本發(fā)明涉及一種可在生物樣品中快速定量檢測有機(jī)小分子的分子印跡聚合物光化學(xué)傳感材料及其制備方法，具體地說就是涉及一種表面具有親水性高分子刷的熒光性分子印跡聚合物微/納米粒子及其制備方法。

背景技術(shù)：

分子印跡技術(shù)是一種制備具有特異性分子識(shí)別位點(diǎn)的合成受體的簡便高效的新方法(H.Zhang，L.Ye，K.Mosbach，J.Mol.Recognit.2006，19，248-259)。由其得到的分子印跡聚合物(Molecularly Imprinted Polymers，簡稱MIPs)由于具有專一分子識(shí)別性能好、耐熱性與化學(xué)穩(wěn)定性高、制備過程簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，因此在色譜固定相、固相提取、免疫分析、仿生傳感器、人工酶、有機(jī)合成與藥物傳遞等眾多方面顯示出廣闊的應(yīng)用前景。其中分子印跡聚合物仿生化學(xué)傳感材料由于在食品安全、環(huán)境檢測及臨床診斷等領(lǐng)域巨大的應(yīng)用前景而成為目前人們研究的熱點(diǎn)(K.Haupt，K.Mosbach，Chem.Rev.2000.100，2495-2504；M.J.Whitcombe，I.Chianella，L.Larcombe，S.A.Piletsky，J.Noble，R.Porter，A.Horgan，Chem.Soc.Rev.2011，40，1547-1571；A.Volkert，A.J.Haes，Analyst2014，139，21-31；J.Wackerlig，P.A.Lieberzeit，Sensor.Actuat.B：Chem.2015，207，144-157)。

分子印跡聚合物化學(xué)傳感材料可通過將分子印跡聚合物作為識(shí)別元件與基于光信號(hào)、電化學(xué)信號(hào)及聲信號(hào)的轉(zhuǎn)換元件組合而成。其中熒光性分子印跡聚合物傳感材料由于熒光已被證明是一種能高效地報(bào)告分子識(shí)別過程的轉(zhuǎn)換機(jī)制而備受關(guān)注。目前，人們已通過將熒光組分(如有機(jī)熒光成分或無機(jī)量子點(diǎn))引入分子印跡聚合物的方法發(fā)展了多種分子印跡聚合物光化學(xué)傳感材料并將其應(yīng)用于眾多分析物的快速靈敏檢測。該領(lǐng)域中的一個(gè)主要研究方向是發(fā)展能夠在水樣中直接檢測有機(jī)小分子的熒光性分子印跡聚合物，這是由于食品安全、環(huán)境檢測及臨床診斷等均是在水溶液中進(jìn)行的。盡管目前人們已經(jīng)發(fā)展了能夠在相對(duì)簡單的水溶液[如蒸餾水(P.Turkewitsch，B.Wandelt，G.D.Darling，W.S.Powell，Anal.('hem.1998，70，2025-2030)、自來水(M.Yang，A.Han，J.Duan，Z.Li，Y.Lai，J.Zhan，J.Hazard.Mater.2012，237-238，63-70；Y.T.Wu，Y.J.Liu，L.X.Gao，K.C.Gao，H.Xia，M.F.Luo，X.J.Wang，L.Ye，Y.Shi，B.Lu，Chemosphere 2015，119，515-523)、河水(H.Li，Y.Li，J.Cheng，Chem.Mater.2010，22，2451-2457；X.Wei，M.Meng，Z.Song，L.Gao，H.Li，J.Dai，Z.Zhou，C.Li，J.Pan，P.Yu，Y.Yan，J.Lumin.2014，153，326-332；Y.T.Wu，Y.J.Liu，L.X.Gao，K.C.Gao，H.Xia，M.F.Luo，X，J.Wang，L.Ye，Y.Shi，B.Lu，Chemosphere 2015，119，515-523)、或緩沖水溶液(J.K.Awino.Y.Zhao，Chem.Commun.2014，50，5752-5755)]中直接檢測有機(jī)小分子的熒光性分子印跡聚合物傳感材料，但是能夠直接用于實(shí)際生物樣品中進(jìn)行有機(jī)小分子檢測的熒光性分子印跡聚合物化學(xué)傳感材料的設(shè)計(jì)由于生物樣品的復(fù)雜性而一直是一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的難題。最近，雖然人們也嘗試?yán)脽晒庑苑肿佑≯E聚合物化學(xué)傳感材料進(jìn)行生物樣品中的分析物的檢測，不過他們或是使用了高度稀釋過的生物樣品(M.-R.Chao，C.-W.Hu，J.-L.Chen，Biosens.Bioelectron.2014，61，471-477；B.T.Huy，M.-H.Seo，X.Zhang，Y.-III Lee，Biosens.Bioelectron.2014，57，310-316)，或者所檢測的分析物為高度親水的蛋白(L.Tan，C.Huang，R.Peng，Y.Tang，W.Li，Biosens.Bioelectron.2014，61，506-511)。而對(duì)生物樣品進(jìn)行稀釋會(huì)大大降低其中分析物的濃度，這將會(huì)使生物樣品的痕量分析變得困難甚至不可能。因此發(fā)展能夠在未經(jīng)稀釋的生物樣品中進(jìn)行有機(jī)小分子直接快速檢測的熒光性分子印跡聚合物化學(xué)傳感材料具有重要的意義。

