專利名稱：化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及化合物，它是整合素α4β1，還稱為極晚抗原(Very LateAnti gen—4)(VLA—4)或CD49d／CD29，和它的蛋白質配位體，例如血管細胞粘連分子—1(VCAM—1)和纖維結合素間相互作用的抑制劑。本發(fā)明還涉及制備該化合物的方法、含有它們的藥物組合物和它們在治療應用方法中的用途。
α4β1是雜二聚體細胞表面受體的整合素家族的成員，所述受體由非共價聯(lián)合的糖蛋白亞單元(α和β)組成，包含細胞粘連于其它細胞或細胞外基質。存在至少14種不同人體整合素α亞單元和至少8種不同β亞單元，每種β亞單元可與一種或多種α亞單元形成雜二聚體。整合素可根據(jù)它們的β亞單元組成細分，α4β1是若干β1整合素中的一種，還稱為極晚抗原(VLA)。
整合素與它們的蛋白質配位體間的相互作用是保持細胞功能的基礎，例如通過束縛細胞在特定的位置、有助于細胞轉移或由它們的環(huán)境向細胞提供生存信號。被整合素識別的配位體包括細胞外基質蛋白質，例如膠原和纖維結合素；血漿蛋白，例如纖維蛋白原；和細胞表面分子，例如免疫球蛋白總科和細胞結合補體的跨膜蛋白質。整合素和配位體間相互作用的特異性由α和β亞單元組成支配。
整合素α4β1在許多造血細胞和建立的細胞系中表達，包括造血前體、末梢和細胞毒素T淋巴細胞、B淋巴細胞、單核細胞、胸腺細胞和嗜曙紅細胞[Hemler，M．E．等人(1987)，J．Biol．Chem．，262，11478—11485；Bochner，B．S．等人(1991)，J．Exp．Med．，173，1553—1556]。不像其它僅結合細胞外基質蛋白質的β1整合素，α4β1結合VCAM—1、在細胞表面，例如血管內皮細胞上表達的免疫球蛋白總科成員，和結合含有不同拼接類型Ⅲ連接片段的纖維結合素(CS—1纖維結合素)[Elices，M．J．等人(1990)，Cell，60，577—584；Wayner，E．A．等，(1989)J．Cell Biol．，109，1321—1330]。
血液白細胞的活化和外滲在炎性疾病的形成和發(fā)展中起主要作用。細胞粘連于血管內皮需要細胞先從血液遷移到發(fā)炎的組織，由血管內皮細胞表面上的細胞粘連分子和循環(huán)的白細胞之間特殊相互作用傳遞[Sharar，S．R．等(1995)．Springer Semin．Immunopathol．，16，359—378]。α4β1被認為在炎癥過程中在淋巴細胞、單核細胞和嗜曙紅細胞的募集中起重要作用。在T—細胞增生、生發(fā)中心的B—細胞集中、在骨骼中促紅細胞生成祖先細胞的集中、胎盤發(fā)育、肌肉發(fā)育和腫瘤細胞轉移中也與α4β1／配位體結合有關。
α4β1與其配位體的親和力通常是低的，但由炎性血管內皮表達的化學促活經(jīng)白細胞表面上的受體作用以提高α4β1功能[Weber，C．等(1996)，J．Cell Biol．，134，1063—1073]。通過體外胞質變動[Osborn，L．等(1989)Cell，59，1203—1211]和人體炎性疾病，例如類風濕性關節(jié)炎[Morales—Ducret，J．等(1992)J．Immunol．，149，1424—1431]、多發(fā)性硬化[Cannella，B．等(1995)Ann．Neurol．，37，424—435]、變應性哮喘[Fukuda，T．等(1996)，Am．J．Respir．Cell Mol．Biol．，14，84—94]和動脈粥樣硬化[O’Brien，K．D．等(1993)．J．Clin．Invest．，92，945—951]提高了在內皮細胞上的VCAM—1表達。
直接針對α4整合素亞單元的單克隆抗體已顯示出對許多人體炎性疾病的動物模型是有效的，包括多發(fā)性硬化、類風濕性關節(jié)炎、變應性哮喘、接觸性皮炎、移植排斥、胰島素依賴糖尿病、炎性腸炎和腎小球性腎炎。
整合素識別其配位體中的短肽基元。在CS—1中最小α4β1結合表位是三肽亮氨酸—天冬氨酸—纈氨酸(Leu—Asp—Yal)[Komoriya，A．，等(1991)J．Biol．Chem．，266，15075—15079]，而VCAM—1含有類似序列異亮氨酸—天冬氨酸—絲氨酸[Clements，J．M．，等(1994)J．Cell．Sci．，107，2127—2135]。25氨基酸纖維結合素，CS—1肽，它含有LerAsp—Val基元，是α4β1結合于VCAM—1的競爭抑制劑[Makarem，R．，等(1994)，J．Biol．Chem．，269，4005—4011]?；谠贑S—1中的Leu—Asp—Val序列的小分子α4β1抑制劑已有描述，例如線性分子苯基乙酸—Leu—Asp—Phe—D—Pro—酰胺[Molossi，S．等(1995)．J．Clin．Invest．，95，2601—2610]和二硫鍵環(huán)肽Cys—Trp—Leu—Asp—Val—Cys[Vanderslice，P．，等(1997)．J．Immuno1．，158，1710—1718]。
近來，在1996年1月11日公開的WO96／00581和1996年7月4日公開的W96／20216中，含有Leu—Asp—Val序列的環(huán)肽被報導抑制α4β1整合素結合于VCAM—1或纖維結合素。
在1994年2月3日公開的WO94／02445中，報導了少數(shù)非肽Leu—Asp—Val替代化合物，用于抑制α4β1導致的粘連。
近來，可口服給藥和抑制VCAM／VLA4結合的式Ⅰ非肽化合物在PCT申請WO96／22966中報導。
優(yōu)選的化合物是其中在式Ⅰ中，R1’是脲衍生物、R2’是氫、R3’是烷基或取代的烷基，R4’是二甲氧基苯基或苯并二氧雜環(huán)戊烯—5—基和Y是CO的化合物。
人們仍需要抑制VCAM—1和纖維結合素與整合素VLA—4相互作用的選擇性化合物，尤其是可通過口服給藥的化合物。
我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)一組合有取代的苯氧基的抑制該相互作用的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，它們提供式(Ⅱ)化合物
其中R1在對位或間位位置，是
其中R2和R3分別選自氫、硝基、C1—6烷基、C3—6環(huán)烷基、C2—6烯基、C2—6炔基、C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基、C1—6二烷基氨基、C1—6烷基C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氨基、氰基、鹵素、三氟甲基、—CO2R12和—CONR12R13，其中R12和R13分別選自氫或C1—6烷基，或R2和R3和與它們相連的苯基一起形成9或10元二環(huán)體系；R4是C1—4烷基；R5選自氫和C1—4烷基；R6選自C1—6烷基、C1—4烷基(C4—6)環(huán)烷基、C1—6烷基(C1—6)烷氧基、C1—6烷基S(C1—6)烷基、C1—4烷基磺酰基(C1—4)烷基，
其中q是1—6的整數(shù)，R14是鹵素；R7選自C1—6烷基、C1—8烷氧基羰基、C2—6烯基、1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基和選擇性地被一個或多個選自C1—4烷氧基、C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基的取代基取代的芳基；R8是芳基、雜芳基、經(jīng)環(huán)碳原子連接氮的二環(huán)雜芳基環(huán)體系或經(jīng)環(huán)碳原子連接氮的9或10元二環(huán)體系，每個環(huán)選擇性地被至多兩個取代基取代，取代基可以是相同或不同的，選自C1—6烷基、C1—4烷氧基、C1—4烷硫基、C1—6烷基C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、羥基、—CO2H、(CH2)pOH，其中p是1或2、氰基、鹵素和三氟甲基；R9和R10分別選自氫和C1—4烷基或R8和R9和與它們相連的氮一起形成二氫吲哚基或二氫喹啉基；R11選自羧基、四唑基、烷基磺?；被柞；?、磺基和亞磺基；Y是氧、硫或磺?；?；m是0或1，n是0或1—4的整數(shù)，其條件是m和n不同時是0，和當m是1時，n是0；
或可藥用的鹽或體內可水解的酯。
‘C1—6烷基C1—4烷氧基’通常指—(C1—6)烷基O(C1—4)烷基，優(yōu)選實例是—CH2OCH3?！瓹1—6烷基氨基C1—6烷基’通常指—(C1—6)烷基NH(C1—6)烷基，其優(yōu)選實例是—CH2NHC2H5。
‘芳基’通常指苯基或萘基，優(yōu)選苯基?！s芳基’指帶有至多4個選自氮、氧和硫的雜原子的芳香5或6元環(huán)，‘雜芳基’的實例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻二唑基、噻唑基、異噁唑基、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基和嘧啶基。
二環(huán)雜芳基環(huán)體系指芳香5，6—、6，5或6，6—稠合環(huán)系，其中一個或兩個環(huán)含有環(huán)雜原子。環(huán)系可含有至多三個雜原子，它分別選自氧、氮和硫。當環(huán)系含有超過一個雜原子時，至少一個雜原子是氮。優(yōu)選二環(huán)雜芳基環(huán)體系的實例是異喹啉基、苯并噻唑基或苯并咪唑基。
9或10元二環(huán)體系指芳香6元環(huán)稠合于5或6元環(huán)，優(yōu)選5或6元飽和環(huán)，并選擇性地被至少一個雜原子，優(yōu)選氧取代，并且經(jīng)芳香6元環(huán)上的環(huán)碳原子連接于氮。R8的優(yōu)選實例是四氫萘基。當R2，R3和與它們相連的苯基一起形成該9或10元二環(huán)體系時，優(yōu)選的基團是二氫苯并呋喃基和二氫苯并吡喃基。
R2和R3優(yōu)選分別選自氫、C1—6烷基、C1—4烷氧基、三氟甲基和鹵素，和更優(yōu)選分別選自甲基、甲氧基、異丙氧基、三氟甲基、氟、溴和氯。
R4的優(yōu)選基團是C1—2烷基，R5優(yōu)選選自氫、甲基和異丙基。R6優(yōu)選選自C1—4烷基和C1—4烷基S(C1—4)烷基，更優(yōu)選選自—CH2CH(CH3)(CH3)和—CH2CH2SCH3。R7優(yōu)選選自C2—6烯基、1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基和1—異丙基—2—甲基丙基乙?；鼉?yōu)選選自烯丙基和1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基。
R8優(yōu)選是苯基、噻吩基、吡啶基、噻二唑基、異噁唑基、噻唑基、5，6，7，8—四氫萘基、異喹啉基、1，3—苯并咪唑基和1，3—苯并噻唑基，分別選擇性地被至多兩個取代基取代，取代基優(yōu)選和分別選自C1—4烷基，更優(yōu)選甲基、鹵素，更優(yōu)選氟、氯和溴；—COOH、—CH2OH、羥基和甲硫基。
R9和R10分別優(yōu)選選自氫和甲基或R8和R9和與它們相連的氮一起形成2，3—二氫—1H—吲哚—1—基，或3，4—二氫—1(2H)—喹啉基。R11優(yōu)選是COOH。在優(yōu)選實施方案中，n是1和m是0。Y優(yōu)選是氧。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是式(Ⅲ)化合物
其中R2—R8、Y、m和n是如上定義的。
更優(yōu)選是這些化合物，其中R2是C1—4烷氧基，尤其是甲氧基，R3、R5和R10分別是氫；R4是C1—4烷基；R6選自C1—4烷基和C1—4烷基S(C1—6)烷基，尤其是—CH2CH(CH3)(CH3)或—CH2CH2SCH3；R7是1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基；R8是芳基或雜芳基，每個分別選擇性地被選自C1—6烷基，尤其是甲基、CH2OH、鹵素，尤其是氯或氟，和羥基的取代基取代，和R9是氫或C1—4烷基或R8和R9和與它們相連的氮一起形成二氫吲哚基或二氫喹啉基；和m和n是0或1，其條件是n和m不能同時是0或1，最優(yōu)選m是0，和n是1。
尤其優(yōu)選的化合物包括4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—苯基脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—氯苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；7—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—羥基甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—[(2，3—二氫—1H—吲哚—1—基羰基)氨基]—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—氟苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—羥基—6—甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；和4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—異丙氧基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺。
式(Ⅱ)和(Ⅲ)化合物在—CHR6和—CHR7上具有手性中心，因此當R6是—CH2CH(CH3)(CH3)或—CH2CH2SCH3時，本發(fā)明的式(Ⅱ)和(Ⅲ)化合物含有亮氨酸或蛋氨酸亞單元，后者是其蛋白原(或天然)構型。本發(fā)明覆蓋了抑制VCAM—1和纖維結合素與整合素VLA—4之間相互作用的所有非對映體。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，其提供了式(Ⅳ)化合物
其中R1a在對位或間位位置，是
