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一種耐受高PH的凱氏擬小球藻及其培養(yǎng)應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12152802閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種耐受高PH的凱氏擬小球藻,為凱氏擬小球藻突變株FSH-Y3,其分類命名為Parachlorella kessleri,已于2014年5月26日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏編號(hào)為CGMCC No. 9238。

2.按照權(quán)利要求1所述的凱氏擬小球藻,其特征在于:該藻株在顯微鏡下藻細(xì)胞為球形、橢圓形,內(nèi)有一個(gè)周生、杯狀或片狀的色素體;無(wú)性繁殖,每個(gè)細(xì)胞可以產(chǎn)生2、4、8或16個(gè)似親孢子,成熟時(shí)母細(xì)胞破裂,孢子逸出,長(zhǎng)大后即為新個(gè)體。

3.按照權(quán)利要求1所述的凱氏擬小球藻,其特征在于:該藻株可以耐受的PH值為10~12,在此PH值條件下的生長(zhǎng)速率比原始凱氏擬小球藻快2~5倍。

4.權(quán)利要求1至3任一權(quán)利要求所述的耐受高PH的凱氏擬小球藻的選育方法,其特征在于包括以下內(nèi)容:

(1)配制凱氏擬小球藻生長(zhǎng)的BG11培養(yǎng)基;

(2)接種原始凱氏擬小球藻,經(jīng)光照和黑暗周期誘導(dǎo),對(duì)原始凱氏擬小球藻進(jìn)行活化;

(3)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的凱氏擬小球藻進(jìn)行紫外誘變,然后進(jìn)行暗培養(yǎng);

(4)將暗培養(yǎng)后的藻液用新鮮培養(yǎng)液稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行光照培養(yǎng);

(5)挑取生長(zhǎng)迅速的單藻落接種到BG11培養(yǎng)液中進(jìn)行初篩,培養(yǎng)液的PH為8.0~9.0;

(6)將步驟(5)初篩的藻液,接種到逐級(jí)提高PH的培養(yǎng)液中進(jìn)行馴化培養(yǎng),每次PH提高0.5~1.0,篩選獲得耐受高PH的藻株。

5.按照權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于:在步驟(3)中,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的藻液5~10mL置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中進(jìn)行紫外誘變;在磁力攪拌下,用30w的紫外燈照射誘變,照射時(shí)間為10~20min,紫外燈與培養(yǎng)皿的距離為15~25cm,照射致死率為60%~80%;照射后蓋上皿蓋,用不透光的紙包好培養(yǎng)皿進(jìn)行暗培養(yǎng),暗反應(yīng)的培養(yǎng)溫度為20~30℃,培養(yǎng)時(shí)間為24~72h。

6.按照權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于:在步驟(6)中,以1:10~1:5的比例將步驟(5)中挑選的藻落接種到培養(yǎng)基中,采用逐級(jí)提高PH值的方式進(jìn)行馴化培養(yǎng),初始PH為8.0~9.0,每次PH提高0.5~1.0,每提高一次在相同條件下培養(yǎng)24~96h。

7.按照權(quán)利要求1所述的凱氏擬小球藻在固定CO2中的應(yīng)用。

8.按照權(quán)利要求1所述的凱氏擬小球藻在生產(chǎn)微藻油脂中的應(yīng)用。

9.按照權(quán)利要求1所述的凱氏擬小球藻在高PH下生產(chǎn)微藻油脂同時(shí)固定CO2中的應(yīng)用。

10.按照權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于:該藻株在PH為10~12的生長(zhǎng)條件下固定二氧化碳并進(jìn)行光照自養(yǎng)生長(zhǎng)獲取富含油脂的生物質(zhì),利用BG11或SE等淡水培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)的光照強(qiáng)度1500~20000Lux,溫度為15~40℃,培養(yǎng)液的初始PH為8.0~9.0,每次PH提高0.5~1.0,直至提高至10~12,培養(yǎng)7天進(jìn)入穩(wěn)定期,收獲藻細(xì)胞。

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