本申請(qǐng)涉及新的取代的稠合嘧啶，其制備方法，其單獨(dú)或以結(jié)合物形式用于治療和/或預(yù)防疾病的用途，以及其用于制備治療和/或預(yù)防疾病，特別是治療和/或預(yù)防心血管病癥的藥物的用途。

哺乳動(dòng)物細(xì)胞中最重要的細(xì)胞傳遞系統(tǒng)之一是環(huán)單磷酸鳥苷(cgmp)。它與一氧化氮(no)一起形成no/cgmp系統(tǒng)，一氧化氮由內(nèi)皮釋放并傳輸激素和機(jī)械信號(hào)。鳥苷酸環(huán)化酶催化由鳥苷三磷酸(gtp)到cgmp的生物合成。目前已知的該族的代表物可以根據(jù)結(jié)構(gòu)特征或根據(jù)配體類型分為兩組：可由利鈉肽激發(fā)的顆粒狀鳥苷酸環(huán)化酶，和可由no激發(fā)的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶?？扇苄曾B苷酸環(huán)化酶由兩個(gè)亞單元構(gòu)成并且極有可能每個(gè)異源二聚體包含一個(gè)血紅素，其是調(diào)節(jié)器中心的一部分。這對(duì)于活化機(jī)制來(lái)說(shuō)是至關(guān)重要的。no能夠結(jié)合至血紅素的鐵原子并因此顯著增加所述酶的活性。相反，不含血紅素的制劑不能被no激發(fā)。一氧化碳(co)也能夠結(jié)合至血紅素的中心鐵原子，但是co的激發(fā)作用明顯小于no的激發(fā)作用。

通過(guò)形成cgmp，以及由于磷酸二酯酶、離子通道和蛋白激酶的結(jié)果調(diào)節(jié)，鳥苷酸環(huán)化酶在多種生理過(guò)程中起著重要的作用，特別是在平滑肌細(xì)胞的舒張和增殖中、在血小板凝集和血小板粘附中和在神經(jīng)元信號(hào)傳遞中，以及在基于上述過(guò)程中斷的病癥中。在病理生理?xiàng)l件下，no/cgmp系統(tǒng)可能受到抑制，這可導(dǎo)致例如高血壓、血小板激活、增加的細(xì)胞增殖、內(nèi)皮功能障礙、動(dòng)脈硬化、心絞痛、心力衰竭、心肌梗死、形成血栓、中風(fēng)和性功能障礙。

由于可預(yù)期的高效率和低水平的副作用，針對(duì)影響生物體內(nèi)的cgmp信號(hào)通道的用于這類病癥的可能的no非依賴性治療是一種有前景的方法。

迄今為止，對(duì)于可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的治療刺激，僅使用了其作用基于no的化合物諸如有機(jī)硝酸酯。no通過(guò)生物轉(zhuǎn)化形成并且通過(guò)攻擊血紅素的中心鐵原子來(lái)活化可溶性鳥苷酸環(huán)化酶。除了副作用外，耐受性的發(fā)展也是這種治療方式的關(guān)鍵性缺點(diǎn)之一。

若干年前，記載了一些直接激發(fā)可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(即不預(yù)先釋放no)的物質(zhì)，例如，3-(5'-羥甲基-2'-呋喃基)-1-芐基吲唑[yc-1；wu等人，blood841994，4226；mülsch等人，brit.j.pharmacol.1997，120，681]。最近的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的刺激劑包括bay41-2272、bay41-8543和riociguat(bay63-2521)[參見，例如，staschj.-p.等人，nat.rev.drugdisc.2006，5：755-768；staschj.-p.等人，chemmedchem2009，4：853-865；staschj.-p.等人，circulation2011，123，2263-2273]。令人關(guān)注的是，這些sgc刺激劑中的一些，例如yc-1或bay41-2272，除了直接激發(fā)鳥苷酸環(huán)化酶之外還顯示出pde5抑制作用。為了使cgmp通道最大化，在藥理學(xué)上需要激發(fā)cgmp的合成并同時(shí)抑制通過(guò)pde-5的降解。該雙重原理(dualprinciple)從藥理學(xué)方面來(lái)說(shuō)是特別有利的[參見，例如，oudout等人，eur.urol.2011，60，1020-1026；albersen等人，jsexmed.2013；10，1268-1277]。

在本發(fā)明的上下文中，當(dāng)本發(fā)明的化合物根據(jù)b-2中的研究在最小有效濃度(mec)≤3μm時(shí)表現(xiàn)出對(duì)重組鳥苷酸環(huán)化酶報(bào)告細(xì)胞系的影響，并且根據(jù)b-3中的研究在ic50<100nm時(shí)表現(xiàn)出對(duì)人磷酸二酯酶-5(pde5)的抑制時(shí)，就實(shí)現(xiàn)了雙重原理。

磷酸二酯酶-5(pde5)是分裂cgmp中的磷酯鍵，形成5'-鳥苷單磷酸(5′-gmp)的酶之一的名稱。在人類中，磷酸二酯酶-5主要發(fā)生在陰莖海綿體和肺動(dòng)脈的平滑肌中。通過(guò)(例如利用西地那非、伐地那非或他達(dá)拉非)抑制pde5來(lái)阻斷cgmp降解導(dǎo)致弛豫信號(hào)通道的信號(hào)增強(qiáng)且特別是導(dǎo)致陰莖海綿體中的供血增加和肺部血管中的壓力降低。它們用于治療勃起功能障礙和肺動(dòng)脈高壓。除了pde5，還有其他裂解cgmp的磷酸二酯酶[staschj.-p.等人，circulation2011，123，2263-2273]。

作為可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的刺激劑，wo00/06568和wo00/06569公開了稠合吡唑衍生物，wo03/095451公開了氨基甲酸酯取代的3-嘧啶基吡唑并吡啶。e.m.becker等人，bmcpharmacology，2001，1(13)中描述了具有苯基酰胺取代基的3-嘧啶基吡唑并吡啶。wo2004/009590描述了具有取代的4-氨基嘧啶的吡唑并吡啶用于治療cns病癥。wo2010/065275和wo2011/149921公開了取代的吡咯并嘧啶和二氫吡啶并嘧啶作為sgc激活劑。作為sgc刺激劑，wo2012/004259描述了稠合氨基嘧啶，wo2012/004258、wo2012/143510和wo2012/152629描述了稠合嘧啶和三嗪。wo2012/28647公開了用于治療心血管病癥的具有各種氮雜雜環(huán)的吡唑并吡啶。

本發(fā)明的目的是提供作為可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的刺激劑以及作為可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的刺激劑和磷酸二酯酶-5抑制劑(雙重原理)，并且與由現(xiàn)有技術(shù)已知的化合物相比具有相同或改進(jìn)的治療特性(例如在它們的體內(nèi)特性方面，例如它們的藥物代謝動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)特性和/或它們的代謝特性和/或它們的劑量-活性關(guān)系)的新的物質(zhì)。

本發(fā)明涉及通式(i)的化合物

其中

環(huán)q代表5元或6元單環(huán)雜芳基或8元或9元雙環(huán)雜芳基，

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0、1或2，

r^5a代表氫、氟、(c1-c4)-烷基、羥基或氨基，

其中(c1-c4)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、三氟甲基、羥基、羥基羰基、(c1-c4)-烷氧基羰基和氨基，

r^5b代表氫、氟、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c6)-烷基、(c1-c4)-烷氧基羰基氨基、氰基、(c3-c7)-環(huán)烷基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、苯基或式-m-r⁷的基團(tuán)，

其中(c1-c6)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、氰基、三氟甲基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(c1-c4)-烷氧基、羥基羰基、(c1-c4)-烷氧基羰基和氨基，

以及其中

m代表鍵或(c1-c4)-烷二基，

r⁷代表-(c＝o)r-or⁸、-(c＝o)r-nr⁹r¹⁰、-c(＝s)-nr⁹r¹⁰、-nr⁸-(c＝o)-r¹¹、-nr⁸-(c＝o)-nr⁹r¹⁰、-nr⁸-so2-nr⁹r¹⁰、-nr⁸-so2-r¹¹、-s(o)s-r¹¹、-so2-nr⁹r¹⁰、4元至7元雜環(huán)基、苯基或5元或6元雜芳基，其中

r代表數(shù)字0或1，

s代表數(shù)字0、1或2，

r⁸、r⁹和r¹⁰分別彼此獨(dú)立地代表氫、(c1-c6)-烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基、4元至7元雜環(huán)基、苯基或5元或6元雜芳基，

或

r⁹和r¹⁰與它們分別連接的原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

r¹¹代表(c1-c6)-烷基或(c3-c7)-環(huán)烷基，

或

r⁸和r¹¹與它們分別連接的原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

以及

其中上述(c1-c6)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基和4元至7元雜環(huán)基基團(tuán)可分別彼此獨(dú)立地另外被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(c1-c4)-烷氧基、羥基羰基、(c1-c4)-烷氧基羰基、氨基、苯基、4元至7元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基，

或

r^5a和r^5b與它們所連接的碳原子一起形成(c2-c4)-烯基基團(tuán)、氧代基團(tuán)、3元至6元碳環(huán)或4元至7元雜環(huán)，其中3元至6元碳環(huán)和4元至7元雜環(huán)可被1或2個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、羥基、甲氧基和(c1-c4)-烷基，

r^6a代表氫、氟、(c1-c4)-烷基或羥基，

r^6b代表氫、氟、(c1-c4)-烷基或三氟甲基，

r¹代表氫、鹵素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、(c1-c4)-烷氧基、苯基或5元或6元雜環(huán)基，

n代表數(shù)字0、1、2或3，

r²代表三氟甲基、(c1-c6)-烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基、苯基或5元或6元雜芳基，

其中(c1-c6)-烷基被選自二氟甲基和三氟甲基的一個(gè)取代基取代且還可被氟至多三取代，

以及其中(c3-c8)-環(huán)烷基可被1或2個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、甲基和甲氧基，

以及其中苯基可被1至3個(gè)鹵素取代基取代且還可被1或2個(gè)彼此獨(dú)立地選自(c1-c4)-烷基、(c1-c4)-烷氧基和氰基的取代基取代，

以及其中5元或6元雜芳基可被1或2個(gè)選自三氟甲基和甲基的取代基取代且還可被氟取代至多三次，

r³代表氫、(c1-c4)-烷基或(c3-c8)-環(huán)烷基，

r⁴代表氫、(c1-c10)-烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、4元至7元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基、-nr¹²r¹³或-or¹⁴，

其中(c1-c10)-烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基和4元至7元雜環(huán)基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、甲基、乙基、羥基、氧代、(c1-c6)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁶-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、-nr¹⁸-so2-r¹⁹、-so2-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-or²¹、-nr¹⁶-(c＝o)-or²¹、苯基、4元至7元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基，其中

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰分別彼此獨(dú)立地代表(c1-c6)-烷基、苯基或(c3-c8)-環(huán)烷基，

r¹⁶、r¹⁷、r¹⁸和r¹⁹分別彼此獨(dú)立地代表氫、(c1-c6)-烷基或(c3-c8)-環(huán)烷基，

或

r¹⁶和r¹⁷與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

r²¹代表氫、(c1-c6)-烷基或(c3-c8)-環(huán)烷基，

以及

其中5元或6元雜芳基和苯基分別可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自鹵素、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c1-c4)-烷氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氰基、羥基和(c3-c7)-環(huán)烷基，

以及其中

r¹²和r¹³彼此獨(dú)立地代表氫或(c1-c4)-烷基，

其中(c1-c4)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基選自氟、羥基和(c1-c4)-烷氧基，

或

r¹²和r¹³與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，以及其中

r¹⁴代表(c1-c6)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基或(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

其中4元至7元雜環(huán)可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、氰基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、氧代、(c1-c4)-烷氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基和氨基，

以及

其中除非另有說(shuō)明，上述(c1-c4)-烷基、(c1-c6)-烷基、(c3-c8)-環(huán)烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、(c3-c6)-烯基和4元至7元雜環(huán)基基團(tuán)可分別彼此獨(dú)立地另外被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、(c1-c4)-烷氧基、羥基羰基、(c1-c4)-烷氧基羰基、氨基、苯基、4元至7元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基，

及其n-氧化物、鹽、溶劑合物、所述n-氧化物的鹽以及所述n-氧化物和鹽的溶劑合物。

本發(fā)明的化合物是式(i)的化合物及其n-氧化物、鹽、溶劑合物以及所述n-氧化物和鹽的溶劑合物，由式(i)所涵蓋的下文中所述式的化合物及其n-氧化物、鹽、溶劑合物以及所述n-氧化物和鹽的溶劑合物，以及由式(i)所涵蓋且在下文中作為工作實(shí)施例所述的化合物及其n-氧化物、鹽、溶劑合物以及所述n-氧化物和鹽的溶劑合物，條件是由式(i)所涵蓋且在下文中所述的化合物并非已經(jīng)是n-氧化物、鹽、溶劑合物以及所述n-氧化物和鹽的溶劑合物。

在本發(fā)明的上下文中，優(yōu)選的鹽為本發(fā)明化合物的生理上可接受的鹽。還包括不僅其本身適于藥學(xué)應(yīng)用，而且還可用于，例如本發(fā)明的化合物的分離、純化或儲(chǔ)存的鹽。

本發(fā)明化合物的生理上可接受的鹽包括無(wú)機(jī)酸、羧酸和磺酸的酸加成鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、萘二磺酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽和苯甲酸鹽。

本發(fā)明化合物的生理上可接受的鹽還包括常規(guī)堿的鹽，例如并優(yōu)選堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)以及衍生自氨或具有1至16個(gè)碳原子的有機(jī)胺的銨鹽，例如并優(yōu)選乙胺、二乙胺、三乙胺、n,n-乙基二異丙基胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲基氨基乙醇、二乙基氨基乙醇、普魯卡因、二環(huán)己基胺、二芐基胺、n-甲基哌啶、n-甲基嗎啉、精氨酸、賴氨酸、膽堿和1,2-乙二胺。

在本發(fā)明的上下文中，溶劑合物指的是本發(fā)明的化合物的以下形式：其通過(guò)與溶劑分子配位而形成固態(tài)或液態(tài)絡(luò)合物。水合物是其中所述配位與水進(jìn)行的特定形式的溶劑合物。在本發(fā)明的上下文中，優(yōu)選的溶劑合物為水合物。

本發(fā)明的化合物，根據(jù)其結(jié)構(gòu)，可以不同的立體異構(gòu)體形式存在，即以構(gòu)型異構(gòu)體形式存在，或者(如果合適)以構(gòu)象異構(gòu)體(對(duì)映異構(gòu)體和/或非對(duì)映異構(gòu)體，包括在阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的情況下的那些)的形式存在。因此，本發(fā)明包括對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體及其各自的混合物?？梢砸砸阎绞綇膶?duì)映異構(gòu)體和/或非對(duì)映異構(gòu)體的此類混合物中分離立體異構(gòu)上一致的成分；為此目的，優(yōu)選使用色譜法，特別是基于非手性相或手性相的hplc色譜法。

如果本發(fā)明的化合物可以互變異構(gòu)的形式存在，則本發(fā)明包括所有的互變異構(gòu)形式。

本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的所有合適的同位素變體。在本文中，本發(fā)明化合物的同位素變體應(yīng)被理解為意指這樣的化合物：其中在本發(fā)明化合物內(nèi)的至少一個(gè)原子被交換為具有相同原子序數(shù)的另一原子，但是與在自然界中通?；蛑饕嬖诘脑淤|(zhì)量相比，該另一原子具有不同的原子質(zhì)量?？杉{入本發(fā)明化合物中的同位素的實(shí)例為氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，如²h(氘)、³h(氚)、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁷o、¹⁸o、³²p、³³p、³³s、³⁴s、³⁵s、³⁶s、¹⁸f、³⁶cl、⁸²br、¹²³i、¹²⁴i、¹²⁹i和¹³¹i。本發(fā)明化合物的特定同位素變體，特別是其中已經(jīng)納入一種或多種放射性同位素的變體，可有益于例如考察作用機(jī)制或在體內(nèi)的活性化合物分布；由于相對(duì)容易的可制備性和可檢測(cè)性，標(biāo)記有³h或¹⁴c同位素的化合物特別適于此目的。此外，由于所述化合物的更高的代謝穩(wěn)定性，同位素(例如氘)的納入可產(chǎn)生特別的治療性益處，例如延長(zhǎng)體內(nèi)的半衰期或減小需要的活性劑量；因此，在一些情況下，本發(fā)明的化合物的此類修飾也可構(gòu)成本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。通過(guò)使用各個(gè)反應(yīng)物和/或起始物料的對(duì)應(yīng)同位素修飾，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，例如根據(jù)下文進(jìn)一步描述的方法以及在工作實(shí)施例中描述的方法可以制備本發(fā)明化合物的同位素變體。

此外，本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物的前藥。本文的術(shù)語(yǔ)“前藥”指這樣的化合物：其本身可有生物活性或無(wú)生物活性，但是其在體內(nèi)停留期間可以被轉(zhuǎn)化為(例如通過(guò)代謝或水解)本發(fā)明的化合物。

除非另有說(shuō)明，在本發(fā)明的上下文中，取代基定義如下：

在本發(fā)明的上下文中，烷基為具有指定的特定數(shù)目碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-甲基丙-1-基、1-甲基丙基、叔丁基、正戊基、異戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基。

在本發(fā)明的上下文中，烷氧基為具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基基團(tuán)。例如可提及以下基團(tuán)：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、1-甲基丙-1-氧基、正丁氧基、2-甲基丙-1-氧基、叔丁氧基。

在本發(fā)明的上下文中，環(huán)烷基或碳環(huán)為分別具有特定數(shù)目碳原子的單環(huán)飽和烷基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。

在本發(fā)明的上下文中，5元至7元飽和或部分不飽和的碳環(huán)是分別具有特定數(shù)目碳原子的飽和或部分不飽和的環(huán)狀烷基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基和環(huán)庚烯基。

在本發(fā)明的上下文中，烷二基為具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈二價(jià)烷基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：亞甲基、乙烷-1,2-二基、乙烷-1,1-二基、丙烷-1,3-二基、丙烷-1,1-二基、丙烷-1,2-二基、丙烷-2,2-二基、丁烷-1,4-二基、丁烷-1,2-二基、丁烷-1,3-二基和丁烷-2,3-二基。

在本發(fā)明的上下文中，烯基為具有2至6個(gè)碳原子和一個(gè)雙鍵的直鏈或支鏈烯基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：烯丙基、異丙烯基、正丁-2-烯-1-基和3-甲基丁-2-烯-1-基。

在本發(fā)明的上下文中，烷氧基羰基為具有1至4個(gè)碳原子和一個(gè)連接在氧原子上的羰基基團(tuán)的直鏈或支鏈烷氧基基團(tuán)。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基和叔丁氧基羰基。

在本發(fā)明的上下文中，烷氧基羰基氨基為氨基基團(tuán)，所述氨基基團(tuán)具有在烷基鏈中具有1至4個(gè)碳原子并且通過(guò)羰基基團(tuán)連接在氮原子上的直鏈或支鏈烷氧基羰基取代基。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：甲氧基羰基氨基、乙氧基羰基氨基、丙氧基羰基氨基、正丁氧基羰基氨基、異丁氧基羰基氨基和叔丁氧基羰基氨基。

在本發(fā)明的上下文中，烷硫基(alkylthio)為具有直鏈或支鏈烷基取代基的硫基基團(tuán)，所述直鏈或支鏈烷基取代基具有1至4個(gè)碳原子。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基、正丁硫基和叔丁硫基。

在本發(fā)明的上下文中，烷基磺?；?/u>為具有1至4個(gè)碳原子并且通過(guò)磺?；鶊F(tuán)連接的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。例如并優(yōu)選可提及以下基團(tuán)：甲基磺?；⒁一酋；?、正丙基磺?；?、異丙基磺?；⒄』酋；褪宥』酋；?。

在本發(fā)明的上下文中，單烷基氨基為具有直鏈或支鏈烷基取代基的氨基基團(tuán)，所述直鏈或支鏈烷基取代基具有1至6個(gè)碳原子。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、異丙基氨基和叔丁基氨基。

在本發(fā)明的上下文中，二烷基氨基為具有兩個(gè)相同或不同的直鏈或支鏈烷基取代基的氨基基團(tuán)，所述直鏈或支鏈烷基取代基分別具有1至6個(gè)碳原子。例如并優(yōu)選，可提及以下基團(tuán)：n,n-二甲基氨基、n,n-二乙基氨基、n-乙基-n-甲基氨基、n-甲基-n-正丙基氨基、n-異丙基-n-正丙基氨基、n-叔丁基-n-甲基氨基、n-乙基-n-正戊基氨基和n-正己基-n-甲基氨基。

在本發(fā)明的上下文中，5元至7元飽和或部分不飽和雜環(huán)為具有總共5至7個(gè)環(huán)原子并含有一個(gè)選自n、o、s、so和/或so2的環(huán)雜原子的飽和或部分不飽和的雜環(huán)。例如可提及以下基團(tuán)：吡咯烷基、四氫呋喃基、哌啶基、四氫吡喃基、二氫吡咯基、二氫吡啶基。

