本發(fā)明涉及新類型的通式I的氨基磷酸1，3，5-三嗪-2-基酯，

其在磷原子處呈絕對(duì)構(gòu)型(S)，即Sp非對(duì)映異構(gòu)體，其中R¹和R²可獨(dú)立地為H、C1-C6(無(wú))支鏈烷基、C1-C6(無(wú))支鏈烷氧基、C1-C6(無(wú))支鏈烷基硫烷基、C1-C6(無(wú))支鏈單烷基氨基或二烷基氨基，包括環(huán)狀氨基，例如吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基，以及它們用于制備生物活性氨基磷酸酯前藥，特別是式II的索非布韋的用途。

索非布韋II是RNA聚合酶的核苷酸抑制劑，其以前藥形式用于治療丙型肝炎，所述前藥在生物體中釋放活性抗病毒劑2'-脫氧-2'-α-氟-β-C-甲基尿苷-5'-三磷酸。

背景技術(shù)：

到目前為止，索非布韋II的最方便的制備方法是基于在于使氨基磷酸酯前體(Sp非對(duì)映異構(gòu)體III)與氟化衍生物IV反應(yīng)的反應(yīng)。該反應(yīng)通過(guò)所謂S_N2機(jī)制在手性磷原子的構(gòu)型反轉(zhuǎn)下立體特異性地進(jìn)行。正是該S_N2機(jī)制使得通過(guò)非對(duì)映異構(gòu)純的中間體III(Sp非對(duì)映異構(gòu)體)的反應(yīng)制備非對(duì)映異構(gòu)純的索非布韋II成為可能。

文獻(xiàn)已描述了前體III的許多合適的離去基團(tuán)(LG)，包括鹵素(Cl、Br、I)、磺酸根(例如甲磺酸根、甲苯磺酸根、三氟甲磺酸根、樟腦磺酸根)和芳氧基，優(yōu)選攜帶至少一個(gè)吸電子基團(tuán)(WO2008/121634、WO2010/135569、WO2011/123645、WO2012/012465、WO2014/008236)。以下基團(tuán)被提及作為最常用的離去基團(tuán)：4-硝基苯氧基、2-硝基苯氧基、2,4-二硝基苯氧基、2-氯-4-硝基苯氧基和五氟苯氧基(J.Org.Chem.2011,76,8311)。使用通式III的氨基磷酸酯前體來(lái)制備索非布韋II的一般方案示于方案1中。

方案1：索非布韋II的合成

對(duì)于大多數(shù)的離去基團(tuán)，通式III的氨基磷酸酯前體的各個(gè)Sp非對(duì)映異構(gòu)體通過(guò)拆分(WO2010/135569)或通過(guò)色譜法從非對(duì)映異構(gòu)體的等摩爾(1:1)混合物分離。在以芳氧基作為離去基團(tuán)(LG)的氨基磷酸酯的情況下，相應(yīng)的Sp非對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)結(jié)晶獲得。專利申請(qǐng)WO2010/135569描述4-硝基苯氧基氨基磷酸酯的Sp非對(duì)映異構(gòu)體富集的混合物的制備。將以1:1的比率含有Sp和Rp非對(duì)映異構(gòu)體(IIIa和IIIb)的混合物的粗反應(yīng)混合物溶解在合適的溶劑(CDM/IPE)中，并用純Sp非對(duì)映異構(gòu)體引晶。通過(guò)隨后的結(jié)晶獲得的產(chǎn)物普遍含有各自氨基磷酸酯的所需Sp非對(duì)映異構(gòu)體IIIa(Sp:Rp 48:1；方案2)。

方案2

類似的程序描述于專利申請(qǐng)WO2011/123645中，該程序此次描述用于五氟苯氧基取代的氨基磷酸酯。在這篇文獻(xiàn)中，各個(gè)光學(xué)純的Sp非對(duì)映異構(gòu)體IIIc(de>99％)通過(guò)從以1:1的比率(Sp:Rp 1:1)含有兩種非對(duì)映異構(gòu)體(IIIc和IIId)的粗反應(yīng)混合物結(jié)晶以37％的總產(chǎn)率獲得(方案3)。

方案3

另一項(xiàng)相對(duì)廣泛的研究論及在使用修飾的核堿基(氟糖)的反應(yīng)中離去的苯氧基對(duì)氨基磷酸酯的反應(yīng)性的影響，以及通過(guò)結(jié)晶獲得非對(duì)映異構(gòu)純的Sp氨基磷酸酯的可能性。這是上文已經(jīng)提及的發(fā)表在J.Org.Chem.2011,76,8311上的論文，其尤其論及2,4-二硝基苯酚、五氟苯酚、2-氯-4-硝基苯酚、2-硝基苯酚、4-硝基苯酚、2,4-二氯苯酚類型的苯氧基。實(shí)現(xiàn)氨基磷酸酯前體的Sp非對(duì)映異構(gòu)體的產(chǎn)率提高的一種可能方式是結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)拆分。此程序首次描述于WO2011/123645中，其中方便地使用五氟苯氧基離去基團(tuán)，從而使得能夠?qū)p非對(duì)映異構(gòu)體IIIc的總產(chǎn)率增加至53％(方案4)。

