1.一種從豬肺中提取肝素鈉和蛋白肽粉的聯(lián)產(chǎn)工藝,其特征在于,包括以下步驟:
(1)打漿:取新鮮(或經(jīng)冷凍保存后自然解凍)豬肺,清洗去污,剝離氣管,去除油脂,用斬拌機(jī)絞碎成肉糜狀,再經(jīng)細(xì)磨機(jī)研磨勻漿5-10min,得到豬肺漿料;
(2)鹽解:往豬肺漿料中加入其重量3-5倍的去離子水,攪拌均勻后得豬肺漿液,往豬肺漿液中加入其重量3-6%的氯化鈉,緩慢升溫至40℃,用NaOH調(diào)pH值至8.5-9.0,攪拌下繼續(xù)升溫至50-55℃,保溫反應(yīng)3-6小時(shí)后,快速升溫至95℃,保溫10min,使蛋白質(zhì)高溫變性,冷卻至60℃,得到豬肺鹽解液;
(3)過(guò)濾:將豬肺鹽解液經(jīng)60目濾袋過(guò)濾,分別收集濾渣(Ⅰ)和濾液(Ⅰ);
(4)酶解:調(diào)整濾液(Ⅰ)PH值至8.0-9.0,升溫至50-55℃,按每公斤豬肺添加4-6克蛋白酶的比例加入2709蛋白酶,保溫酶解3-5小時(shí)后,升溫至85℃,保溫30min滅酶,冷卻至60℃,用100目濾袋過(guò)濾,分別收集濾渣(Ⅱ)和濾液(Ⅱ);
(5)吸附:將濾液(Ⅱ)經(jīng)去除表面油脂層后,升溫至45-60℃,按每公斤豬肺加入25-35g的D-254樹(shù)脂,攪拌狀態(tài)下保溫吸附處理8-10小時(shí)后,用100目濾袋過(guò)濾,分別收集濾液(Ⅲ)和吸附有肝素鈉的樹(shù)脂;
(6)洗脫:
(6-1):將收集的樹(shù)脂先用水反復(fù)沖洗至水變清為止,濾干樹(shù)脂,再以完全浸沒(méi)樹(shù)脂為量,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5-7%的氯化鈉溶液,溫度保持在45-55℃,攪拌30-60min,濾干得洗滌后的樹(shù)脂;
(6-2):以完全浸沒(méi)洗滌后的樹(shù)脂為量,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-25%的氯化鈉溶液,溫度保持在45-55℃,攪拌3-4小時(shí)后,分離樹(shù)脂,收集洗脫液;
(6-3):重復(fù)步驟(6-2)一次,將兩次收集的洗脫液合并,并用100目濾袋過(guò)濾,收集洗脫液待用;
(7)酸處理:往洗脫液中加入其總重量0.1-0.3%的保護(hù)劑攪拌均勻后,用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值至3.0-3.5,靜置10-15分鐘,用150目濾袋過(guò)濾,分別收集濾渣(Ⅲ)和濾液(Ⅳ)待用;
(8)堿處理:用NaOH調(diào)節(jié)濾液(Ⅳ)PH值至11.0,攪拌均勻后靜置15分鐘,用150目濾袋過(guò)濾,分別收集濾渣(Ⅳ)和濾液(Ⅴ)待用;
(9)沉淀:將濾液(Ⅴ)用稀鹽酸調(diào)節(jié)其PH值至7.0-8.0,加入其體積1.5-2.0倍的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80-85%的預(yù)冷過(guò)的乙醇,攪拌均勻后密封沉淀18-24小時(shí),虹吸法除去上層乙醇清液,收集沉淀物(Ⅰ)待用;
(10)復(fù)沉:往上述沉淀物(Ⅰ)中加入其重量3倍的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的氯化鈉溶液,攪拌溶解后升溫至80℃,保溫處理10分鐘后,冷卻到60℃,用150目濾袋過(guò)濾,收集濾液(Ⅵ),往濾液(Ⅵ)中加入其體積1.0-1.5倍的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85-95%的預(yù)冷過(guò)的乙醇,攪拌均勻靜置30分鐘,虹吸法除去上層乙醇清液,收集沉淀物(Ⅱ)待用;
(11)脫水干燥:往上述沉淀物(Ⅱ)中加入其重量2倍的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95-100%的乙醇脫水2-3次,收集沉淀物,置于60-70℃下干燥8-16小時(shí)即得肝素鈉;
(12)濾渣酶解:將步驟(3)中的濾渣(Ⅰ)、步驟(4)中的濾渣(Ⅱ)、步驟(7)中的濾渣(Ⅲ)和步驟(8)中的濾渣(Ⅳ)合并,加入合并濾渣重量1-3倍的去離子水溶解并攪拌均勻,調(diào)節(jié)pH值至8.0~9.0,按每公斤濾渣加入堿性蛋白酶1.0-3.0克,加熱至40-50℃,保溫酶解3-5h,將酶解液升溫至85℃滅酶10分鐘,即得到豬肺蛋白酶解液;
(13)納濾脫鹽:將步驟(5)中的濾液(Ⅲ)與步驟(12)所得的豬肺蛋白酶解液合并,攪拌均勻后通過(guò)截留分子量為100-150Da的納濾膜裝置系統(tǒng)進(jìn)行納濾脫鹽、濃縮,收集濃縮液;
(14)噴霧干燥:將上述納濾濃縮液進(jìn)行噴霧干燥,即得豬肺蛋白肽粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉和蛋白肽粉的聯(lián)產(chǎn)工藝,其特征在于:步驟(7)所述的保護(hù)劑為亞硫酸氫鈉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉和蛋白肽粉的聯(lián)產(chǎn)工藝,其特征在于:步驟(12)所述的堿性蛋白酶為枯草桿菌堿性蛋白酶,酶活力為200000U/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉和蛋白粉的聯(lián)產(chǎn)工藝,其特征在于:步驟(14)所述的噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)口溫度為200-240℃,出風(fēng)口溫度為80—100℃。