專利名稱：用于治療炎性疾病的化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的化學化合物、其制備方法、含有它們的藥物組合物及其在治療中的應用。
炎癥是對組織損傷或微生物侵入的初級反應，其特征為白細胞與內皮粘著，血細胞滲出且在組織內激活。白細胞激活可以導致有毒氧類物質(如過氧化物陰離子)的生成，釋放出粒狀產物(如過氧化物酶和蛋白酶)。循環(huán)白細胞包括嗜中性白細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿細胞、單核細胞和淋巴細胞。不同形式的炎癥涉及不同類型的浸潤白細胞，其具體性能受到粘著分子的性能、細胞因子和趨化因子在組織中的表達調控。
白細胞的主要機能是保護宿主不被生物如細菌和寄生蟲侵襲。一旦組織被損傷或感染，會發(fā)生一系列可引起循環(huán)中的白細胞進入被感染組織內的局部募集的活動。調控白細胞的募集能夠順序破壞和吞噬外源性或死亡細胞，隨后修復組織并且消退炎癥浸潤。然而，在慢性炎癥狀態(tài)中，這種募集常常不適宜，無法充分控制消退，而且炎癥反應可引起組織破壞。
整聯蛋白是細胞表面異源二聚體蛋白，含有α和β鏈，包括在殘余炎癥過程。包括α4β1(也稱作極遲抗原-4(VLA-4)或CD49d/CD29)和4αβ7的α4-整聯蛋白主要表達在除嗜中性白細胞以外的白細胞上(例如嗜曙紅細胞、T-和B-淋巴細胞、嗜堿細胞和肥大細胞)。對α4-整聯蛋白的粘著分子配體包括(i)血管細胞粘著分子(VCAM-1；CD106)，(ii)纖連蛋白中可變剪接連接節(jié)段-1(CS-1)內的一個序列(胞外基質蛋白)，和(iii)粘膜地址素細胞粘著分子(MAdCAM)上的一個位點。在正常情況下，VCAM-1很少表達在脈管系統(tǒng)中，然而，VCAM-1在內皮細胞上的增量調節(jié)發(fā)生在接近炎癥的位點。在一定范圍的非脈管細胞上也可以識別到VCAM-1，這些細胞包括樹狀細胞、骨髓基質細胞、成滑膜細胞(synoviocyte)、星形膠質細胞和一些皮質神經元。MAdCAM表達主要與腸組織有關，它被表達在腸相關淋巴樣組織的高位內皮靜脈、外周淋巴節(jié)和派伊爾氏淋巴集結中。
α4β1(VLA-4)和α4β7均可以與纖連蛋白和MAdCAM中的VCAM-1，CS-1相互作用。α4-整聯蛋白/VCAM-1相作用能夠使白細胞粘附并且隨后形成透過后毛細血管小靜脈壁到組織感染位點的轉移。這種相互作用同樣能夠為T-細胞激活提供共同刺激信號，同時確信α4-整聯蛋白/纖連蛋白的相互作用在肥大細胞、嗜堿細胞和嗜曙紅細胞的脫粒中具有刺激作用。所以，α4-整聯蛋白拮抗劑能夠確保在兩個水平上干預影響許多慢性病的病生理學中必需的炎癥過程的衰減。這些包括(i)抑制白細胞募集到組織的炎癥位點，和(ii)抑制白細胞的激活和炎癥介質的釋放。
由α4-整聯蛋白介導的細胞粘著和信號傳輸是許多生理和病生理過程中所必需的。α4-整聯蛋白阻斷劑的治療功效早已通過測試特異性α4-整聯蛋白阻斷單克隆抗體(抗-α4-mAbs)在體外和體內疾病模型(Lobb和Hemler，1994)的實驗中得到評估?？?α4-mAbs在與哮喘有關的變應性肺炎動物模型中顯示出良好作用，包括豚鼠、大鼠、兔子和綿羊模型。另外，抗-α4-mAbs也已在(i)實驗變應性腦脊髓炎的大鼠和小鼠模型(被視作T-細胞依賴性自身免疫疾病、多發(fā)性硬化的模型)，(ii)接觸性過敏的小鼠模型，(iii)棉-頂(Cotton-top)tamarin中的結腸炎，與炎性腸病有關(Podolsky等人，1993)，和(iv)非肥胖糖尿病小鼠中的胰島素依賴型糖尿病(Baron等人，1994)中顯示出有效性。被認為可阻斷α4-整聯蛋白功能的纖連蛋白衍生肽業(yè)已在小鼠接觸性過敏癥(Ferguson等人，1991)和大鼠佐劑關節(jié)炎(Wahl等人，1994)中顯示出功效。
國際專利申請?zhí)朩O 98/53814、WO 98/53817和WO 98/53818(Merck)公開了雜環(huán)酰胺類化合物、聯芳基鏈烷酸類化合物和磺胺類化合物分別作為VLA-4和/或α4/β7拮抗劑的應用。WO 98/54207(Celltech)公開了酪氨酸衍生物抑制α4整聯蛋白與其配體結合治療和預防免疫或抗炎疾病的用途。WO 97/03094(Biogen)描述了一種半肽化合物的選擇，該化合物能夠抑制配體與VLA-4受體結合。
我們目前發(fā)現一組新的α4-整聯蛋白拮抗劑化合物，它們拮抗α4β1和α4β7兩種整聯蛋白，有效阻斷白細胞粘著和激活，由此影響抗炎特性。因此，這些化合物具有有效的治療效果，尤其是為避免其中白細胞涉及炎癥位點的疾病中由白細胞誘發(fā)的組織損傷提供保護作用。α4β1和α4β7整聯蛋白兩者的拮抗劑可能具有α4β1和α4β7的選擇性拮抗劑所沒有的優(yōu)越性，因為這兩種整聯蛋白被肯定在炎癥中起作用。
所以，按照本發(fā)明的一個方面，我們提供式1的化合物和其鹽和溶劑化物 其中R1和R2獨立地表示(i)-C1-6烷基、-C3-8環(huán)烷基或-C1-3烷基C3-8環(huán)烷基，或上述基團中烷基或環(huán)烷基被一個或多個鹵素、-CN、硝基、羥基或-OC1-6烷基取代的基團；(ii)-(CH2)eAr1或-(CH2)eOAr1；或NR1R2一起表示吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、嗎啉基或吖庚因基，或表示與苯環(huán)稠合的這些基團，任意選擇性地被一個或多個-(CO)n(CH2)tAr1、-(CO)nC1-6烷基Ar1Ar2、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)rOH、-(CH2)rO(CH2)pOH、-(CH2)rOC1-6烷基、-O(CH2)tAr1、-(CH2)rSO2Ar1、哌啶-1-基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)tAr1、NR10(CO)nC1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6環(huán)烷基、-CONR10(CH2)tAr1、鹵素、-NHSO2C1-6烷基、-SO2NR10R11、-SO2C1-6烷基或-SO2Ar2取代；R3表示-C1-6烷基NHC(＝NH)NH2、-C2-6鏈烯基NHC(＝NH)NH2、-C2-6炔基NHC(＝NH)NH2、-C1-6烷基N14R18、-(CH2)hCONR14R18、-(CH2)hCOC1-6烷基、-(CH2)dCHNR18CONR20R21、-(CH2)mNR18CONR14R18、-(CH2)dNR18Ar3、-(CH2)dCONR18Ar3、-(CH2)hCOOR18、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3，-(CH2)dCO(CH2)sAr3或-(CH2)dOAr3；或R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮、-(CH2)c(哌啶-4-基)、-(CH2)c(哌啶-3-基)、-(CH2)c(哌啶-2-基)、-(CH2)c(嗎啉-3-基)或-(CH2)c(嗎啉-2-基)，氮上任意選擇性地被-(CO)fC1-6烷基、-(CO)f(CH2)cAr2或-C(＝NH)NH2取代；
或R3表示選擇性被-C1-6烷基或鹵素取代的-(CH2)z氧芴；或R3表示-(CH2)c-噻噸-9-酮；或R4表示氫、-C1-6烷基、-C1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-(CH2)qAr2、-C1-4烷基-X-R7、C1-4烷基SO2C1-4烷基、-C1-6烷基NR12R13或-C1-6烷基NR12COC1-6烷基；R5代表氫，或R4R5與相連的碳原子一起構成C5-7環(huán)烷基環(huán)；R6表示氫或-C1-6烷基，或R6和R4與同它們分別相連的N和C原子一起構成吡咯烷環(huán)；R7表示氫、-(CH2)wNR12R13、-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基；R8、R9、R16和R17分別表示氫、-C1-6烷基、-C3-6環(huán)烷基、-C1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-C2-6鏈烯基，或NR8R9或NR16R17一起表示嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或被-C1-6烷基、-CO苯基或-SO2甲基N取代的哌嗪基；R10、R11、R12、R13、R15、R18、R20和R21獨立地表示氫或-C1-6烷基；R14、R19和R22獨立地表示氫、-C1-6烷基、-C3-6環(huán)烷基或-(CH2)xAr4或NR14R18或NR15R22一起表示嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或N-C1-6烷基哌嗪基；Ar1表示苯基或含有1至3個選自O、N或S的雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，它們任意選擇性地被一個或多個鹵素、C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、-Ar2或-OAr2取代；Ar2表示任意選擇性地被一個或多個鹵素、-C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、-CF3或硝基取代的苯基；Ar3表示苯基，含有1至3個選自O、N或S雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，或表示與苯環(huán)稠合的這些基團，它們任意選擇性地被一個或多個-CO(CH2)gAr4、-(CH2)yAr4、-(CH2)yCOAr4、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC2-6鏈烯基、-(CO)aC2-6炔基、-(CO)aC3-8環(huán)烷基、-(CO)aC1-6鹵代烷基、鹵素、-COCH2CN、-(CH2)6NR16R17、-(CH2)bNHC(＝NH)NH2、-CYNR16(CO)aR17、-(CH2)bNR15COR19、-(CH2)bCONR15R22、-(CH2)bNR15CONR15R22、-(CH2)bCONR15(CH2)jNR15R22、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bSO2NR15COAr2、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、-SOR19、-(CH2)zOH、-COOR15、-CHO、-OC1-10烷基、-O(CH2)jNR15R22、
-O(CH2)jNHC(＝NH)NH2、-O(CH2)bCONR16R17、-O(CH2)kCOOR15、-O(CH2)jOAr2、-O(CH2)bAr2、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮或4，5-二氫-3(2H)-噠嗪酮基取代；Ar4表示苯基或含有1至3個選自O、N或S的雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，它們任意選擇性地被一個或多個鹵素、-C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、或-CONH2取代；X和Y獨立地表示O或S；a，f，k，s和n獨立地表示0或1；b，c，r，x，y和z獨立地表示0-2的整數；d，g和u獨立地表示1或2；e，h，q和w獨立地表示1-3的整數；j和p獨立地表示2至4的整數；m獨立地表示0至4的整數；t獨立地表示0至3的整數。
Ar1、Ar3和Ar4可以表示的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)實例包括嘧啶、吡啶、呋喃、咪唑、噻吩、吡咯、噻唑、噁唑、異噁唑、1，3，4-噻二唑、1，2，3-噻二唑、1，2，4-噻二唑、1，2，4-噁二唑和吡唑。
Ar1可以表示的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)的特定實例包括嘧啶、吡啶、呋喃、1，2，4-噻二唑和吡唑。
Ar3可以表示的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)的特定實例包括噻唑和吡啶。與苯環(huán)稠合的苯基表示萘基。Ar3可以表示的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)的一個實例包括苯并呋喃。
Ar4可以表示的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)的特定實例包括1，3，4-噻二唑、1，2，3-噻二唑、1，2，4-噁二唑和吡唑。
我們優(yōu)選R1和R2被定義為使NR1R2一起表示哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、嗎啉基或1，2，3，4-四氫異喹啉，它們任意選擇性地被-(CO)n(CH2)rAr1，、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)rAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6環(huán)烷基、-(CH2)rOC1-6烷基、-(CH2)rO(CH2)pOH、哌啶-1-基、-(CH2)rOH或-CONR10(CH2)rAr1基取代。
我們優(yōu)選R1和R2被定義為使NR1R2一起表示任意選擇性地被-(CO)nC1-6烷基(尤其是-COCH3)N取代的嗎啉基或哌嗪基，被-(CO)n(CH2)rAr1(尤其是-CO苯基和-(CO)2-呋喃基)N取代的哌嗪基，被-NR10(CO)n(CH2)rAr1(尤其是-NHCOCH2苯基)取代的哌啶基或被-(CH2)tCONR8R9(尤其是-CONH2)取代的哌啶基。
我們優(yōu)選R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮-3-基、-(CH2)c-噻噸-9-酮-3-基、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3、-(CH2)dOAr3或-(CH2)z氧芴，特別是-OCH2Ar3、-CH2OAr3或氧芴，尤其是-CH2OAr3或氧芴。
當R3表示-(CH2)z氧芴(特別是氧芴)時，我們優(yōu)選它表示-(CH2)z-2-氧芴(特別是2-氧芴)。
當R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮時，我們優(yōu)選它表示-(CH2)c-(2，4-咪唑烷二酮-3-基)(特別是-CH2-2，4-咪唑烷二酮-3-基)。
當R3表示-(CH2)c-噻噸-9-酮，我們優(yōu)選它是-(CH2)c-(噻噸-9-酮-3-基)(特別是-CH2-噻噸-9-酮-3-基)。
我們尤其首選R3表示-CH2OAr3。
我們優(yōu)選R4表示-C1-6烷基，R5表示氫或R4R5與同它們相連的碳一起構成環(huán)己基環(huán)，和R6表示氫或甲基(特別是氫)。
我們特別優(yōu)選R4表示-C1-6烷基，和R5與R6表示氫。
我們尤其優(yōu)選R4表示-CH2CHMe2和R5與R6表示氫。
我們特別優(yōu)選R4和R5具有如式(Ia)所示的立體化學取向 我們優(yōu)選R7表示-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基。
我們尤其優(yōu)選R8和R9分別表示氫或NR8R9一起表示哌啶基或吡咯烷基，特別是哌啶基。
我們優(yōu)選R10表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R11表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R12表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R13表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R14表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R15表示氫或-C1-6烷基，特別是氫。
我們優(yōu)選R16表示氫、-C1-4烷基或-C2-4鏈烯基，特別是氫或丙烯基。
我們優(yōu)選R17表示氫、-C1-4烷基或-C2-4鏈烯基，特別是氫、甲基或丙烯基。
我們優(yōu)選R18表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R19表示氫或C1-6烷基，特別是-C1-6烷基，尤其是甲基。
我們優(yōu)選R20表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R21表示氫或甲基，特別是氫。
我們優(yōu)選R22表示氫、-C1-6烷基或-(CH2)xAr4或NR15R22一起表示哌啶基、吡咯烷基或嗎啉基。
我們尤其優(yōu)選R15和R22定義為使NR15R22共同表示哌啶基。
我們優(yōu)選Ar1表示呋喃、嘧啶或苯基，它們任意選擇性地被鹵素(如氯或氟)或-OC1-6烷基取代。
我們優(yōu)選Ar2表示未取代的苯基。
我們優(yōu)選Ar3表示苯基、萘基或苯并呋喃，它們任意選擇性地被一個或多個-(CH2)yCOAr4、-COOR15、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、(CO)aC2-6鏈烯基、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC3-8環(huán)烷基、鹵素、-(CH2)bCONR15R22、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮-2-基或4，5-二氫-3(2H)-噠嗪酮-6-基取代。我們特別優(yōu)選Ar3表示被-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC3-8環(huán)烷基、鹵素、-(CH2)yCOAr4或-(CH2)bCONR15R22任意選擇性取代的苯基或萘基。
我們特別首選Ar3表示被正丙基、叔丁基、環(huán)己基、碘、-CO苯基或CO哌啶-1-基取代的苯基或被CO哌啶-1-基取代的萘基。
我們優(yōu)選Ar4表示被鹵素任意選擇性地取代的苯基或呋喃，尤其是未取代苯基或呋喃。
我們優(yōu)選e表示1或2。
我們優(yōu)選n表示0或1。
我們優(yōu)選r表示0或1，特別是1。
我們優(yōu)選p表示2。
我們優(yōu)選t表示0、1或3，特別是0或1，尤其是0。
我們優(yōu)選h表示1或2，特別是2。
我們優(yōu)選d表示1。
我們優(yōu)選m表示0或1，特別是1。
我們優(yōu)選c表示0或1，特別是1。
我們優(yōu)選f表示1。
我們優(yōu)選q表示1或2，特別是1。
我們優(yōu)選u表示1。
