1.一種為診斷胎兒染色體非整倍性提供信息的方法,其特征在于,所述方法包括步驟:
(a)從孕婦血液中提取DNA;
(b)根據(jù)大小分級(jí)DNA,以獲得具有1,000bp或更小的DNA;
(c)使用步驟(b)獲得的DNA為染色體上與染色體異常無關(guān)的對照基因和染色體上與染色體非整倍性相關(guān)的靶基因進(jìn)行數(shù)字PCR;
(d)計(jì)算靶基因的定量數(shù)字PCR值與對照基因的定量數(shù)字PCR值的比率;和
(e)當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比例為0.70-1.14時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是正常的。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括:當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比率為0.95-1.10時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是正常的。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,根據(jù)大小對所述DNA進(jìn)行分級(jí)的步驟(b)包括步驟:
(a)將第一磁珠(珠A)添加到所述DNA中,并且分離出未結(jié)合至珠A的DNA;和
(b)將第二磁珠(珠B)添加到分離的DNA中,并且洗脫出結(jié)合至珠B的DNA,其中所述珠A和珠B以0.75-1.25:1的比例(珠A或珠B:DNA)添加至所述DNA中。
4.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,珠A或珠B以0.75-1.0:1的比例(珠A或珠B:DNA)添加至所述DNA中。
5.一種為診斷胎兒染色體非整倍性提供信息的方法,其特征在于,所述方法包括步驟:
(a)從孕婦血液中提取DNA;
(b)根據(jù)大小分級(jí)DNA,以獲得具有1,000bp或更小的DNA;
(c)使用步驟(b)獲得的DNA、位于染色體上與染色體非整倍性無關(guān)的對照基因、位于染色體上與染色體非整倍性相關(guān)的靶基因進(jìn)行數(shù)字PCR;
(d)計(jì)算靶基因的定量數(shù)字PCR值與對照基因的定量數(shù)字PCR值的比率;和
(e)當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比例為0.10-0.69或1.15-1.80時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是異常的。
6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比率為0.45-0.69或1.15-1.31時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是異常的。
7.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比例為0.10-0.69時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是單體的。
8.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述單體是特納綜合征。
9.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,當(dāng)步驟(d)中計(jì)算的比例為1.15-1.80時(shí),確定胎兒的染色體數(shù)目是三體的。
10.如權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述三體是唐氏綜合征、愛德華氏綜合征或帕陶綜合征。
11.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,根據(jù)大小對DNA進(jìn)行分級(jí)的步驟(b)包括步驟:
(a)將第一磁珠(珠A)添加到DNA中,并且分離出未結(jié)合至珠A的DNA;和
(b)將第二磁珠(珠B)添加到分離的DNA中,并且洗脫出結(jié)合至珠B的DNA,其中所述珠A和珠B以0.75-1.25:1的比例(珠A或珠B:DNA)添加至DNA中。
12.如權(quán)利要求11所述的方法,其特征在于,珠A或珠B以0.75-1.0:1的比例(珠A或珠B:DNA)加入DNA。
13.如權(quán)利要求1-12任一所述的方法,其特征在于,所述靶基因可以是選自下組的任何一種或多種基因:具有SEQ ID NO:1至4所示核苷酸序列的基因。
14.如權(quán)利要求13所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:7和8所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的靶基因,并且,SEQ ID NO:9所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的靶基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。
15.如權(quán)利要求13所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:10和11所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的靶基因,并且,SEQ ID NO:12所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的靶基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。
16.如權(quán)利要求13所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:13和14所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的靶基因,并且,SEQ ID NO:15所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的靶基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。
17.如權(quán)利要求13所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:16和17所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:4所示核苷酸序列的靶基因,并且,SEQ ID NO:18所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:4所示核苷酸序列的靶基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。
18.如權(quán)利要求1-12任一所述的方法,其特征在于,所述對照基因可以是選自下組的任何一種或多種基因:具有SEQ ID NO:5至6所示核苷酸序列的基因。
19.如權(quán)利要求18所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:19和20所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的對照基因,并且,SEQ ID NO:21所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的對照基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。
20.如權(quán)利要求18所述的方法,其特征在于,SEQ ID NO:22和23所示的一對引物作為引物對用于擴(kuò)增具有SEQ ID NO:6所示核苷酸序列的對照基因,并且,SEQ ID NO:24所示寡核苷酸作為探針用于檢測具有SEQ ID NO:6所示核苷酸序列的對照基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。