其中

R¹是氫、低級烷基、-CH₂-環(huán)烷基或環(huán)烷基；

R²是氫、低級烷基、被羥基取代的低級烷基，或

R¹和R²可以與它們連接的N和C原子一起形成任選地被一個或兩個F原子或被羥基取代的吡咯烷環(huán)，或可以形成氮雜環(huán)丁烷或哌啶環(huán)；

R³是氫、低級烷基、被羥基取代的低級烷基、-(CH₂)_oNH₂、任選地被羥基取代的芐基、苯基、-CH₂-環(huán)烷基或環(huán)烷基；

R^3’是氫或低級烷基；

n是1；

m是0或1

o是1至4；

或涉及其藥用酸加成鹽，外消旋混合物或其相應(yīng)對映異構(gòu)體和/或光學(xué)異構(gòu)體。

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物是催產(chǎn)素(oxytocin)受體激動劑，該化合物是保留催產(chǎn)素生物活性的催產(chǎn)素類似物。這種類似物分子能夠以類似于內(nèi)源性催產(chǎn)素的方式作用，包括結(jié)合催產(chǎn)素受體。催產(chǎn)素的類似物具有全新的分子結(jié)構(gòu)。

催產(chǎn)素是九氨基酸環(huán)肽激素，具有在位置1和6之間形成二硫鍵的兩個半胱氨酸殘基。人催產(chǎn)素包含序列Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly。

肽已經(jīng)作為商業(yè)相關(guān)類型的藥物出現(xiàn)，相對傳統(tǒng)小分子藥物，其提供更好特異性和效力以及更低毒性性質(zhì)的優(yōu)勢。它們?yōu)楹芏嗉膊√峁┯邢Ｍ闹委熯x擇，比如糖尿病、HIV、肝炎、癌癥等，并且醫(yī)生和患者變得更接受基于肽的藥物。本發(fā)明涉及肽催產(chǎn)素受體激動劑，其還包括天然激素催產(chǎn)素和卡貝縮宮素(carbetocin)。

催產(chǎn)素是有效的子宮收縮劑，用于控制宮縮無力和失血過多，臨床上用以引起分娩，并且已經(jīng)顯示促進(jìn)泌乳的開始和維持(Gimpl等人，Physiol.Rev.，81，(2001)，629–683，Ruis等人,BMJ，283，(1981)，340–342)。卡貝縮宮素(1-脫氨基-1-卡巴(carba)-2-酪氨酸(O-甲基)-催產(chǎn)素)也是有效的子宮收縮劑，臨床上用于控制宮縮無力和失血過多。

肽類催產(chǎn)素激動劑可以用于治療普拉德-威利綜合征(Prader-Willi Syndrom)，其是在25.000個兒童中影響一個的罕見遺傳病。

進(jìn)一步研究表明，催產(chǎn)素激動劑可用于治療炎癥和疼痛，包括腹部和背部疼痛(Yang，Spine，19，1994，867-71)，男性性功能障礙(Lidberg等人，Pharmakopsychiat.，10，1977，21–25)和女性性功能障礙(Anderson-Hunt，等人，BMJ，309，1994，929)，腸易激綜合征(IBS，Louvel等人，Gut，39，1996，741–47)，便秘和胃腸道梗阻(Ohlsson等人，Neurogastroenterol.Motil.，17，2005，697–704)，孤獨癥(Hollander等人，Neuropsychopharm.，28，2008，193–98)，精神緊張，包括創(chuàng)傷后精神緊張性障礙(PTSD)(Pitman等人，Psychiatry Research，48，107–117)，焦慮，包括焦慮癥和抑郁癥(Kirsch等人，J.Neurosci.，25，49，11489–93，Waldherr等人，PNAS，104，2007，16681–84)，手術(shù)失血或產(chǎn)后出血的控制(Fujimoto等人，Acta Obstet.Gynecol.，85，2006，1310-14)，引產(chǎn)和維持(Flamm等人，Obstet.Gynecol.，70，1987，70–12)，傷口愈合和感染，乳腺炎和胎盤娩出，以及骨質(zhì)疏松癥。此外，催產(chǎn)素激動劑可以用于診斷癌癥和胎盤機(jī)能不全。

