本發(fā)明屬于環(huán)境生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)合微生物制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
醬油生產(chǎn)、腐乳產(chǎn)生、肉類加工等企業(yè)產(chǎn)生的廢水除含有高濃度的有機物外，還含有高濃度的鹽類物質(zhì)。采用電解和膜分離之類的技術(shù)，因廢水不是純鹽水，還有很多其他的有機物雜質(zhì)，影響處理效果，而且運行成本高。采用傳統(tǒng)生物法進行處理，高濃度的鹽類物質(zhì)對微生物具有抑制作用，若采用稀釋+生化進行處理，理論上可行，但這會造成水資源的浪費，使處理設(shè)施龐大，投資增加，運行費用提高。目前高鹽度廢水處理主要偏向于不脫鹽、不稀釋，直接進行生物處理。因此，研究生物處理的可行性，提高含鹽廢水的生物處理效率是目前處理含鹽廢水的一個熱點。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中對高鹽度有機廢水的生物處理效率低下的不足，提供一種用于高鹽度有機廢水處理的復(fù)合微生物制劑及其制備方法，該制劑能用于醬油生產(chǎn)、腐乳產(chǎn)生、肉類加工等廢水處理。
本發(fā)明的第一目的是提供一種復(fù)合微生物制劑。
一種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，含有解淀粉芽孢桿菌、嗜鹽鹽單胞菌、鹽脫氮枝芽胞桿菌和熒光假單胞菌。
優(yōu)選，所述的解淀粉芽孢桿菌、嗜鹽鹽單胞菌、鹽脫氮枝芽胞桿菌和熒光假單胞菌的菌體數(shù)量之比為1.3-32：6-24：4-20：18-36。
所述的解淀粉芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463，所述的嗜鹽鹽單胞菌為嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009，所述的鹽脫氮枝芽胞桿菌為鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742，所述的熒光假單胞菌為熒光假單胞菌cgmcc1.6279。
本發(fā)明的第二個目的是提供所述的復(fù)合微生物制劑的制備方法。
所述的復(fù)合微生物制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
將解淀粉芽孢桿菌、嗜鹽鹽單胞菌、鹽脫氮枝芽胞桿菌和熒光假單胞菌分別擴大培養(yǎng)得到發(fā)酵物，再將各發(fā)酵物混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑。
優(yōu)選，所述的制備方法包括以下步驟：
將解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279分別接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基，25-30℃擴大培養(yǎng)至發(fā)酵物中菌體濃度為1×108-8×108cfu/ml，再按解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279的菌體數(shù)量之比為1.3-32：6-24：4-20：18-36的比例將各發(fā)酵物混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑；
所述的解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463的培養(yǎng)基為：每升含有酪蛋白氨基酸2.0g、酵母提取物5.0g、mgcl2.0g、nacl40.0g、kcl1.0g和瓊脂15.0g，余量為蒸餾水，ph7.0-7.2；
所述的嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009的培養(yǎng)基為：每升含有海水2216培養(yǎng)基、瓊脂55.1g，余量為蒸餾水，ph7.2-7.4；
所述的鹽脫氮枝芽孢桿菌mccc1b00742的培養(yǎng)基為：每升含有酵母提取物1.0g、蛋白胨5.0g、牛肉膏1.0g、fepo40.01g和瓊脂16.0g，余量為過濾海水，ph7.4-7.6；
所述的熒光假單胞菌cgmcc1.6279的培養(yǎng)基為：每升含有酵母提取物5.0g、蛋白胨10.0g、nacl10.0g和瓊脂15.0g，余量為蒸餾水，ph7.0-7.2。
優(yōu)選，所述的制備方法還包括將復(fù)合微生物制劑進行真空冷凍干燥得到粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑的步驟。制成粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑易于運輸和保存。粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑在干燥、常溫或低溫環(huán)境中密封保存，保存時間可達8個月，使用時加水溶解至20％-30％濃度即可激活復(fù)合微生物制劑。
本發(fā)明提供了一種復(fù)合微生物制劑及其制備方法，將該復(fù)合微生物制劑應(yīng)用于含高濃度的鹽類物質(zhì)和有機物的廢水的處理，codcr去除率可以達到90％以上，氨氮去除率可以達到80％以上；復(fù)合微生物制劑在投加時，可加入到原有污水處理系統(tǒng)的調(diào)節(jié)池或生化池，投加量為30-100g/m3(按粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑質(zhì)量算)，反應(yīng)時間為8小時至7天；處理效率高，而且不需要在處理前對廢水進行稀釋，操作簡單且不會造成水資源的浪費。該復(fù)合微生物制劑可廣泛的應(yīng)用于高鹽度有機廢水的生物處理，具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實施方式
以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
