技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一株重組菌及其在催化萊鮑迪甙A生成萊鮑迪甙M2中的應(yīng)用，所述重組菌中同時(shí)含有番茄來(lái)源糖基轉(zhuǎn)移酶UGTSL2基因和馬鈴薯來(lái)源蔗糖合酶StSUS1基因，將番茄來(lái)源糖基轉(zhuǎn)移酶UGTSL2基因克隆到pRSFDuet?1的NdeI與XhoI位點(diǎn)之間，構(gòu)建得到重組質(zhì)粒pRSFDuet?SL2，然后再將馬鈴薯來(lái)源蔗糖合酶StSUS1基因克隆到pRSFDuet?SL2的NcoI和EcoRI位點(diǎn)之間，構(gòu)建得到重組質(zhì)粒pRSFDuet?SL2?SUS1，將重組質(zhì)粒pRSFDuet?SL2?SUS1轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞中，得到重組菌。將重組菌誘導(dǎo)表達(dá)后取粗酶液，加入到反應(yīng)混合物中催化萊鮑迪甙A生成萊鮑迪甙M2，反應(yīng)中使用重組菌破碎后的粗酶液，避免了酶的分離純化，也無(wú)需制作凍干粉，反應(yīng)液中不需添加直接底物萊鮑迪甙D及UDP或UDP?葡萄糖和任何細(xì)胞通透劑或其他化學(xué)試劑，環(huán)境友好性更佳。萊鮑迪甙M2的產(chǎn)率高達(dá)11.09g/L。

技術(shù)研發(fā)人員：李艷;陳可泉;周芳芳;郝寧;歐陽(yáng)平凱
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南京工業(yè)大學(xué)
文檔號(hào)碼：201611142851
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.13
技術(shù)公布日：2017.06.13