本發(fā)明涉及農(nóng)藥提純領(lǐng)域，具體涉及一種植物源農(nóng)藥的精提方法。

背景技術(shù)：

黃瓜白粉病、黃瓜霜霉病、黃瓜灰霉病是危害黃瓜栽培的主要病害，發(fā)病率高，損失大。目前對(duì)于黃瓜白粉病、霜霉病、灰霉病的防治主要側(cè)重于化學(xué)防治，由于一些化學(xué)藥劑的專用性強(qiáng)，往往防治這些病害要用幾種藥劑，這樣就大大地增加了種植成本。目前由于化學(xué)農(nóng)藥的大量使用，已給作物引發(fā)了較大的病害抗性，同時(shí)由于長(zhǎng)期大量使用化學(xué)農(nóng)藥，使得高殘留和污染環(huán)境等不利影響日益突出。因此具有低毒、安全、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)的生物農(nóng)藥成為了研究熱點(diǎn)，而植物源農(nóng)藥由于與植物的親和性好，更是成為研發(fā)的重點(diǎn)。

目前，市場(chǎng)上有一種新型植物源農(nóng)藥豆科素，具有防治黃瓜白粉病、霜霉病、灰霉病病害的有效功能，并且具有原材料來(lái)源廣泛、產(chǎn)品成本低、可綜合利用等顯著特點(diǎn)。豆科素能同時(shí)防治黃瓜白粉病、霜霉病、灰霉病這3種主要病害是項(xiàng)目產(chǎn)品具有廣譜治病的特色，對(duì)黃瓜白粉病、霜霉病、灰霉病的防治效果均在80％以上，優(yōu)于同用途的化學(xué)農(nóng)藥，具有優(yōu)效的特色。

但是，豆科素是植物提取的產(chǎn)物，由于提取難度較大，通常的提取純度為豆科素含量為10％左右，這樣大量的雜質(zhì)參雜其中，為豆科素產(chǎn)品的后續(xù)加工生產(chǎn)帶來(lái)了較大的困難，制約了豆科素的廣泛使用。當(dāng)前對(duì)豆科素進(jìn)一步提純使豆科素含量提高的方法是用化學(xué)溶劑氯仿進(jìn)行提取，采用這種方法要使豆科素的含量達(dá)到90％以上要經(jīng)過(guò)3次以上的反復(fù)提取，這樣使提取成本非常高，同時(shí)由于氯仿的安全危險(xiǎn)性非常高，對(duì)生產(chǎn)環(huán)境影響較大，已不適合進(jìn)行規(guī)模化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種方法簡(jiǎn)單、污 染少的植物源農(nóng)藥的精提方法。

本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：一種植物源農(nóng)藥的精提方法，所述的植物源農(nóng)藥為豆科素，即為n-乙?；脏?1-甲酰胺，該精提方法為絮凝-樹(shù)脂分離純化法，主要包括以下幾個(gè)步驟：

(1)調(diào)節(jié)原料的ph至7.5～8.5，加入絮凝劑，絮凝劑與原料的質(zhì)量比為(4～10％)：1，攪拌后過(guò)濾，得到濾液a，待用；

(2)在步驟(1)所得濾液a中添加20～40(wt)％稀硫酸，直至ph為6.5～7.5，用樹(shù)脂過(guò)濾柱過(guò)濾，得到濾液b；

(3)在濾液b中添加生物凝聚酶snm2，生物凝聚酶snm2的添加量為濾液b重量的5～8％，待結(jié)晶后攪拌1～2h，過(guò)濾得到晶體a和濾液c；

(4)將濾液c經(jīng)過(guò)脲醛樹(shù)脂柱過(guò)濾，并用ph為7～8的清水洗脫，得到濾液d，將濾液d重復(fù)步驟(3)，過(guò)濾得到晶體b；

(5)將晶體a和晶體b混合后烘干、粉碎，即得豆科素成品。

所述的原料為質(zhì)量含量為8～12％的豆科素提取液粗品。

所述的絮凝劑為氯化鈣和磷酸氫二鈉的混合物，其中，氯化鈣和磷酸氫二鈉的質(zhì)量比為(0.5～1.5)：(0.5～1.5)。

步驟(1)所述攪拌在攪拌器內(nèi)進(jìn)行，攪拌器的轉(zhuǎn)速為100～200rpm，攪拌時(shí)間為0.5～1h；步驟(1)所述過(guò)濾在壓力為0.1～0.3mpa條件下進(jìn)行。

