專利名稱：多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物及其合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)非正常細(xì)胞，特別是癌癥細(xì)胞的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
熱休克蛋白(heat shock proteins，Hsps)是1962年由遺傳學(xué)家Ritossa發(fā)現(xiàn)的。這是一類在生物進(jìn)化過程中高度保守并廣泛存在于原核及真核生物中的蛋白質(zhì)。Hsp 是一個(gè)多基因家族，其中不同基因的產(chǎn)物在細(xì)胞中的表達(dá)、功能和定位都有不同。本領(lǐng)域內(nèi)常以分子量的異來區(qū)分該家族成員，比如HSp90、HSp70和Hsp27等。除此之外，還有一部分熱休克蛋白是以相關(guān)糖蛋白來分類的，比如GRP 94和GRP 75。Hsps在機(jī)體內(nèi)作為分子伴侶，參與維持蛋白的正常折疊以形成蛋白的正常結(jié)構(gòu)，并在調(diào)節(jié)蛋白合成與降解的平衡及蛋白定位中起著重要的作用。當(dāng)細(xì)胞受到環(huán)境的各種刺激時(shí)，細(xì)胞內(nèi)熱休克蛋白的表達(dá)增加，能快速短暫地保護(hù)細(xì)胞對(duì)抗內(nèi)源性應(yīng)激的進(jìn)攻，增強(qiáng)細(xì)胞的修復(fù)功能以及提高細(xì)胞對(duì)應(yīng)激的耐受程度。人類很多疾病的發(fā)生與蛋白的錯(cuò)誤折疊相關(guān)。因此開發(fā)調(diào)控分子伴侶的藥物成為一種新的思路?，F(xiàn)有大量文獻(xiàn)表明Hsps與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。有證據(jù)表明，在腫瘤進(jìn)展的不同階段，腫瘤中Hsps的表達(dá)情況也相應(yīng)改變。而且腫瘤細(xì)胞比正常細(xì)胞更容易適應(yīng)周圍的惡劣環(huán)境，這顯然與分子伴侶所起的作用密切相關(guān)。近年來的研究認(rèn)為Hsp90在腫瘤細(xì)胞的存活過程中有非常重要的作用，它是很多癌基因通路中的重要組成部分；熱休克蛋白90 (Hsp90)已成為抗腫瘤的新靶點(diǎn)，并且一些天然產(chǎn)物所具有的抗腫瘤活性正是針對(duì)Hsp90這個(gè)分子靶點(diǎn)。Hsp90及其抑制劑是目前抗腫瘤研究的熱點(diǎn)和前沿。Hsp90的生物學(xué)特性Hsp90是細(xì)胞內(nèi)最活躍的分子伴侶蛋白之一，許多信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的正常功能發(fā)揮都依賴于Hsp90。它在細(xì)胞發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，可以和那些由于環(huán)境刺激而使自身構(gòu)象發(fā)生改變的蛋白相互作用，保證蛋白進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼郫B并防止蛋白非特異性聚集，從而維持細(xì)胞的正?；钚浴４送釮sp90在細(xì)胞突變過程中也是一個(gè)重要的緩沖因子，推測(cè)它可能同樣可以糾正突變蛋白所發(fā)生的錯(cuò)誤折疊。細(xì)胞處于正常生理情況時(shí)，Hsp90同樣是一個(gè)重要的調(diào)節(jié)者。目前所知它調(diào)控著40種左右蛋白的空問結(jié)構(gòu)和突變這些蛋白主要可以分為三類留體激素類受體；絲氨酸/蘇氨酸或酪氨酸激酶；其它蛋白，比如突變型 P53，端粒酶hTERT亞基等。所有這些蛋白都是細(xì)胞生理、生化變化過程中的重要調(diào)控蛋白。 胞漿內(nèi)有Hsp90ct和Hsp9013兩型，GRP94存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，Hsp75 /腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白 1 (tumor necrosis factor receptorassociated proteinl, TRAP1)則存在于線粒體基質(zhì)內(nèi)。現(xiàn)在認(rèn)為這4個(gè)成員的作用方式幾乎是一致的，但因?yàn)樗鼈儽旧碓诩?xì)胞內(nèi)的定位不同，所以它們所結(jié)合的蛋白也各不相同。例如酪氨酸激酶ErbB2受體是GRP94專一的下游蛋白(client protein) , I 型月中瘤壞死因子受體(type I tumour necrosis factor receptor. TNFR1)和視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤蛋白 R(retinoblastoma protein)則是 TRAPl 的下游作用蛋白。Hsp90單體由一個(gè)保守的25 kDa的N—末端和一個(gè)55 kDa的c 一末端通過一個(gè)連接區(qū)(TRAP1不含這個(gè)區(qū))相連而成。這兩端都可以和下游蛋白或其它共同作用的分子伴侶等底物多肽相結(jié)合。