其中R2a和R3a分別選自氫、硝基、C1—6烷基、C3—6環(huán)烷基、C2—6烯基、C2—6炔基、C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基、C1—4烷氧基C1—6烷基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氰基、鹵素、三氟甲基、—CO2R7a和—CONR7aR8a，其中R7a和R8a分別選自氫或C1—6烷基；R4a是選自C1—6烷基，C1—6烷氧基取代的(C1—6)烷基和C1—6烷基S(C1—6)烷基；R5a選自C1—6烷基、C2—6烯基、1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基和選擇性地被至少一個選自C1—4烷氧基、C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基的取代基取代的芳基；R6a是芳基或雜芳基，該環(huán)選擇性地被至多兩個取代基取代，取代基可以是相同或不同的，選自C1—6烷基、C1—4烷氧基、C1—4烷氧基C1—6烷基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基；Ya是氧或硫；和na是1—4的整數(shù)；
或可藥用的鹽或體內可水解的酯。
在式(Ⅳ)化合物中，‘芳基’通常指苯基或萘基，優(yōu)選苯基?！s芳基’指帶有至多4個選自氮、氧和硫的雜原子的芳香5或6元環(huán)，‘雜芳基’的實例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吡啶基和嘧啶基。
R2a和R3a優(yōu)選分別選自氫、C1—6烷基、三氟甲基和鹵素，和更優(yōu)選分別選自甲基、三氟甲基和氯。R4a的優(yōu)選選自C1—4烷基和C1—4烷基S(C1— 4)烷基，更優(yōu)選選自—CH2CH(CH3)(CH3)和—CH2CH2SCH3。R5a優(yōu)選選自C2—6烯基、更優(yōu)選選自烯丙基和1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基。R6a優(yōu)選帶有至多兩個取代基的苯基，取代基優(yōu)選和分別選自C1—4烷基，最優(yōu)選甲基、鹵素，最優(yōu)選氯和溴，n優(yōu)選是1。
本發(fā)明的式(Ⅳ)化合物在—CHR4a和—CHR5a上具有手性中心，因此R4a是—CH2CH(CH3)(CH3)或—CH2CH2SCH3時本發(fā)明的式(Ⅳ)化合物含有亮氨酸或蛋氨酸亞單元，后者是其蛋白原(或天然)構型。本發(fā)明覆蓋了抑制VCAM—1和纖維結合素與整合素VLA—4之間相互作用的所有非對映體。
式(Ⅱ)、(Ⅲ)和(Ⅳ)化合物的可藥用的鹽包括酸加成鹽，例如由無機酸，例如氫鹵酸，例如鹽酸和氫溴酸、磺酸和膦酸形成的鹽；和與有機酸，尤其是檸檬酸、馬來酸、乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸、對甲苯磺酸、甲磺酸等形成的鹽。在另一方面，合適的鹽是堿性鹽，例如堿金屬鹽，例如鈉和鉀；堿土金屬鹽，例如鎂和鈣；鋁和銨鹽；和與有機堿，例如乙醇胺、甲胺、二乙胺、異丙基胺、三甲基胺等形成的鹽。該鹽可通過現(xiàn)有技術中已知的任何合適方法制備。
體內可水解的酯是那些可藥用的酯，它在人體內水解以產(chǎn)生母體化合物。該酯可通過給藥，例如向試驗動物靜脈內給藥試驗的化合物，隨后檢查試驗動物的體液鑒定。羥基的合適的體內可水解的酯包括乙酰基，用于羧基的包括C1—6烷氧基甲酯，例如甲氧基甲酯、C1—6烷酰氧基甲酯，例如戊酰氧基甲基、對苯二甲酯，C3—8環(huán)烷氧基羰基C1—6烷基酯，例如1—環(huán)己基羰基氧基乙基、1，3—二氧戊環(huán)—2—基甲酯，例如5—甲基—1，3—二氧戊環(huán)—2—基甲基；和C1—6烷氧基羰基氧基乙酯，例如1—甲氧基羰基氧基乙基。
本發(fā)明的化合物抑制VCAM—1和纖維結合素與整合素VLA—4之間相互作用的活性使用許多體外和體內篩選確定，與現(xiàn)有技術的化合物相比，它們顯示改善的藥效。
例如本發(fā)明的化合物在下文描述的MOLT—4細胞／纖維結合素試驗中優(yōu)選具有＜10μnM，更優(yōu)選＜1μM的IC50。
優(yōu)選的化合物在許多小鼠體內篩選中顯示活性，例如在步行中由卵白蛋白引起的延遲型過敏(DTH)反應和膠原引起的關節(jié)炎。
為了使用，式(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)化合物或其可藥用的鹽或體內可水解的酯通常根據(jù)標準治療實踐配制成藥物組合物。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，它提供了藥物組合物，其含有式(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)化合物或其可藥用的鹽或體內可水解的酯和可藥用的載體。
本發(fā)明的藥物組合物可以是適用于口服的形式，例如片劑、膠囊、含水或含油溶液、懸浮液或乳化液；用于鼻內使用，例如鼻吸藥、鼻噴霧劑或鼻滴劑；用于陰道或直腸使用，例如栓劑；用于通過吸入給藥，例如細粉或液體氣溶膠；用于舌下或頰下使用，例如片劑或膠囊；或用于腸胃外使用(例如靜脈內、皮下、肌內、血管內或浸劑)，例如無菌含水或油狀溶液或懸浮液，或含有加入可生物降解的的聚合物中的藥物的貯存配方。組合物可以是適用于局部給藥的形式，例如乳油、軟膏和凝膠，還包括皮膚斑。為此，本發(fā)明的組合物可通過現(xiàn)有技術中已知的方法配制，例如在Comprehensive Medicinal Chemistry，第5卷，Hansch等編輯，Pegamon Press 1990中一般描述的方法。
此外，除了本發(fā)明的化合物之外，本發(fā)明的藥物組合物可含有適用于治療一種或多種與上述癥狀有關的疾病的一種或多種附加藥理試劑。在另一方面，附加的一種或多種藥理試劑可與本發(fā)明的藥物組合物同時或先后地共同給藥。
本發(fā)明的化合物通常以日劑量0．01—75mg／kg體重，優(yōu)選0．1—15mg／kg體重向人體給藥。本發(fā)明的優(yōu)選組合物是適用于以單元劑量形式，例如片劑或膠囊口服給藥的組合物，根據(jù)本發(fā)明每個單劑量在每一單元劑量中含有1—1000mg，優(yōu)選l0—500mg本發(fā)明的化合物。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，它提供了式(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)化合物或其可藥用的鹽或體內可水解的酯在人體或動物體的治療方法中的用途。
在本發(fā)明的另一方面，其提供了治療由VCAM—1和／或纖維結合素和整合素受體VLA—4之間相互作用傳遞的需要治療的疾病的方法，包括向溫血動物給藥有效量的式(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)或其可藥用的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明還提供了式(Ⅱ)、(Ⅲ)或(Ⅳ)或其可藥用的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療纖維結合素和／或VCAM—1(尤其是VCAM—1)和整合素受體VLA—4之間相互作用傳遞的疾病或醫(yī)學癥狀的藥物中的用途。
在本發(fā)明的實施方案中，需要治療的哺乳動物患多發(fā)性硬化、類風濕性關節(jié)炎、哮喘、冠狀動脈疾病或牛皮癬。
在本發(fā)明的另一方面，它提供了制備其中R11是COOH的式(Ⅱ)化合物或其可藥用的鹽或體內可水解的酯的方法，其包括偶合ⅰ)式(Ⅴ)化合物
和式(Ⅵ)化合物NHR5—CHR6—CONH—CHR7—CH2—COOH(Ⅵ)或ⅱ)式(Ⅶ)化合物
和式(Ⅷ)化合物NH2—CHR7—CH2—COOH(Ⅷ)其中L和L1是離去基團和任何官能團被選擇性地保護；和隨后如果需要a)除去任何保護基團；和b)形成可藥用的鹽或體內可水解的酯。
(Ⅴ)和(Ⅵ)或(Ⅶ)和(Ⅷ)的反應在用于形成肽鍵的標準偶合條件下進行。它們可以固體載體(固相肽合成)或在有機化合物的合成中使用的通常技術的溶液中進行。除了固體載體的例外之外，所有其它的保護基團，偶合試劑、解封試劑和純化技術類似于固相和溶液相肽合成技術。
在反應過程中，如果需要，氨基酸官能團可被保護基團，例如Boc保護。該基團在需要時用標準技術，例如酸或堿處理斷裂。
用于羧基保護的合適保護基團是酯。
用于形成肽鍵的偶合試劑包括通常使用的疊氮化物、對稱酐、混合的酐和各種活性酯和碳化二亞胺。在碳化二亞胺的情況下，還可加入添加劑，例如1—羥基苯并三唑和N—羥基琥珀酰亞胺。其它偶合劑包括1H—苯并三唑—1—基—氧基—三吡咯二膦鎓六氟硼酸鹽(PyBOP)、(2—(1H—苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓(uronium)六氟硼酸鹽(TBTU)、(2—(1H—苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓六氟磷酸鹽(TBTU)和0—(7—氮雜苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓六氟磷酸鹽(HATU)。
偶合反應可在—20℃—40℃的溫度下進行，反應時間可在例如10分鐘至24小時之間變化。用于中間體和最終產(chǎn)物的合適的純化方法包括與許多在有機化學中使用的其它標準技術(例如溶劑提取和結晶)一起采用的色譜法技術，例如高壓液相色譜法(HPLC)。
采用如下縮寫B(tài)oc 叔丁氧基羰基DIPEA二異丙基乙胺DMF 二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亞砜Et3N 三乙胺HATU 0—(7—氮雜苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓六氟磷酸鹽HOBT 1—羥基苯并三唑Su 琥珀酰亞胺TFA 三氟乙酸THF 四氫呋喃WSCDI1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺甲基碘化物或甲基氯化物用于式(Ⅴ)和(Ⅵ)或(Ⅶ)和(Ⅷ)化合物反應的優(yōu)選偶合條件尤其是，a)HATU／DIPEA／DMF
b)HOBT／WSCDI／DIPEA／DMFc)HOBT／WSCDI／DIPEA／N—甲基嗎啉式(Ⅵ)化合物可通過使式(Ⅸ)化合物NHR5CHR6COL’(Ⅸ)與式(Ⅷ)化合物反應制備。式(Ⅸ)化合物優(yōu)選是Boc—氨基酸或Boc—氨基酸—OSu形式，偶合試劑選自d)HATU／DMF／DIPEA；e)HOBT／WSCDI／DIPEA／DMF／二氯甲烷；和f)三乙胺／二氯甲烷；保護基團可以通過使用現(xiàn)有技術中已知的任何合適試劑除去，其尤其優(yōu)選的實例是三氟乙酸。
式(Ⅶ)化合物可通過使式(Ⅴ)化合物與式(Ⅸ)化合物在標準方法中反應制備。
制備式(Ⅷ)化合物的舉例方法如下當R7是芳基或1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基時，可使用如下方法。
其中R15是選自C1—4烷氧基、C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基；或
形成1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基，p是1—4的整數(shù)。
當R7是C2—6烯基時，可使用如下方法
由現(xiàn)有技術顯然BF3·Et2O可用其它已知路易斯酸代替，
被例如烯丙基溴代替，HCl／甲醇可被例如HBr／乙酸代替。
制備其中Y是氧，m是0，n是1和R8是6元芳香環(huán)的式(Ⅴ)化合物的舉例方法如下，其中R16和R17分別選自氫、C1—6烷基、C1—4烷氧基、C1— 4烷硫基、C1—6烷基C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、羥基、—CO2H、—(CH2)pOH，其中p是1或2、氰基、鹵素和三氟甲基
在第一反應步驟中，除甲醇鈉外，可使用堿，除叔丁基酯外，可使用酯，但這些通常需要最終的堿性而不是酸性水解以形成最終產(chǎn)物。對于其中m是0和n是2的式(Ⅴ)化合物，在丙烯酸酯中將加入酚鹽離子(ⅩⅦ)。制備式(ⅩⅪ)化合物的其它途徑包括使式(ⅩⅨ)化合物與三光氣反應，隨后與式(ⅩⅫ)化合物反應。此外，三光氣可與胺(ⅩⅫ)反應，隨后與式(ⅩⅨ)化合物反應。
式(ⅩⅪ)化合物還可根據(jù)如下反應制備
當Y是硫時，制備本發(fā)明的化合物的舉例方法如下。式(Ⅴ)化合物可通過例如在苯環(huán)上選擇性地取代的苯基異氰酸酯與2—(4—氨基苯硫基)乙酸反應形成。并加入偶合劑和式(Ⅵ)和(Ⅶ)的化合物。
當Y是磺?；鶗r，制備本發(fā)明的化合物的舉例方法如下。其中Y=S的式(Ⅱ)化合物通過用Oxone、間—氫過苯甲酸或其它合適的氧化劑處理氧化。在該方法中，可首先分離中間體亞砜(Y=SO)，采用其它更強的條件得到磺?；苌?。
在式(Ⅱ)化合物中當R11是?；酋０?—CHNHSO2Rx)時，制備這些化合物的舉例方法如下。其中R11是—CO2H的式(Ⅱ)化合物用式RxSO2NH2的磺?；吩?—二甲基氨基吡啶和碳化二亞胺存在下處理。
本發(fā)明的化合物可含有超過兩個單元，它們可通過形成酰胺鍵連接。當該單元存在時，本領域技術人員知道將這些單元連接起來的優(yōu)選順序。
本發(fā)明通過如下生物試驗方法、數(shù)據(jù)和非限制性實施例進一步說明。
表1涉及實施例13—76，它給出了最終物質的結構和它們的分析數(shù)據(jù)，它還用代碼給出制備該化合物的方法。
實施例實施例1 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3，4—(亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備
4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺(1．3g，2mmol)在甲醇(250ml)和THF(100ml)混合物中的懸浮液用1NLiOH(12．3ml，12mmol)處理。反應混合物在室溫下攪拌2小時，加入水(75ml)和DMF(10ml)，再攪拌2小時。將反應混合物濃縮至1／4體積，用1M檸檬酸酸化溶液至pH2得到白色固體。過濾出固體，用水和醚洗滌，得到酸(615mg，48％)，白色固體。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．80(s，1H)，8．46(d，1H)，8．00(d，1H)，7．80(d，2H)，7．36(d，2H)，7．08—7．18(m，2H)，6．72—6．96(m，6H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．48(s，2H)，4．40(q，1H)，2．56—2．74(m，2H)，2．18—2．28(m，5H)，1．70—1．90(m，2H)；ESPMS(M+H)623；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，20分鐘，Rt17．35分鐘。
