專利名稱：2,3－二芳基－吡唑并[1,5－b]噠嗪衍生物,其制備方法和用作環(huán)氧酶2(cox－2)抑制劑 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及吡唑并[1，5-b]噠嗪衍生物，其制備方法，含有它們的藥物組合物及其醫(yī)藥用途。
最近發(fā)現(xiàn)環(huán)氧酶(COX)以COX-1和COX-2兩種異構(gòu)形式存在。COX-1相應(yīng)于原先確認(rèn)的組成酶，而COX-2能夠迅速而容易地被一些包括促細(xì)胞分裂劑，內(nèi)毒素，荷爾蒙，胞質(zhì)分裂素和生長(zhǎng)因子在內(nèi)的物質(zhì)誘導(dǎo)。由COX作用而生成的前列腺素具有生理和病理作用。一般認(rèn)為COX-1與一些重要的生理功能例如維持胃腸功能的完整和腎臟血流有關(guān)。相反地，誘導(dǎo)形式COX-2被認(rèn)為是與前列腺素的病理作用有關(guān)，即酶的快速誘導(dǎo)以應(yīng)答炎癥物質(zhì)，荷爾蒙，生長(zhǎng)因子和胞質(zhì)分裂素。因此COX-2的選擇性抑制劑具有消炎，解熱和鎮(zhèn)痛作用，沒(méi)有與抑制COX-1相關(guān)的潛在的副作用?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一組新化合物，它們?yōu)镃OX-2的有效的選擇性抑制劑。
因此，本發(fā)明提供了式(I)化合物及其可藥用的衍生物
其中R0為鹵素，C1-6烷基，C1-6烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，或O(CH2)nNR4R5；R1和R2各選自H，C1-6烷基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6羥烷基，SC1-6烷基，C(O)H，C(O)C1-6烷基，C1-6烷基磺?；?，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，O(CH2)nCO2C1-6烷基，O(CH2)nSC1-6烷基，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSC1-6烷基或C(O)NR4R5；條件是，當(dāng)R0在4位且為鹵素時(shí)，R1和R2中至少有一個(gè)為C1-6烷基磺酰基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，O(CH2)nCO2C1-6烷基，O(CH2)nSC1-6烷基，(CH2)nNR4R5或(CH2)nSC1-6烷基，C(O)NR4R5；R3為C1-6烷基或NH2；R4和R5各獨(dú)立地選自H，或C1-6烷基，或與所連的氮原子一起形成4-8元飽和環(huán)；和n為1-4。
可藥用的衍生物是指式(I)化合物的可藥用鹽，溶劑化物或酯，或該酯的鹽或溶劑化物，或給患者服用后能夠(直接或間接)提供式(I)化合物或其活性代謝物或其殘余物的任何其它化合物。
作為藥用，應(yīng)理解上述鹽是生理上可接受的鹽，但其它鹽也可用于例如制備式(I)化合物及其生理可接受的鹽。
適宜的式(I)化合物的可藥用鹽包括與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸形成的酸加成鹽，優(yōu)選無(wú)機(jī)酸的，例如鹽酸鹽，氫溴酸鹽和硫酸鹽。
術(shù)語(yǔ)鹵素代表氟，氯，溴或碘。
術(shù)語(yǔ)‘烷基’作為基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是指直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基或叔丁基。
優(yōu)選R0在苯環(huán)的3或4位，如在式(I)中所定義。
優(yōu)選R1在噠嗪環(huán)的6位，如在式(I)中所定義。
優(yōu)選R0為F，C1-3烷基，C1-3烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基，或O(CH2)1-3NR4R5。更優(yōu)選的R0為F，C1-3烷氧基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基。
優(yōu)選R1為C1-4烷基磺?；?，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基，O(CH2)1-3CO2C1-4烷基，O(CH2)1-3SC1-4烷基，(CH2)1-3NR4R5，(CH2)1-3SC1-4烷基或C(O)NR4R5或，當(dāng)R0為C1-6烷基，C1-6烷氧基，O(CH2)nNR4R5時(shí)，它也可以是H。更優(yōu)選地R1為C1-4烷基磺?；?，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基或，當(dāng)R0為C1-6烷基，C1-6烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，或O(CH2)nNR4R5時(shí)，它也可以是H。
優(yōu)選R2為H。
優(yōu)選R3為甲基或NH2。
優(yōu)選R4和R5各自獨(dú)立地為C1-3烷基，或與所連的氮原子一起形成5-6元飽和環(huán)。
優(yōu)選n為1-3，更優(yōu)選1或2。
本發(fā)明提供了一組式(I)化合物(A組)，其中R0為F，C1-3烷基，C1-3烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基，或O(CH2)nNR4R5；R1為C1-4烷基磺?；灰粋€(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基，O(CH2)nCO2C1-4烷基，O(CH2)nSC1-4烷基，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSC1-4烷基或C(O)NR4R5或，當(dāng)R0為C1-3烷基，C1-3烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基，或O(CH2)nNR4R5時(shí)，它也可以是H；R2為H；R3為甲基或NH2；R4和R5各自獨(dú)立地為C1-3烷基，或與所連的氮原子一起形成5-6元飽和環(huán)；和n為1-3。
A組中提供了另一組化合物(A1組)，其中R0為F，甲基，C1-2烷氧基，OCHF2；或O(CH2)nNR4R5；R1為甲基磺酰基，OCHF2，O(CH2)nCO2C1-4烷基，O(CH2)nSCH3，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSCH3或C(O)NR4R5或，當(dāng)R0為甲基，C1-2烷氧基，OCHF2，或O(CH2)nN(CH3)2時(shí)，它也可以是H；R2為H；R3為甲基或NH2；R4和R5均為甲基或，與所連的氮原子一起形成5-6元飽和環(huán)；和n為1-2。
A組中提供了另一組化合物(A2組)，其中R0為F，C1-3烷氧基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基；R1為C1-4烷基磺?；?，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基或，當(dāng)R0為C1-3烷氧基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基時(shí)，它也可以是H；R2為H；和R3為甲基或NH2。
