本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
根據(jù)味精生產(chǎn)過(guò)程中廢水所含污染物情況可分成三類(lèi):一是高濃度高酸度有機(jī)廢水即離交尾液;二是其它中高濃度有機(jī)廢水;三是不需處理直接外排的冷卻降溫水。離交尾液是通過(guò)離子交換法提取谷氨酸后剩余的“廢液”,它既含有豐富的有機(jī)質(zhì),還含有N、P、K等少量無(wú)機(jī)敖及其它微量元素,這些物質(zhì)都可為生物生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)。其它中高濃度有機(jī)廢水包括:淀粉廢水、制糖廢水、發(fā)酵洗灌廢水、精制廢水等。淀粉廢水和制糖廢水除了含有一定的有機(jī)污染物質(zhì)外,還有一些懸浮物質(zhì);發(fā)酵洗灌廢水與離交尾液所含成分基本相同,只是含量較低;精制廢水有時(shí)呈酸性,有時(shí)呈堿性,有機(jī)物污染物質(zhì)含量較高,這些有機(jī)廢也是微生物資源開(kāi)發(fā)比較理想的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源之一。但是,這些廢水如果得不到合理利用,不僅會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染,而且使資源白白浪費(fèi)掉。目前,眾多味精廢水處理技術(shù)大致分為兩步,一是提取廢水中的谷氨酸菌體單細(xì)胞蛋白,通過(guò)此步分離菌體,常用物化方法進(jìn)行處理(如絮凝、離心等方法);二是提取菌體后廢液的處理,使其達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)或處理后用于工廠回用,這也是眾多味精廢水處理技術(shù)所面臨的關(guān)鍵問(wèn)題,常采用生物處理方法(如厭氧發(fā)酵、生物膜法,SBR法等)。
多粘類(lèi)芽飽桿菌在自然界中分布廣泛,是一種重要的生防菌,對(duì)多種植物真菌、細(xì)菌病害均有較好的防治作用。多粘類(lèi)芽抱桿菌對(duì)動(dòng)植物真菌、細(xì)菌病原物具有廣譜抗性,利用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)多粘類(lèi)抱桿菌產(chǎn)生的抗真 菌活性物質(zhì)的吸附、解吸性能,篩選出其最佳解吸劑,該活性物質(zhì)對(duì)熱、紫外線穩(wěn)定,對(duì)胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性,對(duì)氯仿部分敏感,對(duì)酸穩(wěn)定,對(duì)堿敏感。可以作為微生物肥料菌劑中的一種成分分解秸稈,有效解決農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一方面農(nóng)業(yè)垃圾過(guò)多,污染水體和環(huán)境,處理困難,另一方面化肥,農(nóng)藥使用過(guò)多,土壤惡化的矛盾。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的日的是提供一種能夠在植物葉際與根際定植,并且對(duì)多種病原菌具有抵抗作用的生防菌多粘類(lèi)芽抱桿菌EBL一06菌株,同時(shí)提供一種利用味精廢水生產(chǎn)該生防菌劑的方法。
本發(fā)明所提供的生防菌株是由我們實(shí)驗(yàn)室從小麥的葉面上分離篩選出來(lái)的,將其編號(hào)為EBL一06,分類(lèi)命名為多粘類(lèi)芽抱桿菌,該菌株具有下列性質(zhì):l菌落形態(tài)特征該菌株在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀,邊緣整齊,表面粘稠,與培養(yǎng)基結(jié)合緊密,菌落中心乳黃色。2菌體形態(tài)特征菌體桿狀,革蘭氏染色顯陽(yáng)性,芽抱端生,包囊膨大。3碳源利用能力可以利用碳源:Q一環(huán)式糊精;肝糖;D一葡糖胺酸;衣康酸;D一半乳糖酸Y一內(nèi)醋;D一半乳糖醛酸;2一環(huán)式糊精;肝糖;D一葡糖胺酸;衣康酸;D一半乳糖酸Y一內(nèi)醋;D一半乳糖醛酸;2一輕基苯甲酸;4一輕基苯甲酸;L一精氨酸;L一天門(mén)冬酞胺;L一絲氨酸;甘氨酞一L一谷氨酸;D一木糖;D一甘露醇;苯乙胺。不可利用碳源:丙酮酸甲酷;D一纖維二糖;p一甲基一D一葡萄糖昔;i一赤醉糖醇;N一乙酞一D葡萄糖氨;D,L—u一磷酸甘油;u一丁酮酸;Y一經(jīng)丁酸;L一苯丙氨酸;L一蘇氨酸;腐胺。對(duì)真菌拈抗能力菌株在PDA固體培養(yǎng)基上表現(xiàn)出對(duì)灰葡萄抱霉、黃瓜黑星病的病原菌原菌、木霉菌等的高效拈抗效果。液體種子 制備:向高壓滅菌的土顯液體培養(yǎng)基中,接種多粘類(lèi)芽抱桿菌,25—35攝氏度培養(yǎng),得到液體種子。4、液態(tài)發(fā)酵:向經(jīng)過(guò)預(yù)處理的廢水中接種5%(體積)的液體種子,于25—35℃,通無(wú)菌空氣培養(yǎng)24—72小時(shí)。后處理:培養(yǎng)好的發(fā)酵液經(jīng)細(xì)菌計(jì)數(shù)后,包裝使用。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明:
由本發(fā)明技術(shù)方案生產(chǎn)的多粘類(lèi)芽抱桿菌生防劑能夠高效防治多種真菌類(lèi)植物病害,而且無(wú)公害,生產(chǎn)成本低,并且有效地利用了味精廢水。以下通過(guò)具體實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施,目的在于幫助讀者更好地理解本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì),但不作為對(duì)本發(fā)明實(shí)施范圍的限定。
實(shí)施例l:多粘類(lèi)芽抱桿菌生物農(nóng)藥制備種子培養(yǎng)基制備:稱(chēng)取200g土豆,切碎,于兒自來(lái)水中煮沸30分鐘,過(guò)濾除去殘?jiān)尤?0g葡萄糖,定容至IL,即得土豆培養(yǎng)基。分裝入5個(gè)lL的三角瓶中,滅菌20min。發(fā)酵培養(yǎng)基制備:經(jīng)過(guò)絮凝除去細(xì)菌蛋白的味精廢水比加入10L自來(lái)水稀釋?zhuān)⒂脷溲趸c調(diào)節(jié)pH至6.0。液體種子制備:向土豆液體培養(yǎng)基中接種多粘類(lèi)芽抱桿菌,于30℃,搖瓶,恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)24小時(shí),得到液體種子。發(fā)酵產(chǎn)品:將上述發(fā)酵培養(yǎng)基裝罐到10L的發(fā)酵罐中,12l℃滅菌10min,按照5%的接種量接種液體種子,在30℃恒溫,通無(wú)菌空氣的條件下,發(fā)酵2至3天,取樣計(jì)數(shù)后,無(wú)菌條件下分裝。