專利名稱：膦羧基磺酸酯鯊烯合成酶抑制劑的鹽及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及膦羧基磺酸酯鯊烯合成酶抑制劑3-苯氧基-α-膦羧基苯丁磺酸，二新戊酰氧基甲酯的新的鹽形式，包括胺鹽例如叔丁胺鹽、叔辛胺鹽和脫氫樅胺鹽，并涉及它們?cè)趶念^抑制膽固醇生物合成、降低血清膽固醇及治療動(dòng)脈粥樣硬化方面的用途。
歐洲專利申請(qǐng)第0595635A1號(hào)披露了α-膦羧基磺酸酯化合物，包括其藥學(xué)上可接受的鹽，它們能抑制膽固醇的生物合成，因而可用作降膽固醇藥和抗動(dòng)脈粥樣硬化劑，它們具有以下結(jié)構(gòu) 式中R2是OR5或R5a；R3和R5相同或不同，為H，烷基，芳基烷基，芳基，環(huán)烷基，如下定義的金屬離子或其它藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子，或藥物前體酯；R5a是H，烷基，芳基烷基或芳基；R4是H，烷基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，如下定義的金屬離子或其它的藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子，或藥物前體酯；Z是H，鹵素，低級(jí)烷基或低級(jí)鏈烯基；R1是含有至少7個(gè)碳原子的親脂性基團(tuán)和在鏈上含有7至25個(gè)碳的烷基；在鏈上含有7至25個(gè)碳并具有1至6個(gè)雙鍵的鏈烯基；在鏈上含有7至25個(gè)碳并且具有1至6個(gè)三鍵的炔基；含有1至5個(gè)雙鍵和1至5個(gè)叁鍵的混合的鏈烯基-炔基；環(huán)烷基；通過(guò)環(huán)上的碳或雜原子連接的雜環(huán)烷基；芳基；雜芳基；雜芳基烷基；環(huán)烷基烷基；雜環(huán)烷基烷基；或下式基團(tuán) 式中Ar是芳基(例如苯基或萘基)、雜芳基(5或6元)并可包括1至3個(gè)與Ar稠合的其它環(huán)(例如芳基，環(huán)烷基，雜芳基或雜環(huán)烷基)；(CH2)p在鏈上含有1至15個(gè)碳、優(yōu)選2至12個(gè)碳并在主鏈上可以含有0、1、2或3個(gè)雙鍵和/或0、1、2或3個(gè)叁鍵并可以在鏈上含有醚或氨基官能團(tuán)和/或可以含有0、1、2或3個(gè)如下對(duì)R6所定義的取代基；及R6、R7、R8和R8a相同或不同，是H，含有1至40個(gè)碳、優(yōu)選3至25個(gè)碳的烷基，含有1至40個(gè)碳、優(yōu)選3至25個(gè)碳的烷氧基，含有2至40個(gè)碳、優(yōu)選3至25個(gè)碳的鏈烯基，含有2至40個(gè)碳、優(yōu)選3至25個(gè)碳的鏈烯氧基，含有2至40個(gè)碳，優(yōu)選3至25個(gè)碳的炔基，含有2至40個(gè)碳、優(yōu)選3至25個(gè)碳的炔氧基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，雜芳基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，Ar-烷基(例如芳基烷基)，ArO(例如芳氧基)，Ar-氨基(例如芳基氨基)，羥基，鹵素，硝基，Ar(例如芳基)，氨基，取代的氨基，其中所述氨基包含1或2個(gè)取代基(它們是烷基、鏈烯基、芳基或任何上述的Ar基團(tuán))，巰基，烷硫基，Ar-硫基(例如芳硫基)，烷基亞硫?；?，Ar-亞硫?；?例如芳基亞硫酰基)，烷基磺酰基，Ar-磺?；?例如芳基磺酰基)，
羧基，氰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基羰基氧基，Ar-羰基氧基(例如芳基羰基氧基)，Ar-羰基氨基(例如芳基羰基氨基)或烷基羰基氨基，以及任何如上定義的Ar基團(tuán)，并且在取代的Ar-(CH2)p-基團(tuán)中的碳的總數(shù)最好超過(guò)10個(gè)碳；所述α-膦羧基磺酸酯化合物的藥學(xué)上可接受的鹽例如為堿金屬鹽如鋰、鈉或鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣或鎂鹽，以及鋅或鋁鹽和其它FDA認(rèn)可的陽(yáng)離子如銨的鹽，膽堿、二乙醇胺、乙二胺的鹽，和天然存在的氨基酸如精氨酸、賴氨酸、丙氨酸等的鹽。