方案4.在Sp非對(duì)映異構(gòu)體的合成中使用結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)拆分

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供用于制備生物活性氨基磷酸酯前藥，特別是式II的索非布韋的新的改進(jìn)方法。這種新的合成策略在式II的索非布韋的工業(yè)生產(chǎn)中使用良好可用性的I型非對(duì)映異構(gòu)純的氨基磷酸酯前體作為關(guān)鍵中間體(方案5)。

方案5.使用-氨基磷酸烷氧基1,3,5-三嗪-2-基酯I來(lái)合成索非布韋II

具體實(shí)施方式

本發(fā)明是基于以下令人驚訝的觀察結(jié)果：用其中R¹和R²可獨(dú)立地為H、C1-C6無(wú)支鏈或有支鏈烷基、C1-C6無(wú)支鏈或有支鏈烷氧基、C1-C6無(wú)支鏈或有支鏈烷基硫烷基、C1-C6無(wú)支鏈或有支鏈單烷基氨基或二烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基的式I的結(jié)構(gòu)以及其立體異構(gòu)體、鹽、溶劑合物、水合物以及結(jié)晶和無(wú)定形形式的適當(dāng)取代的1,3,5-三嗪-1-基氧基代替式III中的芳氧基可實(shí)現(xiàn)區(qū)域選擇性取代的改善(在文獻(xiàn)WO2010/135569中概述的問(wèn)題)以及最終產(chǎn)物的產(chǎn)率增加和簡(jiǎn)化純化兩者。除反應(yīng)性以外，R¹、R²基團(tuán)的適當(dāng)選擇可顯著影響式VI的1,3,5-三嗪在水和有機(jī)溶劑中的溶解度，而這正是可促進(jìn)最終產(chǎn)物的分離和純化的方式。用短的C1-C2烷基，即甲氧基、乙氧基或二甲基氨基取代的或者攜帶極性基團(tuán)，例如N-甲基哌嗪基或三烷基銨的式VI的1,3,5-三嗪在水中相對(duì)易溶，并且在反應(yīng)結(jié)束后，它們可通過(guò)從有機(jī)溶劑單純萃取至水中而不需使用任何其它試劑從反應(yīng)混合物移除。

本發(fā)明的其它方面提供以下化合物：

a)具有式Ia的結(jié)構(gòu)

并且名稱為2-(S)-[(S)-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷酰基氨基]-丙酸異丙酯的化合物；

b)具有式Ib的結(jié)構(gòu)

并且名稱為2-(S)-[(S)-(4,6-二乙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠-丙酸異丙酯的化合物；

c)具有式Ic的結(jié)構(gòu)

并且名稱為2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠-丙酸異丙酯的化合物；

d)具有式Id的結(jié)構(gòu)

并且名稱為2-(S)-[(S)-(4，6-二叔丁氧基-1，3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠-丙酸異丙酯的化合物。

在反應(yīng)混合物的水性處理的情況下，實(shí)驗(yàn)的適當(dāng)選擇安排，即合適的取代基則使得可將反應(yīng)的次級(jí)產(chǎn)物，即式VI的羥基三嗪轉(zhuǎn)移至水相中，同時(shí)式II的產(chǎn)物仍然留在有機(jī)層中，其代表下一技術(shù)階段-結(jié)晶的輸入原料(方案5)。

然而，如果式VI的1，3，5-三嗪用具有較長(zhǎng)(C3-C6)或支鏈烷基鏈的取代基(例如丙氧基、異丙氧基、烯丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、二乙基氨基)取代，則它們是強(qiáng)親脂性的，并且因此它們?cè)谟袡C(jī)溶劑中良好溶解。但如果在式II的索非布韋的制備期間產(chǎn)生此類式VI的親脂性三嗪，則另一方面，它在處理和洗滌期間不通入或僅部分通入水相中。與式VI的水溶性三嗪不同，上述式VI的親脂性三嗪由于其在有機(jī)溶劑中的高溶解度而容易通過(guò)結(jié)晶從式II化合物移除。這正是式VI的羥基三嗪的另一個(gè)令人驚訝的優(yōu)點(diǎn)。事實(shí)上，與五氟苯酚作為離去基團(tuán)相比，式VI的羥基三嗪在這兩種情況(使用親脂性三嗪和親水性三嗪兩者)下均比使用上述五氟苯酚提供更純的最終產(chǎn)物。這是因?yàn)椴还苁褂猛ㄟ^(guò)結(jié)晶或通過(guò)萃取的純化，五氟苯酚仍然留在產(chǎn)物中。經(jīng)取代的式VI的羥基三嗪的最方便的R¹、R²基團(tuán)是烷氧基，優(yōu)選地，其中特別地R¹＝R²是甲氧基、乙氧基、丙氧基、烯丙氧基、異丙氧基或叔丁氧基。

