本發(fā)明涉及藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種fxr受體調(diào)節(jié)劑及其制備方法和用途。

背景技術(shù)：

多細(xì)胞機(jī)體依賴于細(xì)胞和體室之間的高級(jí)信息傳輸機(jī)制，所傳輸?shù)男畔⒖梢允歉叨葟?fù)雜的，并且可以導(dǎo)致的改變涉及細(xì)胞分化、增殖或者再生的基因程序等。而傳輸所用信號(hào)(或激素)，通常為低分子量的分子，比如肽、脂肪酸或者膽固醇衍生物等。

這些信號(hào)中有許多通過最終改變特定基因的轉(zhuǎn)錄來產(chǎn)生其效果。一組經(jīng)深入研究過的調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)各種信號(hào)應(yīng)答的蛋白質(zhì)，為己知的核受體的轉(zhuǎn)錄因子家族，以下經(jīng)常稱為"nr"。該"nr"組成員包括:甾類激素、維生素d、蛻皮激素、順式和反式維生素a酸、甲狀腺激素、膽汁酸、膽固醇-衍生物、脂肪酸(及其他過氧化物酶體增值物)受體；以及所謂的孤兒受體corphanreceptors)，該孤兒受體指結(jié)構(gòu)類似于該組其他成員的蛋白質(zhì)，但是對(duì)其沒有己知的配體。孤兒受體可能提示細(xì)胞中有未知的信號(hào)通道，或者可能是不需要配體激活就可以起作用的核受體。cd.mangelsdorf等人發(fā)現(xiàn)，用這些孤兒受體中的一些進(jìn)行的轉(zhuǎn)錄激活，可能在缺乏外源配體的情況下和/或通過起源自細(xì)胞表面的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)生(thenuclearreceptorsuperfamily:theseconddecade",cell1995,83(6),835-839；revans"thenuclearreceptorsuperfamily:arosettastoneforphysiology",mol.endocrinol.2005,19(6),1429-1438)。

通常，在nr中已經(jīng)限定了三個(gè)功能區(qū)域，氨基末端區(qū)域被認(rèn)為是具有一些調(diào)節(jié)功能的區(qū)域。dna結(jié)合區(qū)域(以下簡稱為"dbd")，通常包括兩個(gè)鋅指單元，并且識(shí)別在應(yīng)答基因的啟動(dòng)子中的特定激素應(yīng)答元件(以下簡稱為"hre")。在"dbd"中的特定氨基酸殘基已經(jīng)被dna序列結(jié)合特異性(m.schena,"mammalianglucocorticoidreceptorderivativesenhancetranscriptioninyeast",science1988，241(4868)，965-967)。配體結(jié)合區(qū)域(以下簡稱為"lbd")，位于己知nr的竣基末端區(qū)域。在沒有激素的情況下，lbd顯示出會(huì)干擾dbd與其hre的相互作用。激素結(jié)合似乎導(dǎo)致在nr中的構(gòu)象變化并由此開啟了這種干擾(a.brzozowski等，"molecularbasisofagonismandantagonismintheoestrogenreceptor",nature1997,389(6652),753-758)。

像甾類激素的核受體調(diào)節(jié)劑，通常是通過結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)受體上并形成核受體-配體復(fù)合物來影響特定細(xì)胞的生長與功能。然后核受體-激素復(fù)合物與特定基因的控制區(qū)域內(nèi)的激素應(yīng)答元件(hre)發(fā)生相互作用，從而改變特定的基因表達(dá)(a.aranda,a.pascual,"nuclearhormonereceptorsandgeneexpression",physiol.rev.2001,81(3)，1269-1304)。

法尼酯x受體α(以下當(dāng)指的是人類受體時(shí)也經(jīng)常稱為nr1h4)是一種原型2型核受體，其在以雜二聚體方式和法尼酶x受體一起結(jié)合到靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域時(shí)激活基因(b.forman等，"identificationofanuclearreceptorthatisactivatedbyfamesolmetabolites"，cell1995,81(5，687-693)。nr1h4的相關(guān)生理性配體為膽汁酸(d.parks等，"bileacids:naturalligandsforanorphannuclearreceptor",science1999,284(5418),1365-1368；m.makishima等，"identificationofanuclearreceptorforbileacids",science1999,284(5418),1362-1365)，其中活性最好的是鵝脫氧膽酸(cdca)，它參與調(diào)節(jié)膽汁酸體內(nèi)平衡的幾種基因的表達(dá)。法尼醇及其衍生物，一起被稱為法尼酯，最初描述為在高濃度時(shí)激活鼠類直向同源物，但是他們沒有激活人類或者鼠類受體的作用。fxr(即nr1h4受體)在肝、小腸、結(jié)腸、卵巢、腎上腺和腎中表達(dá)。除了控制細(xì)胞內(nèi)的基因表達(dá)外，fxr似乎也參與旁分泌和內(nèi)分泌通信(j.holt等，"definitionofanovelgrowthfactor-dependentsignalcascadeforthesuppressionofbileacidbiosynthesis",genesdev.2003,17(13),1581-91；t.inagaki等，"fibroblastgrowthfactor15functionsasanenterohepaticsignaltoregulatebileacidh

omeostasis",cellmetab.2005,2(4),217-225)。

有一篇論文提出了fxr激活后，通過向上調(diào)整巨噬細(xì)胞中的溶酶體命運(yùn)/存活因子(lysosomalfate/survivalfactor)taco-2來對(duì)例如細(xì)菌或者原生動(dòng)物寄生蟲的感染有機(jī)體的存活產(chǎn)生直接影響(p.anand等，"downregulationoftacogenetranscriptionrestrictsmycobacterialentry/survivalwithinhumanmacrophages",femsmicrobiol.lett.2005,250(1),137-144)。這為fxr作為治療例如肺結(jié)核、麻風(fēng)病、利什曼蟲病、美洲錐蟲病(chagasdisease)等的細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌性或者寄生蟲性感染的藥物靶標(biāo)提供了依據(jù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明的目的在于提供一種fxr受體調(diào)節(jié)劑，能夠與fxr(即nr1h4)受體結(jié)合并作為fxr受體的激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：

具有式i結(jié)構(gòu)特征的fxr受體調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體或溶劑化物或前藥：

其中：

a選自：c或n；

p選自：c、n或o；

q選自：c、n或o；

m選自：c或n；

r1選自：氫、1～5個(gè)r2取代或未取代的c1～c6烷基、1～5個(gè)r2取代或未取代的c2～c6鏈烯基、1～5個(gè)r2取代或未取代的c2～c6炔基、1～5個(gè)r2取代或未取代的c3～c6環(huán)烷基、1～5個(gè)r2取代或未取代的雜環(huán)基、1～5個(gè)r2取代或未取代的芳基、1～5個(gè)r2取代或未取代的雜芳環(huán)基；

ar1選自：1～5個(gè)r6取代或未取代的c5～10芳基，1～5個(gè)r6取代或未取代的c5～10雜芳基；

x選自以下取代基：

c選自：0、1、2或3；

d選自：0、1、2或3；

e選自：0、1、2或3；

f選自：0、1、2或3；

m選自：1或2；

r3獨(dú)立地任選自：氫、鹵素、1～5個(gè)r7取代或未取代的c1～c3烷基、1～5個(gè)r7取代或未取代的c1～c3烷氧基、1～5個(gè)r7取代或未取代的c3～c6環(huán)烷基；并且兩個(gè)獨(dú)立地取代基r3可以與和它們連接的原子一起形成3～6元碳環(huán)、芳基、雜芳基或者雜環(huán)；

ar2選自：1～3個(gè)r8取代或未取代的苯基、1～3個(gè)r8取代或未取代的萘基、1～3個(gè)r8取代或未取代的c5～c10單環(huán)或雙環(huán)雜芳基；

r8選自：氫、鹵素、c1～c4烷基、c1～c4烷氧基、c3～c5環(huán)烷基、c2～c4鏈烯基、c2～c4炔基、酰胺基、磺胺基、酯基、氰基、och2f、ochf2、ocf3、scf3、n(ch3)2；

y選自：coor4、conr4r5、c(o)nhso2r4、so2nhc(o)r4、或經(jīng)由c原子連接到ar2的四氮唑；

r4、r5獨(dú)立地任選自：氫、金屬離子、1～5個(gè)r9取代或未取代的c1～c6烷基、1～5個(gè)r9取代或未取代的c2～c6鏈烯基、1～5個(gè)r9取代或未取代的c2～c6炔基、1～5個(gè)r9取代或未取代的c3～c6環(huán)烷基；

r2、r6、r7、r9獨(dú)立地任選自：氫、鹵素、氰基、酰胺基、磺酰胺基、氨基、酯基、硝基、c1～c3烷基、c1～c3單鹵代或多鹵代烷基、c1～c3烷氧基、c1～c3單鹵代或多鹵代烷氧基、被1～3個(gè)氟原子取代或未取代的c3～5環(huán)烷基。

在上述化合物中，優(yōu)選a和m為c或n，且a和m至少有一個(gè)為c；p和q為c、n或o，且p和q不能同時(shí)為c。

在其中一些實(shí)施例中，a選自：c；p選自：n；q選自：o；m選自：c。

在其中一些實(shí)施例中，ar2選自以下基團(tuán)：

r8選自：氫、鹵素、c1～c4烷基、c1～c4烷氧基。

在其中一些實(shí)施例中，x選自以下取代基：

其中：c、d、e、f、r3如上所述。

在其中一些實(shí)施例中，選自具有如下通式ii結(jié)構(gòu)特征的化合物：

其中：

r1選自：1～5個(gè)r2取代或未取代的c3～c6環(huán)烷基；

ar1選自：1～5個(gè)r6取代或未取代的c5～10芳基；優(yōu)選1～3個(gè)r6取代或未取代的苯基或吡啶基；

x選自以下取代基：

c選自：0、1、2或3；

d選自：0、1或2；

e選自：0或1；

f選自：0或1；

r3獨(dú)立地任選自：氫、鹵素、1～5個(gè)r7取代或未取代的c1～c3烷基；

ar2選自以下基團(tuán)：

r8選自：氫、鹵素、c1～c4烷基、c1～c4烷氧基；

y選自：coor4、c(o)nhso2r4；

r4選自：氫、金屬離子、1～5個(gè)r9取代或未取代的c1～c6烷基；

r2、r6、r7、r9獨(dú)立地任選自：氫、鹵素、氰基、硝基、c1～c3烷基、c1～c3單鹵代或多鹵代烷基、c1～c3烷氧基、c1～c3單鹵代或多鹵代烷氧基。

在其中一些實(shí)施例中，a選自：c；

p選自：n；

q選自：o；

m選自：c；

ar1選自：1～3個(gè)r6取代或未取代的苯基；

r6選自：鹵素、被1～3個(gè)氟原子取代或未取代的c1～c3烷基，被1～3個(gè)氟原子取代或未取代的c3～5環(huán)烷基；

r1選自：環(huán)丙烷；

x選自：

c選自：0、1或2；

d選自：0、1或2；

e選自：0、1或2；

f選自：0、1或2。

在其中一些實(shí)施例中，選自如下化合物之一：

本發(fā)明還公開了上述的fxr受體調(diào)節(jié)劑的制備方法，包括以下合成路線：

路線一：

其中：a、m、p、q、x、r1、ar1和ar2如上所述；

el1選自：鹵素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；

el2選自：鹵素；

r選自：c1～c6烷基。

步驟1中，化合物ia與ib發(fā)生親核取代反應(yīng)得到中間體ic。所述的親核取代反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將化合物ia溶于有機(jī)溶劑，加入相轉(zhuǎn)移催化劑和堿性試劑，反應(yīng)0.2到1小時(shí)后再加入化合物ib，在室溫到80℃條件下反應(yīng)1到24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為四氫呋喃、dmf、甲苯、乙腈等，優(yōu)選四氫呋喃；所述相轉(zhuǎn)移催化劑可為18-冠醚-6、四丁基碘化銨、四丁基硫酸氫銨等，優(yōu)選18-冠醚-6；所述堿性試劑包括鈉氫、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉、乙醇鈉等，優(yōu)選叔丁醇鉀或叔丁醇鈉。

