專利名稱：一種連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法。
背景技術(shù)：
辛弗林(Syn印hrine)，分子式C9H13N02；分子量167. 20。分子式結(jié)構(gòu)為
<formula>formula see original document page 3</formula>白色結(jié)晶性粉末，mp. 184°C _185°C，鹽酸鹽結(jié)晶熔點151 152°C，易溶于水。辛弗林主要來自蕓香科植物酸橙的干燥幼果。其藥理作用主要表現(xiàn)為升高血壓， 促進脂肪分解，降血脂，具有腎上腺素樣作用。臨床上主要用于治療支氣管哮喘、低血壓、虛 脫及休克、食積不化、胃下垂等，辛弗林還具有提高新陳代謝、增加熱量消耗的作用。目前枳 實提取物作為減肥商品制劑，主要以辛弗林含量為檢測指標(biāo)。青皮中辛弗林含量為0. 44% -0. 55%，陳皮中辛弗林含量為0. 25% -0. 89%。公開號為CN1318538A的中國專利介紹了 “從中藥枳實中提取辛弗林的方法”，它 是將枳實水提醇沉、砂濾，上陽離子樹脂柱，先用水沖洗，再用氨水洗脫，濃縮氨水洗脫液直 接析晶，重結(jié)晶得辛弗林。此法使用陽離子交換樹脂柱，易發(fā)生消旋化，降低辛弗林的生理 活性。公開號為CN101390975A的中國專利將柑橘果皮貨未成熟的柑橘果實干燥粉碎后 用超臨界流體作為萃取介質(zhì)進行萃取，生產(chǎn)設(shè)備投資高，運營成本高，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。公開號為CN101402577A的中國專利公開了“從個青皮中提取分離左旋-辛弗林的 方法”，用15% -45%乙醇65°C回流提取兩次，濃縮后上D101大孔樹脂吸附，15%乙醇洗脫， 減壓濃縮，噴霧干燥得左旋-辛弗林粗品，純乙醇溶解，硅膠柱分離純化，減壓濃縮、噴霧干 燥。該方法洗脫時間長，仍有部分辛弗林消旋化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法。為了達到上述目 的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括以枳實、青皮、陳皮為原料，將原料用酸水浸泡，微波輔助 提取2-4次，過濾，然后加入堿水調(diào)節(jié)pH至9-10，再用氯仿萃取，棄去氯仿層，堿水層濃縮至 干，得上柱樣品，使用中壓氧化鋁填充柱，將氧化鋁用氯仿分散后濕法裝柱，流動相溶解樣 品，以氯仿-甲醇-氨水混合溶液為洗脫劑，收集含辛弗林流分，無水硫酸鈉干燥，干燥后的 有機溶劑減壓濃縮，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，乙醚-乙醇重結(jié)晶，結(jié)晶產(chǎn)物經(jīng)冷凍或噴霧干燥， 可獲得高純度辛弗林。使用后的層析柱用甲醇再生，氯仿平衡后可重復(fù)使用。填充氧化鋁粒徑為200-400目，每次上柱所用的樣品質(zhì)量與柱中氧化鋁質(zhì)量之比在 1 15-1 50 之間，柱壓為 0. l-5MPa。所用的酸為0. 1-1%鹽酸溶液，液料比為6 1-15 l(L/kg)。所用的堿為氨水或碳酸氫鈉溶液。洗脫劑為氯仿-甲醇混合溶液，體積比為2-4 5-8。分段收集的流分含量高于65%的進入結(jié)晶過程，含量低于65%的按照上述分離 方法重新上樣分離。重結(jié)晶所用溶劑乙醚和乙醇的體積比為1:1-1: 6。結(jié)晶干燥方法可選冷凍干燥或噴霧干燥中的一種。綜上所述，本發(fā)明的優(yōu)點是1、本發(fā)明改變了傳統(tǒng)的生產(chǎn)工藝，本法的層析柱可重復(fù)使用。2、純化過程無污染，溶劑可回收利用，便于工業(yè)連續(xù)化生產(chǎn)。3、生產(chǎn)周期短，最大限度保留了辛弗林的生理活性。
具體實施例方式實施例1 將枳實粉碎，磨成細(xì)粉，稱取1kg枳實細(xì)粉，加入6L0. 1 %鹽酸溶液浸泡2小時，微 波提取3次，每次20分鐘，合并提取液，加入氨水溶液調(diào)pH至9，過濾，加入等體積氯仿萃 取，棄去氯仿層，減壓濃縮堿水液至干。將200-300目堿性氧化鋁15kg用氯仿混懸后，驅(qū)除 氣泡，加入玻璃層析柱中，上述濃縮至干的辛弗林粗品加入1.5L氯仿-甲醇(4 8)溶解， 濾出不容物后用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然后泵入氯仿-甲醇(4 8)洗脫，分段收集流 分，TLC和HPLC監(jiān)測，合并含量65%以上的流出液，加無水硫酸鈉干燥，干燥后的洗脫劑減 壓濃縮，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，粗晶再用乙醚-乙醇(1 3)重結(jié)晶2次，減壓過濾，冷凍干 燥，得4. 3g辛弗林純品，純度95. 3%。含量65%以下的流出液減壓回收試劑后得濃縮物作 為下次柱層析的原料，回收的洗脫劑經(jīng)薄層層析校正后下次重復(fù)使用。實施例2 將青皮粉碎，磨成細(xì)粉，稱取5kg青皮細(xì)粉，加入50L1%鹽酸溶液浸泡1. 5小時，微 波提取2次，每次15分鐘，合并提取液，加入碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至10，過濾，加入等體積氯 仿萃取，棄去氯仿層，減壓濃縮堿水液至干。