此外，N端還有一個(gè)特殊的ATP結(jié)合位點(diǎn)，這個(gè)位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)和Topo II 13的結(jié)構(gòu)類似，是一個(gè)新的核苷酸結(jié)合域。Hsp90發(fā)揮作用依賴于ATP的存在，ATP / ADP結(jié)合部位承擔(dān)著構(gòu)象轉(zhuǎn)換區(qū)的作用，調(diào)節(jié)其參與的多分子伴侶復(fù)合物的裝配。Hsp90處于ADP結(jié)合構(gòu)象時(shí)，Hsp90與p60H0P 形成復(fù)合物以便和Hsp70相結(jié)合。因?yàn)镠sp90的作用蛋白通常和Hsp70 / Hsp40復(fù)合物先結(jié)合，然后再與Hsp90相結(jié)合。當(dāng)ATP取代ADP后，Hsp90發(fā)生構(gòu)象改變，p60H0P和Hsp70 / Hsp40復(fù)合物被釋放，這時(shí)另外一些輔分子伴侶，包括p23，某些親免素或p50cdc37與之結(jié)合，使作用蛋白穩(wěn)定，并處于能夠與配體結(jié)合(如果作用蛋白是留體激素受體)或能對(duì)刺激作出反應(yīng)(例如作用蛋白是一些蛋白激酶)的構(gòu)象狀態(tài)。當(dāng)然這個(gè)轉(zhuǎn)換是一個(gè)動(dòng)態(tài)的、 雙向的過程。當(dāng)ATP水解為ADP，Hsp90的構(gòu)象再次發(fā)生改變，于是它所結(jié)合的輔分子伴侶再次發(fā)生相應(yīng)的轉(zhuǎn)換，所結(jié)合的作用蛋白被釋放并在蛋白酶體的作用下被降解”。20世紀(jì)90年代初，Srivastava證實(shí)從腫瘤細(xì)胞中提得的熱休克蛋白可以導(dǎo)致宿主產(chǎn)生很強(qiáng)的免疫反應(yīng)，這可能是由于這種熱休克蛋白可以作為一些腫瘤抗原的分子伴侶 。Ciocca等在1992年又發(fā)現(xiàn)高表達(dá)Hsps的乳腺癌細(xì)胞對(duì)一些化療藥物有耐受作用。這些結(jié)果都提示Hsps可能是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)中所必需的一些蛋白的分子伴侶。由于Hsp90有很多的下游作用蛋白，可以參與調(diào)節(jié)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，因此其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制也變得十分復(fù)雜。對(duì)于Hsp90作用的研究更多是通過使用它的抑制劑來發(fā)現(xiàn)的。大量的實(shí)驗(yàn)還證明在不同的細(xì)胞株，Hsp90被抑制后其作用效果也有所不同，這與不同腫瘤細(xì)胞具有不同的遺傳背景和生物學(xué)特征相關(guān)。但總的看來，Hsp90抑制劑的抗腫瘤作用譜是十分廣泛的。1992 年，Whitesell 等發(fā)現(xiàn)苯醌安莎霉素類(benzoquinone ansamycins)抗生素在體外和體內(nèi)都能顯示強(qiáng)大的抗腫瘤活性，該效應(yīng)用已知的對(duì)一些酪氨酸激酶的抑制作用難以解釋。深入研究發(fā)現(xiàn)該類抗生素尤其是GA可以專一地與Hsp90結(jié)合，阻礙Hsp90和 ν — Src蛋白聯(lián)結(jié)，從而導(dǎo)致該蛋白不穩(wěn)定，抑制v. Src激酶的活性。該類抑制劑的發(fā)現(xiàn)使 Hsp90成為腫瘤治療的一個(gè)令人振奮的新靶點(diǎn)。目前有的Hsp90抑制劑已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。Geldanamycin (GA)是最早被發(fā)現(xiàn)的Hsp90抑制劑，它的被發(fā)現(xiàn)使得研究Hsp90的生物學(xué)功能，研究依賴Hsp90的蛋白在癌癥發(fā)展中的作用成為可能。GA屬于苯醌安莎霉素類抗生素。這類抗生素在結(jié)構(gòu)上都由一個(gè)苯醌部分和一個(gè)平面性大環(huán)安沙橋相連。它是一個(gè)天然產(chǎn)物，最早是20世紀(jì)70年代從放射菌類肉湯中分離得到的，但直到20世紀(jì)80年代才發(fā)現(xiàn)該化合物具有抗腫瘤活性。它可以逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)染了 ν—Src原癌基因的成纖維細(xì)胞的惡變，在體外實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物體內(nèi)也相繼證實(shí)了它的抗腫瘤活性。最初這類化合物被認(rèn)為是酪氨酸激酶的抑制劑。然而隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)它的抗腫瘤作用的發(fā)揮主要依賴于通過蛋白水解的途徑使那些癌基因蛋白、蛋白激酶失活，而不是直接抑制激酶的催化活性。免疫沉淀和親和力實(shí)驗(yàn)揭示GA的主要作用機(jī)制是通過和Hsp90的結(jié)合實(shí)現(xiàn)的。