本發(fā)明涉及一種中國(guó)被毛飽菌的生產(chǎn)方法，特別是一種能輔助降血糖的中國(guó)被毛孢菌粉的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
：隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們膳食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變，糖尿(diabetesmellitus，DM)已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的慢性疾病。飲食和營(yíng)養(yǎng)治療是糖尿病治療的重要組成部分。通過(guò)膳食和保健食品預(yù)防和控制糖尿病成為一種趨勢(shì)。輔助降血糖保健食品主要是天然植物性食品或提取物，其來(lái)源廣泛，降糖效果和作用機(jī)理也不盡相同。冬蟲(chóng)夏草是我國(guó)二級(jí)保護(hù)物種，是我國(guó)名貴的中藥材瑰寶，它在我國(guó)民間流傳應(yīng)用也已有兩千多年的歷史。冬蟲(chóng)夏草不僅是具有良好保健功能的藥用真菌，而且是具有很高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的高檔滋補(bǔ)食用真菌，隨著人們生活水平和生活質(zhì)量的提高，對(duì)功能保健產(chǎn)品的需求也日趨擴(kuò)大。由于野生冬蟲(chóng)夏草分布地區(qū)狹窄、自然寄生率低、對(duì)生活環(huán)境條件要求苛刻，所以本身資源比較有限。近年來(lái)冬蟲(chóng)夏草主產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境遭到人為嚴(yán)重破壞，大量盲目不合理采挖致使資源日趨減少，產(chǎn)量逐年下降。而冬蟲(chóng)夏草由于可以藥食兩用，且人們不斷發(fā)現(xiàn)其新的藥理作用，所以多個(gè)國(guó)家對(duì)它的需要倍增，價(jià)格逐年上漲，國(guó)際市場(chǎng)日益緊缺。因野生資源逐年枯竭，冬蟲(chóng)夏草的資源保護(hù)和可持續(xù)利用一直是行業(yè)內(nèi)外廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)，人工發(fā)酵方法生產(chǎn)的冬蟲(chóng)夏草菌絲粉慢慢被人們知曉和認(rèn)可。冬蟲(chóng)夏草無(wú)性型菌種中國(guó)被毛孢(HirsutellasinensisLu，Guo，YuetZeng)，目前國(guó)內(nèi)許多個(gè)人和單位研究和公開(kāi)冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)基和發(fā)酵生產(chǎn)方法，但是，這些技術(shù)多采用微生物發(fā)酵常用培養(yǎng)基，基本上以蛋、奶、馬鈴薯作為發(fā)酵食源，培養(yǎng)基成分的選擇，雖然都是按照微生物學(xué)的發(fā)酵原理使菌種能夠生長(zhǎng)，但食源的不同必然造成菌絲體的性質(zhì)有所差異，所生產(chǎn)的冬蟲(chóng)夏草發(fā)酵產(chǎn)品在化學(xué)成分和活性物質(zhì)與天然冬蟲(chóng)夏草有差異，因而現(xiàn)有技術(shù)中培育出的冬蟲(chóng)夏草普遍存在質(zhì)量差，營(yíng)養(yǎng)成分含量較低。目前還沒(méi)有見(jiàn)到用中國(guó)被毛孢菌來(lái)進(jìn)行降低血糖的報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是要克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種能輔助降血糖的中國(guó)被毛孢菌粉的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是：其點(diǎn)是該方法含有以下步驟：步驟一：中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊10～50％，麩皮1～5％，葡萄糖1～3％，蛋白胨0.3～3％，少量微量元素和維生素其余為水，按總體積添加0.1～1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度10～20℃，PH6.5～7.5，通氣量0.2～2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)28～45天；固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊10～50％，葡萄糖0.5～1％，大米10～20％，麩皮1～5％，蛋白胨0.1～1％，酵母膏0.2～2％，少量微量元素和維生素其余為水，按總體積添加0.1～1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度10～20℃，PH6.5～7.5，通氣量0.2～2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)28～45天；液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比：菊芋洗凈切塊10～50％，麩皮1～5％，葡萄糖1～3％，蛋白胨0.3～3％，少量微量元素和維生素其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持20～40分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度10～20℃，PH6.5～7.5，通氣量0.2～2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)7～10天；液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比：菊芋洗凈切塊10～50％，葡萄糖0.5～1％，大米10～20％，麩皮1～5％，蛋白胨0.1～1％，酵母膏0.2～2％，少量微量元素和維生素其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持20～40分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度10～20℃，PH6.5～7.5，通氣量0.2～2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)7～10天；步驟二：濃縮，干燥，粉碎，得中國(guó)被毛孢菌粉。