1.一種制備不同分子量聚蘋果酸的提取方法，包括以下步驟：
（1）發(fā)酵培養(yǎng)；
將出芽短梗霉斜面進(jìn)行活化，采用洗菌的方法將孢子懸液接種到種子培養(yǎng)基中，在28℃，200r/min條件下培養(yǎng)40h；培養(yǎng)好的種子液按10%(v/v)的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25℃，200r/min條件下培養(yǎng)144h，即可獲得聚蘋果酸的發(fā)酵液；
（2）分離純化；
一是板框過(guò)濾除菌脫色：發(fā)酵獲得發(fā)酵液，加入等體積的蒸餾水進(jìn)行稀釋；添加0.8%~1.2%(m/v)的活性炭，攪拌均勻后，攪拌器攪拌條件下反應(yīng)30min；然后添加1.0%~1.4%(m/v)的硅藻土作為助濾劑，實(shí)驗(yàn)室采用的硅藻土粒度統(tǒng)一為200目，攪拌均勻，使用800-1200目濾布經(jīng)板框過(guò)濾機(jī)進(jìn)行過(guò)濾，除去菌體和活性炭，濾液添加相同量的硅藻土進(jìn)行二次板框處理去除殘留的活性炭；
二是分級(jí)超濾：除菌后的濾液分別經(jīng)過(guò)截留分子量為10KDa、5000Da、3000Da、1000Da的中空纖維濾膜進(jìn)行超濾，獲得不同分子量區(qū)間的濾液；
三是成品制備：經(jīng)過(guò)超濾獲得的不同分子區(qū)間的濾液，經(jīng)過(guò)旋蒸濃縮、冷凍干燥制備聚蘋果酸的成品；真空干燥參數(shù)為真空度0.09MPa，溫度-50℃；
四是聚蘋果酸純度的測(cè)定：稱取待測(cè)的聚蘋果酸成品，配成濃度為2g/L的溶液，采用水解的方法將聚蘋果酸水解成蘋果酸單體，通過(guò)反向高效液相色譜的方法測(cè)定水解液中蘋果酸的含量，進(jìn)一步折算成聚蘋果酸的含量，即可得出產(chǎn)品的純度；
五是聚蘋果酸分子量的測(cè)定：將聚蘋果酸樣品稀釋，用0.45μm的水膜過(guò)濾后，置于進(jìn)樣瓶中備用；然后用流動(dòng)相分別精確配置2g/L 不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖溶液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，利用液相色譜檢測(cè)，得出色譜圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；將樣品的液相檢測(cè)圖譜與標(biāo)樣的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比即可得出聚蘋果酸的分子量。