在本發(fā)明的上下文中，雜環(huán)基或雜環(huán)為飽和雜環(huán)，其具有總共4至7個(gè)環(huán)原子并含有1個(gè)或2個(gè)選自n、o、s、so和/或so2的環(huán)雜原子。例如可提及以下基團(tuán)：氮雜環(huán)丁基(azetidinyl)、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉基、四氫呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫代嗎啉基和二氧化硫代嗎啉基。優(yōu)選氧雜環(huán)丁烷基(oxetanyl)、吡咯烷基、四氫呋喃基、哌啶基和四氫吡喃基。

在本發(fā)明的上下文中，雜芳基為單環(huán)或雙環(huán)芳族雜環(huán)(雜芳族)，其具有總共5至10個(gè)環(huán)原子，含有至多四個(gè)相同或不同的選自n、o和s的環(huán)雜原子，并通過(guò)環(huán)碳原子或任選地通過(guò)環(huán)氮原子連接。例如可提及以下基團(tuán)：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、異噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、吲哚基、吲唑基、咪唑并噠嗪基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基(phthalazinyl)、二氫噻吩并吡唑基、噻吩并吡唑基、吡唑并吡唑基、咪唑并噻唑基、四氫環(huán)戊二烯并吡唑基、二氫環(huán)戊二烯并吡唑基、四氫吲唑基、二氫吲唑基、吡唑并吡啶基、四氫吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基和咪唑并吡啶基。在環(huán)q的定義中，優(yōu)選具有至多三個(gè)環(huán)氮原子的5元或6元單環(huán)雜芳基基團(tuán)，如吡唑基、咪唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基和噠嗪基，以及具有至多四個(gè)環(huán)氮原子的8元或9元雙環(huán)雜芳基基團(tuán)，如吲唑-3-基、吲唑-1-基、吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-1-基、咪唑并[1,5-b]噠嗪-5-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基、吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基。特別優(yōu)選具有2或3個(gè)環(huán)氮原子的8元或9元雙環(huán)雜芳基基團(tuán)，如吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基和吲唑-3-基。在基團(tuán)r¹的定義中優(yōu)選噻吩基、吡啶基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基。在基團(tuán)r²的定義中優(yōu)選吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基。在基團(tuán)r⁴的定義中優(yōu)選吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、2,3,5-三唑-1-基、噻唑啉-2-基、1,3,4-噁二唑-2-基、1,3,4-噻二唑-2-基。

在本發(fā)明的上下文中，鹵素為氟、氯、溴和碘。優(yōu)選氟和氯。

在本發(fā)明的上下文中，氧代基團(tuán)為通過(guò)雙鍵與碳原子連接的氧原子。

在本發(fā)明的上下文中，硫代(thiooxo)基團(tuán)為通過(guò)雙鍵與碳原子連接的硫原子。

在可通過(guò)l、q或r²表示基團(tuán)的式中，由符號(hào)#、#¹、#²、*和**標(biāo)記的線的端點(diǎn)不代表碳原子或ch2基團(tuán)，而是至l、q或r²所連接至的各個(gè)原子的鍵的一部分。

除非另有說(shuō)明，否則當(dāng)本發(fā)明的化合物中的基團(tuán)被取代時(shí)，所述基團(tuán)可以被單取代或多取代。在本發(fā)明的上下文中，出現(xiàn)超過(guò)一次的所有基團(tuán)都是彼此獨(dú)立定義的。優(yōu)選被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)相同或不同取代基取代。優(yōu)選被一個(gè)或兩個(gè)相同或不同取代基取代。

在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“治療(treatment或treating)”包括抑制、延遲、阻礙(checking)、緩和、減弱、限制、減輕、阻止、抵御或治愈疾病、病況(condition)、病癥、損傷或健康問題，或這類狀態(tài)和/或這類狀態(tài)的癥狀的發(fā)展、病程(course)或進(jìn)展。術(shù)語(yǔ)“療法(therapy)”在本文中理解為與術(shù)語(yǔ)“治療”同義。

在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“防治(prevention)”、“預(yù)防(prophylaxis)”和“防止(preclusion)”同義使用，并且是指避免或減少以下風(fēng)險(xiǎn)：感染、經(jīng)歷、患有或具有疾病、病況、病癥、損傷或健康問題或這類狀態(tài)和/或這類狀態(tài)的癥狀的發(fā)展或進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)。

疾病、病況、病癥、損傷或健康問題的治療或預(yù)防可以是部分的或完全的。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)

n代表數(shù)字0、1或2，

環(huán)q1與它所連接的原子一起形成5元至7元飽和或部分不飽和的碳環(huán)或5元至7元飽和或部分不飽和的雜環(huán)，

a¹、a²、a³和a⁴分別彼此獨(dú)立地代表n、c-h或c-r¹，

條件是a¹、a²、a³和a⁴基團(tuán)中不超過(guò)兩個(gè)代表n。

在本發(fā)明的上下文中，優(yōu)選式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)

n代表數(shù)字0、1或2，

a¹、a²、a³和a⁴分別彼此獨(dú)立地代表n、c-h或c-r¹，

條件是a¹、a²、a³和a⁴基團(tuán)中不超過(guò)兩個(gè)代表n，

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0或1，

r^5a代表氫、氟、三氟甲基或(c1-c4)-烷基，

r^5b代表氫、氟、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基或式

-m-r⁷的基團(tuán)，

其中(c1-c4)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、氰基、三氟甲基、(c3-c7)-環(huán)烷基、二氟甲氧基和三氟甲氧基，

m代表鍵或亞甲基，

r⁷代表-(c＝o)-or⁸或-(c＝o)-nr⁹r¹⁰，其中

r⁸代表氫、(c1-c4)-烷基、(c3-c6)-環(huán)烷基或4元或7元雜環(huán)基，

r⁹和r¹⁰分別彼此獨(dú)立地代表氫、(c1-c4)-烷基、(c3-c6)-環(huán)烷基、4元至7元雜環(huán)基、苯基或5元或6元雜芳基，

或

r⁹和r¹⁰與它們分別連接至的原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

或

r^5a和r^5b與它們所連接的碳原子一起形成(c2-c4)-烯基基團(tuán)、3元至6元碳環(huán)或4元至7元雜環(huán)，

其中3元至6元碳環(huán)可被羥基單取代且被氟至多二取代，

r^6a代表氫、氟、(c1-c4)-烷基或羥基，

r^6b代表氫、氟、(c1-c4)-烷基或三氟甲基，

r¹代表氟、氯、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c5)-環(huán)烷基或(c1-c4)-烷氧基，

n代表數(shù)字0、1或2，

r²代表(c1-c6)-烷基、苯基或5元或6元雜芳基，

其中(c1-c6)-烷基被選自二氟甲基和三氟甲基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

以及其中苯基被1至3個(gè)氟取代基取代，并且還可被1或2個(gè)彼此獨(dú)立地選自甲基和甲氧基的取代基取代，

以及其中5元或6元雜芳基被氟至多二取代，

r³代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

r⁴代表氫、(c1-c10)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、4元至7元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基、-nr¹²r¹³或-or¹⁴，

其中(c1-c10)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、氧代、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、-nr¹⁸-so2-r¹⁹、苯基、4元至7元雜環(huán)基以及5元或6元雜芳基，

其中(c3-c7)-環(huán)烷基和4元至7元雜環(huán)基分別彼此獨(dú)立地可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基、氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中苯基和5元或6元雜芳基分別彼此獨(dú)立地可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多三取代，

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰彼此獨(dú)立地代表可被氟至多五取代的(c1-c4)-烷基，代表苯基或(c3-c7)-環(huán)烷基，

r¹⁶和r¹⁷分別彼此獨(dú)立地代表氫、(c1-c4)-烷基或(c3-c7)-環(huán)烷基，

r¹⁸和r¹⁹彼此獨(dú)立地代表氫、可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，或代表(c3-c7)-環(huán)烷基，或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

其中4元至7元雜環(huán)可被氟至多四取代，

其中(c3-c7)-環(huán)烷基可被選自(c1-c4)-烷基、羥基、氨基、氰基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中(c2-c6)-烯基可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多五取代，

以及其中4元至7元雜環(huán)基可被1至4個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、三氟甲基、氧代、(c1-c4)-烷基、羥基和氨基，

以及其中5元或6元雜芳基和苯基可分別被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自鹵素、(c1-c4)-烷基、(c1-c4)-烷氧基、氰基和(c3-c5)-環(huán)烷基，

以及其中

r¹²和r¹³彼此獨(dú)立地代表氫或(c1-c4)-烷基，

或

r¹²和r¹³與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

以及其中

r¹⁴代表可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，代表(c3-c7)-環(huán)烷基或(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

其中4元至7元雜環(huán)可被彼此獨(dú)立地選自三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、(c1-c4)-烷氧基、三氟甲氧基和氨基的1至3個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。

在本發(fā)明的上下文，還特別優(yōu)選式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，其中

a¹代表n或c-h，

當(dāng)a¹代表氮時(shí)，r^1a代表氫或甲基，

或

當(dāng)a¹代表c-h時(shí)，r^1a代表氫、氟或氯，

r^1b代表氫或氟，

r^1c代表氫或甲基，

r^1d代表氫、甲基或氟，

r^1e代表氫或氯，

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表氫、甲基或乙基，

r^5b代表氫、氟、三氟甲基、甲基、乙基或乙氧基羰基，其中甲基、乙基或乙氧基羰基可被氟至多三取代，

或

r^5a和r^5b與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)丙基環(huán)，

r²代表(c1-c4)-烷基、苯基或6元雜芳基，

其中(c1-c4)-烷基被選自二氟甲基和三氟甲基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多二取代，

以及其中苯基被1至3個(gè)氟取代基取代，并且還可被1或2個(gè)彼此獨(dú)立地選自甲基和甲氧基的取代基取代，

以及其中6元雜芳基被氟至多二取代，

r³代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

r⁴代表氫、(c1-c10)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、4元至7元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基、-nr¹²r¹³或-or¹⁴，

其中(c1-c10)-烷基可被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、氧代、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、苯基、4元至7元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基，

其中(c3-c7)-環(huán)烷基和4元至7元雜環(huán)基分別獨(dú)立地可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基、氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中苯基和5元或6元雜芳基分別獨(dú)立地可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多三取代，

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰分別獨(dú)立地代表(c1-c4)-烷基、苯基或(c3-c7)-環(huán)烷基，

其中(c1-c4)-烷基可被氟取代至多五次，

r¹⁶和r¹⁷分別獨(dú)立地代表氫、(c1-c4)-烷基或(c3-c7)-環(huán)烷基，

r¹⁸和r¹⁹彼此獨(dú)立地代表氫、可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，或代表(c3-c6)-環(huán)烷基，

或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成4元至6元雜環(huán)，

其中(c3-c7)-環(huán)烷基可被選自(c1-c4)-烷基、羥基、氨基、氰基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中(c2-c6)-烯基可被氟至多五取代，

以及

其中4元至7元雜環(huán)基可被彼此獨(dú)立地選自氧代、(c1-c4)-烷基、羥基、氨基的1或2個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，以及

其中5元或6元雜芳基和苯基可分別被1至3個(gè)取代基取代，所述取代基彼此獨(dú)立地選自鹵素、(c1-c4)-烷基、(c1-c4)-烷氧基、氰基和(c3-c5)-環(huán)烷基，

以及其中

r¹²和r¹³彼此獨(dú)立地代表氫或(c1-c4)-烷基，

或

r¹²和r¹³與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

以及其中

r¹⁴代表可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，代表(c3-c7)-環(huán)烷基或(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成4元至7元雜環(huán)，

其中4元至7元雜環(huán)可被彼此獨(dú)立地選自三氟甲基、(c1-c4)-烷基、(c3-c7)-環(huán)烷基、羥基、(c1-c4)-烷氧基、三氟甲氧基和氨基的1或2個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。

在本發(fā)明的上下文中，還特別優(yōu)選式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，其中

a¹代表n或c-h，

當(dāng)a¹代表n時(shí)，r^1a代表氫或甲基，

或

當(dāng)a¹代表c-h時(shí)，r^1a代表氫、氟或氯，

r^1b代表氫或氟，

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表氫、甲基或乙基，

r^5b代表氫、氟、三氟甲基、甲基或乙基，

其中甲基和乙基可被氟至多三取代，

或

r^5a和r^5b與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)丙基環(huán)，

r²代表2,2,2-三氟乙-1-基、苯基或吡啶基，

其中苯基被1至3個(gè)氟取代基取代，

以及

其中吡啶基被氟單取代，

r³代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

r⁴代表氫、(c1-c6)-烷基、(c3-c6)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、5元或6元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基或-or¹⁴，

其中(c1-c6)-烷基可被彼此獨(dú)立地選自二氟甲基、三氟甲基、(c3-c6)-環(huán)烷基、羥基、氧代、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、苯基、4元至6元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基的1或2個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基和4元至6元雜環(huán)基分別彼此獨(dú)立地可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基、氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中苯基和5元或6元雜芳基分別彼此獨(dú)立地可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多三取代，

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰分別彼此獨(dú)立地代表(c1-c4)-烷基，

其中(c1-c4)-烷基可被氟取代至多五次，

r¹⁶代表氫或(c1-c4)-烷基，

r¹⁷代表(c1-c4)-烷基或(c3-c6)-環(huán)烷基，

r¹⁸和r¹⁹彼此獨(dú)立地代表氫或可被氟至多五取代的(c1-c4)-烷基，

或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基可被選自(c1-c4)-烷基、羥基、氨基、氰基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中(c2-c6)-烯基可被氟至多三取代，

以及其中5元或6元雜環(huán)基可被選自氧代、(c1-c4)-烷基、羥基和氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中5元或6元雜芳基和苯基分別彼此獨(dú)立地可被選自鹵素、(c1-c4)-烷基、氰基和(c3-c5)-環(huán)烷基的一個(gè)取代基取代，以及其中

r¹⁴代表可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，或代表(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中5元或6元雜環(huán)可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。

在本發(fā)明的上下文中，特別優(yōu)選式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，其中

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表甲基，

r^5b代表甲基或三氟甲基，

r²代表下式的苯基基團(tuán)，

其中

#代表與亞甲基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

r²²和r²⁴分別彼此獨(dú)立地代表氫或氟，

r²³代表氟，

或

r²代表3-氟吡啶-2-基，

r³代表氫或甲基，

r⁴代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

其中(c1-c4)-烷基可被選自羥基、氨基、甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和環(huán)丙基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

以及其中環(huán)丙基可被氰基取代，

及其鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表氫、甲基或乙基，

r^5b代表氫、氟、三氟甲基、甲基或乙基，

其中甲基和乙基可被氟至多三取代，

或

r^5a和r^5b與它們所連接的碳原子一起形成環(huán)丙基環(huán)，

r²代表2,2,2-三氟乙-1-基、苯基或吡啶基，

其中苯基被1至3個(gè)氟取代基取代，

以及

其中吡啶基被氟單取代。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表甲基，

r^5b代表甲基或三氟甲基。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表甲基，

r^5b代表甲基。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

l代表#¹-cr^5ar^5b-(cr^6ar^6b)m-#²基團(tuán)，其中

#¹代表與羰基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

#²代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，

m代表數(shù)字0，

r^5a代表甲基，

r^5b代表三氟甲基。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r²代表下式的苯基基團(tuán)

其中

#代表與亞甲基基團(tuán)的連接位點(diǎn)，

r²²和r²⁴分別獨(dú)立地代表氫或氟，

r²³代表氟。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r²代表3-氟吡啶-2-基。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r³代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

r⁴代表氫、(c1-c6)-烷基、(c3-c6)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、5元或6元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基或-or¹⁴，

其中(c1-c6)-烷基可被彼此獨(dú)立地選自二氟甲基、三氟甲基、(c3-c6)-環(huán)烷基、羥基、氧代、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、苯基、4元至6元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基的1或2個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基和4元至6元雜環(huán)基分別獨(dú)立地可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基、氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中苯基和5元或6元雜芳基分別獨(dú)立地可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多三取代，

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰分別獨(dú)立地代表(c1-c4)-烷基，

其中(c1-c4)-烷基可被氟取代至多五次，

r¹⁶代表氫或(c1-c4)-烷基，

r¹⁷代表(c1-c4)-烷基或(c3-c6)-環(huán)烷基，

r¹⁸和r¹⁹彼此獨(dú)立地代表氫或可被氟至多五取代的(c1-c4)-烷基，

或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基可被選自(c1-c4)-烷基、羥基、氨基、氰基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中(c2-c6)-烯基可被氟至多三取代，

以及其中5元或6元雜環(huán)基可被選自氧代、(c1-c4)-烷基、羥基和氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中5元或6元雜芳基和苯基分別獨(dú)立地可被選自鹵素、(c1-c4)-烷基、氰基和(c3-c5)-環(huán)烷基的一個(gè)取代基取代，

以及其中

r¹⁴代表可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，或代表(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中5元或6元雜環(huán)可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r³代表氫，

r⁴代表氫、(c1-c6)-烷基、(c3-c6)-環(huán)烷基、(c2-c6)-烯基、5元或6元雜環(huán)基、苯基、5元或6元雜芳基或-or¹⁴，

其中(c1-c6)-烷基可被彼此獨(dú)立地選自二氟甲基、三氟甲基、(c3-c6)-環(huán)烷基、羥基、氧代、-or¹⁵、-nr¹⁶-(c＝o)-r¹⁷、-nr¹⁸r¹⁹、-(c＝o)-nr¹⁸r¹⁹、-s(o)p-r²⁰、苯基、4元至6元雜環(huán)基和5元或6元雜芳基的1或2個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基和4元至6元雜環(huán)基分別獨(dú)立地可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基、氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及

其中苯基和5元或6元雜芳基分別獨(dú)立地可被(c1-c4)-烷基取代，并且還可被氟至多三取代，

p代表數(shù)字0、1或2，

r¹⁵和r²⁰分別獨(dú)立地代表(c1-c4)-烷基，

其中(c1-c4)-烷基可被氟取代至多五次，

r¹⁶代表氫或(c1-c4)-烷基，

r¹⁷代表(c1-c4)-烷基或(c3-c6)-環(huán)烷基，

r¹⁸和r¹⁹彼此獨(dú)立地代表氫或可被氟至多五取代的(c1-c4)-烷基，

或

r¹⁸和r¹⁹與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中(c3-c6)-環(huán)烷基可被選自(c1-c4)-烷基、羥基、氨基、氰基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中(c2-c6)-烯基可被氟至多三取代，

以及其中5元或6元雜環(huán)基可被選自氧代、(c1-c4)-烷基、羥基和氨基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代，

以及其中5元或6元雜芳基和苯基分別獨(dú)立地可被選自鹵素、(c1-c4)-烷基、氰基和(c3-c5)-環(huán)烷基的一個(gè)取代基取代，

以及其中

r¹⁴代表可被氟至多五取代的(c1-c6)-烷基，或代表(c3-c6)-烯基，

或

r³和r⁴與它們所連接的氮原子一起形成5元或6元雜環(huán)，

其中所述5元或6元雜環(huán)可被選自(c1-c4)-烷基、氧代、羥基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多四取代。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r³代表氫或甲基，

r⁴代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

其中(c1-c4)-烷基可被選自羥基、氨基、甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和環(huán)丙基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代，

以及其中環(huán)丙基可被氰基取代。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r³代表氫，

r⁴代表氫、(c1-c4)-烷基或環(huán)丙基，

其中(c1-c4)-烷基可被選自羥基、氨基、甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和環(huán)丙基的一個(gè)取代基取代，并且還可被氟至多三取代。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中

r³和r⁴代表氫。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)，其中

a¹代表n或c-h，

當(dāng)a¹代表氮時(shí)，r^1a代表氫或甲基，

或

當(dāng)a¹代表c-h時(shí)，r^1a代表氫、氟或氯，

r^1b代表氫或氟，

r^1c代表氫或甲基，

r^1d代表氫、甲基或氟，

r^1e代表氫或氯。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)。

本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案包括式(i)的化合物，其中環(huán)q代表下式的基團(tuán)

其中

*代表與-ch2-r²的連接位點(diǎn)，

**代表與嘧啶環(huán)的連接位點(diǎn)。

在基團(tuán)的各種組合或優(yōu)選組合中具體說(shuō)明的各個(gè)基團(tuán)定義，獨(dú)立于分別說(shuō)明的基團(tuán)組合，也可按需替換為其它組合的基團(tuán)定義。

非常特別優(yōu)選兩個(gè)或更多上述優(yōu)選范圍的組合。

作為優(yōu)選的、特別優(yōu)選的和非常特別優(yōu)選的以及具體的實(shí)施方案說(shuō)明的基團(tuán)定義既適用于式(i)的化合物，相應(yīng)地也適用于所有起始物料和中間體。

本發(fā)明還提供一種制備本發(fā)明的式(i)的化合物的方法，其特征在于，使式(ii)的化合物

其中n、l、q、r¹和r²各自具有上文給出的含義，

在第一步中在合適的堿水溶液或酸水溶液的存在下進(jìn)行反應(yīng)，得到本發(fā)明的式(i-a)的羧酰胺

其中n、l、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義，

并任選地，在第二步中在惰性溶劑中在合適的酸水溶液或堿水溶液的存在下，將羧酰胺(i-a)轉(zhuǎn)化成式(iii)的羧酸，

其中n、l、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義，

隨后在第三步中，隨著羧酸官能團(tuán)的活化，使式(iii)的羧酸與式(iv)的胺化合物反應(yīng)