步驟2中，將中間體ic的保護(hù)基boc脫去得到中間體id，所采用的方法是本領(lǐng)域脫去boc的常規(guī)方法，例如：將中間體ic溶于有機(jī)溶劑，加入酸性試劑，在0℃到60℃反應(yīng)0.5到24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、四氫呋喃等，優(yōu)選二氯甲烷或二氧六環(huán)；所述酸性試劑包括三氟乙酸、對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、鹽酸、氯化氫乙酸乙酯溶液或氯化氫二氧六環(huán)溶液，優(yōu)選三氟乙酸、氯化氫乙酸乙酯溶液或氯化氫二氧六環(huán)溶液。

步驟3中，中間體id與中間體ie可通過親核取代反應(yīng)或金屬催化偶聯(lián)反應(yīng)得到中間體if。所述的親核取代反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體id溶于有機(jī)溶劑，加入堿性試劑和中間體ie，在室溫到150℃條件下反應(yīng)1到24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為四氫呋喃、dmf、甲苯、乙腈、丙腈、nmp等，優(yōu)選dmf或乙腈；所述堿性試劑包括鈉氫、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸銫、碳酸鉀、碳酸鈉、三乙胺、dipea、dbu等，優(yōu)選碳酸鉀、三乙胺或dipea；反應(yīng)條件優(yōu)選80℃到100℃。所述的金屬催化偶聯(lián)反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體id溶于有機(jī)溶劑，加入鈀催化劑、膦配體、堿性試劑和中間體ie，氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)，在80℃到150℃條件下反應(yīng)8到48小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為甲苯、二甲苯、二氧六環(huán)、丙腈、nmp等，優(yōu)選甲苯、二甲苯或二氧六環(huán)；所述鈀催化劑可為醋酸鈀、pd2(dba)3、3ndruphospd、四(三苯基膦)鈀等，優(yōu)選醋酸鈀或pd2(dba)3；所述膦配體可為binap、xantphos、三(叔丁基)膦、三(鄰甲苯基)膦等，優(yōu)選binap或xantphos；所述堿性試劑可為碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉等，優(yōu)選碳酸銫或叔丁醇鉀。

步驟4中，中間體if經(jīng)水解反應(yīng)可得到化合物ig。所述水解反應(yīng)可以用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體if溶入水與任意與水互溶的有機(jī)溶劑中，在堿性條件，經(jīng)室溫到100℃條件下反應(yīng)1-24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為任意與水互溶的溶劑，優(yōu)選乙醇、甲醇、四氫呋喃、二氧六環(huán)等。所用的堿可為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸銫、碳酸鈉等，優(yōu)選氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀。

或者

路線二：

其中：a、m、p、q、x、r1、ar1和ar2如上所述；

el1選自：鹵素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；

el2選自：鹵素；

r選自：c1～c6烷基。

步驟1中，中間體ie與中間體iia可通過親核取代反應(yīng)或金屬催化偶聯(lián)反應(yīng)得到中間體iib。所述的親核取代反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體ie溶于有機(jī)溶劑，加入堿性試劑和中間體iia，在室溫到150℃條件下反應(yīng)1到24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為四氫呋喃、dmf、甲苯、乙腈、丙腈、nmp等，優(yōu)選dmf或乙腈；所述堿性試劑包括鈉氫、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸銫、碳酸鉀、碳酸鈉、三乙胺、dipea、dbu等，優(yōu)選碳酸鉀、三乙胺或dipea；反應(yīng)條件優(yōu)選80℃到100℃。所述的金屬催化偶聯(lián)反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，將中間體ia溶于有機(jī)溶劑，加入鈀催化劑、膦配體、堿性試劑和中間體iia，氮?dú)饣驓鍤獗Ｗo(hù)，在80℃到150℃條件下反應(yīng)8到48小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為甲苯、二甲苯、二氧六環(huán)、丙腈、nmp等，優(yōu)選甲苯、二甲苯或二氧六環(huán)；所述鈀催化劑可為醋酸鈀、pd2(dba)3、^3ndruphospd、四(三苯基膦)鈀等，優(yōu)選醋酸鈀或pd2(dba)3；所述膦配體可為binap、xantphos、三(叔丁基)膦、三(鄰甲苯基)膦等，優(yōu)選binap或xantphos；所述堿性試劑可為碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉等，優(yōu)選碳酸銫或叔丁醇鉀。

步驟2中，中間體iib與中間體ia發(fā)生親核取代反應(yīng)得到中間體if。所述的親核取代反應(yīng)應(yīng)用本領(lǐng)域的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體iib溶于有機(jī)溶劑，加入堿性試劑和中間體ia，在60℃到120℃條件下反應(yīng)1到24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為四氫呋喃、dmf、甲苯、乙腈、丙腈等，優(yōu)選乙腈、dmf；所述堿性試劑包括鈉氫、叔丁醇鉀、叔丁醇鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸銫等，優(yōu)選鈉氫、碳酸鉀。

步驟3中，中間體if經(jīng)水解反應(yīng)可得到化合物ig。所述水解反應(yīng)可以用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將中間體if溶入水與任意與水互溶的有機(jī)溶劑中，在堿性條件，經(jīng)室溫到100℃條件下反應(yīng)1-24小時(shí)。所述有機(jī)溶劑可為任意與水互溶的溶劑，優(yōu)選乙醇、甲醇、四氫呋喃、二氧六環(huán)等。所用的堿可為氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸銫、碳酸鈉等，優(yōu)選氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀。

制備得到化合物ig后，還可通過以下線路三進(jìn)行進(jìn)一步反應(yīng)制備衍生物：

其中，a、m、p、q、x、r1、ar1和ar2如上1所述；

r’選自：氫或c1～c6烷基；

l選自：c1～c6烷基、c2～c6鏈烯基、c2～c6炔基、c3～c6環(huán)烷基、c(o)r6或so2r6；

r6選自：c1～c3烷基、芳基或雜芳基。

步驟1中，化合物ig與中間體iiia發(fā)生縮合反應(yīng)可以得到化合物iiib。所述縮合反應(yīng)可以用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法進(jìn)行，例如：將化合物ig溶于有機(jī)溶劑，加入縮合劑、堿性試劑和中間體iiia，在室溫到100℃的條件下反應(yīng)1到24小時(shí)。所述的有機(jī)溶劑可為二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙腈、dmf、二氧六環(huán)、四氫呋喃等，優(yōu)選二氯甲烷、乙腈、dmf；所述的縮合試劑可為hatu、hbtu、edc、hobt、bop、pybop等，優(yōu)選hatu、edc、hobt、pybop；所述的堿可為三乙胺、dipea、dbu、嗎啉、吡啶等，優(yōu)選三乙胺和dipea。

本發(fā)明還公開了上述的fxr受體調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體或溶劑化物或前藥在制備預(yù)防和治療由fxr介導(dǎo)的疾病的藥物中的應(yīng)用。

在其中一些實(shí)施例中，所述由fxr介導(dǎo)的疾病包括：非酒精性脂肪性肝病，非酒精性脂肪肝炎，慢性肝內(nèi)或肝外膽汁淤積病癥，由慢性膽汁淤積病癥或者急性肝內(nèi)膽汁淤積病癥導(dǎo)致的肝纖維化，慢性乙型肝炎，膽囊結(jié)石，肝癌，結(jié)腸癌，或者腸道炎性疾病。

本發(fā)明還公開了一種藥物組合物，包括上述的fxr受體調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體或溶劑化物或前藥，以及藥學(xué)上可以接受的輔料或載體。

所述藥學(xué)上可以接受的輔料或載體可以為賦形劑或緩釋劑等。該藥物組合物可以是多種形式，如片劑、膠囊劑、散劑、糖漿劑、溶液劑、混懸劑和氣霧劑等，并可以存在于適宜的固體或液體載體或稀釋液中。本發(fā)明的藥物組合物也可以儲(chǔ)存在適宜的注射或滴注的消毒器具中。該藥物組合物中還可包含氣味劑、香味劑等。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明的具有式i結(jié)構(gòu)特征的fxr受體調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體或溶劑化物或前藥，能夠與fxr(即nr1h4)受體結(jié)合，并作為fxr受體的激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑，進(jìn)而能夠應(yīng)用于預(yù)防和治療由fxr介導(dǎo)的疾病，例如非酒精性脂肪性肝病，非酒精性脂肪肝炎，慢性肝內(nèi)或肝外膽汁淤積病癥，由慢性膽汁淤積病癥或者急性肝內(nèi)膽汁淤積病癥導(dǎo)致的肝纖維化，慢性乙型肝炎，膽囊結(jié)石，肝癌，結(jié)腸癌，或者腸道炎性疾病等。

特別是其中，部分化合物，對(duì)fxr激動(dòng)的ec50達(dá)到100nm以下，顯示出了非常好的fxr激動(dòng)活性，具有非常優(yōu)越的應(yīng)用前景，為臨床治療由fxr介導(dǎo)的疾病提供了新的藥物選擇。

具體實(shí)施方式

本文所用“烷基”是指飽和鏈狀烷基，“鏈狀烷基”是指直鏈或支鏈的烷基，如c1-c6烷基是指具有1至6個(gè)碳原子的飽和直鏈或支鏈的烷基，其中直鏈烷基的示例包括但不限于乙基，正丙基等，支鏈烷基的示例包括但不限于異丙基，叔丁基等；“環(huán)烷基”是指具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的烷基，如c3-c4環(huán)烷基指具有3至4個(gè)碳原子的具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的烷基，示例包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)丁基、甲基取代環(huán)丙基等?！跋┗笔侵覆伙柡玩湢钔榛?，如c2～c6烯基表示碳原子數(shù)為2個(gè)到6個(gè)的具有一個(gè)雙鍵的直鏈或支鏈烯基，示例包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基、己烯基等。

術(shù)語“雜環(huán)”代表具有5-7個(gè)成環(huán)原子、含有一到四個(gè)選自n、o、s的雜原子的飽和單環(huán)體系。示例包括但不限于：四氫呋喃、吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉等。

術(shù)語“芳雜環(huán)”代表具有5-6個(gè)成環(huán)原子、含有一到四個(gè)雜原子(選自n、o、s)且遵守hückel規(guī)則的單環(huán)體系。示例包括但不限于吡啶環(huán)、嘧啶環(huán)、噠嗪環(huán)、吡嗪環(huán)、呋喃環(huán)、噻吩環(huán)、噻唑環(huán)、噁唑環(huán)、異噁唑環(huán)、異噻唑環(huán)、咪唑環(huán)、吡唑環(huán)、三氮唑環(huán)、四氮唑環(huán)等。

術(shù)語“烷氧基”表示末端含有一個(gè)氧原子的直鏈或支鏈烷基，示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基等。

術(shù)語“取代”是指用指定取代基的基團(tuán)置換特定結(jié)構(gòu)中的氫基。本發(fā)明中烷基或環(huán)烷基上的取代，如沒有指明發(fā)生在特定的碳原子上，則表示可以發(fā)生在任何取代基個(gè)數(shù)尚未達(dá)到飽和的碳原子上。多個(gè)取代基從同一系列中選擇時(shí)，它們可以相同，也可以不同。本發(fā)明中苯環(huán)、芳雜環(huán)或者雜環(huán)上的取代，如沒有指明發(fā)生在特定的原子上，則表示可以發(fā)生在任何未被除氫與外的其它原子取代的位置。多個(gè)取代基從同一系列中選擇時(shí)，它們可以相同，也可以不同。

術(shù)語“溶劑化物”在文中用來描述包含本發(fā)明化合物和化學(xué)計(jì)量的一種或多種藥學(xué)上可接受的溶劑分子(如乙醇)的分子絡(luò)合物。當(dāng)所述溶劑是水時(shí)采用術(shù)語“水合物”。

