技術(shù)特征：

1.一種海洋生物提取物抗腫瘤活性的測(cè)定方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的貼壁的腫瘤細(xì)胞，倒掉殘留的舊培養(yǎng)液；加入胰酶消化3-5min；在消化后的細(xì)胞中加入含1% FBS的RPMI 1640培養(yǎng)液反復(fù)吹打至形成單細(xì)胞懸液；用1000r/min的低速離心5min；棄去上清，再加入6mL RPMI 1640培養(yǎng)液再次吹打沉淀中的細(xì)胞，使之形成單細(xì)胞懸液；

（2）用血球計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)，將細(xì)胞濃度稀釋至5×10⁴ml^-1左右；

（3）將細(xì)胞加入96孔培養(yǎng)板中，每個(gè)孔加入100μl；置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h；

（4）加入海洋生物提取物樣品，樣品溶液先經(jīng)過(guò)微孔濾膜過(guò)濾除菌，用RPMI 1640培養(yǎng)液將樣品稀釋成5個(gè)濃度梯度，每孔加入180μL，4個(gè)平行孔；

（5）在37℃，48h培養(yǎng)后，用移液槍將96孔板中液體洗凈后每孔加入1mg/ml MTT 100μl，置CO₂培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)4h；

（6）棄去MTT用RPMI 1640洗板一次后，每孔加入DMSO 200μl，置搖床搖勻30min；最后用酶標(biāo)儀在570nm下檢測(cè)；

（7）實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，數(shù)據(jù)以均值±SD表示，并用統(tǒng)計(jì)學(xué)上方差分析的方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行計(jì)算。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海洋生物提取物抗腫瘤活性的測(cè)定方法，其特征在于，細(xì)胞毒百分率（％）＝（OD值對(duì)照孔-OD值給藥孔）/OD值對(duì)照孔×100%；實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，數(shù)據(jù)以均值±SD表示。