(CH2)p基團(tuán)可以含有1、2、3或更多個(gè)烷基、烷氧基、鏈烯基、炔基、羥基和/或鹵素取代基以及任何對(duì)R6所定義的取代基。
在歐洲專利申請(qǐng)第0595635A1中所用的術(shù)語(yǔ)“藥物前體酯”包括本領(lǐng)域公知的磷酸和羧酸的藥物前體酯。實(shí)例包括下列基團(tuán)(1-鏈烷酰氧基)烷基如 或 式中R18、R19和R20是H、烷基、芳基或芳基烷基；但R18O不能是HO。這樣的藥物前體酯包括CH3CO2CH2-， t-C4H9CO2CH2-，或 歐洲專利申請(qǐng)第0595635A1號(hào)還披露了鯊烯合成酶抑制劑3-苯氧基-α-膦羧基苯-丁磺酸三鉀鹽包括其對(duì)映體的制備方法，該化合物的結(jié)構(gòu)如下 ·三鉀鹽本發(fā)明提供具有下式I結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸酯鹽 式中X是鹽，是叔丁胺鹽、叔辛胺鹽或脫氫樅胺鹽。
優(yōu)選叔丁胺鹽。
已發(fā)現(xiàn)，上述鹽是水溶性的，不吸濕，結(jié)晶度高，具有優(yōu)良的貯存壽命，并能達(dá)到良好的鯊烯合成酶抑制劑的口服生物利用度。
所用的原材料是式II3-苯氧基-α-膦羧基苯丁磺酸 最好是(S)對(duì)映體(按歐洲專利申請(qǐng)第93308617.5號(hào)所述制備)。
此外，本發(fā)明提供用于制備鈣鹽III的基本純的游離酸II的分離方法，如下文所述。因此，本發(fā)明的純化方法的一個(gè)方面包括以下步驟制成游離酸II粗品與1-金剛烷胺或辛可尼定形成的結(jié)晶性鹽以形成相應(yīng)的該游離酸的二金剛烷胺鹽或該游離酸的二辛可尼定鹽，以及對(duì)該二金剛烷胺鹽或二辛可尼定鹽進(jìn)行陽(yáng)離子交換以獲得精制游離酸。
在進(jìn)行上述的純化操作時(shí)，最好將游離酸粗品溶于醇溶劑如甲醇、乙醇或異丙醇、最好是甲醇中，而將1-金剛烷胺和辛可尼定溶于適宜的有機(jī)溶劑例如乙酸乙酯、乙醚、四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈或甲苯中。
將辛可尼定的溶液與游離酸粗品的溶液在約15-80℃、優(yōu)選約50-70℃范圍內(nèi)的溫度反應(yīng)，將得到的反應(yīng)混合物冷卻以沉淀二辛可尼定鹽。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，將精制游離酸化合物II溶于惰性有機(jī)溶劑如無(wú)水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲亞砜(DMSO)、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯或其它惰性有機(jī)溶劑中，然后在惰性氣氛如氬氣氛下用新戊酸碘甲酯、新戊酸氯甲酯或新戊酸溴甲酯處理(新戊酸酯與II的摩爾比在約1∶1-10∶1范圍內(nèi)，優(yōu)選約2∶1-5∶1)。將反應(yīng)混合物加熱至約40-50℃范圍內(nèi)的溫度。加入胺堿例如三乙胺、吡啶或二異丙基乙胺和鈣鹽例如CaCl2或碳酸鈣或其它鈣鹽，優(yōu)選CaCl2或氫氧化鈣，形成新戊酰氧基甲酯鈣鹽III。然后將產(chǎn)物通過(guò)由醇性溶劑例如甲醇、乙醇或異丙醇中結(jié)晶來(lái)分離純化。所述新戊酰氧基甲酯鈣鹽III結(jié)構(gòu)如下III
胺堿的用量按胺堿與II的摩爾比在約1∶1-5∶1的范圍內(nèi)，而鈣鹽按其與游離酸的摩爾比在約10∶1-100∶1范圍內(nèi)的量來(lái)使用。
使鈣鹽通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，制得游離酸。
將該游離酸的醇(例如甲醇)溶液用胺例如叔丁胺、叔辛胺或脫氫樅胺按與III的摩爾比在約0.5∶1-2∶1、優(yōu)選1∶1的量處理，生成本發(fā)明I的鹽。
本發(fā)明的式I化合物通過(guò)從頭抑制鯊烯的生成而抑制膽固醇的生物合成。這些化合物抑制鯊烯合成酶，此外，一些本發(fā)明的式I化合物能抑制由二磷酸異戊烯酯至鯊烯這一通道的其它酶，即二磷酸法呢酯合成酶和二磷酸異戊烯酯-二磷酸二甲基烯丙酯異構(gòu)酶。