A，A1和A2組中，R0優(yōu)選在苯環(huán)的3位或4位和R2優(yōu)選在噠嗪環(huán)的6位。
應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括式(I)化合物的所有異構(gòu)體和它們的可藥用的衍生物，包括所有的幾何異構(gòu)體，互變異構(gòu)體和光學(xué)形式及它們的混合物(例如外消旋混合物)。
特別優(yōu)選的本發(fā)明的化合物是3-(4-甲基磺?；?苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；6-二氟甲氧基-2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；2-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；2-(4-氟-苯基)-6-甲基磺酰基-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；2-(4-二氟甲氧基-苯基)-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；4-[2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-基]-苯磺酰胺；6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；及其可藥用的衍生物。
本發(fā)明的化合物是有效的、選擇性的COX-2抑制劑。該活性可由它們相對(duì)于COX-1對(duì)COX-2選擇性抑制來(lái)說(shuō)明。
由于它們選擇性的COX-2抑制活性，本發(fā)明的化合物可用于人用藥和獸藥，特別是治療多種疾病的疼痛(慢性和急性)，發(fā)熱和炎癥。這些疾病是本領(lǐng)域已知的，包括風(fēng)濕熱；與流感或其它病毒感染如感冒有關(guān)的癥狀；下背和脖子痛；頭痛；牙痛；扭傷和拉傷；肌炎；神經(jīng)痛；滑膜炎；關(guān)節(jié)炎，包括風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；變性關(guān)節(jié)病，包括骨關(guān)節(jié)炎；痛風(fēng)和關(guān)節(jié)僵硬脊椎炎；腱炎；滑囊炎；皮膚病，例如牛皮癬，濕疹，灼傷和皮炎；損傷，如運(yùn)動(dòng)損傷及外科和牙科治療引起的損傷。
本發(fā)明的化合物也可用于治療其它可通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的(mediated)疾病。
例如，本發(fā)明的化合物可抑制細(xì)胞和瘤轉(zhuǎn)化和異位腫瘤的生長(zhǎng)，因此可用于治療某些癌癥如結(jié)腸癌。
本發(fā)明的化合物也可防止由于抑制神經(jīng)游離基的生成(并因此氧化應(yīng)力)而造成的神經(jīng)損傷，因此可用于治療中風(fēng)；癲癇；和癲癇發(fā)作(包括大發(fā)作，小發(fā)作，肌陣攣癲癇和部分發(fā)作)。
本發(fā)明的化合物也抑制前列腺素(prostanoid)誘導(dǎo)的平滑肌收縮，因此可用于治療痛經(jīng)和早產(chǎn)。
本發(fā)明的化合物抑制炎癥過(guò)程，因此可用于治療哮喘，過(guò)敏性鼻炎和呼吸困難綜合癥；胃腸道疾病如腸炎，節(jié)段性回腸炎，胃炎，過(guò)敏性腸道綜合癥和潰瘍性腸炎；和下列疾病中的炎癥，如脈管炎，偏頭痛，結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周炎，甲狀腺炎，再生障礙性貧血，Hodgkin氏病，sclerodoma，I型糖尿病，重癥肌無(wú)力，多發(fā)性硬化癥，sorcoidosis，腎病綜合癥，Bechet氏綜合癥，多發(fā)性肌炎，齒齦炎，結(jié)膜炎和心肌缺血。
本發(fā)明的化合物也可用于治療眼科疾病例如視網(wǎng)膜炎，視網(wǎng)膜病，對(duì)眼組織急性傷害造成的眼色素層炎。
本發(fā)明的化合物也可用于治療認(rèn)知紊亂例如癡呆，特別是退化性癡呆(包括老年癡呆，Alzheimer氏病，Pick氏病，Huntington氏舞蹈病，帕金森病和Creutzfeldt-Jakob病)，和血管性癡呆(包括多梗塞癡呆)，以及與顱內(nèi)空間占有損害、外傷、感染和相關(guān)疾病(包括HIV感染)、代謝、毒素、缺氧癥和維生素缺乏癥有關(guān)的癡呆；及與年齡、特別是與年齡相關(guān)的記憶損害有關(guān)的溫和認(rèn)知損害。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種用于人藥或獸藥的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種用于治療通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的疾病的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種治療患有可通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的人或動(dòng)物疾病的方法，該方法包含給所述患者施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了用于制備治療可通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的疾病如炎癥的治療劑的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種治療患有炎癥的人或動(dòng)物的方法，該方法包含給所述受體施用有效量的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
應(yīng)當(dāng)理解，除非另外明確指明，所提及的治療包括已確認(rèn)疾病的治療和預(yù)防性治療。
要意識(shí)到本發(fā)明的化合物可有利地與一種或多種其它治療劑一起使用，適宜的輔助治療劑的例子包括止痛藥如甘氨酸拮抗劑，鈉通道抑制劑(如拉莫三嗪)，P物質(zhì)拮抗劑(如NK1拮抗劑)，乙酰氨基酚或非那西汀；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；氮氧化物合成酶(NOS)抑制劑(如iNOS或nNOS抑制劑)；腫瘤壞死因子α釋放或作用抑制劑；抗體治療(例如單克隆抗體治療)；興奮劑，包括咖啡因；H2拮抗劑，如雷尼替??；質(zhì)子泵抑制劑，如奧美拉唑；解酸劑，如氫氧化鋁或氫氧化鎂；排氣劑，如消泡凈；減充血?jiǎng)?，如苯福林，苯丙醇胺，右旋麻黃堿，羥間唑啉，腎上腺素，鼻眼凈，丁芐唑啉，環(huán)己丙甲胺，或左旋去氧麻黃堿；鎮(zhèn)咳藥，如可待因，二氫可待因酮，carmiphen，咳必清，或右旋甲嗎喃；利尿劑；或鎮(zhèn)靜或非鎮(zhèn)靜抗組胺劑。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括式(I)化合物或其可藥用的衍生物與一種或多種治療劑的聯(lián)合使用。
式(I)化合物或其可藥用的衍生物可以方便地以藥物組合物的形式服用。因而，本發(fā)明的另一方面提供了一種含有式(I)化合物或其可藥用的衍生物的用于人藥或獸藥的藥物組合物。該組合物可方便地按常規(guī)方法與一種或多種生理上可接受的載體或賦形劑混合給出。
式(I)化合物及其可藥用的衍生物可以任何適宜的方式給藥。例如可以局部給藥或吸入給藥，或更優(yōu)選地口服，透皮或非腸道給藥。藥物組合物可以是這種形式，即控制釋放式(I)化合物及其可藥用的衍生物。
