分離并檢測(cè)羅氟司特及其中間體的方法
【專利摘要】本申請(qǐng)涉及分離并檢測(cè)羅氟司特及其中間體的方法，該方法通過(guò)高效液相色譜法，采用反相色譜柱，以含有離子對(duì)試劑的pH=2-7.5的緩沖液為流動(dòng)相A，以甲醇或乙腈為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm，采用線性梯度洗脫方式進(jìn)行分離及檢測(cè)。
【專利說(shuō)明】分離并檢測(cè)羅氟司特及其中間體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)涉及藥物的分離及檢測(cè)方法，特別是涉及分離并檢測(cè)羅氟司特及其中間體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]歐盟已于2010年7月批準(zhǔn)由Nycomed公司制造的藥物一羅氟司特(rof Iumilast,Daxas)上市，以用于治療慢性阻塞性肺疾病(COPD)。羅氟司特為選擇性磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑，是十多年來(lái)首次獲得歐盟批準(zhǔn)的新一類治療COPD的藥物。
[0003]通常需要經(jīng)過(guò)幾個(gè)關(guān)鍵的中間體合成步驟來(lái)化學(xué)合成羅氟司特。因此，羅氟司特中可能殘留有各種中間體，這會(huì)影響到羅氟司特作為藥物應(yīng)用的質(zhì)量和純度。因此，建立羅氟司特及其中間體的分離檢測(cè)方法以控制其質(zhì)量和純度是非常必要的，其中化學(xué)合成羅氟司特的各個(gè)中間體及羅氟司特的結(jié)構(gòu)如下所示:
[0004]
【權(quán)利要求】
1.分離并檢測(cè)羅氟司特及其中間體的方法，所述方法通過(guò)高效液相色譜法采用線性梯度洗脫方式對(duì)羅氟司特及其中間體進(jìn)行分離并檢測(cè)，其中實(shí)施高效液相色譜法的條件為:色譜柱為反相色譜柱，流動(dòng)相A為含有離子對(duì)試劑的pH=2.0-7.5的緩沖液，流動(dòng)相B為甲醇或乙腈,檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述離子對(duì)試劑為烷基磺酸鹽，優(yōu)選C5-C10烷基磺酸的鈉鹽，更優(yōu)選庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉和癸烷磺酸鈉，最優(yōu)選癸烷磺酸鈉。
3.如權(quán)利要求1-2中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液和醋酸鹽緩沖液，優(yōu)選所述緩沖液中所含的緩沖對(duì)選自磷酸二氫鉀-磷酸、磷酸氫二鉀-磷酸、磷酸二氫鈉-磷酸、磷酸氫二鈉-磷酸和醋酸鈉-醋酸，更優(yōu)選磷酸二氫鉀-磷酸和磷酸二氫鈉-磷酸，最優(yōu)選磷酸二氫鈉-磷酸。
4.如權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的方法，其中在所述流動(dòng)相A中所述離子對(duì)的濃度為1000ml水中含0.2g-4.0g離子對(duì)試劑。
5.如權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述反相色譜柱中使用的填充劑為烷基硅烷的化學(xué)鍵合硅膠，所述烷基硅烷的化學(xué)鍵合硅膠優(yōu)選為十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠，更優(yōu)選為十八烷基硅烷鍵合硅膠。
6.如權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利要求所述的方法，其中采用A、B兩相進(jìn)行所述線性梯度洗脫，按體積百分比計(jì)算，A%+B%=100%，所述線性梯度洗脫方式為(T8min，A%由60-80%變?yōu)?35~40%，8~25min，A% 保持 35~40%，25.0lmin, A% 由 35~40% 變?yōu)?60~80%，25.01 ~40min，A%保持60~80% ;所述線性梯度洗脫方式優(yōu)選為(T8min，A%由80%變?yōu)?0%，8~25min，A%保持40%, 25.0lmin, A% 由 40% 變?yōu)?80%, 25.01 ~40min，A% 保持 80%。
7.如權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述色譜柱的柱溫為20°C-35°C,優(yōu)選為25°C-35°C，更優(yōu)選為30°C。
8.如權(quán)利要求1-7中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述色譜柱的流速為0.6-1.2ml/min,優(yōu)選為 0.8-1.2ml/min,更優(yōu)選為 1.0ml/min。
9.如權(quán)利要求1-8中任一權(quán)利要求所述的方法，其中通過(guò)如下方法配制所述含離子對(duì)試劑的緩沖液:將0.8g~8.0g緩沖鹽與0.2g~4.0g離子對(duì)試劑混合，加水1000ml溶解，并調(diào)節(jié)PH值為2.0-7.5 ;優(yōu)選地，將0.8g~4.0g緩沖鹽與0.6g~2.0g離子對(duì)試劑混合，加水1000ml溶解，并調(diào)節(jié)pH值為2.0-6.0 ;更優(yōu)選地，將1.6g緩沖鹽與離子對(duì)試劑1.2g混合，加水1000ml溶解，并調(diào)節(jié)pH值為2.5。
10.如權(quán)利要求1-9中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述流動(dòng)相A的pH值為2.0-6.0，更優(yōu)選為2.0-3.0，最優(yōu)選為2.5。
11.如權(quán)利要求ι-?ο中任一權(quán)利要求所述的方法，其中將羅氟司特及其中間體溶于甲醇或乙腈中以制成待測(cè)樣品的混合溶液，所述待測(cè)樣品的混合溶液的濃度為每Iml混合溶液中含羅氟司特及其中間體各0.1-1.0mg0
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中將2μ 1-50 μ I的所述待測(cè)樣品的混合溶液注入高效液相色譜儀中。
13.如權(quán)利要求1-12中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述羅氟司特的中間體選自下列物質(zhì)中的一種或多種:3，4- 二羥基苯甲醛、3-羥基-4-( 二氟甲氧基)苯甲醛、3-(環(huán)丙基甲氧基)-4-( 二氟甲氧基)苯甲醛、3-(環(huán)丙基甲氧基)-4-( 二氟甲氧基)苯甲酸、4-氨基-3，5-二氯吡啶。
14.權(quán)利要求1-13中任一權(quán)利要求所述的方法在含有羅氟司特的藥品的質(zhì)量控制和質(zhì)量檢測(cè)中的用途。
15.如權(quán)利要求14所述的用途，其中所述含有羅氟司特的藥品為含有羅氟司特的緩釋劑、控釋劑、片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、粉劑、軟膏劑、硬膏劑、栓劑、噴霧劑、氣霧劑、粉霧劑、乳劑、混懸劑、溶液劑、 針劑、膜劑、或注射劑。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103630613SQ201210299424
【公開(kāi)日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2012年8月21日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月21日
【發(fā)明者】易崇勤, 朱丹, 鄭少輝 申請(qǐng)人:北大方正集團(tuán)有限公司, 方正醫(yī)藥研究院有限公司, 北大國(guó)際醫(yī)院集團(tuán)有限公司