此外，論文“Intranasal Oxytocin blocks alcohol withdrawal in human subjects”(Alcohol Clin Exp Res，Vol，No.2012)和“Breaking the loop：Oxytocin as a potential treatment for drug addiction”(Hormones and Behavior，61，2012，331-339)建議用催產(chǎn)素激動劑治療酒精戒斷(alcohol withdrawel)和藥物成癮。

催產(chǎn)素和其受體存在于精神分裂癥的癥狀密切相關(guān)的腦區(qū)域中，比如伏隔核和海馬。催產(chǎn)素受體激動劑可以用于治療孤獨癥，精神緊張(stress)，包括創(chuàng)傷后精神緊張性障礙，焦慮，包括焦慮癥和抑郁癥，精神分裂癥，阿爾茨海默病，精神障礙，記憶喪失和代謝性疾病(WO2012/016229)。

本發(fā)明的目標(biāo)是式I的新化合物和式I的化合物和其藥用鹽用于治療與催產(chǎn)素受體相關(guān)的CNS疾病的用途，所述疾病是孤獨癥，精神緊張，包括創(chuàng)傷后精神緊張性障礙，焦慮，包括焦慮癥和抑郁癥，精神分裂癥，精神障礙和記憶喪失，酒精戒斷，藥物成癮和用于治療普拉德-威利綜合征。

進(jìn)一步的目標(biāo)是制備式I的新化合物和含有它們的藥物。

本發(fā)明可以提供選擇性的，有效的化合物，在某些CNS疾病包括孤獨癥，精神緊張，包括創(chuàng)傷后精神緊張性障礙，焦慮，包括焦慮癥和抑郁癥，精神分裂癥，精神障礙和記憶喪失，酒精戒斷，藥物成癮的治療方面和普拉德-威利綜合征的治療方面提供替代和/或改善。

已經(jīng)顯示，目前的肽對后葉加壓素受體V1a和V2具有非常好的選擇性，如表中所示。這對于用作藥物以避免副作用可以具有較大優(yōu)勢。在旨在治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的情況下，這些生理效果可以被認(rèn)為是不希望的副作用。因此，希望的是獲得相對于后葉加壓素受體對催產(chǎn)素受體有選擇性的藥物。

如本文中使用的，術(shù)語“低級烷基”表示含有1至7個碳原子的飽和直鏈或支鏈基團(tuán)，例如，甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，異丁基，2-丁基，叔丁基等。

術(shù)語“被羥基取代的低級烷基”表示如上文所定義的低級烷基，其中至少一個氫原子被羥基替代。

術(shù)語“環(huán)烷基”表示含有3至6個碳原子的環(huán)烷基鏈。

術(shù)語“藥用酸加成鹽”包括與無機(jī)或有機(jī)酸的鹽，比如鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等。

優(yōu)選的是式I的化合物，其中m是1。

本發(fā)明的一個目標(biāo)是這樣的化合物，其中R¹是氫、低級烷基、-CH₂-環(huán)烷基或環(huán)烷基并且R²是氫、低級烷基、被羥基取代的低級烷基，其他限定如上所述。

本發(fā)明的一個進(jìn)一步的目標(biāo)是這樣的化合物，其中R¹和R²可以與它們連接的N和C一起形成任選地被一個或兩個F原子或被羥基取代的吡咯烷環(huán)，或可以形成氮雜環(huán)丁烷或哌啶環(huán)，并且其他限定如上所述。

已經(jīng)制備了以下具體化合物并且測試了它們對催產(chǎn)素受體的激動活性：

本發(fā)明式I化合物的制備可以以順序或會聚的合成途徑進(jìn)行。進(jìn)行反應(yīng)和純化產(chǎn)生的產(chǎn)物所需的技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。