最近，本研究組在發(fā)展可控/“活性”自由基沉淀聚合新技術(shù)的基礎(chǔ)上(H.Q.Zhang，Eur.Polym.J.2013，49，579-600)，制備了一系列表面具有親水性高分子刷的分子印跡聚合物微/納米粒子，它們被證明在未經(jīng)稀釋的生物樣品中對(duì)有機(jī)小分子具有優(yōu)異的分子識(shí)別性能(Y.Ma，G.Q.Pan，Y.Zhang，X.Z.Guo H.Q.Zhang，Angew.('hem.Int.Ed.2013，52，1511-1514；H.Q. Zhang，Polymer 2014，55，699-714；M.Zhao，X.J.Chen，H.T.Zhang，H.S.Yan，H.Q.Zhang，Biomacromolecules 2014，15，1663-1675；M.Zhao，C.Zhang，Y.Zhang，X.Z.Guo，H.S.Yan，H.Q.Zhang，('hem.Commun.2014，50，2208-2210)。不過其有機(jī)分子的檢測過程不僅需對(duì)該分子印跡聚合物的生物樣品溶液進(jìn)行高速離心，還需將離心所得上清液中的蛋白進(jìn)行沉淀后進(jìn)行定量分析，因此該過程非常耗時(shí)，這大大限制了此類分子印跡聚合物的實(shí)際應(yīng)用。

為了解決上述問題，本發(fā)明在上述工作的基礎(chǔ)上，通過將熒光組分引入分子印跡聚合物中的方法，制備了表面具有親水性高分子刷的熒光性分子印跡聚合物微/納米粒子，成功實(shí)現(xiàn)了在未經(jīng)稀釋的純生物樣品中直接快速檢測有機(jī)小分子的目的。其微/納米尺度的體積賦予該親水性的分子印跡聚合物粒子以優(yōu)異的水相懸浮性能，這為其在食品安全、環(huán)境監(jiān)測及臨床診斷等方面的應(yīng)用提供了極大的便利。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供一種能夠在生物樣品中快速定量檢測有機(jī)小分子的熒光性分子印跡聚合物微/納米粒子及其制備方法，以彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，為分子印跡聚合物傳感材料的實(shí)用化奠定基礎(chǔ)。

本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思是通過將可聚合熒光單體引入到親水性大分子鏈轉(zhuǎn)移劑誘導(dǎo)的RAFT沉淀聚合體系中的方法，一步法制備表面具有親水性高分子刷的熒光性分子印跡聚合物微/納米粒子，得到在未經(jīng)稀釋的生物樣品中可快速定量檢測有機(jī)小分子的分子印跡聚合物。