a)N—(叔丁氧基羰基)蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯的制備根據(jù)如下(實施例3a)中描述的用于制備N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的方法制備該化合物，只是用3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(根據(jù)WO96／22966(Biogen)52—55頁中描述的方法制備，列為本文參考文獻)代替3—氨基—5—己烯酸甲酯鹽酸鹽，用N—(叔丁氧基羰基)蛋氨酸代替N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸。
N—(叔丁氧基羰基)蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1．3(9H，m)，1．6—1．8(2H，m)，2．0(3H，s)，2．3—2．4(2H，t)，2．7—2．8(2H，m)，3．5(3H，s)，3．9—4．0(1H，m)，5．1(1H，m)，5．9(2H，s)，6．7—6．9(4H，m)，8．2(1H，d)m／Z 455(M+H)。
b)蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯的制備根據(jù)如下(實施例3b)中描述的用于制備亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的方法制備該化合物只是用N—(叔丁氧基羰基)蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯代替N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯。
蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1．8—1．9(2H，m)，2．0(3H，s)，2．2—2．4(2H，m)，2．7—2．9(2H，m)，3．5(3H，s)，3．7(1H，t)，5．1(1H，b)，6．0(2H，s)，6．7—6．9(3H，m)，7．1—7．4(2H，b)，8．8(1H，d)m／Z 355(M+H)。
c)叔丁基4—硝基苯氧基乙酸酯的制備在室溫下用在甲醇(50ml)中的甲醇鈉(9．3g)溶液處理4—硝基苯酚(23g)在甲醇(200ml)中的攪拌溶液，減壓蒸發(fā)溶液至干，殘余物懸浮在甲苯(100ml)中。減壓蒸發(fā)甲苯懸浮液至干，殘余物通過用異己烷潷析洗滌。將得到的固體溶解在二甲基甲酰胺(250ml)中，得到的攪拌懸浮液在室溫下用未稀釋的叔丁基溴乙酸酯(35g)處理10分鐘?；旌衔镌?0℃加熱2小時，用冰和水(400ml)稀釋?；旌衔镉靡宜嵋阴?3×150ml)提取，合并的提取物在0℃用2N氫氧化鉀(2×100ml)、水(100ml)和飽和鹽水洗滌。干燥提取物(硫酸鎂)和蒸發(fā)。殘余物用異己烷研制，過濾出結晶，用異己烷洗滌。
叔丁基4—硝基苯氧基乙酸酯36．3g(86％)。熔點83—84℃。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1．45(9H，s)，4．88(2H，s)，7．10 (2H，d)，8．17(2H，d)m／Z 254(M+H)。
d)叔丁基4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸酯的制備在室溫下將迅速攪拌的含有5％披鈀碳(1g)的叔丁基4—硝基苯氧基乙酸酯(10g)在乙酸乙酯(200ml)中的溶液暴露于氫氣氣氛中。在氫氣攝入停止后，過濾溶液，濾餅用乙酸乙酯洗滌。合成的濾液冷卻至5℃，在攪拌下用未稀釋的2—甲基苯基異氰酸酯(7．9g)處理。將溶液在60℃加熱2小時，隨后將溶液急冷至0℃，過濾的沉淀物用冷乙酸乙酯洗滌得到叔丁基4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸酯8．1g(57％)，熔點177—78℃。
1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1．43(9H，s)，2．21(3H，s)，4．58(2H，s)，6．83(2H，d)，6．91(2H，t)，7．15(2H，q)，7．37(2H，d)，7．8(1H，s)，8．8(1H，s)m／Z 357(M+H)。
e)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸的制備在0℃用95％(v／v)三氟乙酸(50ml)處理叔丁基4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸酯(5g)在二氯甲烷(50ml)中的攪拌溶液。攪拌持續(xù)2小時，在此期間溶液達到室溫。通過減壓蒸餾除去揮發(fā)性溶劑，殘余物用水(200ml)稀釋。通過過濾收集沉淀，用水洗滌。粗物質由異丙醇中重結晶得到4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸3．1g(73％)。熔點216—218℃。
1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1HNMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)2．21(3H，s)，4．54(2H，s)，6．83(2H，d)，6．90(2H，t)，7．15(2H，q)，7．8(1H，s)，8．80(1H，s)m／Z 301(M+H)。
f)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酰基—(蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(710mg，2mmol)在DMF(6ml)中的溶液用蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(600mg，2mmol)、(0—(7—氮雜苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓六氟磷酸鹽)(760mg，2mmol)和二異丙基乙胺(0．7ml，4mmol)處理。混合物在室溫下攪拌過夜，混合物在乙酸乙酯和水之間分配，分離出乙酸乙酯層，用1M檸檬酸、飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，真空濃縮得到白色固體。固體用水和乙醚洗滌得到偶合產(chǎn)物(1．3g，100％)白色固體。
NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．88(s，1H)，8．48(d，1H)，8．02(d，1H)，7．84(s，1H)，7．80(d，2H)，7．38(d，2H)，7．06—7．18(m，2H)，6．84—6．94(m，4H)，6．80(d，1H)，6．74(d，1H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．48(s，2H)，4．38(q，1H)，3．52(s，3H)，2．70—2．78(m，2H)，2．20—2．30(m，5H)，1．92(s，3H)，1．70—1．88(m，2H)；ESPMS(M+H)637；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt19．04分鐘。
實施例2 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—(亞甲二氧基)苯基)丙酸甲酯)酰胺。
1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．2(3H，m)，2．1(3H，s)，2．5(2H，m)，4．3(1H，m)，4．4(2H，S)，5．0(1H，m)，5．9(2H，s)，6．6(6H，m)，7．0—7．1(2H，dd)，7．3—7．4(2H，d)，7．9(1H，d)，8．0(1H，d)，8．2(1h，s)，8．9(1H，d)，9．1(1H，s)m／Z 603(M—H)。
HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt17．5分鐘。
a)N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯的制備根據(jù)如下(實施例3a)中描述的用于制備N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的方法制備，只是用3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(參見實施例1)代替3—氨基—5—己烯酸甲酯鹽酸鹽。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．3—1．5(3H，m)，2．7(2H，m)，3．5(3H，s)，4．8—4．9(1H，m)，5．1—5．2(1H，m)，5．9(2H，s)，6．7—6．9(4H，m)，8．2(1h，d)，m／Z 437(M+H)。
b)亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯的制備根據(jù)如下(實施例3b)中描述的用于制備亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的方法制備，只是用N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯代替N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．8(6H，m)，1．3—1．5(2H，m)，1．5—1．6(1H，m)，2．7(2H，m)，3．3—3．4(1H，m)，3．5(3H，s)，4．9—5．3(2H，b)，5．1—5．2(1H，m)，6．0(2H，s)，6．7—6．9(3H，m)，8．4—8．5(1H，d)，m／Z 337(M+H)。
c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．3—1．4(3H，m)，2．2(3H，s)，2．7(2H，m)，3．5(3H，s)，4．3(1H，m)，4．4(2H，S)，5．0(1H，m)，5．9(2H，s)，6．7—6．9(6H，m)，7．0—7．1(2H，q)，7．3—7．4(2H，d)，7．7—7．8(2H，m)，8．0(1H，d)，8．4—8．5(1h，d)，8．9(1H，s)m／Z 619(M+H)。
HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt19．0分鐘。
實施例3 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酰基(蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—(亞甲二氧基)苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．3—1．5(3H，m)，2．0—2．2(2h，m)，2．2(3H，s)，2．3(2H，d)，4．0(1H，m)，4．3(1H，m)，4．4(2H，S)，4．9—5．0(2H，dd)，5．6—5．7(1H，m)，6．8—6．9(3H，m)，7．1—7．2(2H，m)，7．3—7．4(2H，d)，7．8(2H，d)，7．9—8．0(2H，m)，8．8(1H，s)，12．2(1H，b)m／Z 523(M—H)。
HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt16．8分鐘。
a)N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的制備將HOBT(255mg)加入N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸(297mg)在DMF(5ml)中的溶液中，隨后加入1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(273mg)，溶液攪拌15分鐘。將3—氨基—5—己烯酸甲酯(185mg)溶解在DMF(5ml)和三乙胺(140μl)中，將得到的溶液加入N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸活化酯中，隨后加入二異丙基乙胺(100μl)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，將混合物加入乙酸乙酯(30ml)中，用水(2×25ml)、5％檸檬酸(5ml)、水(5ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(5ml)、水(5ml)、飽和鹽水(5ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)，得到N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯(335mg)；NMR(CDCl3)0．9(6H，d)，1．4(10H，m)，1．6．1．8(2H，m)，2．2—2．3(2H，m)，2．5(2H，d)，3．6(3H，s)，4．0—4．1(1H，m)，4．2—4．3(1H，m)，4．8—4．9(1H，b)，5．0—5．1(2H，d)，5．6—5．8(1H，m)，6．5—6．6(1H，m)m／Z 357(M+H)b)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的制備N—(叔丁氧基羰基)亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯(10g)用在水(100ml)中的90％TFA處理?；旌衔飻嚢?0分鐘，蒸發(fā)除去TFA和水。殘余物用制備性HPLC在C18硅膠柱上純化，用乙腈／水／0．1％TFA洗脫，在蒸發(fā)合適餾分后得到膠狀固體。將其溶解在乙酸乙酯(50ml)中，用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)洗滌兩次，用飽和鹽水(10ml)洗滌一次，干燥(硫酸鎂)和蒸發(fā)得到1．6g亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯的單個非對映體異構體，為淺蘭色油狀物。HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt10．7分鐘；1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．4—1．5(2H，m)，1．5—1．7(1H，m)，2．1—2．3(2H，m)，2．3—2．5(2H，m)，3．5(3H，s)，3．6—3．7(1H，m)，4．1—4．2(1H，m)，4．4—4．6(2H，b)，5．0—5．1(2H，dd)，5．6—5．8(1H，m)，8．4(1H，d)m／Z 257(M+H)。