其中r³和r⁴分別具有上文給出的含義，以得到本發(fā)明的式(i-b)的羧酰胺

其中n、l、q、r¹、r²、r³和r⁴分別具有上文給出的含義，

然后脫去所存在的任何保護(hù)基團(tuán)，并且任選用合適的(i)溶劑和/或(ii)酸或堿，任選地將所得到的式(i-a)和(i-b)的化合物轉(zhuǎn)化成它們的溶劑合物、鹽和/或所述鹽的溶劑合物。

式(i-a)和(i-b)的化合物共同構(gòu)成本發(fā)明的式(i)的化合物組。

在第一步中化合物(ii)的腈基水解得到式(i-a)的化合物優(yōu)選在堿水溶液的存在下進(jìn)行。用于腈基水解的合適的堿通常為堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀或氫氧化鋇；或堿金屬碳酸鹽或堿土金屬碳酸鹽，如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸鈣。優(yōu)選使用氫氧化鈉(氫氧化鈉水溶液)。

反應(yīng)(ii)→(i-a)通常在惰性溶劑中在+20℃至+100℃、優(yōu)選+75℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。所述反應(yīng)可在大氣壓力、升高的壓力或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進(jìn)行。通常，所述反應(yīng)在大氣壓力下進(jìn)行。

用于反應(yīng)(ii)→(i-a)的合適的惰性溶劑為水、四氫呋喃、1,4-二噁烷或乙二醇二甲醚，或其他溶劑如二甲基甲酰胺或二甲基亞砜。也可以使用所述溶劑的混合物。優(yōu)選使用二噁烷或二甲基亞砜。

在第二步中化合物(i-a)的酰胺基團(tuán)水解得到式(iii)的化合物優(yōu)選在酸水溶液的存在下進(jìn)行。

用于反應(yīng)(i-a)→(iii)的合適的酸通常為硫酸、氯化氫/鹽酸、溴化氫/氫溴酸或乙酸或其混合物，任選地加入水。優(yōu)選使用鹽酸或鹽酸與乙酸的混合物。

反應(yīng)(i-a)→(iii)可在惰性溶劑如水、thf、1,4-二噁烷、dmf或dmso中進(jìn)行，或在不存在溶劑的情況下進(jìn)行。也可以使用所述溶劑的混合物。所述反應(yīng)通?？稍?20℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。轉(zhuǎn)化可在大氣壓力、升高的壓力或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進(jìn)行。優(yōu)選地，所述反應(yīng)在不存在溶劑的情況下，優(yōu)選在75-100℃的溫度范圍內(nèi)在大氣壓力下進(jìn)行。

偶聯(lián)反應(yīng)(iii)+(iv)→(i-b)[酰胺形成]可通過(guò)借助于縮合劑或活化劑的直接途徑進(jìn)行或者經(jīng)由由(iii)可獲得的碳酰氯或羰基咪唑化物中間體階段進(jìn)行。

這種合適的縮合劑或活化劑為，例如，碳二亞胺如n,n'-二乙基碳二亞胺、n,n'-二丙基碳二亞胺、n,n'-二異丙基碳二亞胺、n,n'-二環(huán)己基碳二亞胺(dcc)或n-(3-二甲基氨基丙基)-n'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(edc)；光氣衍生物如n,n'-羰基二咪唑(cdi)或氯甲酸異丁酯；1,2-噁唑鎓(1,2-oxazolium)化合物如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓3-硫酸鹽或2-叔丁基-5-甲基異噁唑鎓高氯酸鹽；酰氨基化合物如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氫喹啉；氯烯胺(α-chlorenamines)如1-氯-n,n,2-三甲基丙-1-烯-1-胺；1,3,5-三嗪衍生物如4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉氯化物；磷化合物如正丙烷膦酸酐(ppa、t3p)、氰基膦酸二乙酯、二苯基磷?；B氮化物(dppa)、雙(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽或苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸鹽(pybop)；或脲化合物如o-(苯并三唑-1-基)-n,n,n′,n′-四甲基脲四氟硼酸鹽(tbtu)、o-(苯并三唑-1-基)-n,n,n′,n′-四甲基脲六氟磷酸鹽(hbtu)、o-(1h-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(tctu)、o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-n,n,n′,n′-四甲基脲六氟磷酸鹽(hatu)或2-(2-氧代-1-(2h)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(tptu)，任選地與其他助劑結(jié)合，所述其他助劑如1-羥基苯并三唑(hobt)，或n-羥基琥珀酰亞胺(hosu)，以及作為堿的堿金屬碳酸鹽(如碳酸鈉或碳酸鉀)或叔胺堿(如三乙胺、n-甲基嗎啉(nmm)、n-甲基哌啶(nmp)、n,n-二異丙基乙胺、吡啶或4-n,n-二甲基氨基吡啶(dmap)。優(yōu)選使用的縮合劑或活化劑是正丙烷膦酸酐結(jié)合作為堿的n,n-二異丙基乙胺或三乙胺。

在經(jīng)由由(iii)可獲得的碳酰氯或羰基咪唑化物的兩階段反應(yīng)方案的情況下，在常規(guī)堿的存在下進(jìn)行與胺組分(iv)的偶聯(lián)，所述常規(guī)堿例如為碳酸鈉或碳酸鉀、三乙胺、n,n-二異丙基乙胺、n-甲基嗎啉(nmm)、n-甲基哌啶(nmp)、吡啶、2,6-二甲基吡啶、4-n,n-二甲基氨基吡啶(dmap)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(dbn)、甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀、叔丁醇鈉或叔丁醇鉀、或氫化鈉或氫化鉀。在碳酰氯的情況下，所用的堿優(yōu)選為n,n-二異丙基乙胺。

用于所述偶聯(lián)反應(yīng)的惰性溶劑為——根據(jù)所使用的方法——例如醚如乙醚、二異丙醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷或雙(2-甲氧基乙基)醚；烴如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷或環(huán)己烷；鹵代烴如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯；或極性非質(zhì)子溶劑如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、丁腈、吡啶、二甲基亞砜(dmso)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、n,n'-二甲基亞丙基脲(dmpu)或n-甲基吡咯烷酮(nmp)。也可以使用這些溶劑的混合物。優(yōu)選使用1,2-二氯乙烷、四氫呋喃和n,n-二甲基甲酰胺或這些溶劑的混合物。偶聯(lián)通常在-20℃至+60℃、優(yōu)選在0℃至+60℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。

碳酰氯以常規(guī)方式通過(guò)用亞硫酰氯或草酰氯處理(iii)而制備，所述處理任選地在惰性溶劑如二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷中，任選地使用少量n,n-二甲基甲酰胺作為催化劑進(jìn)行。反應(yīng)通常在0℃至+30℃的溫度下進(jìn)行。

優(yōu)選的偶聯(lián)方法是由(iii)衍生的碳酰氯與胺化合物(iv)的反應(yīng)。

所述制備方法例如可通過(guò)以下合成方案(方案1和2)來(lái)說(shuō)明：

方案1

[a)：氫氧化鈉水溶液，二噁烷，80-90℃]。

方案2

[a)：濃鹽酸，80-95℃；b)：丙烷膦酸酐(t3p)，n,n-二異丙基乙胺，dmf，室溫至50℃；c)：socl2，0℃–>室溫；d)：n,n-二異丙基乙胺，二氯乙烷，室溫]

式(ii)的化合物由文獻(xiàn)已知(參見，例如，wo2013/104703)或可以類似于由文獻(xiàn)已知的方法來(lái)制備。

式(ii)的化合物可通過(guò)以下方法制備：使式(v)的化合物

其中n、l、q、r¹和r²分別如上文所定義，并且

x¹代表氯、溴或碘，

通過(guò)與氰化銅(i)在惰性溶劑中、任選地在合適的堿的存在下反應(yīng)而轉(zhuǎn)化成式(ii)的化合物

其中n、l、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義。

方法步驟(v)+氰化銅→(ii)在溶劑中進(jìn)行，所述溶劑在反應(yīng)條件下呈惰性。合適的溶劑為，例如，醚如乙醚、二噁烷、二甲氧基乙烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚，烴如苯、二甲苯、甲苯、己烷、環(huán)己烷或礦物油餾分，或其他溶劑如二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亞砜(dmso)、n,n'-二甲基亞丙基脲(dmpu)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、吡啶、乙腈或環(huán)丁砜。也可以使用所述溶劑的混合物。優(yōu)選dmso。

反應(yīng)(v)→(ii)通常在0℃至+200℃、優(yōu)選在+120℃至+180℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，任選在微波中進(jìn)行。轉(zhuǎn)化可在大氣壓力、升高的壓力或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進(jìn)行。通常，所述反應(yīng)在大氣壓下進(jìn)行。

式(v)的化合物由文獻(xiàn)已知(參見，例如，wo2013/104703、wo2013/030288)或可以類似于由文獻(xiàn)已知的方法來(lái)制備。

式(v)的化合物可通過(guò)以下方法制備：在第一步中，使式(vi)的化合物

其中n、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義，

在惰性溶劑中在合適的堿的存在下與式(vii)的化合物反應(yīng)

其中l(wèi)具有上文給出的含義，并且

t¹代表(c1-c4)-烷基

得到式(viii)的化合物

其中n、l、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義，

然后在第二步中，用亞硝酸異戊酯和鹵素等價(jià)物將式(viii)的化合物轉(zhuǎn)化成式(v)的化合物

其中n、l、q、r¹和r²分別具有上文給出的含義

并且

x¹代表氯、溴或碘。

優(yōu)選地，(v)中的x¹代表碘。

用于方法步驟(vi)+(vii)→(viii)的惰性溶劑為，例如，醇如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇，醚如乙醚、二噁烷、二甲氧基乙烷、四氫呋喃、乙二醇二甲基醚或二乙二醇二甲基醚，烴如苯、二甲苯、甲苯、己烷、環(huán)己烷或礦物油餾分，或其他溶劑如二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亞砜(dmso)、n,n'-二甲基亞丙基脲(dmpu)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、吡啶、乙腈、環(huán)丁砜或水。也可以使用所述溶劑的混合物。優(yōu)選叔丁醇或甲醇。

用于方法步驟(vi)+(vii)→(viii)的合適的堿為堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀；堿金屬碳酸鹽如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫；堿金屬碳酸氫鹽如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀；堿金屬醇鹽如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或叔丁醇鉀；或有機(jī)胺如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)或1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(dbn)。優(yōu)選叔丁醇鉀或甲醇鈉。

反應(yīng)(vi)+(vii)→(viii)通常在+20℃至+150℃、優(yōu)選在+75℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，任選在微波中進(jìn)行。轉(zhuǎn)化可在大氣壓力、升高的壓力或降低的壓力(例如0.5至5巴)下進(jìn)行。通常，反應(yīng)在大氣壓力下進(jìn)行。

方法步驟(viii)→(v)在有或沒有溶劑的情況下進(jìn)行。合適的溶劑是在反應(yīng)條件下為惰性的所有有機(jī)溶劑。優(yōu)選的溶劑是二甲氧基乙烷。

反應(yīng)(viii)→(v)通常在+20℃至+100℃、優(yōu)選在+50℃至+100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，任選在微波中進(jìn)行。轉(zhuǎn)化可在大氣壓力、升高的壓力或降低的壓力(例如在0.5至5巴的范圍內(nèi))下進(jìn)行。通常，反應(yīng)在大氣壓下進(jìn)行。

在轉(zhuǎn)化(viii)→(v)中，合適的鹵素源為，例如，二碘甲烷，碘化銫、碘和碘化銅(i)或溴化銅(ii)的混合物。

在二碘甲烷作為鹵素源的情況下，方法步驟(iv)→(v)以10至30mol亞硝酸異戊酯對(duì)10至30mol碘等價(jià)物的摩爾比例進(jìn)行，基于1mol式(iv)的化合物計(jì)。

上述制備方法可以以示例方式通過(guò)以下合成方案(方案3和方案4)來(lái)說(shuō)明：

方案3

[a)：kot-bu，叔丁醇；b)：二碘甲烷，亞硝酸異戊酯，二噁烷，85℃；c)氰化銅(i)，dmso]。

式(vi)的化合物由文獻(xiàn)已知(參見，例如，wo03/095451，實(shí)施例6a；wo2013/104703，實(shí)施例52a；wo2013/104598，實(shí)施例54a)或可如以下合成方案(方案4)制備。

方案4

[a)：水合肼，1,2-乙二醇；b)：亞硝酸異戊酯，nai，thf；c)：cs2co3，dmf；d)：cucn，dmso，e)：1.naome，meoh，2.nh4cl，乙酸]。

式(ix)的化合物由文獻(xiàn)已知(wo2007/041052)或可以類似于由文獻(xiàn)已知的方法[wo2013/004785和wo2011/149921]來(lái)制備。

式(vii)的化合物市售可得、由文獻(xiàn)已知或可以類似于文獻(xiàn)方法來(lái)制備。

詳細(xì)步驟和其他文獻(xiàn)參考也可見于實(shí)驗(yàn)部分、關(guān)于原料化合物和中間體的制備的部分。

本發(fā)明的化合物具有有價(jià)值的藥理學(xué)特性并可用于治療和/或預(yù)防人和動(dòng)物的病癥。

本發(fā)明的化合物起到可溶性鳥苷酸環(huán)化酶的有效刺激劑和磷酸二酯酶-5的抑制劑的作用，具有有用的藥理學(xué)特性并具有改進(jìn)的治療特性，例如在其體內(nèi)特性方面和/或其藥物動(dòng)力學(xué)特性和/或代謝特性方面。因此，它們適于治療和/或預(yù)防人和動(dòng)物的疾病。

本發(fā)明的化合物引起血管舒張和抑制血小板聚集，并導(dǎo)致血壓降低和冠狀血流增加。通過(guò)直接刺激可溶性鳥苷酸環(huán)化酶和增加細(xì)胞內(nèi)cgmp來(lái)介導(dǎo)這些作用。此外，本發(fā)明的化合物增強(qiáng)增加cgmp水平的物質(zhì)的作用，所述物質(zhì)例如edrf(內(nèi)皮衍生舒張因子)、no供體、原卟啉ix、花生四烯酸或苯肼衍生物。

本發(fā)明的化合物適于治療和/或預(yù)防心血管、肺、血栓栓塞和纖維化的病癥。

因此，本發(fā)明的化合物可以用在用于以下用途的藥物中：用于治療和/或預(yù)防心血管病癥，例如，高血壓、頑固性高血壓、急性和慢性心力衰竭、冠心病、穩(wěn)定型和不穩(wěn)定型心絞痛、外周血管和心臟血管病癥、心律失常、房性和室性心律失常和傳導(dǎo)紊亂(例如，i-iii度房室傳導(dǎo)阻滯(ab阻滯i-iii))、室上快速性心律失常、心房顫動(dòng)、心房撲動(dòng)、心室顫動(dòng)、心室撲動(dòng)、室性快速性心律失常、扭轉(zhuǎn)型室性心動(dòng)過(guò)速、房性和室性期外收縮、av-交接性期外收縮、病態(tài)竇房結(jié)綜合征、暈厥、av-結(jié)折返性心動(dòng)過(guò)速、沃-帕-懷綜合征(wolff-parkinson-whitesyndrome)、急性冠狀動(dòng)脈綜合征(acs)、自身免疫性心臟病癥(心包炎、心內(nèi)膜炎、心瓣炎、主動(dòng)脈炎、心肌疾病)、休克(如心源性休克、感染性休克和過(guò)敏性休克)、動(dòng)脈瘤、拳擊者心肌病(心室早發(fā)性收縮(pvc))；用于治療和/或預(yù)防血栓栓塞病癥和局部缺血如心肌局部缺血、心肌梗塞、中風(fēng)、心臟肥大、短暫的局部缺血性發(fā)作、先兆子癇、炎性心血管病癥、冠狀動(dòng)脈和外周動(dòng)脈痙攣、水腫形成(如肺水腫、腦水腫、腎水腫或心力衰竭導(dǎo)致的水腫)、外周循環(huán)障礙、再灌注損傷、動(dòng)脈和靜脈血栓形成、微量白蛋白尿、心肌功能不全、內(nèi)皮功能紊亂；用于預(yù)防再狹窄，例如溶栓治療后、經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)(pta)后、經(jīng)腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(ptca)后、心臟移植和搭橋手術(shù)后的再狹窄，以及微血管和大血管損傷(血管炎)、纖維蛋白原和低密度脂蛋白(ldl)水平升高和纖溶酶原激活物抑制劑1(pai-1)濃度升高；以及用于治療和/或預(yù)防勃起功能障礙和雌性性功能障礙。

在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“心力衰竭”包括急性和慢性的心力衰竭形式，以及更具體的或相關(guān)的疾病類型，如急性代償失調(diào)性心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、全心衰竭、局部缺血性心肌病、擴(kuò)張型心肌病、肥厚型心肌病、特發(fā)性心肌病、先天性心臟缺陷、與心臟瓣膜缺損相關(guān)的心力衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣關(guān)閉不全、主動(dòng)脈瓣狹窄、主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣關(guān)閉不全、肺動(dòng)脈瓣狹窄、肺動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全、復(fù)合性心臟瓣膜缺損、心肌炎癥(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心力衰竭、酒精中毒性心肌病、心臟貯積病癥、舒張性心力衰竭和收縮性心力衰竭，以及已存在的慢性心力衰竭的急性加重期(加重的心力衰竭)。

此外，本發(fā)明的化合物還可用于治療和/或預(yù)防動(dòng)脈硬化、紊亂的脂類代謝、低脂蛋白血癥、血脂異常(dyslipidemias)、高甘油三酸酯血癥、高脂血癥、高膽固醇血癥、無(wú)β脂蛋白血癥、谷固醇血癥、黃色瘤病、丹吉爾病、肥胖、肥胖癥以及混合性高脂血癥和代謝綜合征。

本發(fā)明的化合物還可用于治療和/或預(yù)防原發(fā)性和繼發(fā)性雷諾現(xiàn)象、微循環(huán)病癥、跛行、外周和自主神經(jīng)病、糖尿病性微血管病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性四肢潰瘍、壞疽、crest綜合征、全身性紅斑狼瘡病(erythematosis)、甲癬、風(fēng)濕病癥，以及用于促進(jìn)傷口愈合。本發(fā)明的化合物還適于治療肌萎縮癥，如becker-kiener肌肉萎縮癥(bmd)和duchenne肌肉萎縮癥(dmd)。

本發(fā)明的化合物還適于治療泌尿科病癥，例如良性前列腺綜合征(bps)、良性前列腺增生(bph)、良性前列腺增大(bpe)、膀胱出口梗阻(boo)、下泌尿道綜合征(luts，包括貓泌尿綜合征(fus))；泌尿生殖系統(tǒng)病癥，包括神經(jīng)原性膀胱過(guò)度活動(dòng)癥(oab)和(ic)，失禁(ui)，例如混合性尿失禁、急迫性尿失禁、壓迫性尿失禁或溢流性尿失禁(mui、uui、sui、oui)、骨盆痛、雄性和雌性泌尿生殖系統(tǒng)器官的良性和惡性病癥。

本發(fā)明的化合物還適于治療和/或預(yù)防腎病，特別是急性和慢性腎功能不全以及急性和慢性腎衰竭。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“腎功能不全”包括腎功能不全的急性和慢性表現(xiàn)，以及潛在或相關(guān)的腎臟病癥，如腎血流灌注不足、透析相關(guān)性低血壓、梗阻性尿路病、腎小球病、腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、腎小球硬化癥、腎小管間質(zhì)疾病、腎病病癥如原發(fā)性和先天性腎病、腎炎、免疫性腎病(如腎移植排斥和免疫復(fù)合物誘導(dǎo)的腎病、毒性物質(zhì)誘導(dǎo)的腎病、造影劑誘導(dǎo)的腎病)、糖尿病和非糖尿病性腎病、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓性腎硬化以及可通過(guò)以下進(jìn)行診斷性表征的腎病綜合征：例如肌酐和/或水排泄的異常減少；尿素、氮、鉀和/或肌酐的血液濃度的異常升高；腎臟酶(例如谷氨?；铣擅?的活性改變；尿液滲透壓或尿量的改變；微量白蛋白尿、巨量白蛋白尿的增加；腎小球和小動(dòng)脈損傷；腎小管擴(kuò)張；高磷酸鹽血癥和/或需要透析。本發(fā)明還涵蓋本發(fā)明化合物用于治療和/或預(yù)防腎功能不全后遺癥的用途，例如肺水腫、心力衰竭、尿毒癥、貧血、電解質(zhì)紊亂(例如高鉀血癥、低鈉血癥)以及骨代謝和碳水化合物代謝紊亂。

此外，本發(fā)明的化合物還適于治療和/或預(yù)防哮喘病癥、肺動(dòng)脈高壓(pah)以及肺高壓(ph)的其他形式(包括與左心疾病、hiv、鐮狀細(xì)胞貧血、血栓栓塞(cteph)、結(jié)節(jié)病、copd或肺纖維化相關(guān)的肺高壓)、慢性梗阻性肺疾病(copd)、急性呼吸窘迫綜合征(ards)、急性肺損傷(ali)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏(aatd)、肺纖維化、肺氣腫(例如香煙煙霧誘發(fā)的肺氣腫)和囊性纖維化(cf)。此外，所述化合物可用作支氣管擴(kuò)張劑。