本發(fā)明的具體方法如下：

(1)將模板分子、單烯類功能單體、多烯類交聯(lián)單體按摩爾比1∶1～10∶1～80投料于適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)溶劑中，單烯類功能單體與多烯類交聯(lián)單體在體系中的體積分?jǐn)?shù)為0.5～10％；

(2)加入單烯類功能單體與多烯類交聯(lián)單體總量約0.5～10％的自由基引發(fā)劑與適量的鏈轉(zhuǎn)移劑，其中自由基引發(fā)劑與鏈轉(zhuǎn)移劑的摩爾比為1∶1～20；

(3)鏈轉(zhuǎn)移劑由小分子鏈轉(zhuǎn)移劑與親水性大分子鏈轉(zhuǎn)移劑組成，其中小分子鏈轉(zhuǎn)移劑所占摩爾百分?jǐn)?shù)為0～95％；

(4)將功能單體量1～200％的可聚合熒光單體加入到反應(yīng)體系中；

(5)將上述混合物完全溶解后，通氬氣或氮?dú)獬酢⒎磻?yīng)器密封后置于25～100℃下反應(yīng)1～500小時(shí)，超聲分散后離心得到含有模板分子的聚合物微/納米粒子；

(6)將含有模板分子的聚合物微/納米顆粒先后用甲醇/乙酸(體積比為10/0.1～10/10)的混合液與甲醇清洗，直至沒有模板分子洗出為止。然后真空干燥至恒重，即得到表面具有親水性高分子刷的熒光性分子印跡聚合物微/納米顆粒。

所用的單烯類功能單體為可與模板分子通過非共價(jià)相互作用形成超分子復(fù)合物的含有C＝C雙鍵的單體[如4-乙烯吡啶、2-乙烯吡啶、4-乙烯基苯甲酸、(甲基)丙烯酸、三氟甲基丙烯酸、甲基丙烯酸-2-羥基乙酯、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、(甲基)丙烯酰胺、2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸、4-乙烯基咪唑、衣康酸或N-乙烯基吡咯烷酮]。

所用的可聚合熒光單體為：含有可聚合C＝C雙鍵的熒光性有機(jī)化合物或無機(jī)量子點(diǎn)。

所用的多烯類交聯(lián)單體為：雙甲基丙烯酸乙二醇酯、三甲基丙烯酸三羥甲基丙酯、季戊四醇三丙烯酸酯、二乙烯苯、N，N′-亞甲基雙丙烯酰胺、N，N′-乙基雙丙烯酰胺、N，N′-1，4-苯基雙丙烯酰胺或1，4-二丙烯酰哌嗪。

所用的自由基引發(fā)劑為：偶氮類自由基引發(fā)劑、過氧化物類自由基引發(fā)劑、或氧化還原類引發(fā)劑。

所用的小分子鏈轉(zhuǎn)移劑為：雙硫酯或三硫酯有機(jī)化合物。

所用的親水性大分子鏈轉(zhuǎn)移劑為：具有雙硫酯或三硫酯端基的各種親水性聚合物[包括聚乙二醇、聚N-異丙基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯、聚甲基丙烯酸單甘油酯、聚(甲基)丙烯酰胺、聚N，N′-二甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸二甲胺基乙酯等]。

所用的溶劑為：乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、乙腈/二甲基甲酰胺、乙腈/二甲基 乙酰胺、乙腈/甲苯、乙腈/四氫呋喃、乙腈/甲醇、乙腈/乙醇、乙腈/丙醇、乙腈/丁醇、乙腈/戊醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、水、甲醇/水、乙醇/水、丙醇/水、丁醇/水、戊醇/水、丁酮或石蠟油。

