專利名稱：：α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其抑瘤活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其在抗腫瘤治療中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：2003年，美國專利(US20030171357A1)公開了一系列可用作蛋白激酶抑制劑的3-氨基吡唑化合物，尤其相關(guān)文獻(xiàn)[P.Pevarello,etal.J.Med.Chem.2004，47(13)，3367-3380]；P.Pevarello,etal.Bioorg.Med.Chem.Lett.2006,16,1084-1090；DanieleFancelli,etal.J.Med.Chem.2005，48，3080-3084]中發(fā)現(xiàn)其作為CDK2抑制劑，可有效地抑制腫瘤細(xì)胞的惡性生長，且對CDK2有很好的選擇性。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclindependentkinase，⑶K)是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，它決定著細(xì)胞周期是否有序進(jìn)行，其只有與相應(yīng)的細(xì)胞周期蛋白結(jié)合后才具有活性。主要有七種CDK(CDK17)，在整個(gè)細(xì)胞周期中的含量基本上是穩(wěn)定的。與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切的主要有CDK2、CDK4和CDK6，它們在腫瘤細(xì)胞中常常有擴(kuò)增和過表達(dá)的現(xiàn)象。其中⑶K2可分別由cyclinE和cyclinA激活，使細(xì)胞通過G1/S期檢驗(yàn)點(diǎn)進(jìn)入并通過S期，是促進(jìn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的關(guān)鍵性調(diào)控蛋白。腫瘤的發(fā)生與G1/S期檢驗(yàn)點(diǎn)失控密切相關(guān)，目前發(fā)現(xiàn)，⑶K2、CyClinE、CyClinA的過表達(dá)與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，抑制CDK2的活性能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長。1988年，日本專利(JP63017870A)公開了一系列鹵代萘磺酰胺類化合物，其中ML-7、ML-9等是肌球蛋白輕鏈激酶的特異性抑制劑[MasahiroSaitoh,etal.JBiolChem.1987，262(16)，7796-7801]。肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)是三磷酸肌醇(IP3)、Ca2+_鈣調(diào)蛋白(CaM)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的一種重要蛋白質(zhì)，能促使肌球蛋白輕鏈(MLC，myosinlightchain)磷酸化。肌球蛋白輕鏈磷酸化調(diào)節(jié)肌球蛋白的收縮，參與諸如細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、粘附、組織修復(fù)、癌癥轉(zhuǎn)移和疾病發(fā)生等重要的生命活動(dòng)。ML-7不但對細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)十分重要，20052006年美國學(xué)者還發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)的胸腺癌和前列腺癌細(xì)胞系中，ML-7可以誘導(dǎo)細(xì)胞自殺或者程序性死亡(Lian-ZhiGu,etal.MolCellBiol,2006,42948-957；FazalF,etal.MolCellBiol,2005,25:6259_6266)，ML-7與治療固體腫瘤的依托泊苷(etoposide)混用治療癌細(xì)胞，可提升依托泊苷殺死癌細(xì)胞的能力，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，活體對ML-7似乎有較高耐受度，且其本身在活體中沒有明顯的毒副作用。由于腫瘤細(xì)胞的生長不僅依賴于快速的細(xì)胞分裂及癌細(xì)胞的活動(dòng)力，而且還須高度依賴于細(xì)胞骨架?；谏鲜鰞煞N激酶抑制劑的抑瘤特點(diǎn)，本發(fā)明設(shè)計(jì)并合成出一系列α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類全新化合物，均能雙靶點(diǎn)作用于腫瘤細(xì)胞生長的增殖和轉(zhuǎn)移雙環(huán)節(jié)，其中許多化合物在細(xì)胞水平上優(yōu)于ML-7陽性對照試劑盒。本發(fā)明所述的α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其在抗瘤方面的新用途，迄今尚未見有國內(nèi)外的相關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是，提供具有抑瘤活性的α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物。本發(fā)明的另一目的是，提供α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物的異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物。本發(fā)明所說α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物的結(jié)構(gòu)如式(1)所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式中η=ι或2；R1獨(dú)立代表H、F、Cl、Br、I；R2獨(dú)立代表H或者R4、-COR4,-COOR4、-CONHR4、-CONR4R5、-NH-C(=NH)NHR4,-C(=NH)NHR4,-SO2R4,-SO2NHR4,-SO2NR4R5，其中R4和R5各自獨(dú)立代表氫原子或者任選被C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C4-C6鏈烯基、C4-C6鏈炔基、芳基、雜芳基取代；A代表0或NR;R獨(dú)立代表氫原子或者R3、-COR3、-SO2R3，其中R3獨(dú)立代表C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基或者C2-C4炔基、C4-C10環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基，每個(gè)C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基或者C2-C4炔基、C4-C10環(huán)烷基烷基任選被13個(gè)獨(dú)立選自下列取代基取代=C1-C4烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-NR6COR8、-NR6COOR9、COR8、-OR9、-CONR6R7、-CO(NOR8)R9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；芳基為苯基或萘基，每個(gè)任選被15個(gè)獨(dú)立選自下列的取代基取代=C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-CONR6R7、-NR6COR8、-OR9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；雜芳基為吡啶基、嘧啶基、三嗪基、呋喃基、吡喃基、喹啉基、異喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、惡唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、異惡唑基、吡唑基、2，3-二氫苯并噻吩基或2，3-二氫苯并呋喃基，每個(gè)任選被15個(gè)獨(dú)立選自下、下列的取代基取代=C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-CONR6R7、-NR9COR8、-OR9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；R6,R7,R8,R9各自獨(dú)立代表氫原子或者C「C6烷基或苯基。