本發(fā)明涉及樹枝狀高分子化合物及其制備方法和應用。

背景技術：

樹枝狀高分子(dendrimer)是一種人工合成的新型納米高分子化合物，自1985年tomalia首次成功合成樹枝狀高分子以來，由于其重要的理論意義和潛在的應用價值，引起了眾多領域科學家的廣泛關注。樹枝狀高分子在合成過程中，反應每循環(huán)一次，在原聚合物基礎上增加一代，因此，可以在納米水平上嚴格控制分子的大小、結構、表面基團的數(shù)量和相對分子量。在樹枝狀高分子內存在空腔，每生成一代便具有一層結構，每層結構中具有一定的分子空腔，這些空腔存在有利于藥物與基因運輸與分子催化的研究。樹枝狀高分子本身有納米尺寸，由于高度支化的拓撲形態(tài)，使得樹枝形分子在三維空間中具有近似的球形結構，其尺寸一般在幾納米至幾十納米之間，并且在樹枝狀高分子的外層富集了大量的官能團，由于端基性質的不同，使樹枝狀高分子具有多功能性，因此，樹枝狀高分子在很多方面將產(chǎn)生更廣泛的應用。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是提供一種樹枝狀高分子化合物及其制備方法和應用。具體地說是一種雙羧酸氨基酸型樹枝狀高分子化合物(amino-dendrimer)，其是以多羧酸分子(如丙三羧酸或1,3,5-環(huán)己三羧酸等)為中心再由雙羧酸氨基酸分子(如天冬氨酸，asp；谷氨酸，glu)以樹狀排列進行支化反應，按幾何學規(guī)則向外擴大，形成的雙羧酸氨基酸型樹狀化合物。支化反應的樹狀延伸，形成不同分子大小的樹狀化合物。

特別地，本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物，或稱雙羧酸氨基酸型樹狀化合物(amino-dendrimer)是以丙三羧酸作為同心分子，再由雙羧酸氨基酸(如天冬氨酸，asp；谷氨酸，glu)以酰胺鍵按樹狀排列連接形成的，其結構示意如圖1所示。

以下對本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物進行詳細描述。

一種樹枝狀高分子化合物，為在核心pa上連接3個樹枝結構r，每個樹枝結構r均有2ⁿ個端基，n為自然數(shù)；所述樹枝狀高分子化合物的結構如下式i所示，

其中，pa表示下式iii所示的結構，r表示下式ii所示的結構；a獨立地表示下式iv或下式v所示的結構；

其中，pa與r通過酰胺鍵(-conh-)鍵合；即l-天冬氨酸分子或l-谷氨酸分子上的α-nh2與丙三羧酸分子上的-cooh脫水(-h2o)形成酰胺鍵(-conh-)。

a分別與下一層兩個a通過酰胺鍵(-conh-)鍵合；即l-天冬氨酸分子兩個羧基(α-cooh和β-cooh)再分別與另外兩個l-天冬氨酸分子上的α-nh2進行-h2o反應，形成酰胺鍵(-conh-)；或l-谷氨酸分子上的兩個羧基(α-cooh和γ-cooh)再分別與另外兩個l-谷氨酸分子上的α-nh2進行-h2o反應，形成酰胺鍵(-conh-)。

本發(fā)明有關術語定義如下：

本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物是具有上述核心(或核)pa和含有上述樹枝結構r構成的樹枝狀化合物。

本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物，當a獨立地表示上式iv所示的結構時，該所述樹枝狀高分子化合物稱為l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物；當a獨立地表示上式v所示的結構時，該所述樹枝狀高分子化合物稱為l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物。

本發(fā)明可采用世代(generation)的概念表示上述樹枝狀高分子化合物分子的大小。本發(fā)明中把由上述核心到最初的樹枝結構定義為第1代(或稱為第1層)。當?shù)?代樹枝結構的外側具有下一個樹枝結構時，把該下一個樹枝結構定義為第2代(或稱為第2層)。第3代以后也同樣地把由下一個樹枝結構定義為下一代(或稱下一層)。以此類推，直至第n代(或稱為第n層)。

本發(fā)明所述端基是指所述樹枝狀高分子化合物表面(最外層)的羧基(-cooh)。為便于描述，在上述式ii中示出了端基中的羥基(-oh)。

當本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的世代數(shù)為1(即第1層)時，每個所述樹枝結構r的端基的數(shù)量為2個；當本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的世代數(shù)為2(即第2層)時，每個所述樹枝結構r的端基的數(shù)量為4個；當本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的世代數(shù)為3(即第3層)時，每個所述樹枝結構r的端基的數(shù)量為8個；……當本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的世代數(shù)為n(即第n層)時，每個所述樹枝結構r的端基的數(shù)量為2ⁿ個，n為自然數(shù)。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物，其中n為1-5，優(yōu)選為1-3。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的世代數(shù)為1-5，更優(yōu)選為1-3。

以下列出本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物的優(yōu)選的例子：

l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物優(yōu)選為下式vi-ix所示的化合物：

所述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物優(yōu)選為下式xi-xiv所示的化合物：

本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物(雙羧酸氨基酸型樹狀化合物)的特點是:1)這種特別造型的樹狀化合物可以作為新型藥物載體；2)由中心向外支化反應是可控的，所以載體分子量也是可控的(如上式vi-ix所示化合物，表示l-天冬氨酸組成的不同分子量的雙羧酸氨基酸型樹狀化合物)；3)由于雙羧氨基酸樹狀化合物是由氨基酸組成，具有良好的水溶性、生物相容性及生物降解性；4)載體表面分子上存在許多羧基，易連接許多藥物分子，也可部分成鹽，解決藥物的水溶性；5)載體-藥物接合物改變了藥物原有的性質，使藥物具有靶向性和緩釋性。