通式i中圓形虛線表示該五元環(huán)中不確定位置具有雙鍵，整個(gè)環(huán)形成共軛體系。

通式中由環(huán)狀結(jié)構(gòu)外部指向環(huán)內(nèi)的單線條表示具有取代基，但取代位置不固定。

本發(fā)明包括式i-ii化合物的游離形式，也包括其藥學(xué)上可接受的鹽及立體異構(gòu)體及溶劑化物和前藥。可通過常規(guī)化學(xué)方法自含有堿性部分或酸性部分的本發(fā)明化合物合成本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽。通常，通過離子交換色譜或通過游離堿和化學(xué)計(jì)算量或過量的所需鹽形式的無機(jī)或有機(jī)酸在適當(dāng)溶劑或多種溶劑的組合中反應(yīng)制備堿性化合物的鹽。類似的，通過和適當(dāng)?shù)臒o機(jī)或有機(jī)堿反應(yīng)形成酸性化合物的鹽。

因此，本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括通過堿性本發(fā)明化合物和無機(jī)或有機(jī)酸反應(yīng)形成的本發(fā)明化合物的常規(guī)無毒鹽。例如，常規(guī)的無毒鹽包括自無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等制備的鹽，也包括自有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、撲酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、三氟乙酸等制備的鹽。

如果本發(fā)明化合物為酸性的，則適當(dāng)?shù)摹八帉W(xué)上可接受的鹽”指通過藥學(xué)上可接受的無毒堿包括無機(jī)堿及有機(jī)堿制備的鹽。得自無機(jī)堿的鹽包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、亞錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。特別優(yōu)選銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽和鈉鹽。得自藥學(xué)上可接受的有機(jī)無毒堿的鹽，所述堿包括伯胺、仲胺和叔胺的鹽，取代的胺包括天然存在的取代胺、環(huán)狀胺及堿性離子交換樹脂例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、n,n'－二芐基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、n一乙基嗎啉、n一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、組氨酸、羥鈷胺、異丙基胺、賴氨酸、甲基葡萄糖胺、嗎啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。

除在文獻(xiàn)中已知的或在實(shí)驗(yàn)程序中例證的標(biāo)準(zhǔn)方法外，可采用如下實(shí)施例中的方法制備本發(fā)明化合物。結(jié)合下述的合成方案，能夠?qū)Ρ景l(fā)明中所述的化合物以及合成方法進(jìn)行更好的理解。實(shí)例中的所有參數(shù)及其余說明，除另加說明外，都是以質(zhì)量為依據(jù)的。柱層析分離所用填料若未說明均為硅膠。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。所述的合成方案描述了可以用于制備本發(fā)明中所述的化合物的方法，所述的方法僅僅是為說明目的的說明性方案描述，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明所具有的范圍的限制。

以下實(shí)施例中所用縮寫釋義如下：

dmf：n,n-二甲基甲酰胺

ncs：n-氯代丁二酰亞胺

hatu：2-(7-氮雜-1h-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯

pcc：氯鉻酸吡啶鹽

thf：四氫呋喃

nmp：n-甲基吡咯烷酮

boc：叔丁氧羰基

dipea：n,n-二異丙基乙胺

dbu：1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯

3ndruphospd：甲磺酸(2-二環(huán)己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯(lián)苯基)(2-氨基-1,1'-聯(lián)苯-2-基)鈀

pd2(dba)3：三(二亞芐基丙酮)二鈀

binap：1,1’-聯(lián)萘-2,2’-苯基膦

xantphos：4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽

實(shí)施例1

3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的制備。

按照以下線路進(jìn)行制備：

(1)2,6-二氯苯甲醛肟的制備。

將2,6-二氯苯甲醛(5.0g,28.6mmol)溶于無水乙醇(45ml)中，室溫下攪拌，依次加入nh2oh·hcl(2.3g,33.1mmol)，naoh(1.3g，32.5mmol)和水(20ml)，90℃油浴下回流過夜。反應(yīng)液冷卻至室溫后，旋干溶劑，加入水(100ml)，用乙酸乙酯(2×100ml)萃取，合并有機(jī)層，用飽和鹽水(2×100ml)洗滌，無水na2so4干燥，過濾，旋干，加入石油醚(100ml)，攪勻，過濾，烘干，得3.5g白色固體2,6-二氯苯甲醛肟，收率：64％。

(2)氯代2,6-二氯苯甲醛肟的制備。

將2,6-二氯苯甲醛肟(4.7g，24.7mmol)溶于dmf(40ml)中，加入ncs(3.3g，24.7mmol)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1h。將反應(yīng)液倒入水(100ml)中，用乙醚(2×150ml)萃取，合并有機(jī)層，有機(jī)層用飽和鹽水(3×100ml)洗滌，無水na2so4干燥，過濾，旋干，得5.5g黃色油狀物，即為氯代2,6-二氯苯甲醛肟，不純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(3)5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯的制備。

將氯代2,6-二氯苯甲醛肟(4.8g，21.1mmol)溶于et3n(40ml)，加入3-環(huán)丙基-3-氧代丙酸乙酯(6.3g，40.6mmol)，再加入thf(20ml)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。將反應(yīng)液倒入水(150ml)中，用乙酸乙酯(2×150ml)萃取，有機(jī)層用飽和鹽水(2×150ml)洗滌，無水na2so4干燥，過濾，旋干，柱層析純化(洗脫液：pe/ea＝100/1)得4.2g白色固體化合物，即為5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯，收率：60％。

(4)[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲醇的制備。

0℃，氮?dú)獗Ｗo(hù)下于250ml雙口瓶中，將四氫鋰鋁(750mg,19.8mmol)加入無水thf(40ml)中，攪勻后滴加溶有5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯(4.15g，12.7mmol)的無水thf溶液(40ml)，繼續(xù)0℃反應(yīng)2h。依次滴加水(0.8ml)、15％naoh溶液(0.8ml)和水(2.4ml)，升至室溫?cái)嚢?5分鐘后，硅藻土過濾，乙酸乙酯洗滌，旋干溶劑后，經(jīng)柱層析純化(洗脫液：pe/ea＝10/1)得2.8g白色固體，即為[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲醇，收率：78％。

(5)4-(氯甲基)-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的制備。

將[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲醇(180mg,0.63mmol)溶于dcm(5ml)，冰浴冷卻，加入氯化亞砜(138μl，1.90mmol)和dmf(3滴)，室溫反應(yīng)1小時(shí)。旋干，經(jīng)柱層析純化得173mg淡黃色油狀物，即為4-(氯甲基)-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑，收率：91％。

(6)4-亞甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的制備。

0℃下，向乙醚(90ml)中加入甲基三苯基溴化膦(14.7g,40.5mmol)和叔丁醇鉀(4.38g,39mmol)，加完后室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)液用冰浴冷卻，將4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.98g,30mmol)溶于乙醚(30ml)并滴加到上述反應(yīng)液中，室溫反應(yīng)過夜。過濾，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝50：1)得無色油狀液體5.2g，即為4-亞甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯，收率：88％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.75(s,2h),3.43(t,j＝5.6hz,4h),2.19(t,j＝5.6hz,4h),1.48(s,9h)。

(7)1,2-二氯-2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制備。

將4-亞甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g,5.07mmol)溶于乙醚(20ml)，加入銅鋅試劑(4.4g,34.5mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)、10℃下，滴加溶有三氯乙酰氯(1.84ml,16.5mmol)的dme(5ml)溶液，繼續(xù)室溫反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液緩慢倒入-10℃的飽和食鹽水(30ml)中，硅藻土過濾，乙酸乙酯(20ml×3)萃取，飽和食鹽水(30ml×2)洗滌，干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝15：1)得棕色油狀液體880mg，即為1,2-二氯-2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：56％。不純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(8)2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制備。

將1,2-二氯-2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(880mg,2.88mmol)溶于甲醇(10ml)，加入飽和氯化銨溶液(10ml)和鋅粉(1.12g)，室溫反應(yīng)過夜。過濾，旋干，加水(20ml)，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝8：1)得無色油狀物490mg，即為2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：72％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:3.43(t,j＝5.6hz,4h),2.84(s,4h),1.72(t,j＝5.6hz,4h),1.49(s,9h)。

(9)2-羥基-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制備。

將2-氧代-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(490mg,2.05mmol)溶于甲醇(10ml)，冰浴冷卻，分批加入硼氫化鈉(156mg,4.10mmol)，室溫反應(yīng)1小時(shí)。旋干，加水(20ml)，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)得白色固體450mg，即為2-羥基-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：91％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.35(m,1h),3.33(m,4h),2.30(m,2h),1.70(m,3h),1.53(m,4h),1.47(m,9h)。

(10)2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯的制備。

將2-羥基-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(241mg,1mmol)溶于四氫呋喃(5ml)，加入18-冠醚-6(317mg,1.2mmol)和叔丁醇鉀(135mg,1.2mmol)，室溫?cái)嚢?0分鐘，再加入4-(氯甲基)-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(302mg,1mmol)，繼續(xù)室溫反應(yīng)過夜。將溶劑旋干，加水(20ml)，用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得370mg淡黃色漿狀物，即為2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯，收率：73％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.45-7.43(m,2h),7.34(m,1h),4.17(s,2h),3.91(m,1h),3.29(t,j＝5.6hz,2h),3.25(t,j＝5.6hz,2h),2.15(m,1h),2.00(m,2h),1.49-1.38(m,15h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

(11)4-{[7-氮雜[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的制備。

將2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯(370mg,0.37mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入三氟乙酸(1ml)，室溫?cái)嚢?小時(shí)后，將反應(yīng)液旋干，加入飽和碳酸氫鈉(15ml)，用二氯甲烷(15ml×2)萃取，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，旋干得235mg黃色漿狀物，即為4-{[7-氮雜[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑，收率：80％。不純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(12)3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯的制備。

將4-{[7-氮雜[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(100mg,0.25mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入間苯二甲酸單甲酯(57mg,0.32mmol)、三乙胺(104μl，0.75mmol)和hatu(131mg,0.34mmol)，室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)液倒入水(15ml)中，用二氯甲烷萃取(15ml×2)萃取，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)得95mg白色固體，即為3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯，收率：68％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.10(m,1h),8.05(m,1h),7.59(m,1h),7.51(t,j＝7.6hz,1h),7.45-7.43(m,2h),7.39-7.35(m,1h),4.18(s,2h),3.95(m,4h),3.63(m,2h),3.22(m,2h),2.15(m,1h),2.05(m,2h),1.61-1.44(m,6h),1.29(m,2h),1.14(m,2h)。

(13)3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的制備。

將3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯(90mg,0.16mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(33mg,0.79mmol)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。旋干，加水(15ml)，用1nhcl調(diào)ph至2左右，過濾，烘干，得75mg白色固體，即為3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸，即為，收率：86％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.15(m,1h),8.10(m,1h),7.65(m,1h),7.54(t,j＝7.6hz,1h),7.45-7.43(m,2h),7.38-7.34(m,1h),4.19(s,2h),3.93(m,1h),3.64(m,2h),3.25(m,2h),2.15(m,1h),2.07(m,2h),1.55-1.45(m,6h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例2

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將4-氨基苯甲酸乙酯(4.9g，30.0mmol)，硫氰酸鉀(11.6g，120.0mmol)溶于乙酸(180ml)中，19℃下滴加溴素(1.5ml，30.0mmol)的乙酸(20ml)溶液，20min加完，升至室溫反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液倒入水(100ml)中，攪拌10分鐘，滴加氨水調(diào)至ph為8左右，過濾，濾餅依次用水洗、石油醚洗，真空干燥，得黃色固體6.7g，即為2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：100％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.28(d,j＝1.6hz,1h),7.88(s,2h),7.82(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.37(d,j＝8.4hz,1h),4.29(q,j＝7.2hz,2h),1.32(t,j＝7.2hz,3h)。

(2)2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

500ml單口瓶中，加入氯化銅(6.0g，44.6mmol)、亞硝酸叔丁酯(7.1ml，59.4mmol)和乙腈(200ml)，冷至0℃，分批加入2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(6.6g，29.7mmol)，30分鐘加完，升至室溫反應(yīng)過夜。硅藻土過濾，濾液滴加1nhcl(60ml)攪拌10分鐘，分層，水層用乙酸乙酯萃取(100ml)，合并有機(jī)層，水洗，飽和鹽水洗，na2so4干燥，過濾，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝25：1)得淡黃色固物6.2g，即為2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：86％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.54(d,j＝0.8hz,1h),8.20(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),8.01(d,j＝8.0hz,1h),4.45(q,j＝7.2hz,2h),1.45(t,j＝7.2hz,3h)。