我們優(yōu)選w表示1或2，特別是1。
我們優(yōu)選x表示0或1，特別是1。
我們優(yōu)選a表示0。
我們優(yōu)選y表示0或1，特別是0。
我們優(yōu)選b表示0或1，特別是0。
我們優(yōu)選j表示2或3，特別是2。
我們優(yōu)選z表示0或1，特別是0。
我們優(yōu)選k表示1。
我們優(yōu)選s表示0。
我們優(yōu)選g表示1。
我們優(yōu)選X表示氧。
我們優(yōu)選Y表示氧。
首選的是式(I)化合物和其鹽和其溶劑化物(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸。
也特別優(yōu)選下列化合物和其鹽和溶劑化物(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2苯甲?；窖趸?乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[4-(氨基羰基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸。
上述優(yōu)選化合物的特征在于口服生物利用度低，這對于吸入藥物而言是有利特性，為的是減小潛在副作用。
式(I)化合物的適用鹽包括生理可接受鹽，例如堿金屬鹽，如鈣、鈉和鉀鹽以及與(三羥甲基)氨基甲烷形成的鹽。式(I)化合物的其他鹽包括可能生理不可接受但可用于制備式(I)化合物及其生理可接受鹽的鹽。如果適宜，酸加成鹽可衍生自無機或有機酸，如鹽酸鹽、氫溴化物、硫酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸、馬來酸鹽、1-羥基nathanoate、甲烷磺酸鹽。溶劑化物的實例包括水合物。
當式(I)化合物的側鏈含有手性中心時，本發(fā)明還涉及對映異構體(包括外消旋混合物)和非對映異構體的混合物以及各對映異構體。通常，優(yōu)選采用純凈單一對映異構體形式的式(I)化合物。
式(I)化合物和其鹽和溶劑化物可以通過下述方法制備，這些方法構成本發(fā)明的另一個方面。
本發(fā)明制備式(I)化合物的方法包括(a)水解式(II)的羧酸酯 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如上定義并且R是能夠形成羧酸酯的基團；或(b)被保護的式(I)化合物脫保護。
在(a)過程中，適當R的實例是C1-6烷基，如甲基或叔丁基。水解或者經酸性方法進行，例如采用三氟乙酸和水；或者經堿性途徑，例如利用氫氧化鈉和甲醇。在另一固相反應中，R可以表示用可利用的羥基官能化的固體載體。固體載體的實例包括樹脂，如聚苯乙烯樹脂，其中苯基環(huán)經連接體被提供羥基。羥基官能化連接體的實例是-CH2O(4-羥甲基-苯基)(Wang樹脂)或3-甲氧基-4-氧基甲基-苯氧基甲基化的1％二乙烯基苯交聯苯乙烯的N-Fmoc氨基酸酰酯(Sasrin樹脂)。
在(b)中，保護基的實例及其脫除方法可以參見T.W.Greene《有機合成中的保護基》(J.Wiley&Sons，1991)。
適用的胺保護基包括磺?；?如甲苯磺酰基)，酰基(如芐氧基羰基或叔丁氧基羰基)和芳烷基(如芐基)，它們可以通過適當的水解或氫解脫除。
式(II)的化合物可以按照下列合成路線制備；合成路線1 步驟(i)在這個合成路線中，我們優(yōu)選R表示甲基。
式(III)和(IV)化合物可以在常規(guī)條件下反應用于制備酰胺。希望在惰性溶劑(如MeCN或DMF)中、在可有可無的HOBT下采用偶聯劑如WSCDI。P1是胺保護基，如一種已經在方法(b)下描述的保護基。在這個合成路線中，優(yōu)選P1表示Boc。
步驟(ii)式(V)向(VI)的轉化適宜在常規(guī)條件下，例如在有機堿如吡啶和惰性有機溶劑如DCM的存在下，利用對硝基苯基氯甲酸酯實施。
步驟(iii)該反應可以通過將反應物在適當溶劑如DCM中、于有機堿如DIPEA的存在下混合進行。
步驟(iv)該脫保護步驟可以在常規(guī)條件下進行。當P1表示Boc時，通過以酸如氫鹵酸(HX)如HCl的處理可以脫除該基團。，步驟(v)式(VIII)與式R3CO2H的化合物的縮合反應可以在與上述步驟(i)類似的條件下進行。
另一種制備式(II)化合物的方法如合成路線2所示合成路線2
步驟(i)在該合成路線中我們優(yōu)選R表示t-Bu(叔丁基)。該步驟的反應條件類似于合成路線1步驟(i)。
在這個合成路線中我們優(yōu)選式(IV)的化合物中P1表示Cbz。
步驟(ii)該過程中包括兩個階段反應，它們是(a)用羧基供體如(Cl3CO)2CO在典型的有機堿如DIPEA和適當溶劑如THF或DCM存在下處理，隨后(b)通過用R1R2NH以類似于上述合成路線1步驟(iii)所述方法處理轉化得到氨基甲酸酯。
步驟(iii)該脫保護反應可以在常規(guī)條件下進行。當P1表示Cbz時，通過氫解可以達到脫保護，例如在Pd/C存在下于溶劑如乙醇中用甲酸銨處理。這個反應可以用酸如氫鹵酸處理得到氫鹵酸鹽(如HCl鹽)產物。
步驟(iv)該過程類似于合成路線1的步驟(v)。另一種式(II)化合物的制備方法如以下合成路線3所示
合成路線3 步驟(i)P2是胺保護基，例如如上所述的保護基，和在這個合成路線中我們優(yōu)選P2表示Fmoc。更優(yōu)選P2是Boc。
式(IX)的化合物可以在2，6-二氯苯甲酰氯、吡啶和適當溶劑(如DMF)的存在下反應到適當固相，例如羥基官能化聚苯乙烯樹脂(如Wang或Sasrin樹脂)上。
步驟(ii)N-保護基P2的脫除可以在常規(guī)條件下實現；例如當P2表示Fmoc時，通過用有機堿如哌啶在適當溶劑如DMF中處理；或例如當P2表示Boc時，通過用氯三甲基硅烷和苯酚在適當溶劑如DCM中處理。
步驟(iii)在這個合成路線中，P1適宜表示Fmoc。另外，它適宜表示Boc。式(XI)的化合物與式(IV)化合物生成酰胺的反應可以在偶聯劑如PyBop、有機堿如DIPEA和適當溶劑如DMF的存在下進行。
步驟(iv)這個脫保護反應可以在常規(guī)條件下進行，例如當P1表示Fmoc或Boc時，在類似于步驟(ii)所述條件下進行。
步驟(v)式(XIII)與式R3CO2H的化合物的縮合反應可以在適當偶聯劑如PyBop、有機堿DIPEA和適當溶劑如DMF的存在下進行。
步驟(vi)這個步驟包括式(XIV)化合物上烯基鏈裂解反應生成式(XV)的化合物，譬如，通過用Pd(PH3)4和PhSiH3(或嗎啉)在適當溶劑如DCM的存在下處理。
步驟(vii)式(XV)化合物向式(XVI)化合物的轉化適宜通過在常規(guī)條件下、于有機堿如DIPEA和惰性有機溶劑如THF和/或DCM存在下用對硝基苯基氯甲酸酯處理來實施。
步驟(viii)這個反應可以通過將反應物在有機堿如DIPEA和合適有機溶劑如DCM和/或THF存在下混合來完成。
某些式(II)的化合物的另一制備方法如以下合成路線4所示
合成路線4 步驟(i)在這個合成路線中，我們優(yōu)選P2表示Fmoc。
該轉化反應可以按照類似于合成路線3步驟(i)至(iii)的過程進行。
步驟(ii)烯基鏈裂解反應可以通過類似于合成路線3步驟(vi)的過程進行。
步驟(iii)對硝基苯基碳酸酯的生成反應可以采用類似于合成路線3步驟(vii)的反應條件進行。
步驟(iv)式(XVIII)向(XIX)的轉化反應可以通過類似于合成路線3步驟(viii)的反應進行。
步驟(v)這個脫保護反應可以采用類似于合成路線3步驟(ii)的過程進行。
步驟(vi)式(XX)向(II)的轉化可以通過一個縮合反應在適當酸存在下采用在適當偶聯劑如PyBop、有機堿如DIPEA和溶劑如DMF進行。
其中R3表示-(CH2)dOAr3的式(II)化合物可以另外由式(XX)的化合物按照步驟(vii)和(viii)進行制備步驟(vii)式(XX)向(XXI)的轉化可以通過縮合反應在鹵代鏈烷酸(如溴代衍生物，即Hal表示溴)的存在下、采用適當偶聯劑如DIC和溶劑如DMF進行。
步驟(viii)在該步驟中，式(XXI)的化合物與式Ar3-OH的化合物的反應可以在碳酸鉀、碘化鈉和適當溶劑如DMF的存在下進行。
式III、IV、IV’、HNR1R2、R3COOH、IX、Hal(CH2)dCOOH和Ar3-OH的化合物或者已知，或者可以通過已知方法制得。
按照下列試驗可以測試本發(fā)明化合物的體外和體內生物活性。(1)Jurkat J6/VCAM-1粘著試驗本實驗用來測試表達在Jurkat J6(人淋巴母細胞系)細胞膜上的整聯蛋白VLA-4與VCAM-1的相互作用。聚苯乙烯96孔微量滴定平板用人免疫球蛋白G(IgG；Sigma Chemicals，UK，產品號14506)以0.05mg/ml碳酸氫鹽緩沖液(36mM NaHCO3和22mM Na2CO3，在Dulbecco’s磷酸鹽緩沖的鹽水中pH 9.8(PBS)時制備；SigmaChemicals，UK，產品號14190-094)的濃度在37℃涂層2小時。隨后吸出該溶液并且用PBS將平板洗滌2次。
通過將其組成的七個結構域克隆在具有zz(蛋白質A)標記的果蠅屬表達體系中制備VCAM-1。這種zzVCAM-1隨后由黃猩猩果蠅(Drosophila melanogaster)S2細胞培養(yǎng)物表達，用銅誘導。加入蛋白酶抑制劑并且經0.2μm濾器過濾或通過離心使培養(yǎng)物上清液澄清。由這種澄清培養(yǎng)基利用IgG瓊脂糖柱純化該zzVCAM-1，該瓊脂糖柱或者單獨用20mM磷酸鈉pH 7.2平衡，或者同時在0.5M氯化鈉存在下平衡。用3M硫氰酸銨洗脫該zzVCAM-1柱，此后利用G25脫鹽柱除去，平衡采用20mM磷酸鈉(pH 7.2)。純化的zzVCAM-1進一步濃縮為較小體積(Amicon攪拌式細胞濃縮器)直至獲得62.5ng/ml的濃度，利用消光系數值計算。
此后，將這種zzVCAM-1溶液在4℃下、于IgG涂層的微量滴定平板中用3％存在于PBS中的牛血清白蛋白(BSA)培養(yǎng)過夜，隨后抽出并且用PBS進一步洗滌2次。生長在細胞培養(yǎng)基RPMI 1640(HyCloneLtd，產品號B-9106-L)中的Jurkat J6細胞(6×106細胞/ml)用10μM的熒光染料2’，7’-雙(2-羧乙基)-5-(e6)-羧基熒光素乙酸甲酯(BCECF-AM；Molecular Probes Inc，產品號B1150)在37℃下標記10分鐘，該RPMI1640培養(yǎng)基中補充有10％熱滅活胎牛血清(FCS；Gibco BRL，產品號10099-075)和2mM L-谷酰胺。此后通過在500×g下離心5分鐘除去過量染料，將細胞重新懸浮至濃度為1.2×107細胞/ml Hank氏平衡鹽溶液(HBSS；Gibco BRL，產品號14190-094)。
將等體積的化合物(溶解在適當溶劑中并且在含有l(wèi)mM MnCl2的HBSS中稀釋)和標記Jurkat J6 cells加入到VCAM-1涂層平板中，并且在37℃下進行30分鐘的粘著。通過將平板反轉并且用棉紙吸附可除去未粘著或松散粘著的細胞。用PBS洗滌2次且隨后進行印跡，此后加入2％洗滌劑(Triton-X；Sigma Chemicals UK，產品號X100)。在華萊士ViktorTM熒光計中進行計數，其中熒光值降低是化合物抑制粘著的指征。所有樣本以一式一份進行分析并且按照4個參數曲線擬合，采用公式(I)公式(I)y=a-d1+(xc)b+d]]>其中a是最小值，b是Hill斜率，c是IC50和d是最大值。(最大值和最小值是與化合物不存在和2mM EDTA二鈉鹽存在下粘著進行比較的值；Sigma Chemicals，UK，產品號ED2P)。數據表示為n次試驗的平均pIC50和平均值的標準偏差。(2)CD3/VCAM-1共同刺激的T-淋巴細胞增殖利用抗CD14、CD19、CD16和HLA.DR抗體和Dynal珠、通過陰性選擇將得自外周血單核細胞的CD4+T-細胞純化。平底96孔組織培養(yǎng)平板用1μgml-1抗CD3抗體(OKT3)涂層，洗滌并且與人IgG和zzVCAM-1融合蛋白質培養(yǎng)。將CD4+T細胞(在RPMI-1640培養(yǎng)基中制備，該培養(yǎng)基補充有10％FCS、青霉素或鏈霉素和L-谷酰胺)加入該涂層平板(1×105細胞/孔)中，在多個劑量的化合物或阻斷抗體存在或不存在條件下培養(yǎng)4天。在培養(yǎng)的最后6小時加入放射標記胸腺嘧啶核甙[3H]，此后用Skatron平板收獲器收獲細胞。利用β平板計數器測量摻入的[3H]標記作為T細胞增殖的指標。化合物一式三份進行測試，并且按照試驗(1)所述的類似方法收集數據。(3)對豚鼠中嗜曙紅細胞浸潤和過度反應性的抑制在基于Danahay等人(1997)所述的方法中，給卵白蛋白敏化豚鼠施用美吡拉敏(30mg/kg ip)以保護不發(fā)生過敏性支氣管痙攣。將溶解在0.9％鹽水中的試驗化合物通過吸入途徑(呼吸30分鐘化合物的氣霧劑)或氣管內途徑在卵白蛋白刺激30分鐘之前和6小時之后給藥(呼吸10分鐘由0.5％卵白蛋白溶液產生的氣霧)。在卵白蛋白刺激后24小時利用整體體積描記器(Buxco Ltd.，USA)測量未受限動物中呼吸道對血栓烷模擬物U46619的過度反應性。此后處死豚鼠并且灌洗肺部。由支氣管肺泡灌洗液獲得白細胞數目的總數和差并測定嗜曙紅細胞累積量的減少百分比(Sanjar等人，1992)。利用地塞米松(200μg/kg i.t)作為陽性對照。數據代表特定劑量的抑制作用，表示為以載體對照反應計的百分比。(4)RPMI 8866/MAdCAM-1粘著實驗本實驗研究表達在RPMI 8866(人B淋巴細胞系)上的α4β7整聯蛋白與MAdCAM-1的相互作用。聚苯乙烯96孔微量滴定平板用人免疫球蛋白G(IgG；Sigma Chemicals，UK，產品號14506)以0.05mg/ml碳酸氫鹽緩沖液(36mM NaHCO3和22mM Na2CO3，在Dulbecco’s磷酸鹽緩沖的鹽水pH 9.8(PBS)中制備；Sigma Chemicals，UK，產品號14190-094)的濃度在37℃涂層2小時。隨后吸出該溶液并且用PBS將平板洗滌2次。
在多角體蛋白促進劑的調控下，通過將其組成的結構域克隆在具有zz(蛋白質A)標記的桿狀病毒表達體系中制得MAdCAM-1。含有zzMAdCAM-1的擴增桿狀病毒用來感染草地夜蛾細胞，指征細胞生長在補充有5％胎牛血清的SF900II培養(yǎng)基的混懸液中。該細胞感染為1的多重性感染，48小時后通過離心收獲。加入蛋白酶抑制劑并且經0.2m濾器過濾或通過離心使培養(yǎng)物上清液澄清。由這種澄清培養(yǎng)基利用IgG瓊脂糖柱純化該zzMAdCAM-1，該瓊脂糖柱或者單獨用20mM磷酸鈉pH 7.2平衡，或者同時在0.5M氯化鈉存在下平衡。用3M硫氰酸銨洗脫該zzMAdCAM-1柱，此后樣品徹底透析采用20mM磷酸鈉(pH7.2)以除去硫氰酸銨。純化的zzMAdCAM-1進一步濃縮為較小體積(Amicon攪拌式細胞濃縮器)直至獲得0.5mg/ml的濃度，利用消光系數值計算。
將zzMAdCAM-1的這種溶液1∶2500稀釋并且隨后在4℃下、于IgG涂層的微量滴定平板中用3％存在于PBS中的牛血清白蛋白(BSA)培養(yǎng)過夜，隨后抽出并且用PBS進一步洗滌2次。生長在細胞培養(yǎng)基RPMI1640(HyClone Ltd，產品號B-9106-L)中的RPMI 8866細胞(3×106細胞/ml)用10M的熒光染料2’，7’-雙(2-羧乙基)-5-(e6)-羧基熒光素乙酸甲酯(BCECF-AM；Molecular Probes Inc，產品號B1150)在37℃下標記10分鐘，該RPMI1640培養(yǎng)基中補充有10％熱滅活胎牛血清(FCS；Gibco BRL，產品號10099-075)和2mM L-谷酰胺。此后通過在500×g下離心5分鐘除去過量染料，將細胞在Hank氏平衡鹽溶液(HBSS；GibcoBRL，產品號4190-094)重新懸浮至濃度為6×106細胞/ml。
將等體積的化合物(溶解在適當溶劑中并且在含有1mM MnCl2的HBSS中稀釋)和標記RPMI 8866細胞加入到MAdCAM-1涂層平板中，并且在37℃下進行30分鐘的粘著。通過將平板反轉并且用棉紙吸附可除去未粘著或松散粘著的細胞。用PBS洗滌2次且隨后進行印跡，此后加入2％洗滌劑(Triton-X；Sigma Chemicals UK，產品號X100)。在華萊士ViktorTM熒光計中進行計數，其中熒光值降低是化合物業(yè)已抑制粘著的指征。所有樣本以一式一份進行分析并且按照4個參數曲線擬合，如公式(I)(上面)所示。其中最大值和最小值是與化合物不存在和2mM EDTA二鈉鹽存在下粘著進行比較的值；SigmaChemicals，UK，產品號ED2P)。數據表示為n次試驗的平均pIC50和平均值的標準偏差。
其中本發(fā)明化合物具有有效抗炎作用的病癥實例包括呼吸道疾病，如支氣管炎(包括慢性支氣管炎)，哮喘(包括變應原誘發(fā)哮喘反應)，慢性阻塞型肺病(COPD)和鼻炎。其它相關疾病包括胃腸道疾病，如腸道炎性疾病，包括炎性腸病(如.克羅恩氏病或潰瘍型結腸炎)和輻射暴露或變應原暴露繼發(fā)的腸道炎性疾病。此外，本發(fā)明的化合物可以用來治療腎炎，皮膚病(如牛皮癬、變應性皮炎和過敏型反應)和具有炎癥因素的中樞神經系統(tǒng)的疾病，如阿耳茨海默氏病、腦膜炎、多發(fā)性硬化和AIDS癡呆。
本發(fā)明化合物具有有效作用的病癥的其它實例包括心血管疾病如動脈粥樣硬化，外周血管疾病和自發(fā)型嗜曙紅細胞過多綜合征。
本發(fā)明的化合物可以有效作為免疫抑制劑，并因此可用于治療自身免疫疾病，如移植后的同種移植組織排異、類風濕關節(jié)炎和糖尿病。
本發(fā)明的化合物也可以有效抑制(癌)遷移主要的相關性疾病包括哮喘、COPD和上呼吸道炎性疾病，包括季節(jié)性和常年性鼻炎。
所屬領域技術人員應理解，本發(fā)明所述治療擴展到已建成疾病的預防和治療。
如上所述，式(I)化合物可用作藥物，特別是抗炎藥。
所以，本發(fā)明的另一方面提供用作藥物、特別是在患有炎性疾病的患者的治療中使用的式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物。
按照本發(fā)明的另一個方面，提供式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物在制備用于治療患有炎性疾病的患者的藥物中的應用。
在另外或其它方面，提供一種治療患有炎性疾病的人或動物的方法，該方法包括給予人或動物有效量的式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物。
本發(fā)明的化合物可以配制為通過任何常規(guī)途徑給藥，因此本發(fā)明在其范圍內還包括用于抗炎治療的藥物組合物，該組合物含有式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物，如果需要，其中同時含有一種或多種生理可接受稀釋劑或載體。
本發(fā)明也提供一種制備所述藥物制劑的方法，其中包括將組分混合。
本發(fā)明的化合物可以配制為譬如經口服、經頰、腸胃外、局部或直腸給藥，優(yōu)選局部給藥至肺部，如通過氣溶膠或作為干粉組合物。