通式(I)的化合物以幾何學(xué)和光學(xué)異構(gòu)體存在，并且所有異構(gòu)體為分離的、純的或部分純化的立體異構(gòu)體或其外消旋混合物。通式(I)的化合物可選擇性地以藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，金屬鹽或者選擇性烷基化銨鹽存在，包括無機(jī)和有機(jī)的酸加成鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、琥珀酸鹽、延胡索酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、扁桃酸鹽、草酸鹽或者類似的藥學(xué)上可接受的無機(jī)或者有機(jī)酸加成鹽，也可按常規(guī)轉(zhuǎn)化方法制備它們的堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽、鋇鹽等。本發(fā)明具體包括以下化合物，以及它們的異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物1)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；2)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；3)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；4)N-{5-[(N-苯基氨基)甲酰基]_4，6_二氫-IH-卩比咯[3，4_c]口比唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；5)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-ι-磺酰胺；6)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘-ι-磺酰胺；7)N-{5-乙酰基-4,6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}-萘磺酰胺；8)N-{5-乙?；?4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺；9)N-{5-乙?；?4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺；10)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；11)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；12)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；13)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；14)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_氯萘-ι-磺酰胺；15)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_碘萘-ι-磺酰胺；16)N-{5-乙?；?4,6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}-萘磺酰胺；17)N-{5-乙?；?4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺；18)N-{5-乙?；?4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺；19)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；20)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；21)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；22)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-萘-1-磺酰胺；23)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；24)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；25)N-{5-乙?；?4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}-萘磺酰胺；26)N-{5-乙?；?4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺；27)N-{5-乙酰基-4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺；28)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫-IH-吡唑[4，3_c]口比啶-3-基}_萘-1-磺酰胺；29)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫-IH-吡唑[4，3_c]口比啶-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；30)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫-IH-吡唑[4，3_c]口比啶-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；31)N-{5-[(N-苯基氨基)甲酰基]_4，6，7_三氫-IH-吡唑[4，3_c]口比啶-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺；32)N-{5-乙?；?4，6，7-三氫-IH-吡唑[4，3_c]吡啶_3_基}_5_碘萘磺酰胺；33)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫異惡唑[4，3_c]吡啶-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；34)N-{5-[(N-苯基氨基]甲?；鵠_4，6，7_三氫異惡唑[4，3_c]吡啶-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；35)N-{5-乙?