根據(jù)本發(fā)明中所述的程序，以高產(chǎn)率從相應(yīng)的式VII的2,4,6-三烷氧基-1,3,5-三嗪制備了式VI的三嗪，所述式VII的2,4,6-三烷氧基-1,3,5-三嗪通過(guò)相應(yīng)的醇化物與氰尿酰氯的反應(yīng)獲得。從氰尿酰氯制備式VI不僅可作為兩步驟方法進(jìn)行，而且這些物質(zhì)可通過(guò)“一鍋”法有利地制備。用羥基高度選擇性地取代僅一個(gè)烷氧基可通過(guò)在相應(yīng)的醇、叔丁醇或水中用氫氧化物處理來(lái)進(jìn)行(方案6)。

方案6.：羥基三嗪VI的一鍋法制備

本方法的主要益處是起始原料的成本低，這是此程序的工業(yè)利用的關(guān)鍵標(biāo)準(zhǔn)之一。其它無(wú)可爭(zhēng)議的益處包括式VI的三嗪非常容易處理，與酚類基材相比，它們是無(wú)任何異味的非揮發(fā)性的、無(wú)刺激性的固體結(jié)晶物質(zhì)。就技術(shù)方法和它們用于制備式II的索非布韋的用途而言，相應(yīng)的式VI的三嗪代表反應(yīng)的副產(chǎn)物(方案5)。由于其獨(dú)特的物理化學(xué)特性，它們可容易地從反應(yīng)混合物分離，并且隨后容易地通過(guò)無(wú)機(jī)酸的作用分解成無(wú)毒性的氰尿酸。另外，這些三嗪可安全地焚化而沒(méi)有任何不必要的風(fēng)險(xiǎn)。這種方法和其用途代表了對(duì)文獻(xiàn)中所述的使用酚類衍生物的原始方法的“綠色”替代方案。

非對(duì)映異構(gòu)純的式I的氨基磷酸酯的合成是基于(S)-2-氨基丙酸異丙酯(L-丙氨酸異丙酯)與二氯磷酸苯酯在合適的溶劑中在合適的堿存在下的反應(yīng)，以及隨后的所產(chǎn)生的式V的中間體與合適的式VI的三嗪的反應(yīng)(方案7)。適合于該反應(yīng)步驟的堿尤其包括在廣泛范圍的溶劑和其混合物中的來(lái)自胺系列的堿，例如三乙胺(Et₃N)、N，N-二異丙基乙胺(DIPEA)、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0.]十一碳-7-烯(DBU)、1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(DABCO)、1-甲基嗎啉、1-乙基哌啶，以及碳酸鹽和碳酸氫鹽，例如Na₂CO₃、K₂CO₃、Cs₂CO₃、NaHCO₃、KHCO₃，或者乙酸鹽NaOAc和KOAc。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，三乙胺或DIPEA用于該反應(yīng)步驟。二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、環(huán)戊基甲基醚、二甲氧基乙烷、叔丁基甲基醚(MTBE)、甲苯、三氟甲苯(TFT)已被證明是適合于該反應(yīng)的溶劑。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，該反應(yīng)在二氯甲烷、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、環(huán)戊基甲基醚中進(jìn)行。上述反應(yīng)步驟在-70℃至20℃，優(yōu)選-40℃至0℃的范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行。在式I的化合物的制備中，式V的中間體不需要進(jìn)行分離，并且它方便地原位產(chǎn)生。隨后的式V的化合物與適當(dāng)選擇的式VI的三嗪的反應(yīng)通常獲得比率為1:1的式IX的非對(duì)映異構(gòu)體S_p:R_p的等摩爾混合物。然而，取決于所選擇的條件，也可獲得式IX的非對(duì)映異構(gòu)體S_p:R_p的其它比率。該反應(yīng)在-10℃至10℃的溫度下，優(yōu)選在0℃下進(jìn)行。

通過(guò)結(jié)晶直接分離式I的目標(biāo)Sp非對(duì)映異構(gòu)體是上述方法的主要優(yōu)點(diǎn)。使用這種方法，可以良好的總產(chǎn)率(>50％)和優(yōu)異的光學(xué)純度(>99％de)從粗反應(yīng)混合物獲得式I的氨基磷酸酯前體的Sp-非對(duì)映異構(gòu)體(方案7)。式I的化合物的最方便的R¹、R²基團(tuán)是烷氧基，優(yōu)選地，其中特別地R¹＝R²是甲氧基、乙氧基、丙氧基、烯丙氧基、異丙氧基或叔丁氧基。