口服給藥用片劑和膠囊可以含有常規(guī)賦形劑，諸如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃芪膠、淀粉膠漿、纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，如乳糖、微晶纖維素、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨糖醇；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如土豆淀粉、、交聯羧甲基纖維素鈉或淀粉乙醇酸鈉；或濕潤劑，如十二烷基硫酸鈉。片劑可以按照所屬領域的已知方法包衣。口服液體制劑可以是例如水或油性混懸液、溶液、乳液、糖漿或酏劑的形式，或可作為干燥產品提供，使用之前用水或其它適當載體配制。所述液體制劑可以含有常規(guī)添加劑，譬如助懸劑，如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/蔗糖糖漿、明膠、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化可食用脂肪；乳化劑，如卵磷脂、脫水山梨糖醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水載體(可以包括可食用油)，例如杏仁油、分餾椰油、油性酯、丙二醇或乙醇；或防腐劑，例如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸。這些制劑也可以含有緩沖鹽、矯味劑、著色劑和/或甜味劑(如甘露糖醇)，如果適當的話。
為了經頰給藥，所述組合物可以采取以常規(guī)方式制備的片劑或錠劑的形式。
化合物也可以配制為栓劑，如含有常規(guī)栓劑基質，例如可可脂或其它甘油酯。
本發(fā)明的化合物也可以配制為通過快速濃注或連續(xù)輸注腸胃外給藥，并且可以以單位劑型存在，譬如安瓿、瓶劑、小體積輸注液或預填充注射器，或含有附加防腐劑的多劑量容器。該組合物可以采取如存在于水或非水載體中的溶液、混懸液或乳液形式，并且可以含有制劑試劑，例如抗氧劑、緩沖劑、殺菌劑和/或張度調節(jié)劑。另外，活性成分可以是粉末形式，在使用之前用適當載體如滅菌無熱原水。通過將滅菌粉末在無菌條件下填充到各個滅菌容器中或將滅菌溶液在無菌條件下填充到各個容器內并且冷凍干燥可以制得干燥固體劑型。
對于本發(fā)明所用的局部給藥，我們包括經吹入和吸入給藥。不同種類局部給藥的制劑的實例包括軟膏、霜劑、洗劑、散劑、陰道栓劑、噴霧劑、氣溶膠、膠囊或吸入器或吹入器所用的藥筒，霧化用溶液或滴劑(如滴眼劑或滴鼻劑)。
譬如，軟膏和霜劑可以用水或油性基質配制，同時加入適當增稠劑和/或膠凝劑和/或溶劑。所以，所述基質譬如可包括水和/或油如液體石蠟，或植物油如花生油或蓖麻油，或溶劑如聚乙二醇。可采用的增稠劑包括軟石蠟、硬脂酸鋁、鯨蠟基硬脂基醇、聚乙二醇類化合物、微晶蠟和蜂蠟。
洗劑可以用水或油性基質配制，并且通常也含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、助懸劑或增稠劑。
外用的散劑可以借助于任何適當的粉末基質配制，例如滑石、乳糖或淀粉。滴劑可以用水或非水基質配制，其中也含有一種或多種分散劑、增溶劑或助懸劑。吸入用散劑組合物適宜含有乳糖。噴霧劑組合物可以配制為如水溶液或混懸液，或成為由加壓包裝輸送的氣溶膠，同時應用適當的拋射劑，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、1，1，1，2-四氟乙烷、二氧化碳或其它適當氣體。
鼻內噴霧劑可以用水或非水載體配制，同時加入試劑如增稠劑、緩沖鹽或調節(jié)pH的酸或堿、等滲調節(jié)劑或抗氧劑。
吸入器或吹入器中所用的膠囊和藥筒(如明膠膠囊或藥筒)，或發(fā)泡劑(如層狀鋁箔)可以配制為含有本發(fā)明化合物與適當粉末基質(如乳糖或淀粉)的粉狀混合物。
通過噴霧吸入的溶液可以用水載體配制，同時加入試劑如酸或堿、緩沖鹽、等滲調節(jié)劑或抗菌劑。它們可以經過濾或在高壓釜中加熱滅菌，或作為非滅菌產品提供。
本發(fā)明的藥物組合物也可以與其他治療劑合用，譬如抗炎劑(例如皮質類固醇類(如.丙酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、糠酸莫米松、曲安奈德或布地奈德)或NSAID類(如色苷酸鈉、奈多羅米鈉、PDE-4抑制劑、白三烯拮抗劑、iNOS抑制劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整聯蛋白拮抗劑和腺苷2a激動劑))或β-腎上腺素能藥(例如沙美特羅、沙丁胺醇、福莫特羅、非諾特羅或特布他林及其鹽)或抗感染藥(如抗生素、抗病毒藥)。
所以，本發(fā)明在另一方面中提供一種聯合形式，其中含有式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物以及另一種治療活性劑，如抗炎劑如皮質類固醇、NSAID、β腎上腺素能劑或抗感染藥。一種藥物組合物含有與長效β2腎上腺素能受體激動劑聯合的式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物(例如沙美特羅或其鹽或溶劑化物，如沙美特羅Xinafoate)特別令人感興趣。
上述聯合形式可以方便地以藥物制劑的形式使用，這種藥物制劑含有定義如上的聯合形式以及生理可接受稀釋劑或載體，它代表本發(fā)明的另一個方面。
上述聯合形式中各組分可以順序或同時地在單獨或結合的藥物制劑中給藥。所屬領域技術人員很容易了解已知治療劑的適用劑量。
本發(fā)明的化合物可以方便地以例如0.001至500mg/kg體重、優(yōu)選0.01至500mg/kg體重、更優(yōu)選0.01至100mg/kg體重的量給藥，每天1至4次。顯然，精確劑量應取決于患者的年齡和情況以及給藥選擇的具體途徑。
本發(fā)明的化合物的優(yōu)越性在于，它們更加有效，顯示出更高的選擇性(如，其中相對于β2整聯蛋白如LFA-1或VLA-5(αvβ1)而言它們選擇性拮抗α4整聯蛋白)，具有較少的副作用，具有更長的作用時間，當吸入給藥時生物利用度較低或具有較小的全身活性，合成容易且經濟，或具有其它更多的類似已知化合物所沒有的理想特性。
某些中間體是新的化合物并且構成本發(fā)明的另一方。
本發(fā)明可通過參見下列實施例舉例說明。
NMR光譜是在Bruker DPX400 400MHz光譜儀上進行。LC/MS系統(tǒng)所用液相色譜質譜(LCMS)系統(tǒng)如下所述A3μmABZ＋PLUS，3.3cm×4.6mm內徑柱，洗脫采用溶劑A-0.01M醋酸銨水溶液＋0.1％v/v甲酸，和B-95∶5乙腈/水＋0.05％v/v甲酸，同時流量為3ml/分鐘。采用以下的梯度方案100％A共0.7分鐘；A＋B的混合物，梯度曲線在3.7分鐘內0-100％B；保持100％B共0.9分鐘；在0.2分鐘內恢復到0％B。
采用正性和負性電子噴射電離。保護的測量測量Fmoc-氨基酸樹脂的置換度的方法如下所述向10mg樹脂中加入20％存在于DMF中的哌啶(1ml)。20℃下振搖30分鐘后，過濾樹脂。向50μL濾液中加入20％存在于DMF中的哌啶(0.95ml)，在302nm下用UV分光光度計測量溶液的吸光度。利用以下公式計算出置換度置換度(mmol/g)＝(吸光度×2×104)/(消光系數x以mg計的重量)中間體中間體1(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯向N-(叔丁氧基羰基)-L-亮氨酸(7g)在乙腈(100ml)中的溶液內于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基1)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(5.9g)和1-羥基苯并三唑(4.2g)。在20℃下攪拌30分鐘后，加入L-酪氨酸甲酯(5.5g)且繼續(xù)攪拌18h。將該混合物在真空中濃縮至約10ml，令殘余物在1M鹽酸(200ml)和乙酸乙酯(100ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(100ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)、水(2×100ml)和鹽水(50ml)洗滌，硫酸鈉干燥并且真空蒸發(fā)。殘余物與氯仿共蒸發(fā)得到標題化合物，為白色泡沫(11.3g，98％)。LCMSRt3.11分鐘；m/z 409(MH+)。中間體2(2S)-2-{[(2S)-2-氨基4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽向中間體1(3.1g)在1，4-二噁烷(10ml)中的溶液內加入4M存在于1，4-二噁烷(20ml)中的氯化氫。20℃下將該溶液攪拌2小時，隨后真空蒸發(fā)。殘余物用甲苯(2×20ml)和乙醚(2×20ml)共蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(2.6g，98％)。LCMSRt1.98分鐘；m/z309(MH+)。中間體3(2S)-3-(4-羥基苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙?；?氨基]戊?；鶀氨基)丙酸甲酯向中間體44(0.45g)在乙腈(20ml)中的懸浮液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.31g)和1-羥基苯并三唑(0.22g)。20℃下攪拌30分鐘后加入中間體2(0.5g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.28ml)并且繼續(xù)攪拌18小時。將該混合物真空濃縮，殘余物在2M鹽酸(50ml)和乙酸乙酯(30ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(30ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(30ml)、水(2×30ml)和鹽水(20ml)洗滌，硫酸鈉干燥并且真空蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(2∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.6g，69％)。LCMSRt3.42分鐘；m/z 604(MH+)。中間體4(2S)-3-(4-羥基苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸甲酯由中間體43(0.81g)和中間體2(1.02g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱色譜在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1)洗脫，得到標題化合物，其為白色泡沫(1.2g，74％)。LCMSRt3.40分鐘；m/z569(MH+)。中間體5(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b.d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯由中間體45(0.29g)和中間體2(0.5g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱色譜在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1)洗脫，得到白色泡沫標題化合物(0.66g，97％)。LCMSRt3.55分鐘；m/z 503(MH+)。中間體6(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸甲酯向中間體5(0.59g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入4-二甲基氨基吡啶(0.18g)。將該混合物冷卻至0-5℃并且加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.3g)。繼續(xù)攪拌18小時，令該反應升至20℃。該溶液用氯仿(60ml)稀釋，用1M鹽酸(2×40ml)和水(40ml)洗滌，用硫酸鎂干燥并且真空蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯(3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.36g，46％)。LCMSRt3.98分鐘；m/z 668(MH+)。中間體74-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-甲氧基3-氧代丙基]苯酯向三光氣(0.59g)在無水二氯甲烷(40ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入中間體1(1.87g)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液，隨后加入二異丙基乙胺(1.2ml)。20℃下攪拌3小時后，加入中間體59(1g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.8ml)。繼續(xù)攪拌18小時。隨后真空中蒸發(fā)該混合物。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1開始至5∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(1.76g，59％)。LCMSRt3.42分鐘；m/z 651[M-H]-。中間體84-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶羧酸4-((2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯酯鹽酸鹽向中間體7(1.76g)在1，4-二噁烷(10ml)中的溶液內加入4M存在于1，4-二噁烷(8ml)中的氯化氫。20℃下攪拌3小時后，真空中蒸發(fā)溶劑并且用乙醚研制殘余物，得到標題化合物，為膏狀固體(1.59g，100％)。LCMSRt2.50分鐘；m/z 553(MH+)。中間體9(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸甲酯向中間體1(0.41g)在二氯甲烷(3ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入吡啶(1ml)。將該混合物冷卻至0-5℃并且加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.22g)。繼續(xù)攪拌18小時，令該反應升至20℃。用二氯甲烷(40ml)稀釋并且用1M鹽酸(50ml)洗滌。水相進一步用二氯甲烷(40ml)提取，合并的有機提取液用硫酸鈉干燥并且真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用石油醚/乙酸乙酯(3∶1開始，達到3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.29g，50％)。LCMSRt3.39分鐘；m/z 574(MH+)。中間體104-[(2，2-二環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶羧酸4-((2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯酯鹽酸鹽向中間體9(0.22g)在無水二氯甲烷(4ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入中間體58(0.14g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.08ml)。20℃下攪拌4小時后，該混合物用二氯甲烷(50ml)稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(3×25ml)和1M鹽酸(40ml)洗滌，硫酸鈉干燥且真空中蒸發(fā)，達到膏狀固體。向其中加入4M存在于1，4-二噁烷(3ml)中的氯化氫，將該混合物20℃下攪拌3小時。真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙醚研制，得到標題化合物，為膏狀固體(0.24g，95％)。LCMSRt3.05分鐘；m/z 641(MH+)。中間體11(2S)-2-[((2S)-2-{[(苯甲酰氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-羥基苯基)丙酸叔丁酯向N-芐氧羰基-L-亮氨酸(8.6g)在乙腈(150ml)中的溶液內、在氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(6.83g)和1-羥基苯并三唑(4.81g)。20℃下攪拌30分鐘后，加入L-酪氨酸叔丁酯(7.7g)，并且連續(xù)攪拌18小時。真空中濃縮該混合物至約10nl，令殘余物在1M鹽酸(300ml)和乙酸乙酯(150ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(150ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(150ml)、水(2×150ml)和鹽水(100ml)洗滌，用硫酸鈉干燥且真空中蒸發(fā)。殘余物與氯仿共蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色泡沫(15g，96％)。LCMSRt3.56分鐘；m/z485(MH+)。中間體12(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸叔丁酯向中間體11(1.36g)在二氯甲烷(15ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.75g)和4-二甲基氨基吡啶(0.47g)。該混合物在20℃下攪拌18小時，隨后用氯仿(50ml)稀釋，用1M鹽酸(2×30ml)和水(30ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用石油醚/乙酸乙酯(4∶1開始，達到1∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(1.34g，74％)。LCMSRt3.89分鐘；m/z 650(MH+)。中間體134-嗎啉羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向中間體12(0.34g)在二氯甲烷(8ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入嗎啉(0.06ml)和二異丙基乙胺(0.15ml)。該混合物在20℃下攪拌18小時，隨后用氯仿(30ml)稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(3×40ml)、2M鹽酸(40ml)和水(30ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(3∶2)洗脫，得到標題化合物，為無色膠(0.31g，99％)。LCMSRt3.60分鐘；m/z 598(MH+)。