在本發(fā)明中描述的化合物還是用于控制以no/cgmp系統(tǒng)紊亂為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的活性化合物。它們特別適于在認(rèn)知失調(diào)后改進(jìn)感知、注意力集中能力、學(xué)習(xí)能力或記憶能力，其中認(rèn)知失調(diào)如特別是伴隨以下狀況/疾病/綜合征發(fā)生的認(rèn)知失調(diào)：如輕度認(rèn)知失調(diào)、年齡相關(guān)的學(xué)習(xí)和記憶力失調(diào)、年齡相關(guān)的失憶、血管性癡呆、顱腦創(chuàng)傷、中風(fēng)、中風(fēng)后發(fā)生的癡呆(中風(fēng)后癡呆)、創(chuàng)傷后顱腦創(chuàng)傷、注意力集中的整體失調(diào)、在具有學(xué)習(xí)和記憶力困難的兒童中的注意集中失調(diào)、阿爾茨海默病、路維小體癡呆、伴隨額葉退化的癡呆(包括皮克氏綜合征、帕金森病、進(jìn)行性核性麻痹)、伴隨皮質(zhì)基底節(jié)變性的癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化癥(als)、亨廷頓氏舞蹈病、脫髓鞘、多發(fā)性硬化、丘腦退化、creutzfeldt-jakob癡呆、hiv癡呆、伴隨癡呆的精神分裂癥或科爾薩科夫氏精神病。它們還適于治療和/或預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥如焦慮、緊張和抑郁狀態(tài)，中樞神經(jīng)相關(guān)的性功能障礙和睡眠障礙，以及適于控制食物、興奮劑和成癮性藥物攝取的病理性失調(diào)。

此外，本發(fā)明的化合物還適于控制腦血流并且是控制偏頭痛的有效試劑。它們還適于預(yù)防和控制腦梗死(腦卒中)后遺癥，如中風(fēng)、腦局部缺血和顱腦創(chuàng)傷。本發(fā)明的化合物同樣可用于控制疼痛狀況和耳鳴。

此外，本發(fā)明的化合物有抗炎作用，并因此可用做治療和/或預(yù)防以下疾病的抗炎劑：敗血癥(sirs)、多器官衰竭(mods、mof)、腎臟的炎性病癥、慢性腸炎(ibd、克羅恩氏病、uc)、胰腺炎、腹膜炎、類風(fēng)濕性病、炎性皮膚病和炎性眼病。

此外，本發(fā)明的化合物還可用于治療和/或預(yù)防自身免疫性疾病。

本發(fā)明的化合物還適于治療和/或預(yù)防內(nèi)臟器官(例如肺、心臟、腎臟、骨髓以及特別是肝臟)的纖維化病癥，以及皮膚病學(xué)纖維化和眼的纖維化病癥。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)纖維化病癥特別包括以下術(shù)語(yǔ)：肝纖維化、肝硬化、肺纖維化、心內(nèi)膜心肌纖維化、腎病、腎小球性腎炎、間質(zhì)性腎纖維化、由糖尿病引起的纖維化損傷、骨髓纖維化及相似的纖維化病癥、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、增生性瘢痕(包括外科手術(shù)后增生性瘢痕)、痣、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變和結(jié)締組織病癥(例如結(jié)節(jié)病)。

本發(fā)明的化合物還適于控制術(shù)后瘢痕，例如由青光眼手術(shù)導(dǎo)致的瘢痕。

本發(fā)明的化合物還可在美容方面被用于老化和角質(zhì)化的皮膚。

此外，本發(fā)明的化合物適于治療和/或預(yù)防肝炎、腫瘤、骨質(zhì)疏松癥、青光眼和胃輕癱。

本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防病癥、特別是上文提及的病癥的用途。

本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動(dòng)脈高壓、局部缺血、血管病癥、腎功能不全、血栓栓塞病癥、纖維化病癥、動(dòng)脈硬化、癡呆病癥和勃起功能障礙的用途。

本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用于治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動(dòng)脈高壓、局部缺血、血管病癥、腎功能不全、血栓栓塞病癥、纖維化病癥、動(dòng)脈硬化、癡呆病癥和勃起功能障礙的方法中。

本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用于制備治療和/或預(yù)防病癥、特別是上文提及的病癥的藥物的用途。

本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物用于制備治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動(dòng)脈高壓、局部缺血、血管病癥、腎功能不全、血栓栓塞病癥、纖維化病癥、動(dòng)脈硬化、癡呆病癥和勃起功能障礙的藥物的用途。

本發(fā)明還提供一種使用有效量的至少一種本發(fā)明的化合物治療和/或預(yù)防病癥、特別是上文提及的病癥的方法。

本發(fā)明還提供一種使用有效量的至少一種本發(fā)明的化合物來(lái)治療和/或預(yù)防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動(dòng)脈高壓、局部缺血、血管病癥、腎功能不全、血栓栓塞病癥、纖維化病癥、動(dòng)脈硬化、癡呆病癥和勃起功能障礙的方法。

本發(fā)明的化合物可被單獨(dú)使用或，如果需要的話，與其他活性化合物結(jié)合使用。本發(fā)明還提供藥物，其包含至少一種本發(fā)明的化合物以及一種或多種其他活性化合物，特別用于治療和/或預(yù)防上述病癥的活性化合物。適合結(jié)合物的活性化合物的優(yōu)選實(shí)例包括：

·有機(jī)硝酸酯和no供體，例如硝普鈉、硝化甘油、單硝酸異山梨酯、二硝酸異山梨酯、嗎多明(molsidomine)或sin-1、以及吸入性no；

·抑制環(huán)單磷酸鳥苷(cgmp)分解的化合物，例如磷酸二酯酶(pde)1、2和/或5的抑制劑，特別是pde5抑制劑如西地那非、伐地那非和他達(dá)拉非；

·抗血栓形成劑，例如并優(yōu)選選自血小板聚集抑制劑、抗凝血?jiǎng)┗蜓w維蛋白溶酶物(profibrinolyticsubstance)；

·降血壓的活性化合物，例如并優(yōu)選選自鈣拮抗劑、血管緊張素aii拮抗劑、ace抑制劑、內(nèi)皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑以及利尿劑；和/或

·改變脂類代謝的活性化合物，例如并優(yōu)選選自甲狀腺受體激動(dòng)劑、膽固醇合成抑制劑(例如并優(yōu)選hmg-coa還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑)、acat抑制劑、cetp抑制劑、mtp抑制劑、ppar-α、ppar-γ和/或ppar-δ激動(dòng)劑、膽固醇吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑和脂蛋白(a)拮抗劑。

抗血栓形成劑優(yōu)選理解為意指選自血小板聚集抑制劑、抗凝血?jiǎng)┗蜓w維蛋白溶酶物的化合物。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與血小板聚集抑制劑聯(lián)合給藥，所述血小板聚集抑制劑例如并優(yōu)選阿司匹林、氯吡格雷(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidine)或雙嘧達(dá)莫(dipyridamole)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與凝血酶抑制劑聯(lián)合給藥，所述凝血酶抑制劑例如并優(yōu)選希美加群(ximelagatran)、達(dá)比加群(dabigatran)、美拉加群(melagatran)、比伐盧定(bivalirudin)或克賽(clexane)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與gpiib/iiia拮抗劑聯(lián)合給藥，所述gpiib/iiia拮抗劑例如并優(yōu)選替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與因子xa抑制劑聯(lián)合給藥，所述因子xa抑制劑例如并優(yōu)選利伐沙班(rivaroxaban)、du-176b、阿哌沙班(apixaban)、奧米沙班(otamixaban)、非地沙班(fidexaban)、雷扎沙班(razaxaban)、磺達(dá)肝癸鈉(fondaparinux)、艾卓肝素(idraparinux)、pmd-3112、ym-150、kfa-1982、emd-503982、mcm-17、mln-1021、dx9065a、dpc906、jtv803、ssr-126512或ssr-128428。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與肝素或低分子量(lmw)肝素衍生物聯(lián)合給藥。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與維生素k拮抗劑(例如并優(yōu)選香豆素)聯(lián)合給藥。

降血壓劑優(yōu)選理解為意指選自以下的化合物：鈣拮抗劑、血管緊張素aii拮抗劑、ace抑制劑、內(nèi)皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑和利尿劑。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與鈣拮抗劑聯(lián)合給藥，所述鈣拮抗劑例如并優(yōu)選硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、維拉帕米(verapamil)或地爾硫卓(diltiazem)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與α-1-受體阻斷劑聯(lián)合給藥，所述α-1-受體阻斷劑例如并優(yōu)選哌唑嗪(prazosin)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與β-受體阻斷劑聯(lián)合給藥，所述β-受體阻斷劑例如并優(yōu)選普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、噻嗎洛爾(timolol)、吲哚洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、布拉洛爾(bupranolol)、美替洛爾(metipranolol)、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、卡拉洛爾(carazalol)、索他洛爾(sotalol)、美托洛爾(metoprolol)、倍他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達(dá)洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾(landiolol)、奈比洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與血管緊張素aii拮抗劑聯(lián)合給藥，所述血管緊張素aii拮抗劑的優(yōu)選實(shí)例為洛沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)或恩布沙坦(embursatan)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與ace抑制劑聯(lián)合給藥，所述ace抑制劑例如并優(yōu)選依那普利(enalapril)、卡托普利(captopril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、奎諾普利(quinopril)、培哚普利(perindopril)或泉多普利(trandopril)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與內(nèi)皮素拮抗劑聯(lián)合給藥，所述內(nèi)皮素拮抗劑例如并優(yōu)選波生坦(bosentan)、達(dá)盧生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)或西他生坦(sitaxsentan)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與腎素抑制劑聯(lián)合給藥，所述腎素抑制劑例如并優(yōu)選阿利吉侖(aliskiren)、spp-600或spp-800。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑聯(lián)合給藥，所述鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑例如并優(yōu)選螺內(nèi)酯(spironolactone)或依普利酮(eplerenone)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與下述物質(zhì)聯(lián)合給藥：袢利尿劑(例如呋塞米(furosemide)、托拉塞米(torasemide)、布美他尼(bumetanide)和吡咯他尼(piretanide))、保鉀利尿劑(例如阿米洛利(amiloride)和氨苯蝶啶(triamterene))、醛固酮拮抗劑(例如螺內(nèi)酯、坎利酸鉀(potassiumcanrenoate)和依普利酮(eplerenone))以及噻嗪類利尿劑(例如氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、希帕胺(xipamide)和吲達(dá)帕胺(indapamide))。

脂類代謝調(diào)節(jié)劑優(yōu)選理解為意指選自以下的化合物：cetp抑制劑、甲狀腺受體激動(dòng)劑、膽固醇合成抑制劑如hmg-coa還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑、acat抑制劑、mtp抑制劑、ppar-α、ppar-γ和/或ppar-δ激動(dòng)劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑和脂蛋白(a)拮抗劑。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與cetp抑制劑聯(lián)合給藥，所述cetp抑制劑例如并優(yōu)選達(dá)塞曲匹(dalcetrapib)、bay60-5521、安塞曲匹(anacetrapib)或cetp疫苗(ceti-1)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與甲狀腺受體激動(dòng)劑聯(lián)合給藥，所述甲狀腺受體激動(dòng)劑例如并優(yōu)選d-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲狀腺原氨酸(t3)、cgs23425或阿昔替羅(axitirome)(cgs26214)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與他汀類的hmg-coa還原酶抑制劑聯(lián)合給藥，所述他汀類的hmg-coa還原酶抑制劑例如并優(yōu)選洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、羅伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與角鯊烯合成抑制劑聯(lián)合給藥，所述角鯊烯合成抑制劑例如并優(yōu)選bms-188494或tak-475。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與acat抑制劑聯(lián)合給藥，所述acat抑制劑例如并優(yōu)選阿伐麥布(avasimibe)、甲亞油酰胺(melinamide)、帕替麥布(pactimibe)、依魯麥布(eflucimibe)或smp-797。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與mtp抑制劑聯(lián)合給藥，所述mtp抑制劑例如并優(yōu)選英普他派(implitapide)、bms-201038、r-103757或jtt-130。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與ppar-γ激動(dòng)劑聯(lián)合給藥，所述ppar-γ激動(dòng)劑例如并優(yōu)選吡格列酮(pioglitazone)或羅格列酮(rosiglitazone)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與ppar-δ激動(dòng)劑聯(lián)合給藥，所述ppar-δ激動(dòng)劑例如并優(yōu)選gw501516或bay68-5042。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與膽固醇吸收抑制劑聯(lián)合給藥，所述膽固醇吸收抑制劑例如并優(yōu)選依澤替米貝(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕馬苷(pamaqueside)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與脂肪酶抑制劑聯(lián)合給藥，所述脂肪酶抑制劑例如并優(yōu)選奧利司他(orlistat)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與聚合膽汁酸吸附劑聯(lián)合給藥，所述聚合膽汁酸吸附劑例如并優(yōu)選消膽胺(cholestyramine)、考來(lái)替泊(colestipol)、考來(lái)索文(colesolvam)、考來(lái)膠(cholestagel)或考來(lái)替蘭(colestimide)。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與膽汁酸再吸收抑制劑聯(lián)合給藥，所述膽汁酸再吸收抑制劑例如并優(yōu)選asbt(＝ibat)抑制劑，例如azd-7806、s-8921、ak-105、bari-1741、sc-435或sc-635。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與脂蛋白(a)拮抗劑聯(lián)合給藥，所述脂蛋白(a)拮抗劑例如并優(yōu)選吉卡賓鈣(gemcabenecalcium)(ci-1027)或煙酸。

本發(fā)明還提供包含至少一種本發(fā)明的化合物、通常連同一種或多種惰性的、非毒性的、藥學(xué)上合適的賦形劑的藥物，以及其用于上文提及的目的的用途。

本發(fā)明的化合物可全身地和/或局部地作用。為此目的，其可以適合的方式給藥，例如通過(guò)口服、腸胃外、肺、鼻、舌下、舌、頰、直腸、真皮、透皮、結(jié)膜或耳途徑給藥，或作為植入物或支架給藥。

對(duì)于這些給藥途徑，本發(fā)明的化合物可以以合適的給藥形式給藥。

用于口服給藥的合適給藥形式為這樣的給藥形式：所述給藥形式根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)發(fā)揮作用，快速和/或以緩和的方式釋放本發(fā)明的化合物并且含有晶體和/或無(wú)定形化的和/或溶解的形式的本發(fā)明化合物，例如片劑(未包衣或包衣片劑，例如具有耐胃液的包衣或延緩溶解的包衣或不溶性的包衣，所述包衣控制本發(fā)明化合物的釋放)、在口腔中迅速崩解的片劑或膜劑/扁片劑(oblate)、膜劑/凍干劑、膠囊劑(例如硬明膠或軟明膠膠囊劑)、糖衣片劑、顆粒劑、丸劑、粉劑、乳劑、懸浮劑、氣霧劑或溶液劑。

腸胃外給藥可以在避開吸收步驟的情況下(例如通過(guò)靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、心內(nèi)、脊柱內(nèi)或腰椎內(nèi)途徑)或在包括吸收的情況下(例如通過(guò)肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、透皮或腹膜內(nèi)途徑)進(jìn)行。適于腸胃外給藥的劑型包括溶液劑、懸浮劑、乳劑、凍干劑或無(wú)菌粉末劑形式的注射和輸液用制劑。

對(duì)于其他的給藥途徑，合適的實(shí)例為可吸入藥物形式(包括粉末吸入劑、霧化劑)、滴鼻劑、溶液劑或噴霧劑；用于舌、舌下或頰給藥的片劑、膜劑/扁片劑或膠囊劑；栓劑、耳用或眼用制劑、陰道膠囊劑、水性懸浮劑(洗劑、振蕩合劑)、親脂性懸浮劑、軟膏劑、乳膏劑、透皮治療系統(tǒng)(例如貼劑)、乳劑、糊劑、泡沫劑、灑粉劑、植入物或支架。

優(yōu)選口服或腸胃外給藥，特別是口服給藥。

本發(fā)明的化合物可轉(zhuǎn)化成所述給藥形式。這可用本身已知的方式通過(guò)與惰性的、無(wú)毒的、藥學(xué)上合適的賦形劑混合來(lái)完成。這些賦形劑包括載體(例如微晶纖維素、乳糖、甘露醇)、溶劑(例如液體聚乙二醇)、乳化劑和分散劑或潤(rùn)濕劑(例如十二烷基硫酸鈉、聚氧脫水山梨糖醇油酸酯)、粘結(jié)劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、穩(wěn)定劑(例如抗氧化劑，例如抗壞血酸)、著色劑(例如無(wú)機(jī)顏料，例如氧化鐵)以及調(diào)味劑(flavor)和/或氣味矯正劑(odorcorrectant)。

通常，已發(fā)現(xiàn)有利的是，在腸胃外給藥的情況下，給藥量約為0.001至1mg/kg體重，優(yōu)選約0.01至0.5mg/kg體重以獲得有效結(jié)果。在口服給藥的情況下，劑量為約0.001至2mg/kg體重，優(yōu)選約0.001至1mg/kg體重。

然而，在有些情況下，可能必須偏離所述量，特別是根據(jù)體重、給藥途徑、對(duì)活性組分的個(gè)體響應(yīng)、制劑性質(zhì)以及給藥時(shí)間或給藥間隔進(jìn)行偏離。因此，在有些情況下，小于上述最小量可能是足夠的，而在其他情況下，必須超過(guò)所述上限。在較大量給藥的情況下，建議將這些劑量分成一天內(nèi)的幾個(gè)單獨(dú)劑量。

以下工作實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明。本發(fā)明不限于所述實(shí)施例。

除非另有說(shuō)明，以下測(cè)試和實(shí)施例中的百分比均為重量百分比；份為重量份。除非另有說(shuō)明，液體/液體溶液的溶劑比、稀釋比和濃度數(shù)據(jù)分別基于體積計(jì)。

a.實(shí)施例

縮寫和首字母縮略詞：

abs.無(wú)水的

aq.水溶液

calc.計(jì)算值

boc叔丁氧基羰基

br.s寬單峰(在nmr中)

cbz芐氧基羰基

δnmr譜中的位移(以ppm表示)

d雙重峰(nmr耦合模式)

dad二極管列陣檢測(cè)器(用于uv檢測(cè))

tlc薄層色譜

dci直接化學(xué)電離(在ms中)

dd雙二重峰(nmr耦合模式)

ddt雙雙三重峰(nmr耦合模式)

dmfn,n-二甲基甲酰胺

dmso二甲基亞砜

ent對(duì)映體純；對(duì)映異構(gòu)體

eq.當(dāng)量

esi電噴霧電離(在ms中)

et乙基

h小時(shí)

hatu1-[雙(二甲基氨基)亞甲基]-1h-1,2,3-

三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷

酸鹽

(1-[bis(dimethylamino)methylene]-1

h-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium

3-oxidehexafluorophosphate)

hplc高壓、高效液相色譜

hrms高分辨率質(zhì)譜

conc.濃的(在溶液的情況下)

lc-ms與液相色譜聯(lián)用的質(zhì)譜

m多重峰

m摩爾濃度(在溶液中)

me甲基

min分鐘

ms質(zhì)譜

n當(dāng)量濃度(在溶液的情況下)

nmr核磁共振光譜

pdcl2(dppf)ch2cl21,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀

(ii)/二氯甲烷絡(luò)合物

ph苯基

q四重峰(nmr耦合模式)

quint.五重峰(nmr耦合模式)

rac外消旋的；外消旋體

rel相對(duì)立體化學(xué)

rt室溫(約20-25℃)

rt保留時(shí)間(在hplc、lc/ms中)

s單峰(nmr耦合模式)

sfc超臨界流體色譜

t三重峰(nmr耦合模式)

tbtu(苯并三唑-1-基氧基)雙二甲基氨基甲

基鎓氟硼酸鹽

((benzotriazol-1-yloxy)bisdimethyla

minomethyliumfluoroborate)

tfa三氟乙酸

thf四氫呋喃

uv紫外光譜

v/v(溶液的)體積與體積比

lc/ms和ms方法：

方法1(lc-ms)：

儀器：watersacquitysqduplc系統(tǒng)；柱：watersacquityuplchsst31.8μ，50×1mm；流動(dòng)相a：1l水+0.25ml99％濃度的甲酸，流動(dòng)相b：1l乙腈+0.25ml99％濃度的甲酸；梯度：0.0min90％a→1.2min5％a→2.0min5％a；烘箱溫度：50℃；流速：0.40ml/min；uv檢測(cè)：208-400nm。

方法2(lc-ms)：

儀器：watersacquitysqduplc系統(tǒng)；柱：watersacquityuplchsst31.8μ，50×1mm；流動(dòng)相a：1l水+0.25ml99％濃度的甲酸，流動(dòng)相b：1l乙腈+0.25ml99％濃度的甲酸；梯度：0.0min95％a→6.0min5％a→7.5min5％a；烘箱溫度：50℃；流速：0.35ml/min；uv檢測(cè)：210-400nm。

方法3(lc-ms)：

儀器：配有watersuplcacquity的micromassquattropremier；柱：thermohypersilgold1.9μ，50×1mm；流動(dòng)相a：1l水+0.5ml50％濃度的甲酸，流動(dòng)相b：1l乙腈+0.5ml50％濃度的甲酸；梯度：0.0min97％a→0.5min97％a→3.2min5％a→4.0min5％a；烘箱溫度：50℃；流速：0.3ml/min；uv檢測(cè)：210nm。