方案7：非對(duì)映異構(gòu)純的氨基磷酸酯I的合成

另外，已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，三嗪氨基磷酸酯也經(jīng)受結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)拆分，使得直接獲得的式I的產(chǎn)物的產(chǎn)率仍然可以這種方式來(lái)增加。式I的前體的純Sp非對(duì)映異構(gòu)體可從純Rp異構(gòu)體或式IX的Sp:Rp非對(duì)映異構(gòu)體的任何混合物，優(yōu)選從含有較高量的Rp異構(gòu)體的混合物開(kāi)始，從Rp非對(duì)映異構(gòu)體制備。通過(guò)在合適的溶劑中用堿，例如Et₃N、DIPEA、DABCO、DBU、咪唑、1,2-雙(二甲基氨基)乙烷、1，2-雙(二乙基氨基)乙烷、1，3-雙(二甲基氨基)丙烷、1，3-雙(二乙基氨基)丙烷處理Rp或任何Sp:Rp混合物，可實(shí)現(xiàn)P原子的絕對(duì)構(gòu)型的改變；在優(yōu)選實(shí)施方案中，使用Et₃N或DIPEA作為堿。適合于結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)拆分的溶劑特別包括乙酸乙酯(EtOAc)、乙酸異丙酯(i-PrOAc)、2-甲基四氫呋喃、四氫呋喃(THF)、二烷、二甲氧基乙烷、二乙氧基乙烷、叔丁基甲基醚(MTBE)、環(huán)戊基甲基醚、二乙醚、甲苯、甲基乙基酮(MEK)、丙酮；以及非極性溶劑，在一般情況下尤其為烴，即戊烷、己烷、庚烷、環(huán)己烷、萘烷、甲基環(huán)己烷、2-甲基丁烷、2-甲基戊烷、三乙基甲烷、異辛烷；芳族溶劑，即甲苯、二甲苯、均三甲苯、苯、三氟甲苯(TFT)；以及上述溶劑的組合。在優(yōu)選實(shí)施方案中，使用EtOAc、i-PrOAc、2-甲基四氫呋喃(2-MeTHF)、四氫呋喃、己烷、庚烷、環(huán)己烷和它們的混合物。

根據(jù)本發(fā)明制備式I的純Sp-非對(duì)映異構(gòu)體的條件簡(jiǎn)單并且可達(dá)成手性非常純的產(chǎn)物的高產(chǎn)率。本發(fā)明還描述方便的實(shí)施方案，其中進(jìn)行結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)拆分而無(wú)需從反應(yīng)混合物分離式I的純Sp非對(duì)映異構(gòu)體，并且僅在之后分離這些式I的Sp非對(duì)映異構(gòu)體。本專利中描述的新的通式I的三嗪氨基磷酸酯穩(wěn)定，具有足夠的反應(yīng)性、選擇性，并且通?？捎糜谏锘钚园被姿狨デ八帲貏e是式II的索非布韋的工業(yè)生產(chǎn)。式I的化合物的最方便的R¹、R²基團(tuán)是烷氧基，優(yōu)選地，其中特別地R¹＝R²是甲氧基、乙氧基、丙氧基、烯丙氧基、異丙氧基或叔丁氧基。

本發(fā)明還包括新的通式I的三嗪氨基磷酸酯在式II的索非布韋的制備中的用途。在這個(gè)程序中，式IV的中間體可通過(guò)用幾乎任何格氏試劑處理來(lái)活化(方案5)。通常，可使用任何伯級(jí)、仲級(jí)和叔級(jí)氯化鎂、溴化鎂和碘化鎂，例如叔丁基氯化鎂、芐基氯化鎂、環(huán)己基氯化鎂、環(huán)己基溴化鎂、庚基氯化鎂、辛基氯化鎂。在優(yōu)選實(shí)施方案中，使用庚基氯化鎂和叔丁基氯化鎂。在根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案中，格氏試劑:式IV的中間體以1.1:1至2.9:1摩爾當(dāng)量的比率，優(yōu)選以1.8:1至2.2:1的比率使用。合適的溶劑或它們的混合物尤其包括THF、2-MeTHF、二烷、MTBE、環(huán)戊基甲基醚、Et₂O、二甲氧基乙烷、二乙氧基乙烷、二甲氧基丙烷、二乙氧基丙烷；優(yōu)選使用THF、2-MeTHF和環(huán)戊基甲基醚。還已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，為實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)化率和區(qū)域選擇性，式IV的輸入中間體不需要在添加格氏試劑之前完全溶解在所使用的溶劑或溶劑混合物中。從工業(yè)觀點(diǎn)來(lái)看，使用在反應(yīng)期間釋放高沸點(diǎn)烴(例如甲苯、環(huán)己烷、庚烷、辛烷)的此類格氏試劑可具有很大的實(shí)用和安全優(yōu)點(diǎn)。式I的三嗪氨基磷酸酯與通過(guò)格氏試劑活化后的式IV的中間體在-20℃至20℃的溫度下，優(yōu)選在-10℃至10℃下非常好地反應(yīng)。根據(jù)本專利中介紹的制備方法，式I的三嗪氨基磷酸酯與式IV的中間體以10:1至1:10，優(yōu)選2:1至1:2的摩爾比率反應(yīng)。該方法以及在式II的索非布韋的制備中使用式I的三嗪氨基磷酸酯提供出色的產(chǎn)率，并且所獲得的索非布韋具有優(yōu)異的化學(xué)和光學(xué)純度。這些特性清楚地預(yù)先確定整個(gè)方法可用于以可直接用于生產(chǎn)最終劑型的品質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)式II的索非布韋。

使用下文的工作實(shí)施例以更詳細(xì)的方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡明。這些實(shí)施例示出了根據(jù)本發(fā)明的程序的改進(jìn)，其僅具有說(shuō)明性特性而不在任何方面限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例