本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物還具有以下特點：

1.同心分子同心分子是組成雙羧酸氨基酸型樹狀化合物的起源，本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物以丙三羧酸(propane-1,2,3-tricarboxylicacid)作為同心分子，其結構式如下式xvi所示。丙三羧酸或丙三羧酸的羧基脫去羥基后形成的結構(如下式iii所示，)在本發(fā)明所述樹枝狀高分子化合物中也稱作核心或核。

2.雙羧酸氨基酸的按列雙羧酸氨基酸分子上的α-nh2與丙三羧酸分子上的-cooh脫水(-h2o)形成酰胺鍵(-conh-)。雙羧酸氨基酸分子上的兩個羧基(α-cooh和，β-cooh或γ-cooh)再分別與另外兩個雙羧酸氨基酸分子上的α-nh2進行-h2o反應。每次-h2o反應樹狀化合物按幾何學規(guī)則擴大分子量。

3.樹狀化合物的表面雙羧酸氨基酸型樹枝狀高分子化合物的表面分子(外層)為多個羧酸(第一層6個-cooh，第二層12個-cooh，第三層24個-cooh…，第n層3×2ⁿ個-cooh，n為自然數(shù))，分子表面的羧酸為游離羧酸。

4.樹狀化合物的載體作用樹枝狀高分子化合物的表面游離羧酸能與藥物分子上的-oh或-nh2脫水(-h2o)形成酯鍵(-coo-)或酰胺鍵(-conh-)，將藥物分子與樹狀化合物鍵合組合成載體-藥物的新型藥物。

5.樹狀化合物的靶向作用樹狀化合物隨著加層反應的次數(shù)增加，其樹狀化合物的分子量也按幾何學規(guī)則擴大分子量，呈大分子載體。一定分子量及特定氨基酸(天冬氨酸)組成的大分子具有腫瘤靶向作用(如圖2所示)。

6.樹狀化合物的螯合金屬作用樹狀化合物的表面游離羧酸因為是多個羧酸，能螯合正二價以上的金屬離子(如下式xvii所示)(如:鈣離子(ca²⁺)、鉻離子(cr³⁺)、鐵離子(fe³⁺)、銅離子(cu²⁺)、鍺(ge)、砷(as)、鉑(pt)、金(au)…等)，也是很好的金屬螯合劑。樹狀化合物的螯合金屬的作用可將具有生物活性的金屬安全載入體內，并通過體內靶向分布、代謝，可作為有治療作用的載體-金屬藥物(比如:載體-鉑等)，同樣載體也能螯合體內過量有害金屬，對金屬中毒可用來解毒等。

7.樹狀化合物的螯合放射性同位素作用樹狀化合物的表面游離羧酸同樣也能螯合臨床上常用的放射性同位素(如：碘(131i)、金(198au)、汞(203hg)、锝(99mtc)、銦(113min)、鉻(51cr)、鈷(57、58co)、鍶(85sr)、鎵(67se)…等)，也是很好的放射性同位素的金屬螯合劑。樹狀化合物的螯合放射性同位素作用可將放射性同位素安全載入體內，并通過體內靶向分布、代謝，可作為有特殊意義的診斷劑或放療劑。

上式xvii表示l-天冬氨酸型樹狀化合物螯合金屬(m⁺²)。

7.載體-藥物的意義1.改變藥物的水溶性；2.提高藥物的靶向性；3.緩慢釋放藥物，維持較長的有效血藥濃度和降低藥物的毒、副作用；4.改變藥物的藥代動力學；5.載體可生物降解，主要降解物為機體所需的雙羧酸氨基酸。

本發(fā)明還提供上述樹枝狀高分子化合物的制備方法。

所述樹枝狀高分子化合物的制備方法，包括以丙三羧酸和，l-天門冬氨酸雙芐酯(l-asparticaciddibenzylester，如下式xix所示)或l-谷氨酸雙芐酯(l-glutamicaciddibenzylester，如下式xxi所示)為原料制得；即以丙三羧酸和l-天門冬氨酸雙芐酯為原料制得l-天門冬氨酸型樹枝狀高分子化合物；以丙三羧酸和l-谷氨酸雙芐酯為原料制得l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物。

優(yōu)選地，本發(fā)明采用發(fā)散合成法，即是從所述樹枝狀高分子化合物的核心(中心點)開始向外擴展來進行合成反應。從核心(中心點)開始，該核心擁有3個反應點，然后用帶有分支結構的單元與核心反應，即得到了第一代分子。將第一代分子分支末端的官能團轉化為可繼續(xù)進行反應的官能團，然后重復與分支單元反應物進行反應則得到第二代分子。不斷重復以上的兩個步驟，就可以得到期望的樹枝狀高分子化合物。

上述樹枝狀高分子化合物的合成方法中，包括以n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺(dcc，n,n’-dicyclohexylcarbodiimide)為催化劑，以dmf(即n,n-二甲基甲酰胺)為反應溶劑。

上述l-天門冬氨酸雙芐酯可由l-天冬氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽經(jīng)脫鹽(如下式xviii所示)而制得；其反應歷程如下式所示：