方法4(lc-ms)：

ms儀器：watersmicromassquattromicro；hplc儀器：agilent1100系列；柱：ymc-triartc183μ50×3mm；流動(dòng)相a：1l水+0.01mol碳酸銨，流動(dòng)相b：1l乙腈；梯度：0.0min100％a→2.75min5％a→4.5min5％a；烘箱溫度：40℃；流速：1.25ml/min；uv檢測(cè)：210nm。

方法5(lc-ms)：

ms儀器：waters(micromass)qm；hplc儀器：agilent1100系列；柱：agilentzorbaxextend-c183.5μ，3.0×50mm；流動(dòng)相a：1l水+0.01mol碳酸銨，流動(dòng)相b：1l乙腈；梯度：0.0min98％a→0.2min98％a→3.0min5％a→4.5min5％a；烘箱溫度：40℃；流速：1.75ml/min；uv檢測(cè)：210nm。

方法6(gc-ms)：

儀器：micromassgct，gc6890；柱：restekrtx-35，15m×200μm×0.33μm；恒定的氦氣流速：0.88ml/min；烘箱溫度：70℃；入口溫度：250℃；梯度：70℃，30℃/min→310℃(保持3min)。

方法7(lc-ms)：

ms儀器：agilentmsquad6150；hplc儀器：agilent1290；柱：watersacquityuplchsst31.8μ，50×2.1mm；流動(dòng)相a：1l水+0.25ml99％濃度的甲酸，流動(dòng)相b：1l乙腈+0.25ml99％濃度的甲酸；梯度：0.0min90％a→0.3min90％a→1.7min5％a→3.0min5％a；烘箱溫度：50℃；流速：1.20ml/min；uv檢測(cè)：205-305nm。

方法8(gc-ms)：

儀器：thermoscientificdsqii，thermoscientifictracegcultra；柱：restekrtx-35ms，15m×200μm×0.33μm；恒定的氦氣流速：1.20ml/min；烘箱溫度：60℃；入口溫度：220℃；梯度：60℃，30℃/min→300℃(保持3.33min)。

方法9(lc-ms)：

ms儀器：waterssqd；hplc儀器：watersuplc；柱：agilentzorbaxsb-aq，1.8μm，50×2.1mm；流動(dòng)相a：水+0.025％甲酸，流動(dòng)相b：乙腈(ulc)+0.025％甲酸；梯度：0.0min98％a-0.9min25％a-1.0min5％a-1.4min5％a-1.41min98％a-1.5min98％a；烘箱溫度：40℃；流速：0.600ml/min；uv檢測(cè)：dad；210nm。

方法10(制備型hplc)：

變型a)：ms儀器：waters，hplc儀器：waters；柱：watersx-bridgec185μm，19×50mm；流動(dòng)相a：水+0.05％氨，流動(dòng)相b：梯度的乙腈(ulc)；流速：40ml/min；uv檢測(cè)：dad；210-400nm。

變型b)：ms儀器：waters，hplc儀器：waters(柱phenomenexlunac18(2)axiatech.，5μm，50mm×21.2mm；流動(dòng)相a：水+0.05％甲酸，流動(dòng)相b：梯度的乙腈(ulc)；流速：40ml/min；uv檢測(cè)：dad；210-400nm)。

方法11(lc-ms)：

ms儀器：thermofisherscientificltq-orbitrap-xl；hplc儀器：agilent1200sl；柱：agilent，poroshell120sb-c182.7μm3×150mm；流動(dòng)相a：1l水+0.1％三氟乙酸；流動(dòng)相b：1l乙腈+0.1％三氟乙酸；梯度：0.0min2％b→1.5min2％b→15.5min95％b→18.0min95％b；烘箱溫度：40℃；流速：0.75ml/min；uv檢測(cè)：210nm。

其他細(xì)節(jié)：

在用制備型hplc通過(guò)上述方法(其中洗脫劑包含添加劑，例如三氟乙酸、甲酸或氨)純化本發(fā)明的化合物的情況下，如果本發(fā)明的化合物包含足夠的堿性或酸性官能團(tuán)，則本發(fā)明的化合物可以以鹽形式獲得，例如以三氟乙酸鹽、甲酸鹽或銨鹽的形式。這樣的鹽可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種方法轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的游離堿或游離酸。

此外，脒可以以游離化合物的形式存在或部分地(如果涉及乙酸，則取決于制備)以乙酸鹽或乙酸鹽溶劑合物的形式存在。

在下文所述的本發(fā)明的合成中間體和工作實(shí)施例的情況下，任何化合物以相應(yīng)的堿或酸的鹽的形式給出，通過(guò)相應(yīng)的制備和/或純化方法獲得的所述任何化合物通常是精確化學(xué)計(jì)量組成未知的鹽。因此，在這類鹽的情況下，除非更具體地說(shuō)明，否則名稱和結(jié)構(gòu)式的添加部分(如“鹽酸鹽”、“三氟乙酸鹽”、“鈉鹽”或“xhcl”、“xcf3cooh”、“xna+”)不應(yīng)以化學(xué)計(jì)量意義來(lái)理解，而僅是對(duì)其中存在的成鹽組分的描述性表征。

這也相應(yīng)地適用于如果合成中間體或工作實(shí)施例或其鹽是通過(guò)所述制備和/或純化方法以化學(xué)計(jì)量組成未知的溶劑合物如水合物(如果它們是一個(gè)定義型)的形式獲得的情況。

此外，本發(fā)明的仲酰胺可以旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體/異構(gòu)體混合物的形式存在，特別是在nmr研究中。純度數(shù)值通?；趌c/ms色譜圖中的相應(yīng)峰積分，但可能另外還借助了¹hnmr光譜而確定。如果沒有指出純度，那么根據(jù)lc/ms色譜圖中的自動(dòng)峰積分純度通常為100％，或者純度尚未明確確定。

如果指出純度<100％，那么所述的以理論值的％表示的產(chǎn)率通常就純度進(jìn)行了校正。在含溶劑或被污染的批次中，形式上的產(chǎn)率可能“>100％”；在此情況下，產(chǎn)率未就溶劑或純度進(jìn)行校正。

在所有¹hnmr光譜數(shù)據(jù)中，化學(xué)位移δ以ppm表示。

在以下段落中記錄的¹hnmr光譜中的質(zhì)子信號(hào)的多重性代表在每種情況下觀察到的信號(hào)形式，并未考慮任何較高階信號(hào)現(xiàn)象。一般來(lái)說(shuō)，所述化學(xué)位移指的是所討論的信號(hào)的中心。在寬多重峰的情況下，給出區(qū)間。被溶劑或水遮蔽的信號(hào)是暫時(shí)指定或尚未列出。顯著變寬的信號(hào)——例如由分子部分的快速轉(zhuǎn)動(dòng)引起或因?yàn)榻粨Q質(zhì)子——同樣是暫時(shí)指定(通常稱為寬多重峰或?qū)拞畏?或未列出。

熔點(diǎn)和熔點(diǎn)范圍(如果提及的話)是未校正的。

下文沒有明確描述其制備的所有反應(yīng)物或試劑是從普遍可得的來(lái)源購(gòu)得。對(duì)于下文同樣未描述其制備并且不可購(gòu)買獲得或從不普遍可得的來(lái)源獲得的所有其他反應(yīng)物或試劑，參考其中描述了其制備的公開文獻(xiàn)。

原料化合物和中間體：

實(shí)施例1a

5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺

首先將58g(340.03mmol)2-氯-5-氟-6-甲基煙腈(制備記載于wo2007/041052，實(shí)施例u-2，第80頁(yè))加入到1,2-乙二醇(580ml)中，然后加入水合肼(24.81ml)和56.09ml(340.03mmol)n,n-二異丙基乙胺。將混合物在80℃下攪拌16h，然后在120℃下攪拌6h。冷卻至室溫后，加入水(2.5l)和乙酸乙酯(2.5l)，并抽濾出所得固體。減壓干燥所獲得的固體。得到28.4g(理論值的47％)目標(biāo)化合物。

lc-ms(方法4):rt＝1.77min

ms(esipos):m/z＝167[m+h]⁺

實(shí)施例2a

5-氟-3-碘-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先將28g(168.5mmol)實(shí)施例1a的5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺加入到1.32lthf中，并將混合物冷卻至0℃。然后緩慢加入41.45ml(337.03mmol)三氟化硼乙醚絡(luò)合物。將反應(yīng)混合物冷卻至-10℃。然后緩慢加入25.66g(219.07mmol)亞硝酸異戊酯在166mlthf中的溶液，隨后將混合物再攪拌30min。然后將反應(yīng)溶液濃縮至其體積的約三分之一。然后加入988ml丙酮，并將溶液冷卻至0℃。向該溶液中逐滴加入32.84g(219.07mmol)碘化鈉在412ml丙酮中的溶液，然后將混合物在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物倒入5l冰水中并用乙酸乙酯萃取三次，每次使用750ml乙酸乙酯。將合并的有機(jī)相用750ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥，然后在減壓下濃縮。將粗產(chǎn)物使用硅膠純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯，梯度9:1至1:1)。得到14.90g(理論值的32％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.84min

ms(esipos):m/z＝278[m+h]⁺

實(shí)施例3a

1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-3-碘-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先將2.60g(9.37mmol)實(shí)施例2a的5-氟-3-碘-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶加入到35mldmf中。然后加入3.67g(11.26mmol)碳酸銫和1.94g(9.37mmol)1-(溴甲基)-2,3-二氟苯在10mldmf中的溶液，隨后將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入到200ml水中，并用乙酸乙酯萃取兩次。將收集的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，并濃縮產(chǎn)物級(jí)分。通過(guò)制備型hplc進(jìn)行進(jìn)一步純化(柱：sunfirec18，5μm，250×20mm；流動(dòng)相：12％水+85％甲醇+3％1％濃度的tfa水溶液；流速：25ml/min；溫度：40℃；波長(zhǎng)：210nm)。得到2.67g(理論值的71％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.29min

ms(esipos):m/z＝404[m+h]⁺

類似于實(shí)施例3a，通過(guò)使實(shí)施例2a的5-氟-3-碘-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶與1-(溴甲基)-2-氟苯、2-(溴甲基)-1,3,4-三氟苯或2-(氯甲基)-3-氟吡啶鹽酸鹽(1.1-1.5當(dāng)量)和碳酸銫(1.2-2當(dāng)量)在所述反應(yīng)條件(反應(yīng)時(shí)間：2-72h；溫度：室溫至60℃)下在dmf中進(jìn)行反應(yīng)而制備表1a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

方法a：將反應(yīng)混合物加入到水中，然后在室溫下攪拌約1h。濾出所形成的固體，用水洗滌并在高真空下干燥。

方法b：或者，將反應(yīng)混合物加入到水中并用乙酸乙酯萃取。將收集的有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法在硅膠上純化(流動(dòng)相：石油醚/乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇)。

方法c：或者，將反應(yīng)混合物用乙腈稀釋并通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa或0.05％甲酸)。

表1a：

¹⁾該起始原料在wo2013/104703(實(shí)施例50a)中已經(jīng)有所描述。

實(shí)施例7a

1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈

首先將2.47g(6.13mmol)實(shí)施例3a的1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-3-碘-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶與0.576g(6.43mmol)氰化銅(i)的混合物加入到在燒瓶中的12.1ml無(wú)水dmso中，所述燒瓶已通過(guò)加熱干燥，并將混合物在150℃下攪拌3h。向冷卻的反應(yīng)溶液中加入乙酸乙酯，并將混合物用半飽和氯化銨水溶液和濃氨水溶液(3/1)的混合物洗滌三次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并通過(guò)蒸發(fā)濃縮。將粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度：15/1至10/1；然后二氯甲烷/甲醇：10/1)。得到780mg目標(biāo)化合物(理論值的42％)。

lc-ms(方法1):rt＝1.19min

ms(esipos):m/z＝303[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝2.65(d,3h),5.87(s,2h),7.10-7.25(m,2h),7.39-7.48(m,1h),8.41(d,1h)。

類似于實(shí)施例7a，通過(guò)使合適的碘化物與氰化銅(i)(1.1-1.5當(dāng)量)在所述反應(yīng)條件(反應(yīng)時(shí)間：1-5h；溫度：150℃)下在dmso中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)制備表2a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

方法a：冷卻后，向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯，并將混合物用半飽和氯化銨水溶液和濃氨水溶液(3/1)的混合物洗滌三次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，并過(guò)濾，并在減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度：或二氯甲烷/甲醇梯度)。

方法b：或者，將反應(yīng)混合物用乙腈稀釋并通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa或0.05％甲酸)。

表2a：

¹⁾該原料在wo2013/104703(實(shí)施例51a)中已經(jīng)有所記載。

實(shí)施例11a

1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亞胺酰胺(carboximidamide)

首先將960mg(3.18mmol)實(shí)施例7a的1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈加入到9.47ml甲醇中。加入0.69ml(3.18mmol)甲醇鈉的甲醇溶液，隨后在室溫下攪拌混合物1h。然后再加入10ml甲醇，隨后將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌1h。加入204mg(3.81mmol)氯化銨和0.71ml(12.39mmol)乙酸，并將反應(yīng)混合物在回流下攪拌7h。在減壓下除去溶劑，并將殘余物與38ml1n氫氧化鈉水溶液一起在室溫下攪拌1h。然后濾出沉淀物并用水洗滌。得到1.0g目標(biāo)化合物(理論值的90％，純度90％)。

lc-ms(方法1):rt＝0.68min

ms(esipos):m/z＝320[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝2.60(d,3h),5.77(s,2h),6.62(br.s,3h),6.91-6.98(m,1h),7.11-7.20(m,1h),7.34-7.44(m,1h),8.29(d,1h)。

類似于實(shí)施例11a，通過(guò)使合適的腈與甲醇鈉(1.0-1.2當(dāng)量)的甲醇溶液，隨后與氯化銨(1.2-1.5當(dāng)量)和乙酸(3.5-5當(dāng)量)在所述反應(yīng)條件(加入氯化銨和乙酸后的反應(yīng)時(shí)間：5-24小時(shí)；溫度：回流)下反應(yīng)來(lái)制備表3a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

蒸發(fā)溶劑，并將殘余物與1n氫氧化鈉水溶液一起在室溫下攪拌0.5-2h。然后濾出沉淀物，用水洗滌，隨后干燥。

所獲得的目標(biāo)化合物可——如果合適，部分地——以乙酸鹽或乙酸鹽溶劑合物的形式存在。

表3a：

¹⁾該乙酸鹽原料在wo2013/104703(實(shí)施例52a)中已經(jīng)有所記載。

實(shí)施例15a

5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亞胺酰胺乙酸鹽

wo2013/004785，實(shí)施例14a，第69-70頁(yè)記載了所述化合物的制備。

實(shí)施例16a

6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-甲酰亞胺酰胺乙酸鹽

wo2013/104598，實(shí)施例54a，第97-98頁(yè)記載了所述化合物的制備。

實(shí)施例17a

4-氨基-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先將2.34g(6.67mmol；純度90％)實(shí)施例11a的1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亞胺酰胺加入到50.5ml叔丁醇中。然后加入1.33g(8.00mmol)3,3-二氰基新戊酸甲酯，隨后將混合物在回流下攪拌6h。再加入8ml叔丁醇，然后將混合物在回流下加熱過(guò)夜。冷卻至室溫后，加入水，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min。濾出所形成的沉淀物并用水洗滌。將固體在高真空下干燥。得到3.25g(理論值的99％，純度：92％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.03min

ms(esipos):m/z＝454[m+h]⁺

類似于實(shí)施例17a，通過(guò)使合適的甲酰亞胺酰胺(脒)與3,3-二氰基新戊酸甲酯(1.1-1.5當(dāng)量)在叔丁醇[向以乙酸鹽或乙酸鹽溶劑合物形式存在的脒中加入0.2-1.4當(dāng)量的叔丁醇鉀]中，在所述反應(yīng)條件(反應(yīng)時(shí)間：4-24h)下反應(yīng)來(lái)制備表4a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

向反應(yīng)混合物中加入水，并將混合物在室溫下攪拌30min。濾出所形成的沉淀物并用水洗滌。

表4a：

¹⁾該原料在wo2013/104703(實(shí)施例55a)中已經(jīng)有所記載。

實(shí)施例23a

3,3-二氰基-2-(三氟甲基)丙烯酸甲酯

journaloffluorinechemistry1991，第51卷，3，第323-334頁(yè)記載了該化合物的合成。

實(shí)施例24a

2-(二氰基甲基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酸甲酯

將3.00g(14.70mmol)實(shí)施例23a的3,3-二氰基-2-(三氟甲基)丙烯酸甲酯溶于四氫呋喃(30ml)中，并將溶液冷卻至0℃。然后逐滴加入7.35ml(22.05mmol)甲基氯化鎂(3m，在thf中)，使得溫度不超過(guò)5℃。添加結(jié)束后，將混合物再攪拌10min。然后向混合物中加入1n鹽酸水溶液，隨后將混合物用乙酸乙酯萃取。分離各相，并將含水相用乙酸乙酯再萃取兩次。合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。然后將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷，然后環(huán)己烷:乙酸乙酯9:1(體積:體積))。濃縮，得到3.24g(理論值的63％)標(biāo)題化合物。

¹h-nmr(400mhz,cdcl3):δ[ppm]＝1.81(s,3h),3.95(s,3h),4.48(s,1h)。

實(shí)施例25a

外消旋-4-氨基-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先將23.0g(66.02mmol)實(shí)施例15a的5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亞胺酰胺乙酸鹽加入到叔丁醇(400ml)中，并加入13.43g(119.68mmol)叔丁醇鉀。隨后，加入在叔丁醇(100ml)中的21.08g(95.75mmol)實(shí)施例24a的2-(二氰基甲基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酸甲酯，并將混合物在回流下加熱過(guò)夜。冷卻至室溫后，加入水，并將反應(yīng)混合物在室溫下再攪拌30min。濾出形成的沉淀物，并用水和少量乙醚洗滌。將固體在高真空下干燥。得到16.1g標(biāo)題化合物(理論值的51％)。

lc-ms(方法1):rt＝0.95min；

ms(esipos):m/z＝477[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.72(s,3h),5.96(s,2h),7.10(br.s,2h),7.42-7.48(m,1h),7.75-7.80(m,1h),8.27(d,1h),8.68(dd,1h),8.86(dd,1h),11.60(br.s,1h)。

類似于實(shí)施例25a，通過(guò)使合適的甲酰亞胺酰胺(脒)與2-(二氰基甲基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酸甲酯(1.1-1.5當(dāng)量)在叔丁醇[向以乙酸鹽或乙酸鹽溶劑合物形式存在的脒中加入0.2-1.4當(dāng)量叔丁醇鉀]中，在所述反應(yīng)條件(反應(yīng)時(shí)間：0.5-24h)下反應(yīng)來(lái)制備表5a中所示的示例性化合物。

或者，可在微波中進(jìn)行反應(yīng)[0.5-10h，100℃]

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

加入水，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min。濾出所形成的沉淀物并用水洗滌。

表5a：

實(shí)施例30a

2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先將3.25g(6.61mmol；純度92％)實(shí)施例17a的4-氨基-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮加入到64ml二噁烷中，加入4.42ml(33.04mmol)亞硝酸異戊酯和2.66ml(33.04mmol)二碘甲烷，然后將混合物在85℃下加熱3h。冷卻后，在減壓下濃縮該混合物，并將殘余物在硅膠上進(jìn)行層析(流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇梯度)。在減壓下除去溶劑，得到2.32g(理論值的51％，純度82％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.34min

ms(esipos):m/z＝565[m+h]⁺

類似于實(shí)施例30a，通過(guò)使合適的苯胺與二碘甲烷(3-18當(dāng)量)和亞硝酸異戊酯(3-10當(dāng)量)在二噁烷中，在所述反應(yīng)條件(溫度：85℃；反應(yīng)時(shí)間：2-10h)下反應(yīng)來(lái)制備表6a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

濃縮反應(yīng)混合物[如果合適，在水和有機(jī)溶劑之間分配，然后濃縮]，并將殘余物在硅膠上進(jìn)行層析(流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇或環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度)。任選地，通過(guò)制備型hplc進(jìn)行進(jìn)一步純化[柱：sunfirec18，5μm，100×30mm；流動(dòng)相：水/乙腈+0.2％濃度的甲酸]。

表6a：

¹⁾該起始物料在wo2013/104703(實(shí)施例56a)中已經(jīng)有所記載。

實(shí)施例36a

外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-4-碘-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

將798μl(5.93mmol)亞硝酸異戊酯和286μl(3.56mmol)二碘甲烷加入到在15ml二噁烷中的565mg(1.19mmol)實(shí)施例25a的外消旋-4-氨基-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮中，并將混合物加熱至85℃，保持4h。冷卻后，在減壓下濃縮該混合物，將殘余物溶于二氯甲烷中，加入硅藻土，然后在減壓下濃縮該混合物。然后將吸附在硅藻土上的粗化合物通過(guò)柱色譜法(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度)。濃縮，得到297mg(理論值的42％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.19min；

ms(esipos):m/z＝588[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.81(s,3h),6.04(s,2h),7.43-7.47(m,1h),7.77-7.82(m,1h),8.26(d,1h),8.47(dd,1h),8.76(dd,1h),12.41(br.s,1h)。

類似于實(shí)施例36a，通過(guò)使合適的苯胺與二碘甲烷(4-18當(dāng)量)和亞硝酸異戊酯(4-12當(dāng)量)在二噁烷中，在所述反應(yīng)條件(溫度：85℃；反應(yīng)時(shí)間：2-10h)下反應(yīng)來(lái)制備表7a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