以下實施例中所用的解淀粉芽孢桿菌(bacillusamyloliquefaciens)為中國普通微生物菌種保藏管理中心(cgmcc)保藏，保藏號為1.7463，將該菌簡述為解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463；所用的嗜鹽鹽單胞菌(halomonashalophila)為中國普通微生物菌種保藏管理中心(cgmcc)保藏，保藏號為1.9009，將該菌簡述為嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009；所用鹽脫氮枝芽胞桿菌(virgibacillushalodenitrificans，pseudonocardiaammonioxydans)為中國海洋微生物菌種保藏管理中心(mccc)保藏，保藏號1b00742，將該菌簡述為鹽脫氮枝芽 胞桿菌mccc1b00742；所用的熒光假單胞菌(pseudomonasfluorescens)為中國普通微生物菌種保藏管理中心(cgmcc)保藏，保藏號為1.6279，將該菌簡述為熒光假單胞菌cgmcc1.6279。
以下實施例中所用的培養(yǎng)基如下：
解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463培養(yǎng)基為：每升含有酪蛋白氨基酸2.0g、酵母提取物5.0g、mgcl2.0g、nacl40.0g、kcl1.0g和瓊脂15.0g，余量為蒸餾水，ph7.0-7.2，其制備方法是將所有成分混合均勻后，調(diào)ph，然后滅菌備用。
嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009培養(yǎng)基為：每升含有海水2216培養(yǎng)基、瓊脂55.1g，余量為蒸餾水，ph7.2-7.4，其制備方法是將所有成分混合均勻后，調(diào)ph，然后滅菌備用。
鹽脫氮枝芽孢桿菌mccc1b00742培養(yǎng)基為：每升含有酵母提取物1.0g、蛋白胨5.0g、牛肉膏1.0g、fepo40.01g和瓊脂16.0g，余量為過濾海水，ph7.4-7.6，其制備方法是將所有成分混合均勻后，調(diào)ph，然后滅菌備用。
熒光假單胞菌cgmcc1.6279培養(yǎng)基為：每升含有酵母提取物5.0g、蛋白胨10.0g、nacl10.0g和瓊脂15.0g，余量為蒸餾水，ph7.0-7.2，其制備方法是將所有成分混合均勻后，調(diào)ph，然后滅菌備用。
實施例1：醬油工業(yè)廢水處理
廣東某醬油廠每天產(chǎn)生廢水1500方，廢水含鹽量8000-9000mg/l，codcr2000-3000mg/l，氨氮50-70mg/l。
將解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌 mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279分別接種到對應(yīng)的培養(yǎng)基上，25-30℃擴大培養(yǎng)。解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463擴大培養(yǎng)后濃度為1.3×108cfu/ml，嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009擴大培養(yǎng)后濃度為1.5×108cfu/ml，鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742擴大培養(yǎng)后濃度為2×108cfu/ml，熒光假單胞菌cgmcc1.6279擴大培養(yǎng)后濃度為8×108cfu/ml。
將擴大培養(yǎng)好的解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279發(fā)酵物按體積比為1：4：2：3的比例混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑；然后進行真空冷凍干燥，制成粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑保存。該固體復(fù)合微生物制劑中解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279的菌體數(shù)量之比為1.3：6：4：24。
把粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑加水溶解至濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)20％-30％后，投加到廢水調(diào)節(jié)池中，投加量30-40g/m3(按粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑質(zhì)量算)，停留時間為7天，在復(fù)合微生物制劑作用下，調(diào)節(jié)池廢水被微生物快速降解，生成二氧化碳、水、氮氣等無害物質(zhì)。投加固體復(fù)合微生物制劑7天后測得codcr去除率可以達到50％以上，氨氮去除率可以達到40％以上，有效降低后續(xù)處理工藝的負(fù)荷。
實施例2：海產(chǎn)品加工廢水處理
某海產(chǎn)品加工廠廢水含有蛋白質(zhì)、膠體物等有機物，codcr600-800mg/l，氨氮70-90mg/l，加工工程中使用海水作為預(yù)處理工序，故廢水中氯離子含量高達4000-5000mg/l。
將解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌 mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279分別接種到對應(yīng)的培養(yǎng)基上，25-30℃擴大培養(yǎng)。解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463擴大培養(yǎng)后濃度為1×108cfu/ml，嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009擴大培養(yǎng)后濃度為2×108cfu/ml，鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742擴大培養(yǎng)后濃度為5×108cfu/ml，熒光假單胞菌cgmcc1.6279擴大培養(yǎng)后濃度為6×108cfu/ml。