優(yōu)選的微量元素為K或Na或Mg或Zn或Cu或Mn中的一種或任意幾種；按培養(yǎng)基重量百分比0.01～1％添加。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)和效果：1、對(duì)動(dòng)物降低血糖有明顯的效果。建立動(dòng)物模型：胰島損傷高血糖模型，觀察不同劑量的冬蟲(chóng)夏草對(duì)該模型損傷的修復(fù)作用。實(shí)驗(yàn)方法：購(gòu)入成年昆明小鼠50只，適應(yīng)1天后，隨機(jī)取10只為正常對(duì)照組，其余小鼠禁食12小時(shí)(自由飲水)，注射四氧嘧啶(用前新鮮配制)造模。測(cè)血糖，血糖值10－25mmol/L為高血糖模型成功。隨機(jī)選1個(gè)模型對(duì)照組和3個(gè)冬蟲(chóng)夏草菌粉劑量組。劑量組給予不同濃度冬蟲(chóng)夏草粉混懸液(1g/(kg·d)、2g/(kg·d)、3.0g/(kg·d))，模型對(duì)照組給予空白溶劑，連續(xù)15天，按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行測(cè)定血糖及胰島素值。冬蟲(chóng)夏草菌粉對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖濃度及胰島素的影響組別動(dòng)物數(shù)血糖(mmol/L)胰島素(pmol/L)正常對(duì)照組108.596±2.016446.913±10.904模型組1024.227±5.36218.432±4.221樣品1g/(kg·d)1017.569±3.26540.135±12.998樣品2g/(kg·d)1014.104±2.96838.553±10.985樣品3.0g/(kg·d)1012.108±3.82938.521±9.554與模型對(duì)照組相比，冬蟲(chóng)夏草菌粉各劑量對(duì)小鼠血糖降低有明顯效果，并能對(duì)胰島素的破壞有一定的抑制作用。2、對(duì)人體具有明顯的降低血糖的效果。人體試食：王女士胰腺炎伴糖尿病2年，控制階段無(wú)胰島素注射1月，30天前空腹16.55，餐后2小時(shí)20.23，口服冬蟲(chóng)夏草菌粉每日6克，持續(xù)30天，空腹血糖，8.14，餐后2小時(shí)血糖9.17，、糖化血紅蛋白(或糖化血清蛋白)、血脂四項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯升高。高血糖人群服用冬蟲(chóng)夏草菌粉30～45天血糖改善情況(服用量每日6克)試食人員服用前服用后餐前血糖(mmol/L)服用后餐后血糖(mmol/L)郭先生41歲15.448.54610.12趙女士39歲13.627.8818.32譚先生55歲19.219.8311.25朱先生57歲15.3910.2612.04經(jīng)過(guò)幾位試食者實(shí)驗(yàn)，中國(guó)被毛孢菌粉對(duì)幾位受試者血糖輔助降低方面有明顯效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例1中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)方法：步驟一：中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊10％，麩皮1％，葡萄糖1％，蛋白胨0.3％，磷酸氫二鉀0.005％，硫酸鎂0.005％，微量維生素，其余為水，按總體積添加0.1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度10℃，PH6.5，通氣量0.2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)28天；固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊10％，葡萄糖0.5％，大米10％，麩皮1％，蛋白胨0.1％，酵母膏0.2％，磷酸氫二鉀0.02％，微量維生素，其余為水，按總體積添加0.1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度10℃，PH6.5，通氣量0.2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)28天；液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比：菊芋洗凈切塊10％，麩皮1％，葡萄糖1％，蛋白胨0.3％，氯化錳0.05％，微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持20分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度10℃，PH6.5，通氣量0.2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)7天；液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比：菊芋洗凈切塊10％，葡萄糖0.5％，大米10％，麩皮1％，蛋白胨0.1％，酵母膏0.2％，氯化鈉0.02％、硫酸鎂0.01％、氯化鋅0.01％、硫酸銅0.02％、微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持20分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度10℃，PH6.5，通氣量0.2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)7天；步驟二：濃縮，干燥，粉碎，得中國(guó)被毛孢菌粉。