本發(fā)明化合物可用于治療高脂蛋白血癥、高脂血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、混合性高膽固醇血癥和高甘油三酯血癥，和/或預(yù)防或抑制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化。因此，本發(fā)明化合物可用于治療疾病例如乳糜微粒血綜合癥、I型高脂蛋白血癥、家族性混合性高脂蛋白血癥、家族性高甘油三酯血癥、混合性高脂蛋白血癥、家族性高膽固醇血癥和III型高脂蛋白血癥和/或動(dòng)脈粥樣硬化。
此外，本發(fā)明化合物可增加血漿高密度脂蛋白膽固醇水平。
本發(fā)明化合物還可以用于抑制膽石的形成，治療丁型肝炎(通過(guò)抑制蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶，Glenn等人，Science，256卷，1331-1333頁(yè)，1992年5月29日)，治療腫瘤，降低血壓，降低血糖，治療糖尿病，治療炎癥，用作利尿劑、影響肌收縮力的藥物(inotropic agent)、抗關(guān)節(jié)炎(抗風(fēng)濕)藥，治療其它的鈣和磷酸鹽代謝疾病包括治療骨吸收、Paget氏病、骨質(zhì)疏松癥、關(guān)節(jié)鈣化、植入物和轉(zhuǎn)移，在牙膏和漱口藥中作為抗結(jié)石劑和抗牙石劑，治療各種結(jié)石，治療鐮狀細(xì)胞性貧血，治療缺氧和缺血性組織，和用作抗阿米巴藥，以及用于與锝99m和放射性碘化衍生物形成絡(luò)合物用作診斷劑。
美國(guó)申請(qǐng)序號(hào)第774957號(hào)申請(qǐng)(1991年10月11日申請(qǐng))披露了含蛋白質(zhì)的CAAX盒(CAAX box)的轉(zhuǎn)譯后修飾可通過(guò)使用蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑得到抑制，所述蛋白質(zhì)異戊轉(zhuǎn)移酶抑制劑能抑制異戊烯基(例如法呢基(在ras致癌基因產(chǎn)物的情況下)牻牛兒基或牻牛兒基牻牛兒基)通過(guò)蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移到CAAX盒的半胱氨酸上。蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑將阻斷蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶對(duì)異戊烯基(例如法呢基、牻牛兒基或牻牛兒基牻牛兒基)由焦磷酸異戊烯酯向CAAX盒的cys殘基例如ras p21cys或其它的含蛋白質(zhì)的CAAX盒的CAAX盒半胱氨酸轉(zhuǎn)移的催化。在ras p21致癌基因產(chǎn)物的情況下，由于在蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑存在下cys不能被法呢基化，因而ras蛋白質(zhì)與膜無(wú)法進(jìn)行相互作用，使得細(xì)胞的腫瘤轉(zhuǎn)化將受到阻止。在此方式中，蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑阻止細(xì)胞的腫瘤轉(zhuǎn)化，因此可用作抗癌劑治療和/或預(yù)防ras相關(guān)腫瘤。
含有已得到證實(shí)或據(jù)認(rèn)為經(jīng)歷異戊烯基化的蛋白質(zhì)的CAAX盒的實(shí)例包括ras，nuclear lamins，雜三聚(heterotrimeric)G-蛋白質(zhì)的α或γ亞基，retinal transducin G25K和K-rev p21的γ亞基，和包括rho、rap、rac、ral和rab的蛋白質(zhì)系。
本發(fā)明化合物可用在這樣的方式中通過(guò)給需要治療的病人使用治療量的可作為蛋白質(zhì)異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑的本發(fā)明式I化合物阻斷或防止含蛋白質(zhì)的CAAX盒例如ras致癌基因產(chǎn)物異戊烯基化，因此抑制含蛋白質(zhì)的CAAX盒的疾病促進(jìn)作用，或更具體地講，預(yù)防和/或治療與ras相關(guān)的腫瘤。