制備l-天門冬氨酸雙芐酯的具體方法如下：取天門冬氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽、乙酸乙酯和2.5％的碳酸氫鈉溶液一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相；收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到天門冬氨酸雙芐酯黃色油狀液體。其中優(yōu)選地，l-天門冬氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽、碳酸氫鈉的摩爾比為1∶1-1.2。

上述l-谷氨酸雙芐酯可由l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽(l-glutamicaciddibenzylester4-toluenesulfonate，如下式xx所示)經(jīng)脫鹽而制得；其反應歷程如下式所示：

制備l-谷氨酸雙芐酯的具體方法如下：取l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽、乙酸乙酯和2.5％的碳酸氫鈉溶液一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相。收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到l-谷氨酸雙芐酯黃色油狀液體。其中優(yōu)選地，l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽、碳酸氫鈉的摩爾比為1∶1-1.2。

具體地，上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法，其合成路線如下：

上式vi、式vii所示化合物即分別為第1世代(第一層)、第2世代(第二層)l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物。

第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法以此類推，直至獲得所需代數(shù)的樹枝狀高分子化合物。

上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法描述如下：

原料：丙三羧酸(propane-1,2,3-tricarboxylicacid)；l-天門冬氨酸雙芐酯(l-asparticaciddibenzylester)。

催化劑：n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺(dcc，n,n’-dicyclohexylcarbodiimide)。

反應溶劑：n,n-二甲基甲酰胺(即dmf)。

產(chǎn)物及中間體的簡化命名：1、第一層由丙三羧酸和l-天冬氨酸雙芐酯合成的樹狀單環(huán)含酯基的多肽，以下簡稱單環(huán)肽酯(l-天冬氨酸型)。2、由所述單環(huán)肽酯脫保護得到的一層樹狀多肽，以下簡稱單環(huán)肽(l-天冬氨酸型)。3、由所述單環(huán)肽和l-天冬氨酸雙芐酯合成的樹狀雙環(huán)含酯基的多肽(l-天冬氨酸型)，以下簡稱雙環(huán)肽酯。4、由所述雙環(huán)肽酯脫保護得到的二層樹狀多肽，以下簡稱雙環(huán)肽(l-天冬氨酸型)。

具體地，上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法，包括以下步驟：

以l-天冬氨酸雙芐酯和丙三羧酸原料為反應原料，以dmf為反應溶劑，以dcc為催化劑發(fā)生成肽反應，分離得到式xxii所示的化合物(單環(huán)肽酯)；將所述式xxii所示的化合物(單環(huán)肽酯)脫保護得到vi所示的化合物(單環(huán)肽)；然后以式vi所示的化合物(單環(huán)肽)和l-天冬氨酸雙芐酯為原料，重復交替進行成肽反應和脫保護反應，直到得到含有3×2ⁿ個端基的樹枝狀高分子化合物。其中n為自然數(shù)，優(yōu)選地，n為1-5，進一步優(yōu)選為1-3。

例如，以l-天冬氨酸雙芐酯和所述vi所示的化合物(單環(huán)肽)為原料，在dmf和n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺存在條件下發(fā)生成肽反應，分離得到式xxiii所示的化合物(雙環(huán)肽酯)；將所述式xxiii所示的化合物(雙環(huán)肽酯)脫保護得到vii所示的化合物(雙環(huán)肽)。

所述成肽反應的條件為：反應物料摩爾比，丙三羧酸∶l-天冬氨酸雙芐酯∶dcc為1∶3.5-4.5∶3-3.3；反應溫度40±5℃；反應時間8h以上。

優(yōu)選地，所述脫保護反應為水解反應，具體反應條件為：ph為2-3；反應時間4-6h；反應溫度30±5℃。

更具體地，上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即第一層，上式vi所示化合物)的制備方法，包括以下步驟：

1-1)單環(huán)肽酯的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述單環(huán)肽酯的制備方法包括：將原料l-天冬氨酸雙芐酯和丙三羧酸在dmf和n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺存在條件下反應完全，用鹽酸、乙酸乙酯萃取，上層酯層依次用碳酸氫鈉水溶液及飽和氯化鈉水溶液洗滌，取上層有機相加熱、攪拌溶解，降溫、析出白色固體，抽濾，烘干，得單環(huán)肽酯粗品；

其中，優(yōu)選地，所述原料丙三羧酸和l-天冬氨酸雙芐酯的摩爾比為1∶3.5-4.5，進一步優(yōu)選為1-4；

優(yōu)選地，將所得單環(huán)肽酯粗品制得單環(huán)肽酯精制品，其方法包括：向所得單環(huán)肽酯粗品加入乙酸乙酯，加熱回流，保溫攪拌，然后降溫，靜置析晶，過濾，將晶體烘干，得單環(huán)肽酯精制品。

1-2)單環(huán)肽的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述單環(huán)肽的制備方法包括：將步驟1-1)所得單環(huán)肽酯(單環(huán)肽酯精粗品或單環(huán)肽酯精制品)溶解在甲醇和四氫呋喃的混合溶液中，攪拌下滴加鹽酸，調節(jié)ph至2-3；反應結束，蒸去溶劑，降溫得到白色固體；加入乙酸乙酯攪拌使其全部溶解，再加入稀鹽酸萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相再加水萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液；濃縮去溶劑，濃縮液析晶，過濾，得到單環(huán)肽白色固體潮品；

優(yōu)選地，將所得單環(huán)肽白色固體潮品制得單環(huán)肽精制品，其方法包括：將所得單環(huán)肽白色固體潮品加氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph至8-9，使溶清(即溶解澄清，dissolvedclarification)；通過透析袋進行透析(截留分子量1000)；透析外液用鹽酸調節(jié)ph至2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌烘干，得到單環(huán)肽精制品，即為上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即第一層，上式vi所示化合物)。

