專利名稱：一種羅氟司特原料的制備方法和檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種羅氟司特原料的制備方法和檢測方法，屬于藥物化學技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
慢性阻塞性肺病(chronicobstructive puLmonary diseases 簡稱 C0PD)是一種具有氣流受限特征的可以預防和治療的疾病，氣流受限不完全可逆、呈進行性發(fā)展，與肺部對香煙煙霧等有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應有關(guān)。COPD主要累及肺臟，但也可引起全身(或稱肺外)的不良效應。慢性阻塞性肺病還常與心力衰竭和代謝綜合征等密切相關(guān)，這些慢性共患疾病的存在可能會進一步加重慢性阻塞性肺病的臨床表現(xiàn)。作為一種氣道和肺部的慢性炎癥性疾病，慢性阻塞性肺病已成為全球常見疾病和致人死亡的主要病因之一。
羅氟司特為磷酸二酯酶4抑制劑，用于輔助支氣管擴張劑維持治療成人與慢性支氣管炎相關(guān)且有頻繁病癥惡化史的重度COPD患者，以降低COPD惡化的風險。羅氟司特的作用機制為通過抑制肺部細胞內(nèi)的PDE4，防止CAMP水解，從而阻斷炎癥反應信號傳遞，減少炎癥介質(zhì)的釋放，進而抑制如COPD和哮喘等呼吸道疾病對肺組織造成的損傷，起到抗炎作用。羅氟司特原研藥是由Nycomed公司開發(fā)、以期用于治療哮喘和慢性阻塞性肺病的一個新型口服藥物，2010年7月已在歐盟獲準用于輔助支氣管擴張劑維持治療重度慢性阻塞性肺病(COPD)患者，在歐盟國家，其商品名為Daxas ;2011年2月28日，美國FDA批準其用于降低伴慢性支氣管炎和有急性加重史的嚴重CCffD患者的癥狀惡化風險，在美國的商品名為DaLiresp ;原研藥上市的劑型為片劑,規(guī)格為500 y g,推薦用法用量為每天一次,每次一片(500ii g)。專利公開號為“CN1126468A”、申請?zhí)枮椤?4192659. I”的專利文件中公開了以下技術(shù)內(nèi)容在合成羅氟司特時，以四氫呋喃為溶劑，NaH做堿來制備中間體2，再與中間體I縮合得到羅氟司特。而實驗過程中發(fā)現(xiàn)用NaH做堿制備中間體2時有大量氫氣產(chǎn)生，不易控制，同時精制產(chǎn)品溶于溶劑時有乳光產(chǎn)生，可能是NaH中的雜質(zhì)帶來。此外，目前對羅氟司特原料還沒有一套嚴格可靠的質(zhì)量檢測標準。如果沒有嚴格的質(zhì)量標準，得到的產(chǎn)品不能確保其質(zhì)量，結(jié)果必將影響該藥物的臨床療效；所以為提高以羅氟司特為原料制成的藥物制劑的治療作用，確保用藥的安全、有效及產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定，制定一個嚴格可靠的質(zhì)量標準成為保證藥品質(zhì)量的基本要求。隨著現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的發(fā)展，高效液相色譜法等分析方法在藥品的質(zhì)量控制中得到了越來越廣泛的應用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種羅氟司特原料的制備方法和檢測方法。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，對羅氟司特原料的制備工藝進行了優(yōu)化，使其對治療COPD等疾病的療效更為顯著，并建立了系統(tǒng)的、完整的、有效的成分鑒別和含量測定方法，可有效控制該藥品的質(zhì)量，從而確保其臨床療效。以齊墩果酸為原料合成I a，2 a - 二羥基齊墩果酸，并對其進行了 CCL4所致肝細胞損傷的保護活性篩選，發(fā)現(xiàn)該化合物及其鹽對四氯化碳誘導體外肝細胞損傷和體內(nèi)肝損傷具有很好的保護作用，對四氯化碳誘導小鼠肝損傷有很好的保護作用，可應用于保肝藥物的制備中。本發(fā)明的技術(shù)方案一種羅氟司特原料的制備方法，取3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亞砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，發(fā)生酰氯化反應得中間體1，再取3，5- 二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氫呋喃和叔丁醇鉀混合，發(fā)生成鹽反應得中間體2的四氫呋喃溶液，后取中間體I、中間體2和四氫呋喃混合，發(fā)生酰胺化反應得羅氟司特粗品，對羅氟司特粗品進行精制即得；其反應路線如下
權(quán)利要求
1.一種羅氟司特原料的制備方法，其特征在于取3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亞砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，發(fā)生酰氯化反應得中間體1，再取3，5_ 二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氫呋喃和叔丁醇鉀混合，發(fā)生成鹽反應得中間體2的四氫呋喃溶液，后取中間體I、中間體2和四氫呋喃混合，發(fā)生酰胺化反應得羅氟司特粗品，對羅氟司特粗品進行精制即得；其反應路線如下