濃縮反應(yīng)混合物，并將殘余物在硅膠上進(jìn)行層析(流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇梯度)。任選地，通過(guò)制備型hplc進(jìn)行進(jìn)一步純化[柱：kinetexc18，5μm，100×300mm；流動(dòng)相：水/乙腈35:65]。

表7a：

實(shí)施例41a

2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈

在wo2013/104703中已經(jīng)記載了該物質(zhì)。

另一種制備方法：

在150℃下，將在200mldmso中的27g(52.5mmol)2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮[在wo2013/030288，實(shí)施例15a中記載]和5.17g(57.75mmol)氰化銅(i)攪拌2h。冷卻至40℃后，將反應(yīng)混合物倒入水、濃氨水溶液和乙酸乙酯的混合物中，攪拌并濾過(guò)硅藻土。分離各相，將有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌兩次，干燥，濃縮并在高真空下干燥。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇(2％))。隨后通過(guò)第二柱層析法純化混合級(jí)分(硅膠，二氯甲烷/1-2％甲醇)。得到總共12.0g(理論值的55％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法7):rt＝1.35min

ms(esipos):m/z＝414[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.48(s,6h),5.89(s,2h),7.09-7.29(m,3h),7.32-7.41(m,1h),7.44-7.56(m,1h),8.71(d,1h),8.82(d,1h),12.17(br.s,1h)。

實(shí)施例42a

2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈

wo2013/104703實(shí)施例81a，第163頁(yè)已經(jīng)記載了該物質(zhì)。

實(shí)施例43a

2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈

在已加熱干燥過(guò)的燒瓶中，首先將150mg(0.22mmol；純度82％)實(shí)施例30a的2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮加入到2ml純的dmso中，加入27mg(0.30mmol)氰化銅(i)，并將混合物在150℃下加熱2h。將反應(yīng)溶液通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用約14ml乙酸乙酯沖洗，用半濃氯化銨水溶液/濃氯化銨水溶液(3/1)的混合物洗滌三次并用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，并在減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：二氯甲烷至二氯甲烷/甲醇＝100/1)。然后通過(guò)第二柱層析法來(lái)純化所獲得的粗產(chǎn)物(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯＝5/1)。在減壓下除去溶劑，得到104mg(理論值的95％，純度93％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.20min

ms(esipos):m/z＝464[m+h]⁺

類似于實(shí)施例43a，通過(guò)使合適的碘化物與氰化銅(i)(1.0-1.5當(dāng)量)在dmso中，在所述反應(yīng)條件(溫度：150℃；反應(yīng)時(shí)間：0.25-3h)下反應(yīng)來(lái)制備表8a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

方法a：如果合適，將反應(yīng)溶液通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用乙酸乙酯沖洗，用半濃氯化銨水溶液/濃氯化銨水溶液(3/1)的混合物洗滌三次并用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，并在減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法(硅膠，流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇或環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度)或制備型hplc(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)純化。

方法b：或者或另外，加入水/乙腈，并將反應(yīng)混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度或甲醇/水梯度，其中加入0.1％tfa)。

表8a：

實(shí)施例49a

外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈

在已加熱干燥過(guò)的燒瓶中，首先將560mg(0.84mmol)實(shí)施例36a的外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-4-碘-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氫-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮加入到9ml無(wú)水dmso中，加入83mg(0.92mmol)氰化銅(i)，然后將混合物在150℃下加熱1.5h。將反應(yīng)溶液冷卻，加入水/乙腈，并將混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。蒸發(fā)，得到80mg(理論值的20％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.07min

ms(esipos):m/z＝487[m+h]⁺

類似于實(shí)施例49a，通過(guò)使合適的碘化物與氰化銅(i)(1.0-1.5當(dāng)量)在dmso中，在所述反應(yīng)條件(溫度：150℃；反應(yīng)時(shí)間：0.25-3h)下反應(yīng)來(lái)制備表9a中所示的示例性化合物。

反應(yīng)混合物的示例性后處理：

如果合適，將反應(yīng)溶液通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用乙酸乙酯沖洗，用半濃氯化銨水溶液/濃氯化銨水溶液(3/1)的混合物洗滌三次并用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，并在減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱層析法(硅膠，流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇梯度或環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度)或制備型hplc(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)純化。

或者或另外，加入水/乙腈，并將反應(yīng)混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。

表9a：

實(shí)施例54a

2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸

在80℃下，將9.0g(20.86mmol)2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例1)在180ml濃鹽酸中的懸浮液攪拌20h。然后加入水和乙酸乙酯，用20％濃度的氫氧化鈉水溶液將ph調(diào)節(jié)至2-3，并分離各相。用乙酸乙酯萃取含水相，將合并的有機(jī)相干燥并在減壓下濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷/甲醇(9:1)中，并通過(guò)柱層析法純化(硅膠，二氯甲烷和二氯甲烷/甲醇(5-20％)作為流動(dòng)相)。將所獲得的粗產(chǎn)物懸浮于乙醚中，抽濾出所得固體并在高真空下干燥。得到7.50g(理論值的83％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法7):rt＝1.13min

ms(esipos):m/z＝433[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.47(s,6h),5.90(s,2h),7.08-7.27(m,3h),7.31-7.39(m,1h),7.46(dd,1h),8.68(dd,1h),8.96(dd,1h),11.80(br.s,1h),14.10(br.s,1h)。

實(shí)施例55a

2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸

在80℃下，將2.02g(4.5mmol)2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例2)在40ml濃鹽酸中的懸浮液攪拌10h。冷卻后，抽濾出所形成的固體，用水洗滌并干燥。得到1.41g(理論值的66％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.95min

ms(esipos):m/z＝451[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.49(s,6h),5.87(s,2h),7.11-7.29(m,3h),7.31-7.44(m,1h),8.69(dd,1h),8.76(dd,1h),11.90(s,1h),14.05(br.s,1h)。

實(shí)施例56a

2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸

在95℃下，將386mg(0.80mmol)實(shí)施例4的2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺在19ml濃鹽酸中和19ml濃乙酸中的混合物攪拌24h。冷卻至室溫后，向混合物中加入水，然后在室溫下將所形成的懸浮液攪拌30min。然后將所得固體濾出，用水洗滌并在減壓下干燥。得到416mg(粗產(chǎn)物；純度約93％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法11):rt＝12.19min

ms(esipos):m/z＝483[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.48(s,6h),2.65(d,3h),5.87(s,2h),6.99-7.05(m,1h),7.13-7.21(m,1h),7.35-7.42(m,1h),8.59(d,1h),11.88(s,1h),14.02(br.s,1h)。

實(shí)施例57a

2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸

在80℃下，將245mg(0.54mmol)實(shí)施例8的2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺在6.4ml濃鹽酸中的懸浮液攪拌11h。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑。將殘余物溶于水和少量乙腈中，并在50℃下攪拌該混合物30min。濾出所得固體，用水洗滌并干燥。得到269mg(理論值的96％，純度86％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法11):rt＝9.89min

ms(esipos):m/z＝452[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.48(s,6h),6.02(s,2h),7.39-7.47(m,1h),7.74-7.81(m,1h),8.23-8.30(m,1h),8.66-8.78(m,2h),11.88(s,1h),14.02(br.s,1h)。

實(shí)施例58a

2-[6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸

在95℃下，將1.83g(3.94mmol)2-[6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例3)在20ml濃鹽酸和20ml濃乙酸中攪拌18h。伴隨著攪拌，然后將溫?zé)岬姆磻?yīng)混合物小心地引入到250ml70℃的溫水中。冷卻混合物后，抽濾出所形成的固體，用水洗滌并干燥。得到1.57g(理論值的86％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法2):rt＝3.19min

ms(esipos):m/z＝466[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.47(s,6h),5.86(s,2h),7.12-7.28(m,3h),7.32-7.44(m,2h),8.06(d,1h),8.65(d,1h),11.87(s,1h),14.0(br.s,1h)。

實(shí)施例59a

外消旋-2-[(二苯基亞甲基)氨基]-4,4-二氟丁腈

首先將18g(81.72mmol)[(二苯基亞甲基)氨基]乙腈加入到500ml無(wú)水thf中，在-78℃下在氬氣下加入39.22ml(98.06mmol)正丁基鋰(2.5n，在己烷中)，然后在-78℃下將混合物攪拌15min。隨后，使反應(yīng)溶液升至0℃。逐滴加入17.25g(89.89mmol)1,1-二氟-2-碘乙烷，然后在0℃下攪拌混合物15min。在0℃下，然后向反應(yīng)溶液中先加入水，再加入乙酸乙酯，并將混合物用半飽和氯化鈉水溶液洗滌三次。將合并的含水相用乙酸乙酯再萃取兩次。將合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：二氯甲烷/環(huán)己烷＝1/1)。得到13.57g目標(biāo)化合物(理論值的49％，純度84％)。

lc-ms(方法3):rt＝2.48min

ms(esipos):m/z＝285[m+h]+

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ＝2.53-2.61(m,2h；被溶劑峰部分疊加),4.50(t,1h),6.08-6.41(m,1h),7.23-7.33(m,2h),7.38-7.47(m,2h),7.49-7.67(m,6h)。

實(shí)施例60a

外消旋-2-[(二苯基亞甲基)氨基]-4,4-二氟-2-甲基丁腈

在-78℃下，在氬氣下，向初始進(jìn)料在255ml無(wú)水thf中的13.07g(38.62mmol)實(shí)施例59a的外消旋2-[(二苯基亞甲基)氨基]-4,4-二氟丁腈中加入15.6ml(39.0mmol)正丁基鋰(2.5n，在己烷中)，然后在-78℃下攪拌混合物10min。隨后，在-78℃下，向反應(yīng)溶液中加入22.6g(154.46mmol)碘甲烷。將反應(yīng)混合物經(jīng)3.5h逐漸升至0℃。在0℃下，然后先加入水再加入乙酸乙酯，并將混合物用飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯＝15/1)。得到11.4g目標(biāo)化合物(理論值的91％，純度92％)。

lc-ms(方法3):rt＝2.52min

ms(esipos):m/z＝299[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ＝1.67(s,3h),2.55-2.77(m,2h),6.14-6.48(m,1h),7.28-7.34(m,2h),7.36-7.44(m,2h),7.44-7.54(m,6h)。

實(shí)施例61a

外消旋-2-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁腈鹽酸鹽

將10.84g(33.43mmol；92％純度)實(shí)施例60a的外消旋-2-[(二苯基亞甲基)氨基]-4,4-二氟-2-甲基丁腈溶于156ml四氫呋喃和6ml水中，加入73.5ml(36.77mmol)氯化氫溶液(0.5n，在乙醚中)，并在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。然后向反應(yīng)溶液中加入16.71ml(33.43mmol)氯化氫溶液(2n，在乙醚中)，并將混合物濃縮。分離出的粗產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化而直接進(jìn)一步反應(yīng)。

lc-ms(方法3):rt＝0.32min

ms(esipos):m/z＝135(m-hcl+h)⁺

實(shí)施例62a

外消旋-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯

首先將實(shí)施例61a的粗產(chǎn)物外消旋-2-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁腈鹽酸鹽加入到109ml四氫呋喃/水(1:1)中，并加入18.94g(137.06mmol)碳酸鉀和6.27g(36.77mmol)氯甲酸芐酯。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過(guò)夜。再將1.14g(6.69mmol)氯甲酸芐酯加入到反應(yīng)中，并在室溫下將混合物再攪拌2h。然后分離各相，并將含水相用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，然后經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法純化(流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度20/1至5/1)。得到7.68g目標(biāo)化合物(經(jīng)兩步是理論值的61％，純度71％)。

lc-ms(方法3):rt＝2.04min

ms(esipos):m/z＝269[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.65(s,3h),2.51-2.65(m,2h),5.10(s,2h),6.08-6.41(m,1h),7.27-7.44(m,5h),8.24(br.s,1h)。

實(shí)施例63a

對(duì)映異構(gòu)-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相[柱：daicelchiralpakay-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：80％異己烷，20％異丙醇；流速：25ml/min；溫度：22℃，檢測(cè)：210nm]上通過(guò)制備型分離將7.68g(20.33mmol，純度71％)實(shí)施例62a的外消旋-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯分離成對(duì)映異構(gòu)體。

對(duì)映異構(gòu)體a：產(chǎn)量：2.64g(>99％ee)

rt＝6.67min[chiralpakay-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：80％異己烷，20％異丙醇；流速：3ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例64a

對(duì)映異構(gòu)-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相[柱：daicelchiralpakay-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：80％異己烷，20％異丙醇；流速：25ml/min；溫度：22℃，檢測(cè)210nm]上通過(guò)制備型分離將7.68g(20.33mmol，純度71％)實(shí)施例62a的外消旋-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯分離成對(duì)映異構(gòu)體。

對(duì)映異構(gòu)體b：產(chǎn)量：2.76g(93％ee)

rt＝7.66min[chiralpakay-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：80％異己烷，20％異丙醇；流速：3ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例65a

對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)

將2.3g(8.57mmol)實(shí)施例63a的對(duì)映異構(gòu)-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)溶于75ml甲醇氨溶液(7n，在甲醇中)中，并在氬氣下加入2.66g雷尼鎳(50％的水性漿液)。將反應(yīng)混合物在高壓釜中在20-30巴下氫化1.5h。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用甲醇和甲醇氨溶液(2n，在甲醇中)沖洗，并濃縮。得到2.23g目標(biāo)化合物(理論值的94％)。

lc-ms(方法3):rt＝1.48min

ms(esipos):m/z＝273[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.19(s,3h),1.48(br.s,2h),2.08-2.40(m,2h),2.53-2.72(m,2h；被溶劑峰部分疊加),5.00(s,2h),5.90-6.23(m,1h),6.95(br.s,1h),7.25-7.41(m,5h)。

實(shí)施例66a

對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)

將2.76g(10.29mmol)實(shí)施例64a的對(duì)映異構(gòu)-(2-氰基-4,4-二氟丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)溶于90ml甲醇氨溶液(7n，在甲醇中)中，并在氬氣下加入3.19g雷尼鎳(50％的水性漿液)。將反應(yīng)混合物在高壓釜中在20-30巴氫氣下氫化1.5h。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾并用甲醇和甲醇氨溶液(2n，在甲醇中)沖洗，并將混合物濃縮。得到2.64g目標(biāo)化合物(理論值的88％，純度93％)。

lc-ms(方法3):rt＝1.49min

ms(esipos):m/z＝273[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.19(s,3h),1.48(br.s,2h),2.08-2.40(m,2h),2.53-2.73(m,2h；被溶劑峰部分疊加),5.00(s,2h),5.90-6.24(m,1h),6.95(br.s,1h),7.25-7.41(m,5h)。

實(shí)施例67a

對(duì)映異構(gòu)-(4,4-二氟-1-{[(2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)羰基]氨基}-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)

將25mg(0.05mmol)實(shí)施例57a的2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸、39mg(0.14mmol)實(shí)施例65a的對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)和40μl(0.29mmol)三乙胺溶于0.3mldmf中，加入43μl(0.07mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(2,4,6-tripropyl-1,3,5,2,4,6-trioxatriphosphinane2,4,6-trioxide)(t3p，50％的乙酸乙酯溶液)，并將混合物在室溫下攪拌3h。再加入39mg(0.14mmol)對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)、20μl(0.14mmol)三乙胺和23μl(0.04mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(t3p，50％的乙酸乙酯溶液)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。然后加入乙腈/水和tfa，并將反應(yīng)混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。得到26mg目標(biāo)化合物(理論值的63％，純度80％)。

lc-ms(方法1):rt＝1.19min

ms(esipos):m/z＝706.5[m+h]⁺

類似于實(shí)施例67a的方法，由原料56a、57a的酸和合適的胺(實(shí)施例65a和66a)來(lái)制備表10a中所列的示例性化合物。如果合適，向反應(yīng)混合物中再加入胺(1-3當(dāng)量)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(50％，在乙酸乙酯中)(0.5-1.0當(dāng)量)和三乙胺(2-4當(dāng)量)并繼續(xù)攪拌直到反應(yīng)進(jìn)行完全(1-24h)。通過(guò)制備型hplc進(jìn)行純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％甲酸或0.1％tfa)。

表10a：

1)使用實(shí)施例66a的對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)。

2)使用實(shí)施例65a的對(duì)映異構(gòu)-(1-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)。

工作實(shí)施例：

實(shí)施例1

2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

在80℃下，將在100ml二噁烷和35ml2m氫氧化鈉水溶液中的11.5g(27.8mmol)2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈(實(shí)施例41a)攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒入10％氯化鈉水溶液和乙酸乙酯的混合物中，并在攪拌下使用半濃鹽酸調(diào)節(jié)至ph3。濾出所得沉淀，用乙酸乙酯洗滌并干燥。得到9.0g(理論值的75％)標(biāo)題化合物。分離濾液的各相，將含水相用乙酸乙酯再萃取一次，將合并的有機(jī)相干燥，并在減壓下除去溶劑，得到另外3.1g粗產(chǎn)物(理論值的15％，純度59％)。

lc-ms(方法7):rt＝1.12min

ms(esipos):m/z＝432[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ[ppm]＝1.50(s,6h),5.88(s,2h),7.10-7.27(m,3h),7.32-7.41(m,1h),7.46(dd,1h),8.05(br.s,1h),8.10(br.s,1h),8.69(dd,1h),8.93(dd,1h),11.86(s,1h)

實(shí)施例2

2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

在80℃下，將在70ml二噁烷和24ml2m氫氧化鈉水溶液中的2.11g(純度75％，3.67mmol)2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈(在wo2013/104703，實(shí)施例81a中記載)攪拌6h。然后用甲酸將反應(yīng)混合物調(diào)節(jié)至ph5并在減壓下濃縮，隨后將殘余物用100ml水稀釋。然后抽濾出所形成的沉淀物并干燥。將所得固體懸浮于50ml石油醚和2ml二氯甲烷中，然后抽濾并干燥。得到2.23g粗產(chǎn)物，其進(jìn)一步反應(yīng)得到實(shí)施例55a的化合物。通過(guò)制備型hplc獲得純物質(zhì)(rp18，水+0.1％甲酸/乙腈(5-95％)梯度)。

lc-ms(方法1):rt＝0.94min

ms(esipos):m/z＝450[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.50(s,6h),5.88(s,2h),7.11-7.29(m,3h),7.32-7.42(m,1h),8.01(br.s,1h),8.20(br.s,1h),8.69(dd,1h),8.75(dd,1h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例3

2-[6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

在80℃下，將1.69g(3.77mmol)2-[6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈(實(shí)施例48a)在12ml二噁烷和4ml2m氫氧化鈉水溶液中攪拌5h。然后使用甲酸將反應(yīng)混合物調(diào)節(jié)至ph5，在減壓下濃縮該反應(yīng)混合物，然后向殘余物中加入水，并在50℃下攪拌所得懸浮液。冷卻至室溫后，抽濾出所形成的沉淀物并干燥。得到1.83g粗產(chǎn)物，其進(jìn)一步反應(yīng)得到實(shí)施例58a的化合物。通過(guò)制備型hplc獲得純物質(zhì)(rp18，水+0.1％甲酸/乙腈(5-95％)梯度)。

lc-ms(方法1):rt＝1.05min

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.49(s,6h),5.86(s,2h),7.12-7.27(m,3h),7.33-7.42(m,2h),8.01-8.08(m,1h),8.54(d,1h),11.83(s,1h)。

實(shí)施例4

2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將424mg(0.86mmol；純度93％)實(shí)施例43a的2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到13ml無(wú)水二噁烷中，加入3.23ml(6.46mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物10h。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫，并用1ml1m氫氧化鈉水溶液稀釋。再加入1.08ml(2.16mmol)2n氫氧化鈉溶液，然后在90℃下將混合物再攪拌8h。使用1n鹽酸將混合物調(diào)節(jié)至ph3。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除懸浮液中的二噁烷。然后濾出所獲得的固體。得到413mg(理論值的95％，純度95％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.97min

ms(esipos):m/z＝482[m+h]⁺

¹h-nmr(500mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.49(s,6h),2.64(d,3h),5.88(s,2h),6.99-7.05(m,1h),7.13-7.20(m,1h),7.37-7.42(m,1h),8.01(br.s,1h),8.19(br.s,1h),8.59(d,1h),11.82(br.s,1h)。

實(shí)施例5

2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將39mg(0.09mmol)實(shí)施例44a的2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到1.7ml無(wú)水二噁烷中，加入0.70ml(1.40mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在80℃下攪拌混合物6h。將反應(yīng)溶液冷卻并用5ml1n氫氧化鈉水溶液稀釋。隨后使用飽和氯化銨水溶液將混合物調(diào)節(jié)至ph5。濾出所獲得的固體，用水洗滌并在高真空下干燥。得到36mg(理論值的85％；純度96％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法7):rt＝1.29min

ms(esipos):m/z＝464[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.46(s,6h),2.64(d,3h),5.83(s,2h),7.12-7.20(m,2h),7.20-7.28(m,1h),7.33-7.40(m,1h),7.95(br.s,1h),8.15(br.s,1h),8.58(d,1h),10.83(br.s,1h)。