上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即第二層，上式vii所示化合物)的制備方法，包括以下步驟：

2-1)雙環(huán)肽酯的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述雙環(huán)肽酯的制備方法包括：將原料l-天冬氨酸雙芐酯和單環(huán)肽(即上式vi所示化合物)在dmf和n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺存在條件下反應完全，用鹽酸、乙酸乙酯萃取，上層酯層依次用碳酸氫鈉水溶液及飽和氯化鈉水溶液洗滌，將上層有機相干燥，過濾，濾液濃縮后，析晶，過濾，得到白色固體雙環(huán)肽酯潮品；

其中，優(yōu)選地，所述原料單環(huán)肽和l-天冬氨酸雙芐酯的摩爾比為1∶6.5-7.5；

優(yōu)選地，將所得雙環(huán)肽酯潮品制得雙環(huán)肽酯精制品，其方法包括：向所得雙環(huán)肽酯潮品加入乙酸乙酯，加熱至回流，保溫攪拌，然后降溫，靜置析晶，過濾得到白色固體，再用純水洗滌，過濾，烘干，得雙環(huán)肽酯精制品；

2-2)雙環(huán)肽的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述雙環(huán)肽的制備方法包括：將步驟2-1)所得雙環(huán)肽酯(雙環(huán)肽酯潮品或雙環(huán)肽酯精制品)溶解在甲醇和四氫呋喃的混合溶液中，攪拌下滴加鹽酸，調節(jié)ph至2-3；反應結束，蒸去溶劑，降溫得到白色固體；加入乙酸乙酯攪拌使其全部溶解，再加入稀鹽酸萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相再加水萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液；濃縮去溶劑，濃縮液析晶，過濾，得到雙環(huán)肽白色固體潮品；

優(yōu)選地，將所得雙環(huán)肽白色固體潮品制得雙環(huán)肽精制品，其方法包括：將所得雙環(huán)肽白色固體潮品加氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph至8-9，使溶清(即溶解澄清，dissolvedclarification)；通過透析袋進行透析(截留分子量2000)；透析外液用鹽酸調節(jié)ph至2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌，烘干，得到雙環(huán)肽精制品，即為上述l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即第二層，上式vii所示化合物)。

第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法以此類推。

上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法，其合成路線如下：

l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)的制備方法以此類推，直至獲得所需代數(shù)的樹枝狀高分子化合物。

上述l-谷氨酸型樹狀化合物的制備方法描述如下：

原料:丙三羧酸(propane-1,2,3-tricarboxylicacid)；l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽(l-glutamicaciddibenzylester4-toluenesulfonate)。

催化劑：n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺(dcc，n,n’-dicyclohexylcarbodiimide)。

反應溶劑：n,n-二甲基甲酰胺(即dmf)。

產(chǎn)物及中間體的簡化命名：1、第一層由丙三羧酸和l-谷氨酸雙芐酯合成的樹狀單環(huán)含酯基的多肽，以下簡稱單環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)。2、由單環(huán)肽酯脫保護得到的一層樹狀多肽，以下簡稱單環(huán)肽(l-谷氨酸型)。3、由單環(huán)肽和l-谷氨酸雙芐酯合成的樹狀雙環(huán)含酯基的多肽，以下簡稱雙環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)。4、由雙環(huán)肽酯脫保護得到的二層樹狀多肽，以下簡稱雙環(huán)肽(l-谷氨酸型)。

具體地，上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法，包括以下步驟：

以l-谷氨酸雙芐酯和丙三羧酸原料為反應原料，以dmf為反應溶劑，以dcc為催化劑發(fā)生成肽反應，分離得到式xxiv所示的化合物(單環(huán)肽酯)；將所述式xxiv所示的化合物(單環(huán)肽酯)脫保護得到xi所示的化合物(單環(huán)肽)；然后以式xi所示的化合物(單環(huán)肽)和l-谷氨酸雙芐酯為原料，重復交替進行成肽反應和脫保護反應，直到得到含有3×2ⁿ個端基的樹枝狀高分子化合物；其中n為自然數(shù)，優(yōu)選地，n為1-5，進一步優(yōu)選為1-3。

例如，以l-谷氨酸雙芐酯和所述xi所示的化合物(單環(huán)肽)為原料，在dmf和dcc存在條件下發(fā)生成肽反應，分離得到式xxv所示的化合物(雙環(huán)肽酯)；將所述式xxv所示的化合物(雙環(huán)肽酯)脫保護得到xii所示的化合物(雙環(huán)肽)。

優(yōu)選地，所述成肽反應的條件為：反應物料摩爾比，丙三羧酸∶l-谷氨酸雙芐酯∶dcc為1∶3.5-4.5∶3-3.3；反應溫度40±5℃；反應時間8h以上。

優(yōu)選地，所述脫保護反應為水解反應，具體反應條件為：ph為2-3；反應時間4-6h；反應溫度30±5℃。

更具體地，上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即第一層，上式xi所示化合物)的制備方法，包括以下步驟：

1-1)單環(huán)肽酯的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述單環(huán)肽酯的制備方法包括：將原料l-谷氨酸雙芐酯和丙三羧酸在dmf和n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺存在條件下反應完全，加入鹽酸、乙酸乙酯萃取，上層酯層依次用碳酸氫鈉水溶液及飽和氯化鈉水溶液洗滌，取上層有機相加熱、攪拌溶解，降溫、析出白色固體，抽濾，烘干，得單環(huán)肽酯粗品；