c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酰基—(亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。
4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—5—己烯酸甲酯)酰胺。m／Z 539(M+H)。HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，20分鐘，Rt17．7分鐘(92％純度)，使用時無需嚴格干燥或進一步表征。
實施例4 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．35(d，1H)，8．50(d，2H)，8．30(d，1H)，7．75(d，1H)，7．60(d，1H)，7．05—7．30(m，4H)，6．90—7．00(m，1H)，6．85(s，1H)，6．70—6．80(m，2H)，5．95(s，2H)，4．88—5．00(m，1H)，4．65(s，2H)，4．24—4．40(m，1H)，2．35—2．45(m，2H)，2．25(s，3H)，1．40—1．60(m，3H)，0．70—0．90(m，6H)；ESPMS(M+H)673；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，超過20分鐘，Rt15．94分鐘。
a)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙酸叔丁基酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．28(d，2H)，7．75(d，1H)，7．60(d，1H)，7．04—7．22(m，4H)，6．92(t，1H)，4．72(s，2H)，2．20(s，3H)，1．40(s，9H)；ESPMS(M+H)425。
b)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙酸的制備以類似4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．30(d，2H)，7．75(d，1H)，7．60(d，1H)，7．04—7．22(m，4H)，6．90(t，1H)，4．75(s，2H)，2．22(s，3H))；ESPMS(M—H)367。
c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—三氟甲基苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．52(s，1H)，8．45(s，1H)，8．20(d，1H)，7．75(d，1H)，7．58(d，1H)，7．05—7．22(m，5H)，6．86—6．96(m，2H)，6．80(d，lH)，6．75(d，2H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．62(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，3．52(s，3H)，2．68—2．78(m，2H)，2．20(s，3H)，1．30—1．50(m，3H)，0．72—0．84(m，6H)；ESPMS(M+H)687；HPLC—Dynamax 60A柱C18；乙腈／水／0．1％TFA1O％—70％，超過20分鐘，Rt20．05分鐘。
實施例5 4—(N’—(2—氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．30(s，1H)，8．60(d，1H)，8．25(s，1H)，8．15(d，1H)，7．95(d，1H)，7．42(d，1H)，7．35(d，2H)，7．25(t，1H)，7．00(t，1H)，6．75—6．92(m，4H)，6．70(d，1H)，5．95(s，2H)，5．05(q，1H)，4．50(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，2．50—2．65(m，2H)，1．30—1．50(m，3H)，0．70—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)625；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，超過20分鐘，Rt15．07分鐘。
b)4—(N’—(2—氯苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1d)的方法用4—硝基—2—氯苯氧基乙酸叔丁基酯制備，4—硝基—2—氯苯氧基乙酸叔丁基酯以類似4—硝基苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c)的方法制備。
4—硝基—2—氯苯氧基乙酸叔丁基酯1H NMR(CDCl3，300 MHz，ppm)8．32(d，1H)，8．15(d，1H)，6．85(d，1H)，4．72(s，2H)，1．45(s，9H)；ESPMS(M+H)288。
4—(N’—(2—氯苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．24(s，1H)，8．30—8．40(m，2H)，7．60(d，1H)，7．55(d，2H)，7．45(t，1H)，7．20(t，1H)，7．05(d，2H)，4．75(s，2H)，1．60(s，9H)；ESPMS(M+H)377。
c)4—(N’—(2—氯苯基)脲)—苯氧基乙酸的制備以類似4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．20(s，1H)，8．20(s，1H)，8．15(d，1H)，7．40(d，1H)，7．35(d，2H)，7．25(t，1H)，7．00(t，1H)，6．82(d，2H)，4．60(s，2H)；ESPMS(M—H)319d)4—(N’—(2—氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—氯苯基)脲)—苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．20(s，1H)，8．45(d，1H)，8．20(s，1H)，8．15(d，1H)，7．95(d，1H)，7．42(d，1H)，7．35(d，2H)，7．25(t，1H)，7．00(t，1H)，6．85—6．95(m，3H)，6．80(d，1H)，6．75(d，1H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．45(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，3．50(s，3H)，2．70—2．76(m，2H)，1．30—1．50(m，3H)，0．70—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)639；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA20％—80％，超過20分鐘，Rt16．71分鐘。
實施例6 4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．38(s，1H)，8．62(d，1H)，8．10(s，1H)，8．05(d，1H)，7．95(d，1H)，7．60(d，1H)，7．25—7．40(m，3H)，6．70—7．00(m，6H)，5．95(s，2H)，5．05(q，1H)，4．45(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，2．50—2．65(m，2H)，1．30—1．50(m，3H)，0．70—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)671；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，超過20分鐘，Rt14．85分鐘。
a)4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．15(s，1H)，7．88—7．95(m，2H)，7．45(d，1H)，7．15—7．25(m，3H)，6．78—6．88(m，1H)，6．68．6．75(m，2H)，4．45(s，2H)，1．30(s，9H)；ESPMS(M+H)423b)4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙酸的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．25(s，1H)，8．00—8．10(m，2H)，7．58(d，1H)，7．25—7．38(m，3H)，6．90—6．98(m，1H)，6．80—6．88(m，2H)，4．60(s，2H)；ESPMS(M+H)365c)4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—溴苯基)脲)—苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．28(s，1H)，8．45(d，1H)，8．00—8．10(m，2H)，7．95(d，1H)，7．58(d，1H)，7．25—7．40(m，3H)，6．85—6．95(m，4H)，6．8(d，1H)，6．72(d，1H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．44(s，2H)，4．35(q，1H)，3．50(s，3H)，2．70—2．78(m，2H)，1．30—1．50(m，3H)，0．75—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)683；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA20％—80％，超過20分鐘，Rt16．87分鐘。
實施例7 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．80(s，1H)，8．98(d，1H)，8．60(s，1H)，7．98(d，1H)，7．75(s，1H)，7．65(d，1H)，7．20(d，1H)，7．04—7．15(m，2H)，6．85—7．00(m，2H)，6．82(s，1H)，6．70—6．80(m，2H)，5．90(s，2H)，5．00(q，1H)，4．58(s，2H)，4．35(q，1H)，2．20(s，3H)，1．38—1．55(m，3H)，0．70—0．90(m，6H)；ESPMS(M+H)639；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，超過20分鐘，Rt14．97分鐘。
a)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．95(s，1H)，7．85(s，1H)，7．76(d，1H)，7．65(d，1H)，7．05—7．20(m，3H)，6．88—6．95(m，2H)，4．65(s，2H)，2．20(s，3H)，1．40(s，9H)；ESPMS(M+H)391。
b)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙酸的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．95(s，1H)，7．85(s，1H)，7．78(d，1H)，7．68(d，1H)，7．08—7．20(m，3H)，6．88—7．00(m，2H)，4．70(s，2H)，2．20(s，3H)；ESPMS(M+H)335。
c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．05(s，1H)，8．55(d，1H)，7．98(s，1H)，7．85(d，1H)，7．75(d，1H)，7．70(d，1H)，7．05—7．20(m，3H)，6．90—7．00(m，2H)，6．85(s，1H)，6．80(d，1H)，6．75(d，1H)，5．95(s，2H)，5．10(q，1H)，4．60(s，2H)，4．35(q，1H)，3．50(s，3H)，2．68—2．76(m，2H)，2．20(s，3H)，1．35—1．45(m，3H)，0．75—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)653；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt20．45分鐘。
實施例8 4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酰基(蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)10．15(s，1H)，9．50—9．60(m，1H)，9．10(s，1H)，8．25(d，1H)，7．90(d，2H)，7．60(d，1H)，7．30—7．40(m，2H)，6．95—7．05(m，3H)，6．90(s，2H)，6．10(d，2H)，5．09—5．19(m，1H)，4．65(s，2H)，4．42—4．52(m，1H)，2．55(d，2H)，2．40(s，3H)，1．60—1．70(m，3H)，0．90—1．10(m，6H)；ESPMS(M+H)639；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA1O％—90％，超過20分鐘，Rt15．14分鐘。