為了口服，藥物組合物可以按慣例與可接受的賦形劑制成下列形式，例如片劑(包括舌下片劑)，膠囊，粉末，溶液，糖漿或懸浮液。
為透皮給藥，藥物組合物可以以透皮斑貼片形式存在，例如透皮離子電滲療法貼片。
為非腸道給藥，藥物組合物可以是注射劑或輸液(例如靜脈，血管內(nèi)或皮下)。組合物可以是油或水賦形劑中的懸浮液、溶液或乳劑，可含有配制劑，例如懸浮劑，穩(wěn)定劑和/或分散劑。為了注射給藥，可以是單位劑量制劑或最好是加有防腐劑的多劑量制劑。
或者非腸道給藥時(shí)，活性成分可以是與適宜賦形劑重組的粉末。
本發(fā)明的化合物也可制成儲(chǔ)存(depot)制劑。該長(zhǎng)效制劑可植入給藥(例如皮下或肌肉內(nèi))或肌肉注射。因此，本發(fā)明的化合物可以例如用適宜的聚合或疏水物質(zhì)(例如可接受的油中的乳劑)或離子交換樹(shù)脂配制，或作為微溶衍生物如微溶鹽。
如上所述，本發(fā)明的化合物也可與其它治療劑聯(lián)合使用。因而本發(fā)明另一方面提供了一種含有式(I)化合物或其可藥用的衍生物與另一種治療劑的聯(lián)合體。
上述聯(lián)合體可以是常規(guī)使用的藥物配方，該藥物配方含有上述結(jié)合體和藥用載體或賦形劑，這是本發(fā)明的另一方面。該聯(lián)合體中的各組分可以順序或同時(shí)以分開(kāi)的或結(jié)合的藥物制劑給藥。
當(dāng)式(I)化合物或其可藥用的衍生物與對(duì)同種疾病有效的第二種治療劑聯(lián)合使用時(shí)，各化合物的劑量可以不同于其單獨(dú)使用時(shí)的劑量。適宜的劑量是很容易被本領(lǐng)域技術(shù)人員了解的。
用于人類治療時(shí)，式(I)化合物的推薦日劑量為0.01mg/kg-500mg/kg，例如0.05mg/kg-100mg/kg，如0.1mg/kg-50mg/kg，可方便地分成1-4次的劑量給藥。具體劑量取決于病人的年齡及病情和給藥途徑。因而，例如0.25mg/kg-10mg/kg的劑量適于全身給藥。
式(I)化合物及其可藥用的衍生物可用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的制備類似結(jié)構(gòu)的化合物的方法進(jìn)行制備。
以下將描述制備式(I)化合物及其可藥用的衍生物的適宜方法。除非另外指明，式中R0-R5和n的定義與式(I)中相同；Hal為鹵素，如Br或I；X-為抗衡離子，如I-；烷基的定義同前。
因而，按照第一種方法(A)，式(I)化合物可通過(guò)式(II)化合物或其被保護(hù)的衍生物與式(III)的硼酸或其適宜的衍生物在適宜的過(guò)渡金屬催化劑存在下反應(yīng)進(jìn)行制備
適宜的式(III)衍生物包括硼酸酯，例如R.Miyaura等在J.Org.Chem.，1995，60，7508-7510中所述的硼酸酯。反應(yīng)可方便地在溶劑例如醚(例如1，2-二甲氧基乙烷)中，在堿例如無(wú)機(jī)堿(例如碳酸鈉)的存在下，用鈀催化劑例如四(三苯基膦)鈀(O)進(jìn)行。
按照另一種方法(B)，其中R3為C1-6烷基的式(I)化合物可在常規(guī)條件下，通過(guò)氧化式(IV)化合物或其被保護(hù)的衍生物進(jìn)行制備
該氧化反應(yīng)在溶劑例如含水醇(例如含水甲醇)中在-78℃至室溫下，用單過(guò)硫酸鹽化合物例如過(guò)一硫酸鉀(叫作OxoneTM)方便地進(jìn)行。
按照另一種方法(C)，其中R1為C1-6烷基磺?；氖?I)化合物可通過(guò)式(V)化合物或其被保護(hù)的衍生物在常規(guī)條件下氧化進(jìn)行制備。按上述對(duì)(B)法所述方法方便地進(jìn)行氧化。
按照另一種方法(D)，其中R1為被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基的式(I)化合物可通過(guò)式(VI)的醇或其被保護(hù)的衍生物與鹵代氟烷烴在常規(guī)條件下反應(yīng)進(jìn)行制備。
該反應(yīng)方便地在溶劑例如極性溶劑(例如N，N-二甲基甲酰胺)中，在強(qiáng)堿例如無(wú)機(jī)氫化物(如氫化鈉)存在下，在約室溫下用適宜的溴代氟烷進(jìn)行，生成所需的式(I)化合物。
按照另一種方法(E)，可用其它式(I)化合物作前體，通過(guò)相互轉(zhuǎn)化制備式(I)化合物。下列步驟用來(lái)舉例說(shuō)明適宜的相互轉(zhuǎn)化。
其中R1或R2代表被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷基的式(I)化合物可通過(guò)其中R1或R2為C1-6羥烷基，C(O)H或C(O)C1-6烷基的式(I)化合物與適宜的氟源反應(yīng)進(jìn)行制備。適宜的氟源包括，例如二乙氨基硫三氟化物。該反應(yīng)在溶劑例如鹵代烴(例如二氯甲烷)存在下，在低溫例如-78℃進(jìn)行。
其中R1或R2代表C(O)H的式(I)化合物可由其中R1或R2代表CH2OH的相應(yīng)的式(I)化合物氧化進(jìn)行制備。適宜的氧化劑包括，例如，氧化鎂(IV)。該氧化可方便地在溶劑，例如鹵代烴(例如氯仿)存在下，在升高的溫度(如回流)進(jìn)行。
其中R1或R2代表C1-6羥烷基，且其中羥基與連接噠嗪環(huán)的碳原子相連的式(I)化合物可通過(guò)其中R1或R2代表相應(yīng)的醛或酮的式(I)化合物還原進(jìn)行制備。適宜的還原劑包括氫化物還原劑，例如二異丁基鋁氫化物。該還原可方便地在溶劑，例如鹵代烴(例如二氯甲烷)存在下，在低溫例如-78℃進(jìn)行。
正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，在合成式(I)化合物的任何階段有必要或需要保護(hù)分子中的一個(gè)或多個(gè)敏感基團(tuán)，以防止不需要的副反應(yīng)。
因而，制備式(I)化合物的另一種方法(F)包含被保護(hù)的式(I)化合物的脫保護(hù)。
用于制備式(I)化合物的保護(hù)基可以常規(guī)方法使用。參見(jiàn)例如，Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts在‘Protective Groupsin Organic Synthesis’ Second Edition(John Wiley and Sons，1991)中所述的方法，其中也描述了除去這些保護(hù)基的方法。
式(II)化合物可通過(guò)式(VII)化合物的常規(guī)鹵化進(jìn)行制備。
因而，式(VI)的酯先水解成相應(yīng)的酸，例如用強(qiáng)堿(如氫氧化鈉)在溶劑(例如乙醇)存在下在較高溫度下反應(yīng)。然后將相應(yīng)的酸用鹵化劑方便地在室溫在溶劑(例如氯化烴)中反應(yīng)，在此條件下，酸將進(jìn)行鹵化和脫羧反應(yīng)。方便地，鹵化劑為溴化劑，例如在強(qiáng)酸存在下用溴(如氫溴酸溶于乙酸)或N-溴代琥珀酰亞胺，生成相應(yīng)的其中Hal為溴的式(II)化合物。
式(VII)的酯可通過(guò)式(VIII)化合物與式(IX)的氨基噠嗪鎓配合物在常規(guī)條件下反應(yīng)進(jìn)行制備。
該反應(yīng)方便地在室溫下，在堿如碳酸鉀存在下，在溶劑如N，N-二甲基甲酰胺中進(jìn)行。
式(III)的硼酸是已知物或可用文獻(xiàn)例如EPA出版物No.533268中所述方法制備。
式(IV)，(V)和(VI)化合物可從式(II)化合物開(kāi)始，用類似于制備式(I)化合物的方法進(jìn)行制備。
式(VIII)化合物是已知化合物或可用文獻(xiàn)例如D H Wadsworth等在J.Org.Chem，(1987)，52(16)，3662-8和J.Morris和D.G.Wishka，Synthesis(1994)，(1)，43-6中所述方法進(jìn)行制備。