(3)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將4-{[7-氮雜[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(130mg,0.32mmol)溶于dmf(3ml)，加入2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(100mg,0.42mmol)和三乙胺(89μl,0.65mmol)，100℃加熱反應(yīng)1小時(shí)。待反應(yīng)液冷至室溫，將其倒入水(20ml)中，用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，有機(jī)層用飽和食鹽水(15ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得180mg淡黃色固體，即為2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：93％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.30(d,j＝1.6hz,1h),8.01(dd,j＝8.4hz,1.6hz,1h),7.51(d,j＝8.4hz,1h),7.46-7.44(m,2h),7.39-7.35(m,1h),4.39(q,j＝7.2hz,2h),4.20(s,2h),3.97(m,1h),3.58(t,j＝5.6hz,2h),3.52(t,j＝5.6hz,2h),2.16(m,1h),2.08(m,2h),1.65-1.54(m,6h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

(4)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

將2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(180mg,0.29mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(62mg,1.47mmol)，室溫反應(yīng)過夜。旋干，加水(15ml)，用1nhcl調(diào)ph至2左右，過濾，烘干，得146mg白色固體，即為2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸，收率：85％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.36(s,1h),8.05(m,1h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.47-7.44(m,2h),7.39-7.35(m,1h),4.20(s,2h),3.97(m,1h),3.59(m,2h),3.52(m,2h),2.16(m,1h),2.08(m,2h),1.65-1.54(m,6h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例3

3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲氧基}2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸的制備。

(1)6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯的制備。

參照實(shí)施例1制備2-羥基-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的方法制備6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯，僅是用3-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-甲酸叔丁酯代替4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.20(m,1h),3.90(s,2h),3.89(s,2h),2.55(m,2h),2.09(m,2h),1.95(m,1h),1.44(s,9h)。

(2)3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲氧基}2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸的制備。

參照實(shí)施例1制備3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的方法制備3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸，僅是用6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.31(s,1h),8.21(d,j＝8.0hz,1h),7.92(d,j＝7.6hz,1h),7.56(t,j＝7.6hz,1h),7.45-7.33(m,3h),4.25-4.10(m,6h),3.83(m,1h),2.38(m,2h),2.13(m,1h),1.94(m,2h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例4

2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.38(d,j＝1.6hz,1h),8.08(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.61(d,j＝8.8hz,1h),7.47-7.45(m,2h),7.40-7.36(m,1h),4.20(s,2h),4.17(s,2h),4.10(s,2h),3.87(m,1h),2.42(m,2h),2.15(m,1h),2.02(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例5

3-{8-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸的制備。

(1)3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-酮的制備。

3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-酮的合成同wo2011025690所述。將芐胺(2.68g,25mmol)溶于叔丁醇(6ml)，10℃下加入多聚甲醛(1.5g,50mmol)、濃鹽酸(2.37ml,27.5mmol)和環(huán)戊酮(5.46g,65mmol)，80℃反應(yīng)3小時(shí)。冷卻，旋干，加丙酮(30ml)，過濾得3.58g白色固體。于100ml單口瓶中加入乙酸(20ml)、濃鹽酸(1.25ml,13.5mmol)和多聚甲醛，加熱至95℃。將上述所得固體溶于乙酸(20ml)并滴加至上述反應(yīng)液中，半小時(shí)加完，并繼續(xù)反應(yīng)1小時(shí)。冷卻，旋除溶劑，加水(30ml)和二氯甲烷(30ml)，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph至10，分層，水層用二氯甲烷(30ml×2)萃取，合并有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝25：1)得無色油狀液體2.21g，即為3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-酮，收率：41％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.38-7.26(m,5h),3.62(s,2h),3.00(m,2h),2.57(m,2h),2.18(m,2h),2.09(m,2h),1.88(m,2h)。

(2)3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-醇的制備。

將3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-酮(2.15g,10mmol)溶于甲醇(40ml)，冰浴冷卻，分批加入硼氫化鈉(570mg,15mmol)，升至室溫反應(yīng)2小時(shí)。旋干，加水(50ml)，用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，飽和食鹽水(50ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干得淡黃色固體2.0g，即為3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-醇，不純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(3)8-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的制備。

將3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]-8-醇(2.0g,9.20mmol)溶于甲醇(30ml)，通入氫氣，室溫反應(yīng)過夜。用硅藻土過濾，旋干，將所得物溶于二氯甲烷(30ml)，并加入三乙胺(2.55ml,18.4mmol)和boc酸酐(2.29ml,11.0mmol)，室溫反應(yīng)4小時(shí)。旋干，柱層析純化得白色固體1.5g，即為8-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯，收率：72％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.06(m,1h),3.71(m,1h),3.57(m,1h),3.39(m,1h),3.31(m,1h),2.01(m,2h),1.74(m,3h),1.63-1.57(m,2h),1.48(s,9h)。

(4)3-{8-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸的制備。

參照實(shí)施例1制備3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑4-基]甲氧基}-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的方法制備3-{8-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸，僅是用8-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.14(m,1h),8.06(s,1h),7.62(m,1h),7.53(m,1h),7.49-7.45(m,2h),7.43-7.39(m,1h),4.37(m,2h),4.20(m,1h),3.61(m,1h),3.26(m,1h),3.02(m,1h),2.88(m,1h),2.15(m,2h),1.91(m,1h),1.66(m,3h),1.40(m,1h),1.29(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例6

2-{8-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用8-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.42(d,j＝1.6hz,1h),8.11(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.60(d,j＝8.4hz,1h),7.29-7.27(m,2h),7.07(m,1h),4.42(s,2h),3.73(t,j＝5.2hz,1h),3.49(m,2h),3.21(m,2h),2.24(m,2h),2.13(m,2h),1.75-1.62(m,4h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例7

3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羰基}苯甲酸的制備。

(1)2-羥基-6-氮雜[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制備。

參照實(shí)施例1制備2-羥基-7-氮雜[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的方法制備，僅是用3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.35(m,1h),3.31(m,4h),2.36(m,2h),1.98-1.75(m,5h),1.48(s,9h)。

(2)3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羰基}苯甲酸的制備。

參照實(shí)施例1的方法制備，僅是用2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷--6-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.24(s,1h),8.18(m,1h),7.78(d,j＝7.6hz,1h),7.55(m,1h),7.48-7.42(m,1h),7.38-7.33(m,2h),4.22(s,1h),4.14(s,1h),3.93(m,1h),3.68-3.60(m,1h),3.52(m,1h),3.43(m,1h),3.30(d,j＝11.6hz,1h),2.28-1.98(m,3h),1.89-1.82(m,3h),1.74-1.61(m,1h),1.27(m,2h),1.13(m,2h)。

實(shí)施例8

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷--6-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.39(s,1h),8.08(d,j＝8.4hz,1h),7.59(d,j＝8.4hz,1h),7.47-7.44(m,2h),7.40-7.34(m,1h),4.22(s,1h),3.98(m,1h),3.54(m,4h),2.26-2.14(m,3h),2.01(t,j＝6.8hz,2h),1.85(m,2h),1.29(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例9

3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸的制備。

(1)3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯的制備。

將4-[(2-氮雜[3.3]庚烷-6-氧基)甲基]-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(230mg,0.61mmol)溶于甲苯(8ml)，加入間溴苯甲酸甲酯(156mg,0.73mmol)、醋酸鈀(6.8mg,0.03mmol)、binap(19mg,0.03mmol)和碳酸銫(298mg,0.91mmol)，氬氣保護(hù)，100℃反應(yīng)過夜。待反應(yīng)液冷至室溫，用硅藻土過濾，旋干，經(jīng)柱層析純化得130mg白色固體，即為3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯，收率：41％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.48-7.45(m,2h),7.42-7.37(m,2h),7.26(m,1h),7.07(m,1h),6.59(m,1h),4.20(s,2h),3.91(s,3h),3.87(m,1h),3.82(s,2h),3.76(s,2h),2.36(m,2h),2.16(m,1h),1.95(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

(2)3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸的制備。

將3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯(130mg,0.25mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(53mg,1.27mmol)，室溫反應(yīng)20小時(shí)。旋干，加水(10ml)，用1nhcl調(diào)ph至3，過濾，烘干得灰白色固體110mg，即為3-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸，收率：90％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:7.69-7.66(m,2h),7.62-7.58(m,2h),7.24(m,1h),6.89(m,1h),6.59(m,1h),4.12(s,2h),3.80(m,1h),3.74(s,2h),3.64(s,2h),2.30(m,3h),1.75(m,2h),1.15(m,2h),1.10(m,2h).

實(shí)施例10

3-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯甲酸的制備。

參照實(shí)施例9的方法制備，僅是用2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷--2-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:7.68-7.64(m,2h),7.60-7.55(m,1h),7.27-7.22(m,1h),7.16(m,1h),7.01(m,1h),6.68(m,1h),4.13(d,j＝1.6hz,2h),3.91(m,1h),3.22-3.15(m,4h),2.32(m,1h),2.07(m,2h),1.83(m,2h),1.59(m,2h),1.14(m,2h),1.10(m,2h).

實(shí)施例11

2-{10-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-8-氮雜雙環(huán)[4.3.1]癸烷-8-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)10-羥基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.1]癸烷--8-甲酸叔丁酯的制備。

參照實(shí)施例5制備8-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的方法制備，僅是用環(huán)庚酮代替環(huán)戊酮。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.16(m,1h),4.06(m,1h),4.00(m,1h),2.85(m,2h),2.17(m,2h),2.00(m,2h),1.72(m,2h),1.62-1.51(m,4h),1.48(s,9h)。

(2)2-{10-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-8-氮雜雙環(huán)[4.3.1]癸烷-8-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用10-羥基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.1]癸烷--8-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,dmso)δ:8.14(m,1h),8.06(s,1h),7.62(m,1h),7.53(m,1h),7.49-7.45(m,2h),7.43-7.39(m,1h),4.37(m,2h),4.20(m,1h),3.61(m,1h),3.26(m,1h),3.02(m,1h),2.88(m,1h),2.15(m,2h),1.91(m,1h),1.66(m,3h),1.40(m,1h),1.29(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例12

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制備。

將硫氰酸鉀(2.1g,22.0mmol)溶于乙酸(5ml)中，10℃下滴加4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g,5.5mmol)的乙酸溶液(5ml)，10分鐘加完，再滴加溴(283μl,5.5mmol)的乙酸溶液(5ml)，升至室溫反應(yīng)4h。加入水(25ml)稀釋，用氨水調(diào)ph至8～9，過濾，洗滌，真空干燥得1.38g橙色固體，即為2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：100％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:7.94(d,j＝1.2hz,1h),7.82(s,2h),7.34(d,j＝1.2hz,1h),3.88(s,3h),3.83(s,3h)。

(2)2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制備。

將無水氯化銅(1.11g,8.25mmol)和亞硝酸叔丁酯(1.3ml,11.0mmol)加入到乙腈(20ml)中，室溫下攪拌10分鐘，分批加入2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯(1.38g,5.5mmol)，15分鐘加完，繼續(xù)反應(yīng)16h。硅藻土過濾，濾液加入1nhcl(15ml)攪拌15分鐘，分層，水層用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，合并有機(jī)層，飽和鹽水(15ml×2)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝20：1)得600mg白色固體，即為2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：42％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.12(d,j＝1.6hz,1h),7.61(d,j＝1.6hz,1h),4.10(s,3h),3.98(s,3h)。

(3)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例8的方法制備，僅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。¹h-nmr(400mhz,dmso)δ:8.00(t,j＝1.6hz,1h),7.69-7.65(m,2h),7.61-7.55(m,1h),7.38(m,1h),4.14(d,j＝4.0hz,1h),3.96-3.89(m,4h),3.42(m,4h),2.32(m,1h),2.11(m,2h),1.94(m,1h),1.89(m,1h),1.68(m,1h),1.59(m,1h),1.16(m,2h),1.10(m,2h).