a)4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．82(s，1H)，7．82—7．90(m，2H)，7．32(d，2H)，7．22(s，1H)，7．15(d，1H)，6．80(d，2H)，4．56(s，2H)2．20(s，3H)；ESPMS(M+H)391。
b)4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙酸的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．84(s，1H)，7．82—7．90(m，2H)，7．32(d，2H)，7．22(s，1H)，7．15(d，1H)，6．82(d，2H)，4．60(s，2H)2．20(s，3H)；ESPMS(M—H)335c)4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯，得到4—(N’—(2—甲基—4—氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．15(s，1H)，8．50(d，1H)，8．15(s，1H)，7．95(d，1H)，7．82(d，1H)，7．38(d，2H)，7．20(s，1H)，7．15(d，1H)，6．70—6．90(m，5H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．45(s，2H)，4．35(q，1H)，3．50(s，3H)，2．68—2．78(m，2H)，2．20(s，3H)，1．30—1．50(m，3H)，0．70—0．90(m，6H)；ESPMS(M+H)653；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／O．1％TFA1O％—70％，超過20分鐘，Rt20．53分鐘。
實施例9 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．90—9．00(m，1H)，8．20(s，1H)，8．08(s，1H)，7．85(d，1H)，7．60(d，1H)，7．30(d，1H)，6．90—7．04(m，2H)，6．50—6．80(m，6H)，5．78(s，2H)，4．72—4．88(m，1H)，4．35(s，2H)，4．20—4．42(m，1H)，2．00—2．15(m，6H)，1．25—1．42(m，3H)，0．60—0．80(m，6H)；ESPMS(M+H)619；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，20分鐘，Rt14．70分鐘。
a)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．10(s，2H)，8．00(s，1H)，7．78(d，1H)，7．50(d，1H)，7．04—7．18(m，2H)，6．90(t，1H)，6．75(s，1H)，6．65(d，1H)，4．58(s，2H)，2．20(d，6H)，1．40(s，9H)；ESPMS(M+H)371。
b)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙酸的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(參見實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．10(s，2H)，8．00(s，1H)，7．75—7．82(m，1H)，7，44—7．52(m，1H)，7．04—7．20(m，2H)，6．84—6．95(m，1H)，6．75(s，1H)，6．62—6．70(m，1H)，4．60(s，2H)，2．20(d，6H)；ESPMS(M—H)313c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2—甲基苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．50(d，1H)，8．18(s，1H)，8．05(s，1H)，7．95(d，1H)，7．78(d，1H)，7．50(d，1H)，7．05—7．18(m，2H)，6．82—6．95(m，2H)，6．70—6．92(m，4H)，5．98(s，2H)，5．10(q，1H)，4．50(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，3．50(s，3H)，2．70—2．78(m，2H)，2．20(d，6H)，1．30—1．50(m，3H)，0．72—0．88(m，6H)；ESPMS(M+H)633；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／O．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt18．99分鐘。
實施例10 4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．70(s，1H)，9．15(d，1H)，8．68(s，1H)，7．95—8．10(m，2H)，7．50(d，1H)，7．25—7．35(m，3H)，6．75—6．85(m，3H)，6．65—6．72(m，2H)，5．88(s，2H)，4．85—4．95(m，1H)，4．45(s，2H)，4．20—4．35(m，1H)，2．33—2．40(m，2H)，1．35—1．50(m，3H)，0．70—0．85(m，6H)；ESPMS(M+H)661；HPLC—Vydac 201HS54柱；乙腈／水／0．1％TFA10％—90％，超過20分鐘，Rt15．96分鐘。
a)4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙酸叔丁基酯的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯(參見實施例1c和1d)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．20(s，1H)，8．25(s，1H)，8．15(d，1H)，7．50—7．60(m，1H)，7．22—7．38(m，3H)，6．80(d，2H)，4．56(s，2H)，1．38(s，9H)；ESPMS(M+H)411。
b)4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙酸的制備以類似于4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸(實施例1e)的方法制備。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．22(s，1H)，8．30(s，1H)，8．18(d，1H)，7．58(s，1H)，7．24—7．40(m，3H)，6．80—6．90(m，2H)，4．58(s，2H)；ESPMS(M—H)353c)4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸，用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2a和2b)代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯，得到4—(N’—(2，4—二氯苯基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)9．30(s，1H)，8．50(d，1H)，8．30(s，1H)，8．18(d，1H)，7．94(d，1H)，7．58(s，1H)，7．30(d，3H)，6．68—6．95(m，5H)，5．94(s，2H)，5．10(q，1H)，4．50(s，2H)，4．30—4．40(m，1H)，3．52(s，3H)，2．62—2．82(m，2H)，1．30—1．50(m，3H)，0．70—0．90(m，6H)；ESPMS(M+H)675；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt21．90分鐘。
實施例11 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．95(s，1H)，8．50(d，1H)，7．98(d，1H)，7．85(s，1H)，7．75(d，1H)，7．68(s，1H)，7．05—7．20(m，3H)，6．98(d，1H)，6．90(t，1H)，6．82(s，1H)，6．80(d，1H)，6．75(d，1H)，5．95(s，2H)，5．05(q，1H)，4．60(s，2H)，4．40(q，1H)，2．60—2．75(m，2H)，2．15—2．30(m，5H)，1．95(s，3H)，1．70—1．90(m，2H)；ESPMS(M+H)657；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt17．43分鐘。
a)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙酰基(蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1f的方法制備，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氯苯氧基乙酸(參見實施例7a和7b)代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)8．98(s，1H)，8．52(d，1H)，8．00(d，1H)，7．85(s，1H)，7．75(d，1H)，7．68(d，1H)，7．05—7．20(m，3H)，6．98(d，1H)，6．92(t，1H)，6．85(s，1H)，6．80(d，1H)，6．75(d，1H)，5．96(s，2H)，5．10(q，1H)，4．60(s，2H)，4．40(q，1H)，3．52(s，3H)，2．70—2．78(m，2H)，2．25(t，2H)，2．20(s，3H)，1．94(s，3H)，1．70—1．90(m，2H)；ESPMS(M+H)671；HPLC—Dynamax 60A柱C18乙腈／水／0．1％TFA10％—70％，超過20分鐘，Rt19．47分鐘。
實施例12 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸酯)酰胺(150mg)、MeOH(5ml)和2N氫氧化鈉(2ml)的混合物在50℃攪拌2小時，隨后用乙酸酸化。將混合物真空濃縮至約3ml，隨后用水稀釋，收集不溶解的固體，用水和乙酸乙酯洗滌得到4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺(110mg，74％)，熔點207—210℃1H NMR(d6—DMSO，300MHz，ppm)9．05(s，1H)；8．4(d，1H)；8．05(d，1H)；7．9(s，1H)；7．8(d，1H)；7．4(d，2H)；7．3(d，2H)；7．1(m，2H)；6．95(m，1H)；6．7—6．9(m，3H)；5．95(s，2H)；5．05(m，1H)；4．25(m，1H)；3．6(dd，2H)；2．6(m，2H)；2．2(s，3H)；1．2—1．4(m，3H)；0．75(m，6H)．MS(ES—)m／e 619．5(MH)—a)4—N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙酸的制備2—(4—氨基苯硫基)乙酸(3．07g)在乙腈(120ml)中的懸浮液回流攪拌，同時加入2—甲基苯基異氰酸酯(2．1ml)，將混合物攪拌回流1小時。冷卻生成的溶液，收集結晶的淺灰色固體得到4—N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙酸(4．93g，93％)，熔點182—183℃。
b)(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸酯)酰胺的制備在室溫下攪拌4—N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙酸(364mg)、DMF(7ml)、2—(1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基)—2—(亮氨酸基氨基)丙酸甲酯(336mg)、1—羥基苯并三唑(156mg)、1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(220mg)和N—甲基嗎啉(116mg)的混合物4天．混合物用乙酸乙酯和水稀釋，收集沉淀，用水和乙酸乙酯洗滌得到(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯硫基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸酯)酰胺(500mg，79％)，為灰白色固體。
實施例13—76如下文和表1中描述制備。
實施例14 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯基磺?；阴；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1中的方法制備，只是用甲基—2—(1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基)—2—(2—{[4—(2—甲基苯基脲基)苯基磺?；鵠乙酰基亮氨?；被鶀丙酸酯代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酰基(蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。