式(IX)化合物是已知化合物或可用文獻(xiàn)例如Y Kobayashi等在Chem Pharm Bull，(1971)，19(10)，2106-15；T.Tsuchiya，J.Kurita和K.Takayama.Chem.Pharm.Bull，28(9)2676-2681(1980)和K Novitskii等在Khim Geterotskil Soedin，1970 2，57-62中所述方法進(jìn)行制備。
上述某些中間體是新化合物，應(yīng)當(dāng)理解，所有這些新中間體在此構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。式(II)化合物是關(guān)鍵中間體，代表本發(fā)明的特殊方面。
在進(jìn)行后處理之后本發(fā)明的化合物可以游離堿的形式被方便地分離出來(lái)?？捎贸Ｒ?guī)方法制備本發(fā)明化合物的可藥用酸加成鹽。
在上述方法之一的后處理過(guò)程中可形成本發(fā)明化合物的溶劑化物(如水合物)。
下列實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明但不限制本發(fā)明。所有溫度為℃。用Merck 9385硅膠進(jìn)行閃式柱層析。在硅膠板上進(jìn)行薄層層析(Tlc)。在Brucker 250MHz光譜儀上測(cè)定NMR?；瘜W(xué)位移是以四甲基硅作內(nèi)標(biāo)，單位為δppm。使用下列縮寫Me＝甲基，s＝單峰，d＝雙重峰，t＝三重峰，m＝多重峰。
實(shí)施例16-二氟甲氧基-2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲基磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(i)6-甲氧基-2-(4-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯將1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(3.39ml)加到3-(4-氟苯基)-丙-2-酸甲酯(3.36g)和1-氨基-3-甲氧基-噠嗪-1-鎓磺酸鹽1(6.1419g)溶于乙腈(125ml)的混合物中，將混合物在室溫下攪拌48小時(shí)。開(kāi)始2小時(shí)時(shí)向反應(yīng)液中通入空氣。將混合物真空濃縮，溶于乙酸乙酯(150ml)，用水洗滌(3×25ml)，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)，生成標(biāo)題化合物，為棕色固體(4.77g)。
1H NMR(CDCl3)8.4(d，1H，J＝10Hz) 7.85-7.90(m，2H) 7.1-7.2(m，2H)6.9-7.0(d，1H，J＝10Hz) 4.1(s，3H) 3.9(s，3H)MH+302參考1T.Tsuchiya，J.Kurita and K.Takayama，Chem.Pharm.Bull.28(9)2676-2681(1980).
(ii)6-甲氧基-2-(4-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸將6-甲氧基-2-(4-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯(4.469g)，2N氫氧化鈉(50ml)和甲醇(90ml)的混合物加熱回流2小時(shí)。向冷卻的溶液中加入2N鹽酸(200ml)，過(guò)濾分離出標(biāo)題化合物，為米色固體(3.639g)。
1H NMR(DMSO-d6)12.8(br.s，1H)8.4(d，1H，J＝10Hz) 7.8-7.9(m，2H) 7.21-7.32(m，2H) 7.15-7.2(d，1H，J＝10Hz) 4.0(s，3H)MH+288(iii)2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪6-甲氧基-2-(4-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸(869mg)和碳酸氫鈉(756mg)溶于二甲基甲酰胺(10ml)的混合物與N-溴代琥珀酰亞胺(587mg)反應(yīng)，室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后將其加到水(50ml)中，用乙酸乙酯(3×50ml)提取，干燥(MgSO4)，真空蒸發(fā)。所得棕色固體(1.612g)溶于1，2-二甲氧基乙烷(20ml)。加入2N碳酸鈉水溶液(10ml)和4-(甲磺?；?苯基硼酸(660mg)和四(三苯基膦)鈀(O)(100mg)，將混合物加熱回流20小時(shí)。將反應(yīng)物傾入水(50ml)中，用二氯甲烷(3×100ml)提取。合并有機(jī)提取液，干燥(MgSO4)，真空蒸發(fā)，生成棕色固體(1.116g)，用閃式硅膠柱層析純化，以環(huán)己烷/乙酸乙酯洗脫(4∶1然后2∶1)，生成標(biāo)題化合物，為黃色固體(390mg)。
Tlc，SiO2，Rf0.3(1∶1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，UV檢測(cè)。
MH+398(iv)2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-6-酚在密閉容器(ReactivialTM)中將2-(4-氟-苯基)-3-(4-(甲磺?；?苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪(321mg)與鹽酸吡啶(1.4g)的混合物加熱至200℃反應(yīng)3小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)液傾入水(20ml)中，用乙酸乙酯(3×30ml)提取。合并有機(jī)提取液，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)，得到固體，用乙醚研磨，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(119mg)。
Tlc，SiO2，Rf 0.07(1∶2環(huán)己烷/乙酸乙酯)，UV檢測(cè)。
MH+384(v)6-二氟甲氧基-2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪將2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-6-酚(0.2g)溶于無(wú)水二甲基甲酰胺(5ml)的溶液用氫化鈉(0.046g，60％的礦物油分散液)處理，氣泡停止放出后，于室溫下向混合物中通入溴代二氟甲烷氣體30分鐘。然后將反應(yīng)混合物傾入水(50ml)中，用乙酸乙酯(50ml)提取，用水(3×50ml)洗滌有機(jī)提取液，干燥，真空濃縮。將殘余物層析純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.17g)。MH+＝4341HNMR(CDCl3)δ8.05-8.0(d，J＝10HZ，2H) 8.0-7.95(d，J＝10HZ，1H) 7.6-7.5(m，4H) 7.8-7.2(t，J＝70HZ，1H) 7.1-7.05(t，J＝11HZ，2H) 6.9-6.85(d，J＝10HZ，1H) 3.15(s，3H)Tlc，SiO2，Rf 0.35(乙酸乙酯/環(huán)己烷(1/1))實(shí)施例23-(4-甲磺?；?苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(i)2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-羧酸甲酯氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(22.76ml，2eq)滴加到3-(4-甲氧基-苯基)-丙-2-酸甲酯1(14.46g，76mM)和1-氨基噠嗪鎓碘化物2(2eq)溶于乙腈的溶液中，攪拌6小時(shí)。硅膠層析純化，用甲苯洗脫，然后用甲苯∶乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(2.76g)，為棕色固體。