所采用的模板分子為：各種有機(jī)小分子分析物[如心得安、戊脈安、戊烷脒、茶堿、咖啡因、嗎啡、阿替洛爾、撲熱息痛、布洛芬、萘普生、沙美利定、噴他脒、維拉拍米、反胺苯環(huán)醇、多巴胺、甲基沙美利定、異戊巴比妥、阿夫唑嗪、齊多呋定、司他呋定、布比卡因、甲哌卡因、羅哌卡因、酞胺哌啶酮、那蒙特金、單嘧磺隆、尼古丁、紫杉醇、葉酸、維生素B、維生素B2、麻黃素、苯丙氨酸苯胺、苯妥英、地西潘、雙氯醇胺、溴代雙氯醇胺、雙酚A、對(duì)叔丁基苯酚、對(duì)硝基苯酚、對(duì)氯酚、苯并芘、磷酸二苯酯、甲磺隆、單嘧磺隆、瘦肉精、9-乙基腺嘌呤、三聚氰胺、槲皮素、蘆丁、各種抗生素(如青霉素、紅霉素、四環(huán)素、土霉素、氯霉素、赭曲霉毒素A、四環(huán)素、氟哌酸、氟喹諾酮、頭孢氨芐、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、恩佛沙星、氧氟沙星、頭孢硫脒、阿莫西林、卡馬西平、奧卡西平等)、磷酸酯、一硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、焦磷酸酯、磷酰胺、硫代磷酰胺、N-甲基氨基甲酸酯、二甲基氨基甲酸酯、三嗪、脒類、沙蠶毒類、脲類、二硫代氨基甲酸鹽、氨基磺酸類、硫代磺酸酯類、三氯甲硫基類、抗蚜威、吡蟲啉、莠去津、莠滅凈、甲草胺、乙草胺、丁草胺、異丙甲草胺、撲草凈、二甲戊靈、百草枯、精喹禾靈、咪唑乙煙酸、氟磺胺草醚、異惡草松、草除靈、雙甲脒、二嗪磷、乙酰甲胺磷、溴氰菊酯、異丙隆、非草隆、利谷隆、甲氧隆、綠麥隆、秀谷隆、戊唑醇、2-甲基-4-氯苯氧乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、2，4，5-三氯苯氧乙酸、西瑪津、撲滅津、特丁津、雌二醇、乙炔基雌二醇、17-β-雌二醇、睪丸酮、葡糖苷酸睪酮、醋酸皮質(zhì)酮、皮炎平、皮康霜、恩膚霜、復(fù)方酮康唑霜、復(fù)方酮納樂霜、去炎松軟膏、樂膚液、皮康王、艾洛松、優(yōu)卓爾、適確得、復(fù)方適確得、特美膚、索康、喜樂、地塞米松磷酸鈉、可的松、氫化可的松、醋酸氫化可的松、丁酸氫化可的松、地塞米松、醋酸地塞米松、強(qiáng)的松、雙丙酸倍氯米松、糠酸莫米松、氟輕松、丙酸倍他米松、鹵美他松、倍氯美松、雙醋氟美松、的確當(dāng)、百力特、點(diǎn)必舒、艾氟龍、曲安西龍、哈西奈德或丙酸氯倍他索]。

附圖說明：

圖1.利用親水性大分子鏈轉(zhuǎn)移劑誘導(dǎo)的RAFT沉淀聚合法制備表面具有親水性高分子刷的熒光性分子印跡聚合物微/納米粒子的實(shí)驗(yàn)路線及其熒光淬滅過程示意圖。

圖2.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(以四環(huán)素Tc為模板，簡稱Tc-MIP-1)的原子力顯微鏡照片。

圖3.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-1，對(duì)應(yīng)于圖2中的Tc-MIP-1)的原子力顯微鏡照片。

圖4.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(以心得安為模板分子，簡稱心得安-MIP-1)的原子力顯微鏡照片。

圖5.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(心得安-CP-1，對(duì)應(yīng)于圖4中的心得安-MIP-1)的原子力顯微鏡照片。

圖6.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(Tc-MIP-1，實(shí)心符號(hào))及其非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-1，空心符號(hào))在純牛血清中熒光淬滅程度(即F₀/F-1，其中F₀為四環(huán)素濃度為0時(shí)Tc-MIP-1/Tc-CP-1溶液的熒光強(qiáng)度，而F為存在四環(huán)素時(shí)Tc-MIP-1/Tc-CP-1溶液的熒光強(qiáng)度)與四環(huán)素Tc濃度的關(guān)系圖。