實(shí)施例13

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯的制備。

將3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(1.0g,5.0mmol)溶于乙酸乙酯(5ml)和甲醇(5ml)中，加入10％pd/c(150mg)，氫氣氛圍下室溫反應(yīng)16h。硅藻土過濾，旋干溶劑得830mg白色固體，即為3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯。收率：98％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.69(m,1h),7.66(m,1h),6.76(m,1h),4.17(s,2h),3.88(s,3h)。

(2)2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制備。

將3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯(830mg,4.9mmol)和硫氰酸鉀(1.9mg,19.6mmol)溶于乙酸中(10ml)，10℃下滴加溴(250μl,4.9mmol)的乙酸溶液(5ml)，30min加完，升至30℃反應(yīng)48h。加入水(30ml)稀釋，用氨水調(diào)ph至8～9，過濾，用水洗滌，真空干燥得530mg黃色固體，即為2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：48％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.16(m,1h),8.14(s,2h),7.56(m,1h),3.83(s,3h)。

(3)2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制備。

將無水氯化銅(474mg,3.53mmol)和亞硝酸叔丁酯(0.56ml,4.7mmol)加入到乙腈(10ml)中，室溫下攪拌10分鐘，分批加入2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯(530mg,2.35mmol)，15分鐘加完，繼續(xù)反應(yīng)16h。硅藻土過濾，濾液加入1nhcl(15ml)攪拌15分鐘，分層，水層用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，合并有機(jī)層，飽和鹽水(15ml×2)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得350mg白色固體，即為2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：60％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.33(d,j＝1.6hz,1h),7.88(dd,j＝1.6hz,9.2hz,1h),3.99(s,3h)。

(4)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例8的方法制備，僅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.18(s,1h),7.89(m,1h),7.48-7.44(m,2h),7.41-7.34(m,1h),4.22(s,2h),3.98(m,1h),3.56(m,4h),2.26-2.13(m,3h),2.02(t,j＝6.8hz,2h),1.84(m,2h),1.29(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例14

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

(1)2-巰基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制備。

將4-氨基-3-羥基-苯甲酸甲酯(0.5g,3mmol)溶于乙醇(15ml)，加入乙基黃原酸鉀(577mg,3.6mmol)，加熱回流反應(yīng)過夜。待反應(yīng)液冷至室溫，旋干，所得物加水(25ml)溶解，用1nhcl調(diào)ph至5，過濾，烘干，得棕色固體370mg，即為2-巰基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯。收率：59％。

(2)2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制備。

將2-巰基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(370mg,1.77mmol)溶于氯化亞砜(8ml)，加入3滴dmf，80℃反應(yīng)10分鐘。冷至室溫，旋干，加入乙酸乙酯(30ml)和水(30ml)，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得270mg淡黃色固體，即為2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯，收率：72％。

(3)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制備。

將4-[(6-氮雜螺[3.4]辛烷-2-氧基)甲基]-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(80mg,0.174mmol)和2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(43mg,0.191mmol)溶于5ml乙腈中，加入三乙胺(60μl,0.450mmol)，80℃下回流反應(yīng)1.5h。反應(yīng)液冷卻至室溫，旋干，柱層析純化(洗脫液：石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得95mg無色油狀物，即為2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯。收率：89％。

(4)2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

將2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(90mg,0.156mmol)溶于2ml四氫呋喃和2ml甲醇中，加入氫氧化鋰(33mg,0.788mmol)和水(1ml)，室溫下反應(yīng)16h。旋干溶劑，加入10ml水溶解，用1m鹽酸調(diào)ph至3-4，過濾，洗滌，真空干燥得57mg白色固體，即為2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸。收率：65％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.04-8.00(m,2h),7.47-7.44(m,2h),7.40-7.34(m,2h),4.22(s,2h),3.98(m,1h),3.67(m,2h),3.58(s,1h),3.54(s,1h),2.25-2.13(m,3h),1.97(t,j＝6.8hz,2h),1.83(m,2h),1.30(m,2h),1.15(m,2h).

實(shí)施例15

(r)-2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)(2s,4r)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯的制備。

將boc-l-羥脯氨酸乙酯(5g,20.4mmol)和咪唑(2.92g,42.8mmol)溶于dmf(50ml)，加入tbscl(3.38g,22..4mmol)，室溫反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液倒入水(100ml)中，用乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合并有機(jī)層，再用飽和食鹽水(100ml×3)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化得7.26g無色油狀物，即為(2s,4r)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯，收率：99％。

(2)(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-(羥甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯(7.8g,21.7mmol)溶于四氫呋喃(60ml)，冷卻至0℃，加入2m硼氫化鋰四氫呋喃溶液(16.3ml)，室溫反應(yīng)5小時(shí)后，加入乙酸乙酯(20ml)，冷卻至0℃，滴加1nhcl淬滅反應(yīng)，加水(100ml)，用乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合并有機(jī)層，再用飽和食鹽水(100ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干得6.81g淡黃色油狀物，收率：95％。

(3)(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺?；?氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-(羥甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6.81g,20.6mmol)溶于二氯甲烷(60ml)，加入三乙胺(5.7ml,41.2mmol)，冷卻至0℃，滴加甲磺酰氯(3.54g,30.9mmol)，0℃反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液倒入水(100ml)中，用二氯甲烷(60ml×2)萃取，合并有機(jī)層，再用飽和食鹽水(100ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干得8.4g棕色油狀物，即為(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：99％。

(4)(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺?；?氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3g,7.32mmol)溶于四氫呋喃(30ml)，冷卻至5℃，滴加1m三乙基硼氫化鈉四氫呋喃溶液(22ml)，并升至室溫繼續(xù)反應(yīng)2小時(shí)。冷卻至0℃，滴加水淬滅反應(yīng)，加水(50ml)，用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗滌(50ml×2)，無水硫酸鈉干燥，旋干得2.2g無色油狀物，即為(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：98％。

(5)(2s,4r)-4-羥基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.2g,6.98mmol)溶于四氫呋喃(30ml)，加入四丁基氟化銨(3.65g,14.0mmol)，室溫反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液倒入水(60ml)中，用乙酸乙酯(60ml×2)萃取，飽和食鹽水(60ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)得1.47g黃色油狀物，即為(2s,4r)-4-羥基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：99％。

(6)(2r)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-4-羥基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.47g,7.3mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，加入硅膠(2.36g)和pcc(2.36g,11.0mmol)，室溫反應(yīng)過夜。過濾，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得1.2g淡黃色油狀物，即為(2r)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率82％。

(7)(2r)--2-甲基-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

0℃下，將ph3p⁺ch3br^-(2.48g,6.95mmol)和叔丁醇鉀(0.85g,7.53mmol)加入20ml乙醚中，加完升至室溫?cái)嚢?h。0℃下，滴加(2r)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.16g,5.79mmol)的乙醚溶液(10ml)，15min加完，升至室溫反應(yīng)16h。加硅藻土過濾，洗滌，旋干溶劑，柱層析(洗脫液：石油醚/乙酸乙酯＝80/1)得680mg無色透明液體，即為(2r)--2-甲基-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：60％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:5.0(s,2h),4.17-3.98(m,2h),3.88(m,1h),2.36-2.10(m,2h),1.49(s,9h),1.14(dd,j＝6.0hz,3h)。

(8)(7r)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制備。

將(2r)--2-甲基-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(680mg,3.45mmol)溶于乙醚(20ml)，加入鋅銅試劑(2.67g,20.7mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)。將三氯乙酰氯(1.15ml,10.35mmol)溶于乙二醇二甲醚(5ml)，并滴加入反應(yīng)液中，繼續(xù)室溫反應(yīng)過夜。將反應(yīng)倒入0℃的飽和食鹽水(30ml)中，硅藻土過濾，用乙酸乙酯(30ml×2)萃取，飽和食鹽水(50ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)得棕色油狀物1.06g，即為(7r)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，不進(jìn)行進(jìn)一步純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(9)(7r)-7-甲基-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制備。

將(7r)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(1.06g,3.44mmol)溶于甲醇(10ml)，加入鋅粉(1.34g,20.6mmol)和飽和氯化銨(10ml)，室溫反應(yīng)過夜。過濾除去固體，旋干濾液，加水(20ml)，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，飽和食鹽水(20ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得325mg淡黃色油狀物，即為(7r)-7-甲基-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，收率：40％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.97(m,1h),3.70-3.52(m,2h),3.18-2.97(m,4h),2.31(m,1h),1.85(m,1h),1.49(s,9h),1.31(m,3h).

(10)(7r)-7-甲基-2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制備。

將(7r)-7-甲基-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(325mg,1.36mmol)溶于甲醇(8ml)，冰浴冷卻，分批加入硼氫化鈉(103mg,2.72mmol)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。旋干，加水(20ml)，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，飽和食鹽水(20ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)得淡棕色油狀物300mg，即為(7r)-7-甲基-2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，收率：91％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:4.31(m,1h),3.83(m,1h),3.40-3.33(m,2h),2.43(m,1h),2.33(m,2h),2.09-1.85(m,4h),1.48(s,9h),1.22(m,3h).

(11)(r)-2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用(r)-2-羥基-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.40(d,j＝1.2hz,1h),8.08(dd,j＝1.2hz,8.4hz,1h),7.60(d,j＝8.4hz,1h),7.48-7.44(m,2h),7.40-7.34(m,1h),4.20(s,2h),4.08(m,1h),3.60(m,2h),2.30-2.13(m,4h),1.97-1.73(m,3h),1.41(dd,j＝6.4hz,23.2hz,3h),1.29(m,2h),1.15(m,2h).

實(shí)施例16

(s)-2-{2-{[5-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-羥基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺?；?氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.8g,11.7mmol)溶于四氫呋喃(60ml)，加入四丁基氟化銨(12.2g,46.8mmol)室溫反應(yīng)6小時(shí)后，加熱反應(yīng)過夜。待反應(yīng)液冷至室溫，旋干，加水(100ml)，用乙酸乙酯(80ml×2)萃取，飽和食鹽水(80ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝2.5:1)得1.65g黃色油狀液體，即為(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-羥基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：64％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.83-4.63(m,1h),4.50(m,2h),4.11(m,1h),3.48(m,2h),2.21-2.08(m,2h),1.87(m,1h),1.49(m,9h)。

(2)(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

將(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-羥基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.65g,7.56mmol)溶于dcm(50ml)中，加入2.5g硅膠，0℃下，分批加入pcc(2.44g,11.34mmol)，加完，升至室溫反應(yīng)16小時(shí)。過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝6：1)得1.35g淡黃色油狀物，即為(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：82％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.76(m,1h),4.52-4.38(m,2h),3.90(m,1h),3.72(d,j＝19.2hz,1h),2.80(m,1h),2.56(d,j＝19.2hz,1h),1.50(s,9h)。

(3)(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制備。

0℃下，將ph3p⁺ch3br^-(2.66g,7.46mmol)和叔丁醇鉀(0.91g,8.07mmol)加入20ml乙醚中，加完升至室溫?cái)嚢?h。0℃下，滴加18130(1.35g,6.21mmol)的10ml乙醚溶液，15min加完，升至室溫反應(yīng)16h。加硅藻土過濾，洗滌，旋干溶劑，柱層析(洗脫液：石油醚/乙酸乙酯＝100/1)得960mg無色透明液體，即為(2s,4r)-2-(氟甲基)-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：72％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:5.04(m,2h),4.49-4.08(m,4h),3.88(m,1h),2.78(m,1h),2.59(m,1h),1.49(s,9h)。

(4)(s)-7-(氟甲基)-2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制備。

參照實(shí)施例15中制備(r)-2-羥基-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的方法制備，僅是用(s)-2-(氟甲基)-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替(r)-2-甲基-4-亞甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:4.54(m,1h),4.46-4.29(m,2h),3.96(m,1h),3.48-3.31(m,2h),2.45-2.30(m,2h),2.04(m,4h),1.83(m,1h),1.48(s,9h)。

(5)(s)-2-{2-{[5-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用(s)-7-(氟甲基)-2-羥基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.42(s,1h),8.09(d,j＝8.8hz,1h),7.60(m,1h),7.48-7.44(m,2h),7.40-7.34(m,1h),4.97-4.52(m,2h),4.32(m,1h),4.21(s,2h),3.95(m,1h),3.56(m,1h),3.48(m,1h),2.29(m,1h),2.21-2.14(m,4h),1.95-1.81(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h).