MH+2841H NMR(CDCl3)δ3.87(3H，s) 3.9(3H，s) 7.0(2H，d，J＝9Hz) 7.25(1H，dd，J＝9& 4Hz) 7.90(2H，d，J＝9Hz) 8.45(1H，dd，J＝4 & 2Hz) 8.55(1H，dd，J＝9 & 2Hz)參考1JMorris and D.G.Wishka，Synthesis(1994)，(1)，43-6參考2Kobayashi et al Chem.Pharm.Bull(1971)，19(10)，2106-15(ii)3-(4-甲磺?；?苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯(2.76g)和氫氧化鈉水溶液(2N，30ml)溶于乙醇(30ml)的混合物回流反應(yīng)2小時(shí)。用鹽酸(2N)將冷卻的混合物酸化，過(guò)濾分離出所得白色固體(2.53g)。將該固體溶于DMF，加入碳酸氫鈉(2.67g，3.3eq)，然后分批加入N-溴代琥珀酰亞胺(1.88g，1.1eq)。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌1小時(shí)后，加水，用乙酸乙酯(2×25ml)提取。將干燥后的有機(jī)層濃縮，殘余物溶于DME(60ml)。加入碳酸鈉水溶液(2N，15ml)，然后加入4-甲磺?；?苯基硼酸(3.12g)和四(三苯基膦)鈀(O)(250mg)。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將混合物加熱回流反應(yīng)18小時(shí)，冷卻，傾入水中，用乙酸乙酯(2×25ml)提取。合并有機(jī)層，干燥，濃縮到硅膠上。用硅膠層析，以甲苯∶乙酸乙酯(8∶1)洗脫，濃縮后得到標(biāo)題化合物(3.58g)，為奶油色固體。MH+3801H NMR(DMSO)δ3.25(3H，s) 3.75(3H，s) 6.95(2H，d，J＝8.5Hz) 7.25(1H，dd，J＝9 & 5Hz) 7.45(2H，d，J＝8.5Hz) 7.60(2H，d，J＝8Hz) 7.9(2H，d，J＝8.5Hz) 8.15(1H，dd，J＝9 & 2Hz) 8.49(1H，dd，J＝5 & 2Hz)實(shí)施例32-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(i)4-[3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-2-基]-苯酚-70℃下，將三溴化硼(溶于CH2Cl2的1M溶液，2.1eq)加到3-(4-甲磺?；?苯基)-2-(4-甲氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(3.58g)溶于CH2Cl2的溶液。將混合物攪拌10分鐘，然后加熱至0℃，于0℃攪拌過(guò)夜。用碳酸鉀堿化反應(yīng)混合物，然后用鹽酸(2M)酸化，傾入水中，用CH2Cl2提取。干燥有機(jī)層，過(guò)濾，濃縮，得到標(biāo)題化合物(1.87g)，為黃色固體。MH+3661H.NMR(DMSO)δ3.30(3H，s) 6.80(2H，d，J＝8.5Hz) 7.30(1H，dd，J＝9 &5Hz) 7.35(2H，d，J＝8.5Hz) 7.60(2H，d，J＝8Hz) 8.0(2H，d，J＝8.5Hz) 8.20(1H，dd，J＝9 & 2Hz) 8.55(1H，dd，J＝5 & 2Hz) 9.75(1H，s)(ii)2-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將4-[3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-2-基]-苯酚(663mg，1.82eq)，碘乙烷(1eq)和碳酸鉀(2eq)溶于乙腈(30ml)的混合物加熱回流18小時(shí)。冷卻后的反應(yīng)混合物在水(30ml)和乙酸乙酯(30ml)中分配。收集有機(jī)層，干燥，層析純化，得到標(biāo)題化合物(547mg)，為奶油色泡沫。MH+3941H NMR(DMSO)δ1.45(3H，t，J＝7Hz) 3.10(3H，s) 4.1(2H，q，J＝7Hz) 6.87(2H，d，J＝9Hz) 7.08(1H，dd，J＝9 & 5Hz) 7.55(4H，t，J＝9Hz) 7.92(1H，dd，J＝9 & 2Hz) 7.95(2H，d，J＝9Hz) 8.20(1H，dd，J＝9 & 2Hz) 8.32(1H，dd，J＝5 & 2Hz)實(shí)施例42-(4-氟-苯基)-6-甲磺?；?3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(i)2-(4-氟-苯基)-6-甲硫烷基-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯攪拌下，在10分鐘內(nèi)將固體叔丁氧羰基-O-基磺?；u胺1(7.8g)分批加到TFA(25ml)中，然后繼續(xù)攪拌20分鐘。將溶液傾入冰(約200ml)，放置至冰全部熔化。過(guò)濾所得白色固體，用水洗滌，溶于DME(100ml)。將溶液用4A分子篩干燥1.5小時(shí)，過(guò)濾，然后加到3-甲硫基-噠嗪2(2.6g)溶于二氯甲烷(35ml)的溶液中，將反應(yīng)液室溫?cái)嚢?0小時(shí)。過(guò)濾分離出中間體鹽，為淺棕色結(jié)晶(3.87g)，懸浮于乙腈(100ml)，加入3-(4-氟-苯基)-丙-2-酸甲酯(2.02g)。滴加1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(2.1ml)，將反應(yīng)液室溫?cái)嚢?0小時(shí)。過(guò)濾所得結(jié)晶沉淀，洗滌，干燥(770mg)。濾液濃縮，得到第二批產(chǎn)物(430mg)。殘余物在水和乙酸乙酯(各100ml)間分配，水層用乙酸乙酯(20ml)提取。合并有機(jī)層，用水、鹽水洗滌，干燥。除去溶劑，得到棕色油，閃式硅膠(300g)層析純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯(3∶1)洗脫，得到另一批產(chǎn)物(247mg)。三批合并，得到標(biāo)題化合物(1.45g)，為淺棕色固體。
