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與蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性相關(guān)的SNP分子標(biāo)記及其應(yīng)用的制作方法

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技術(shù)特征:

1.與蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性相關(guān)的SNP分子標(biāo)記,其特征在于,所述SNP分子標(biāo)記位于用于調(diào)控蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病Md-miRLn12的初級(jí)轉(zhuǎn)錄本Md-MIRLn12-277的啟動(dòng)子上,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,該序列的378bp處堿基為T(mén)的蘋(píng)果品種對(duì)蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病的抗性顯著高于此處堿基為G的蘋(píng)果品種。

2.用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述與蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性相關(guān)的SNP分子標(biāo)記的引物,其特征在于,包括正向引物F5’-AACACAGGGAGCACTTCTATTG-3’和反向引物R5'-GTCCGTTATTATACGAATAATTGG-3'。

3.權(quán)利要求1所述與蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性相關(guān)的SNP分子標(biāo)記在鑒定蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性品種及感病品種中的應(yīng)用,其特征在于,包括以下步驟:

1)提取待測(cè)蘋(píng)果植株的基因組DNA;

2)以待測(cè)蘋(píng)果植株的基因組DNA為模板,利用權(quán)利要求2所述引物F和R,進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng);

3)檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,如果擴(kuò)增產(chǎn)物序列中378bp處的堿基為T(mén),則待測(cè)蘋(píng)果植株屬于蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性品種;如果擴(kuò)增產(chǎn)物序列中378bp處的堿基為G,則待測(cè)蘋(píng)果植株屬于蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病感病品種。

4.含有權(quán)利要求2所述引物的用于檢測(cè)蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性蘋(píng)果品種的試劑盒。

5.權(quán)利要求1所述與蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病抗性相關(guān)的SNP分子標(biāo)記在蘋(píng)果分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。

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