通過使用Fmoc和Boc方法的固相肽化學(xué)中的標(biāo)準(zhǔn)方法合成本文中的化合物。手工進(jìn)行的反應(yīng)在室溫進(jìn)行，而微波輔助的肽合成在升高的溫度進(jìn)行。

一般合成描述：

參考例如：Kates和Albericio編輯，“Solid Phase Synthesis：A practical guide”，Marcel Decker，New York，Basel，2000，手工或使用微波技術(shù)通過現(xiàn)有固相合成方案(Fmoc-化學(xué))合成線性肽。作為固相載體，使用TentaGel-S-RAM樹脂(0.24meq/g)。在用COMU(0.5mol/L于DMF中)和4當(dāng)量的DIPEA(2mol/L于NMP中)活化之后，所有Fmoc-氨基酸以4-倍過量加入。用DMF中的20％哌啶實現(xiàn)Fmoc-切割。在脫保護(hù)和從樹脂切割以及標(biāo)準(zhǔn)后處理后，將肽在溶液中環(huán)化。將粗制肽用DMF中的標(biāo)準(zhǔn)肽活化劑處理。通過HPLC監(jiān)測環(huán)化。

切割和后處理：

將三氟乙酸、三異丙基硅烷和水(95/2.5/2.5)的切割-混合物加入至樹脂并且在RT振蕩1h。將切割的肽在冷乙醚(-18℃)中沉淀。將肽離心并且將殘留物用冷乙醚洗滌兩次。將殘留物再次溶解在水/乙腈中并凍干。

純化:

使用反相高效液相色譜(RP-HPLC)純化肽，使用Reprospher 100 C18-T柱(100x 4.6mm，5um粒徑)作為固定相和水/乙腈作為洗脫劑(1-50％MeCN梯度，歷時30min)。收集級分并且通過LC/MS分析。將純產(chǎn)物樣品合并并凍干。獲得所有肽，為白色粉末，純度>85％。通過質(zhì)譜獲得產(chǎn)品鑒定。

所有標(biāo)準(zhǔn)氨基酸購自CEM。(2S)-Fmoc-4,4-二氟-吡咯烷-2-甲酸，F(xiàn)moc-Trans-4-氟-脯氨酸-OH，F(xiàn)moc-Hyp(tBu)-OH(2S,4S)-Fmoc-4-氟-吡咯烷-2-甲酸購自Polypeptide。Fmoc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸如下文所述產(chǎn)生。