將250-400目堿性氧化鋁75kg用氯仿混懸后， 驅(qū)除氣泡，加入玻璃層析柱中，上述濃縮至干的辛弗林粗品加入8L氯仿-甲醇(3 6)溶 解，濾出不容物后用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然后泵入氯仿-甲醇(3 6)洗脫，分段收集 流分，TLC和HPLC監(jiān)測，合并含量65%以上的流出液，加無水硫酸鈉干燥，干燥后的洗脫劑 減壓濃縮，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，粗晶再用乙醚-乙醇(1 2)重結(jié)晶3次，減壓過濾，冷凍 干燥，得30. 2g辛弗林純品，純度96.5%。含量65%以下的流出液減壓回收試劑后得濃縮 物作為下次柱層析的原料，回收的洗脫劑經(jīng)薄層層析校正后下次重復(fù)使用。實施例3 將陳皮粉碎，磨成細(xì)粉，稱取10kg陳皮細(xì)粉，加入65L0. 5%鹽酸溶液浸泡1小時， 微波提取3次，每次10分鐘，合并提取液，加入氨水溶液調(diào)pH至9，過濾，加入等體積氯仿 萃取，棄去氯仿層，減壓濃縮堿水液至干。將300-400目堿性氧化鋁200kg用氯仿混懸后， 驅(qū)除氣泡，加入玻璃層析柱中，上述濃縮至干的辛弗林粗品加入15L氯仿-甲醇(1 7)溶解，濾出不容物后用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然后泵入氯仿-甲醇(1 7)洗脫，分段收集 流分，TLC和HPLC監(jiān)測，合并含量65%以上的流出液，加無水硫酸鈉干燥，干燥后的洗脫劑 減壓濃縮，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，粗晶再用乙醚-乙醇(1 5)重結(jié)晶3次，減壓過濾，冷凍 干燥，得37. 8g辛弗林純品，純度96. 2%。含量65%以下的流出液減壓回收試劑后得濃縮 物作為下次柱層析的原料，回收的洗脫劑經(jīng)薄層層析校正后下次重復(fù)使用。
權(quán)利要求
一種連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，本方法以枳實、青皮、陳皮為原料制備辛弗林。將原料用酸水浸泡，微波輔助提取2-4次，過濾，然后加入堿水調(diào)節(jié)pH至9-10，再用氯仿萃取，棄去氯仿層，堿水層濃縮至干，得上柱樣品，使用中壓氧化鋁填充柱，將氧化鋁用氯仿分散后濕法裝柱，流動相溶解樣品，以氯仿-甲醇混合溶液為洗脫劑，收集含辛弗林流分，無水硫酸鈉干燥，干燥后的有機溶劑減壓濃縮，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，乙醚-乙醇重結(jié)晶，結(jié)晶產(chǎn)物經(jīng)冷凍或噴霧干燥，可獲得高純度辛弗林。
2.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于填充氧化 鋁粒徑為200-400目，每次上柱所用的樣品質(zhì)量與柱中氧化鋁質(zhì)量之比在1 15-1 50 之間，柱壓為0. l-5MPa。
3.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于所用的酸 為0. 1-1%鹽酸溶液，液料比為6 1-15 l(L/kg)。
4.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于所用的堿 為氨水或碳酸氫鈉溶液。
5.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于洗脫劑為 氯仿-甲醇混合溶液，體積比為2-4 5-8。
6.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于分段收集 的流分含量高于65%的進入結(jié)晶過程，含量低于65%的按照上述分離方法重新上樣分離。
7.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于重結(jié)晶所 用溶劑乙醚和乙醇的體積比為1:1-1: 6。
8.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，其特征在于結(jié)晶干燥 方法可選冷凍干燥或噴霧干燥中的一種。
全文摘要
一種連續(xù)中壓柱層析制備辛弗林的方法，本方法以枳實、青皮、陳皮為原料，酸水浸泡，微波輔助提取2-4次，過濾，堿水調(diào)節(jié)pH9-10，有機溶劑萃取，棄去有機溶劑層，堿液層濃縮干燥得上柱樣品；使用中壓氧化鋁填充柱，濕法裝柱，洗脫劑溶樣，氯仿-甲醇為洗脫劑，收集含辛弗林流分，回收洗脫劑，靜置結(jié)晶，濾出結(jié)晶，乙醚-乙醇重結(jié)晶，干燥結(jié)晶產(chǎn)物可獲得高純度辛弗林。
文檔編號C07C213/10GK101805267SQ201010156110
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月27日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司