中間體13(另一種方法)4-嗎啉羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基}氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光氣(2.24g)在無水二氯甲烷(50ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入中間體11(10g)在無水THF(50ml)中的溶液，隨后加入二異丙基乙胺(3.94ml)。20℃下攪拌4小時后，加入嗎啉(2ml)，隨后加入二異丙基乙胺(3.94ml)。連續(xù)攪拌18小時，此后令混合物在1M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)、水(50ml)和鹽水(30ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用環(huán)已烷/乙酸乙酯(3∶1開始直至1∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(6.8g，58％)。中間體144-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中間體11(9g)和異哌啶甲酰胺(isonipecotamide)(5.2g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯洗脫，得到標題化合物，為白色固體(3.52g，30％)。中間體14(另一種方法)4-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向中間體12(1g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入異哌啶甲酰胺(0.23g)和二異丙基乙胺(0.43ml)。20℃下將該混合物攪拌18小時，隨后用氯仿(80ml)稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(3×50ml)、2M鹽酸(50ml)和水(50ml)洗滌，硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用石油醚/乙酸乙酯(3∶2)開始直至乙酸乙酯/甲醇(4∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.46g，47％)。LCMSRt3.47分鐘；m/z 639(MH+)。中間體154-嗎啉羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向10％鈀碳Degussa型E101(0.09g)中、于氮氣氛下加入中間體13(0.3g)在乙醇(20ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(0.17g)。20℃下攪拌4小時后，經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(10ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在二氯甲烷(50ml)和1M氫氧化鈉(15ml)之間分配。分離各層，有機相進一步用1M氫氧化鈉(15ml)和水(15ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)，得到灰色膠狀標題化合物(0.1g，41％)。LCMSRt2.43分鐘；m/z 464(MH+)。中間體164-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中間體14(0.46g)進行類似制備。得到標題化合物，為淺黃色膠(0.36g，99％)。LCMSRt2.33分鐘；m/z 505(MH+)。中間體174-乙?；?1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光氣(0.24g)在無水二氯甲烷(5ml)中的溶液內、與氮氣氛下加入中間體11(1g)在無水THF(10ml)中的溶液，隨后加入二異丙基乙胺(0.43ml)。20℃下攪拌4小時后，加入1-乙?；哙?0.32g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.43ml)。繼續(xù)攪拌18小時，隨后令該混合物在1M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)、水(50ml)和鹽水(30ml)洗滌，硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯開始直至乙酸乙酯/乙醇(9∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(1.3g，99％)。LCMSRt3.44分鐘；m/z 639(MH+)。中間體184-苯甲?；?1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光氣(0.24g)在無水二氯甲烷(5ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入中間體11(1g)在無水THF(10ml)中的溶液，隨后加入二異丙基乙胺(0.43ml)。20℃下攪拌4小時后，加入中間體56(0.78g)，隨后加入二異丙基乙胺(1.15ml)。繼續(xù)攪拌18小時，隨后令該混合物在1M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之間分配。分離各層，水相進一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)、水(50ml)和鹽水(30ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1開始直至2∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(1.02g，71％)。LCMSRt3.71分鐘；m/z 701(MH+)。中間體194-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中間體11(1.81g)和中間體55(0.91g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(1.24g，47％)。LCMSRt3.63分鐘；m/z707(MH+)。中間體204-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3氧代丙基]苯酯向10％鈀碳Degussa型E101(0.27g)中、于氮氣氛下加入中間體19(1.24g)在乙醇(20ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(0.77g)。20℃下攪拌4小時后，將該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(20ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在二氯甲烷(50ml)和1M氫氧化鈉(15ml)之間分配。分離各層，有機相進一步用1M氫氧化鈉(15ml)和水(15ml)洗滌，硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色泡沫(0.55g，54％)。LCMSRt2.63分鐘；m/z 573(MH+)。中間體214-乙?；?1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯鹽酸鹽向10％鈀碳Degussa型E101(0.4g)中、于氮氣氛下加入中間體17(1.28g)在乙醇(30ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(0.38g)。20℃下攪拌6小時后，將該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(20ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在二氯甲烷(70ml)和1M氫氧化鈉(30ml)之間分配。分離各層，水相進一步用二氯甲烷(2×50ml)提取。合并的有機提取液用硫酸鈉干燥。該溶液用4M存在于1，4-二噁烷(0.55ml)中的氯化氫處理且真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(1.02g，94％)LCMSRt2.46分鐘；m/z 505(MH+)。中間體224-苯甲酰基-1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯鹽酸鹽向10％鈀碳Degussa型E101(0.3g)中、于氮氣氛下加入中間體18(1g)在乙醇(30ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(0.27g)。20℃下攪拌6小時后，將該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(20ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在二氯甲烷(70ml)和1M氫氧化鈉(30ml)之間分配。分離各層，水相進一步用二氯甲烷(2×50ml)提取。合并的有機提取液用硫酸鈉干燥。該溶液用4M存在于1，4-二噁烷(0.4ml)中的氯化氫處理且真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(0.8g，100％)LCMSRt2.72分鐘；m/z 567(MH+)。中間體234-嗎啉羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯鹽酸鹽向10％鈀碳Degussa型E101(2.1g)中、于氮氣氛下加入中間體13(6.8g)在乙醇(500ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(4.1g)。20℃下攪拌17小時后，將該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(50ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在二氯甲烷(150ml)和1M氫氧化鈉(75ml)之間分配。分離各層，水相進一步用二氯甲烷(2×100ml)提取。合并的有機提取液用硫酸鈉干燥。該溶液用1M存在于乙醚(13ml)中的氯化氫處理且真空中蒸發(fā)。用乙醚研制殘余物，得到標題化合物，為白色固體(4.8g，87％)LCMSRt2.50分鐘；m/z 464(MH+)。中間體244-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯鹽酸鹽向10％鈀碳Degussa型E101(1.1g)中、于氮氣氛下加入中間體14(3.41g)在乙醇(80ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(2.1g)。20℃下攪拌3小時后，該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(40ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，殘余物在氯仿(500ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)之間分配。分離各層，水相進一步用氯仿(2×100ml)提取。合并的有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×100ml)和水(2×100ml)洗滌，隨后用硫酸鈉干燥。該溶液用4M存在于1，4-二噁烷(1.5ml)中的氯化氫處理，真空中蒸發(fā)。殘余物與甲苯(2×50ml)共沸，得到標題化合物，為白色固體(2.88g，100％)。LCMSRt2.36分鐘；m/z 505(MH+)。中間體25(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(4-羥基苯基)丙酸叔丁酯向10％鈀碳Degussa型E101(0.63g)中、于氮氣氛下加入中間體11(2g)在乙醇(20ml)中的溶液，隨后加入甲酸銨(1.8g)。20℃下攪拌2小時后，該混合物經Harborlite J2助濾劑墊過濾，該濾墊用乙醇(50ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，殘余物在二氯甲烷(100ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)之間分配。分離各層，有機相進一步用飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)和水(50ml)洗滌，硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色固體。將其在DMF(5ml)中的溶液加入中間體46(0.879g)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.809g)和1-羥基苯并三唑(0.578g)在乙腈(10ml)中的預混溶液中，該預混溶液業(yè)已在在氮氣氛和20℃下攪拌30分鐘。繼續(xù)攪拌18小時，該混合物用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用1M鹽酸(3×50ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(3×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色泡沫(2.1g，94％)。LCMSRt3.83分鐘；m/z 541(MH+)。中間體26(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸叔丁酯向中間體25(2.1g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入4-硝基苯基氯甲酸酯(1.1g)和4-二甲基氨基吡啶(0.69g)。將該混合物在20℃下攪拌18小時，隨后用氯仿(80ml)稀釋，用1M鹽酸(2×50ml)和水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到標題化合物，為澄清油(2.65g，97％)。LCMSRt4.17分鐘；m/z706(MH+)。中間體274-嗎啉羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙?；?氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯將中間體23(0.5g)和二異丙基乙胺(0.19ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液冷卻至0-5℃。向其中加入溴代乙酰氯(0.09ml)，隨后加入二異丙基乙胺(0.19ml)并且連續(xù)攪拌2小時。該混合物用二氯甲烷(50ml)稀釋，用2M鹽酸(50ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)和鹽水(30ml)洗滌，用硫酸鎂干燥并且真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色泡沫(0.52g，89％)，LCMSRt3.28分鐘；m/z 584(MH+)。中間體284-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基]苯酯向中間體8(0.48g)在無水二氯甲烷(4ml)中的溶液內加入二異丙基乙胺(0.142ml)。將該混合物冷卻至0-5℃，加入溴代乙酰氯(0.07ml)。繼續(xù)攪拌1小時，令該反應升至20℃，該混合物用二氯甲烷(5ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液(5ml)、水(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(0.464g，85％)。LCMSRt3.20分鐘；m/z 672[M-H]-中間體29經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸向Wang樹脂(100-200目，10g)中加入(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸(8.5g)在DMF(45ml)中的溶液。15分鐘后加入吡啶(2.4ml)，隨后加入2，6-二氯苯甲酰氯(2.75ml)。將該混合物在20℃下振搖18小時。過濾樹脂，用DMF(5×40ml)、二氯甲烷(5×40ml)和乙醚(5×40ml)洗滌，隨后真空中干燥。置換在樹脂上的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸的量計算出為0.52mmol/g。中間體30經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸中間體29(2.5mmol)用20％存在于DMF(15ml)中的哌啶處理，20℃下振搖30分鐘。過濾樹脂并且用DMF(5×20ml)洗滌。加入Fmoc-亮氨酸(2.8g)在DMF(10ml)中的溶液，隨后加入苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(4.1g)在DMF(5ml)和二異丙基乙胺(2.8ml)中的溶液。將該混合物在20℃下振搖18小時。過濾樹脂，用DMF(5×20ml)、二氯甲烷(5×20ml)和乙醚(5×20ml)洗滌，隨后真空干燥，取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂，濾液利用LCMS分析Rt，4.22分鐘；m/z557(MH+)。中間體31經酸于Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸中間體30(1mmol)用20％存在DMF(10ml)中的哌啶處理并且20℃下振搖1小時。過濾樹脂并用DMF(5×10ml)洗滌。加入中間體46(0.314g)在DMF(10ml)中的溶液，隨后加入苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(0.78g)在DMF(5ml)和二異丙基乙胺(0.68ml)中的溶液。將該混合物在20℃下振搖18小時。過濾樹脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時。過濾樹脂并且濾液利用LCMS分析Rt4.27min；m/z525(MH+)。中間體32經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸由中間體30(0.97mmol)和(2-甲基苯氧基)乙酸(0.48g)進行類似制備。LCMSRt3.89分鐘；m/z 483(MH+)。中間體33經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸中間體31(1mmol)用苯基硅烷(1ml)在二氯甲烷(9ml)中的溶液處理，隨后用四(三苯基膦)鈀(0)(0.1g)處理。