a)甲基—2—(1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基)—2—(2—{[4—(2—甲基苯基脲基)苯基磺?；鵠乙酰基亮氨酰基氨基}丙酸酯的制備在室溫下攪拌甲基—2—(1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基)—2—(2—{[4—(2—甲基苯基脲基)苯硫基]乙酰基亮氨?；被鶀丙酸酯(實施例12b，0．35g)、DMF(2ml)、甲醇(8ml)、Oxone_(1g)和水(4ml)的混合物24小時?；旌衔镉盟♂?，用乙酸乙酯提取，干燥有機相和蒸發(fā)至干。殘余物用乙醚磨碎，收集不溶解的固體得到甲基—2—(1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基)—2—(2—{[4—(2—甲基苯基脲基)苯基磺?；鵠乙?；涟滨；被鶀丙酸酯(O．329)。[m／e667(M+H)+]實施例16 2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基)丁?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例2的方法，只是在2c和1f中用2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基)丁酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸。
a)2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基)丁酸乙酯的制備將碳酸鉀(5．5g，0．04mol)加入4—硝基苯酚(5．56g，0．04mol)在DMF(20ml)中的攪拌溶液中，隨后加入2—溴丁酸乙酯(7．8g，0．04mol)，混合物在室溫下攪拌48小時。將混合物傾入水(60ml)中用乙醚(2次，70ml)提取。分離有機相，用鹽水洗滌，干燥和蒸發(fā)至干得到油狀物(9g)。在乙醇(20ml)中的該油狀物(2g，0．008mol)中加入10％Pd／C(0．2g)，混合物在氫氣中攪拌2小時，過濾并蒸發(fā)至干。在二氯甲烷(20ml)中的殘余物用2—甲基苯基異氰酸酯(1．05g，0．008mol)處理，使混合物靜置18小時。過濾溶液，蒸發(fā)至干，殘余物由乙醇中重結晶得到產(chǎn)物(1．3g)。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)；1．0(t)，3H；1．2(t)，3H；2．2(s)，3H；4．1(q)，2H；4．65(t)，1H；6．8(d)，2H；6．9(t)，1H；7．1(m)，2H；7．35(d)，2H；7．8(m)，2H，8．8(s)，1H ESPMS(M+H)357b)2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基)丁酸的制備將2M氫氧化鈉水溶液(3ml)加入在二甲基亞砜(7ml)中的2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基)丁酸乙酯(1．2g，0．0034mol)中，混合物在室溫下攪拌1小時。加入水(10ml)，用2N鹽酸調節(jié)pH至約2，過濾產(chǎn)物，用水洗滌和干燥得到產(chǎn)物(1．0g)。1H NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)；1．0(t)，3H；2．2(s)，3H；4．5(t)，1H；6．8(d)，2H；6．9(t)，1H；7．1(m)，2H；7．35(d)，2H；7．8(m)，2H，8．8(s)，1H1H ESPMS(M—H)327。
實施例23 4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙?；被?2—[甲基磺?；一鵠甘氨酰基氨基)天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)酯的制備在室溫和常壓下將4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙?；被猄—(2—[甲基磺?；一鵠甘氨?；被?天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(65mg)、DMF(5ml)和10％Pd／C催化劑(20mg)的混合物在氫氣下攪拌4小時。過濾混合物，蒸發(fā)濾液至干，殘余物用乙酸乙酯研制得到2—(2—苯基—苯并噁唑—6—基)—乙酰基氨基—(2—[甲基磺?；一鵠甘氨酰基)—天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)酯(52mg，91％)，為灰白色固體。
a)BOC—天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備攪拌BOC—天冬氨酸—β—芐酯(3．23g)、二氯甲烷(20ml)、2，4—二甲基戊醇(1．51g)和二環(huán)己基碳化二亞胺(2．06g)的混合物，用4—二甲基氨基吡啶(20mg)。將混合物攪拌1小時，過濾，蒸發(fā)濾液至干。殘余物用硅膠快速色譜法純化，使用增加極性的二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，合并合適的餾分，蒸發(fā)至干得到產(chǎn)物，為膠狀物(3．55g)。[m／e422(MH)+]b)天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備
BOC—天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(3．4g)在二氯甲烷(10ml)中的溶液用三氟乙酸(10ml)處理，混合物在室溫下攪拌2小時，隨后蒸發(fā)至干。殘余物用水(10ml)和乙酸乙酯(30ml)的混合物攪拌，用碳酸氫鉀堿化。分離出有機相，用鹽水洗滌，干燥和蒸發(fā)至干得到天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(2．7g)。[m／e322(MH)+]c)BOC—蛋氨酰基—天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備攪拌天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(0．64g)、BOC—蛋氨酸(0．75g)、羥基苯并三唑(0．41g)、N—甲基嗎啉(1ml)和1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0．57g)的混合物18小時。用二氯甲烷稀釋混合物至30ml，依次用含水碳酸氫鈉溶液(2次)和鹽水洗滌，隨后干燥和蒸發(fā)至干得到BOC—蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯，為膠狀物(1．15g)，無需進—步純化而使用。
d)蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備在室溫下攪拌BOC—蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(1g)、二氯甲烷(5ml)、三乙基甲硅烷(0．5ml)和三氟乙酸(5ml)的混合物1小時，蒸發(fā)至干。殘余物在含水碳酸鉀溶液和乙酸乙酯之間分配，分離出有機相，干燥并蒸發(fā)至干。殘余物用快速色譜法純化，用在乙酸乙酯中的1％三乙胺溶液洗脫得到蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯，為膠狀物(0．32g)[m／e 453(MH)+]e)4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙酰基氨基—蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備將蛋氨?；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(0．3g)、4—(2—甲基苯基脲基)苯基乙酸(0．28g)、羥基苯并三唑(0．13g)、N—甲基嗎啉(0．1ml)、二氯甲烷(5ml)和1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0．19g)的混合物攪拌18小時。混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用1鹽酸、1N氫氧化鈉和鹽水洗滌，隨后干燥和蒸發(fā)至干。殘余物用乙酸乙酯研制得到4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙?；被鞍滨；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯白色固體(0．4g)。[m／e719(MH)+]f)4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙酰基氨基—(2—[甲基磺?；一鵠甘氨?；?天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯的制備將4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙?；被鞍滨；於彼帷痢?2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(0．12g)、DMF(1ml)、Oxane_[Aldrich](O．25g)和水(0．5ml)的混合物在室溫下攪拌72小時?；旌衔镉盟♂?，收集不溶解的固體得到4—(2—甲基苯基脲基)—苯基乙酰基氨基—(2—[甲基磺?；一鵠甘氨酰基)天冬氨酸—α—(2，5—二甲基戊基)—β—芐基二酯(0．11g)，為白色固體。[m／e719(MH)+]實施例28 6—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧基(亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例2的方法，只是在2c和1f中用6—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧酸代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸。
a)2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧酸乙酯的制備在室溫下將2—甲基苯基異氰酸酯(O．32g，0．0024mol)加入6—氨基苯并二氫吡喃—4—酮—2—羧酸乙酯(0．32g，0．0022mol，如Barker，G．；Ellis，G．P．；J Chem Soc C，1970，2230中所述制備，列為本文參考文獻)在THF(5ml)中的溶液中．將混合物攪拌18小時，通過過濾回收產(chǎn)物，用乙醚洗滌得到0．64g產(chǎn)物，將其在60℃在Pd／C催化劑(0．4g)存在下在N—甲基吡咯烷酮(20ml)和乙酸(20ml)的混合物中氫化10小時，過濾和蒸發(fā)至干，殘余物用水研制。干燥固體殘余物得到產(chǎn)物2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧酸乙酯(0．45g)。NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)；1．2(t)，3H；2．1(m)，2H；2．2(s)，3H；2．7(m)，2H；4．1(q)，2H；4．8(m)，1H；6．7(d)，1H6．9(t)，1H；7．1(m)，4H；7．8(m)，2H；8．7(s)，1H．ESPMS(M+H)355b)6—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧酸的制備在二甲基亞砜(5ml)中的2—(4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯并二氫吡喃—2—羧酸乙酯(0．43g，0．0012mol)用含水氫氧化鈉(1．2ml)處理，混合物靜置2小時，加入水(10ml)，用2N鹽酸調節(jié)pH至2。過濾出產(chǎn)物，用水洗滌，空氣干燥得到上述產(chǎn)物(0．35g)。NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)；2．1(m)，2H；2．2(s)，3H；2．7(m)，2H；4．7(m)，1H；6．7(d)，1H；6．9(t)，1H；7．1(m)，4H，7．8(m)，2H；8．7(s)，1H，ESPMS(M+H)327。
實施例29 4—(N’—(2—噻吩基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是用4—(N’—(2—噻吩基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸甲酯)酰胺。
a)4—(N’—(2—噻吩基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸甲酯)酰胺的制備在室溫和氬氣中將Proton-Sponge_(Aldrich)(102mg)加入在THF(3ml)中的噻吩—2—羧酸(61mg)的攪拌溶液中。20分鐘后，加入二苯基磷?；B氮化物(131mg)，將混合物回流加熱5小時。將溶液冷卻至室溫，在攪拌和室溫下加入在THF(5ml)中的如實施例30b中制備的4—氨基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸甲酯)酰胺(243mg)溶液，混合物回流12小時。將冷卻的混合物在乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)之間分配，乙酸乙酯相用1M檸檬酸、飽和含水碳酸氫鈉和鹽水洗滌。蒸發(fā)得到棕色固體，它用乙醚磨碎通過過濾分離出產(chǎn)物，收率43mg。m／Z(+ve)611．3(M+H)m／Z(—ve)611．3實施例30 4—(N’(2—苯基脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是用4—(N’—苯基脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。
