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一種冬凌草毛狀根的誘導方法及誘導表達冬凌草甲素的方法與流程

文檔序號:11804043閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種冬凌草毛狀根的誘導方法,其特征在于,包含以下步驟:以農(nóng)桿菌ATCC15834侵染冬凌草葉柄外植體20min,即可成功誘導毛狀根生成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導方法,其特征在于,具體步驟如下:將冬凌草葉柄外植體接種于預(yù)培養(yǎng)固體培養(yǎng)基中進行預(yù)培養(yǎng);將預(yù)培養(yǎng)的冬凌草外植體置于發(fā)根農(nóng)桿菌ATCC15834菌液中浸泡20min后取出,擦干外植體表面多余的菌液,接種回預(yù)培養(yǎng)固體培養(yǎng)基進行暗培養(yǎng);然后將外植體轉(zhuǎn)移到除菌生根培養(yǎng)基進行暗培養(yǎng),即可成功誘導毛狀根生成。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導方法,其特征在于,所述除菌生根培養(yǎng)基為含400 mg·L-1頭孢霉素除菌生根培養(yǎng)基。

4.一種誘導冬凌草毛狀根合成冬凌草甲素的方法,其特征在于,以農(nóng)桿菌ATCC15834侵染冬凌草葉柄外植體20 min,即可成功誘導毛狀根生成;將冬凌草毛狀根在B5培養(yǎng)基培養(yǎng)45d后,提取獲得冬凌草甲素。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,具體步驟如下:將冬凌草葉柄外植體接種于預(yù)培養(yǎng)固體培養(yǎng)基中進行預(yù)培養(yǎng);將預(yù)培養(yǎng)的冬凌草外植體置于發(fā)根農(nóng)桿菌ATCC15834菌液中浸泡20min后取出,擦干外植體表面多余的菌液,接種回預(yù)培養(yǎng)固體培養(yǎng)基進行暗培養(yǎng);然后將外植體轉(zhuǎn)移到除菌生根培養(yǎng)基進行暗培養(yǎng),即可成功誘導毛狀根生成;將冬凌草毛狀根接種在B5培養(yǎng)基,培養(yǎng)45d后,提取獲得冬凌草甲素。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,將冬凌草毛狀根按100mL培養(yǎng)基 0.2 g鮮重毛狀根的比例接種在B5培養(yǎng)基上。

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