將該混合物在20℃下振搖40分鐘。過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗滌，隨后再次用苯基硅烷(1ml)在二氯甲烷(9ml)中的溶液處理，隨后用四(三苯基膦)鈀(0)(0.1g)處理。20℃下振搖40分鐘后，過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗滌，隨后用二異丙基乙胺(1.74ml)在1∶1二氯甲烷/THF(16ml)中的溶液處理。分次加入4-硝基苯基氯甲酸酯(2g)，將該混合物在20℃下振搖28小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，此后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂并且濾液利用LCMS分析Rt，4.33分鐘；m/z 650(MH+)。中間體34經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中間體32(0.97mmol)進行類似制備。LCMSRt3.31分鐘；m/z443(MH+)。中間體35經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基)苯基)丙酸由中間體30(1.05mmol)進行類似制備。LCMSRt4.32分鐘；m/z682(MH+)。中間體36經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4甲基戊?；?氨基]-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中間體35(1.05mmol)用1-(2-糠?；?哌嗪(0.57g)在1∶1二氯甲烷/THF(9ml)中的溶液處理，隨后用二異丙基乙胺(1.1ml)處理。在20℃下攪拌4小時后，過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂并且濾液通過LCMS分析Rt，3.67分鐘；m/z 723(MH+)。中間體37經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸由中間體35(1.7mmol)和中間體53(1.02g)進行類似制備。LCMSRt4.03分鐘；m/z 795(MH+)。中間體38經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙?；?氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-[4({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中間體36(1.05mmol)用20％存在于DMF(8ml)中的哌啶處理并且在20℃下振搖1小時30分鐘。過濾樹脂并且用DMF(5×10ml)洗滌。加入溴乙酸(0.44g)在DMF(8ml)中的溶液，隨后加入1，3-二異丙基碳二亞胺(0.49ml)。將該混合物在20℃下攪拌18小時。過濾樹脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂并且濾液通過LCMS分析Rt3.11分鐘；m/z621(MH+)。中間體39經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中間體37(0.73mmol)進行類似制備。LCMSRt3.43分鐘；m/z695(MH+)。中間體40經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙?；?氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸中間體30(0.55mmol)用20％存在于DMF(6ml)中的哌啶處理并且在20℃下振搖1小時。過濾樹脂并且用DMF(5×10ml)洗滌。加入溴代乙酸(0.23g)在DMF(3ml)中的溶液，隨后加入1，3-二異丙基碳二亞胺(0.26ml)。將該混合物在20℃下振搖18小時。過濾樹脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂并且濾液通過LCMS分析Rt3.47分鐘；m/z455(MH+)。中間體41經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸中間體40(0.55mmol)用DMF(4ml)處理。加入2-環(huán)己基苯酚(0.97g)、碳酸鉀(0.76g)和碘化鈉(0.82g)并且將該混合物在20℃下振搖40小時。過濾樹脂并且用水(3×5ml)、DMF(5×5ml)、二氯甲烷(5×5ml)和乙醚(5×5ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時，過濾樹脂并且濾液通過LCMS分析Rt4.49分鐘；m/z 551(MH+)。中間體42經酸與Wang樹脂鍵合的(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸中間體41(0.55mmol)用苯基硅烷(1.35ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液處理，隨后用四(三苯基膦)鈀(0)(0.063g)處理。將該混合物在20℃下振搖40分鐘。過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10mol)洗滌，隨后再次用苯基硅烷(1.35ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液處理，進而用四(三苯基膦)鈀(0)(0.063g)處理。20℃下振搖40分鐘后，過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗滌，此后用二異丙基乙胺(1.9ml)在1∶1二氯甲烷/THF(8ml)中的溶液處理。滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(2.2g)并且將該混合物在20℃下振搖18小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗滌，隨后真空干燥。取5mg樣品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)處理0.5小時。過濾樹脂并且濾液通過LCMS分析Rt4.54分鐘；m/z 676(MH+)。中間體43(2-碘代苯氧基)乙酸將溴乙酸叔丁酯(4.0ml)加入在DMF(40ml)中含有2-碘代苯酚(4.98g)和碳酸鉀(6.3g)的混懸液中。將該混合物在20℃和氮氣氛下攪拌1小時，并且隨后在乙酸乙酯(150ml)和水(100ml)之間分配。水層用新的乙酸乙酯(2×80ml)提取，合并的有機提取液用鹽水(100ml)洗滌，硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到澄清液體(7.56g)。將該液體溶解在二氯甲烷(20ml)和三氟乙酸(8ml)中并且將該溶液在20℃下攪拌2小時。真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物用環(huán)己烷/乙酸乙酯(5∶1)的混合物研制，得到標題化合物，為白色固體(5.19g，82％)。LCMSRt3.02分鐘；m/z 277[M-H]-。中間體44{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酸由3-(1-哌啶基羰基)-2-萘酚(Griffiths和Hawkins，1977)((4.98g)進行類似制備。中間體酯通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1)洗脫，分離標題化合物，為白色固體(3.2g，53％).LCMSRt3.74分鐘；m/z 314(MH+)。中間體45二苯并[b，d]呋喃-4-羧酸在-78℃和氮氣氛下，將1.6M正丁基鋰在己烷(18.5ml)中的溶液滴加到二苯并呋喃(5.0g)在無水THF(25ml)中的攪拌溶液內。令所得混懸液上升至20℃，在此溫度下攪拌3小時。隨后冷卻至-78℃，在氮氣氛下，加入過量固體二氧化碳在乙醚(250ml)中的混合物。將所得白色混懸液在20℃下放置1小時，隨后用2M氫氧化鈉(500ml)稀釋。水提取液用乙醚(3×200ml)洗滌，用6M鹽酸酸化至pH1并且用乙酸乙酯(3×200ml)提取。合并的有機提取液用鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(3.64g，58％)。LCMSRt5.06分鐘；m/z 213(MH+)。中間體46[2-(叔丁基)苯氧基]乙酸將溴乙酸甲酯(3.0ml)加入在DMF(250ml)中含有2-叔丁基苯酚(5.0ml)和碳酸鉀(10.6g)的混懸液中。將該混合物在20℃和氮氣氛下攪拌20小時，隨后真空中蒸發(fā)為漿液，令其在乙醚(200ml)和1M鹽酸(100ml)之間分配。水層用更多的乙醚(100ml)提取，合并的有機提取液用鹽水(100ml)洗滌，硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶9)洗脫，得到澄清液體(6.64g)。將該液體溶解在甲醇(100ml)和2M氫氧化鈉(100ml)中，在20℃下將該溶液攪拌0.5小時。真空中蒸發(fā)甲醇，含水殘余物用乙醚(50ml)洗滌，用6M鹽酸酸化至pH1并且用乙酸乙酯(2×200ml)提取。合并的有機提取液用鹽水(50ml)洗滌，硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色結晶塊(5.86g，95％)。LCMSRt3.78分鐘；m/z 207[M-H]-中間體474-(2-甲氧基-2-氧代乙氧基)苯甲酸將溴乙酸甲酯(1.6ml)加入在乙腈(60ml)中含有4-羥基苯甲酸叔丁酯(Shah等人，1992)(3.03g)、碘化鈉(2.55g)和碳酸鉀(4.2g)中的混懸液內。將該混合物在90℃和氮氣氛下攪拌17小時，隨后冷卻至20℃。令其在水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)之間分配，有機提取液用水(2×80ml)和鹽水(60ml)洗滌，以硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗品通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶9)至乙酸乙酯/石油醚(1∶2)的梯度洗脫，得到淺紅色膠(3.85g)。將該產物溶解在二氯甲烷(50ml)中，加入三氟乙酸(15ml)，20℃下將該溶液攪拌3小時。真空蒸發(fā)溶劑，得到標題化合物，為白色固體(2.97g，91％)。LCMSRt2.45分鐘；m/z 211(MH+)。中間體48[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酸向中間體47(2.95g)在乙腈(55ml)中的混懸液內加入二異丙基乙胺(3.5ml)，隨后加入(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基銨(uronium)四氟硼酸鹽(4.5g)。所得溶液在20℃和氮氣氛下攪拌10分鐘，隨后加入哌啶(1.4ml)，將該混合物在20℃和氮氣氛下攪拌18小時，隨后真空中蒸發(fā)。殘余物在乙酸乙酯(100ml)和8％碳酸氫鈉水溶液(65ml)之間分配，有機提取液用2M鹽酸(50ml)和鹽水(100ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到橙色油(4.05g)。將該油溶解在甲醇(100ml)中，加入1M氫氧化鈉(30ml)，將該混合物在20℃下攪拌3小時。隨后用1M鹽酸酸化至pH 1并且冷卻至5℃，通過過濾收集沉淀并且真空干燥，得到標題化合物，為白色固體(3.03g，80％)。LCMSRt4.17分鐘；m/z 264(MH+)。中間體49(2-苯甲酰基苯氧基)乙酸將溴乙酸甲酯(3.0ml)加入在乙腈(35ml)中含有2-羥基二苯酮(2.3g)、碳酸鉀(3.2g)和碘化鈉(2.33g)的混懸液內。將該混合物在90℃和氮氣氛下攪拌18小時并且令其冷卻至20℃。隨后在乙酸乙酯(80ml)和水(60ml)之間分配，有機提取液用水(2×60ml)和鹽水(60ml)洗滌，以硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)洗脫，得到淺黃色油(3.05g)。將該油溶解在甲醇(100mol)和1M氫氧化鈉(35ml)中，將該溶液在20℃下攪拌18小時。該溶液用2M鹽酸酸化至pH 1并且用乙酸乙酯(2×80ml)提取。合并的有機提取液用水(2×70ml)洗滌，硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)至乙酸乙酯/甲醇(4∶1)的梯度洗脫，得到標題化合物，為淺黃膠(1.62g，57％)。LCMSRt3.41分鐘；m/z 257(MH+)。中間體50[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酸由1-溴-2-萘酚(10.55g)進行類似制備。中間體酯通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶3)洗脫，分離標題化合物，為淺棕色固體(11.36g，89％).LCMSRtm/z 281[M-H]+中間體51[4-(氨基羰基)苯氧基]乙酸將4-甲酰基苯氧基乙酸(1.86g)和鹽酸羥胺(1.07g)在98％甲酸(50ml)中的溶液在回流下攪拌2小時，隨后在冰浴中冷卻。通過過濾收集沉淀，用水洗滌并且真空干燥，得到白色固體(1.1g)。在回流和氮氣氛下將該固體和氫氧化鉀(2.3g)在叔丁醇(50ml)中的混合物攪拌4小時，隨后令其冷卻。將該混合物用水(100ml)稀釋，用乙酸乙酯(50ml)洗滌并且用6M鹽酸酸化至pH2。通過過濾收集沉淀，用水洗滌和真空干燥，得到標題化合物，為白色固體(1.06g，53％)。LCMSRt1.90min；m/z 196(MH+)中間體524-氨基-1-哌啶甲酸叔丁酯在10分鐘內將三乙酰氧基硼氫化鈉(30.2g)分次滴加到冰冷的1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶酮(20.07g)、二芐基胺(19.7g)和乙酸(5ml)在二氯甲烷(500ml)中的混合物內并且在20℃下連續(xù)攪拌16小時。將該溶液小心地用2M氫氧化鈉(400ml)處理并且分離有機層，用硫酸鎂干燥并且真空蒸發(fā)。殘余物在己烷/乙醚(2∶1)(250ml)中研制得到白色固體(18.75g)。將該固體溶解在THF(50ml)、乙醇(50ml)和2M鹽酸(8ml)的混合物中，將該溶液加入20％存在于乙醇(100ml)中的碳載氫氧化鈀(5.0g)混懸液內。在20℃和1個大氣壓下氫化該混合物17小時，隨后經Harborlite J2助濾劑墊過濾并且用乙醇(100ml)洗滌該濾墊。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，將殘余物溶解在水(50ml)中并且用2M氫氧化鈉調節(jié)至pH9，真空中蒸發(fā)。將殘余物過濾到乙醇(30ml)和氯仿(70ml)的混合物中，通過過濾除去不溶物。將母液真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為無色油(10.04g，49％)。LCMSRt1.81分鐘；m/z 201(MH+)。中間體532-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)乙酰胺鹽酸鹽向4-氯苯基乙酸(2.55g)在乙腈(100ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(3.16g)和1-羥基苯并三唑(2.22g)。在20℃下攪拌10分鐘后，加入中間體52(3g)在乙腈(20ml)中的溶液，繼續(xù)攪拌18小時。該混合物在真空中蒸發(fā)，令殘余物在水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)之間分配。有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×80ml)和水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到淺黃色固體。將該固體在乙醚中研制，得到白色固體(4.15g)。將一部分該固體(2.36g)溶解在1，4-二噁烷(100ml)中，加入4M存在于1，4-二噁烷(12ml)中的氯化氫。該溶液在20℃下攪拌18小時，隨后加入另一部分4M存在于1，4-二噁烷(8ml)中的氯化氫。繼續(xù)在20℃下攪拌18小時，將該溶液真空蒸發(fā)，得到白色固體。將該固體在乙醚中研制，得到標題化合物，為白色固體(1.9g，77％)。LCMSRt1.89分鐘；m/z 253(MH+)。中間體54N-(4-氟芐基)-4-哌啶甲酰胺鹽酸鹽向1-叔丁氧基羰基哌啶-4-甲酸(3.61g)在乙腈中(25ml)的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(3.21g)和1-羥基苯并三唑(2.29g)。在20℃下攪拌20分鐘后，加入4-氟芐胺(2.0ml)并且繼續(xù)攪拌3小時。真空中濃縮該混合物，令殘余物在1M鹽酸(50ml)和乙酸乙酯(200ml)之間分配。分離各層，有機相用1M鹽酸(3×50ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(3×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯(1∶1)至乙酸乙酯的梯度洗脫，得到無色結晶(5.02g)。將一部分該固體(4.96g)溶解在1，4-二噁烷(20ml)中，加入4M存在于1，4-二噁烷(15ml)中的氯化氫。將該混合物在20℃下攪拌2小時，通過過濾收集沉淀，用1，4-二噁烷和乙醚洗滌，真空干燥，得到標題化合物，為白色吸濕固體(3.54g，83％)。LCMSRt1.52分鐘；m/z 237(MH+)。中間體551-(4-哌啶基羰基)哌啶鹽酸鹽由1-叔丁氧基羰基哌啶-4-甲酸(3.68g)和哌啶(1.6ml)進行類似制備。中間體酰胺通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脫，分離標題化合物，為白色固體(3.26g，93％)。MSm/z197(MH+)，TLCRf0.1[二氯甲烷/乙醇/880氨(50∶8∶1)用碘代鉑酸顯色]。中間體561-苯甲酰基哌嗪由苯甲酸(5.02g)和1-(叔丁氧基羰基)哌嗪(7.66g)進行類似制備，分離標題化合物，為白色固體(7.7g，82％)。LCMSRt0.51分鐘；m/z 191(MH+)。中間體572-環(huán)己基-N-(4-哌啶基)乙酰胺在20℃和氮氣氛下將4-氨基-1-芐基哌啶(5.0ml)、環(huán)己烷乙酸(3.79g)和(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基銨四氟硼酸鹽(8.35g)在乙腈(60ml)中的溶液攪拌18小時，隨后真空蒸發(fā)為漿液。