a)4—硝基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備將HOBT(1．5g)加入在DMF(10ml)中的4—硝基苯氧基乙酸(1．97g)的溶液中，隨后加入1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(2．14g)，溶液攪拌15分鐘．將亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(實施例2b)(2．69g)溶解在DMF(10ml)中，將得到的溶液加入活化酯的溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，將混合物加入乙酸乙酯(100ml)中，用水(2次，10ml)、5％檸檬酸(10ml)、水(10ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)、水(10ml)和飽和鹽水(10ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)，蒸發(fā)得到4—硝基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺3．02g。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．3—1．4(3H，m)，2．7(2H，m)，3．5(3H，s)，4．3—4．4(1H，s)，4．7(2H，m)，5．1(1H，m)，5．9(2H，s)，6．7—6．9(3H，m)，7．1(2H，d)，8．2(3H，m)，8．4—8．5(1H，d)m／Z 516(M+H)。
b)4—氨基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備在室溫下將在含有5％Pd／C(0．3g)的乙酸乙酯(60ml)中的4—硝基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺(3．02g)迅速攪拌的溶液暴露于氫氣氣氛中。當氫氣的攝入停止后，過濾溶液，濾餅用乙酸乙酯洗滌。蒸發(fā)合并的濾液至干得到2．7g4—氨基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)0．9(6H，m)，1．3—1．4(3H，m)，2．7(2H，m)，3．5(3H，s)，4．3—4．4(3H，m)，4．7(2H，m)，5．1(1H，m)，5．9(2H，s)，6．5(2H，d)，6．7—6．9(5H，m)，7．8(1H，d)，8．4—8．5(1H，d)m/Z 486(M+H)。
HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA20％—80％，超過20分鐘，Rt9．7分鐘，用于下一步驟，無需進一步純化。
c)4—(N’—(2—苯基脲)—苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備將4—氨基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺(727mg)和二異丙基乙胺(0．282ml)溶解在二氯甲烷(2ml)中，在氬氣下在30分鐘內加入光氣(165mg)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中。得到的溶液攪拌5分鐘，加入注射器中，將總體積的三分之一在氬氣下加入苯胺(0．042ml)和二異丙基乙胺(0．093ml)在二氯甲烷(2ml)中的常識?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，蒸發(fā)混合物至干，隨后溶解在乙酸乙酯(30ml)中，用水(10ml)、5％檸檬酸(10ml)、水(10ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)、水(10ml)和飽和鹽水(10ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)溶劑，用乙醚研制，得到212mg4—(N’—苯基脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺白色固體，將其水解，無需進一步純化。m／Z605(M+H)。HPLC—Dynamax 60AC18柱；乙腈／水／0．1％TFA20％—80％，超過20分鐘，Rt15．8分鐘(95％純度)。
實施例54 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?N—(2—甲基丙基)甘氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?甲基N—(2—甲基丙基)甘氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。
a)N—(2—甲基丙基)甘氨酸甲酯的制備在氬氣氣氛下將溴乙酸叔丁基酯(8．4ml，10．1g)在—40℃和攪拌在5分鐘內加入異丁基胺(50ml，36．8g)在乙醚(100ml)中的溶液中，溶液在該溫度下攪拌1小時，隨后在室溫下攪拌18小時。過濾混合物，在室溫下蒸餾濾液以除去乙醚和過量的異丁基胺(沸點64—66℃)，隨后減壓蒸餾得到產(chǎn)物，收率82％，沸點68℃／3mm。NMR(CDCl3300 MHz，ppm)3．28(2H，s)，2．4(2H，d)，1．72(1H，m)，1．48(9H，s)，0．92(6H，d)。
m／Z188．3(M+H)b)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；獅N—(2—甲基丙基)甘氨酸叔丁基酯}酰胺的制備4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—苯氧基乙酸(1．5g，5mmol)在DMF(6ml)中的溶液用N—(2—甲基丙基)甘氨酸叔丁基酯(936mg，5mmol)、(0—(7—氮雜苯并三唑—1—基)—1，1，3，3—四甲基尿鎓六氟磷酸鹽)(2．28g，6mmol)和二異丙基乙胺(1．9ml，11mmol)處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，混合物在乙酸乙酯和水之間分配，分離出乙酸乙酯層，用1M檸檬酸、飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，真空濃縮得到白色固體。固體在KP—SilO(BiotageUK Ltd．)上用色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫得到偶合產(chǎn)物(1．8g，76％)，白色固體。NMR(100degC，DMSO d6，300 MHz，ppm)8．52(1H，s)，7．73(1H，d)，7．66(1H，s)，7．33(2H，d)7．1(2H，q) 6．92(1H，t)6．84(2H，d)，4．7(2H，寬s)，4．0(2H，寬s)，3．18(2H，d)，2．24(3H，s)，1．88(1H，m)，1．48(9H，s)，0．85—0．96(6H，s寬)。ESPMS(M+NH4)487．5c)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；狽—(2—甲基丙基)甘氨酸的制備根據(jù)實施例1e制備，但使用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；獅N—(2—甲基丙基)甘氨酸叔丁基酯}酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯。
4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；狽—(2—甲基丙基)甘氨酸m／Z414．3(M+H)d)4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?N—(2—甲基丙基)甘氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；狽—(2—甲基丙基)甘氨酸(1．5g，3．6mmol)在二氯甲烷和DMF9∶1v／v(70ml)的混合物中的溶液用3—氨基—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯(根據(jù)WO96／22966中52—55頁所述的方法制備，列為本文參考文獻)(1．6g，7．2mmol)、1—(3—二甲基氨基丙基)—3—乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(2．22g，7．2mmol)／HOBT(972mg，7．2mmol)和二異丙基乙胺(1．3ml，7．2mmol)處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，混合物在乙酸乙酯和水之間分配，分離出乙酸乙酯層，用1M檸檬酸、飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，真空濃縮得到半透明膠狀物。膠狀物在KP—SilO(Biotage UK Ltd．)上用色譜法純化，用甲苯／乙酸乙酯洗脫得到偶合產(chǎn)物(1．3g，58％)，白色固體。
4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?N—(2—甲基丙基)甘氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺NMR(DMSO d6，300 MHz，ppm)0．73—0．93(6H，m)，1．75—1．83(1H，m)，2．21(3H，s)，2．75(2H，t)，3．0—3．2(2H，m)，3．52(3H，s)，3．82(2H，d)，4．70(2H，d)，5．18(1H，m)，5．95(2H，s)，6．7—6．9(6H，m)，7．0—7．1(2H，q)，7．3(2H，d)，7．8(2H，d)，8．24—8．67(1h，dd)，8．79(1H，d)．m／Z 619．4(M+H)。
實施例66 4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?2—(2—甲氧基乙基)甘氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例54的方法，用實施例546中的2—(2—甲氧基乙基)甘氨酸甲酯代替N—(2—甲基丙基)甘氨酸叔丁基酯。2—(2—甲氧基乙基)甘氨酸甲酯通過EP618221中所述的方法制備，如實施例1中所述用LiOH水解實施例54c中的取代的甘氨酸酯。
實施例67—4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是用4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—氨基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺，在1c中用4—硝基—3—甲氧基苯酚代替4—硝基苯酚。
a)4—硝基—3—甲氧基苯酚將氫氧化鈉溶液在室溫下加入4—氟—2—甲氧基硝基苯(11．1g)在DMSO(60ml)中的攪拌溶液中，混合物在85℃下攪拌2．5小時。冷卻的溶液用水(100ml)稀釋，用乙醚(3×100ml)提取，合并的乙醚溶液用2N氫氧化鈉(3×75ml)提取，合并的水相通過加入2N鹽酸調節(jié)至pH2。收集沉淀的固體，用水洗滌。用五氧化二磷干燥產(chǎn)物，得到7．4g。m／Z170．1(M+H)它無需進一步純化用于下一步驟(參見實施例1c)。
實施例69 4—(N’—(吡啶—3—基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是用4—(N’—(吡啶—3—基)脲)—苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙?；?蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺。
a)4—(N’—(吡啶—3—基)脲)—苯氧基乙酰基(甲基亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸)酰胺的制備將3—吡啶基異氰酸酯(75mg，0．62mmol)在室溫下加入4—氨基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯)酰胺(參見實施例30b)(280mg，0．58mmol)在雨水乙酸乙酯中的攪拌溶液中。將混合物回流加熱2小時，通過過濾收集產(chǎn)物，得到200mg。(56％)1H NMR(DMSOd6，300 MHz，ppm)0．78(6H，t)；1．39(3H，m)；2．73(2H，q)；3．52(3H，s)；4．37(1H，m)；4．47(2H，s)；5．11(1H，q)；5．96(2H，s)；6．72(1H，d)；6．81(1H，d)；6．87(3H，d)；7．26—7．38(3H，m)；7．92(2H，m)；8．15(1H，d)；8．45(1H，d)；8．60(2H，d)；8．76(1H，s)；ESPMS 606．4(M+H)+實施例71 7—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2，3—二氫苯并呋喃—4—氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺的制備根據(jù)實施例1的方法，只是在1e中用7—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2，3—二氫苯并呋喃—4—氧基乙酸叔丁基酯代替4—(N’—(2—甲基苯基)脲)苯氧基乙酸叔丁基酯，在1f中用亮氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯代替蛋氨酸—3—氨基—3—(3，4—亞甲二氧基苯基)丙酸甲酯。
a)4—羥基—二氫苯并呋喃的制備在室溫下將在含有30％Pd／C(0．2g)的冰醋酸(30ml)中的4—羥基苯并呋喃(2．0g)(根據(jù)G．Keen & P．Maddocks Syn．Comm．，16(13)，1635—1640(1986))的迅速攪拌的溶液暴露于氫氣氣氛中。當氫氣攝入停止時，過濾溶液，濾餅用冰醋酸洗滌。合并的濾液蒸發(fā)至干得到4—羥基—二氫苯并呋喃(2．05g)。1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)3．0(2H，t)，4．5(2H，t)，6．2(1H．d)，6．3(1H，d)，6．8(1H，t)，9．5(1H，b)m／Z135(M—H)。