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種羅氟司特原料的制備方法，其特征在于，由中間體I和中間體2制備羅氟司特粗品的具體過程為取中間體I溶于350mL四氫呋喃，將中間體I的四氫呋喃溶液滴入到中間體2的四氫呋喃反應液中，同時控制反應液溫度O 10°C，Ih滴完，滴完后，于O I (TC保溫反應I. 5h，再于O 15°C加入IN鹽酸350mL，加完水相pH=2 3，分出有機相，水相用乙酸乙酯洗滌，合并有機相，先用飽和NaHCO3水溶液洗滌，再用水洗滌，有機相減壓蒸干，得到濕粗品，將濕粗品放入干燥箱中于60 65°C干燥2h，得羅氟司特粗品 50g。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種羅氟司特原料的制備方法，其特征在于，對羅氟司特粗品進行精制的具體過程為取羅氟司特粗品50g、乙酸乙酯190mL攪拌至固體溶解，先升溫到回流，再保溫加熱回流15min，室溫下靜置析晶5h，抽濾，沉淀用冷乙酸乙酯洗滌兩次，將濾餅均勻地鋪于不銹鋼方盤中，放入干燥箱中，于60 65°C干燥2h，得到羅氟司特精制產(chǎn)品40g。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種羅氟司特原料的制備方法，其特征在于，由化合物SM-I制備中間體I的具體過程為取3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸35g、氯化亞砜39mL、二甲基甲酰胺ImL、甲苯350mL，攪拌使固體溶解，升溫至80±5°C，再于80±5°C保溫反應3h，當室溫自然冷卻至50°C時，將反應液真空減壓蒸干溶劑，得到40g中間體I。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種羅氟司特原料的制備方法，其特征在于，由化合物SM-2制備中間體2的具體過程為取四氫呋喃350mL、3，5- 二氯_4_氨基吡啶48. 9g攪拌至固體溶解，分三批加入叔丁醇鉀33. 5g，同時控制反應液溫度在10°C以下，叔丁醇鉀加入完畢后，再于O 10°C保溫反應20min,得到中間體2的四氫呋喃溶液。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述的羅氟司特原料的檢測方法，其特征在于所述檢測方法包括性狀、鑒別、檢查和含量測定項目；其中鑒別是對羅氟司特進行鑒別；檢查是對有關(guān)物質(zhì)、有機殘留溶劑、水分、熾灼殘渣和重金屬進行檢查；含量測定是對羅氟司特含量進行測定。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的羅氟司特原料的檢測方法，其特征在于，對羅氟司特的具體鑒別方法為 (1)有機氟鑒別取本原料藥7mg，參照《中國藥典》2010版二部附錄附錄YDC的氧瓶燃燒法進行檢查，以水20mL與O. 01moL/L氫氧化鈉溶液6. 5mL為吸收液，待燃燒完畢后，充分振搖；取吸收液2mL，加茜素氟藍試液O. 5mL，再加含12%醋酸鈉的稀醋酸溶液O. 2mL，用水稀釋至4mL，加硝酸亞鈰試液O. 5mL，即顯藍紫色； (2)IR鑒別采用溴化鉀壓片，本原料藥的紅外光吸收圖譜與對照品圖譜一致。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的羅氟司特原料的檢測方法，其特征在于，具體檢查方法為 (I)有關(guān)物質(zhì) 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以pH 3. 5的O. 02M KH2PO4 CH3CN=42 :58為流動相，色譜柱為 ALLtimaTM, C18, 250X4. 6mm，5 μ m，柱溫為 30。C，檢測波長為 215nm，流速為 I. OmL/min，進樣體積為10 μ L，運行時間為30min，數(shù)據(jù)采集時間為30min ;羅氟司特峰拖尾因子不得超過2. O,羅氟司特峰柱效不低于5000，羅氟司特峰與雜質(zhì)C分離度不低于I. 5 ； 測定法精密稱取羅氟司特工作對照品、羅氟司特雜質(zhì)對照品A、雜質(zhì)對照品B、雜質(zhì)對照品C和雜質(zhì)對照品D各IOmg于同一 IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋到刻度，搖勻，過濾，得100 μ g/mL的對照貯備液，吸取I. OmL對照貯備液于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋到刻度，搖勻，過濾，得含羅氟司特、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D各I. Oyg/mL的溶液，作為對照品溶液；系統(tǒng)適用性溶液同對照品溶液；稱取樣品25mg置50mL容量瓶中，加40mL乙腈，超聲lOmin，不時搖散，再用乙腈稀釋到刻度，搖勻，過濾，即得O. 5mg/mL的樣品溶液；進樣品溶劑乙腈至系統(tǒng)穩(wěn)定后，進樣系統(tǒng)適用性溶液，使所得峰面積RSD不得超過5. 0%，取以上對照溶液10 μ L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰高為滿量程的20%，再取樣品溶液10 μ L，注入液相色譜儀；按外標法計算，計算公式如下 (a)已知雜質(zhì)用已知雜質(zhì)對照峰面積計算