令其在乙酸乙酯(200ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)之間分配。有機提取液用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到灰白色固體。由環(huán)己烷結晶得到膏狀晶體(6.24g)。將一份該固體(3.8g)溶解在乙醇(100ml)中并且用10％鈀碳Degussa型E101(1.2g)和甲酸銨(2.24g)處理。該混合物在20℃和氮氣氛下攪拌2.5小時，隨后經Harborlite J2助濾劑墊過濾并且用乙醇(100ml)洗滌該濾墊。合并的濾液和洗滌液真空蒸發(fā)，殘余物在氯仿(100ml)和0.5M氫氧化鉀(10ml)之間分配。分離各層，水相用新鮮氯仿(2×100ml)提取，合并的有機提取液用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色固體。將其用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(2.01g，60％)。LCMSRt1.93分鐘；m/z 225(MH+)。中間體582，2-二環(huán)己基-N-(4-哌啶基)乙酰胺將在DMF(250ml)中含有二環(huán)己基乙酸(4.75g)、二異丙基乙胺(7.5ml)和苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(11g)的溶液在20℃下攪拌10分鐘，隨后在10分鐘內滴加4-氨基-1-芐基哌啶(4.3ml)。將該混合物在20℃下攪拌18小時，隨后用乙酸乙酯(200ml)稀釋，通過過濾收集沉淀，用乙酸乙酯(60ml)和水(50ml)洗滌，真空干燥，得到白色固體(5.91g)。將一份該固體(3g)懸浮在乙醇(300ml)中，用10％鈀碳Degussa型E101(1.2g)和甲酸銨(2.68g)處理。在20℃和氮氣氛下將該混合物攪拌4小時。隨后經Harborlite J2助濾劑墊過濾并且用乙醇(50ml)洗滌該濾墊。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，殘余物在氯仿(200ml)和0.5M氫氧化鈉(150ml)之間分配。分離各層，水相用新鮮氯仿(100ml)提取，合并的有機提取液用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色固體。將其在冰冷的乙醚中研制，得到標題化合物，為白色固體(1.8，78％)。LCMSRt2.69分鐘；m/z307(MH+)。中間體592-苯基-N-(4-哌啶基)乙酰胺向苯基乙酸(3.4g)在乙腈(100ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(5.28g)和1-羥基苯并三唑(3.72g)，在20℃下攪拌30分鐘后，加入4-氨基-1-芐基哌啶(5.1ml)，連續(xù)攪拌18小時。真空濃縮該混合物。殘余物在2M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之間分配。分離各層，水相再用乙酸乙酯(75ml)洗滌，用固體碳酸鉀堿化，用二氯甲烷(2×100ml)提取。合并的有機提取液用水(2×100ml)和鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色固體(4.8g)。將一份該固體(4.7g)溶解在乙醇(150ml)中，用10％鈀碳Degussa型E101(1.5g)和甲酸銨(2.88g)處理?；旌衔镌?0℃和氮氣氛下攪拌4小時，隨后經Harborlite J2助濾劑墊過濾并且用乙醇(150ml)洗滌該濾墊。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)，令殘余物在氯仿(l00ml)和0.5M氫氧化鈉(50ml)之間分配。分離各層，水相用新鮮氯仿(2×100ml)提取，合并的有機提取液用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)，得到標題化合物，為白色固體(2.4g，45％)。MSm/z 219(MH+)，TLCRf，0.16[二氯甲烷/甲醇/880氨(40∶10∶1)用碘顯色]。
將200g樹脂用20％存在于DMF(1.21)中的哌啶處理并且在20℃下攪拌3小時。過濾樹脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗滌。向其中加入Fmoc-亮氨酸(233.3g)、1，3-二異丙基碳二亞胺(84.7g)和1-羥基苯并三唑(89.3g)在NMP(1.21)中的溶液。將該混合物在20℃下攪拌18小時。過濾樹脂并且用NMP(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗滌。
樹脂用20％存在于DMF(1.21)中的哌啶處理并且在20℃下攪拌3小時。過濾樹脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗滌。
向其中加入中間體46(68.8g)、1，3-二異丙基碳二亞胺(42.3g)和1-羥基苯并三唑(44.7g)在NMP(1.21)中的溶液。將該混合物在20℃下攪拌18小時。過濾樹脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗滌。
向樹脂中加入二氯甲烷(500ml)、苯基硅烷(160ml)和四(三苯基膦)鈀(0)(34g)在二氯甲烷(500ml)中的漿液。將該混合物在20℃下攪拌2小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(3×11)、乙醚(3×11)和二氯甲烷(6×11)洗滌。
樹脂在二氯甲烷(800ml)中的漿液用二異丙基乙胺(120ml)處理，隨后用4-硝基苯基氯甲酸酯(131g)分三份每隔10分鐘進行處理。i將該混合物在20℃下攪拌2小時。過濾樹脂，用二氯甲烷(3×11)、乙醚(3×11)和DMF(3×11)洗滌。樹脂在DMF(800ml)中的漿液用嗎啉(56.5ml)在DMF(200ml)中的溶液處理。將該混合物在20℃下攪拌2小時。過濾樹脂并且用DMF(3×11)、乙醚(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗滌。
樹脂在二氯甲烷(400ml)中的漿液用10％存在于二氯甲烷(800ml)中的TFA處理。在20℃下攪拌30分鐘后，過濾樹脂并且用二氯甲烷(2×500ml)洗滌。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)。殘余物用乙醚(750ml)研制，過濾所得白色固體。向其中加入乙腈(500ml)，將該混合物加熱回流。過濾熱溶液，令濾液冷卻至20℃。過濾該混合物，得到標題化合物，為白色固體(50.9g)。實施例25(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]-3-{4-{[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向(2-甲基苯氧基)乙酸(0.332g)在乙腈(40ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.383g)和1-羥基苯并三唑(0.27g)。在20℃下攪拌30分鐘后，加入中間體23(1g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.35ml)，繼續(xù)攪拌18小時。令該混合物在1M鹽酸(50ml)和乙酸乙酯(75ml)之間分配。分離各層，有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液(40ml)和水(50ml)洗滌，用硫酸鈉干燥并且真空蒸發(fā)得到白色泡沫。向該泡沫在二氯甲烷(20ml)中的溶液內加入三氟乙酸(20ml)和水(1ml)。在20℃下攪拌4小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(0.895g，80％).LCMSRt3.31分鐘；m/z 556(MH+)。實施例26(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基)氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸由中間體43(0.06g)和中間體24(0.1g)進行類似制備。得到標題化合物，為白色固體(0.07g，56％)。LCMSRt3.33分鐘；m/z 709(MH+)。實施例27(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]丙酸向(2-甲基苯氧基)乙酸(0.345g)在乙腈(50ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.4g)和1-羥基苯并三唑(0.3g)。在20℃下攪拌30分鐘后加入中間體24(1g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.35ml)，繼續(xù)攪拌18小時。將該混合物真空濃縮，令殘余物在1M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(300ml)之間分配。分離各層，有機相用1M鹽酸(2×100ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(3×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色固體。向該固體在氯仿(5ml)中的溶液內加入三氟乙酸(5ml)和水(1ml)。在20℃下攪拌3小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物與甲苯(2×20ml)共沸，隨后用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(1.06g，96％).LCMSRt3.20分鐘；m/z 597(MH+)。在水中的溶解度0.01mg/ml。NMR(DMSO-d6)δH12.75(brs，1H)，8.33(d，1H)，7.81(d，1H)，7.32(br s，1H)，7.21(d，2H)，7.15(d，1H)，7.11(t，1H)，6.98(d，2H)，6.79-6.89(m’s，3H)，(AB體系，2H)，4.39-4.46(m’s，2H)，3.95-4.14(m’s，2H)，2.80-3.10(m’s，4H)，2.33(m，1H)，2.20(s，3H)，1.75(m，2H)，1.40-1.60(m’s，5H)，0.82-0.87(m’s，6H)。實施例27(另一種方法)(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸向Wang樹脂(50g)加入(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙酸(115.8g)和1-羥基苯并三唑(48.6g)在DMF(475ml)中的溶液。15分鐘后，加入1，3-二異丙基碳二亞胺(56.5ml)，并且將該混合物在45℃下攪拌24小時。過濾樹脂并且用DMF(3×360ml)、甲醇(3×360ml)和二氯甲烷(3×700ml)洗滌。向樹脂在二氯甲烷(644ml)中的漿液中加入吡啶(14.7ml)。加入乙酸酐(26.9ml)，在20℃下將該混合物攪拌12小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(3×550ml)、甲醇(3×370ml)和二氯甲烷(3×550ml)洗滌。
將20g樹脂在二氯甲烷(100ml)中的漿液冷卻至2-5℃并且用苯酚(20g)在二氯甲烷(80ml)中的溶液處理。滴加氯三甲基硅烷(20ml)，將該混合物在2-5℃下攪拌6小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(3×200ml)、甲醇(3×200ml)、含10％水的DMF(2×200ml)、含10％二異丙基乙胺的DMF(3×200ml)、DMF(200ml)、甲醇(3×200ml)和二氯甲烷(3×200ml)洗滌。
樹脂在DMF(55ml)中的漿液用Fmoc-亮氨酸(32.7g)和1-羥基苯并三唑(12.5g)在DMF(85ml)中的溶液處理。15分鐘后，加入1，3-二異丙基碳二亞胺(19.3ml)，將該混合物在20℃下攪拌15小時，過濾該樹脂并且用DMF(3×150ml)、甲醇(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗滌。
樹脂用20％存在于DMF(180ml)中的哌啶處理并且在20℃下攪拌1小時。過濾樹脂并且用DMF(3×150ml)、二氯甲烷(3×150ml)、DMF(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗滌。向該樹脂在DMF(50ml)中的漿液內加入(2-甲基苯氧基)乙酸(17.9g)和1-羥基苯并三唑(14.6g)在DMF(100ml)中的溶液。5分鐘后加入1，3-二異丙基碳二亞胺(16.9ml)，將該混合物在20℃下攪拌65小時。過濾樹脂并且用DMF(2×150ml)、甲醇(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗滌。
樹脂在二氯甲烷(60ml)中的漿液用四(三苯基膦)鈀(0)(5.21g)在二氯甲烷(140ml)中的溶液處理，隨后用嗎啉(13ml)處理。在20℃下攪拌該混合物2小時，隨后過濾樹脂并且用二氯甲烷(7×200ml)洗滌。
樹脂在二氯甲烷(160ml)中的漿液用二異丙基乙胺(12.4ml)處理，隨后用4-硝基苯基氯甲酸酯(24.8g)分三份間隔5分鐘進行處理。
將該混合物在20℃下攪拌1小時。過濾樹脂并且用二氯甲烷(3×200ml)洗滌。樹脂用異哌啶甲酰胺(15.8g)在DMF(180ml)中的溶液處理，將該混合物在20℃下攪拌1.5小時。過濾該樹脂并且用DMF(4×200ml)和二氯甲烷(2×200ml)洗滌。
樹脂用50％存在于二氯甲烷(200ml)中的TFA處理。20℃下攪拌1小時后，過濾樹脂并且用二氯甲烷(5×200ml)處理。合并的濾液和洗滌液在真空中蒸發(fā)。殘余物與甲苯(2×100ml)共蒸發(fā)，用乙醚(50ml)研制，過濾所得白色固體。向其中加入乙腈(150ml)，將該混合物加熱回流。令所得混懸液冷卻至20℃并且攪拌18小時。過濾該混合物，得到標題化合物，為白色固體(4.9g)。實施例27A(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸鉀鹽將實施例27(10g)在甲醇(150ml)的混懸液加熱回流得到澄清溶液。向其中加入碳酸鉀(1.169)在水(7.5ml)中的溶液。加熱回流2分鐘后，真空蒸發(fā)溶劑得到松脆泡沫。向其中加入乙腈(100ml)，并且將該混合物加熱回流，在此期間泡沫破碎并且開始結晶。10分鐘后，令該混合物冷卻至20℃，隨后在減壓下過濾，用乙腈(25ml)和乙醚(50ml)洗滌，得到標題化合物，為白色固體(10.65g，100％)。可以肯定分離出的產物是其一水合物。在水中的溶解度＞250mg/ml。NMR(DMSO-d6)δH8.27(d，1H)，7.42(d，1H)，7.37(d，1H)，7.04-7.16(m’s，4H)，6.78-6.88(m’s，5H)，4.44-4.59(AB體系，2H)，4.21(m，1H).(br m’s，2H)，3.87(m，1H)，2.80-3.10(m’s，4H)，2.34(m，1H)，2.20(s，3H)，1.75(m，2H)，1.41-1.60(m’s 5H)，0.86(d，3H)，0.80(d，3H)。實施例28(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸向中間體45(0.438g)在乙腈(50ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.4g)和1-羥基苯并三唑(0.29g)。在20℃下攪拌30分鐘后，加入中間體24(1g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.35ml)，繼續(xù)攪拌18小時。將該混合物真空濃縮，殘余物在1M鹽酸(100ml)和乙酸乙酯(300ml)之間分配。分離各層，有機相用1M鹽酸(2×100ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(3×100ml)和鹽水(100ml)洗滌，用硫酸鎂干燥并且真空蒸發(fā)得到白色固體。向該固體在氯仿(5ml)中的溶液內加入三氟乙酸(5ml)和水(1ml)。在20℃下攪拌3小時后，真空蒸發(fā)溶劑，殘余物與甲苯(2×20ml)共沸騰，然后用乙醚研制，得到標題化合物，為白色泡沫(0.95g，80％)。LCMSRt3.48分鐘；m/z 643(MH+)。實施例29(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸向中間體46(0.1g)在乙腈(5ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.09g)和1-羥基苯并三唑(0.063g)。在20℃下攪拌30分鐘后加入中間體20(0.18g)，繼續(xù)攪拌18小時。令混合物在水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)之間分配。分離各層，有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×30ml)、水(30ml)和鹽水(30ml)洗滌，用硫酸鈉干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脫得到澄清油。向該產物在二氯甲烷(8ml)中的溶液內加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下攪拌2小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.08g，36％)。LCMSRt4.07分鐘；m/z 707(MH+)。實施例30(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由(2-甲基苯氧基)乙酸(0.09g)和中間體20(0.3g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.116g，34％)。LCMSRt3.56分鐘；m/z 665(MH+)。實施例31(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中間體45(0.1g)和中間體20(0.176g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(180∶15∶3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.075g，35％)。