反應(yīng)通常使用具有UV(PDA)檢測(cè)器的Agilent 1100HPLC設(shè)備進(jìn)行監(jiān)測(cè)，所述檢測(cè)器裝備有Ascentis Express C18柱(2.7μm)(100×4.6mm)，流速為1ml/min，流動(dòng)相A：磷酸鹽緩沖液和流動(dòng)相B：乙腈(0-2min10％MeCN，2-18min梯度10％->90％MeCN)。使用NMR Bruker Avance 250MHz或500MHz光譜儀記錄¹H、¹³C和³¹P NMR光譜。

2,4,6-三烷氧基-1,3,5-三嗪

實(shí)施例1

式VIIa的2,4,6-三甲氧基-1,3,5-三嗪

在0-5℃的溫度下，將氰尿酰氯(92g,0.5mol)以多個(gè)小份添加至NaOH(60g，1.5mol)和MeOH(500ml)的混合物中。添加所有氰尿酰氯后，將混合物在20℃下攪拌2小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑，并將蒸餾殘?jiān)鼞腋∮贖₂O(500ml)中。將產(chǎn)物抽吸，用H₂O(2×40ml)洗滌，并在室溫和壓力下干燥。獲得作為固體無(wú)色物質(zhì)的式VIIa的2,4,6-三甲氧基-1,3,5-三嗪(79g,92％)。¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆)：3.92(s，9H；OCH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz，DMSO-d₆)：173.1，55.1ppm。HPLC(200nm)：R_t＝6.072min。

實(shí)施例2

式VIIb的2，4，6-三乙氧基-1，3，5-三嗪

使用實(shí)施例1中所述的程序，獲得作為緩慢結(jié)晶的無(wú)色油狀物的式VIIb的2，4，6-三乙氧基-1，3，5-三嗪，產(chǎn)率為93％(99g，93％)。¹H-NMR(250MHz,DMSO-d₆)：4.34(q,J＝7.1,6H；OCH₂),1.30(t,J＝6.2,18H；CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz，DMSO-d₆)：172.5,63.6,14.0ppm。HPLC(200nm)：R_t＝11.383min。

實(shí)施例3

式VIIc的2,4,6-三異丙氧基-1,3,5-三嗪

使用實(shí)施例1中所述的程序，獲得作為固體無(wú)色物質(zhì)的式VIIc的2,4,6-三異丙氧基-1,3,5-三嗪，產(chǎn)率為69％。¹H-NMR(250MHz,DMSO-d₆)：5.35(sept,J＝6.2,3H；OCH),1.37(d,J＝6.2,18H；CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz,DMSO-d₆)：172.6,71.3,21.8ppm。HPLC(200nm)：R_t＝14.625min。

實(shí)施例4

式VIId的2,4,6-三(叔丁氧基)-1,3,5-三嗪

在20℃下，歷時(shí)90min，將tBuOK在THF中的溶液(1M,32ml)逐滴添加至氰尿酰氯(1.84g,0.01mol)在THF(7ml)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在20℃下攪拌4小時(shí)，隨后在真空中濃縮。將蒸發(fā)產(chǎn)物懸浮于H₂O(20ml)中。將固體產(chǎn)物通過(guò)過(guò)濾分離，用水(3×10ml)洗滌，然后在0.1kPa的壓力和20℃的溫度下干燥。獲得作為無(wú)色固體物質(zhì)的式VIId的三嗪，產(chǎn)率為87％(2.58g)。¹H-NMR(250MHz,DMSO-d₆)：1.53(s,27H；CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz,DMSO-d₆)：171.2,81.8,27.9ppm。HPLC(200nm)：R_t＝16.815min。

2-羥基-4,6-二烷氧基-三嗪

實(shí)施例5

式VIa的4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-醇

將式VIIa的2，4，6-三甲氧基-1,3,5-三嗪(34g,0.2mol)和KOH(14g,0.25mol)在MeOH(150ml)中的混合物加熱至沸騰，保持20小時(shí)。冷卻至室溫后，在真空中蒸發(fā)溶劑，并將蒸餾殘?jiān)糜谒?50ml)中。將混合物在低于15℃的溫度下用AcOH酸化至將分離的產(chǎn)物抽吸，用H₂O(2×35ml)洗滌，并在室溫和壓力下干燥。獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式VIa的2-羥基-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(27g,87％)。¹H-NMR(250MHz,DMSO-d₆)：12.42(bs，1H)，3.86(s，6H；OCH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz,DMSO-d₆)：168.1,157.3,55.2ppm。HPLC(200nm)：R_t＝1.475min。

實(shí)施例6

式VIb的4,6-二乙氧基-1,3,5-三嗪-2-醇

將式VIIb的2,4,6-三乙氧基-1,3,5-三嗪(21g,0.1mol)和KOH(7.7g,0.137mol)在tBuOH(100ml)中的混合物加熱至70℃，保持2小時(shí)。冷卻至室溫后，在真空中蒸發(fā)溶劑，并將蒸餾殘?jiān)糜谒?100ml)中。將混合物在低于15℃的溫度下用濃鹽酸水溶液酸化至將分離的產(chǎn)物抽吸，用H₂O(2×25ml)洗滌，并在室溫和壓力下干燥。獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式VIb的2-羥基-4,6-二乙氧基-1，3，5-三嗪(15.3g,84％)。¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆)：12.31(bs,1H),4.31(q，J＝7.1，4H；CH₂),1.27(t，J＝7.1,6H,CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz,DMSO-d₆)：168(bs),157.1,64.1,14.0ppm。HPLC(200nm)：R_t＝5.154min。