式I蛋白質(zhì)-異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑不像HMG CoA還原酶抑制劑，它能干擾ras致癌基因產(chǎn)物的異戊烯基化并抑制其轉(zhuǎn)化活性，還可能干擾或可能不干擾FPP(泛醌類、多萜醇和Haem A合成中的一個(gè)前體)的合成。
本發(fā)明化合物還可以與下列藥物合用抗高脂蛋白血藥，降膽固醇藥，和/或降甘油三酯藥，和/或抗動(dòng)脈粥樣硬化劑例如一種或多種HMG CoA還原酶抑制劑，例如pravastatin，lovastatin，simvastatin，velostatin，fluvastatin，rivastatin，compactin，SDZ-63，370(Sandoz)，CI-981(W-L)，HR-780，L-645164，CL-274471，dalvastatin，α-、β-和γ-生育三烯酚，(3R，5S，6E)-9，9-二(4-氟苯基)-3，5-二羥基-8-(1-甲基-1H-四唑-5-基)-6，8-壬二烯酸L-精氨酸鹽，(S)-4-〔〔2-〔4-(4-氟苯基)-5-甲基-2-(1-甲基乙基)-6-苯基-3-吡啶基〕乙烯基〕羥基-氧膦基〕-3-羥基丁酸二鈉鹽，BB-476(British Biotechnology)，dihydrocompactin，〔4R-〔4α，6β(E)〕〕-6-〔2-〔5-(4-氟苯基)-3-(1-甲基乙基)-1-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基〕乙烯基〕四氫-4-羥基-2H-吡喃-2-酮，和/或1H-吡咯-1-庚酸，2-(4-氟苯基)-β，δ-二羥基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-4-〔(苯基氨基)羰基〕鈣鹽〔R-(R*，R*)〕；一種或多種fibric acid衍生物例如祛脂乙酯、降脂苯酰，Lopid(gemfibrozil)，一種或多種其它的膽固醇生物合成抑制劑，例如NB-598，N-(1-氧代十二烷基)-4α，10-二甲基-8-氮雜-反-萘烷-3β-醇，2，4-十一碳二烯酸，11-〔3-(羥基甲基)-4-氧代-2-氧雜丁環(huán)基(oxetanyl)〕-3，5，7-三甲基-，〔2R-〔2α(2E，4E，7R*)，3β〕〕；一種或多種膽汁酸螯合劑，例如降膽敏，降膽寧，降膽葡胺(DEAE-Sephadex)；一種或多種抗氧化劑，例如丙丁酚和維生素E；和/或一種或多種其它的降脂和/或抗動(dòng)脈粥樣硬化劑，例如煙酸或其衍生物，新霉素，對(duì)氨基水楊酸，丙丁酚，羥基丙基甲基纖維素，LS-2904，乙醇，2-〔〔1-甲基-2-〔3-(三氟甲基)苯基〕乙基〕氨基〕苯甲酸酯。
以上與本發(fā)明鯊烯合成酶抑制劑合用的化合物的用量按Physicians’Desk Reference(PDR)中所示。
本發(fā)明化合物還可以與十二烷基硫酸鈉或其它藥學(xué)上可接受的去污劑一起使用以增強(qiáng)所述化合物的口服生物利用度。
對(duì)鯊烯合成酶抑制作用可用下列方法測(cè)定。
用二磷酸法呢酯作底物測(cè)定大鼠肝臟微粒體鯊烯合成酶活性，用氣相層析分析對(duì)鯊烯合成定量。用最初由Agnew所述的修飾條件(Methods in Enzymology 110357，1985)進(jìn)行鑒定。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是含有至少一種本發(fā)明化合物例如式I化合物和藥用賦形劑或稀釋劑的藥用組合物。該藥用組合物可用常規(guī)固體或液體賦形劑或者稀釋劑和適于期望的使用方式的藥用添加劑來(lái)配制。所述化合物可以片劑、膠囊劑、顆粒劑或粉劑形式經(jīng)口服途徑給哺乳類包括人、猴、狗等使用，或可以注射劑形式經(jīng)腸道外途徑使用。成人劑量每天最好在200-2000mg之間，該劑量可以單劑形式或以每天1-4次的分劑形式來(lái)使用。