Fmoc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸的合成

經(jīng)20min向(2S)-2-氨基-4-{[(3S)-3-氨基-3-羧基丙基]二硫基}丁酸(10g，37.263mmol)在MeOH(250mL)中的攪拌的溶液中逐滴加入SOCl₂(10.8mL，149.05mmol)并且將反應(yīng)混合物在25℃攪拌18h。然后將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，得到(2S)-2-氨基-4-{[(3S)-3-氨基-4-甲氧基-4-氧代丁基]二硫基丁酸甲酯HCl鹽(12g，87％)，為灰白色固體。向(2S)-2-氨基-4-{[(3S)-3-氨基-4-甲氧基-4-氧代丁基]二硫基}丁酸甲酯HCl鹽(24g，64.97mmol)在H₂O(560mL)中的攪拌的懸浮液中加入二烷(1800mL)中的K₂CO₃(53.7g，389.8mmol)，F(xiàn)moc-Cl(33.6g，129.9mmol)，并將反應(yīng)混合物在25℃攪拌18h。將固體過濾出，用MeOH(800mL)洗滌并且在減壓下干燥，得到(2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-{[(3S)-3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲氧基-4-氧代丁基]二硫基}丁酸甲酯(32g，66％)，為灰白色固體。LCMS：741(M+H)。向(2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-{[(3S)-3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲氧基-4-氧代丁基]二硫基}丁酸甲酯(16g，21.6mmol)在MeOH(864mL)和DCM(240mL)中的攪拌溶液中加入Zn粉(4.2g，64.8mmol)，TFA(64.3mL，863.8mmol)并將反應(yīng)混合物在25℃攪拌18h。將反應(yīng)混合物過濾以去除鋅并且將濾液在減壓下濃縮。將粗品置于乙酸乙酯中并用1N HCl溶液、1N NaOH溶液、水和鹽水溶液洗滌。將分開的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并在減壓下蒸發(fā)，得到(2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-硫基丁酸甲酯，其在不進(jìn)一步純化的情況下直接用于下一步驟。LC-MS：372(M+H)。向(2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-硫基丁酸甲酯(8g，21.5mmol)在MeOH/THF(2∶1，336mL)中的攪拌溶液中加入三乙胺(3mL，21.5mmol)，丙-2-酸叔丁酯(4.70mL，32.3mmol)并將反應(yīng)混合物在25℃攪拌3h。將反應(yīng)混合物在減壓下蒸發(fā)。將粗品置于DCM中，用1N HCl、飽和的NaHCO₃溶液、水和鹽水溶液洗滌。將分開的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并在減壓下蒸發(fā)。將由此獲得的粗品通過普通二氧化硅柱，使用DCM(100％)純化，得到(2S)-4-{[3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]硫基}-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁酸甲酯(4.6g，44％)，為無色粘性液體。LC-MS：500(M+H)。向(2S)-4-{[3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]硫基}-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁酸甲酯(4.6g，9.2mmol)在異丙醇(122mL)和H₂O(46mL)中的攪拌溶液中加入CaCl₂(16.5g，149.2mmol)，LiOH(1.5g，36.8mmol)并將反應(yīng)混合物在25℃攪拌40min。將有機(jī)溶劑在減壓下移除。將得到的殘留物用10％K₂CO₃溶液稀釋并用二乙醚洗滌。將分開的水層用濃HCl酸化至pH～2并用DCM萃取。將分開的有機(jī)層用水、鹽水溶液洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并在減壓下蒸發(fā)，得到(2S)-4-{[3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]硫基}-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁酸(4g，89％)，為灰白色粘性固體。LC-MS：484(M-H)。向(2S)-4-{[3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]硫基}-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁酸(3.5g，7.2mmol)在乙酸乙酯(18mL)中的攪拌溶液中加入過硫酸氫鉀(oxone)(22.15g，36.0mmol)并將反應(yīng)混合物在25℃攪拌48h。然后將反應(yīng)物過濾，將固體用乙酸乙酯洗滌并且將濾液在減壓蒸發(fā)下。將由此獲得的粗品通過普通二氧化硅柱，使用DCM中的0-5％MeOH純化，得到(2S)-4-{[3-(叔丁氧基)-3-氧代丙烷]磺?；鶀-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁酸(3.1g，84％)，為白色固體。LC-MS：516(M-H)。

肽合成：

使用CEM微波技術(shù)，以每個氨基酸5分鐘的偶聯(lián)時間在升高的溫度(78℃)并且以0.25mmol的規(guī)模合成肽。使用TentalGel-S RAM樹脂作為固體載體(0.24meq/g)進(jìn)行合成。將所有使用的氨基酸溶解在NMP中至0.2mol濃度。使用DMF中的4當(dāng)量COMU(0.5mol/L)和DIPEA的溶液活化氨基酸。用DMF中的哌啶(20％)實現(xiàn)Fmoc-切割3min。重復(fù)Fmoc-切割。

從樹脂切割：

將10ml的由95/2.5/2.5三氟乙酸、三異丙基硅烷和水組成的切割混合物加入至樹脂中并在室溫震蕩3h。將切割的肽在冷的Et₂O(-18℃)中沉淀。將肽在2x 50ml聚丙烯管中離心。將沉淀用冷的乙醚洗滌兩次。之后將沉淀溶解在H₂O/乙腈中并凍干，產(chǎn)生88mg白色粉末。