實(shí)施例2中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)方法：步驟一：中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊50％，麩皮5％，葡萄糖3％，蛋白胨3％、氯化鈉0.04％，硫酸銅0.04％，氯化錳0.02％，微量維生素，其余為水，按總體積添加1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度20℃，PH7.5，通氣量2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)45天；固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊50％，葡萄糖1％，大米20％，麩皮5％，蛋白胨1％，酵母膏2％，磷酸氫二鉀0.02％，氯化鈉0.01％，硫酸鎂0.02％，氯化鋅0.01％，硫酸銅0.02％，氯化錳0.01％，微量維生素，其余為水，少量微量元素和維生素其余為水，按總體積添加1％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度20℃，PH7.5，通氣量2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)45天；液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比：菊芋洗凈切塊50％，麩皮5％，葡萄糖3％，蛋白胨3％，磷酸氫二鉀0.03％，硫酸鎂0.04％，硫酸銅0.03％，微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持40分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度20℃，PH7.5，通氣量2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)10天；液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比：菊芋洗凈切塊50％，葡萄糖1％，大米20％，麩皮5％，蛋白胨1％，酵母膏2％，硫酸鎂0.03％，氯化鋅0.03％，硫酸銅0.02％，氯化錳0.02％，微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持40分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度20℃，PH7.5，通氣量2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)10天；步驟二：濃縮，干燥，粉碎，得中國(guó)被毛孢菌粉。實(shí)施例3中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)方法：步驟一：中國(guó)被毛孢菌的培養(yǎng)固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(一)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊30％，麩皮3％，葡萄糖2％，蛋白胨1.5％，氯化錳0.03％，微量維生素，其余為水，按總體積添加0.5％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度15℃，PH7，通氣量1VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)38天；固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基(二)按重量百分比如下：菊芋洗凈切塊30％，葡萄糖0.7％，大米15％，麩皮3％，蛋白胨0.5％，酵母膏1.2％，硫酸銅0.03％，氯化錳0.05％，微量維生素，其余為水，按總體積添加0.6％的瓊脂做凝固劑；分裝滅菌接種培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：溫度16℃，PH7，通氣量1.5VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；培養(yǎng)39天；液體培養(yǎng)基(一)按重量百分比：菊芋洗凈切塊30％，麩皮2％，葡萄糖2％，蛋白胨1.6％，磷酸氫二鉀0.02％，氯化鋅0.02％，硫酸銅0.02％，氯化錳0.02％，微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持30分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度18℃，PH6.7，通氣量1.2VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)9天；液體培養(yǎng)基(二)按重量百分比：菊芋洗凈切塊35％，葡萄糖0.8％，大米16％，麩皮2％，蛋白胨0.6％，酵母膏1.6％，磷酸氫二鉀0.02％，氯化鈉0.02％，硫酸鎂0.02％，氯化鋅0.02％，硫酸銅0.02％，微量維生素，其余為水，上述各種原料按百分比投料，加水1.5倍煮開(kāi)保持35分鐘，沉淀過(guò)濾；培養(yǎng)條件：溫度17℃，PH7，通氣量1.4VVM，微量自然光或避光培養(yǎng)；4級(jí)培養(yǎng)，每級(jí)9天；步驟二：濃縮，干燥，粉碎，得中國(guó)被毛孢菌粉。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3