口服用典型的膠囊劑包含活性成分(250mg)、乳糖(75mg)和硬脂酸鎂(15mg)。使此混合物通過(guò)60目網(wǎng)篩，并將其裝入1號(hào)明膠膠囊。
典型的注射劑可以通過(guò)將250mg滅菌活性成分無(wú)菌裝入小瓶中，無(wú)菌凍干和密封來(lái)制備。使用時(shí)，將小瓶中內(nèi)容物與2ml生理鹽水混合，制成注射劑。
下列實(shí)施例代表本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。
實(shí)施例1 化合物A按歐洲專利申請(qǐng)第0595635A1號(hào)的實(shí)施例178中所述來(lái)制備。 將3N鹽酸溶液(124ml)于室溫在約10分鐘內(nèi)滴加至攪拌著的化合物A(6.14g，11.8mmol)的乙腈(124ml)溶液中。將所得到的混合物攪拌3小時(shí)以完成反應(yīng)。將反應(yīng)混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，除去大部分乙腈，剩下的水性層用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水(2×50ml)、鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾。將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至干，得到油狀的化合物B粗品(4.83g，收率87％)。不經(jīng)任何進(jìn)一步純化將此化合物用在下一個(gè)反應(yīng)中。 向攪拌著的化合物B粗品(4.83g，11.35mmol)的冰乙酸(40ml)液中加入甲酸(4.5ml)并冷卻至～10℃。向此混合物中用～15分鐘非常緩慢地加入30％過(guò)氧化氫水溶液(6.97ml，68.1mmol)，同時(shí)，保持反應(yīng)的內(nèi)溫在30℃以下。黃色的聚合固體由反應(yīng)中沉淀出來(lái)。將反應(yīng)混合物用約20分鐘緩慢溫?zé)嶂潦覝?，然后攪?小時(shí)以完成反應(yīng)。將過(guò)量的過(guò)氧化物通過(guò)緩慢加入二甲基硫醚(2.08ml，2.5當(dāng)量)小心分解。攪拌30分鐘后，將混合物用燒結(jié)漏斗過(guò)濾以除去聚合固體。將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到殘?jiān)?。將殘?jiān)苡谝宜嵋阴ヒ患妆?1∶5)的混合物中并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。將此操作重復(fù)4次以除去大部分乙酸，得到化合物C粗品。
將此化合物粗品用兩種方法純化。
方法(1)將化合物C粗品溶于甲醇(15ml)中，并于室溫用1-金剛烷胺(3.54g，22.69mmol)的乙酸乙酯溶液(150ml)處理。攪拌1小時(shí)后，用布氏漏斗收集沉淀的化合物C的二金剛烷胺鹽。將此白色固體用乙酸乙酯(50ml)洗滌，并于室溫在真空烘箱中干燥，得7.60g。向此鹽在甲醇(～75ml)中的懸浮液中加入AG50W-X8離子交換樹(shù)脂(55g)并于室溫?cái)嚢?0分鐘。然后將混合物倒入包含AG50W-X8離子交換樹(shù)脂(25g)的燒結(jié)漏斗中。將甲醇濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到純標(biāo)題化合物(3.8g，83％，由化合物A的總收率)。
方法(2)將三酸C粗品(4.93g)在回流下溶于乙酸乙酯(30ml)和甲醇(～5ml)的混合物中。向此攪拌著的溶液中加入在乙酸乙酯(30ml)中的辛可尼定(4.43g，2.0當(dāng)量)。將混合物加熱至回流，得到均勻的溶液。將此溶液放冷至室溫，形成標(biāo)題三酸二辛可尼定鹽的結(jié)晶。將此結(jié)晶在4℃冷卻～14小時(shí)后用布氏漏斗收集。第一批得到2.33g，并由母液中獲得第二批(2.49g)。將合并的辛可尼定鹽(4.82g)溶于甲醇(50ml)中并用Dowex50X8離子交換樹(shù)脂(50g)處理。將此懸浮液攪拌1小時(shí)，過(guò)濾。將濾液濃縮，得到純標(biāo)題化合物。 