實(shí)施例17

(r)-2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例15的方法制備，僅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.19(s,1h),7.79(d,j＝11.2hz,1h),7.48-7.44(m,2h),7.41-7.34(m,1h),4.20(s,2h),4.09(m,1h),3.96(m,1h),3.60(m,2h),2.34-2.12(m,4h),1.98-1.73(m,3h),1.41(dd,j＝6.4hz,21.2hz,3h),1.29(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例18

(r)-2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例15的方法制備，僅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.08(s,1h),7.57(s,1h),7.49-7.44(m,2h),7.40-7.33(m,1h),4.19(s,2h),4.06-3.93(m,5h),3.74-3.59(m,2h),2.32-2.09(m,4h),1.97-1.71(m,3h),1.39(dd,j＝6.4hz,21.6hz,3h),1.28(m,2h),1.15(m,2h).

實(shí)施例19

(s)-2-{2-{[5-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例15的方法制備，僅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.20(s,1h),7.80(d,j＝10.8hz,1h),7.48-7.44(m,2h),7.41-7.35(m,1h),4.92(m,1h),4.67-4.49(m,1h),4.35(m,1h),4.20(s,2h),3.95(m,1h),3.59-3.44(m,2h),2.29(m,1h),2.21-2.14(m,4h),1.95-1.80(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例20

(s)-2-{2-{[5-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例16的方法制備，僅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.09(m,1h),7.58(m,1h),7.48-7.44(m,2h),7.40-7.34(m,1h),4.97-4.49(m,2h),4.43-4.26(m,1h),4.20(s,2h),4.05(s,3h),3.94(m,1h),3.63-3.47(m,2h),2.27(m,1h),2.19-2.13(m,4h),1.94-1.78(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h).

實(shí)施例21

(s)-2-{2-{[5-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例15的方法制備，僅是用2-氯-苯并[d]噁唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.05-8.02(m,2h),7.47-7.43(m,2h),7.40-7.33(m,2h),4.91-4.48(m,2h),4.21(m,3h),3.95(m,1h),3.71(m,1h),3.62(m,1h),2.27(m,1h),2.18-2.13(m,4h),1.95-1.78(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例22

2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯的制備。

將5-甲氧基-2-甲基苯甲酸(3.95g，26.0mmol)溶于dmf(30ml)中，加入cs2co3(21.21g，65.0mmol)，0℃下滴加ch3i(4.1ml，65.0mmol)，10min加完，升至室溫反應(yīng)過夜。用硅藻土過濾，濾液倒入水(100ml)中，乙酸乙酯(60ml×2)萃取，合并有機(jī)層，用飽和鹽水洗(60ml×2)，na2so4干燥，過濾，旋干溶劑得4.80g黃色油狀物，即為5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯，產(chǎn)物直接下一步反應(yīng)。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.46(d,j＝2.8hz,1h),7.16(d,j＝8.4hz,1h),6.97(dd,j＝8.4hz,2.8hz,1h),3.91(s,3h),3.83(s,3h),2.53(s,3h)。

(2)2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯的制備。

將5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯(4.8g，26.0mmol)溶于ccl4(100ml)中，加入nbs(5.1g，28.6mmol)，(phco2)2(315mg,1.30mmol)，80℃下回流反應(yīng)1h。冷卻至室溫，將反應(yīng)液倒入冰水(150ml)中，用二氯甲烷萃取(100ml×3)，合并有機(jī)層，na2so4干燥，過濾，旋干溶劑得7.5g黃色油狀物，即為2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯，產(chǎn)物直接下一步反應(yīng)。

(3)2-芐基-6-甲氧基異吲哚啉-1-酮的制備。

將2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(7.5g，26.0mmol)溶于甲醇(150ml)中，加入芐胺(3.0ml，27.0mmol)，三乙胺(5.6ml，40.0mmol)，70℃下回流反應(yīng)過夜。冷卻至室溫，旋干溶劑，加入水(100ml)，用二氯甲烷(100ml)萃取，有機(jī)層na2so4干燥，過濾，旋干溶劑，加入石油醚(100ml)，過濾，得3.1g淡黃色固體，即為2-芐基-6-甲氧基異吲哚啉-1-酮，三步總收率：49％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.41(d,j＝2.4hz,1h),7.33(m,6h),7.10(dd,j＝8.4hz,2.4hz,1h),4.82(s,2h),4.22(s,2h),3.90(s,3h)。

(4)2-芐基-5-甲氧基異吲哚啉的制備。

氬氣保護(hù)，0℃下，將lialh4(177mg，4.66mmol)加入無水thf(5ml)中，滴加2-芐基-6-甲氧基異吲哚啉-1-酮(585mg，2.33mmol)的無水thf(5ml)溶液，15min加完，升至65℃回流反應(yīng)4h。冷卻至室溫，滴加水(0.8ml)淬滅反應(yīng)，再滴加10％naoh溶液(0.2ml)，攪勻后，加硅藻土過濾，旋干溶劑，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)純化得430mg棕色油狀物，即為2-芐基-5-甲氧基異吲哚啉，收率：78％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.45(d,j＝6.8hz,2h),7.39(t,j＝6.8hz,2h),7.31(m,1h),7.11(d,j＝8.8hz,1h),3.94(s,4h),3.91(s,2h),3.81(s,3h)。

(5)5-甲氧基異吲哚啉的制備。

將2-芐基-5-甲氧基異吲哚啉(430mg，1.81mmol)溶于甲醇(10ml)中，加入pd/c(80mg)，通入氫氣，室溫反應(yīng)過夜。經(jīng)硅藻土過濾，旋干溶劑得黃色油狀物211mg，即為5-甲氧基異吲哚啉，收率：78％。

(6)2-(5-甲氧基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將5-甲氧基異吲哚啉(211mg,1.41mmol)溶于dmf(10ml)中，加入2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(342mg,1.41mmol)和三乙胺(392μl,2.82mmol)，n2保護(hù)，100℃下反應(yīng)1h。冷卻至室溫，過濾，濾餅用石油醚(10ml)打漿，過濾得280mg白色固體，即為2-(5-甲氧基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：56％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.38(d,j＝1.2hz,1h),8.05(dd,j＝8.6hz,1.8hz,1h),7.64(d,j＝8.8hz,1h),7.26(s,1h),6.92(m,2h),4.94(s,2h),4.90(s,2h),4.41(q,j＝7.2hz,2h),3.86(s,3h),1.43(t,j＝7.2hz,3h)。

(7)2-(5-羥基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯

將2-(5-甲氧基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(280mg,0.79mmol)溶于dcm(10ml)，冰浴冷卻，再滴加三溴化硼(396mg,1.58mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，繼續(xù)0℃反應(yīng)過夜，滴加甲醇(2ml)淬滅反應(yīng)，旋干，經(jīng)柱層析純化(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得120mg白色固體，即為2-(5-羥基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：45％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:9.53(s,1h),8.45(d,j＝1.6hz,1h),7.89(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.55(d,j＝8.4hz,1h),7.21(d,j＝8.0hz,1h),6.81(d,j＝1.6hz,1h),6.75(dd,j＝1.6hz,8.0hz,1h),4.79(m,4h),4.30(q,j＝7.2hz,2h),1.33(t,j＝7.2hz,3h)。

(8)2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將鈉氫(28mg,0.72mmol)懸浮于無水四氫呋喃(5ml)，加入2-(5-羥基異吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(80mg,0.24mmol)，室溫?cái)嚢?0min，再加入4-氯甲基-5-環(huán)丙基-3-2,6-二氯苯基)異噁唑(145mg,0.48mmol)、四丁基碘化銨(18mg,0.048mmol)和dmf(2ml)，80℃加熱反應(yīng)2小時(shí)。待反應(yīng)液冷至室溫，將其倒入水(20ml)中，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，有機(jī)層再用飽和食鹽水(30ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得70mg灰白色固體，即為2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：49％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.38(d,j＝1.6hz,1h),8.05(dd,j＝1.6hz,8.8hz,1h),7.64(d,j＝8.8hz,1h),7.44-7.42(m,2h),7.37-7.33(m,1h),7.20(d,j＝8.0hz,1h),6.82-6.79(m,2h),4.89-4.86(m,6h),4.41(q,j＝7.2hz,2h),2.63(m,1h),1.43(t,j＝7.2hz,3h),1.31(m,2h),1.17(m,2h)。

(9)2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

將2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(65mg,0.11mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(23mg,0.55mmol)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。旋干，加水(10ml)，用1nhcl調(diào)ph至3左右，過濾，真空烘干得灰白色固體28mg，即為2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}異吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸，收率：45％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.42(d,j＝1.6hz,1h),7.88(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.64-7.62(m,2h),7.56-7.52(m,2h),7.26(d,j＝8.4hz,1h),6.91(d,j＝2.0hz,1h),6.77(dd,j＝2.0hz,8.4hz,1h),4.80(s,2h),4.79(m,4h),2.44(m,1h),1.19-1.13(m,4h)。

實(shí)施例23

2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

按照以下線路進(jìn)行制備：

(1)2-(6-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將1,2,3,4-四氫異喹啉-6-醇(100mg,0.670mmol)，2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(178mg,0.737mmol)溶于5mldmf中，加入三乙胺(186μl,1.34mmol)，100℃下反應(yīng)1h。反應(yīng)液冷卻至室溫，加入15ml水和10ml石油醚，攪拌均勻后過濾，依次用水、石油醚洗滌，真空干燥得200mg淡黃色固體，即為2-(6-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。收率：84％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,dmso)δ:9.35(s,1h),8.41(d,j＝1.6hz,1h),7.88(dd,j＝8.4hz,1.6hz,1h),7.51(d,j＝8.4hz,1h),7.10(d,j＝8.0hz,1h),6.66(m,1h),6.63(m,1h),4.69(s,2h),4.30(q,j＝7.2hz,2h),3.81(t,j＝5.6hz,2h),2.90(t,j＝5.6hz,2h),1.32(t,j＝7.2hz,2h),。

(2)2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制備。

將2-(6-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(90mg,0.254mmol)和4-(氯甲基)-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(90mg,0.305mmol)溶于5ml乙腈中，加入碳酸鉀(75mg,0.508mmol)和催化量碘化鉀，85℃下回流反應(yīng)16h。反應(yīng)液冷卻至室溫，旋干溶劑，用15mldcm溶解，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得130mg白色固體，即為2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。收率：83％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.35(d,j＝1.6hz,1h),8.03(dd,j＝8.4hz,1.6hz,1h),7.58(d,j＝8.4hz,1h),7.42(m,2h),7.33(m,1h),7.09(d,j＝8.4hz,1h),6.66(dd,j＝8.4hz,2.4hz,1h),6.63(d,j＝2.4hz,1h),4.82(s,2h),4.77(s,2h),4.40(q,j＝7.2hz,2h),3.89(t,j＝5.6hz,2h),2.97(t,j＝5.6hz,2h),2.23-2.16(m,1h),1.42(t,j＝7.2hz,3h),1.31-1.28(m,2h),1.18-1.12(m,2h)。

(3)2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

將2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(125mg,0.202mmol)溶于2ml四氫呋喃和2ml甲醇中，加入氫氧化鋰一水合物(42mg,1.010mmol)和水(1ml)，室溫下反應(yīng)24h。旋干溶劑，加入水(10ml)，用1n鹽酸調(diào)ph至3-4，過濾，洗滌，真空干燥得105mg白色固體，即為2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸。收率：88％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.38(d,j＝1.6hz,1h),7.86(dd,j＝8.4hz,1.6hz,1h),7.62-7.60(m,2h),7.55-7.51(m,1h),7.49(d,j＝8.4hz,1h),7.15(d,j＝8.4hz,1h),6.69-6.65(m,2h),4.85(s,2h),4.70(s,2h),3.80(t,j＝5.6hz,2h),2.90(t,j＝5.6hz,2h),2.43(m,1h),1.18-1.11(m,4h)。

實(shí)施例24

2-{7-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)7-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽的制備。

