技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提出了一種通過原生質(zhì)體快速驗(yàn)證啟動(dòng)子強(qiáng)弱的方法，通過在同一個(gè)載體上用目標(biāo)啟動(dòng)子和參考啟動(dòng)子分別驅(qū)動(dòng)同一種熒光蛋白，在同一個(gè)細(xì)胞中表達(dá)，但是分別定位在不同的亞細(xì)胞位置，然后再利用同一個(gè)激光束激發(fā)熒光蛋白，此種情況下所有的其他參數(shù)都是一致的情況下，不同的亞細(xì)胞位置上的熒光亮度就可以代表啟動(dòng)子的強(qiáng)度，通過與參考啟動(dòng)子比較可以定量分析出目標(biāo)啟動(dòng)子與參考啟動(dòng)子的倍比關(guān)系。本發(fā)明只需構(gòu)建一次插入了待驗(yàn)證啟動(dòng)子序列的載體，然后用構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體再在激光共聚焦顯微鏡下觀察拍照通過比較對(duì)照啟動(dòng)子產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度和需驗(yàn)證的啟動(dòng)子產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度的方式快速評(píng)價(jià)啟動(dòng)子活性的強(qiáng)弱。

技術(shù)研發(fā)人員：李陽(yáng);孫智光
受保護(hù)的技術(shù)使用者：武漢伯遠(yuǎn)生物科技有限公司
文檔號(hào)碼：201610837885
技術(shù)研發(fā)日：2016.09.21
技術(shù)公布日：2017.05.31