雖然GA顯示了較好的抗腫瘤活性，但其嚴(yán)重的肝臟毒性使其臨床應(yīng)用受到了限制，然而它獨(dú)特的作用靶點(diǎn)和生物活性仍然引起藥物學(xué)家和生物學(xué)家的重視。目前它更多的作為研究Hsp90體內(nèi)生物學(xué)功能的工具藥，并作為開發(fā)以Hsp90為作用靶點(diǎn)的藥物的先導(dǎo)化合物來被研究。由于Hsp90在維持多種腫瘤蛋白的正常結(jié)構(gòu)、功能和穩(wěn)定性中的重要作用，它已被認(rèn)為是腫瘤治療的一個(gè)新靶點(diǎn)。此外Hsp90在正常組織中的廣泛分布，也為它成為腫瘤治療靶點(diǎn)設(shè)置了障礙。最近體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)腫瘤組織來源的Hsp90與17-AAG的親和力比正常組織來源的Hsp90要高100倍。Kamal等認(rèn)為這是由于腫瘤組織內(nèi)的Hsp90通常和另一些蛋白組成有活性的多伴侶復(fù)合物，且ATP酶的活性也比正常組織內(nèi)的Hsp90要高，而在正常組織內(nèi)Hsp90是以無活性形式存在的。因此該治療靶點(diǎn)的發(fā)掘有可能為腫瘤治療提供一個(gè)特異、有效、副作用少的新方法。Hsp90抑制劑的尋找正成為時(shí)下的研究熱點(diǎn)。苯醌安沙霉素類化合物作為第一代Hsp90抑制劑已經(jīng)進(jìn)入臨床研究，另外還有一些不同結(jié)構(gòu)的天然產(chǎn)物也能顯示出對(duì)Hsp90的抑制作用。但是現(xiàn)有的抑制劑都有較強(qiáng)的毒副作用，限制了其臨床應(yīng)用。此外能否確立合適的給藥方案，也是該類化合物發(fā)揮抗腫瘤效果的制約性因素。因此尋找抗Hsp90生物活性好，毒副作用小的小分子化合物已成為目前研究的方向。 這些熱休克蛋白90抑制化合物的例子包括那些已公布的專利申請(qǐng)內(nèi)的描述，這些專利包括 W02006/071789, W02006/008503, W02006/090094, W02005/021552。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提出一種小分子化合物的主體分子結(jié)構(gòu)及其衍生物、活性強(qiáng)，低毒和副作用小的熱休克蛋白90 (Hsp90)抑制劑——多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物。本發(fā)明的化學(xué)分子式為
權(quán)利要求
1.多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物，其分子式如下
2. 一種如權(quán)利要求1所述多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物的合成方法， 其特征在于包括以下步驟1)合成二乙酯的IH-吡咯-2，4 二羧酸先將異氰基乙酸乙酯和1，8_ 二氮雜雙環(huán)[5. 4. 0]十一碳-7-烯溶解在四氫呋喃中，形成溶液，再向溶液中添加甲醛，并將反應(yīng)混合物在50士0. 5°C環(huán)境下攪拌反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)混合物冷卻至常溫，再用乙酸乙酯分別與飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液萃洗反應(yīng)混合物，合并萃洗后的乙酸乙酯有機(jī)層，經(jīng)脫水干燥、真空濃縮，取得二乙酯的IH -吡咯-2，4 二羧酸；2)合成1-氨基二乙基-IH-吡咯-2，4 二羧酸將二乙酯的IH -吡咯-2，4 二羧酸、氯化銨、甲基三辛基氯化銨、氫氧化鈉水溶液與甲基叔丁基醚混合形成溶劑，在溶劑里添加濃銨，然后再添加漂白水，再將形成的反應(yīng)混合物在室溫條件下攪拌反應(yīng)；反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物過濾，取濾液用乙酸乙酯分別與飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液萃洗，合并萃洗后的乙酸乙酯有機(jī)層，經(jīng)脫水干燥、真空濃縮，取得1-氨基二乙基-IH -吡咯-2，4 二羧酸；3)合成二乙基氨基-4- 4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸將1-氨基二乙基-IH -吡咯-2，4 二羧酸和氯甲脒鹽酸鹽與二甲亞砜在150士0.5°C環(huán)境條件下混合攪拌反應(yīng)；反應(yīng)混合物冷卻至常溫后，用乙酸乙酯分別與飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液萃洗反應(yīng)混合物，合并萃洗后的乙酸乙酯有機(jī)層，經(jīng)脫水干燥、真空濃縮，取得二乙基氨基-4 - 4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品，最后用重結(jié)晶方法純化，取得純化的二乙基氨基-4 - 4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1,2,4]三嗪-6 -羧酸；4)合成乙基-2-{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基} -4 -羥基吡咯并[2，1 - f] 的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸將二乙基氨基-4 - 4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸與二甲基甲酰胺、亞硫酰氯、二氯甲烷混合進(jìn)行回流反應(yīng)；反應(yīng)混合物冷卻至常溫后，用乙酸乙酯分別與飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液萃洗反應(yīng)混合物，合并萃洗后的乙酸乙酯有機(jī)層，經(jīng)脫水干燥、真空濃縮，取得乙基-2 -{(五)_ [ (二甲氨基)亞甲基]氨基} -4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品；再用重結(jié)晶法純化，取得純化的乙基-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基} -4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸；5)合成乙基4-氯-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f] [1,2,4]三嗪-6 -羧酸將乙基-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基} -4 -羥基吡咯并[2，1 - f]的 [1，2，4]三嗪-6 -羧酸和三氯氧磷在100士0.5°C條件下攪拌反應(yīng)，使反應(yīng)混合物的顏色變成了均勻褐色后保溫30分鐘；然后將反應(yīng)混合物迅速冷卻到0°C，然后用NaOH溶液調(diào)整反應(yīng)混合物的PH值至7. 2，過濾后取白色懸浮物，用乙酸乙酯洗凈，取過濾的濾液用鹽水撮取有機(jī)層，再經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得乙基4 -氯-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基] 氨基}吡咯并[2，1 - f][l，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)物；最后用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的乙基4 -氯-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f][l,2,4]三嗪-6 -羧酸；6)合成乙基4- (2，4-二氯-6 -羥基苯基)-2- {(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸將碳酸鈉水溶液與乙基4 -氯-2 -{(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并 [2, 1 - f][l，2，4]三嗪-6 -羧酸、(3，5-二氯-2 -(羥基硼)苯酚)(7)和1，4 二氧雜環(huán)己烷混合，并用氮?dú)獯祾吆笤偌尤胨?三苯基膦)鈀，在80士0. 5°C條件下攪拌反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后冷卻到室溫，然后再加入水形成水混合物，將水混合物用乙酸乙酯萃取，以飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層；然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得乙基4 - (2，4-二氯-6 -羥基苯基)-2- {(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品；最后將乙基4 - (2，4-二氯-6 -羥基苯基)-2- {(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的乙基4 - (2，4-二氯-6 -羥基苯基)-2- {(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸；7)合成二乙基氨基-4- (2，4- 二氯-6 -羥基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4] 三嗪-6 -羧酸將4M鹽酸的二惡烷溶液與乙基4 - (2，4-二氯-6 -羥基苯基)-2- {(五)-[(二甲氨基)亞甲基]氨基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸和甲醇在室溫下攪拌反應(yīng)；取反應(yīng)液經(jīng)真空蒸發(fā)后再用飽和碳酸鈉溶液進(jìn)行中和，再用乙酸乙酯萃取；用飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層，然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得二乙基氨基-4 -(2，4-二氯-6 -羥基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品；最后將二乙基氨基-4 - (2，4- 