圖7.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(Tc-MIP-1)及其非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-1)在純牛血清中吸附四環(huán) 素(Tc)、氯化四環(huán)素(cTc)、氯霉素(Chl)、頭孢氨芐(Lex)、萬古霉素鹽酸鹽(Van)、或阿替洛爾(Atenolol)后的熒光淬滅結(jié)果圖(吸附溫度為25℃，Tc、cTc、Chl、Lex、Van及阿替洛爾的濃度均為10μM，Tc-MIP-1與Tc-CP-1的濃度均為0.5mg/mL)。

圖8.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(心得安-MIP-1，實(shí)心符號(hào))及其非印跡聚合物納米顆粒(心得安-CP-1，空心符號(hào))在純牛血清中熒光淬滅程度(即F₀/F-1，其中F₀為心得安濃度為0時(shí)心得安-MIP-1/心得安-CP-1溶液的熒光強(qiáng)度，而F為存在心得安時(shí)心得安-MIP-1/心得安-CP-1溶液的熒光強(qiáng)度)與心得安濃度的關(guān)系圖。

圖9.表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(心得安-MIP-1)及其非印跡聚合物納米顆粒(心得安-CP-1)在純牛血清中吸附心得安或阿替洛爾(Atenolol)后的熒光淬滅結(jié)果圖(吸附溫度為25℃，心得安與阿替洛爾的濃度均為20μM，心得安-MIP-1與心得安-CP-1的濃度均為0.3mg/mL)。

具體實(shí)施方式

實(shí)例1

將0.834mmol四環(huán)素Tc加入裝有60mL乙腈/二甲基甲酰胺(4∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝5140)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中，反應(yīng)24h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直到無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(Tc-MIP-1)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-1)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。

實(shí)例2

將0.834mmol四環(huán)素Tc加入裝有60mL乙腈/二甲基甲酰胺(4∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝3610)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中，反應(yīng)24h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直到無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝3610)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(Tc-MIP-2)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝3610)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-2)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。

實(shí)例3

將0.834mmol四環(huán)素Tc加入裝有60mL乙腈/二甲基甲酰胺(4∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基 丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝2610)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中，反應(yīng)24h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直到無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝2610)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(Tc-MIP-3)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝2610)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(Tc-CP-3)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。

實(shí)例4

將0.834mmol心得安加入裝有60mL乙腈/甲醇(2∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝5140)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中反應(yīng)16h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直至無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(即心得安-MIP-1)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝5140)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(即心得安-CP-1)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。

實(shí)例5

將0.834mmol心得安加入裝有60mL乙腈/甲醇(2∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝3610)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中反應(yīng)16h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直至無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝3610)的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(即心得安-MIP-2)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝3610)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(即心得安-CP-2)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。

實(shí)例6

將0.834mmol心得安加入裝有60mL乙腈/甲醇(2∶1，體積/體積)的100mL圓底燒瓶中，磁子攪拌使其完全溶解，然后加入0.834mmol甲基丙烯酸、2.501mmol雙甲基丙烯酸乙二醇酯、0.0834mmol可聚合熒光單體(甲基丙烯酸-2-羥基乙酯基)9-蒽酸酯、0.0552mmol小分子鏈轉(zhuǎn)移劑二硫代苯甲酸異丙苯酯(CDB)、0.0342mmol聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯大分子鏈轉(zhuǎn)移劑(M_n，NMR＝2610)和0.0566mmol偶氮二異丁腈(AIBN)。通氬氣除氧30min后將反應(yīng)體系密封，置于60℃恒溫油浴中反應(yīng)16h，離心得反應(yīng)產(chǎn)物。

先后用甲醇/乙酸(9∶1，體積/體積)與甲醇清洗反應(yīng)產(chǎn)物，直至無模板分子洗出為止。晾干后于真空凍干48h，得到表面具有親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝2610) 的熒光性分子印跡聚合物納米顆粒(即心得安-MIP-3)。

表面接枝親水性聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯高分子刷(M_n，NMR＝2610)的熒光性非印跡聚合物納米顆粒(即心得安-CP-3)的制備中除不加模板分子外，其他過程同上。