專利名稱：一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種從粗壯脈紋孢菌(Afetfro1^ora. craMa)及其孢子中提取天然類胡蘿卜素的方法，屬天然色素添加劑生產(chǎn)加工領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
天然類胡蘿卜素主要作為天然色素和營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用，可防止人體維生素A缺乏和預(yù)防眼病等。近年來(lái)研究表明，類胡蘿卜素在防癌抗癌、預(yù)防心血管疾病和延緩衰老等方面有明顯作用，目前已廣泛應(yīng)用于食品及飼料添加劑、醫(yī)藥保健和化妝品等行業(yè)，同時(shí)天然色素具有合成色素所無(wú)法比擬的生理功能和安全性，非常迎合當(dāng)今綠色、環(huán)保的潮流，是目前國(guó)際市場(chǎng)頗受歡迎的產(chǎn)品，具有非常廣闊的市場(chǎng)前景。粗壯脈紋孢菌(Meurospora. crassa )，屬真菌門，真子囊菌亞綱，鹿角菌目，糞殼菌科，脈紋孢菌屬。粗壯脈紋孢菌可產(chǎn)較高產(chǎn)量的類胡蘿卜素，其色素在菌體和成熟孢子中都有分布，特別是在其成熟孢子中，類胡蘿卜素含量可達(dá)0.25 0.3%。同時(shí)該菌生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)周期短，培養(yǎng)過程易操作控制，因此，其在類胡蘿卜素的發(fā)酵生產(chǎn)方面具有很大的應(yīng)用前景。但該菌所產(chǎn)色素為胞內(nèi)色素，分生孢子壁厚且堅(jiān)硬，直接用有機(jī)溶劑浸提很難將其中的類胡蘿卜素提取出來(lái)，且類胡蘿卜素對(duì)光照、溫度及氧氣等因素敏感，繁雜的提取工藝容易造成類胡蘿卜素在提取過程中的損失，因此簡(jiǎn)單、高效、快速的提取工藝對(duì)類胡蘿卜素的提取非常重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)單，高效，成本低，色素提取率高的粗壯脈紋孢菌中類胡蘿卜素的提取工藝。本發(fā)明的具體工藝步驟
(1)粗壯脈紋孢菌及其孢子經(jīng)30 80°C干燥后，將培養(yǎng)物粉碎為粗粉狀，過20 100目篩；
(2)培養(yǎng)物粗粉和孢子粉用0. 1 3mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁30s 30min，鹽酸溶液加入量為0. 1 5L/kg培養(yǎng)物或孢子；
(3)酸法破壁結(jié)束后水洗至中性，經(jīng)擠壓過濾或減壓抽濾得濾渣；
(4)濾渣用丙酮或乙酸乙酯等有機(jī)試劑浸提1 60min，料液比為5 50L/kg濾渣， 浸提兩次，合并提取液；
(5)提取液經(jīng)減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物，減壓蒸發(fā)溶媒溫度為30 70 "C。本發(fā)明的主要特點(diǎn)是針對(duì)粗壯脈紋孢菌iNeurospora. crassa )及其孢子特殊的細(xì)胞/孢子壁結(jié)構(gòu)，用較低濃度的鹽酸溶液在溫和條件下快速破壞其中的多糖及蛋白等組分，在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到較好的破壁和色素提取效果。本發(fā)明的有益效果是1、所需鹽酸溶液的濃度低，耗用量少，破壁時(shí)間短，效率高， 類胡蘿卜素破壞少，可快速提取粗壯脈紋孢菌ctmm)及其孢子中類胡蘿卜素，色素提取率高；2、工藝簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，條件溫和，所用時(shí)間短，提取效率高，成本低； 3、所提色素色澤好，純度高，可作為食品、飼料、醫(yī)藥及相關(guān)領(lǐng)域天然色素添加劑使用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一
粗壯脈紋孢菌固態(tài)培養(yǎng)物經(jīng)45 60°C干燥后粉碎，粗粉物過40目篩，培養(yǎng)物粗粉用 0. 8mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁1 5min，酸液加入量為0. 5 2L/kg培養(yǎng)物，破壁結(jié)束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復(fù)水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用丙酮浸提5 lOmin，料液比為5 10L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液，提取液經(jīng)45 50°C減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達(dá)98%以上。實(shí)施例二
粗壯脈紋孢菌孢子經(jīng)45 60°C干燥后用0. 8mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁1 3min， 酸液加入量為1. 0 3. OL/kg孢子，破壁結(jié)束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復(fù)水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用丙酮浸提5 8min，料液比為35 50L/kg濾渣，浸提兩次， 合并提取液，提取液經(jīng)45 50°C減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達(dá)96%以上。實(shí)施例三
粗壯脈紋孢菌液態(tài)培養(yǎng)物經(jīng)水洗、過濾后所得菌絲體用1. Omol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁5 lOmin，酸液加入量為1. 0 2. 0L/kg菌絲體，破壁結(jié)束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復(fù)水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用乙酸乙酯浸提8 lOmin，料液比為15 25L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液，提取液經(jīng)45 50°C減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達(dá)95%以上。
權(quán)利要求
1.一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，其特征在于粗壯脈紋孢菌及其孢子經(jīng)干燥后，將固態(tài)培養(yǎng)物粉碎為粗粉狀，過20 100目篩；培養(yǎng)物粗粉和孢子粉用鹽酸溶液常溫酸法破壁；酸法破壁結(jié)束后水洗至中性，經(jīng)過濾或減壓抽濾得濾渣；濾渣用有機(jī)試劑浸提兩次，合并提取液；提取液經(jīng)減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，其特征在于粗壯脈紋孢菌及其孢子干燥溫度為30 80°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，其特征在于所述的鹽酸溶液濃度為0. 1 3mol/L，破壁時(shí)間30s 30min，鹽酸溶液加入量為0. 1 5L/kg培養(yǎng)物或孢子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，其特征在于浸提有機(jī)試劑為丙酮或乙酸乙酯，浸提時(shí)間1 60min，料液比為5 50L/kg濾渣。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，其特征在于所述的減壓蒸發(fā)回收溶媒溫度為30 70°C。
全文摘要
一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法，是將粗壯脈紋孢菌及其孢子經(jīng)30～80℃干燥后，將培養(yǎng)物粉碎為粗粉狀，用0.1～3mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁30s～30min，過濾，水洗后所得濾渣用有機(jī)溶劑浸提1～60min，提取液經(jīng)減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得粗提物。與現(xiàn)有的類胡蘿卜素提取方法相比，本發(fā)明具有工藝簡(jiǎn)單，色素提取率高，生產(chǎn)成本低，類胡蘿卜素純度高等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C09B61/00GK102352120SQ201110237029
公開日2012年2月15日 申請(qǐng)日期2011年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月18日
發(fā)明者劉志剛, 李靜, 鄧澤元 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)