其中，優(yōu)選地，所述原料丙三羧酸和l-谷氨酸雙芐酯的摩爾比為1∶3.5-4.5；進一步優(yōu)選為1∶4。

優(yōu)選地，將所得單環(huán)肽酯粗品制得單環(huán)肽酯精制品，其方法包括：向所得單環(huán)肽酯粗品加入乙酸乙酯，加熱回流，保溫攪拌，然后降溫，靜置析晶，過濾，將晶體烘干，得單環(huán)肽酯精制品。外觀：白色粉末狀固體。

1-2)單環(huán)肽的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述單環(huán)肽的制備方法包括：將步驟1-1)所得單環(huán)肽酯(單環(huán)肽酯精粗品或單環(huán)肽酯精制品)溶解在甲醇和四氫呋喃的混合溶液中，攪拌下滴加鹽酸，調節(jié)ph至2-3；反應結束，蒸去溶劑，降溫得到白色固體；加入乙酸乙酯攪拌使其全部溶解，再加入稀鹽酸萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相再加水萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液；濃縮去溶劑，濃縮液析晶，過濾，得到單環(huán)肽白色固體潮品；

優(yōu)選地，將所得單環(huán)肽白色固體潮品制得單環(huán)肽精制品，其方法包括：將所得單環(huán)肽白色固體潮品加氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph至8-9，使溶清(即溶解澄清，dissolvedclarification)；通過透析袋進行透析(截留分子量1000)；透析外液用鹽酸調節(jié)ph至2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌烘干，得到單環(huán)肽精制品，即為上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即第一層，上式xi所示化合物)。

上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即第二層，上式xii所示化合物)的制備方法，包括以下步驟：

2-1)雙環(huán)肽酯的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述雙環(huán)肽酯的制備方法包括：將原料l-谷氨酸雙芐酯和上述單環(huán)肽(即上式xi所示化合物)在dmf和n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺存在條件下反應完全，用鹽酸、乙酸乙酯萃取，上層酯層依次用碳酸氫鈉水溶液及飽和氯化鈉水溶液洗滌，將上層有機相干燥，過濾，濾液濃縮后，析晶，過濾，得到白色固體雙環(huán)肽酯潮品；

其中，優(yōu)選地，所述原料單環(huán)肽和l-谷氨酸雙芐酯的摩爾比為1∶6.5-7.5；

優(yōu)選地，將所得雙環(huán)肽酯潮品制得雙環(huán)肽酯精制品，其方法包括：向所得雙環(huán)肽酯潮品加入乙酸乙酯，加熱至回流，保溫攪拌，然后降溫，靜置析晶，過濾得到白色固體，再用純水洗滌，過濾，烘干，得雙環(huán)肽酯精制品；外觀：白色粉末狀固體；

2-2)雙環(huán)肽的制備：

該步驟反應路線如下：

優(yōu)選地，所述雙環(huán)肽的制備方法包括：將步驟2-1)所得雙環(huán)肽酯(雙環(huán)肽酯潮品或雙環(huán)肽酯精制品)溶解在甲醇和四氫呋喃的混合溶液中，攪拌下滴加鹽酸，調節(jié)ph至2-3；反應結束，蒸去溶劑，降溫得到白色固體；加入乙酸乙酯攪拌使其全部溶解，再加入稀鹽酸萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相再加水萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜；過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液；濃縮去溶劑，濃縮液析晶，過濾，得到雙環(huán)肽白色固體潮品；

優(yōu)選地，將所得雙環(huán)肽白色固體潮品制得雙環(huán)肽精制品，其方法包括：將所得雙環(huán)肽白色固體潮品加氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph至8-9，使溶清(即溶解澄清，dissolvedclarification)；通過透析袋進行透析(截留分子量2000)；透析外液用鹽酸調節(jié)ph至2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌，烘干，得到雙環(huán)肽精制品，即為上述l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即第二層，上式xii所示化合物)。

l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)的制備方法以此類推。

本發(fā)明還包括上述樹枝狀高分子化合物的用途，所述用途包括作為藥物的載體、作為腫瘤靶向載體、螯合正二價及正二價以上的金屬離子、螯合放射性同位素等。

當上述樹枝狀高分子化合物作為藥物的載體時，其表面游離羧酸(-cooh)與藥物分子上的羥基(-oh)或氨基(-nh2)脫水(-h2o)形成酯鍵(-coo-)或酰胺鍵(-conh-)，鍵合組合成載體-藥物的新化學結構。這種載體-藥物的新化學結構的優(yōu)點或有益效果是：具有良好的水溶性、生物相容性及生物降解性；載體表面分子上存在許多羧基，易連接許多藥物分子，也可部分成鹽，解決藥物的水溶性；載體-藥物接合物改變了藥物原有的性質，使藥物具有靶向性和緩釋性等。

本發(fā)明上述樹枝狀高分子化合物的表面多個游離羧酸能螯合正二價以上的金屬離子，可作為金屬螯合劑；可螯合的金屬包括:鈣離子(ca²⁺)、鉻離子(cr³⁺)、鐵離子(fe³⁺)、銅離子(cu²⁺)、鍺(ge)、砷(as)、鉑(pt)、金(au)等。

本發(fā)明上述樹枝狀高分子化合物表面游離羧酸同樣也能螯合臨床上常用的放射性同位素(如:碘(131i)、金(198au)、汞(203hg)、锝(99mtc)、銦(113min)、鉻(51cr)、鈷(57、58co)、鍶(85sr)、鎵(67se)等。

