技術總結
本發(fā)明公開一種山羊CDK2基因敲除載體及其構建方法，采用CRISPR/cas9系統(tǒng)，首先設計CDK2基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序列，構建同時表達sgRNA和Cas9D10A的質粒PYSY?sgRNA，連接并轉化至大腸桿菌DH5α感受態(tài)細胞，最后對轉化子進行驗證；酶切和測序鑒定證明CDK2基因敲除載體構建正確。本發(fā)明采用CRISPR/Cas9構建的載體，為后續(xù)獲得山羊CDK2基因缺失型細胞系，研究支原體肺炎感染引發(fā)的細胞凋亡分子分子機制提供理論依據(jù)。

技術研發(fā)人員：惠文巧;陳勝;湯繼順;班謙
受保護的技術使用者：安徽省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所
文檔號碼：201611222742
技術研發(fā)日：2016.12.27
技術公布日：2017.06.13