LCMSRt4.09分鐘；m/z 711(MH+)。實施例32(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基}乙烯基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中間體50(0.124g)和中間體20(0.168g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(200∶15∶3∶2)洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫(0.055g，24％)。LCMSRt4.19分鐘；m/z 779(MH+)。實施例33(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸向中間體26(0.47g)在二氯甲烷(8ml)中的溶液內、于氮氣氛下加入異哌啶甲酰胺(0.106g)和二異丙基乙胺(0.2ml)。在20℃下將該混合物攪拌18小時，隨后用氯仿(100ml)稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(3×50ml)、1M鹽酸(3×50ml)和水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)，得到白色泡沫。向該泡沫在氯仿(3ml)中的溶液內加入三氟乙酸(3ml)。在20℃下攪拌4小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(0.223g，52％)。LCMSRt3.35分鐘；m/z 639(MH+)。實施例34(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(4-{[(4-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中間體26(0.312g)和中間體54(0.181g)進行類似制備。得到標題化合物，為白色固體(0.187g，57％)。LCMSRt3.71分鐘；m/z 747(MH+)。實施例35(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2.4-二氯苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向無水碳酸鉀(0.057g)和碘化鈉(0.051g)在無水DMF(1ml)中的混懸液加入2，4-二氯苯酚(0.166g)，隨后加入中間體27(0.2g)。在20℃下將該混合物攪拌18小時，隨后在飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)和乙酸乙酯(10ml)之間分配。分離各層，有機相進一步用飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1)洗脫，得到白色泡沫。向該泡沫在二氯甲烷(2ml)中的溶液加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下攪拌2小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(0.146g，70％)。LCMSRt3.70分鐘；m/z 610(MH+)。實施例36(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲?；窖趸?乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由2-羥基二苯酮(0.2g)和中間體27(0.2g)進行類似制備。得到標題化合物，為淺黃色泡沫(0.057g，26％)。LCMSRt3.60分鐘；m/z 646(MH+)。實施例37(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-丙基苯氧基)乙酰基]氨基}戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由2-丙基苯酚(0.14ml)和中間體27(0.2g)進行類似制備。得到標題化合物，為白色固體(0.141g，70％)。LCMSRt3.71分鐘；m/z584(MH+)。實施例38(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由1-溴-2-萘酚(0.23g)和中間體27(0.2g)進行類似制備。得到標題化合物，為白色固體(0.11g，48％)。LCMSRt3.91分鐘；m/z 670(MH+)。實施例39(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向無水碳酸鉀(0.1g)和碘化鈉(0.06g)在無水DMF(1ml)中的混懸液中加入2-環(huán)己基苯酚(0.12g)，隨后加入中間體27(0.2g)。將該混合物在20℃下攪拌18小時，隨后在飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)和乙酸乙酯(10mol)之間分配。分離各層，有機相進一步用飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)和鹽水(10ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和真空中蒸發(fā)。粗原料通過閃式柱層析在硅膠上純化，用乙酸乙酯/環(huán)己烷(1∶1)洗脫，得到白色泡沫。向該泡沫在二氯甲烷(3ml)中的溶液內加入三氟乙酸(3ml)。在20℃下攪拌2小時后，真空中蒸發(fā)溶劑，殘余物與甲苯共沸，隨后用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(0.118g，55％)。LCMSRt4.16分鐘；m/z 624(MH+)。實施例40(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向中間體13(0.19g)在氯仿(2ml)中的溶液內加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下攪拌4小時，真空蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙醚研制，得到標題化合物，為白色固體(0.156g，90％).LCMSRt3.22分鐘；m/z 542(MH+)。實施例41(2S)-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸中間體38(0.26mmol)用DMF(4ml)處理。加入2-碘代苯酚(0.57g)、碳酸鉀(0.36g)和碘化鈉(0.39g)，在20℃下振搖該混合物。填裝樹脂，用水(2×5ml)、DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗滌，隨后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(4ml)處理。30分鐘后，過濾樹脂，濾液真空蒸發(fā)。殘余物與甲苯(5ml)共沸，隨后用乙醚研制。粗產物自乙腈中結晶，得到標題化合物，為白色固體(0.043g)。LCMSRt3.50分鐘；m/z 761(MH+)。實施例42(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中間體38(0.26mmol)用DMF(4ml)處理。加入2-叔丁基苯酚(0.4ml)、碳酸鉀(0.36g)和碘化鈉(0.39g)，將該混合物在20℃下攪拌16小時。過濾樹脂，用水(2×5ml)、DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗滌，隨后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(4ml)處理。30分鐘后，過濾樹脂，濾液在真空中干燥。殘余物與甲苯(5ml)共沸，隨后用乙醚研制。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶1)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.04g)。LCMSRt3.63分鐘；m/z 691(MH+)。實施例43(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基)氧基)苯基]丙酸由中間體38(0.26mmol)和2-環(huán)己基苯酚(0.46g)進行類似制備。粗產物用含有反相硅膠的固相提取柱純化，用氯仿/甲醇梯度(由98∶2增加至80∶20)洗脫，得到標題化合物，為膏狀固體(0.037g)。LCMSRt3.83分鐘；m/z 717(MH+)。實施例44(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中間體38(0.26mmol)和1-溴-2-萘酚(0.58g)進行類似制備。粗產物由乙腈結晶，得到標題化合物，為膏狀無色固體(0.064g)。LCMSRt3.69分鐘；m/z 763(MH+)。實施例45(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸由中間體39(0.29mmol)和2-環(huán)己基苯酚(0.48g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.073g)。LCMSRt4.13分鐘；m/z 789(MH+)。實施例46(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲?；窖趸?乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中間體39(0.29mmol)和2-羥基二苯酮(0.55g)進行類似制備。粗產物通過閃式柱層析在硅膠上純化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到標題化合物，為白色固體(0.065g)。LCMSRt3.75分鐘；m/z 811(MH+)。實施例47(2S)-3-(4-{[(4-{(2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸用20％哌啶的DMF(5ml)溶液處理中間體37(0.27mmol)，并在20℃振動1小時。過濾樹脂并用DMF(5×5ml)洗滌。加入中間體43(0.154g)的DMF(3ml)溶液，隨后加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(0.285g)的DMF(2ml)溶液和二異丙基乙胺(0.26ml)。在20℃下振動混合物18小時。過濾樹脂，用DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗滌，然后用1∶1的三氟乙酸/二氯甲烷(5ml)處理。30分鐘后，過濾樹脂，真空蒸發(fā)濾液。粗產物用閃計硅膠柱色譜法提純，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到白色固體標題化合物(0.083g)。LCMSRt3.76分鐘；m/z 833(MH+)。實施例48(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸該化合物可類似地由中間體37(0.27mmol)和中間體46(0.115g)制得。粗產物用閃式硅膠柱色譜法提純，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到白色固體標題化合物(0.107g)。LCMSRt3.93分鐘；m/z763(MH+)。實施例49(2S)-3-(4{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸該化合物可類似地由中間體37(0.27mmol)和中間體45(0.117g)制得。粗產物用閃式硅膠柱色譜法提純，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到白色固體標題化合物(0.056g)。LCMSRt3.80分鐘；m/z765[M-H]-。實施例50(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙?；?氨基]戊?；鶀氨基)丙酸該化合物可類似地由中間體37(0.27mmol)和中間體44(0.173g)制得。粗產物用認式硅膠柱色譜法提純，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脫，得到白色固體標題化合物(0.062g)。LCMSRt3.71分鐘；m/z 868(MH+)。實施例51(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)處理中間體33(0.23mmol)。加入中間體59(0.105g)，隨后加入二異丙基乙胺(0.16ml)。在20℃下搖動18小時后，過濾樹脂，用二氯甲烷(4×5ml)和乙醚(3×5ml)洗滌，然后真空干燥。LCMS表明，一些碳酸4-硝基苯酯已水解成苯酚，因此，用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)、二異丙基乙胺(0.2ml)和氯甲酸4-硝基苯酯(0.23g)處理樹脂。在20℃振動18小時后，過濾樹脂，用二氯甲烷(4×5ml)洗滌，然后用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)、中間體59(0.07g)和二異丙基乙胺(0.12ml)處理。在20℃振動18小時后，過濾樹脂，用二氯甲烷(4×5ml)洗滌，然后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(3ml)處理。30分鐘后，過濾樹脂，真空蒸發(fā)濾液。將殘余物與二氯甲烷共蒸發(fā)，隨后與乙醚共蒸發(fā)，得到灰白色固體標題化合物(0.083g)。LCMSRt3.99分鐘；m/z 729(MH+)。實施例52(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2-環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸該化合物可類似地由中間體33(0.23mmol)和中間體57(0.106g)制得。得到灰白色固體標題化合物(0.073g)。LCMSRt4.27分鐘；m/z 735(MH+)。實施例53(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2，2-二環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸所述化合物可類似地由中間體33(0.25mmol)和中間體58(0.144g)制得。得到灰白色固體標題化合物(0.105g)。LCMSRt4.63分鐘；m/z 817(MH+)。實施例54(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸所述化合物可類似地由中間體34(0.3mmol)和中間體59(0.196g)制得。粗產物用閃式硅膠柱色譜法提純，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脫，得到淺黃色泡沫狀標題化合物(0.091g)。LCMSRt3.49分鐘；m/z 687(MH+)。實施例55(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸用中間體59(0.178g)的1∶1二氯甲烷/THF(2ml)溶液處理中間體42(0.27mmol)，隨后用二異丙基乙胺(0.95ml)處理。在20℃振動2小時后，過濾樹脂，用二氯甲烷(5×5ml)洗滌，然后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(3ml)處理。30分鐘后，過濾樹脂，真空蒸發(fā)濾液。用乙醚研磨殘余物，得到灰白色固體標題化合物(0.074g)。LCMSRt4.04分鐘；m/z 755(MH+)。實施例56(2S)-3-{4-[({4-[(2-環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸所述化合物可類似地由中間體42(0.27mmol)和中間體57(0.18g)制得。得到灰白色固體標題化合物(0.102g)。LCMSRt4.22分鐘；m/z 761(MH+)。生物學數據將上述實施例的化合物按試驗(1)，Jurkat粘著試驗進行試驗，結果如下
*SEM n次實驗的平均標準偏差實施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物按試驗(2)，CD3/VCAM-1共同刺激的T細胞增殖試驗進行試驗，結果如下
實施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物還按試驗(3)，豚鼠肺嗜曙紅細胞浸潤和過度反應性的抑制試驗進行試驗(在抗原攻擊之前0.5小時和之后6小時給予氣管內的劑量)，結果如下
實施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物還按試驗(4)，RPMI 8866/MAdCAM-1粘著試驗進行試驗，結果如下
*SEM n次試驗的平均標準偏差縮寫WSCDI1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽PyBop六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻DIC 1，3-二異丙基碳化二亞胺HOBT 1-羥基苯并三唑Boc 叔丁氧基羰基Fmoc 9-芴基甲氧基羰基Cbz 芐氧羰基DIPEA二異丙基乙胺DCM 二氯甲烷DMF 二甲基甲酰胺THF 四氫呋喃NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮參考文獻Baron，J.L.等，(1994).J.Clin.Invest.93，1700-1708.Danahay等，(1997).Br.J.Pharmacol.120(2)，289-297.Ferguson，T.A等，(1991).Proc.Natl.Acad.Sci.USA88，8072-8076.Griffiths，J.and Hawkins，C.(1977).J.Appl.Chem.Biotechnol.27(10)，558-564.Lobb，R.R.and Hemler，M.E.(1994).J.Clin.Invest.94，1722-1728.Podolsky，D.K.等，(1993).J.Clin.Invest.92，372-380.Sanjar，S.，McCabe，P.J.，Fattah，D.，Humbles，A.A.and Pole，S.M.(1992).Am.Rev.Respir.Dis.145，A40.Shah，S.等，(1992).J.Med.Chem.35(21)，3745-3754.Wahl，S.M.等，(1994).J.Clin.Invest.94，655-662.
