本發(fā)明屬于生物制藥及飼料生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
我國是世界上最重要的天然腸衣生產(chǎn)和出口大國,全世界60%以上的腸衣需要在我國加工和出口。而腸衣生產(chǎn)中產(chǎn)生的小腸粘膜,通過加工可得粗品肝素及腸膜蛋白飼料。目前的肝素鈉原生產(chǎn)工藝流程如下:
1、豬小腸驗收(確保豬小腸原材料的質(zhì)量,主要為新鮮度)。
2、粘膜提?。ㄍㄟ^刮制得小腸粘膜)。
3、酶解:加鹽,加鹽為粘膜液的3.5%~4%,調(diào)整ph至8.5~9后升溫至55~58℃,鹽解1小時;然后蛋白酶,按每根小腸加2~3克蛋白酶,并升溫至85~90℃后保溫2小時。
4、吸附:將過濾后的酶解液降溫至55~60℃后加入樹脂,酶解液吸附肝素鈉,吸附8小時。
5、洗脫:
①將80目尼龍布過濾袋套在吸附罐的閥門口,邊攪拌邊放液,最后用清水將剩余的樹脂沖出;
②將盛有樹脂的尼龍布袋放入清水中清洗,直至無雜物為止;③將收集在尼龍布袋中的樹脂放入含鹽度為波美度5°的鹽水中漂洗20~30分鐘;④用鹽水三次洗脫樹脂,使樹脂與附著的肝素鈉分離。
6、沉淀:
①一次洗脫水單獨沉淀或一次洗脫水合二次洗脫水合并沉淀;②按酒精與洗脫水的體積比為2~2.5:1加入酒精,然后用塑料棒攪勻直至出現(xiàn)顆粒為止,此時酒精度應(yīng)為40~45度;③沉淀24小時。
以上工藝為目前大多數(shù)廠家所采用,最大的缺點是附產(chǎn)物腸膜蛋白全都變成廢水排棄,不但浪費了寶貴的腸膜蛋白資源,又污染了環(huán)境。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明目的是提出一種充分利用資源的腸膜蛋白多肽提取工藝。
本發(fā)明技術(shù)方案是:將刮制取得的小腸粘膜液以鹽解后,采用離心式過濾,分別取得濾出液和濾渣;將濾出液經(jīng)吸附、洗脫和沉淀取得肝素鈉;將濾渣以蛋白酶進行酶解處理后,經(jīng)干燥取得腸膜蛋白。
本發(fā)明首先解決了大量的腸粘膜鹽解液的分離問題,使鹽解肝素液與腸膜蛋白有效分離,由于肝素水分離后較以前澄清,使樹脂吸附更為便利,提高了肝素的收率;其次節(jié)約了人力,在原生產(chǎn)工藝中采用灌袋吊濾后再壓濾,勞動強度大且過濾效果差速度慢,不能
適應(yīng)大生產(chǎn)需要。本發(fā)明采用改用離心式過濾技術(shù)后,每小時可處理8至12噸的物料,每天可處理100至150噸物料,可生產(chǎn)1~2噸腸膜蛋白,腸膜蛋白的含固量可達35%左右,可大大增加生產(chǎn)經(jīng)濟效益,還有利于改善環(huán)境。
所述鹽解是:先在小腸粘膜液中加入食鹽,然后調(diào)整混合物的ph至8.5~10,升溫至55~58℃,保溫2小時,然后再升溫至100℃,保溫10分鐘以上,取得鹽解后混合物。所述鹽解時,鹽與粘膜液的投料質(zhì)量比為3.5~4︰100。
本發(fā)明離心式過濾的條件是:在螺旋差速為15~25r/min、轉(zhuǎn)速為2000~2150r/min、分離因素為2250的臥螺離心機。
本發(fā)明所述酶解處理的溫度條件是52~57℃。其中,濾渣與蛋白酶的混合質(zhì)量比為200:1。
將酶解處理后得到的酶解液置于75~80℃溫度條件下干燥10~12小時。
具體實施方式
1、豬小腸驗收,確保豬小腸原材料的質(zhì)量,主要是新鮮度的把控。
2、粘膜提?。和ㄟ^刮制,取得小腸粘膜液。
3、鹽解:在小腸粘膜液中加入食鹽,加鹽量為粘膜液的3.5%~4%(質(zhì)量百分比),以氫氧化鈉調(diào)整混合物的ph至8.5~10,升溫至55~58℃,保溫2小時,然后再升溫至100℃,保溫10分鐘以上,取得鹽解后混合物。
4、離心過濾:將鹽解后混合物置于lw450×2060ns臥螺離心機內(nèi),在螺旋差速為15~25r/min、轉(zhuǎn)速為2000~2150r/min、分離因素為2250的條件下進行離心式過濾,分別取得濾出液和濾渣。
5、吸附:將步驟4取得的濾出液降溫至55~57℃后加入樹脂,鹽解液吸附肝素鈉,吸附8小時。
6、洗脫:
①將80目尼龍布過濾袋套在吸附罐的閥門口,邊攪拌邊放液,最后用清水將剩余的樹脂沖出;
②將盛有樹脂的尼龍布袋放入清水中清洗,直至無雜物為止;③將收集在尼龍布袋中的樹脂放入含鹽度為波美度5°的鹽水中漂洗20~30分鐘;④用鹽水三次洗脫樹脂,使樹脂與附著的肝素鈉分離。
7、沉淀:
①一次洗脫水單獨沉淀或一次洗脫水合二次洗脫水合并沉淀;②按酒精與洗脫水的體積比為2~2.5:1加入酒精,然后用塑料棒攪勻直至出現(xiàn)顆粒為止,此時酒精度應(yīng)為40~45度;③沉淀24小時后取上清即為肝素鈉。
8、酶解:將步驟4取得的濾渣與蛋白酶混合,在52~57℃溫度條件下進行酶解處理1小時。
其中,濾渣與酶的混合質(zhì)量比為200︰1。
9、干燥:將步驟8得到的酶解液置于75~80℃溫度條件下干燥10~12小時,取得固體,即為腸膜蛋白。