本發(fā)明上述樹枝狀高分子化合物的表面游離羧酸(-cooh)與藥物分子結合或螯合金屬，剩余的表面游離羧酸(-cooh)可與鈉(na⁺)或鉀(k⁺)成羧酸鹽(-coo-na⁺或-coo-k⁺)，從而解決了水溶性的技術問題。

本發(fā)明上述樹枝狀高分子化合物還可用作為腫瘤靶向載體，其優(yōu)點或有益效果是通過與抗腫瘤藥物分子結構中的金屬離子螯合形成大分子抗腫瘤藥物。通過不同分子量的載體與藥物螯合后，可以延長螯合后的藥物在腫瘤區(qū)域的滯留時間，起到靶向作用，從而達到減少抗腫瘤藥物的毒性和增強抗腫瘤藥效的作用。

本發(fā)明還提供一種含有上述樹枝狀高分子化合物的組合物。所述組合物的用途包括作為藥物的載體、作為腫瘤靶向載體、螯合正二價及正二價以上的金屬離子、螯合放射性同位素或作為診斷劑或放療劑。

附圖說明

圖1為本發(fā)明樹枝狀高分子化合物的結構示意圖，其中0表示核心、1表示第1世代(即第一層)、2表示表示第2世代(即第二層)。

圖2為l-天冬氨酸型單環(huán)肽酯(式xxii所示化合物)的質譜圖。

圖3為l-天冬氨酸型單環(huán)肽(式vi所示化合物)的質譜圖。

圖4為l-天冬氨酸型雙環(huán)肽酯(式xxiii所示化合物)的質譜圖。

圖5為l-天冬氨酸型雙環(huán)肽(式vii所示化合物)的質譜圖。

圖6為實驗例1結果圖。

圖7為實驗例2結果圖。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術或條件者，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件，或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可通過正規(guī)渠道商購買得到的常規(guī)產(chǎn)品。

實施例1l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備

制備l-天門冬氨酸雙芐酯：取天門冬氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽58.26g(0.12mol)、乙酸乙酯500ml和2.5％的碳酸氫鈉溶液500ml一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相。收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到天門冬氨酸雙芐酯黃色油狀液體。

1、第一層合成(l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代即第一層，式vi所示化合物)

單環(huán)肽酯(l-天冬氨酸型)的合成：向上述l-天冬氨酸雙芐酯黃色油狀液體中加入丙三羧酸5.28g(0.03mol)、dmf200ml、n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺18.57-20.63g(0.09mol-0.1mol)，40℃下攪拌反應8h停止反應。將反應液中倒入2000ml燒杯中，加入0.1n鹽酸600ml，乙酸乙酯600ml，室溫攪拌萃取30min，用分液漏斗靜置后分液，分去下層水相。上層酯層再加入2.5％的碳酸氫鈉水溶液600ml，室溫攪拌洗滌30min，倒入分液漏斗中靜置后分去下層水相。上層酯層再用600ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，分去下層水相。上層有機相為白色乳化物。將白色乳狀物加熱至70℃，攪拌溶解，自然降溫至室溫，析出白色固體。抽濾，得潮品。50℃鼓風烘干，得單環(huán)肽酯粗品約30.9g。

單環(huán)肽酯(l-天冬氨酸型)精制：將單環(huán)肽酯粗品30.9g，加乙酸乙酯400ml，加熱至回流保溫攪拌1h，降溫至室溫靜置析晶12h。過濾，晶體50℃烘干，得單環(huán)肽酯精制品。外觀：白色粉末狀固體。收重：28.4g。收率：88.5％(以丙三羧酸計)。單環(huán)肽酯m/z(esi)：1169.41/1157.92(見圖2)。

2.第一層脫保護

單環(huán)肽(l-天冬氨酸型)合成：將單環(huán)肽酯10.6g(0.01mol)溶解在甲醇30ml和四氫呋喃30ml的混合溶液中，30℃溫度攪拌下滴加2.0mol/l的鹽酸，調節(jié)ph＝2-3，繼續(xù)保溫攪拌4-6h，期間監(jiān)控反應液酸度，補加鹽酸使反應液酸度維持在ph＝2-3。反應結束，60℃下真空濃縮蒸去溶劑，降溫至室溫得到白色固體。加入乙酸乙酯80ml攪拌使其全部溶解，再加入0.2mol/l的稀鹽酸30ml，萃取，靜置分層，分去下層水相。上層有機相再加水30ml，萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜。過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液90ml。濃縮去溶劑50-60ml，濃縮液2-5℃下析晶12-16h，過濾，得到單環(huán)肽白色固體潮品。

單環(huán)肽(l-天冬氨酸型)精制：將上述單環(huán)肽白色固體潮品加5％的氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph＝8-9，使溶清。通過截留分子量1000的透析袋進行透析。透析外液用1mol/l的鹽酸調節(jié)ph＝2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌2遍，30℃鼓風烘干，得到單環(huán)肽精制品。收重：4.5g，收率82％(以單環(huán)肽酯計)。單環(huán)肽m/z(esi)：500.11、518.12(見圖3)。

3.第二層合成(l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代，即第二層，式vii所示化合物)

l-天冬氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽脫鹽:取l-天冬雙芐酯對甲苯磺酸鹽26.7g(0.055mol)、乙酸乙酯200ml和2.5％的碳酸氫鈉溶液200ml一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相。收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到天冬氨酸雙芐酯黃色油狀液體。