實(shí)施例7

式VIc的4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-醇

將式VIIc的2,4,6-三異丙氧基-1,3,5-三嗪(88g,0.345mol)和KOH(24g,0.43mol)在iPrOH(260ml)中的混合物加熱至沸騰，保持2小時(shí)。冷卻至室溫后，在真空中蒸發(fā)溶劑，并將蒸餾殘?jiān)糜谒?260ml)中。將混合物在低于15℃的溫度下用濃鹽酸水溶液酸化至將分離的產(chǎn)物抽吸，用H₂O(3×150ml)洗滌，并在室溫和壓力下干燥。獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式VIc的2-羥基-4，6-二異丙氧基-1，3，5-三嗪(64g，87％)。¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆)：12.19(bs，1H)，5.18(sept,J＝6.2,2H；OCH)，1.27(d，J＝6.2，12H；CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz,DMSO-d₆)：167(bs),157.1,71.7,21.4ppm。HPLC(200nm)：R_t＝7.883min。

實(shí)施例8

式VId的4,6-二(叔丁氧基)-1,3,5-三嗪-2-醇

將式VIId的2,4,6-三(叔丁氧基)-1，3,5-三嗪(0.6g,2mmol)和KOH(0.14g,2.5mmol)在tBuOH(260ml)中的混合物加熱至70℃，保持5h。冷卻至20℃后，將混合物在真空中濃縮。將蒸發(fā)產(chǎn)物與H₂O(5ml)混合，并用乙酸水溶液(10％)酸化至將分離的固體產(chǎn)物抽吸，用水(3×5ml)洗滌，并在真空(0.1kPa)中在20℃下干燥。獲得作為淺黃色固體物質(zhì)的式VId的產(chǎn)物，產(chǎn)率為55％(0.27g)。¹H-NMR(250MHz，DMSO-d₆)：11.99(bs，1H)，1.54(s，18H；CH₃)ppm。¹³C-NMR(63MHz，DMSO-d₆)：167(bs)，156.5，84(bs)，27.8ppm。

磷中間體

實(shí)施例9

式Ia的2-(S)-[(S)-(4，6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯

在-50℃至-60℃的溫度下，將Et₃N(55g，0.55mol)在CH₂Cl₂(300ml)中的溶液逐滴添加至異丙基丙氨酸.HCl(44g,0.26mol)和二氯磷酸苯酯(57g,0.27mol)在CH₂Cl₂(300ml)中的混合物中。在-50℃至-60℃下攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物在2小時(shí)期間加熱至-5℃。在-10℃至0℃的溫度下，將式VIa的2-羥基-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-醇(41g,0.26mol)和Et₃N(29g,0.29mol)在CH₂Cl₂(160ml)中的溶液逐滴添加至反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)混合物在-10℃至0℃的溫度下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用H₂O(4×300ml)洗滌。在真空中蒸發(fā)溶劑，并將產(chǎn)物從二乙醚和環(huán)己烷的混合物結(jié)晶。獲得作為淺黃色結(jié)晶物質(zhì)的2-(S)-[(S)-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯(Ia)(21g,19％)。¹H-NMR(500MHz,DMSO-d₆)：7.41(t,J＝7.9,2H；Ph),7.27(d,J＝7.3,1H；Ph),7.23(t,J＝7.4,1H；Ph),6.55(dd,J＝13.0,J＝10.1,1H；NH),4.81(sept,J＝6.3,1H；OCH),4.11-4.00(m,1H；NH-CH)，3.96(s,6H；OCH₃),1.24(d，J＝7.1，3H；NHCHCH₃),1.14(d,J＝6.3，3H；OCHC_aH₃)，1.11(d，J＝6.3，3H；OCHC_bH₃)ppm。³¹P-NMR(101MHz,DMSO-d₆)：-3.24ppm。¹³C-NMR(126MHz，DMSO-d₆)：173.3，172.2(d，J＝5,3),168.3(d,J＝2，5)，150.0(d，J＝6,1),129.8,125.1,120.2(d,J＝4.9),72.0,68.0,50.0(d,J＝1.1),21.26,21.25,19.9(d,J＝6.6)ppm。HPLC(210nm)：R_t＝12.295min。

實(shí)施例10

式Ib的2-(S)-[(S)-(4,6-二乙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷酰基氨基]丙酸異丙酯

使用實(shí)施例9中所述的程序，獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式Ib的2-(S)-[(S)-(4,6-二乙氧基-1,3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯，產(chǎn)率為38％。

¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：7.41(t，J＝7.9,2H；Ph),7.26(d，J＝8.6,1H；Ph),7.23(d,J＝7.4,1H；Ph),6.54(dd,J＝13.2,J＝10.0,1H；NH),4.81(sept,J＝6.4,1H；OCH),4.39(q,J＝7.1；4H,OCH₂),4.07-3.97(m,1H；NH-CH),1.32(t,J＝7.1,6H；2×OCH₂CH₃),1.23(d,J＝7.1，3H；NHCHCH₃),1.13(d,J＝6.3,3H；OCHC_aH₃),1.11(d，J＝6.2，3H；OCHC_bH₃)ppm。³¹P-NMR(101MHz,DMSO-d₆)：-3.34ppm。¹³C-NMR(126MHz,DMSO-d₆)：172.7,172.2(d,J＝5.4),168.2(d,J＝2,3),150.0(d,J＝6,1),129.8,125.1,120.2(d，J＝4.9),68.1,64.4,50.1(d，J＝1.5)，21.31，21.26，19.9(d,J＝6.7),13.9ppm。HPLC(210nm)：R_t＝13.954min。

實(shí)施例11

式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯

使用實(shí)施例9中所述的程序，獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1，3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯，產(chǎn)率為47％。

¹H-NMR(500MHz,DMSO-d₆)：7.41(t,J＝7.9,2H；Ph),7.25(d,J＝8.6,1H；Ph),7.22(t,J＝7.5,1H；Ph),6.52(dd,J＝13.4,J＝10.0,1H；NH),5.21(sept,J＝6.2,1H；N＝C-OCH),4.82(sept,J＝6.3,1H；O＝C-OCH),4.05-3.95(m,1H；NH-CH),1.312(d,J＝6.1,6H；N＝C-OCHC_aH₃),1.310(d,J＝6.3,6H；N＝C-OCHC_bH₃),1.24(d,J＝7.1,3H；NHCHCH₃),1.13(d,J＝6.2,3H；O＝C-OCHC_aH₃),1.10(d,J＝6.2,3H；O＝C-OCHC_bH₃)ppm。³¹P-NMR(101MHz,DMSO-d₆)：-3.45ppm。¹³C-NMR(126MHz,DMSO-d₆)：172.3,172.1(d,J＝5.6),168.3(d,J＝2，5),150.0(d,J＝6.1)，129.8，125.1，120.2(d,J＝4.9),72.0,68.2,50.0(d,J＝1.1),21.38,21.36,21.34，21.24，19.9(d，J＝6.6)ppm。HPLC(210nm)：R_t＝15.272min。

實(shí)施例12

式Ic的2-(S)-[(S)-(4，6-二異丙氧基-1，3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯

將2-(S)-[(R)-(4，6-二異丙氧基-1，3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠-丙酸異丙酯(1g)(Rp:Sp>80:20)溶解于2-甲基四氫呋喃(1ml)中。向溶液中添加庚烷(5ml)和DIPEA(0.2ml)。將混合物在室溫下攪拌4天。將分離的產(chǎn)物抽吸，并用2-甲基四氫呋喃/庚烷的混合物洗滌。獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式Ic的2-(S)-[(S)-(4，6-二異丙氧基-1,3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯，產(chǎn)率為45％(0.454g)。

實(shí)施例13

式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯

使用實(shí)施例9中所述的程序，獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷酰基氨基]丙酸異丙酯，產(chǎn)率為46％(57g)。將含有混合物的母液在真空中濃縮，并再次溶解于EtOAc(51ml)中。向溶液中緩慢添加環(huán)己烷(255ml)，然后添加Et₃N(10ml)。將混合物在室溫下攪拌2天。將分離的產(chǎn)物抽吸，并用EtOAc/環(huán)己烷的混合物洗滌，并在真空中干燥，結(jié)晶的式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯的第二級(jí)分的產(chǎn)率為27％(34g)。

實(shí)施例14

式Id的2-(S)-{(S)-[4，6-二(叔丁氧基)-1,3,5-三嗪-2-氧基]-苯氧基-磷酰基氨基}丙酸異丙酯

使用實(shí)施例9中所述的程序，獲得作為無(wú)色結(jié)晶物質(zhì)的2-(S)-{(S)-[4,6-二(叔丁氧基)-1,3,5-三嗪-2-氧基]-苯氧基-磷酰基氨基}丙酸異丙酯(Id)，產(chǎn)率為14％。¹H-NMR(500MHz,DMSO-d₆)：7.40(t,J＝7.9,2H；Ph),7.28(d,J＝7.3,1H；Ph),7.23(t,J＝7.4,1H；Ph),6.54(dd，J＝13.0，J＝10.1，1H；NH)，4.81(sept，J＝6.3，1H；OCH)，4.11-4.00(m,1H；NH-CH),1.53(s,18H；C(CH₃)₃),1.24(d，J＝7.1，3H；NHCHCH₃)，1.14(d，J＝6.3，3H；OCHC_aH₃)，1.12(d，J＝6.3，3H；OCHC_bH₃)ppm。³¹P-NMR(101MHz，DMSO-d₆)：-3.48ppm。¹³C-NMR(126MHz，DMSO-d₆)：172.9，172.2(d，J＝5.3)，168.2(d，J＝2.5)，150.5(d，J＝6.1)，129.8，125.1，120.2,(d,J＝4.9),81.8,68.0,50.3,(d,J＝1.4),27.8,21.30,21.25，19.9(d，J＝6.7)ppm。