環(huán)化:

將粗制肽溶解在DMF(15ml)中。加入DMF中的1當(dāng)量的偶聯(lián)劑PyoAP(0.5mol/L)和NMP中的DIPEA(2mol/l)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1h。反應(yīng)完成(LCMS控制)后，將DMF含量濃縮至約2ml。將殘留物在冷的(-18℃)二乙醚(40ml)中沉淀。將肽離心并將沉淀用冷的乙醚洗滌。

純化:

將粗制肽通過制備型HPLC在Reprospher 100 C18-T柱(100x 4.6mm，5um粒徑)上純化。作為洗脫系統(tǒng)，在0-75min內(nèi)以0-100％乙腈梯度使用0.1％TFA/水/乙腈的混合物。收集級分并且通過分析型HPLC檢查。將含有純產(chǎn)物的級分合并并凍干。獲得27mg白色粉末。

相應(yīng)合成下文列出的所有其他肽。

縮寫:

Fmoc：9-芴基甲氧基羰基

tBu：叔丁基

Gly：甘氨酸

Phe：苯丙氨酸

Cha：環(huán)己基丙氨酸

Chg：環(huán)己基甘氨酸

Sar：肌氨酸

Hyp：羥基脯氨酸

Ile:異亮氨酸

Leu:亮氨酸

Nle:正亮氨酸

Nva:正纈氨酸

Dap：二氨基丙酸

Aib：氨基異丁酸

Pro：脯氨酸

Ala：丙氨酸

Val：纈氨酸

homoVal:高纈氨酸

His(Trt)：側(cè)鏈保護(hù)的(三苯甲基)組氨酸

Asn(Trt)：側(cè)鏈保護(hù)的(三苯甲基)天冬酰胺

Gln(Trt)：側(cè)鏈保護(hù)的(三苯甲基)谷氨酰胺

Tyr(tBu)：側(cè)鏈保護(hù)的(tBu)酪氨酸

Thr(tBu)：側(cè)鏈保護(hù)的(tBu)蘇氨酸

HOBT：N-羥基苯并三唑

COMU:1-[(1-(氰基-2-乙氧基-2-氧代亞乙基氨基氧基)二甲基氨基嗎啉代)]脲六氟磷酸鹽

PyoAP:(7-氮雜苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基-六氟磷酸鹽

HBTU：O-苯并三唑-N,N,N′,N′-四甲基-脲-六氟磷酸鹽

DMF：N,N-二甲基甲酰胺

NMP：N-甲基吡咯烷酮

DIPEA：N,N-二異丙基胺

DCM：二氯甲烷

MeCN：乙腈

實施例1

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Pro-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1006.1；觀察到1006.4

實施例2

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期980.1；觀察到981.2

實施例3

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，(2S)-Fmoc-4,4-二氟-吡咯烷-2-甲酸，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。MS(M+H⁺)：預(yù)期1042.1；觀察到1043.1

實施例4

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，(S)-N-Fmoc-氮雜環(huán)丁烷-2-甲酸，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。MS(M+H⁺)：預(yù)期992.2；觀察到993.4

實施例5

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-哌可酸，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1020.2；觀察到1020.5

實施例6

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，(2S,4S)-Fmoc-4-氟-吡咯烷-2-甲酸，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1024.1；觀察到1024.5

實施例7

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Trans-4-氟-脯氨酸，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1024.1；觀察到1024.5

實施例8

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Hyp(tBu)-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1022.1；觀察到1022.5

實施例9

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Nle-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期980.1；觀察到980.4

實施例10

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Aib-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期952.0；觀察到952.4

實施例11

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Cha-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1020.2；觀察到1020.6

實施例12

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Val-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期966.1；觀察到966.5

實施例13

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期980.1；觀察到980.4

實施例14

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Nva-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期966.1；觀察到966.5

實施例15

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-高Val-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期994.1；觀察到994.5