0℃下，將1,2,3,4-四氫異喹啉(2.5ml,2.0mmol)滴加到硫酸(10ml，18.0mmol)中，10min加完，然后分批加入硝酸鉀(2.16g,2.14mmol)，升至室溫反應(yīng)16h。將反應(yīng)液倒入冰水(50ml)中，用乙酸乙酯(30ml×2)洗滌，水層用氨水調(diào)ph至9-10，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，所得物再用乙酸乙酯(20ml)溶解，用hcl的乙酸乙酯溶液調(diào)ph至4-5，過濾，洗滌，干燥得1.8g黃色固體，即為7-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽，收率：42％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:9.91(s,2h),8.20(d,j＝1.6hz,1h),8.10(dd,j＝8.4hz,1.6hz,1h),7.52(d,j＝8.4hz,1h),4.37(s,2h),3.38(t,j＝6.0hz,2h),3.15(t,j＝6.0hz,2h)。

(2)7-氨基-1,2,3,4-四氫異喹啉的制備。

將7-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(1.8g,8.4mmol)溶于水(30ml)中，加入碳酸鉀(3.5g,25.4mmol)，室溫下攪拌30min，然后用乙酸乙酯萃取(20ml×3)，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干得棕色固體，再將其溶于甲醇(20ml)中，加入10％pd/c(220mg)，氫氣氛圍下室溫反應(yīng)16h。加硅藻土過濾，洗滌，旋干溶劑得1.2g黃色固體，即為7-氨基-1,2,3,4-四氫異喹啉。收率：96％。產(chǎn)物不純化直接下步反應(yīng)。

(3)1,2,3,4-四氫異喹啉-7-醇的制備。

將7-氨基-1,2,3,4-四氫異喹啉(1.2g,8.1mmol)溶于水(15ml)中，0℃下加入硫酸(1.8ml,32.4mmol)，然后滴加亞硝酸鈉(670mg,9.7mmol)的水溶液(10ml)，15min加完，120℃下回流反應(yīng)1.5h。反應(yīng)液冷卻至室溫，分批加入碳酸氫鈉固體至ph＝8，過濾，濾液用dcm萃取(20ml×3)，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干得185mg紅棕色油狀物，即為1,2,3,4-四氫異喹啉-7-醇。收率：15％。產(chǎn)物的m/z(m+h⁺)：150.1。

(4)2-{7-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例23的方法制備，僅是用1,2,3,4-四氫異喹啉-7-醇代替1,2,3,4-四氫異喹啉-6-醇。¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.42(m,1h),8.10(d,j＝8.8hz,1h),7.61(d,j＝8.8hz,1h),7.44-7.42(m,2h),7.36-7.32(m,1h),7.07(d,j＝8.4hz,1h),6.71(m,1h),6.66(m,1h),4.82(s,2h),4.79(s,2h,3.88(m,2h),2.97(m,2h),2.20(m,1h),1.31(m,2h),1.17(m,2h).

實(shí)施例25

2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}六氫-1h-異吲哚-2(3h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)2,3,3a,4,7,7a-六氫-1h-異吲哚的制備。

0℃、氬氣保護(hù)下，分批將四氫鋁鋰(4.0g,105mmol)加入到無水thf(100ml)中，加完后滴加溶有3a,4,7,7a-四氫-1h-異吲哚-1,3(2h)-二酮(5.0g,33mmol)的無水thf溶液，30min加完，升至40℃下反應(yīng)16h。冰浴下滴加水(12ml)淬滅反應(yīng)，加入40g無水硫酸鈉攪拌10min，加硅藻土過濾，用dcm洗滌，濾液旋干得3.2g棕色油狀物，即為2,3,3a,4,7,7a-六氫-1h-異吲哚，產(chǎn)物不需純化直接下一步反應(yīng)。收率：80％。

(2)3a,4,7,7a-四氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯的制備。

將2,3,3a,4,7,7a-六氫-1h-異吲哚(3.2g,26mmol)溶于thf(80ml)中，加入三乙胺(5.5ml,39mmol)，0℃下滴加boc酸酐(7.3ml,31mmol)，15min加完，自然升至室溫反應(yīng)16h。將反應(yīng)液倒入水(150ml)中，用乙酸乙酯萃取(150ml×2)，有機(jī)層飽和鹽水(150ml)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得4.65g棕色油狀物，即為3a,4,7,7a-四氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯。收率：80％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:5.65(s,2h),3.48(m,2h),3.44-3.37(m,2h),3.17(m,1h),3.08(m,1h),2.34-2.25(m,2h),1.91(m,2h),1.46(s,9h)。

(3)5-羥基六氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯的制備。

將3a,4,7,7a-四氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯(500mg,2.22mol)溶于無水thf(5ml)中，0℃下，滴加1m硼烷thf溶液(2.22ml)，15min加完，升至室溫反應(yīng)16h。0℃下，依次滴加甲醇(1.25ml)、3m氫氧化鈉水溶液(0.83ml)、30％雙氧水(0.83ml)，加完后升至60℃反應(yīng)1.5h。反應(yīng)液冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(15ml)稀釋，用飽和鹽水(15ml)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得390mg白色固體，即為5-羥基六氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯。收率：72％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:3.90(m,1h),3.38(m,2h),3.19(m,2h),2.14(m,1h),1.86(m,4h),1.56(m,2h),1.48(s,9h),1.38(m,2h)。

(4)2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}六氫-1h-異吲哚-2(3h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用5-羥基六氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.34(d,j＝1.6hz,1h),7.84(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.67-7.64(m,2h),7.59-7.55(m,1h),7.43(d,j＝8.4hz,1h),4.26(m,2h),3.58-3.36(m,5h),2.33(m,1h),2.22(m,2h),1.56(m,2h),1.47(m,2h),1.23(m,2h),1.16(m,2h),1.10(m,2h)。

實(shí)施例26

2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}六氫環(huán)戊并[c]吡咯-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸的制備。

將高錳酸鉀(1.49g,9.39mmol)溶于水(15ml)，冷卻至5℃，緩慢滴加3a,4,7,7a-四氫-1h-異吲哚-2(3h)-甲酸叔丁酯(700mg,3.13mmol)溶于丙酮(5ml)的溶液，加完繼續(xù)5℃反應(yīng)3小時(shí)。加入亞硫酸氫鈉飽和溶液破壞過量的高錳酸鉀，用1nhcl調(diào)ph至2，用二氯甲烷(30ml×3)萃取，飽和食鹽水(30ml×3)洗滌，旋干得白色泡沫狀固體900mg，即為2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸，不純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

(2)5-氧代六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯的制備。

將2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸(900mg,3.13mmol)溶于乙酸酐(15ml)，加入乙酸鈉(231mg,2.82mmol)，120℃反應(yīng)2小時(shí)。待反應(yīng)液冷至室溫，過濾，旋干，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得390mg淡黃色油狀物，即為5-氧代六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯，兩步收率：55％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:3.67(m,2h),3.23(m,2h),2.94(m,2h),2.50(m,2h),2.17(m,2h),1.48(s,9h)。

(3)5-羥基六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯的制備。

將5-氧代六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯(390mg,1.73mmol)溶于甲醇(10ml)，冷卻至0℃，分批加入硼氫化鈉(132mg,3.46mmol)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。旋干，加水(20ml)，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，飽和食鹽水(20ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)得336mg淡黃色漿狀物，即為5-羥基六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯，收率：85％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.32(m,1h),3.51(m,2h),3.36(m,2h),2.62(m,2h),2.19(m,2h),1.76(d,j＝4.8hz,1h),1.56-1.47(m,11h)。

(4)2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}六氫環(huán)戊并[c]吡咯-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用5-羥基六氫環(huán)戊[c]吡咯-2(1h)-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.40(m,1h),8.09(d,j＝8.4hz,1h),7.61(d,j＝8.8hz,1h),7.38-7.36(m,2h),7.26(m,1h),4.23(s,2h),3.96(m,1h),3.78(m,2h),3.47(m,2h),2.79(m,2h),2.08(m,3h),1.48(m,2h),1.22(m,2h),1.07(m,2h)。

實(shí)施例27

2-{5-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}六氫環(huán)戊并[c]吡咯-2(1h)-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例26的方法制備，僅是用2-氯-苯并[d]噁唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.05-8.00(m,2h),7.41-7.36(m,3h),7.28-7.24(m,1h),4.24(s,2h),3.96(m,1h),3.85(m,2h),3.53(m,2h),2.76(m,2h),2.07(m,3h),1.50(m,2h),1.23(m,2h),1.08(m,2h)。

實(shí)施例28

2-{9-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

(1)3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-酮的制備。

將芐胺(2.14ml,19.6mmol)溶于叔丁醇(5ml)中，0℃下，依次加入多聚甲醛(1.18g,39.2mmol)、鹽酸(1.8ml,21.6mmol)、環(huán)己酮(5.26ml,50.9mmol)，加完后加熱至80℃下回流反應(yīng)3h。旋干溶劑，加入水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)，分層，水層用4m氫氧化鈉水溶液調(diào)ph至9-10，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)，有機(jī)層飽和鹽水(30ml)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干得黃色固體，用乙酸(15ml)溶解，95℃下，滴加到乙酸(12ml)、鹽酸(0.76ml)、多聚甲醛(550mg)得混合液中，30min加完，繼續(xù)反應(yīng)1h。旋干溶劑，加入水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)，分層，水層用4m氫氧化鈉水溶液調(diào)ph至9-10，用乙酸乙酯萃取(20ml×2)，有機(jī)層飽和鹽水(20ml)洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝100：1)得1.28g黃色油狀物，即為3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-酮。收率：28％。產(chǎn)物的m/z[m+h]⁺：230.2。

(2)3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇的制備。

將3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-酮(1.28g,5.5mmol)溶于甲醇(15ml)中，冰浴下分批加入硼氫化鈉(0.42g,11.0mmol)，加完升至室溫反應(yīng)1h。旋干溶劑，加入水(15ml)，用乙酸乙酯萃取(15ml×2)，有機(jī)層無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得900mg白色固體，即為3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇。

(3)3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇的制備。

將3-芐基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇(900mg,3.85mmol)溶于甲醇(15ml)中，加入pd/c(180mg)，氫氣氛圍下室溫反應(yīng)16h。加硅藻土過濾，洗滌，旋干得640mg白色固體，即為3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇，產(chǎn)物不需純化直接下一步反應(yīng)。

(4)9-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯的制備。

將3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-9-醇(640mg,4.5mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，加入boc酸酐(1.24ml,5.4mmol)和三乙胺(0.94ml,6.75mmol)，室溫下反應(yīng)1h。加入水(20ml)洗，分層，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得480mg白色固體，即為9-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯。收率：44％。產(chǎn)物的m/z[m+h]⁺：242.2。

(5)2-{9-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用9-羥基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,dmso)δ:8.33(d,j＝1.2hz,1h),7.84(dd,j＝1.2hz,8.0hz,1h),7.65-7.63(m,2h),7.58-7.54(m,1h),7.43(m,j＝8.4hz,1h),4.33(s,2h),4.02(m,1h),3.56(m,4h),2.36(m,1h),1.94(m,2h),1.47(m,3h),1.35(m,2h),1.23(m,1h),1.17-1.15(m,4h).

