技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種海洋生物提取物抗腫瘤活性的測定方法,包括如下步驟:(1)取對數(shù)生長期的貼壁的腫瘤細(xì)胞,制成單細(xì)胞懸液;離心去上清,再加入RPMI?1640培養(yǎng)液再次吹打沉淀中的細(xì)胞,使之形成單細(xì)胞懸液;(2)將細(xì)胞濃度稀釋至5×104ml-1;(3)將細(xì)胞加入96孔培養(yǎng)板中,每個孔加入100μl;置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h;(4)加入海洋生物提取物樣品,用RPMI?1640培養(yǎng)液將樣品稀釋成5個濃度梯度,每孔加入180μL,4個平行孔;(5)在37℃,48h培養(yǎng)后,每孔加入1mg/ml?MTT?100μl,培養(yǎng)4h;(6)棄去MTT用RPMI?1640洗板一次后,每孔加入DMSO?200μl,置搖床搖勻30min;最后用酶標(biāo)儀在570nm下檢測。本發(fā)明的測定方法簡單快速,測定結(jié)果準(zhǔn)確。
技術(shù)研發(fā)人員:褚方強(qiáng)
受保護(hù)的技術(shù)使用者:青島清泉生物科技有限公司
文檔號碼:201510959557
技術(shù)研發(fā)日:2015.12.21
技術(shù)公布日:2017.06.27