實施例16

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Phe-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1014.1；觀察到1014.4

實施例17

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Tyr(tBu)-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1030.1；觀察到1030.4

實施例18

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Ser(tBu)-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期954.0；觀察到954.4

實施例19

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Ala-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期938.0；觀察到938.4

實施例20

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Dap(BOC)-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期953.0；觀察到953.4

實施例21

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Chg-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1006.1；觀察到1006.4

實施例22

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc--MeLeu-OH，F(xiàn)moc-Sar-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期994.1；觀察到994.5

實施例23

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Nva-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1008.1；觀察到1008.4

實施例24

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Nle-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1022.2；觀察到1022.4

實施例25

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-Ser(tBu)-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期996.1；觀察到996.3

實施例26

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-高Ser(tBu)-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1010.1；觀察到1010.4

實施例27

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Leu-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1006.1；觀察到1006.4

實施例28

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-a-MeLeu-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1020.1；觀察到1020.5

實施例29

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Val-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期992.1；觀察到992.5

實施例30

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Aib-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期978.1；觀察到978.5

實施例31

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺酰基)-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1006.1；觀察到1006.4

實施例32

使用以下氨基酸：Fmoc-Gly-OH，F(xiàn)moc-Chg-OH，F(xiàn)moc-環(huán)丙基Gly-OH，F(xiàn)moc-(S)-2-氨基-4-(2-叔丁氧基羰基-乙磺?；?-丁酸，F(xiàn)moc-Asn(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Gln(Trt)-OH，F(xiàn)moc-Ile-OH和Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

MS(M+H⁺)：預(yù)期1032.2；觀察到1032.4

材料和方法

細(xì)胞培養(yǎng)和穩(wěn)定克隆制備

將中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞用編碼人V1a、人催產(chǎn)素(OTR)或人V2受體的表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，后者與嵌合Gqs5G蛋白組合，以重新定向針對鈣流的信號。通過有限稀釋克隆穩(wěn)定細(xì)胞，獲得表達(dá)人V1a，人V2+Gqs5或人OTR受體的單克隆細(xì)胞系并且基于在檢測受體活化后細(xì)胞中鈣流的熒光成像平板讀數(shù)器(FLIPR)上檢測的功能性響應(yīng)來選擇。將穩(wěn)定細(xì)胞系在含有10％胎牛血清(FBS)，1％青霉素-鏈霉素，1％L-谷氨酸鹽，200ug/ml遺傳霉素的F-12K營養(yǎng)混合物(Kaighns Modification)中，在37℃，在10％CO₂培養(yǎng)箱中以95％濕度培養(yǎng)。

使用熒光成像(熒光成像平板讀數(shù)器，F(xiàn)LIPR)的鈣流測定

在測定之前的下午，將細(xì)胞以50,000個細(xì)胞/孔的密度鋪在黑色96孔板中，所述96孔板具有清晰的底部，以允許從各個孔的底部檢查細(xì)胞和測量熒光。細(xì)胞的密度足以在次日獲得鋪滿的單層。對于各個實驗，新鮮制備無酚紅、含有20mM HEPES(pH 7.3)和2.5mM丙磺舒的Hanks平衡的鹽溶液(測定緩沖液)。使用Beckman Biomek 2000實驗室自動化工作站在含有1％DMSO的測定緩沖液中進(jìn)行化合物稀釋。染料-上樣緩沖液由測定緩沖液中的終濃度2μM的Fluo-4-AM(溶解于DMSO和普流尼克酸(pluronic acid))組成。從孔中移除已有的培養(yǎng)基并且向每孔加入100μl的染料-上樣緩沖液并且在37℃在5％CO₂溫箱中在95％濕度孵育大約60min。染料一加載完，在Embla細(xì)胞清洗器上將細(xì)胞用測定緩沖液徹底清洗，以去除任何未結(jié)合的染料。每孔精確地留下100μl測定緩沖液。

