技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種利用piggyBac轉(zhuǎn)座子在CHO細胞中獲得表達目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定細胞群的方法，步驟包括：1)構(gòu)建含有待表達的編碼目標(biāo)蛋白基因和抗生素篩選基因的基因片段的質(zhì)粒，和含有piggyBac轉(zhuǎn)座子序列的質(zhì)粒；2)將步驟1)中構(gòu)建的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染同時引入CHO細胞中；3)對步驟2)中轉(zhuǎn)染后細胞直接在搖瓶中進行抗生素篩選。本方法能夠在一到兩周時間內(nèi)構(gòu)建穩(wěn)定的細胞群，并能夠高效的表達目標(biāo)蛋白。以及，本發(fā)明還公開一種利用piggyBac轉(zhuǎn)座子在CHO細胞中獲得表達目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定細胞群并直接放大生產(chǎn)目標(biāo)蛋白的方法，可滿足50升以上的生產(chǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：張崢;李曉璐;蔡潔行;周偉昌;陳智勝
受保護的技術(shù)使用者：上海藥明生物技術(shù)有限公司;無錫藥明康德生物技術(shù)股份有限公司
文檔號碼：201611183175
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.20
技術(shù)公布日：2017.05.31