雙環(huán)肽酯(l-天冬氨酸型)的合成：向上述l-天冬氨酸雙芐酯黃色油狀液體中加入單環(huán)肽4.2g(0.0076mol)、dmf150ml、n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺9.3-11.2g(0.0456-0.0547mol)，40℃下攪拌反應8h，停止反應。反應液加入0.1n鹽酸400ml和乙酸乙酯400ml，萃取，分液漏斗靜置后分液，分去下層水相。上層酯層再加入2.5％的碳酸氫鈉水溶液400ml洗滌酯層，分液漏斗中靜置后分去下層水相。上層酯層再用400ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，分去下層水相。上層有機相干燥后，過濾，濾液真空濃縮后2-5℃下析晶12h，過濾，得到白色固體潮品15g。

雙環(huán)肽酯(l-天冬氨酸型)精制：將上述白色固體潮品加乙酸乙酯400ml，加熱至回流保溫攪拌1h，降溫至室溫靜置析晶14-18h。過濾得到白色固體，再用純水100ml×2室溫下攪拌洗滌30min，過濾，得到白色固體，30℃鼓風烘干，得雙環(huán)肽酯精制品。外觀：白色粉末狀固體。收重：13.5g。收率：77.1％(以單環(huán)肽計)。雙環(huán)肽酯m/z(esi)：2314.13(見圖4)。

4.第二層脫保護

雙環(huán)肽(l-天冬氨酸型)合成：將雙環(huán)肽酯11.5g(0.005mol)溶解在甲醇30ml和四氫呋喃30ml的混合溶液中，30℃溫度攪拌下滴加2.0mol/l的鹽酸，調節(jié)ph＝2-3，繼續(xù)保溫攪拌6h，期間監(jiān)控反應液酸度，補加鹽酸使反應液酸度維持在ph＝2-3。反應結束，60℃下真空濃縮蒸去溶劑，降溫至室溫得到白色固體。加入乙酸乙酯70ml攪拌使其全部溶解，再加入0.2mol/l的稀鹽酸30ml，萃取，靜置分層，分去下層水相。上層有機相再加入30ml水，萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜。過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液80ml。濃縮去溶劑50ml，濃縮液2-5℃下析晶12-16h，過濾，得到雙環(huán)肽白色固體潮品。

雙環(huán)肽(l-天冬氨酸型)精制：將上述雙環(huán)肽白色固體潮品加5％的氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph＝8-9，使溶清。通過截留分子量2000的透析袋進行透析。透析外液用1mol/l的鹽酸調節(jié)ph＝2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌2遍，30℃鼓風烘干，得到雙環(huán)肽精制品。收重：4.8g，收率約80％(以雙環(huán)肽酯計)。雙環(huán)肽m/z(esi)：1233.4、1248.2(見圖5)。

第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法以此類推。

實施例2l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備

制備l-谷氨酸雙芐酯:取l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽59.95g(0.12mol)、乙酸乙酯500ml和2.5％的碳酸氫鈉溶液500ml一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相。收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到l-谷氨酸雙芐酯黃色油狀液體。

1.第一層合成(l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代，即第一層，式xi所示化合物)

單環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)的合成：向上述l-谷氨酸雙芐酯黃色油狀液體中加入丙三羧酸5.28g(0.03mol)、dmf200ml、n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺18.57-20.63g(0.09-0.1mol)，40℃下攪拌反應8h停止反應。將反應液中倒入2000ml燒杯中，加入0.1n鹽酸600ml，乙酸乙酯600ml，室溫攪拌萃取30min，用分液漏斗靜置后分液，分去下層水相。上層酯層再加入2.5％的碳酸氫鈉水溶液600ml，室溫攪拌洗滌30min，倒入分液漏斗中靜置后分去下層水相。上層酯層再用600ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，分去下層水相。上層有機相為白色乳化物。將白色乳狀物加熱至70℃，攪拌溶解，自然降溫至室溫，析出白色固體。抽濾，得潮品。50℃鼓風烘干，得粗品約31.5g。

單環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)精制：將單環(huán)肽酯粗品31.5g，加乙酸乙酯400-500ml，加熱至回流保溫攪拌1h，降溫至室溫靜置析晶12-16h。過濾，晶體50℃烘干，得單環(huán)肽酯精制品。外觀：白色粉末狀固體。收重：26.5g。收率：84.0％(以丙三羧酸計)。

2.第一層脫保護

單環(huán)肽(l-谷氨酸型)合成：將單環(huán)肽酯10.5g(0.01mol)溶解在甲醇30ml和四氫呋喃30ml的混合溶液中，30℃溫度攪拌下滴加2.0mol/l的鹽酸，調節(jié)ph＝2-3，繼續(xù)保溫攪拌4h，期間監(jiān)控反應液酸度，補加鹽酸使反應液酸度維持在ph＝2-3。反應結束，60℃下真空濃縮蒸去溶劑，降溫至室溫得到白色固體。加入乙酸乙酯80ml攪拌使其全部溶解，再加入0.2mol/l的稀鹽酸30ml，萃取，靜置分層，分去下層水相。上層有機相再加入30ml水，萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜。過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液85ml。濃縮去溶劑55-60ml，濃縮液2-5℃下析晶12-16h，過濾，得到單環(huán)肽白色固體潮品。