步驟(2)所述樹(shù)脂過(guò)濾柱所采用的樹(shù)脂填料為大孔吸附樹(shù)脂，過(guò)濾的壓力為0.02～0.1mpa。

步驟(3)所述的攪拌在攪拌器內(nèi)進(jìn)行，攪拌器的轉(zhuǎn)速為50～150rpm，攪拌在26～28℃的條件下進(jìn)行。

提取液粗品粘度大，含有較多不溶性粒子以及雜蛋白。氯化鈣和磷酸氫二鈉兩者形成凝膠，將雜蛋白吸附并包裹其中形成沉淀除去。采用氯化鈣和磷酸氫二鈉作為絮凝劑能夠有效改變提取液中大分子物質(zhì)的分散狀態(tài)，使其聚結(jié)成較大的顆粒，便于提高過(guò)濾速率。

大孔樹(shù)脂吸附去除溶液中生物堿和糖類物質(zhì)。

生物凝聚酶snm2在溶液中使目的物質(zhì)形成膠結(jié)顆粒，從而產(chǎn)生沉淀。生物凝聚酶snm2環(huán)保無(wú)污染。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：

(1)豆科素成品的純度高達(dá)90～95％，有效地降低了損耗，控制了成本，且提取所得的豆科素成品藥效穩(wěn)定，大大促進(jìn)了產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力；

(2)本發(fā)明所采用的物質(zhì)都是無(wú)毒的，精提過(guò)程中產(chǎn)生的廢水、廢渣不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。

實(shí)施例1

取豆科素提取液20噸，該豆科素提取液由某公司提取車間生產(chǎn)，提取液含量10.2％。

(1)用燒堿將ph調(diào)至8，加入850公斤氯化鈣和850公斤磷酸氫二鈉，攪拌轉(zhuǎn)速200rpm攪拌半小時(shí)，板框過(guò)濾；

(2)用30％稀硫酸調(diào)節(jié)濾液ph值為7.0，調(diào)節(jié)后濾液過(guò)樹(shù)脂柱，大孔樹(shù)脂吸附過(guò)濾；

(3)收集濾液后用1噸生物凝聚酶snm2調(diào)節(jié)結(jié)晶，100rpm攪拌均勻，保持時(shí)間2小時(shí)，循環(huán)水保持結(jié)晶液溫度為27度，離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分離心過(guò)濾。

(4)濾液經(jīng)過(guò)脲醛樹(shù)脂過(guò)濾，清水洗脫，將洗脫液加入生物凝聚酶200公斤100rpm勻速攪拌結(jié)晶，離心機(jī)離心，從離心機(jī)中取出濕物料，將物料送入烘房。

(5)烘干后粉碎機(jī)粉碎，稱重1.8噸，豆科素含量91.2％，回收率為80.5％。

實(shí)施例2

取豆科素粗品提取液10噸，豆科素含量8.6％。

(1)燒堿調(diào)節(jié)ph值為8.2，加氯化鈣400公斤和磷酸氫二鈉400公斤，加燒堿保持ph值8左右，200rpm攪拌半小時(shí)，板框0.1mpa過(guò)濾。

(2)有效濾液用30％稀硫酸調(diào)節(jié)ph值7.0經(jīng)過(guò)樹(shù)脂柱，大孔樹(shù)脂吸附過(guò)濾后，濾液保持27度下用生物凝聚酶snm2(500公斤)調(diào)節(jié)結(jié)晶。

(3)100rpm勻速攪拌2小時(shí)后離心機(jī)離心過(guò)濾，酸性濾液經(jīng)過(guò)脲醛樹(shù)脂吸附，清水洗脫。

(4)洗脫液加入生物凝聚酶80公斤100rpm攪拌調(diào)節(jié)結(jié)晶，經(jīng)過(guò)離心機(jī)離心， 取出離心機(jī)中的濕品。

(5)把濕物料送入烘房烘干，烘干后粉碎機(jī)粉碎，稱重772公斤，豆科素含量93.1％，回收率83.5％。

實(shí)施例3

取豆科素粗品提取液300公斤，測(cè)定豆科素含量11.6％。

(1)緩慢加入燒堿調(diào)節(jié)ph值為8.1，200rpm攪拌半小時(shí)，加氯化鈣15公斤和磷酸氫二鈉15公斤，用燒堿調(diào)節(jié)ph值8.1，保持ph8.1，0.1mpa壓力下板框過(guò)濾。