目標(biāo)化合物

實(shí)施例15

式II的索非布韋

在-15℃下，歷時(shí)1小時(shí)，將叔-BuMgCl的溶液(17.35ml,17.35mmol，2.1當(dāng)量，在THF中的1M溶液)逐滴添加至式IV的化合物(2.15g,8.26mmol)在THF(66ml)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在-15℃下攪拌1小時(shí)，然后歷時(shí)30min加熱至-5℃，并再攪拌2小時(shí)。然后，逐滴添加式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸酯(3.99mg,8.26mmol,1當(dāng)量)在THF(16ml)中的溶液，并將反應(yīng)混合物在-5℃下攪拌。48小時(shí)后，歷時(shí)30min，向反應(yīng)混合物中添加2M HCl(100ml)，隨后添加EtOAc(100ml)。將有機(jī)層用2M HCl(50ml)、22×30ml2.5％Na₂CO₃、水(50ml)、鹽水(50ml)洗滌，并用Na₂SO₄干燥。在減壓下通過(guò)蒸餾移除溶劑后，獲得3.38g呈白色泡沫形式的粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物在室溫下溶解于DCM/甲苯(20ml)的混合物中，添加II的晶種，并將混合物攪拌12小時(shí)。將產(chǎn)物在玻璃料上抽吸，用冷的DCM洗滌，并在真空干燥器(40℃,200Pa)中干燥8小時(shí)，從而提供3.02g(69％)呈白色粉末形式的式II的索非布韋(純度為99.5％，光學(xué)純度>99.9％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO)δ11.50(s,1H),7.53(d,J＝7.0Hz,1H),7.33-7.36(m,2H),7.18-7.21(m,2H),7.117-7.20(m,1H),6.03(dd,J＝12.7,10.4Hz,1H),5.83(d,J＝4.3Hz,1H),5.51(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),5.51(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),4.85(hept,J＝6.3Hz,1H),4.33(dd,J＝11.1,5.7Hz,1H),4.20(dt,J＝11.6,6.0Hz,1H),3.97(dd，J＝9.1，4.7Hz，1H)，3.85-3.76(m，1H)，1.25(d,J＝22.6Hz，1H),1.22(d,J＝6.8Hz,1H)，1.15(dd,J＝6.3,0.8Hz,1H)。¹³C NMR(126MHz,DMSO)δ172.64(d,J＝5.1Hz)，162.78(s)，150.71(d,J＝6.3Hz)，150.47(s)，129.67(s)，124.63(s)，120.09(d，J＝4.9Hz)，102.28(s),101.04(s),99.60(s),79.47(s),71.51(s),68.02(s),64.66(s),49.79(s),26.86(s),21.42(d,J＝4.3Hz)，19.81(d,J＝6.5Hz)，16.56(d,J＝25.2Hz)。³¹P NMR(101MHz,DMSO)δ3.80(s)。HPLC(210nm)：R_t＝9.853min。

實(shí)施例16

式II的索非布韋

使用實(shí)施例15中所述的程序，使用式Ib的2-(S)-[(S)-(4,6-二乙氧基-1，3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯獲得式II的索非布韋，產(chǎn)率為63％。

實(shí)施例17

式II的索非布韋

使用實(shí)施例15中所述的程序，使用式Ia的2-(S)-[(S)-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷?；被鵠丙酸異丙酯獲得式II的索非布韋，產(chǎn)率為63％。

實(shí)施例18

式II的索非布韋

使用實(shí)施例15中所述的程序，使用式Id的2-(S)-[(S)-(4，6-二叔丁基-1，3，5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷酰基氨基]丙酸異丙酯獲得式II的索非布韋，產(chǎn)率為57％。

實(shí)施例19

式II的索非布韋

在-15℃的溫度下，歷時(shí)1小時(shí)，將正-庚基MgCl的溶液(2.7ml，2.71mmol，2.05當(dāng)量，在THF中的1M溶液)逐滴添加至式IV的化合物(344mg,1.32mmol)在THF(10ml)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在-15℃下攪拌1小時(shí)，然后歷時(shí)30min加熱至-5℃，并再攪拌2小時(shí)。然后，逐滴添加式Ic的2-(S)-[(S)-(4,6-二異丙氧基-1,3,5-三嗪-2-氧基)-苯氧基-磷酰基氨基]丙酸酯(606mg,1.26mmol，0.95當(dāng)量)在THF(2.6ml)中的溶液，并將反應(yīng)混合物在-5℃下攪拌。48小時(shí)后，歷時(shí)30min，向反應(yīng)混合物中添加2M HCl(15ml)，隨后添加EtOAc(15ml)。將有機(jī)層用2M HCl(5ml)、22×3ml2.5％Na₂CO₃、水(5ml)、鹽水(5ml)洗滌，并用Na₂SO₄干燥。在減壓下通過(guò)蒸餾移除溶劑后，獲得489mg的量的呈白色泡沫形式的粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物在室溫下溶解于DCM/甲苯(5ml)的混合物中，添加II的晶種，并將混合物攪拌6小時(shí)。將產(chǎn)物在玻璃料上抽吸，用冷的DCM洗滌，并在真空干燥器(40℃,200Pa)中干燥4小時(shí)，從而提供426g(61％)呈白色粉末形式的式II的索非布韋(純度為99.1％，光學(xué)純度>99.9％)。