實(shí)施例6

2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將180mg(0.37mmol)實(shí)施例45a的2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到7ml無(wú)水二噁烷中，加入3.0ml(6.00mmol)2n氫氧化鈉水溶液，在室溫下攪拌混合物過(guò)夜并在80℃下攪拌5h。將反應(yīng)溶液冷卻并用5ml1n氫氧化鈉水溶液稀釋。隨后使用飽和氯化銨水溶液將混合物調(diào)節(jié)至ph5。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去懸浮液中的二噁烷。然后濾出所獲得的固體。用水洗滌該固體并在高真空下干燥。得到149mg(理論值的73％，純度92％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.02min

ms(esipos):m/z＝500[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.48(s,6h),2.65(d,3h),5.86(s,2h),7.16-7.24(m,1h),7.55(ddt,1h),8.00(br.s,1h),8.17(br.s,1h),8.56(d,1h),11.82(br.s,1h)。

實(shí)施例7

2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將55mg(0.12mmol)實(shí)施例46a的2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到2.4ml無(wú)水二噁烷中，加入0.305ml(0.61mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物13h。再加入0.061ml(0.122mmol)2n氫氧化鈉溶液，然后在90℃下將混合物攪拌5h。再加入0.091ml(0.182mmol)2n氫氧化鈉水溶液，然后在90℃下將混合物攪拌4h。將反應(yīng)溶液蒸發(fā)濃縮，加入水/乙腈，并將混合物通過(guò)制備型hplc純化(柱：rp18，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。得到43mg(理論值的75％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.86min

ms(esipos):m/z＝465[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.49(s,6h),2.60(d,3h),5.97(s,2h),7.39-7.46(m,1h),7.72-7.82(m,1h),7.99(br.s,1h),8.19(br.s,1h),8.28(d,1h),8.59(d,1h),11.80(br.s,1h)。

實(shí)施例8

將319mg(0.74mmol)實(shí)施例47a的2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到10.5ml無(wú)水二噁烷中，加入1.85ml(3.70mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物13h。將反應(yīng)溶液冷卻，蒸發(fā)掉有機(jī)溶劑。然后加入乙酸乙酯，并使用1n鹽酸將混合物調(diào)節(jié)至ph3。濾出所獲得的固體并用水洗滌。得到258mg(理論值的77％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.80min

ms(esipos):m/z＝451[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.50(s,6h),6.02(s,2h),7.41-7.47(m,1h),7.74-7.81(m,1h),8.01(br.s,1h),8.20(br.s,1h),8.24-8.29(m,1h),8.66-8.73(m,2h),11.82(br.s,1h)。

實(shí)施例9

外消旋-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將340mg(0.66mmol)實(shí)施例52a的外消旋-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到10ml無(wú)水二噁烷中，加入1.64ml(3.28mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物5.5h。再加入0.82ml(0.164mmol)2n氫氧化鈉溶液，然后在90℃下將混合物攪拌4h。在減壓下除去揮發(fā)性成分，然后向殘余物中加入水/乙腈/tfa和少量甲醇。濾出所形成的沉淀并干燥。得到333mg(理論值的93％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.06min

ms(esipos):m/z＝536[m+h]⁺

¹h-nmr(500mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.90(s,3h),2.63(d,3h),5.89(s,2h),7.02-7.08(m,1h),7.14-7.21(m,1h),7.37-7.43(m,1h),7.98(br.s,1h),8.29(br.s,1h),8.55(d,1h),12.48(br.s,1h)。

實(shí)施例10

對(duì)映異構(gòu)-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相上，將300mg外消旋-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例9)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakib，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：82％co2，18％乙醇，流速50ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體a：107mg(>99％ee)

rt＝2.07min[sfc：daicelchiralpakib，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→60％乙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例11

對(duì)映異構(gòu)-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相上，將300mg外消旋-2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例9)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakib，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：82％co2，18％乙醇，流速50ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體b：105mg(>96％ee)

rt＝2.16min[sfc：daicelchiralpakib，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→60％乙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例12

外消旋-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將138mg(0.26mmol；純度94％)實(shí)施例50a的外消旋-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到4ml無(wú)水二噁烷中，加入1.5ml(3.00mmol)2n氫氧化鈉水溶液，在室溫下攪拌混合物過(guò)夜并在80℃下攪拌5h。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫并用5ml1n氫氧化鈉水溶液稀釋。隨后使用飽和氯化銨水溶液將混合物調(diào)節(jié)至ph5。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去懸浮液中的二噁烷。然后濾出所獲得的固體。用水洗滌該固體并在高真空下干燥。得到116mg(理論值的83％，純度96％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.03min

ms(esipos):m/z＝518[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.91(s,3h),2.65(d,3h),5.84(s,2h),7.13-7.27(m,3h),7.34-7.41(m,1h),7.99(s,1h),8.29(s,1h),8.54(d,1h),12.46(br.s,1h)。

實(shí)施例13

對(duì)映異構(gòu)-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相上，將102mg外消旋-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例12)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralceloj-h，5μm，sfc250×20mm，流動(dòng)相85％co2，15％異丙醇，流速100ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體a：37mg(純度>99％，>99％ee)

rt＝2.09min[sfc：daicelchiralceloj-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→50％異丙醇梯度；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例14

對(duì)映異構(gòu)-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相上，將102mg外消旋-2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例12)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralceloj-h，5μm，sfc250×20mm，流動(dòng)相85％co2，15％異丙醇，流速100ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體b：38mg(純度>99％，>99％ee)

rt＝2.54min[sfc：daicelchiralceloj-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→50％異丙醇梯度；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例15

外消旋-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將121mg(0.20mmol；純度90％)實(shí)施例51a的外消旋-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到4ml無(wú)水二噁烷中，加入1.5ml(3.00mmol)2n氫氧化鈉水溶液，在室溫下將混合物攪拌過(guò)夜，然后在80℃下攪拌5h。然后將反應(yīng)溶液冷卻至室溫，并用5ml1n氫氧化鈉水溶液稀釋。隨后使用飽和氯化銨水溶液將混合物調(diào)節(jié)至ph5。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去懸浮液中的二噁烷。然后濾出所獲得的固體。用水洗滌該固體并在高真空下干燥。得到116mg(理論值的83％，純度96％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.04min

ms(esipos):m/z＝554[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.90(s,3h),2.66(d,3h),5.87(s,2h),7.20(ddt,1h),7.55(ddt,1h),7.99(s,1h),8.29(s,1h),8.54(d,1h),12.45(br.s,1h)。

實(shí)施例16

對(duì)映異構(gòu)-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相上，將85mg外消旋-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例15)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralceloj-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：85％co2，15％異丙醇，流速80ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體a：36mg(純度>99％，>99％ee)

rt＝2.04min[sfc：daicelchiralceloj-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→60％異丙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例17

對(duì)映異構(gòu)-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相上，將85mg外消旋-2-[5-氟-6-甲基-1-(2,3,6-三氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例15)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralceloj-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：85％co2，15％異丙醇，流速80ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體b：36mg(純度>99％，>99％ee)

rt＝2.57min[sfc：daicelchiralceloj-h，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→60％異丙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例18

外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將100mg(0.20mmol)實(shí)施例53a的外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到3.0ml無(wú)水二噁烷中，加入0.50ml(1.00mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物7h。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫，并加入1.20ml(1.2mmol)1m鹽酸。然后加入水/乙腈，并將混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。得到67mg(理論值的63％)標(biāo)題化合物

lc-ms(方法1):rt＝0.92min

ms(esipos):m/z＝519[m+h]⁺

¹h-nmr(500mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.89(s,3h),2.63(d,3h),5.98(s,2h),7.39-7.44(m,1h),7.75-7.81(m,1h),7.98(br.s,1h)8.24-8.33(m,2h),8.55(d,1h),12.43(br.s,1h)。

實(shí)施例19

對(duì)映異構(gòu)-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相上，將67mg外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例18)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakoj-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：80％co2，20％甲醇，流速100ml/min；30℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體a：26mg(純度98％，>99％ee)

rt＝1.99min[sfc：daicelchiralpakoj-h，5μm，250×4.6mm，流動(dòng)相：5→50％甲醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例20

對(duì)映異構(gòu)-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相上，將67mg外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例18)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakoj-h，5μm，250×20mm，流動(dòng)相：80％co2，20％甲醇，流速100ml/min；30℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體b：29mg(純度98％，99％ee)

rt＝2.59min[sfc：daicelchiralpakoj-h，5μm，250×4.6mm，流動(dòng)相：5→50％甲醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例21

外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將80mg(0.16mmol)實(shí)施例49a的2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲腈首先加入到2.5ml無(wú)水二噁烷中，加入0.41ml(0.82mmol)2n氫氧化鈉水溶液，并在90℃下攪拌混合物7h。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫并用1.00ml(1.00mmol)1m鹽酸稀釋。然后加入水/乙腈，并將混合物通過(guò)制備型hplc純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％tfa)。得到54mg(理論值的63％；純度97％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝0.86min

ms(esipos):m/z＝505[m+h]⁺

¹h-nmr(500mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.92(s,3h),6.04(s,2h),7.41-7.47(m,1h),7.74-7.81(m,1h),7.98(br.s,1h)8.24-8.28(m,1h),8.31(s,1h),8.63-8.68(m,1h),8.72–8.75(m,1h),12.46(br.s,1h)。

實(shí)施例22

對(duì)映異構(gòu)-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

在手性相上，將48mg外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例21)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakib，5μm，250×30mm，流動(dòng)相：80％co2，20％乙醇，流速80ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體a：16mg(純度97％，>99％ee)

rt＝3.26min[sfc：daicelchiralpakib，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→50％乙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例23

對(duì)映異構(gòu)-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體b)

在手性相上，將48mg外消旋-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-6-氧代-5-(三氟甲基)-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(實(shí)施例21)分離成對(duì)映異構(gòu)體[sfc柱：daicelchiralpakib，5μm，250×30mm，流動(dòng)相：80％co2，20％乙醇，流速80ml/min；40℃，檢測(cè)：210nm]。

對(duì)映異構(gòu)體b：18mg(純度97％，93％ee)

rt＝3.84min[sfc：daicelchiralpakib，5μm，250×4.6mm；流動(dòng)相：5→50％乙醇；流速3.0ml/min；檢測(cè)：220nm]。

實(shí)施例24

n-環(huán)丙基-2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將38mg(0.09mmol)實(shí)施例54a的化合物、10mg(0.18mmol)環(huán)丙胺和46μl(34mg，0.26mmol)二異丙基乙胺溶于0.8mldmf中，加入78.5μl(0.13mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(t3p，50％的在乙酸乙酯中的溶液)，并在室溫下將混合物攪拌10h。再加入5mg(0.09mmol)環(huán)丙胺和42μl(0.07mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(t3p，50％的在乙酸乙酯中的溶液)，并在50℃下將混合物攪拌5h。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，溶于dmso和乙腈中，用5m甲酸輕微酸化，并通過(guò)制備型hplc純化(rp18，流動(dòng)相：0.1％甲酸水溶液-乙腈，5-95％)。將殘余物在硅膠上純化(流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯5-65％梯度)。得到19mg(理論值的46％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.02min

ms(esipos):m/z＝472[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝0.63-0.72(m,2h),0.75-0.85(m,2h),1.49(s,6h),2.87-2.98(m,1h),5.88(s,2h),7.10-7.29(m,3h),7.32-7.41(m,1h),7.48(dd,1h),8.65-8.76(m,2h),8.84(dd,1h),11.86(br.s,1h)。

類似于實(shí)施例24的方法，由實(shí)施例58a的酸和合適的胺來(lái)制備表1中所列的示例性化合物。

表1：

實(shí)施例27

2-[5-氟-1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-n-[(1-羥基環(huán)丙基)甲基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將50mg(0.11mmol)實(shí)施例55a的化合物、19mg(0.22mmol)1-(氨基甲基)環(huán)丙醇和93μl(0.67mmol)三乙胺溶于0.7mldmf中，加入99μl(0.17mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(t3p，50％的在乙酸乙酯中的溶液)，并在室溫下將混合物攪拌9h。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，溶于dmso和乙腈中，用甲酸輕微酸化，并通過(guò)制備型hplc純化(rp18，流動(dòng)相：0.1％甲酸水溶液-乙腈，5-95％)。得到33mg(理論值的55％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.01min

ms(esipos):m/z＝520[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝0.60-0.70(m,4h),1.50(s,6h),3.51(d,2h),5.89(s,2h),7.12-7.30(m,3h),7.33-7.42(m,1h),8.64(d,1h),8.70-8.80(m,2h),11.89(s,1h)。

類似于實(shí)施例27的方法，由原料55a、56a和57a的酸和合適的胺制備表2中所列的示例性化合物。如果合適，向反應(yīng)混合物中再加入胺(1-3當(dāng)量)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(50％，在乙酸乙酯中)(0.5-1.0當(dāng)量)和三乙胺(2-4當(dāng)量)，并連續(xù)攪拌直到反應(yīng)進(jìn)行完全(1-24h)。通過(guò)制備型hplc進(jìn)行純化(rp18柱，流動(dòng)相：乙腈/水梯度，其中加入0.1％甲酸或0.1％tfa)。

表2：

實(shí)施例42

2-[6-氯-1-(2-氟芐基)-1h-吲唑-3-基]-n-(環(huán)丙基甲基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

將在1mlthf中的70mg(0.15mmol)實(shí)施例58a的化合物、21mg(0.3mmol)1-環(huán)丙基甲胺和61mg(0.6mmol)三乙胺加熱至60℃，然后加入0.18ml(0.3mmol)2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(t3p，50％的在乙酸乙酯中的溶液)，并在該溫度下將混合物攪拌30min。使反應(yīng)混合物在水和乙酸乙酯之間分配(萃取)，將有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，干燥并濃縮。將殘余物通過(guò)柱層析法純化(硅膠，流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯5-65％梯度)。得到59mg(理論值的76％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法1):rt＝1.23min

ms(esipos):m/z＝519[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝0.29-0.36(m,1h),0.48-0.54(m,1h),1.07-1.17(m,1h),1.50(s,6h),3.26(t,2h),5.87(s,2h),7.14-7.28(m,3h),7.33-7.42(m,2h),8.09(s,1h),8.53(d,1h),8.70(t,1h),11.85(s,1h)。

類似于實(shí)施例42的方法，分別由實(shí)施例58a和實(shí)施例55a的酸和合適的胺來(lái)制備表3中所列的示例性化合物。如果胺是以鹽的形式使用，則另外使用2當(dāng)量的三乙胺。如果合適，再加入胺、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(50％的在乙酸乙酯中的溶液)和三乙胺，并連續(xù)攪拌直到反應(yīng)進(jìn)行完全。

后處理：

方法a)：如實(shí)施例42中所述進(jìn)行萃取并在硅膠上進(jìn)行柱層析。

方法b)：向反應(yīng)混合物(ph3-4)中加入水、乙腈和甲酸，濾出所形成的沉淀物并用水/乙腈洗滌。

方法c)：濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于dmso/乙腈/甲酸水溶液中，并通過(guò)制備型hplc純化(柱：rp18，水+0.1％甲酸/乙腈(5-95％)梯度)。

表3：

實(shí)施例55

對(duì)映異構(gòu)-n-(2-氨基-4,4-二氟-2-甲基丁基)-2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺(對(duì)映異構(gòu)體a)

將26mg(0.03mmol)實(shí)施例67a的對(duì)映異構(gòu)-(4,4-二氟-1-{[(2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)羰基]氨基}-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)溶解在0.8ml乙醇中，加入11μl(0.15mmol)三氟乙酸和1mg活性炭載鈀(10％)，并在大氣壓力和室溫下將混合物氫化2h。隨后通過(guò)微孔過(guò)濾器過(guò)濾反應(yīng)溶液，并將濾液在減壓下濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷/甲醇氨溶液(2n，在甲醇中)中，然后通過(guò)制備型厚層層析法純化(流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。將產(chǎn)物級(jí)分合并并濃縮。得到12mg目標(biāo)化合物(理論值的72％)。

lc-ms(方法1):rt＝0.71min

ms(esipos):m/z＝572.5[m+h]⁺

¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]＝1.13(s,3h),1.51(d,6h),1.93-2.07(m,2h),3.25-3.42(m,2h；被溶劑峰疊加),6.02(s,2h),6.13-6.46(m,1h),7.41-7.47(m,1h),7.74-7.81(m,1h),8.24-8.28(m,1h),8.71-8.74(m,1h),8.75-8.79(m,1h),8.84(t,1h)。

類似于實(shí)施例55的方法，由合適的原料制備表4中所列的示例性化合物。在每種情況下，反應(yīng)時(shí)間為0.5-3h。通過(guò)制備型厚層層析法進(jìn)行純化(流動(dòng)相：二氯甲烷/甲醇＝10/1或20/1)。

表4：

1)使用實(shí)施例68a的對(duì)映異構(gòu)-(4,4-二氟-1-{[(2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)羰基]氨基}-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)。

2)使用實(shí)施例69a的對(duì)映異構(gòu)-{1-[({2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}羰基)氨基]-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體a)。

3)使用實(shí)施例70a的對(duì)映異構(gòu)-{1-[({2-[1-(2,3-二氟芐基)-5-氟-6-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}羰基)氨基]-4,4-二氟-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸芐酯(對(duì)映異構(gòu)體b)。

實(shí)施例59

n-(2-乙基丁基)-2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

步驟1：2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-碳酰氯

在0℃下，將40.77g(342.73mmol)亞硫酰氯加入到14.82g(34.27mmol)2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酸(實(shí)施例54a)中，并在室溫下攪拌混合物3h。隨后將反應(yīng)溶液完全濃縮。然后向殘余物中加入50ml甲苯，隨后在減壓下除去溶劑。該步驟重復(fù)兩次。

步驟2：n-(2-乙基丁基)-2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-羧酰胺

首先將10.12mg(0.10mmol)2-乙基丁烷-1-胺加入到微量滴定板(96個(gè)深凹處)中，并加入在0.6ml1,2-二氯乙烷中的45.09mg(0.10mmol)2-[1-(2-氟芐基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氫-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-碳酰氯(來(lái)自步驟1)。然后加入64.62mg(0.5mol)n,n-二異丙基乙胺，并在室溫下將混合物振搖過(guò)夜。然后使用離心干燥器完全除去溶劑，然后向殘余物中加入0.6mldmf。然后過(guò)濾反應(yīng)混合物，并通過(guò)制備型lc-ms(方法10)從濾液中分離出目標(biāo)化合物。使用離心干燥器在減壓下濃縮含產(chǎn)物的級(jí)分。將得到的各產(chǎn)物級(jí)分的殘余物溶于0.6mldmso中。然后將這些級(jí)分合并，最后在離心干燥器中除去溶劑。得到10.8mg(理論值的21％)標(biāo)題化合物。

lc-ms(方法9):rt＝1.26min

ms(esipos):m/z＝516[m+h]⁺

類似于實(shí)施例59，使用合適的胺制備表5中所示的示例性化合物：

表5：

b.藥理學(xué)功效的評(píng)價(jià)

本發(fā)明化合物的藥理學(xué)活性可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的體外和體內(nèi)研究來(lái)說(shuō)明。以下應(yīng)用實(shí)施例描述了本發(fā)明化合物的生物學(xué)作用，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。

縮寫和首字母縮略詞：

使用以下縮寫：

auc曲線下面的面積

bsa牛血清白蛋白

cmax血漿濃度峰值

caco-2上皮細(xì)胞系

dmso二甲基亞砜

edta乙二胺四乙酸

f生物利用度

hepes2-[4-(2-羥基乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸

ic抑制濃度

mec最低有效濃度

nadh煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

pde5磷酸二酯酶5

peg聚乙二醇

tris三(羥甲基)氨基甲烷

b-1.體外血管舒張作用

本發(fā)明化合物對(duì)離體血管條的舒張活性的測(cè)定如jpstasch等人在brjpharmacol.2002；135，333-343中所述的進(jìn)行。通過(guò)打擊頸部將兔子打昏并放血。將主動(dòng)脈取出，去除附著的組織并分成1.5mm寬的環(huán)，將所述環(huán)在預(yù)應(yīng)力下單獨(dú)置于5ml器官浴槽中，所述浴槽含有37℃的鼓入卡波金(carbogen)的krebs-henseleit溶液，所述溶液具有以下組成(各自均以mm計(jì))：氯化鈉：119；氯化鉀：4.8；二水合氯化鈣：1；七水合硫酸鎂：1.4；磷酸二氫鉀：1.2；碳酸氫鈉：25；葡萄糖：10。用stathamuc2細(xì)胞測(cè)定收縮力，用a/d轉(zhuǎn)換器(das-1802hc，keithleyinstrumentsmunich)放大并數(shù)字化，并平行記錄在線性記錄儀上(linearrecorder)。

為了產(chǎn)生收縮，以不斷增加的濃度將苯腎上腺素(phenylephrine)累積加入到所述浴槽中。在若干對(duì)照循環(huán)后，在每個(gè)另外的運(yùn)行中每次以增加的劑量加入待研究的物質(zhì)，并將收縮量值與在最后的在先運(yùn)行中獲得的收縮量值進(jìn)行比較。這用于計(jì)算使對(duì)照值的量值減少50％所需的濃度(ic50值)。標(biāo)準(zhǔn)給藥體積是5μl；浴槽溶液中的dmso含量對(duì)應(yīng)于0.1％。

b-2.對(duì)重組鳥苷酸環(huán)化酶報(bào)告細(xì)胞系的作用

如f.wunder等人在anal.biochem.2005，339，104-112中所描述的那樣，使用重組鳥苷酸環(huán)化酶報(bào)告細(xì)胞系測(cè)定本發(fā)明化合物的細(xì)胞活性。