(2)濾液用30％稀硫酸調(diào)節(jié)ph值7.1后經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂柱過(guò)濾，樹(shù)脂柱過(guò)濾后加入生物凝聚酶20公斤調(diào)節(jié)結(jié)晶，100rpm轉(zhuǎn)速下攪拌2小時(shí)。

(3)離心機(jī)離心，酸性濾液過(guò)脲醛樹(shù)脂柱，清水洗脫，洗脫液仍然用凝聚酶5公斤100rpm調(diào)節(jié)結(jié)晶，離心機(jī)過(guò)濾，

(4)將離心機(jī)中的濕品取出，濕品送入烘房烘干，烘干物料粉碎稱重30.2公斤，豆科素含量93.7％，回收率81.3％。

實(shí)施例4

取豆科素粗品提取液1000公斤，測(cè)定豆科素含量8％，精提方法為絮凝-樹(shù)脂分離純化法，主要包括以下幾個(gè)步驟：

(1)用naoh調(diào)節(jié)豆科素粗品提取液的ph至7.5，加入10kg氯化鈣及30kg磷酸氫二鈉，并用naoh調(diào)節(jié)ph維持在7.5，利用攪拌器進(jìn)行攪拌，攪拌器的轉(zhuǎn)速為100rpm，攪拌時(shí)間為1h；然后在0.1mpa條件下進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液a；

(2)在步驟(1)所得濾液a中添加20(wt)％稀硫酸，直至ph為6.5，用大孔樹(shù)脂柱過(guò)濾，過(guò)濾壓力為0.02mpa，得到濾液b；

(3)在濾液b中添加生物凝聚酶snm2，生物凝聚酶snm2的添加量為濾液b重量的5％，待結(jié)晶后在26℃條件下于攪拌器中攪拌1h，攪拌器的轉(zhuǎn)速為150rpm，離心過(guò)濾得到晶體a和濾液c；

(4)將濾液c經(jīng)過(guò)脲醛樹(shù)脂柱過(guò)濾，并用ph為7的清水洗脫，得到濾液d，在濾液d中加入，生物凝聚酶snm2，生物凝聚酶snm2的添加量為濾液d重量的5％，待結(jié)晶后在在26℃條件下于攪拌器中攪拌1h，攪拌器的轉(zhuǎn)速為150rpm，離心過(guò)濾得到晶體b；

(5)將晶體a和晶體b混合后烘干、粉碎，即得豆科素成品。經(jīng)檢測(cè)，豆科 素成品稱重72.4公斤，豆科素含量94.3％，回收率85.3％。

實(shí)施例5

取豆科素粗品提取液1000公斤，測(cè)定豆科素含量12％，精提方法為絮凝-樹(shù)脂分離純化法，主要包括以下幾個(gè)步驟：

(1)用naoh調(diào)節(jié)豆科素粗品提取液的ph至8.5，加入75kg氯化鈣及25kg磷酸氫二鈉，并用naoh調(diào)節(jié)ph維持在8.5，利用攪拌器進(jìn)行攪拌，攪拌器的轉(zhuǎn)速為200rpm，攪拌時(shí)間為0.5h；然后在0.3mpa條件下進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液a；

(2)在步驟(1)所得濾液a中添加40(wt)％稀硫酸，直至ph為7.5，用大孔樹(shù)脂柱過(guò)濾，過(guò)濾壓力為0.1mpa，得到濾液b；

(3)在濾液b中添加生物凝聚酶snm2，生物凝聚酶snm2的添加量為濾液b重量的8％，待結(jié)晶后在28℃條件下于攪拌器中攪拌2h，攪拌器的轉(zhuǎn)速為50rpm，離心過(guò)濾得到晶體a和濾液c；

(4)將濾液c經(jīng)過(guò)脲醛樹(shù)脂柱過(guò)濾，并用ph為8的清水洗脫，得到濾液d，在濾液d中加入，生物凝聚酶snm2，生物凝聚酶snm2的添加量為濾液d重量的8％，待結(jié)晶后在在28℃條件下于攪拌器中攪拌2h，攪拌器的轉(zhuǎn)速為50rpm，離心過(guò)濾得到晶體b；

(5)將晶體a和晶體b混合后烘干、粉碎，即得豆科素成品。經(jīng)檢測(cè)，豆科素成品稱重87.2公斤，豆科素含量94.5％，回收率82.4％。