將每個含有染料加載的細(xì)胞的96孔板置于FLIPR機(jī)器中并且將激光強(qiáng)度設(shè)置到合適水平，以檢測低的基底熒光。為了測試作為激動劑的化合物，將25μl稀釋的化合物加入至平板，10秒進(jìn)入熒光測量并且記錄熒光響應(yīng)5分鐘。將熒光數(shù)據(jù)歸一化為內(nèi)源性完全激動劑劑量響應(yīng)，對于最大響應(yīng)設(shè)為100％并且對于最小設(shè)為0％。使用四參數(shù)邏輯方程用Microsoft Excel XLFit如下構(gòu)建各個激動劑濃度-響應(yīng)曲線：Y＝最小+((最大–最小)/(1+10^{(LogEC50-X)nH}))，其中y是％歸一化熒光，最小是最小y，最大是最大y，logEC₅₀是產(chǎn)生最大引發(fā)熒光的50％的log₁₀濃度，x是激動劑化合物濃度的log₁₀并且H是曲線的斜率(希爾系數(shù))。最大值以百分?jǐn)?shù)給出激動劑測試化合物的功效。產(chǎn)生半數(shù)-最大響應(yīng)的激動劑濃度由EC₅₀值表示，其對數(shù)獲得pEC₅₀值。

可以與對于hV1a和hV2的比較數(shù)據(jù)一起，提供對于具體肽的以下EC₅₀(nM)，和功效(％)：

式I化合物和式I化合物的藥用鹽可以用作藥物，例如以藥物制劑的形式用作藥物。所述藥物制劑可以優(yōu)選經(jīng)皮，鼻內(nèi)，皮下或靜脈內(nèi)(iv)給藥。

經(jīng)皮是一種給藥途徑，其中活性成分跨皮膚遞送用以系統(tǒng)分布。實例包括用于藥物遞送的經(jīng)皮貼片，和用于醫(yī)學(xué)或美學(xué)目的的經(jīng)皮移植物。

經(jīng)鼻給藥可以用以遞送藥物而產(chǎn)生局部或系統(tǒng)性效應(yīng)，用于局部效果的鼻噴霧非常常見。肽藥物可以以鼻噴霧給藥，以避免口服給藥后的藥物降解。

對于肽藥物給藥，皮下注射也是常見的。肌肉內(nèi)注射是直接將物質(zhì)注射入肌肉內(nèi)。其是藥物給藥的多種替代方法的一種。其常用于特定形式的以小量給藥的藥物。該注射應(yīng)該在皮膚下給予。

靜脈內(nèi)途徑是直接將液體物質(zhì)灌注到靜脈中。與其它給藥途徑相比，靜脈內(nèi)途徑是將流體和藥物遞送遍及身體的最快方式。

此外，所述藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、香料、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它治療上有價值的物質(zhì)。

含有式I化合物或其藥用鹽和治療惰性載體的藥物也是本發(fā)明的目標(biāo)，作為其制備方法，所述方法包括將一種以上式I的化合物和/或藥用酸加成鹽和，如果需要，一種以上其它治療上有價值的物質(zhì)與一種以上治療上惰性的載體納入蓋倫給藥形式。

根據(jù)本發(fā)明的最優(yōu)選的適應(yīng)癥是包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的那些，例如治療或預(yù)防孤獨癥，精神緊張,包括創(chuàng)傷后精神緊張性障礙，焦慮，包括焦慮癥和抑郁癥,精神分裂癥，精神障礙和記憶喪失，酒精戒斷，藥物成癮和用于治療普拉德-威利綜合征。

劑量可以在寬的限度內(nèi)變化，并且當(dāng)然在各個特定情況中必須被調(diào)整至個體需求。對于成人的劑量可以在每天約0.01mg至約1000mg的通式I的化合物或相應(yīng)量的其藥用鹽之間變化。每日劑量可以以單個劑量施用或以分開的劑量施用，此外，當(dāng)發(fā)現(xiàn)需要時，也可以超過上限。