本發(fā)明化合物的代表性值(mec＝最低有效濃度)在下表中示出(表1b；在一些情況下作為各測(cè)定值的平均值)：

表1b：

b-3.人磷酸二酯酶5(pde5)的抑制

通過(guò)破裂(800巴，3代)，隨后通過(guò)離心(75000g，60min，4℃)以及在monoq10/10柱上的上清液離子交換層析(線性氯化鈉梯度，用0.2-0.3m在緩沖液(20mmhepesph7.2，2mm氯化鎂)中的氯化鈉溶液洗脫)，由人血小板獲得pde5制劑。將具有pde5活性的級(jí)分合并(pde5制劑)并儲(chǔ)存在-80℃下。

為測(cè)定它們對(duì)人pde5的體外作用，將測(cè)試物質(zhì)溶解在100％dmso中并系列稀釋。通常，制備從200μm至0.091μm的稀釋系列(1:3)(測(cè)試中得到的最終濃度：4μm至0.0018μm)。分別將2μl經(jīng)稀釋的物質(zhì)溶液置于微量滴定板(isoplate-96/200w；perkinelmer)的孔中。隨后，加入50μl上述pde5制劑的稀釋液。如此選擇pde5制劑的稀釋液：其使得在此后的孵育中，少于70％的底物被轉(zhuǎn)化(一般稀釋：1:100；稀釋緩沖液：50mmtris/鹽酸ph7.5，8.3mm氯化鎂，1.7mmedta，0.2％bsa)。用分析緩沖液(50mmtris/鹽酸ph7.5，8.3mm氯化鎂，1.7mmedta)將底物[8-³h]環(huán)鳥苷-3',5'-單磷酸(1μci/μl；perkinelmer)按1:2000稀釋至0.0005μci/μl的濃度。通過(guò)加入50μl(0.025μci)稀釋的底物，酶反應(yīng)終于開始。在室溫下孵育測(cè)試混合物60min，并通過(guò)加入25μl18mg/ml的釔閃爍接近珠(yttriumscintillationproximitybead)在水中的懸浮液(磷酸二酯酶珠，用于spa分析，rpnq0150，perkinelmer)停止該反應(yīng)。用膜密封微量滴定板并在室溫下靜置60min。隨后，在microbeta閃爍計(jì)數(shù)器(perkinelmer)中分析所述板，每個(gè)孔分析30s。使用底物濃度對(duì)pde5抑制百分?jǐn)?shù)的圖形曲線確定ic50值。

本發(fā)明化合物的代表性ic50值示于下表(表2b；在一些情況下作為各測(cè)定值的平均值)：

表2b：

b-4.有意識(shí)的、自發(fā)性高血壓大鼠的無(wú)線電遙測(cè)血壓測(cè)量

使用來(lái)自datasciencesinternationaldsi，usa的市售遙測(cè)系統(tǒng)對(duì)下文所述的有意識(shí)的大鼠進(jìn)行血壓測(cè)量。

所述系統(tǒng)由3個(gè)主要組件組成：

-可植入發(fā)射器(遙測(cè)發(fā)射器)

-接收器(接收器)，其經(jīng)由多路轉(zhuǎn)換器(dsidataexchangematrix)連接到

-數(shù)據(jù)采集計(jì)算機(jī)。

所述遙測(cè)系統(tǒng)能夠連續(xù)記錄有意識(shí)的動(dòng)物在其通常棲息地中的血壓、心率和身體動(dòng)作。

動(dòng)物材料

研究在體重>200g的成年雌性自發(fā)性高血壓大鼠(shrokamoto)中進(jìn)行。來(lái)自okamotokyotoschoolofmedicine，1963的shr/ncrl是具有極大升高的血壓的雄性wistarkyoto大鼠與具有輕微升高的血壓的雌性大鼠的雜交種，在f13時(shí)其被送至美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(u.s.nationalinstitutesofhealth)。

在發(fā)射器植入后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單獨(dú)圈養(yǎng)在3型makrolon籠中。它們可自由攝取標(biāo)準(zhǔn)飼料和水。

實(shí)驗(yàn)室中的晝/夜節(jié)律由在上午6:00和下午7:00的室內(nèi)照明改變。

發(fā)射器植入

在第一次實(shí)驗(yàn)使用之前至少14天，將所用的ta11pa-c40遙測(cè)發(fā)射器在無(wú)菌條件下手術(shù)植入到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中。以此方式裝備了儀器的動(dòng)物可在傷口愈合和植入物固定后被重復(fù)使用。

為了植入，將禁食的動(dòng)物用戊巴比妥(耐波他(nembutal)，sanofi：50mg/kg腹膜內(nèi)給藥)麻醉，在其腹部的大面積上剃毛并消毒。在沿腹白線打開腹腔后，將所述系統(tǒng)的充滿液體的測(cè)量導(dǎo)管在分叉點(diǎn)上方沿顱骨方向插入到降主動(dòng)脈中并用組織膠(vetbondtm，3m)固定。將發(fā)射器外殼在腹腔內(nèi)固定至腹壁肌肉組織上，且傷口被逐層封閉。

在術(shù)后，給予抗生素(tardomyocelcomp，bayer，1ml/kg皮下注射)以預(yù)防感染。

物質(zhì)和溶液

除非另有說(shuō)明，否則將待研究的物質(zhì)通過(guò)強(qiáng)飼法分別口服給藥至一組動(dòng)物(n＝6)。按照5ml/kg體重的給藥體積，將測(cè)試物質(zhì)溶解于合適的溶劑混合物中或懸浮在0.5％纖基乙酸鈉(tylose)中。

溶劑治療的動(dòng)物組被用作對(duì)照組。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程

將現(xiàn)有的遙測(cè)測(cè)量單元配置給24只動(dòng)物。每個(gè)實(shí)驗(yàn)均以實(shí)驗(yàn)編號(hào)進(jìn)行記錄(以年月日記)。

給在所述系統(tǒng)中生活的每一只裝備了儀器的大鼠分配單獨(dú)的接收天線(1010receiver，dsi)。

植入的發(fā)射器可通過(guò)所結(jié)合的磁開關(guān)從外部進(jìn)行激活。在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將它們切換到發(fā)射。所發(fā)射的信號(hào)可通過(guò)數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)(dataquesttma.r.t.forwindows，dsi)在線探測(cè)并適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行處理。數(shù)據(jù)分別儲(chǔ)存在為此目的而創(chuàng)建的并帶有實(shí)驗(yàn)編號(hào)的文件夾中。

在標(biāo)準(zhǔn)步驟中，分別測(cè)量以下各項(xiàng)10秒的時(shí)間：

-收縮壓(sbp)

-舒張壓(dbp)

-平均動(dòng)脈壓(map)

-心率(hr)

-活性(act)。

在計(jì)算機(jī)控制下按5分鐘的間隔重復(fù)采集測(cè)量值。在圖表中用當(dāng)前測(cè)量的氣壓(ambientpressurereferencemoniotr；apr-1)校正作為絕對(duì)值得到的源數(shù)據(jù)并將其存儲(chǔ)為單獨(dú)數(shù)據(jù)。制造公司(dsi)的大量文件中給出了其他的技術(shù)細(xì)節(jié)。

除非另有說(shuō)明，否則在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天上午9:00時(shí)給藥測(cè)試物質(zhì)。在給藥后，在24小時(shí)內(nèi)測(cè)量上述參數(shù)。

評(píng)價(jià)

在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用分析軟件(dataquesttma.r.t.tmanalysis)分類所采集的單個(gè)數(shù)據(jù)。在本文中，將給藥前2小時(shí)的值假定為空白值，因此所選擇的數(shù)據(jù)集包括從實(shí)驗(yàn)當(dāng)天上午7:00時(shí)至次日上午9:00時(shí)的時(shí)間段。

通過(guò)測(cè)定平均值在預(yù)定時(shí)間內(nèi)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行平滑(平均15分鐘)，并將數(shù)據(jù)作為文本文檔轉(zhuǎn)移到存儲(chǔ)介質(zhì)中。將以此方式預(yù)分類并壓縮的測(cè)量值轉(zhuǎn)移到excel模板中并作為表格呈現(xiàn)。對(duì)于實(shí)驗(yàn)的每一天，將得到的數(shù)據(jù)儲(chǔ)存在帶有實(shí)驗(yàn)編號(hào)的專門文件夾中。將結(jié)果和試驗(yàn)方案以通過(guò)編號(hào)分類的紙件形式存檔。

參考：

klauswitte，kaihu，johannaswiatek，claudiamüssig，georgertlandlemmer：experimentalheartfailureinrats:effectsoncardiovascularcircadianrhythmsandonmyocardialβ-adrenergicsignaling.cardiovascres47(2)：203-405，2000；kozookamoto：spontaneoushypertensioninrats.intrevexppathol7：227-270，1969；maartenvandenbuuse：circadianrhythmsofbloodpressure,heartrate,andlocomotoractivityinspontaneouslyhypertensiveratsasmeasuredwithradio-telemetry.physiology&behavior55(4)：783-787，1994。

b-5.在對(duì)大鼠的長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)中測(cè)定器官保護(hù)作用

本發(fā)明化合物的器官保護(hù)作用示于治療相關(guān)的“低一氧化氮(no)/高腎素”大鼠高血壓模型中。所述研究類似于最近公開的文章(sharkovskay等人，jhypertension2010；28：1666-1675)進(jìn)行。這包括治療腎素-轉(zhuǎn)基因大鼠(tgr(mren2)27)，其中，在幾個(gè)星期內(nèi)，通過(guò)飲用水已經(jīng)對(duì)所述大鼠同時(shí)給藥no合成酶抑制劑l-name和本發(fā)明化合物或載體。在治療期間，測(cè)定血液動(dòng)力學(xué)和腎功能參數(shù)。在長(zhǎng)期研究結(jié)束時(shí)，由組織病理學(xué)研究、生物標(biāo)志物、表達(dá)分析和心血管等離子體參數(shù)顯示出器官(腎、肺、心臟、主動(dòng)脈)保護(hù)。

b-6.低氧條件下有意識(shí)的狗的肺動(dòng)脈壓(pap)測(cè)量

對(duì)下文所述的有意識(shí)的狗的血壓測(cè)量是使用例如購(gòu)自datasciencesinternationaldsi，usa的遙測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行。所述系統(tǒng)由可植入壓力發(fā)射器、接收器和數(shù)據(jù)采集計(jì)算機(jī)組成。所述遙測(cè)系統(tǒng)使得可以連續(xù)地監(jiān)測(cè)有意識(shí)動(dòng)物的血壓和心率。在第一次實(shí)驗(yàn)使用之前，將所用的遙測(cè)發(fā)射器在無(wú)菌條件下手術(shù)植入到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中。以此方式裝備了儀器的動(dòng)物在傷口愈合和植入物固定后可被重復(fù)使用。測(cè)試使用成年雄性小獵犬進(jìn)行。制造公司(dsi)的文件中可以看到技術(shù)細(xì)節(jié)。

物質(zhì)和溶液

通過(guò)口服明膠膠囊劑或以合適的溶劑混合物的形式靜脈注射，將待測(cè)試物質(zhì)分別給藥至一組狗(n＝3-6)。將經(jīng)載體處理的一組動(dòng)物用作對(duì)照組。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程

對(duì)于低氧條件下的測(cè)量，將動(dòng)物轉(zhuǎn)移到具有低氧氣氛的室中(氧含量約10％)。這使用商購(gòu)可得的低氧發(fā)生器(購(gòu)自hoehenbalance，cologne，germany)來(lái)建立。在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)中，例如，在物質(zhì)給藥之后1小時(shí)和5小時(shí)，將狗轉(zhuǎn)移到低氧室中，保持30min。在進(jìn)入低氧室之前和之后約10min，以及在停留在低氧室期間，通過(guò)遙測(cè)測(cè)量血壓和心率。

評(píng)價(jià)

在健康的狗中，低氧下pap迅速升高。通過(guò)物質(zhì)給藥可減少該升高。為了量化pap升高值以及心率和全身血壓的差值，將在低氧期之前和在低氧期過(guò)程中的數(shù)據(jù)(所述數(shù)據(jù)通過(guò)確定平均值被平滑)進(jìn)行比較。測(cè)量參數(shù)曲線用prism軟件(graphpad，usa)以圖形呈現(xiàn)。

b-7.靜脈內(nèi)和口服給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定

在雄性cd-1小鼠、雄性wistar大鼠、雌性小獵犬和雌性食蟹猴中測(cè)定本發(fā)明的化合物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。在小鼠和大鼠的情況下，通過(guò)物種特異性血漿/dmso制劑進(jìn)行靜脈內(nèi)給藥，而在狗和猴的情況下，通過(guò)水/peg400/乙醇制劑進(jìn)行靜脈內(nèi)給藥。在所有物種中，通過(guò)強(qiáng)飼法，基于水/peg400/乙醇制劑來(lái)進(jìn)行溶解物質(zhì)的口服給藥。在物質(zhì)給藥前將硅酮導(dǎo)管插入右側(cè)頸外靜脈(venajugularisexterna)中，以便容易地從大鼠中采集血液。所述操作在用異氟烷麻醉并給止痛劑(阿托品/卡布洛芬(rimadyl)(3/1)0.1ml皮下給藥)之前至少一天進(jìn)行。在時(shí)間窗內(nèi)取血(通常多于10個(gè)時(shí)間點(diǎn))，所述時(shí)間窗包括物質(zhì)給藥之后至少24小時(shí)至最多72小時(shí)的時(shí)間終點(diǎn)。將血采集到肝素化試管中。然后通過(guò)離心獲得血漿；如果需要，將其儲(chǔ)存在-20℃下直至進(jìn)一步處理。

將內(nèi)標(biāo)物(其也可以是化學(xué)上不相關(guān)的物質(zhì))加到本發(fā)明化合物的樣品、校準(zhǔn)樣品和合格者(qualifier)中，接著通過(guò)過(guò)量的乙腈使蛋白質(zhì)沉淀。添加與lc條件匹配的緩沖溶液，隨后形成渦旋，接著在1000g下進(jìn)行離心。通過(guò)lc-ms(/ms)使用c18反相柱和可變流動(dòng)相混合物對(duì)上清液進(jìn)行分析。由具體選擇的離子監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)或高分辨lc-ms實(shí)驗(yàn)的提取離子色譜的峰高或面積來(lái)量化所述物質(zhì)。

借助經(jīng)驗(yàn)證的藥代動(dòng)力學(xué)計(jì)算程序，由所測(cè)定的血漿濃度/時(shí)間曲線來(lái)計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如auc、cmax、f(生物利用度)、t1/2(最終半衰期)、mrt(平均停留時(shí)間)和cl(清除率)。

由于所述物質(zhì)的量化是在血漿中進(jìn)行，為了能相應(yīng)地調(diào)整藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，必須測(cè)定所述物質(zhì)的血液/血漿分布。為此目的，在滾輥式混合器(rockingrollermixer)中將限定量的物質(zhì)在所述物種的肝素化全血中孵育20min。以1000g離心，獲得血漿。在測(cè)量血漿和血液中的濃度(通過(guò)lc-ms(/ms)；見上文)后，通過(guò)商形成來(lái)確定c血液/c血漿值。

b-8.代謝研究

為了測(cè)定本發(fā)明化合物的代謝特征，將它們與重組人細(xì)胞色素p450(cyp)酶、肝微粒體或來(lái)自不同動(dòng)物物種(例如大鼠、狗)以及人源的原代新鮮肝細(xì)胞一起孵育，以獲得和比較以下有關(guān)信息：盡可能完整的肝階段i和階段ii代謝，以及所述代謝中涉及的酶。

以約0.1-10μm的濃度孵育本發(fā)明的化合物。為此，制備濃度為0.01-1mm的本發(fā)明化合物的乙腈母液，然后以1:100的稀釋度移液到孵育混合物中。在37℃下在含和不含nadph生成體系(其由1mmnadp⁺、10mm葡萄糖-6-磷酸和1單位葡萄糖-6-磷酸脫氫酶組成)的50mmph7.4的磷酸鉀緩沖液中孵育肝微粒體和重組酶。還在37℃下，將原代肝細(xì)胞懸浮孵育在williamse培養(yǎng)基中。在孵育0-4h時(shí)間后，用乙腈(終濃度為約30％)終止孵育混合物，并以約15000×g將蛋白質(zhì)離心出來(lái)。直接分析由此終止的樣品，或?qū)⑵鋬?chǔ)存在-20℃下直至進(jìn)行分析。

所述分析通過(guò)帶有紫外和質(zhì)譜檢測(cè)的高效液相色譜法(hplc-uv-ms/ms)進(jìn)行分析。為此，用合適的c18反相柱和乙腈與10mm甲酸銨水溶液或0.05％甲酸的可變流動(dòng)相混合物對(duì)孵育樣品的上清液進(jìn)行層析。uv色譜圖與質(zhì)譜數(shù)據(jù)結(jié)合用于代謝物的鑒定、結(jié)構(gòu)解析和定量評(píng)價(jià)，以及用于孵育混合物中本發(fā)明化合物的定量代謝減少。

b-9.caco-2滲透性試驗(yàn)

測(cè)試物質(zhì)的滲透性借助caco-2細(xì)胞系測(cè)定，所述caco-2細(xì)胞系已建立用于胃腸屏障滲透性預(yù)測(cè)的體外模型(artursson,p.和karlsson,j.“correlationbetweenoraldrugabsorptioninhumansandapparentdrugpermeabilitycoefficientsinhumanintestinalepithelial(caco-2)cells”biochem.biophys.1991，175(3)，880-885)。將caco-2細(xì)胞(accno.169，dsmz，deutschesammlungvonmikroorganismenundzellkulturen，braunschweig，germany)接種在含有插入物(insert)的24孔板中并培養(yǎng)15至16天。對(duì)于滲透性研究，將測(cè)試物質(zhì)溶解在dmso中并用轉(zhuǎn)移緩沖液(hanksbufferedsaltsolution，gibco/invitrogen，含19.9mm葡萄糖和9.8mmhepes)稀釋至最終的測(cè)試濃度。為測(cè)定測(cè)試物質(zhì)從頂部到基底外側(cè)的滲透性(pappa-b)，將包含測(cè)試物質(zhì)的溶液施用到caco-2細(xì)胞單層的頂面上，將轉(zhuǎn)移緩沖液施用到基底外側(cè)面上。為了測(cè)定測(cè)試物質(zhì)從基底外側(cè)到頂部的滲透性(pappb-a)，將包含測(cè)試物質(zhì)的溶液施用到caco-2細(xì)胞單層的基底外側(cè)面上，將轉(zhuǎn)移緩沖液施用到頂面上。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，從相應(yīng)的供體隔室中取樣，以確保質(zhì)量平衡。在37℃下孵育兩個(gè)小時(shí)后，從兩個(gè)隔室中取出樣品。通過(guò)lc-ms/ms對(duì)樣品進(jìn)行分析，并計(jì)算表觀滲透系數(shù)(papp)。對(duì)于各細(xì)胞單層，測(cè)定熒光黃的滲透性，以便確保細(xì)胞層完整性。在各測(cè)試運(yùn)行中，還測(cè)定了阿替洛爾(低滲透性的標(biāo)記物)和柳氮磺胺吡啶(主動(dòng)排泄的標(biāo)記物)的滲透性作為質(zhì)量控制。

c.藥物組合物的工作實(shí)施例

本發(fā)明的化合物可被轉(zhuǎn)化成如下的藥物制劑：

片劑：

組成：

100mg本發(fā)明的化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米淀粉(天然的)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(pvp25)(basf，ludwigshafen，germany)和2mg硬脂酸鎂。

片劑重量212mg、直徑8mm，曲率半徑12mm。

制備：

將本發(fā)明的化合物、乳糖和淀粉的混合物用5％(重量/重量)的pvp水溶液進(jìn)行制粒。將顆粒干燥，然后與硬脂酸鎂混合5分鐘。將該混合物用常規(guī)壓片機(jī)壓片(片劑規(guī)格見上)。用于壓制的指導(dǎo)值為15kn的壓力。

用于口服給藥的懸浮劑：

組成：

1000mg本發(fā)明的化合物、1000mg乙醇(96％)、400mg(購(gòu)自fmc，pennsylvania，usa的黃原膠)和99g水。

10ml口服懸浮劑對(duì)應(yīng)于100mg本發(fā)明的化合物的單一劑量。

制備：

將rhodigel懸浮于乙醇中；將本發(fā)明的化合物加入到懸浮液中。邊攪拌邊加入水。將混合物攪拌約6h直到rhodigel的溶脹完全。

用于口服給藥的溶液劑：

組成：

500mg本發(fā)明的化合物、2.5g聚山梨醇酯和97g聚乙二醇400。20g口服溶液劑對(duì)應(yīng)于100mg本發(fā)明的化合物的單一劑量。

制備：

在攪拌下，將本發(fā)明的化合物懸浮于聚乙二醇和聚山梨醇酯的混合物中。繼續(xù)攪拌操作直到本發(fā)明的化合物完全溶解。

i.v.溶液劑：

將本發(fā)明的化合物以低于飽和溶解度的濃度溶于生理學(xué)上可接受的溶劑(例如等滲鹽水溶液、5％葡萄糖溶液和/或30％peg400溶液)中。將該溶液無(wú)菌過(guò)濾并分配至無(wú)菌且無(wú)熱原的注射器中。