在室溫和氬氣下，向攪拌著的化合物C(1.045g，2.7mmol)的無(wú)水DMF(9ml)溶液中加入新戊酸碘甲酯(2.59g，10.70mmol)并將混合物加熱(內(nèi)溫在41.5-45.9℃之間)。將三乙胺(0.9ml，6.46mmol)用約1小時(shí)分批少量緩慢加至其中。攪拌15分鐘后，由反應(yīng)混合物中取樣，用HPLC分析。反應(yīng)未完全。一次加入新戊酸碘甲酯(0.962g，3.97mmol)，隨后用約30分鐘加入三乙胺(0.23ml，1.65mmol)并使反應(yīng)再繼續(xù)進(jìn)行30分鐘，然后用HPLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。再加入三乙胺(0.035ml，0.25mmol)，使反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物倒入含有5％硫酸(10ml)的分液漏斗中。用水(～10ml)將反應(yīng)燒瓶的剩余物洗滌至分液漏斗中。將混合物用己烷(5×40ml)洗滌(將含新戊酸碘甲酯的己烷層棄去)并用乙酸乙酯(2×40ml)萃取。將合并的乙酸乙酯層依次用5％Na2S2O3(2×40ml)、飽和NaHCO3(3×40ml)和2M CaCl2(4×40ml)洗滌。將有機(jī)層在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到灰白色泡沫固體樣粗產(chǎn)物。將其溶于無(wú)水乙醇(16ml)中，于室溫放置12小時(shí)使其結(jié)晶。將結(jié)晶產(chǎn)物用布氏漏斗過(guò)濾(于4℃保持～1小時(shí)后)，將固體用乙醇(2×2ml)洗滌并在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(1.18g，，收率～70％) 將AG50W-X8離子交換樹(shù)脂(95g)一次加至攪拌著的化合物D鈣鹽(9.35g，15.04mmol)的甲醇(480ml)溶液中。將此多相混合物攪拌30分鐘并濾過(guò)AG50W-X8離子交換樹(shù)脂(25g)墊。用甲醇(～100ml)洗滌樹(shù)脂。將含標(biāo)題游離酸的合并的甲醇溶液直接用來(lái)制備不同的鹽。 向攪拌著的游離酸E(由9.53g(15.04mmol)實(shí)施例1的鈣鹽D制得)的甲醇(580ml)溶液中非常緩慢地加入叔丁胺(1.10g，15.04mmol)。攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到泡沫狀固體。將此殘留物溶于乙酸乙酯(9ml)和己烷(45ml)中，將此混合物在室溫放置以使鹽結(jié)晶。12小時(shí)后，用布氏漏斗收集晶體，用乙酸乙酯和己烷的混合物(1∶9，～40ml)洗滌并真空干燥，得到標(biāo)題叔丁胺鹽，為白色固體(9.3g)。
實(shí)施例2
向攪拌著的實(shí)施例1的游離酸E(由0.15g(0.241mmol)實(shí)施例1的鈣鹽D制得)的甲醇(7ml)溶液中非常緩慢地加入叔辛胺(0.033g，0.241mmol)。攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到泡沫狀固體。將此殘留物溶于乙酸乙酯(0.5ml)和己烷(2.5ml)中，并將此混合物在室溫放置以使鹽結(jié)晶。12小時(shí)后，用布氏漏斗收集晶體，用乙酸乙酯和己烷的混合物(1∶9，～5ml)洗滌并真空干燥，得到標(biāo)題叔辛胺鹽，為白色固體。
實(shí)施例3 向劇烈攪拌著的實(shí)施例1的D游離酸(由0.64g(～1mmo1)實(shí)施例1的C鈣鹽制得)的甲醇(20ml)溶液中加入去離子水(150ml)，接著緩慢加入在甲醇(5ml)中的(+)脫氫樅胺(0.29g，1.0mmol)中。在此添加過(guò)程中形成沉淀。攪拌1小時(shí)后用布氏漏斗收集沉淀。將固體用去離子水(100ml)洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題鹽，為白色固體(0.6g)。
權(quán)利要求
1.具有以下結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸酯鹽 其中X代表叔丁胺鹽、叔辛胺鹽或脫氫樅胺鹽。
