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一種腺苷酸脫氨酶的液態(tài)發(fā)酵方法與流程

文檔序號(hào):12346332閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種腺苷酸脫氨酶的液態(tài)發(fā)酵方法,其特征在于,其包括如下步驟:

(1)菌種活化:將曲霉孢子接入培養(yǎng)基中培養(yǎng),洗脫得到孢子懸液;

(2)種子制備:將孢子懸液按照1%~2.5%重量比的接種量接入種子搖瓶培養(yǎng)基中,得到種子菌液;

(3)種子罐培養(yǎng):按照0.1%~0.5%重量比的接種量,將種子菌液接入裝有種子培養(yǎng)基的種子罐中培養(yǎng),得到種子培養(yǎng)液,其中轉(zhuǎn)速為50~150rpm,通風(fēng)比為1:0.3~1:1.2;

(4)發(fā)酵罐生產(chǎn):按照2%~10%重量比的接種量,將種子培養(yǎng)液接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中培養(yǎng),其中轉(zhuǎn)速為100~200rpm,通風(fēng)比為1:0.3~1:1.2,發(fā)酵結(jié)束得到發(fā)酵液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,步驟(1)中所述菌種置于28~29℃培養(yǎng)2~4天。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,步驟(2)中所述的孢子懸液置于28~29℃培養(yǎng)20~24小時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,步驟(3)中所述的種子罐培養(yǎng)是在29~31℃溫度下,培養(yǎng)24~28小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,步驟(4)中所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)是在29~30℃溫度下,培養(yǎng)110~130小時(shí)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,對(duì)所述的發(fā)酵液采用板框過(guò)濾得到粗酶過(guò)濾液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,對(duì)所述的粗酶過(guò)濾液進(jìn)行濃縮,濃縮倍數(shù)控制在10~20倍,得到濃縮液。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,所述的種子培養(yǎng)基,以100mL水計(jì),包括:黃豆汁8~12g,蔗糖1~3g,K2HPO40.25~0.75g和酵母粉0.05~0.25g,pH值為5.0~7.2。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,所述的發(fā)酵培養(yǎng)基,以100mL水計(jì),包括:葡萄糖1~5g,蛋白胨1~4g,三水檸檬酸二鈉0.2~0.6g, MgSO4·7H2O 0.02~0.06g,微量元素母液2~6g和吐溫-800.08~0.24g,pH值為5.0~7.0。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的生產(chǎn)方法,其特征在于,所述的微量元素母液,以100mL水計(jì),包括:硫酸鋅0.5~3g和氯化鈣1~4g。

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