MH+3181H NMR(CDCl3)δ2.70(3H，s)，3.88(3H，s) 7.08-7.18(3H，m) 7.84(2H，m)8.31(1H，d，J＝10Hz)參考1K Novitskii et al，Khim Geterotskil Soedin，1970 2，57-62參考2Barlin G.B.，Brown，W.V.，J Chem Soc(1968)，(12)，1435-45(ii)2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-6-甲硫烷基-吡唑并[1，5-b]噠嗪在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將2-(4-氟-苯基)-6-(甲硫基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯(1.45g)，碳酸鉀(690mg)溶于甲醇(40ml)和水(14ml)的混合物攪拌，加熱回流20小時(shí)。除去溶劑，所得固體在乙酸乙酯(50ml)和水(250ml)間分配。將水層酸化至pH1(2M HCl)，過(guò)濾固體(1.0g，MH+304)。將該固體(1.0g)，碳酸氫鈉(557mg)和NBS(594mg)的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)液傾入水(150ml)中，用乙酸乙酯(3×50ml)提取。合并提取液，用水(50ml)、鹽水(20ml)洗滌，干燥，濃縮。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將所得固體(1.015g，MH+338，340)，4-(甲磺酰基)苯基硼酸(902mg)，碳酸鈉(740mg)和四(三苯基膦)鈀(O)(175mg)在DME(30mls)和水(15ml)中攪拌加熱回流48小時(shí)。將反應(yīng)液傾入水中，用乙酸乙酯(3×50ml)提取。合并提取液，干燥，除去溶劑，得到棕色固體。用硅膠(300g)純化，以環(huán)己烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.713g)，為黃色固體。MH+4141H NMRδ(DMSO)2.65(3H，s) 3.28(3H，s) 7.20-7.30(3H，m) 7.55(2H，m)7.62(4H，d，J＝8.5Hz) 7.95-8.05(3H，m)(iii)2-(4-氟-苯基)-6-甲磺?；?3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪將2-(4-氟-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-6-(甲硫基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(60mg，0.145)溶于甲醇(5ml)和水(2ml)的懸浮液與過(guò)硫酸氫鉀(oxone)(196mg，0.32)攪拌20小時(shí)。將所得溶液傾入水(50ml)中，用氯仿(3×20ml)提取。合并提取液，干燥，除去溶劑。殘余物自甲醇中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(60mg)，為白色固體。MH+4461H NMR(DMSO-d6)δ3.34(3H，s) 3.53(3H，s) 7.33(2H，t，J＝9Hz) 7.62(2H，m) 7.68(1H，d，J＝8.5Hz) 8.04(1H，d，J＝10Hz) 8.52(1H，d，J＝9Hz)TLC SiO2己烷∶乙酸乙酯(1∶1) Rf 0.24 UV實(shí)施例52-(4-二氟甲氧基-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪將氫化鈉(48mg，60％的油分散液，1.2mmol)加到4-[3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-2-基]-苯酚(200mg，0.55mmol)溶于無(wú)水二甲基甲酰胺(5ml)的溶液中。向溶液中慢慢通入溴代二氟甲烷氣體20分鐘，然后用CH2Cl2(30ml)稀釋。水層進(jìn)行后處理，然后硅膠層析，用CH2Cl2∶乙酸乙酯(3∶1)洗脫，然后層析，用CH2Cl2∶乙酸乙酯(10∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(63mg，28％)，為白色固體。MH+416NMR(CDCl3)δ8.38(1H，dd，J＝4Hz)，8.01(2H，d，J＝8.5Hz)，7.94(1H，dd，J＝9& 2Hz)，7.65(2H，d，J 8.5Hz)7.57(2H，d，J＝8Hz)，7.10(3H，m)，6.87-6.27(1H，t，J＝7.4Hz) 3.15(3H，s)
實(shí)施例64-[2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-基]-苯磺酰胺(i)2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(1.47ml，2eq)滴加到3-(4-乙氧基-苯基)-丙-2-酸甲酯(1.0g)和1-氨基噠嗪鎓碘化物2(2.19g)溶于乙腈(10ml)的溶液中，攪拌5小時(shí)。濃縮，水層進(jìn)行后處理，得到標(biāo)題化合物(1.2g)，為粘稠棕色固體。
MH+298(ii)2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸將2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯(1.2g)，乙醇(10ml)和2N氫氧化鈉(10ml)的混合物加熱至80℃反應(yīng)1.5小時(shí)。將混合物冷卻，用2N鹽酸酸化至pH 1。過(guò)濾分離出標(biāo)題化合物，為棕色固體(716mg，63％)。
MH+284(iii)2-(4-乙氧基-苯基)-3-碘代-吡唑并[1，5-b]噠嗪將2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸(710mg)，N-碘代琥珀酰亞胺(678mg)和碳酸氫鈉(717mg)溶于DMF(8ml)的混合物攪拌4小時(shí)。然后再加入N-碘代琥珀酰亞胺(100mg)，繼續(xù)攪拌2小時(shí)。水層進(jìn)行后處理，得到深棕色固體，用SPE純化，以二氯甲烷洗脫。得到標(biāo)題化合物，為橙棕色固體(429mg，47％)。
MH+366(iv)4-[2-(4-乙氧基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-基]-苯磺酰胺氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將4-碘代苯磺酰胺(0.311g)，二頻那醇二硼烷1(0.279g)，乙酸鉀(486mg)和[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)氯化物配合物和二氯甲烷(1∶1)(0.45g)溶于二甲基甲酰胺(8ml)的混合物加熱至80℃反應(yīng)2小時(shí)。將冷卻后的反應(yīng)混合物真空濃縮，殘余物懸浮于1，2-二甲氧基乙烷(10ml)，加入2-(4-乙氧基-苯基)-3-碘代-吡唑并[1，5-b]噠嗪(0.4g)，2N碳酸鈉(4ml)和四(三苯基膦)鈀(O)(20mg)，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將混合物加熱回流18小時(shí)。將冷卻后的反應(yīng)混合物傾入水(60ml)中，用乙酸乙酯(3×60ml)提取懸浮液。合并有機(jī)提取液，干燥(Na2SO4)，濃縮。層析純化殘余物，用二氯甲烷/乙酸乙酯(3∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.116g，27％)。MH+395NMR(CDCL3)δ8.32(1H，dd，J＝4 & 2Hz)，7.97(2H，d，J＝8Hz)，7.89(1H，dd，J＝9 & 2Hz)，7.54(4H，m)，7.04(1H，dd，J＝9 & 4Hz)，6.88(2H，d，J＝9Hz)，1.43(3H，t，J＝7Hz)參考1R.Miyaura et al J.Org.Chem.，1995，60，7508-7510.
