本發(fā)明涉及生物制藥領(lǐng)域的一種肝素鈉的蛋白酶水解工藝，具體是一種超聲輔助酶法制備肝素鈉工藝。
背景技術(shù)：
肝素鈉是一種由動(dòng)物結(jié)締組織的肥大細(xì)胞產(chǎn)生的粘多糖,是一種天然抗凝血物質(zhì),它在抗凝血,促進(jìn)脂蛋白酶釋放和補(bǔ)體溶細(xì)胞體系等方面具有活性,被廣泛用于治療血栓塞、暴發(fā)性流腦、敗血癥、腎炎、急性心肌梗塞、動(dòng)脈硬化等疾病,還具有澄清血漿脂質(zhì),降低膽固醇等作用。在機(jī)體內(nèi)它與蛋白質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物存在于肥大細(xì)胞中,可被蛋白酶解離出來(lái)，因此，目前的動(dòng)物小腸內(nèi)的肝素鈉一般都是采用蛋白酶水解工藝制作，但是，由于簡(jiǎn)單的水解工藝制得的肝素鈉速度慢、提取率低，該技術(shù)有待進(jìn)一步地提升。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種肝素鈉的蛋白酶水解工藝，具體是一種提取率高、提取速度快的肝素鈉的蛋白酶水解工藝。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種超聲輔助酶法制備肝素鈉工藝，其特征在于：主要由蛋白酶水解蛋白質(zhì)進(jìn)行肝素鈉的提取，在小腸粘膜處理階段控制其含鹽量為小腸粘膜質(zhì)量的2-5%，并添加堿劑，調(diào)其ph值為9；在所述蛋白酶水解蛋白質(zhì)提取肝素鈉的過(guò)程中，同時(shí)輔助超聲波。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述超聲輔助酶法制備肝素鈉工藝，其特征在于：超聲波的波長(zhǎng)在25hz，功率密度0.4-1w/cm2的超聲波，在酶解的首尾各介入一次次，每次處理0.5h。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：由于食鹽可促進(jìn)脂肪的分解,對(duì)蛋白質(zhì)的分解具有抑制作用，因此在肝素鈉的提取上，不宜過(guò)量使用食鹽。但是目前普遍存在提取肝素鈉超量使用食鹽的現(xiàn)象，主要是因?yàn)槭雏}量的增加會(huì)加快肝素鈉的提取速度，缺點(diǎn)是原料浪費(fèi)大、廢水污染嚴(yán)重，由于沒(méi)有找到合適的即能提高生產(chǎn)效率，又能環(huán)保、高效且提高收率的方法，因此，一直被延續(xù)。
本發(fā)明主要是采用超聲波的介入，用超聲波作用于液體介質(zhì)時(shí)除產(chǎn)生空化作用、熱效應(yīng)、并賦予液體分子動(dòng)量外,還加速傳質(zhì)和傳熱的速率，對(duì)溶質(zhì)的溶解度及溶解速度產(chǎn)生的影響，提高肝素鈉的收率及彌補(bǔ)本發(fā)明鹽度較低降低生產(chǎn)效率的缺陷。實(shí)現(xiàn)了高收率、高效且綠色環(huán)保，減少?gòu)U水排放的生產(chǎn)方式。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
選取含鹽度為4度的豬小腸粘膜液500g，加入naoh，調(diào)其ph值為9，攪拌升溫至55℃，保溫30分鐘后，按小腸粘膜：堿性蛋白酶重量比為500：0.1加入堿性蛋白酶，保溫2小時(shí)，在加入堿性蛋白酶后，介入超聲波，具體為：超聲波的波長(zhǎng)在25hz，功率密度0.4-1w/cm2的超聲波，在酶解的首尾各介入一次，每次處理0.5h。酶解后是常規(guī)的樹(shù)脂吸附、洗脫、醇淀、烘干得收率為90%,效價(jià)為105u/mg的肝素鈉，且在該生產(chǎn)中，由于減少了nacl的用量，其廢水量每處理1t小腸減少200g，實(shí)現(xiàn)了高效、高收率、環(huán)保的生產(chǎn)目的。
實(shí)施例2
在1000升的反應(yīng)釜中抽含鹽度為3.5度的200付豬小腸粘膜和水，豬小腸和水的重量比為3:1，加入naoh，調(diào)其ph值為9，攪拌升溫至55℃，保溫30分鐘后，按小腸粘膜：堿性蛋白酶重量比為500g：0.1加入堿性蛋白酶，保溫2小時(shí)，在加入堿性蛋白酶后，介入超聲波，具體為：超聲波的波長(zhǎng)在25hz，功率密度0.5w/cm2的超聲波，在酶解的首尾各介入一次，每次處理0.5h。酶解后是常規(guī)的樹(shù)脂吸附、洗脫、醇淀、烘干得收率為91%、效價(jià)為106u/mg的肝素鈉，且在該生產(chǎn)中，由于減少了nacl的用量，其廢水量每處理1t小腸減少300g，實(shí)現(xiàn)了高效、高收率、環(huán)保的生產(chǎn)目的。