將擴大培養(yǎng)好的解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279發(fā)酵物按體積比為2：3：4：3的比例混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑；然后進行真空冷凍干燥，制成粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑保存。該固體復(fù)合微生物制劑中解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279的菌體數(shù)量之比為2：6：20：18。
把粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑和活性污泥投加到sbr(序批式活性污泥法)試驗反應(yīng)器中，活性污泥濃度3000g/m3，粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑投加量100g/m3。反應(yīng)器曝氣時間為8小時，codcr去除率可以達到80％以上，氨氮去除率可以達到70％以上；延長曝氣時間至10小時，codcr去除率可以達到90％以上，氨氮去除率可以達到80％以上。
實施例3：榨菜廠腌制廢水處理
某榨菜廠污水處理站廢水主要來源于榨菜生產(chǎn)過程中間歇排放的腌制廢水、淘洗水、脫鹽水、壓榨脫水等，還有部分生活污水。codcr2000mg/l，氨氮60mg/l，含鹽量5000mg/l。
將解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279分別接種到對應(yīng)的培養(yǎng)基上，25-30℃擴大培 養(yǎng)。解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463擴大培養(yǎng)后濃度為5×108cfu/ml，嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009擴大培養(yǎng)后濃度為5×108cfu/ml，鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742擴大培養(yǎng)后濃度為1.5×108cfu/ml，熒光假單胞菌cgmcc1.6279擴大培養(yǎng)后濃度為6×108cfu/ml。
將擴大培養(yǎng)好的解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279發(fā)酵物按體積比為4：4：3：3的比例混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑；然后進行真空冷凍干燥，制成粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑保存。該固體復(fù)合微生物制劑中解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279的菌體數(shù)量之比為20：20：4.5：18。
向sbr(序批式活性污泥法)反應(yīng)器中加入彈性填料，密度為25％，然后把粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑和活性污泥投加到試驗反應(yīng)器中進行掛膜，粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑投加量100g/m3。反應(yīng)器曝氣時間為12小時，4天后掛膜完成，codcr去除率可以達到90％以上，氨氮去除率可以達到70％以上。
實施例4：涼果腌制廢水
涼果加工過程中所產(chǎn)生的廢水、汁、糖液常被作為廢水倒掉，廢水直接排入江河中使得河水帶有嚴(yán)重的酸臭味，大量廢水滲入農(nóng)田，會使田地逐年鹽堿化，糧食減產(chǎn)。某涼果腌制廢水經(jīng)過混凝沉淀處理，codcr去除率達50％，處理后codcr為1200mg/l，氯離子基本不能被混凝沉淀去除，含量高達5000mg/l以上。
將解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌 mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279分別接種到對應(yīng)的培養(yǎng)基上，25-30℃擴大培養(yǎng)。解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463擴大培養(yǎng)后濃度為8×108cfu/ml，嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009擴大培養(yǎng)后濃度為6×108cfu/ml，鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742擴大培養(yǎng)后濃度為2×108cfu/ml，熒光假單胞菌cgmcc1.6279擴大培養(yǎng)后濃度為6×108cfu/ml。
將擴大培養(yǎng)好的解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279發(fā)酵物按體積比為4：4：5：6的比例混合均勻，制備得到復(fù)合微生物制劑；然后進行真空冷凍干燥，制成粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑保存。該固體復(fù)合微生物制劑中解淀粉芽孢桿菌cgmcc1.7463、嗜鹽鹽單胞菌cgmcc1.9009、鹽脫氮枝芽胞桿菌mccc1b00742和熒光假單胞菌cgmcc1.6279的菌體數(shù)量之比為32：24：10：36。
向sbr(序批式活性污泥法)反應(yīng)器中加入彈性填料，密度為40％，然后把粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑和活性污泥投加到試驗反應(yīng)器中進行掛膜，粉末狀的固體復(fù)合微生物制劑投加量130g/m3。反應(yīng)器曝氣時間為8小時，3天后掛膜完成，codcr去除率可以達到85％以上。