實(shí)施例76-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(i)1-(2，2-二溴-乙烯基)-3-氟-苯攪拌下，在3分鐘內(nèi)將三苯基膦(77.1g)分批加到冷的(冰/鹽浴，0℃)四溴化碳(48.82g)溶于無(wú)水CH2Cl2(200ml)的溶液中，溫度維持在10℃以下。加到3-氟苯甲醛(7.8ml)之前，將所得橙色懸浮液于0℃攪拌1小時(shí)。加畢，將懸浮液于0℃攪拌1小時(shí)，然后加水(75ml)終止反應(yīng)。分離有機(jī)層，用鹽水(75ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)至干。將殘余膠狀物傾入環(huán)己烷(1L)中，攪拌30分鐘。慢慢倒出有機(jī)層，殘余物用CH2Cl2進(jìn)行后處理，傾入環(huán)己烷(1L)。將該步驟重復(fù)兩次以上，合并有機(jī)層，濃縮至約100ml，使其通過(guò)硅膠。濾液濃縮，得到標(biāo)題化合物，為易流動(dòng)的黃色油(24g，100％)。MH+280，MH-279NMR(CDCl3)δ7.05(1H，tm，J＝9Hz)7.3(3H，m)7.45(1H，s)(ii)(3-氟-苯基)-丙炔酸甲酯攪拌下，在30分鐘內(nèi)向冷至-78℃的1-(2，2-二溴-乙烯基)-3-氟-苯(23.8g)溶于無(wú)水THF(350ml)的溶液中滴加正丁基鋰(2.2eq，1.6M的己烷溶液)。加入氯甲酸甲酯(11.6g，9.5ml)之前，將混合物于-78℃進(jìn)一步攪拌30分鐘，在用1∶1碳酸氫鈉飽和水溶液∶氯化銨(100ml)稀釋前，將所得混合物加熱至0℃反應(yīng)1小時(shí)，用乙醚(2×100ml)提取。合并有機(jī)提取液，用鹽水(25ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)至干，得到標(biāo)題化合物，為棕色油(16.7g，100％)MH-173NMR(CDCl3)δ7.4-7.1(4H，m)3.85(3H，s，CO2Me)(iii)2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯攪拌下，將1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(5ml)加到冷的(3-氟-苯基)-丙炔酸甲酯(2.67g)和1-氨基-3-甲氧基-噠嗪-1-鎓磺酸鹽(4.89g)溶于乙腈(80ml)的混合物中，將混合物于0℃攪拌1小時(shí)，然后室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將混合物真空濃縮，在乙酸乙酯(150ml)和水(150ml)間分配。分離水層，進(jìn)一步用乙酸乙酯(2×100ml)提取。合并有機(jī)提取液，用水(2×50ml)、鹽水(25ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)，得到固體，用無(wú)水乙醚∶石油醚(1∶0.5)研磨，得到標(biāo)題化合物，為棕色固體(2.4g，53％)。MH+3021H NMR(CDCl3)δ12.8(1H，br s)；8.4(1H，d，J 10Hz) 7.7-7.6(2H，m) 7.42(1H，q，J 8 Hz) 7.15(1H，td，J 8 & 3Hz) 6.95(1H，d，J 10Hz) 4.1(3H，s)3.88(3H，s)(iv)2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸將2N氫氧化鈉(50ml)加到2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸甲酯(2.3g)溶于無(wú)水乙醇(50ml)的溶液中，將所得混合物加熱回流3小時(shí)。將冷卻后的反應(yīng)混合物慢慢傾入攪拌著的2N鹽酸溶液(300ml)中。將所得懸浮液室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后過(guò)濾，濾餅用水洗滌，60℃真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(2.0g，91％)。MH+2881H NMR(DMSO)δ8.45(1H，d，J 10Hz)；7.67(2H，m)；7.5(1H，q，J 7Hz)；7.3(1H，td，J 7 & 2Hz)；7.21(1H，d，J 10Hz)；4.0(3H，s)(v)3-溴-2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪攪拌下，將n-溴代琥珀酰亞胺(1.78g)加到2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪-3-羧酸(2.0g)溶于無(wú)水DMF(20ml)的溶液中，將所得溶液室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(80ml)稀釋，依次用水(10×100ml)和鹽水(25ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(2.1g，93％)。MH+323，MH-3211H NMR(CDCl3) 7.9(2H，m) 7.8(1H，d，J 10Hz)；7.45(1H，m)；7.191H，td，J 8&2 Hz)；6.78(1H，d，J 10Hz)；4.1(3H，s)(vi)6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪將數(shù)份3-溴-2-(3-氟-苯基)-6-甲氧基-吡唑并[1，5-b]噠嗪(400mg，共2.1g)分別放入裝有電磁攪棒的反應(yīng)瓶(Reactivials)中。向各瓶中加入鹽酸吡啶(10eq)，將瓶子密封，加熱至200℃反應(yīng)3小時(shí)。開(kāi)啟前，將瓶子冷至約140℃，將內(nèi)容物傾入冰/水中。所得混合物用乙酸乙酯(3×100ml)提取，合并有機(jī)提取液，用水(7×75ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)至得到去-溴苯酚，為棕色固體(1.0g，MH+230)。將該固體溶于無(wú)水DMF(10ml)，分批加入氫化鈉(60％的礦物油分散液，200mg)。室溫?cái)嚢?0分鐘后，將溶液轉(zhuǎn)移至冷的小高壓釜中，加入溴代二氟甲烷(5ml，xs，-30℃冷凝)。將高壓釜密封，熱至室溫，攪拌36小時(shí)。所得溶液用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用水(10×20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮，殘余膠用閃式柱層析純化，以環(huán)己烷∶乙酸乙酯(4∶1)作洗脫液。得到標(biāo)題化合物，為固體(652mg，60％)。MH+280 MH-278NMR(DMSO)δ8.42(1H，d，J＝10Hz) 7.85(1H，d，J 8Hz) 7.78(1H，t，J 70Hz)7.55(1H，q，J 8Hz) 7.38(1H，s) 7.25(1H，m) 7.17(1H，d，J 10Hz)(vii)3-溴-6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪將N-溴代琥珀酰亞胺(195mg)加到6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(251mg)和碳酸氫鈉(185mg)溶于無(wú)水DMF(10ml)的溶液中，攪拌反應(yīng)18小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(300ml)稀釋，用水(10×20ml)、鹽水(20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮，得到標(biāo)題化合物，為固體(293mg，91％)。MH+359，MH-356/357NMR(DMSO)δ8.36(1H，d，J 10Hz) 7.88(1H，d，J 8Hz) 7.78(1H，t，J 70Hz，OCHF2) 7.77(1H，dm，J 10Hz) 7.62(1H，dt，J 8 & 6Hz) 7.38(1H，dt，J 9 & 2Hz)7.3(1H，d，J 10Hz)(Viii)6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-3-(4-甲磺酰基-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪攪拌下，將2N碳酸鈉水溶液(10ml)加到3-溴-6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪(286mg)溶于DMF(20ml)的溶液中。向該混合物中加入4-甲磺酰基-苯基硼酸(180mg)和四三苯基膦鈀(O)(34mg)。將所得混合物攪拌，加熱至回流反應(yīng)18小時(shí)。用乙酸乙酯(300ml)稀釋冷卻的反應(yīng)混合物，有機(jī)溶液用水(10×30ml)和鹽水(30ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)至得到膠狀物，用閃式柱層析純化，以氯仿∶乙酸乙酯(50∶1-5∶1)洗脫。合并適宜的洗脫液，濃縮，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(132mg，37％)。MH+4341H NMR(CDCl3)δ8.02(1H，d，J 9Hz)；7.95(2H，d，J 10Hz)；7.58(1H，d，9Hz)；7.52(1H，t，J 70Hz)；7.32(3H，m)；7.08(1H，m)；6.9(1H，d，J 9Hz)；3.15(3H，s)生物數(shù)據(jù)對(duì)人類COX-1和COX-2的抑制活性是在用人COX-1和COX-2的cDNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染過(guò)的COS細(xì)胞中測(cè)定的。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)，用下列方法將COS細(xì)胞從培養(yǎng)它們的175cm2燒瓶中移至24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿中。將培養(yǎng)基(加有熱滅活的牛胎兒血清(10％v/v)，青霉素(100IU/ml)，鏈霉素(100μg/ml)和geneticin(600μg/ml)的Dulbecco’s改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM))從融合細(xì)胞的燒瓶中移出(1只融合燒瓶中含有大約1×107個(gè)細(xì)胞)。向燒瓶中加入10ml磷酸鹽緩沖液(PBS)以洗滌細(xì)胞。除去PBS，然后用10ml胰蛋白酶將細(xì)胞洗滌20秒鐘，然后除去胰蛋白酶，將燒瓶放入恒溫箱(37℃)1-2分鐘至細(xì)胞從燒瓶中分離。然后將燒瓶從恒溫箱中取出，將細(xì)胞再懸浮于10ml新制成的培養(yǎng)基中。將瓶中的內(nèi)容物移至250ml無(wú)菌容器中，隨后將培養(yǎng)基的體積補(bǔ)至100ml。用移液管將1ml細(xì)胞懸浮液移至4×24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿的各個(gè)孔中。將培養(yǎng)皿放入恒溫箱過(guò)夜(37℃，95％空氣/5％CO2)。如果需要多個(gè)細(xì)胞瓶，在將細(xì)胞放入24孔培養(yǎng)皿中之前，將各瓶中的細(xì)胞合并。