實(shí)施例29

5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并呋喃-2-甲酸的制備。

參照實(shí)施例10的方法制備，僅是用5-溴苯并呋喃-2-甲酸乙酯代替間溴苯甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:7.54(s,1h),7.47-7.43(m,3h),7.38-7.33(m,1h),6.77(m,1h),6.64(m,1h),4.22(s,2h),3.97(m,1h),3.30(m,2h),3.22(m,2h),2.17(m,3h),1.95(m,2h),1.82(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例30

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并噻吩-2-甲酸的制備。

參照實(shí)施例10的方法制備，僅是用6-溴苯并噻吩-2-甲酸乙酯代替間溴苯甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.01(s,1h),7.70(d,j＝8.8hz,1h),7.46-7.44(m,2h),7.39-7.33(m,1h),6.83(m,1h),6.70(m,1h),4.22(s,2h),3.99(m,1h),3.37-3.26(m,4h),2.17(m,3h),1.96(m,2h),1.81(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例31

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]異噻唑-2-甲酸的制備。

參照實(shí)施例10的方法制備，僅是用6-溴苯并[d]異噻唑-2-甲酸甲酯代替間溴苯甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.64(s,1h),7.39(m,3h),6.60(m,2h),4.18(s,2h),3.93(m,1h),3.18(m,4h),2.14(m,3h),1.88(m,2h),1.74(m,2h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例32

5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酸的制備。

(1)5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酸甲酯的制備。

將4-[(6-氮雜螺[3.4]辛烷-2-氧基)甲基]-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(100mg,0.24mmol)溶于甲苯(5ml)，加入1-甲基-6-溴-1h-吲哚-3-甲酸甲酯(80mg,0.28mmol)、pd2(dba)3(12mg,0.012mmol)、2-二環(huán)己基磷-2,4,6-三異丙基聯(lián)苯(12mg,0.024mmol)和碳酸銫(298mg,0.91mmol)，氬氣保護(hù)，100℃反應(yīng)過夜。待反應(yīng)液冷至室溫，用硅藻土過濾，旋干，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)純化得65mg黃色油狀物，即為5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酸甲酯，收率：47％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.46-7.43(m,2h),7.38-7.33(m,1h),7.26(m,1h),7.13(s,1h),6.81(m,1h),6.65(m,1h),4.21(s,2h),4.04(s,3h),3.98(m,1h),3.91(s,3h),3.31(m,2h),3.22(m,2h),2.17(m,3h),1.94(m,2h),1.80(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

(2)5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酸的制備。

將6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-3-甲酸甲酯(65mg,0.11mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(23mg,0.55mmol)，室溫反應(yīng)過夜。旋干，加水(15ml)，用1nhcl調(diào)ph至3左右，過濾，烘干，得54mg白色固體，即為5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-2-甲酸，收率：81％。

表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:7.46-7.43(m,2h),7.38-7.34(m,1h),7.29(m,2h),6.87(m,1h),6.69(m,1h),4.22(s,2h),4.05(s,3h),3.97(m,1h),3.32(m,2h),3.25(m,2h),2.17(m,3h),1.95(m,2h),1.82(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例33

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1h-吲哚-3-甲酸的制備。

參照實(shí)施例32的方法制備，僅是用1-甲基-6-溴-1h-吲哚-3-甲酸甲酯代替1-甲基-5-溴-1h-吲哚-2-甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.02(d,j＝8.8hz,1h),7.69(s,1h),7.46-7.43(m,2h),7.38-7.33(m,1h),6.64(m,1h),6.30(s,1h),4.22(s,2h),3.99(m,1h),3.77(s,3h),3.35(m,2h),3.26(m,2h),2.18(m,3h),1.95(m,2h),1.82(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例34

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}喹啉-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例10的方法制備，僅是用2-氯喹啉-6-甲酸甲酯代替間溴苯甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:9.12(m,1h),8.55(m,2h),8.28(m,1h),7.40(m,2h),7.37(m,1h),6.43(m,1h),4.16(s,2h),3.96-3.76(m,5h),2.20-2.02(m,5h),1.79(m,2h),1.23(m,2h),1.12(m,2h)。

實(shí)施例35

5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸的制備。

(1)5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯的制備。

將4-{[7-氮雜[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(100mg,0.24mmol)溶于dmf(5ml)，加入5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(45mg,0.26mmol)和碳酸鉀(81mg,0.59mmol)，80℃加熱反應(yīng)2小時(shí)。待反應(yīng)液冷至室溫，將其倒入水(20ml)中，用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，有機(jī)層用飽和食鹽水(20ml×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，經(jīng)柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝1.5:1)得100mg褐色油狀物，即為5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯，收率：81％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.81(m,1h),7.86(m,1h),7.46-7.44(m,2h),7.39-7.34(m,1h),4.21(s,2h),3.97(m,4h),3.58-3.44(m,4h),2.16(m,3h),1.98(m,2h),1.83(m,2h),1.29(m,2h),1.15(m,2h)。

(2)5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸的制備。

將5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯(100mg,0.19mmol)溶于四氫呋喃(2ml)、甲醇(2ml)和水(1ml)中，加入氫氧化鋰一水合物(40mg,0.95mmol)，室溫反應(yīng)過夜。旋干，加水(15ml)，用1nhcl調(diào)ph至2左右，過濾，烘干，得73mg白色固體，即為5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸，收率：75％。

表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.86(s,1h),7.80(s,1h),7.46-7.43(m,2h),7.39-7.34(m,1h),4.21(s,2h),3.97(m,1h),3.51(m,4h),2.16(m,3h),1.97(m,2h),1.82(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例36

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-2-甲酸的制備。

參照實(shí)施例35的方法制備，僅是用6-氯吡啶-2-甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.62(m,1h),7.46-7.37(m,4h),6.56(m,1h),4.22(s,2h),3.98(m,1h),3.49-3.35(m,4h),2.17(m,3h),1.96(m,2h),1.82(m,2h),1.27(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例37

4-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-3-氟苯甲酸的制備。

參照實(shí)施例10的方法制備，僅是用3-氟-4-溴苯甲酸甲酯代替間溴苯甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.75(m,1h),7.68(m,1h),7.45-7.43(m,2h),7.38-7.33(m,1h),6.51(m,1h),4.21(s,2h),3.96(m,1h),3.50-3.38(m,4h),2.16(m,3h),1.87(m,2h),1.78(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例38

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氟苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例8的方法制備，僅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.39(s,1h),8.08(d,j＝8.4hz,1h),7.60(d,j＝8.4hz,1h),7.46(m,1h),7.08-7.03(m,2h),4.29(s,2h),3.97(m,1h),3.59(m,4h),2.27-2.16(m,3h),2.02(m,2h),1.90(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例39

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氟苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例14的方法制備，僅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.03(d,j＝8.4hz,1h),8.00(s,1h),7.46(m,1h),7.39(d,j＝8.4hz,1h),7.06(m,2h),4.29(s,2h),3.98(m,1h),3.66(m,2h),3.58(d,j＝11.2hz,2h),2.27-2.15(m,3h),1.98(m,2h),1.88(m,2h),1.27(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例40

2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氟苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例23的方法制備，僅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.42(s,1h),8.10(m,1h),7.62(d,j＝8.4hz,1h),7.44(m,1h),7.10(d,j＝8.4hz,1h),7.03(m,2h),6.73(m,1h),6.64(m,1h),4.90(s,2h),4.78(s,2h),3.90(t,j＝5.6hz,2h),2.97(t,j＝5.6hz,2h),2.19(m,1h),1.28(t,m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例41

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例8的方法制備，僅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.39(s,1h),8.08(d,j＝8.4hz,1h),7.82(d,j＝7.6hz,1h),7.69-7.59(m,3h),7.49(m,1h),4.15(s,2h),3.96(m,1h),3.56(m,4h),2.24(m,2h),2.13(m,1h),2.03(m,2h),1.86(m,2h),1.27(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例42

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例14的方法制備，僅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.02(m,2h),7.82(d,j＝7.6hz,1h),7.64(m,2h),7.49(m,1h),7.39(m,1h),4.15(s,2h),3.96(m,1h),3.68(m,2h),3.58(d,j＝11.2hz,2h),2.23(m,2h),2.13(m,1h),1.99(m,2h),1.86(m,2h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例43

2-{6-{[5-環(huán)丙基-3-(2-三氟甲基苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氫異喹啉-2(1h)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例23的方法制備，僅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.41(s,1h),8.09(d,j＝8.4hz,1h),7.81(m,1h),7.60(m,3h),7.48(m,1h),7.10(d,j＝8.4hz,1h),6.73(m,1h),6.66(m,1h),4.78(s,2h),4.75(s,2h),3.89(m,2h),2.98(m,2h),2.16(m,1h),1.29(t,m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例44

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-3-甲酸的制備。

參照實(shí)施例35的方法制備，僅是用6-氯吡啶-3-甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.86(s,1h),8.03(m,1h),7.43-7.34(m,3h),6.27(m,1h),4.20(s,2h),3.96(m,1h),3.45(m,4h),2.15(m,3h),1.92(m,2h),1.79(m,2h),1.28(m,2h),1.14(m,2h)。

實(shí)施例45

5-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-2-甲酸的制備。

參照實(shí)施例32的方法制備，僅是用5-溴吡啶-2-甲酸甲酯代替1-甲基-6-溴-1h-吲哚-3-甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.02(m,1h),7.83(s,1h),7.45-7.35(m,3h),6.81(m,1h),4.21(s,2h),3.99(m,1h),3.36-3.25(m,4h),2.16(m,3h),1.98(m,2h),1.82(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例46

6-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}噠嗪-3-甲酸的制備。

參照實(shí)施例35的方法制備，僅是用6-氯噠嗪-3甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.97(d,j＝10.4hz,1h),7.43(s,2h),7.38(m,1h),6.67(m,1h),4.20(s,2h),3.97(m,1h),3.52(m,4h),2.15(m,3h),1.98(m,2h),1.80(m,2h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)施例47

2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}-n-(甲磺?；?苯并[d]噻唑-6-甲酰胺的制備。

將2-{2-{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸(50mg,0.088mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入dmap(19.5mg,0.16mmol)和edc.hcl(31mg,0.16mmol)，室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)液倒入水(20ml)中，用二氯甲烷(20mlx2)萃取，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，經(jīng)柱層析純化(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得34mg灰白色固體，收率：60％。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.19(s,1h),7.77(d,j＝8.4hz,1h),7.55(d,j＝8.4hz,1h),7.47-7.41(m,2h),7.38-7.33(m,1h),4.18(s,1h),3.95(m,1h),3.53(m,4h),3.40(s,4h),2.20-2.14(m,3h),1.99(m,2h),1.80(m,2h),1.26(m,2h),1.16(m,2h)。

實(shí)施例48

2-{4-{{[5-環(huán)丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基]甲氧基}甲基}哌啶-1-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制備。

參照實(shí)施例2的方法制備，僅是用4-(羥甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯代替2-羥基7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)為：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.37(d,j＝1.6hz,1h),8.06(dd,j＝1.6hz,8.4hz,1h),7.59(d,j＝8.8hz,1h),7.46-7.44(m,2h),7.38-7.34(m,1h),4.19(s,2h),3.33(m,2h),2.98(m,4h),2.15(m,1h),1.85(m,1h),1.43(m,4h),1.28(m,2h),1.15(m,2h)。

實(shí)驗(yàn)例

將上述實(shí)施例制備得到的化合物進(jìn)行fxr激動(dòng)活性的體外測試。

alphascreen測試，采用珀金埃爾默儀器有限公司(perkins-elmer)的六聚組氨酸檢測試劑盒(hexahistidinedetectionkit)，檢測化合物對(duì)人法尼醇受體蛋白結(jié)合其共激活因子(src1-2)的影響，方法如下：

1)制備混合物，包括人法尼醇受體蛋白hfxr(100nm,15μl/孔)、多肽bsrc1-2(50nm,15μl/孔)、10×alphascreen緩沖液(15μl/孔)、去離子水(60μl/孔)，轉(zhuǎn)入96孔板，105μl/孔；

2)上述實(shí)施例制備得到的化合物按照2倍倍比稀釋12次，15μl/孔；

3)供體微珠、受體微珠一共30μl/孔；(注意：避光操作)

4)室溫避光孵育2h；

5)轉(zhuǎn)384孔板，40μl/孔，3個(gè)復(fù)孔。瞬時(shí)離心1000rpm，1分鐘，使液滴充分混合在孔底；(注意：避光操作)

6)暗室里，儀器讀板(均相發(fā)光免疫檢測系統(tǒng))，ec50由數(shù)據(jù)處理軟件graphpadprism5處理得到。

結(jié)果如下表1所示：

表1fxr激動(dòng)活性測試結(jié)果

注：nm為nmol/l，a代表ec50<100nm，b代表100nm<ec50<1000nm，c代表ec50>1000nm，gw4064為陽性對(duì)照化合物，其結(jié)構(gòu)如下：

從上述結(jié)果中可以看出，本發(fā)明的化合物對(duì)fxr有較好的激動(dòng)活性，特別是其中部分化合物，對(duì)fxr激動(dòng)的ec50達(dá)到100nm以下，顯示出了非常好的fxr激動(dòng)活性。

以上所述實(shí)施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合，為使描述簡潔，未對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述，然而，只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾，都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說明書記載的范圍。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。