b)4—羥基，7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯))—2，3—二氫苯并呋喃的制備將三氟磺酸(0．114ml)在—70℃和氬氣中加入4—羥基—二氫苯并呋喃(1．77g)在二氯甲烷(80ml)中的溶液中，隨后加入二(2，2，2—三氯乙基)偶氮二羧酸酯(BTEAD)(6g)?；旌衔镌凇?0℃下攪拌30分鐘，隨后用25％乙酸銨溶液(30ml)驟冷，使其溫熱至室溫，用乙酸乙酯(2次，100ml)提取，合并的有機提取物用飽和鹽水(20ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)、蒸發(fā)和用Biotage 40M體系純化，用5％乙酸乙酯／甲苯純化得到4—羥基，7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯))—2，3—二氫苯并呋喃(4．73g)。
1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)3．0(2H，t)，4．5(2H，t)，4．8(4H，s)，6．2(1H，d)，7．0(1H，d)，9．6(1H，s)，10．75(1H，s)m／Z 515(M—H)。
c)叔丁基—7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯))—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯的制備將溴乙酸叔丁基酯(1．62ml)加入4—羥基，7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯))—2，3—二氫苯并呋喃(1．63g)在含有粉末碳酸鉀(1．63g)的丁—2—酮(50ml)溶液中，混合物在80℃下攪拌過濾。蒸發(fā)混合物至干，隨后溶解在乙酸乙酯(50ml)中，用水(20ml)洗滌，水相再次用乙酸乙酯(20ml)提取，合并的有機提取物用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)和飽和鹽水(20ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)得到叔丁基—7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯))—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯(5．4g)m／Z266(M+H)，無需進一步純化，用于下一步驟。
d)叔丁基—7—氨基—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯的制備在氬氣氣氛下將鋅粉(2g)加入叔丁基—7—(肼1，2—二羧酸二(2，2，2—三氯乙酯)—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯(2g)在冰醋酸(20ml)中的攪拌溶液中。1小時后，加入氫氧化鈉(70ml)，混合物用乙酸乙酯(3次，100ml)提取，干燥(硫酸鎂)。蒸發(fā)和在40S Biotage體系中色譜純化，用10％乙酸乙酯／甲苯洗脫得到叔丁基—7—氨基—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯，淺黃色固體(341mg)。1H NMR(CDCl3，300 MHz，ppm)1．5(9H，s)，3．2(2H，t)，4．4(2H，s)，4．6(2H，t)，6．1(1H，d)，6．5(1H，d)m／Z 266(M+H)。
e)7—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2，3—二氫苯并呋喃—4—氧基乙酸叔丁基酯的制備在氬氣氣氛和室溫下將未稀釋的2—甲基苯基異氰酸酯(171mg，160μl)在2分鐘內加入叔丁基—7—氨基—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙酸酯(341mg)在二氯甲烷(5ml)中的攪拌溶液中?；旌衔飻嚢?8小時，隨后蒸發(fā)。殘余物用乙醚磨碎，過濾固體。使用產(chǎn)物無需進一步提純。
1H NMR(DMSO—d6，300 MHz，ppm)1．4(9H，s)，2．2(3H，s)，3．2(2H，t)，4．6(2H，s)，4．7(2H，t)，6．3(1H，d)，6．9(1H，t)7．1(1H，t)7．7(1H，d)7．8(1H，d)8．2(1H，s)8．4(1H，s)。
實施例77藥物組合物本發(fā)明的化合物可與例如乳糖Ph．Eur、Croscarmellose鈉、玉米淀粉漿(5％w／v漿)和硬脂酸鎂一起配制片劑用于人的治療或預防用途。
體外和體內試驗采用如下縮寫，如下列出物質的合適來源。
MOLT—4細胞—人體T—成淋巴細胞的白細胞(European Collection ofAnimal Cell Cultures，Proton Down)纖維結合素—根據(jù)在E．Nengvall，E．Ruoslahti，Int．J．Cancer，1977，20，1—5頁和J．Forsyth等的Mehtods in Enzymology，1992，215，311—316頁中描述的方法由人體血漿通過明膠—瓊脂糖親和力色譜法純化。
RPMI 1640—細胞培養(yǎng)介質(Life technologies，Paisley UK)。
PBS—Dulbecco’s磷酸鹽緩沖鹽水(Life technologies)BSA—牛血清白蛋白，餾分V(ICN，Thame，UK)CFA—Complete Freund’s Adjuvant(Life technologies)在如下試驗和模型中，所涉及的化合物是本發(fā)明的式(Ⅱ)、(Ⅲ)和(Ⅳ)化合物。
1．1體外試驗1．1．1MOLT—4細胞／纖維結合素粘連試驗MOLT—4細胞／纖維結合素粘連試驗用于研究在MOLT—4細胞膜上表達的整合素α4β1與纖維結合素的相互作用。聚苯乙烯96孔板在4℃用纖維結合素，在PBS中的100μl，20μg／ml涂覆過夜。通過加入100μlBSA，20mg／ml阻斷非特異粘連，在室溫下培養(yǎng)1小時后，抽吸溶液。在每個孔中加入懸浮在無血清RPMI—1640介質中的MOLT—4細胞，2E6細胞／ml(50μl)和在相同介質(50μl)中稀釋的化合物的溶液。在37℃和5％(v／v)CO2潮濕氣氛中培養(yǎng)2小時后，通過緩慢搖晃隨后真空抽吸除去非粘連細胞。粘連細胞通過比色酸磷酸酶試驗定量。在每個孔中加入在含有1％Triton X—100的pH5．0的50mM乙酸鈉緩沖液中的100μl對—硝基苯基磷酸酯(6mg／ml)。在37℃下培養(yǎng)1小時后，在每個孔中加入50μl氫氧化鈉，用微滴板分光光度計測量在405nm的吸光度。抑制粘連的化合物得到較低的吸光度讀數(shù)。標準、對照和試驗條件試驗三次，抑制百分數(shù)根據(jù)在每個孔中總(無抑制劑)和非特異抑制(無纖維結合素)標準計算。
1．2體內炎性模型化合物的活性可在如下模型中測試。
1．2．1在小鼠中的卵白蛋清延遲型過敏癥Balb／c雌性小鼠(20—25g)用卵白蛋清(2mg／ml)與CFA的1∶1(v／v)乳液脅腹免疫，7天后，小鼠通過在右后足墊subplantar注射在鹽水中的1％熱凝聚的卵白蛋清(30μl)攻擊。在隨后的24小時內發(fā)生足腫脹，測量足墊厚度與對側未注射足的厚度相比較，計算足墊厚度百分數(shù)的增加。通過管飼法給5只一組的小鼠劑量口服化合物，劑量為0．001mg／kg—l00mg／kg。比較載體處理的動物和化合物處理的動物計算炎性響應的抑制。
1．2．2小鼠中膠原誘導的關節(jié)炎DBA／l雄性小鼠用由等體積的在0．05M乙酸中的牛膠原Ⅱ型(2mg／ml)和CFA制備的乳液0．1ml免疫，該混合物在尾根部注射。20天后，通過管飼法劑量口服化合物，劑量為0．001mg／kg／天—100mg／kg／天。在第一次劑量的一天后，每個動物接受0．1ml在0．05M乙酸中的膠原Ⅱ型腹膜內激發(fā)注射。到第28天，判斷小鼠所有四肢關節(jié)炎的發(fā)病率和嚴重程度。關節(jié)炎的抑制通過比較載體處理的和化合物處理的小鼠計算。
表1
方法A1是經(jīng)對氨基苯氧基乙酸的酯和異氰酸酯(實施例1d)方法A2是經(jīng)對氨基苯氧基乙酸的酯和異氰酸酯，異氰酸酯在溶液中由羧酸和二苯基磷酰基疊氮化物產(chǎn)生(實施例1d)方法B是經(jīng)對對氨基苯氧基乙酸的酯和三光氣，隨后仲胺(類似于實施例30c中描述的方法)方法C1是通過與三光氣，隨后仲胺反應經(jīng)完全N—端胺(實施例30c)方法C2是通過與異氰酸酯反應經(jīng)完全N—端胺(實施例69a)方法K是經(jīng)C—端甲酯的水解(實施例1)方法L是經(jīng)C—端芐酯的水解(實施例23)方法P是經(jīng)BTEAD在富電子苯酚中引入氨基(實施例71b)方法Q是用親核物質替代活性芳基鹵化物(實施例67a)
權利要求
1．式(Ⅱ)化合物
其中R1在對位或間位位置，是
其中R2和R3分別選自氫、硝基、C1—6烷基、C3—6環(huán)烷基、C2—6烯基、C2—6炔基、C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基、C1—6二烷基氨基、C1—6烷基C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氨基、氰基、鹵素、三氟甲基、—CO2R12和—CONR12R13，其中R12和R13分別選自氫或C1—6烷基，或R2和R3和與它們相連的苯基一起形成9或10元二環(huán)體系；R4是C1—4烷基；R5選自氫和C1—4烷基；R6選自C1—6烷基、C1—4烷基(C4—6)環(huán)烷基、C1—6烷基(C1—6)烷氧基、C1—6烷基S(C1—6)烷基、C1—4烷基磺?；?C1—4)烷基，
其中R2是C1—4烷氧基；R3、R5和R10分別是氫；R4是C1—4烷基；R6選自C1—4烷基和C1—4烷基S(C1—6)烷基；R7是選自C2—6烯基和1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基，其選擇性地被至少一個選自C1—4烷氧基、C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基的取代基取代；R8是芳基或雜芳基，每個分別選擇性地被選自C1—6烷基、CH2OH、鹵素和羥基的取代基取代，和R9是氫或C1—4烷基或R8和R9和與它們相連的氮一起形成二氫吲哚基或二氫喹啉基；和m和n是0或1，其條件是n和m不能同時是0或1；或其可藥用的鹽或體內可水解的酯。
3．權利要求2的化合物，其中R2是甲氧基。
4．權利要求l或2的化合物，其中化合物選自4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—苯基脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—氯苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；7—(N’—(2—甲基苯基)脲)—2，3—二氫苯并呋喃基—4—氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—羥基甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—[(2，3—二氫—1H—吲哚—1—基羰基)氨基]—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—氟苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；4—(N’—(2—羥基—6—甲基苯基)脲)—3—甲氧基苯氧基乙?；?亮氨酸—3—氨基(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺；和4—(N’—(2—甲基苯基)脲)—3—異丙氧基苯氧基乙酰基(亮氨酸—3—氨基—(3，4—亞甲二氧基)苯基丙酸)酰胺。
5．式(Ⅳ)化合物
其中R1a在對位或間位位置，是
其中R2a和R3a分別選自氫、硝基、C1—6烷基、C3—6環(huán)烷基、C2—6烯基、C2—6炔基、C1—4烷氧基、C1—6烷基氨基、C1—4烷氧基C1—6烷基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氰基、鹵素、三氟甲基、—CO2R7a和—CONR7aR8a，其中R7a和R8a分別選自氫或C1—6烷基；R4a是選自C1—6烷基，C1—6烷氧基取代的(C1—6)烷基和C1—6烷基S(C1—6)烷基；R5a選自C1—6烷基、C2—6烯基、1，3—苯并二氧戊環(huán)—5—基和選擇性地被至少一個選自C1—4烷氧基、C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基的取代基取代的芳基；R6a是芳基或雜芳基，環(huán)選擇性地被至多兩個取代基取代，取代基可以是相同或不同的，選自C1—6烷基、C1—4烷氧基、C1—4烷氧基C1—6烷基、C1—6烷基氨基C1—6烷基、氰基、鹵素和三氟甲基；Ya是氧或硫；和na是1—4的整數(shù)；或可藥用的鹽或體內可水解的酯。
6．藥物組合物，其含有權利要求1—5的任何一項的化合物或可藥用的鹽和可藥用的的稀釋劑或載體。
7．制備式(Ⅱ)的化合物或其可藥用的鹽或體內可水解的酯的方法，其包括偶合ⅰ)式(Ⅴ)化合物
和式(Ⅵ)化合物NHR5—CHR6—CONH—CHR7—CH2—COOH(Ⅵ)或ⅱ)式(Ⅶ)化合物
和式(Ⅷ)化合物NH2—CHR7—CH2—COOH (Ⅷ)其中L和L1是離去基團和任何官能團被選擇性地保護；和隨后如果需要a)除去任何保護基團；和b)形成可藥用的鹽或體內可水解的酯。
8．在需要治療的哺乳動物中抑制VCAM—1和／或纖維結合素和整合素受體VLA—4相互作用的方法，其包括向所述溫哺乳動物給藥有效量的權利要求1—5的任何一項的化合物、其可藥用的鹽或權利要求6的藥物組合物。
9．權利要求8的方法，用于治療多發(fā)性硬化、類風濕性關節(jié)炎、哮喘、冠狀動脈疾病或牛皮癬。
10．權利要求1—5的任何一項的化合物或其可藥用的鹽在制備用于治療通過VCAM—1和／或纖維結合素和整合素VLA—4之間相互作用傳遞的疾病或癥狀的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(Ⅱ)化合物,其中R
文檔編號C07D405/12GK1278790SQ9881106
公開日2001年1月3日 申請日期1998年11月9日 優(yōu)先權日1997年11月12日
發(fā)明者D·R·布里泰恩, C·約翰斯通 申請人:阿斯特拉曾尼卡英國有限公司