過(guò)夜培養(yǎng)后，將培養(yǎng)基完全地從24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿中取出，以放入250μl新制成的DMEM(37℃)中。將測(cè)試化合物在DMSO中補(bǔ)充至所需測(cè)試濃度250x，以1μl體積加到各孔中。然后輕輕旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿使之混合，然后在恒溫箱中放置1小時(shí)(37℃，95％空氣/5％CO2)。培養(yǎng)期之后，向各孔中加入10μl花生四烯酸(750μM)，至花生四烯酸的最終濃度為30μM。用酶免疫測(cè)定法確定前列腺素E2(PGE2)含量之前，將培養(yǎng)皿進(jìn)一步培養(yǎng)15分鐘，然后從各孔中取出培養(yǎng)基，于-20℃貯存。測(cè)試化合物的抑制活性用IC50值表示，該值定義為抑制細(xì)胞釋放PGE2達(dá)50％時(shí)所需的化合物濃度。通過(guò)比較各自的IC50值計(jì)算COX-1對(duì)COX-2抑制的選擇率。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物及其可藥用的衍生物
其中R0為鹵素，C1-6烷基，C1-6烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，或O(CH2)nNR4R5；R1和R2各獨(dú)立地選自H，C16烷基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6羥烷基，SC1-6烷基，C(O)H，C(O)C1-6烷基，C1-6烷基磺?；灰粋€(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，O(CH2)nCO2C1-6烷基，O(CH2)nSC1-6烷基，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSC1-6烷基或C(O)NR4R5；條件是，當(dāng)R0在4位且為鹵素時(shí)，R1和R2中至少有一個(gè)為C1-6烷基磺?；?，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，O(CH2)nCO2C1-6烷基，O(CH2)nSC1-6烷基，(CH2)nNR4R5或(CH2)nSC1-6烷基，C(O)NR4R5；R3為C1-6烷基或NH2；R4和R5各自獨(dú)立地選自H，或C1-6烷基，或與所連的氮原子一起形成4-8元飽和環(huán)；和n為1-4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R0為F，C1-3烷基，C1-3烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基，或O(CH2)nNR4R5；R1為C1-4烷基磺?；灰粋€(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基，O(CH2)nCO2C1-4烷基，O(CH2)nSC1-4烷基，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSC1-4烷基或C(O)NR4R5或，當(dāng)R0為C1-3烷基，C1-3烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基，或O(CH2)nNR4R5時(shí)，它也可以是H；R2為H；R3為甲基或NH2；R4和R5各自獨(dú)立地為C1-3烷基，或與所連的氮原子一起形成5-6元飽和環(huán)；和n為1-3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R0為F，甲基，C1-2烷氧基，OCHF2，或O(CH2)nNR4R5；R1為甲基磺?；琌CHF2，O(CH2)nCO2C1-4烷基，O(CH2)nSCH3，(CH2)nNR4R5，(CH2)nSCH3或C(O)NR4R5或，當(dāng)R0為甲基，C1-2烷氧基，OCHF2，或O(CH2)nN(CH3)2時(shí)，它也可以是H；R2為H；R3為甲基或NH2；R4和R5均為甲基或，與所連的氮原子一起形成5-6元飽和環(huán)；和n為1-2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物，其中R0為F，C1-3烷氧基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基；R1為C1-4烷基磺酰基，被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-4烷氧基或，當(dāng)R0為C1-3烷氧基或被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-3烷氧基時(shí)，它也可以是H；R2為H；R3為甲基或NH2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的化合物，其中R0在苯環(huán)的3位或4位。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的化合物，其中R1在噠嗪環(huán)的6位。
7. 2-(4-乙氧基-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；6-二氟甲氧基-2-(3-氟-苯基)-3-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[1，5-b]噠嗪；及其可藥用的衍生物。
8.一種制備權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)中定義的式(I)化合物及其可藥用的衍生物的方法，包含(A)式(II)化合物或其被保護(hù)的衍生物與式(III)化合物或其被保護(hù)的衍生物反應(yīng)
或
(B)如果R3代表C1-4烷基，使式(IV)化合物或其被保護(hù)的衍生物與氧化劑反應(yīng)；或
(C)如果R1為C1-6烷基磺酰基，將式(V)化合物或其被保護(hù)的衍生物進(jìn)行氧化
(D)如果R1為被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-6烷氧基，使式(VI)的醇或其被保護(hù)的衍生物與鹵代氟烷反應(yīng)
(E)將式(I)化合物互變成另一種式(I)化合物；或(F)使被保護(hù)的式(I)化合物的衍生物脫保護(hù)；和任選地將(A)至(F)任一方法制成的式(I)化合物轉(zhuǎn)變成其可藥用的衍生物。
9.一種藥物組合物，含有與一種或多種生理可接受的載體或賦形劑混合的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)定義的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
10.用于人藥或獸藥的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)定義的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
11.用于治療通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的疾病的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)定義的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
12.一種治療通過(guò)選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的人或動(dòng)物患者疾病的方法，包含給所述患者服用有效量的權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)定義的式(I)化合物或其可藥用的衍生物。
14.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)定義的式(I)化合物或其可藥用的衍生物用于制備治療由選擇性抑制COX-2來(lái)介導(dǎo)的疾病的治療劑的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物及其可藥用的衍生物。式(Ⅰ)中,其中R
文檔編號(hào)C07D487/04GK1278263SQ98810876
公開(kāi)日2000年12月27日 申請(qǐng)日期1998年9月3日 優(yōu)先權(quán)日1997年9月5日
發(fā)明者P·貝斯維克, I·坎貝克, N·馬修斯, A·內(nèi)勒 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司