二氯-6 -羥基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的二乙基氨基-4 - (2，4-二氯-6 -羥基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸；8)合成二乙基氨基-4-{2，4- 二氯-6- [2 -(氫-吡唑-1 -基)乙氧基]苯基} 吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6-羧酸將碳酸鉀和1 - (2-氯乙基)-1Η -吡唑(10)、二乙基氨基-4 - (2，4_ 二氯-6 -羥基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸、二甲基甲酰胺在120士0.5°C條件下攪拌反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后冷卻到室溫，再向反應(yīng)混合物加入水和乙酸乙酯，再攪拌30分鐘， 得到水混合物；取水混合物用乙酸乙酯萃取，以飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層， 然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得二乙基氨基-4- {2，4-二氯-6- [2 -(氫-吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6-羧酸粗產(chǎn)品；最后將二乙基氨基-4- {2，4- 二氯-6- [2 -(氫-吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f] 的[1，2，4]三嗪-6-羧酸粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的二乙基氨基-4- {2，4-二氯-6- [2 -(氫-吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6-羧酸；9)合成2-氨基-4- {2，4- 二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基]苯基} 吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸將氫氧化鈉水溶液與二乙基氨基-4- {2，4-二氯-6- [2 -(氫-吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6-羧酸、乙醇在室溫下攪拌反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后加入鹽酸水溶液，得到PH值為7.0士1的混合物；將混合物用乙酸乙酯萃取，以飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層，然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得2 -氨基-4-{2，4-二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4] 三嗪-6 -羧酸；10)合成2-氨基-N-環(huán)丙基-4 - (2，4-二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基) 乙氧基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -甲酰胺將1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽與2 -氨基-4- {2，4-二氯-6-[2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基]苯基}吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -羧酸、環(huán)丙胺、三乙胺、二甲基甲酰胺在室溫下攪拌反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后用乙酸乙酯萃取，以飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層，然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得2 -氨基-N-環(huán)丙基-4 -(2，4-二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基苯基)吡咯并[2，1 - f]的[1，2，4]三嗪-6 -甲酰胺粗產(chǎn)品；最后將2 -氨基-N-環(huán)丙基-4 - (2，4-二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基苯基)吡咯并[2，1 - f] 的[1，2，4]三嗪-6 -甲酰胺粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的2 -氨基-N-環(huán)丙基-4 - (2，4-二氯-6- [2 -(的IH -吡唑-1 -基)乙氧基苯基)吡咯并[2，1 - f] 的[1，2，4]三嗪-6 -甲酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物合成方法，其特征在于所述3，5- 二氯-2 -(羥基硼)苯酚的合成步驟是1)合成二碘-3，5 -二氯苯酚將對(duì)3，5- 二氯苯酚與無水甲苯混合后在0°C和氮?dú)鈿夥障录尤霘浠c水溶液進(jìn)行反應(yīng)；將反應(yīng)混合物升溫到室溫并攪拌30分鐘，將形成的懸浮液冷卻回0°C，然后加入碘進(jìn)一步反應(yīng)；取最后的反應(yīng)混合物攪拌后置于0°C至室溫的環(huán)境下至少M(fèi)小時(shí)后，依次用鹽酸水溶液淬解、用乙酸乙酯淬取、用乙酸乙酯層分離、用飽和氯化鈉水溶液淬洗，再取淬洗后的有機(jī)層經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得二碘-3，5 - 二氯苯酚粗產(chǎn)品；再將二碘-3，5 -二氯苯酚粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的二碘-3，5 -二氯苯酚；2)合成1，5-二氯-3 -(甲氧基乙氧基)-2 -碘苯將二碘-3，5 -二氯苯酚、氯甲氧基乙烷、碳酸銫和二甲基甲酰胺在室溫下攪拌反應(yīng)；先后用水和鹽水淬洗反應(yīng)后的混合物，取淬洗后的有機(jī)層經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得 1，5_ 二氯-3 -(甲氧基乙氧基)_2 -碘苯粗產(chǎn)品；再將1，5-二氯-3 -(甲氧基乙氧基)_2 -碘苯粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的1，5-二氯-3 -(甲氧基乙氧基)_2 -碘苯；3)合成2- [2，4 - 二氯-6 -(甲氧基乙氧基)苯基]-4，4，5，5 -四甲基_1，3，2 -二氧硼巷將1，5- 二氯-3 -(甲氧基乙氧基)_2 -碘苯和4，4，5，5-甲基-[1，3，2] 二氧硼巷和三乙基胺在二惡烷溶液中用氮?dú)獯祾?0分鐘后，再將醋酸鈀和聯(lián)苯-2 -基-二環(huán)己基膦加入到反應(yīng)混合物中，將反應(yīng)混合物在80°C條件下攪拌反應(yīng)至反應(yīng)結(jié)束；待反應(yīng)混合物冷卻后，用飽和氯化銨溶液、水和鹽水先后淬洗反應(yīng)混合物；取淬洗后的有機(jī)層經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得2 - [2，4 - 二氯-6 -(甲氧基乙氧基)苯基]-4，4，5，5 -四甲基_1，3，2 -二氧硼巷粗產(chǎn)品；再將2 - [2，4 - 二氯-6 -(甲氧基乙氧基)苯基]-4，4，5，5 -四甲基_1，3，2 - 二氧硼巷粗產(chǎn)品用硅膠柱進(jìn)行純化，取得純化的2 - [2，4 - 二氯-6 -(甲氧基乙氧基)苯基]-4，4，5，5 -四甲基-1，3，2 - 二氧硼巷；4)合成3，5-二氯-2 -(羥基硼)苯酚將2 - [2，4 - 二氯-6 -(甲氧基乙氧基)苯基]-4，4, 5,5 -四甲基-1，3，2 - 二氧硼巷和無水二氯甲烷混合后在0°C和氮?dú)夥諊录尤肴寤疬M(jìn)行反應(yīng)；待反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)混合物倒入水中，再加入氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的PH值至10士 1 ；經(jīng)分離， 去除有機(jī)層；以INHCl溶液調(diào)整分離得到的水層溶液的pH值至3，再用乙酸乙酯萃取，以飽和氯化鈉水溶液萃洗萃取后的有機(jī)層，然后經(jīng)脫水干燥和真空濃縮，取得3，5-二氯-2 -(羥基硼)苯酚。
全文摘要
多靶點(diǎn)抗腫瘤抑制劑2-氨吡咯-三嗪的衍生物及其合成方法，涉及治療哺乳動(dòng)物體內(nèi)非正常細(xì)胞的技術(shù)領(lǐng)域。以異氰基乙酸乙酯為起點(diǎn)通過化學(xué)合成法合成，具有合成工藝成熟、生產(chǎn)周期短、對(duì)環(huán)境友好、成本低等優(yōu)越性。產(chǎn)品可應(yīng)用于作為熱休克蛋白質(zhì)類90多靶點(diǎn)抗腫瘤的抑制劑，能夠抑制Hsp90，促使在腫瘤生長(zhǎng)信號(hào)通路中起重要作用的Hsp90效應(yīng)蛋白通過泛素化降解，從而阻斷腫瘤增殖生長(zhǎng)信號(hào)通路的多個(gè)靶點(diǎn)，有效阻止腫瘤的生長(zhǎng)。本發(fā)明與腫瘤細(xì)胞有更高的親和力，可選擇性地殺傷腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)其底物蛋白通過泛素-蛋白酶體通路降解,從而發(fā)揮靶點(diǎn)治療、抗腫瘤的功效，其作用強(qiáng)，副作用小。
文檔編號(hào)C07D487/04GK102153558SQ201110043218
公開日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2011年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月23日
發(fā)明者孟佳倫 申請(qǐng)人:揚(yáng)州永濟(jì)醫(yī)藥新技術(shù)有限公司