2.如權(quán)利要求1所定義的鹽，它是叔丁胺鹽。
3.如權(quán)利要求1所定義的鹽，它是叔辛胺鹽。
4.如權(quán)利要求1所定義的鹽，它是脫氫樅胺鹽。
5.包含如權(quán)利要求1所定義的膦羧基酸酯鹽和其藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
6.抑制膽固醇生物合成、降低血清膽固醇、或抑制和/或治療血脂過(guò)多癥、高脂血癥、高脂蛋白血癥、高膽固醇血癥和/或高甘油三酯血癥或抑制和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化的方法，它包括給需要這樣的治療的病人使用治療有效量的具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 其中X代表叔丁胺鹽、叔辛胺鹽或脫氫樅胺鹽。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中鹽是叔丁胺鹽。
8.如權(quán)利要求6所述的方法，其中鹽是叔辛胺鹽。
9.如權(quán)利要求6所述的方法，其中鹽是脫氫樅胺鹽。
10.如權(quán)利要求6所述的用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的方法。
11.如權(quán)利要求6所述的用于治療高膽固醇血癥的方法。
12.獲得基本純的具有以下結(jié)構(gòu)的游離酸的分離純化法， 它包括使該游離酸與1-金剛烷胺或辛可尼定反應(yīng)，生成相應(yīng)的鹽，使如此生成的鹽進(jìn)行離子交換，得到基本純的游離酸。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，使1-金剛烷胺與游離酸反應(yīng)生成相應(yīng)的所述游離酸的二金剛烷胺鹽。
14.如權(quán)利要求12所述的方法，其中使辛可尼定與游離酸反應(yīng)生成相應(yīng)的二辛可尼定鹽。
15.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，游離酸最初被溶于醇溶劑中
16.制備具有以下結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸新戊酰氧基甲酯鈣鹽的方法， 它包括制成具有以下結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸游離酸的溶液， 在惰性氣氛和在胺堿以及鈣鹽或氫氧化物存在下，用新戊酸鹵代甲酯處理該游離酸，生成該膦羧基磺酸的新戊酰氧基甲酯鈣鹽。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中新戊酸鹵代甲酯是新戊酸氯-、溴-或碘代甲酯。
18.制備具有以下結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸酯的胺鹽的方法， 其中X是胺鹽，它是叔丁胺鹽、叔辛胺鹽或脫氫樅胺鹽，所述方法包括制備具有以下結(jié)構(gòu)的膦羧基磺酸酯的鈣鹽， 將此鈣鹽用離子交換樹(shù)脂處理，得到如上定義的游離酸，將此游離酸與胺反應(yīng)劑反應(yīng)，生成如上定義的膦羧基磺酸酯的胺鹽。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中胺反應(yīng)劑是叔丁胺、叔辛胺或脫氫樅胺。
全文摘要
本發(fā)明提供下式膦羧基磺酸酯鯊烯合成酶抑制劑的新鹽形式，包括鈣鹽、叔丁胺鹽、叔辛胺鹽和脫氫樅胺鹽。這些鹽能抑制膽固醇生物合成，因此可用于降低血清膽固醇和治療動(dòng)脈粥樣硬化。
文檔編號(hào)C07F9/40GK1130188SQ9511902
公開(kāi)日1996年9月4日 申請(qǐng)日期1995年11月3日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月3日
發(fā)明者Y·彭里, 陳中冰, D·J·庫(kù)塞拉, E·J·馬丁尼茲, P·D·彭塞勞, J·K·托塔希爾, P·蒂姆斯 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司