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的羅氟司特原料的檢測方法，其特征在于，對羅氟司特含量進行測定的方法為 采用HPLC法測定羅氟司特的含量； 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以pH 3. O的O. 03M KH2PO4 CH3CN=30 :70為流動相，色譜柱為ALLtimaTM，C18，250X4. 6_，5 μ m，柱溫為30° C，流速為I. OmL/min，檢測波長為220nm，進樣體積為20yL，運行時間為12min，數(shù)據(jù)采集時間為數(shù)據(jù)采集為12min，羅氟司特峰拖尾因子不得超過2. O,羅氟司特峰柱效不低于5000，羅氟司特含量不得少于98. 5% ；測定法精密稱取羅氟司特工作對照品25mg于一 50mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋到刻度，搖勻，過濾，即得500 μ g/mL的對照貯備液，吸取5. OmL對照貯備液于50mL容量瓶中，用50%乙腈稀釋到刻度，搖勻，過濾，作為對照品溶液；系統(tǒng)適用性溶液同對照品溶液；稱取樣品25mg置50mL容量瓶中，加40mL50%乙腈，超聲lOmin，不時搖散，再用樣品溶劑稀釋到刻度，搖勻，過濾，即得500 μ g/mL的樣品貯備液，吸取5. OmL樣品貯備液于50mL容量瓶中，用50%乙腈稀釋到刻度，搖勻，過濾，作為樣品溶液；進樣品溶劑乙腈至系統(tǒng)穩(wěn)定后進樣系統(tǒng)適用性溶液，使所得峰面積RSD不得超過5. 0%，再取以上對照溶液10 μ L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰高約為滿量程的20% ;再取上述樣品溶液10 μ L，注入
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的羅氟司特原料的檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括 (一)性狀本原料藥為白色至類白色粉末； (二)鑒別 (1)有機氟鑒別取本原料藥7mg，參照《中國藥典》2010版二部附錄附錄YDC的氧瓶燃燒法進行檢查，以水20mL與O. OlmoL/L氫氧化鈉溶液6. 5mL為吸收液，待燃燒完畢后，充分振搖；取吸收液2mL，加茜素氟藍試液O. 5mL,再加含12%醋酸鈉的稀醋酸溶液O. 2mL,用水稀釋至4mL，加硝酸亞鈰試液O. 5mL，即顯藍紫色； (2)IR鑒別采用溴化鉀壓片，本原料藥的紅外光吸收圖譜與對照品圖譜一致； (三)檢查 (I)有關(guān)物質(zhì) 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以pH 3. 5的O. 02M KH2PO4 CH3CN=42 :58為流動相，色譜柱為 ALLtimaTM, C18, 250X4. 6mm，5 μ m，柱溫為 30。C，檢測波長為 215nm，流速為 I. OmL/min，進樣體積為10 μ L，運行時間為30min，數(shù)據(jù)采集時間為30min ;羅氟司特峰拖尾因子不得超過2. O,羅氟司特峰柱效不低于5000，羅氟司特峰與雜質(zhì)C分離度不低于I. 5 ； 測定法精密稱取羅氟司特工作對照品、羅氟司特雜質(zhì)對照品A、雜質(zhì)對照品B、雜質(zhì)對照品C和雜質(zhì)對照品D各IOmg于同一 IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋到刻度，搖勻，過濾，得100 μ g/mL的對照貯備液，吸取I. OmL對照貯備液于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋到刻度，搖勻，過濾，得含羅氟司特、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D各I. O μ g/mL的溶液，作為對照品溶液；系統(tǒng)適用性溶液同對照品溶液；稱取樣品25mg置50mL容量瓶中，加40mL乙腈，超聲lOmin，不時搖散，再用乙腈稀釋到刻度，搖勻，過濾，即得O. 5mg/mL的樣品溶液；進樣品溶劑乙腈至系統(tǒng)穩(wěn)定后，進樣系統(tǒng)適用性溶液，使所得峰面積RSD不得超過5. 0%，取以上對照溶液10 μ L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰高為滿量程的20%，再取樣品溶液10 μ L，注入液相色譜儀；按外標法計算，計算公式如下 (a)已知雜質(zhì)用已知雜質(zhì)對照峰面積計算
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羅氟司特原料的制備方法和檢測方法，所述制備方法包括取3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亞砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，發(fā)生酰氯化反應得中間體1，再取3，5-二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氫呋喃和叔丁醇鉀混合，發(fā)生成鹽反應得中間體2的四氫呋喃溶液，后取中間體1、中間體2和四氫呋喃混合，發(fā)生酰胺化反應得羅氟司特粗品，對羅氟司特粗品進行精制即得。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，對羅氟司特原料的制備工藝進行了優(yōu)化，使其對治療COPD等疾病的療效更為顯著，并建立了系統(tǒng)的、完整的、有效的成分鑒別和含量測定方法，可有效控制該藥品的質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
文檔編號C07D213/75GK102964297SQ20121049293
公開日2013年3月13日 申請日期2012年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月27日
發(fā)明者張觀福 申請人:貴州信邦制藥股份有限公司