單環(huán)肽(l-谷氨酸型)精制：將上述單環(huán)肽白色固體潮品加5％的氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph＝8-9，使溶清。通過截留分子量1000的透析袋進行透析。透析外液用1mol/l的鹽酸調節(jié)ph＝2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌2遍，30℃鼓風烘干，得到單環(huán)肽精制品。收重：4.1g，收率80％(以單環(huán)肽酯計)。

3.第二層合成(l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代，即第二層，式xii所示化合物)

l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽脫鹽:取l-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽25.2g(0.0504mol)、乙酸乙酯200ml和2.5％的碳酸氫鈉溶液200ml一起投入到反應瓶中，25℃下攪拌15min，靜置分層，分去下層水相。收集上層有機相，加無水硫酸鈉干燥后過濾，濾液50℃真空濃縮去乙酸乙酯，得到谷氨酸雙芐酯黃色油狀液體。

雙環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)的合成：向上述l-谷氨酸雙芐酯黃色油狀液體中加入單環(huán)肽3.57g(0.007mol)、dmf150ml、n,n’-二環(huán)已基碳二亞胺8.60-10.32g(0.042-0.0504mol)，40℃下攪拌反應8h，停止反應。反應液加入0.1n鹽酸400ml和乙酸乙酯400ml，萃取，分液漏斗靜置后分液，分去下層水相。上層酯層再加入2.5％的碳酸氫鈉水溶液400ml洗滌酯層，分液漏斗中靜置后分去下層水相。上層酯層再用400ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，分去下層水相。上層有機相干燥后，過濾，濾液真空濃縮后2-5℃下析晶12h，過濾，得到白色固體潮品13g。

雙環(huán)肽酯(l-谷氨酸型)精制：將上述白色固體潮品加乙酸乙酯400ml，加熱至回流保溫攪拌1h，降溫至室溫靜置析晶14h。過濾得到白色固體，再用純水100ml×2室溫下攪拌洗滌30min，過濾，得到白色固體，30℃鼓風烘干，得雙環(huán)肽酯精制品。外觀：白色粉末狀固體。收重：12.5g。收率：79.1％(以單環(huán)肽計)。

4.第二層脫保護

雙環(huán)肽(l-谷氨酸型)合成：將雙環(huán)肽酯11.3g(0.005mol)溶解在甲醇30ml和四氫呋喃30ml的混合溶液中，30℃溫度攪拌下滴加2.0mol/l的鹽酸，調節(jié)ph＝2-3，繼續(xù)保溫攪拌6-8h，期間監(jiān)控反應液酸度，補加鹽酸使反應液酸度維持在ph＝2-3。反應結束，60℃下真空濃縮蒸去溶劑，降溫至室溫得到白色固體。加入乙酸乙酯70ml攪拌使其全部溶解，再加入0.2mol/l的稀鹽酸30ml，萃取，靜置分層，分去下層水相。上層有機相再加入30ml水，萃取，靜置分層，分去下層水相，上層有機相加無水硫酸鈉干燥過夜。過濾，除去硫酸鈉，得到澄清液80ml。濃縮去溶劑50-60ml，濃縮液2-5℃下析晶12-16h，過濾，得到雙環(huán)肽白色固體潮品。

雙環(huán)肽(l-谷氨酸型)精制：將上述雙環(huán)肽白色固體潮品加5％的氫氧化鈉水溶液調節(jié)ph＝8-9，使溶清。通過截留分子量2000的透析袋進行透析。透析外液用1mol/l的鹽酸調節(jié)ph＝2-3，得到白色固體，過濾，純水洗滌2遍，30℃鼓風烘干，得到雙環(huán)肽精制品。收重：4.2g，收率約71.2％(以雙環(huán)肽酯計)。

第3世代(第三層)、第4世代(第四層)……第n世代(第n層)l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物的制備方法以此類推。

實施例3

分別含有式v～式ix任一化合物的組合物。該組合物的用途包括作為藥物的載體、作為腫瘤靶向載體、螯合正二價及正二價以上的金屬離子、螯合放射性同位素或作為診斷劑或放療劑。

實施例4

分別含有式xi～式xiv任一化合物的組合物。該組合物的用途是包括作為藥物的載體、作為腫瘤靶向載體、螯合正二價及正二價以上的金屬離子、螯合放射性同位素或作為診斷劑或放療劑。

實驗例1

分別將式vi和vii化合物在锝標后大鼠給藥，考察是否可作為腫瘤靶向載體。本實驗例中，通過實驗考察了式vi和vii化合物在锝標后大鼠體內與腫瘤分子是否結合并具有影像跟蹤功能。實驗結果顯示，式vi和vii化合物锝標后大鼠給藥可以與腫瘤分子結合并具有影像跟蹤功能。實驗結果見圖6。圖6中a、b分別表示l-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即式vi所示化合物)及l(fā)-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即式vii所示化合物)锝標大鼠給藥后2小時腫瘤(左小腿)影像。

實驗例2

分別將式xi和xii化合物在锝標后大鼠給藥，考察是否可作為腫瘤靶向載體。本實驗例中，通過實驗考察了式xi和xii化合物在小鼠體內與腫瘤分子是否結合并具有影像跟蹤功能。實驗結果顯示，式xi和xii化合物锝標后大鼠給藥可以與腫瘤分子結合并具有影像跟蹤功能。實驗結果見圖7。圖7中a、b分別表示l-谷氨酸型樹枝狀高分子化合物第1世代(即式xi所示化合物)及l(fā)-天冬氨酸型樹枝狀高分子化合物第2世代(即式vii所示化合物)锝標大鼠給藥后2小時腫瘤(左小腿)影像。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。