在說明書和權利要求書中，除非上下文需要，否則術語“包括”應理解為包括規(guī)定的整數或步驟，但并不排除任何其它整數或步驟。
權利要求
1.下式I的化合物和其鹽和溶劑化物 其中R1和R2獨立地表示(i)-C1-6烷基、-C3-8環(huán)烷基或-C1-3烷基C3-8環(huán)烷基，或上述基團中烷基或環(huán)烷基被一個或多個鹵素、-CN、硝基、羥基或-OC1-6烷基取代的基團；(ii)-(CH2)eAr1或-(CH2)eOAr1；或NR1R2一起表示吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、嗎啉基或吖庚因基，或表示與苯環(huán)稠合的這些基團，任意選擇性地被一個或多個-(CO)n(CH2)tAr1、-(CO)nC1-6烷基Ar1Ar2、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)rOH、-(CH2)rO(CH2)pOH、-(CH2)rOC1-6烷基、-O(CH2)tAr1、-(CH2)rSO2Ar1、哌啶-1-基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)tAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6環(huán)烷基、-CONR10(CH2)tAr1、鹵素、-NHSO2C1-6烷基、-SO2NR10R11、-SO2C1-6烷基或-SO2Ar2取代；R3表示-C1-6烷基NHC(＝NH)NH2、-C2-6鏈烯基NHC(＝NH)NH2、-C2-6炔基NHC(＝NH)NH2、-C1-6烷基N14R18、-(CH2)hCONR14R18、-(CH2)hCOC1-6烷基、-(CH2)dCHNR18CONR20R21、-(CH2)mNR18CONR14R18、-(CH2)dNR18Ar3、-(CH2)dCONR18Ar3、-(CH2)hCOOR18、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3，-(CH2)dCO(CH2)sAr3或-(CH2)dOAr3；或R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮、-(CH2)c(哌啶-4-基)、-(CH2)c(哌啶-3-基)、-(CH2)c(哌啶-2-基)、-(CH2)c(嗎啉-3-基)或-(CH2)c(嗎啉-2-基)，氮上任意選擇性地被-(CO)fC1-6烷基、-(CO)f(CH2)cAr2或-C(＝NH)NH2取代；或R3表示任意選擇性被-C1-6烷基或鹵素取代的-(CH2)z氧芴；或R3表示-(CH2)c-噻噸-9-酮；或R4表示氫、-C1-6烷基、-C1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-(CH2)qAr2、-C1-4烷基-X-R7、-C1-4烷基SO2C1-4烷基、-C1-6烷基NR12R13或-C1-6烷基NR12COC1-6烷基；R5代表氫，或R4R5與相連的碳原子一起構成C5-7環(huán)烷基環(huán)；R6表示氫或-C1-6烷基，或R6和R4與同它們分別相連的N和C原子一起構成吡咯烷環(huán)；R7表示氫、-(CH2)wNR12R13、-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基；R8、R9、R16和R17分別表示氫、-C1-6烷基、-C3-6環(huán)烷基、-C1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-C2-6鏈烯基，或NR8R9或NR16R17一起表示嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或被-C1-6烷基、-CO苯基或-SO2甲基N-取代的哌嗪基；R10、R11、R12、R13、R15、R18、R20和R21獨立地表示氫或-C1-6烷基；R14、R19和R22獨立地表示氫、-C1-6烷基、-C3-6環(huán)烷基或-(CH2)xAr4或NR14R18或NR15R22一起表示嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或N-C1-6烷基哌嗪基；Ar1表示苯基或含有1至3個選自O、N或S的雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，它們任意選擇性地被一個或多個鹵素、C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、-Ar2或-OAr2取代；Ar2表示任意選擇性地被一個或多個鹵素、-C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、-CF3或硝基取代的苯基；Ar3表示苯基，含有1至3個選自O、N或S雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，或表示與苯環(huán)稠合的這些基團，它們任意選擇性地被一個或多個-CO(CH2)gAr4、-(CH2)yAr4、-(CH2)yCOAr4、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC2-6鏈烯基、-(CO)aC2-6炔基、-(CO)aC3-8環(huán)烷基、-(CO)aC1-6鹵代烷基、鹵素、-COCH2CN、-(CH2)bNR16R17、-(CH2)bNHC(＝NH)NH2、-CYNR16(CO)aR17、-(CH2)bNR15COR19、-(CH2)bCONR15R22、-(CH2)bNR15CONR15R22、-(CH2)bCONR15(CH2)jNR15R22、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bSO2NR15COAr2、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、-SOR19、-(CH2)zOH、-COOR15、-CHO、-OC1-10烷基、-O(CH2)jNR15R22、-O(CH2)jNHC(＝NH)NH2、-O(CH2)bCONR16R17、-O(CH2)kCOOR15、-O(CH2)jOAr2、-O(CH2)bAr2、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮或4，5-二氫-3(2H)-噠嗪酮基取代；Ar4表示苯基或含有1至3個選自O、N或S雜原子的5或6元雜環(huán)芳香環(huán)，它們任意選擇性地被一個或多個鹵素、-C1-6烷基、羥基、-OC1-6烷基、CF3、硝基或-CONH2取代；X和Y獨立地表示O或S；a，f，k，s和n獨立地表示0或1；b，c，r，x，y和z獨立地表示0-2的整數；d，g和u獨立地表示1或2；e，h，q和w獨立地表示1-3的整數；j和p獨立地表示2至4的整數；m獨立地表示0至4的整數；t獨立地表示0至3的整數。
2.根據權利要求1的化合物，其中R4表示-C1-6烷基，R5代表氫，或R4R5與相連的碳原子一起構成環(huán)己基環(huán)，并且R6表示氫或甲基。
3.根據權利要求2的化合物，其中R4表示-C1-6烷基，R5和R6代表氫。
4.根據權利要求3的化合物，其中R4表示-CH2CHMe2，R5和R6代表氫。
5.根據權利要求1-4中任一權利要求的化合物，其中NR1R2一起表示哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、嗎啉基或1，2，3，4-四氫異喹啉，它們任意選擇性地被-(CO)n(CH2)rAr1、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)rAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6環(huán)烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6環(huán)烷基、-(CH2)rOC1-6烷基、-(CH2)rO-(CH2)pOH、哌啶-1-基、-(CH2)rOH或-CONR10(CH2)rAr1取代。
6.根據權利要求5的化合物，其中NR1R2一起表示任意選擇性地被-(CO)nC1-6烷基N-取代的嗎啉基或哌嗪基，被-(CO)n(CH2)rAr1N-取代的哌嗪基，被-NR10(CO)n(CH2)rAr1取代的哌啶基或被-(CH2)tCONR8R9取代的哌啶基。
7.根據權利要求1-6中任一權利要求的化合物，其中R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮-3-基、-(CH2)c-噻噸-9-酮-3-基、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3、-(CH2)dOAr3或-(CH2)z氧芴。
8.根據權利要求7的化合物，其中R3表示-OCH2Ar3、-CH2OAr3或氧芴。
9.根據權利要求8的化合物，其中R3表示-CH2OAr3。
10.根據權利要求1-9中任一權利要求的化合物，其中R4和R5具有下式(Ia)的立體化學取向。
11.式(I)的化合物，選自(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙?；?氨基]戊?；鶀氨基)-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2，2-二環(huán)己基乙?；?氨基-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙?；鶀氨基)戊?；鵠氨基}-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)戊?；鵠氨基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2-環(huán)己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2，2-二環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?-1-哌嗪基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2，4-二氯苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[(4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊?；?氨基]-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-(4-{[(4-{[(4-氟芐基)氨基]羰基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2，4-二氯苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲?；窖趸?乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-丙基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{(2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙?；鵠氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙?；?氨基]戊?；鶀氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；?氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2-環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2，2-二環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2-環(huán)己基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙?；鵠氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；和其鹽和溶劑化物。
12.式(I)的化合物，選自(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-環(huán)己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊?；?氨基]-3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-{4-[({4-[(2-苯基乙?；?氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}-3-[4-({[4(2-糠?；?-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊?；鶀氨基)丙酸；和其鹽和溶劑化物。
13.式(I)的化合物，選自(2S)-3-(4-{[(4-乙?；?1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊?；鵠氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊酰基)氨基]3-{4-[(4-嗎啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲?；窖趸?乙?；鵠氨基}-4-甲基戊?；?氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[4-(氨基羰基)苯氧基]乙?；鶀氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；和其鹽和溶劑化物。
14.式(I)的化合物，其為(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸或其鹽或溶劑化物。
15.根據權利要求14的式(I)化合物，其為(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}戊?；?氨基]丙酸的鉀鹽或其溶劑化物。
16.含有權利要求1-15中任一權利要求定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物和一種或多種藥學上可接受的稀釋劑或載體的藥物組合物。
17.含有權利要求1-15中任一權利要求定義的式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物和長效β2腎上腺素能受體激動劑的藥物組合物。
18.權利要求1-15中任一權利要求定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物用作藥物。
19.權利要求1-15中任一權利要求定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療炎性疾病的藥物中的用途。
20.一種治療或預防諸如哮喘的炎性疾病的方法，包括給患者施用有效量的權利要求1-15中任一權利要求定義的式(I)化合物或其生理可接受鹽或溶劑化物。
21.一種制備權利要求1-20中任一權利要求定義的式(I)化合物的方法，包括(a)水解式(II)的羧酸酯 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如權利要求1-10中的定義，R是能夠形成羧酸酯的基團；或(b)被保護的式(I)化合物脫保護。
22.式(II)的化合物， 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如權利要求1-10中的定義，R是能夠形成羧酸酯的基團。
23.式(VI)的化合物， 其中P1表示Boc，R4、R5和R6如權利要求1-4和10中的定義，R表示能夠形成羧酸酯的基團。
24.式(VII)的化合物， 其中P1表示Boc，R1、R2、R4、R5和R6如權利要求1-6和10中的定義，R表示能夠形成羧酸酯的基團。
25.式(VIII)的化合物， 其中R1、R2、R4、R5和R6如權利要求1-6和10中的定義，HX是氫鹵酸，R表示能夠形成羧酸酯的基團。
26.式(XIII)的化合物， 其中R4、R5和R6如權利要求1-4和10中的定義，R’表示羥基官能化的聚苯乙烯樹脂。
27.式(XIV)的化合物， 其中R3、R5、R5和R6如權利要求1-4和7-10中的定義，R’表示羥基官能化的聚苯乙烯樹脂。
28.式(XXI)的化合物， 其中R1、R2、R4、R5和R6和d如權利要求1-6和10中的定義，R’表示羥基官能化的聚苯乙烯樹脂，并且Hal表示鹵素。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的式(Ⅰ)化合物,其中R
文檔編號C07K5/065GK1330637SQ99814654
公開日2002年1月9日 申請日期1999年12月16日 優(yōu)先權日1998年12月18日
發(fā)明者D·R·阿穆, D·布朗, M·S·康格雷維, P·M·戈雷, D·V·S·格林, S·霍爾曼, T·I·M·杰克, S·P·凱林, A·M·馬森, K·莫里斯, N·G·拉姆斯登, P·瓦德 申請人:葛蘭素集團有限公司