；?4，6，7-三氫異惡唑[4，3_c]吡啶_3_基}_5_碘萘磺酰胺；36)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫_2_甲基吡唑[4，3_c]吡啶-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；37)N-{5-[(N-苯基氨基)甲酰基]_4，6，7_三氫_2_甲基吡唑[4，3_c]吡啶-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺；38)N-{5-乙?；?4，6，7-三氫-2-甲基吡唑[4，3_c]吡啶_3_基}_5_碘萘磺酰胺；實(shí)施方案以下實(shí)施例僅為幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明?！磳?shí)施例1>Ν-{5-[(Ν-正丁基氨基)甲酰基]-4，6-二氫-IH-吡口各[3，4_c]口比唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺(a)3-氨基-4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_5_羧酸叔丁基酯的制備N2保護(hù)下，將1-叔丁氧羰基-3-氰基-4-吡咯烷酮9.Og,0.043mol(合成方法參見DanieleFancelli,etal.J.Med.Chem.2005，48，3080-3084)、鹽酸胼(4.5g，0.0428mol)和乙醇(250mL)的混合物于60°C攪拌反應(yīng)3h后，冷卻至0°C緩慢滴加飽和的碳酸氫鈉水溶液600mL，繼續(xù)攪拌30min后，將所得反應(yīng)液減壓旋蒸除去大部分的乙醇和水，剩余液用乙酸乙酯(300mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液蒸除溶劑得到淡黃色粗品，經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=61)，真空干燥得白色粉末狀固體3.5g，收率36%。1HNMR(400MHz,DMS0-d6)δppm1.42(9H,s),4.12(4Η,m),5.03(2Η,brs)，11.18(1Η,brs)。MS(ESI，m/z):225·6(M++1,100%)(b)1-乙氧羰基-5-叔丁氧羰基-3-氨基-4，6-二氫吡咯[3，4_c]吡唑的制備取氯甲酸乙酯(8.9mL,93mmol)于250mL四氫呋喃中，于0_5°C下緩慢滴加至實(shí)施例1步驟(a)的產(chǎn)物(20g,89mmol)與DIEA(92mL，528mmol)的500mL四氫呋喃溶液中，保持0-5°C2小時(shí)，允許升至室溫，攪拌過夜。所得混合物旋干，殘余物用乙酸乙酯(200mL)溶解，水洗，有機(jī)層無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=101)，真空干燥得白色粉末狀固體18g，收率68%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm1.26,1.27(3H,2t,J=7.2Hz,rotamers),1.44(9H,s)，4.14-4.20(2Η,m)，4.26(2H,q,J=7.2Hz)，4.44-4.47(2H,m)，5.69(2H,s)。MS(ESI，m/z)297(M++1,100%)(c)N-{5-叔丁氧羰基-4，6-二氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-1-磺酰胺的制備將5-氯-1-萘磺酰氯(2.72g，10.5mmol)溶于40mL的無水乙腈中，N2保護(hù)，緩慢滴加至實(shí)施例1步驟(b)產(chǎn)物(2.79g，9.44mmol)、30mL的無水吡啶和60mL無水乙腈混合物中，4560°C反應(yīng)6小時(shí)，旋干，二氯甲烷(IOOmL)萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=101)真空干燥得白色粉末狀固體3.28g，收率60%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm1·26，1·27(3H,2t，J=7.2Hz，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，I.42(9H,s)，4.10-4.20(2H,m)，4.26(2H,q,J=7.2Hz)，4.44-4.47(2H,m)，7.75-7.84(1H,m)，7.89(1H,s)，7.91(1H,s)，8.27-8.28(1H,m)，8.52-8.55(1H,m)，8.68-8.72(1H,m)，II.96，12.04(1H，2s，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)。MS(ESI，m/z):521·3(M++l，100%)。(d)N-{4，5，6-三氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺鹽酸鹽的制備將實(shí)施例1步驟(c)產(chǎn)物(3.Og,5.8mmol)溶于60mL干燥的二氯甲烷中，通鹽酸氣35小時(shí)，有大量白色沉淀生成，抽濾，二氯甲烷(20mL)洗滌，濾餅真空干燥得2.60g,收率98%。MS(ESI，m/z):421·2(M++1，100%)。(e)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫乙氧羰基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺的制備將異氰酸正丁酯(0.62g，6.2mmol)的二氯甲烷(5mL)混合液滴加入實(shí)施例1步驟(d)的產(chǎn)物(2.Og,4.8mmol)的二氯甲烷(40mL)和DIEA(3.72g，28.8mmol)的懸浮液中，室溫?cái)嚢?8小時(shí)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干，真空干燥，得白色粉末狀固體1.95g，收率78%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·82(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.22(2Η,m)，1.40(2Η,m)，3.11(2H,m)，4.11-4.38(3H,m)，6.25(1H,s)，7.78-7.87(1H,m)，7.89(1H,s)，7.92(1H,s)，8.30-8.33(1H,m)，8.51-8.52(1H,m)，8.71-8.73(1H,m)，11.21(1H,2s)。MS(ESI,m/z):521(M++1，100%)。(f)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺的制備將三乙胺的10%甲醇溶液22mL與實(shí)施例1步驟(e)的產(chǎn)物(1.9g，3.7mmol)的混合液于30°C下攪拌3小時(shí)，減壓旋干，殘留物加乙醚研磨，抽濾，乙醚(40mL)洗滌，真空干燥得到白色粉末狀固體化合物2)0.91g，收率55%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·84(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.26(2Η,m)，1.40(2Η,m)，3.08(2H,m)，4.15(1H,s)，4.24(1H,s)，6.23(1H,s)，7.68-7.79(1H,m)，7.86(1H,s)，7.88(1H，s)，8.24-8.26(1H，d)，8.47-8.49(1H,d)，8.68-8.70(1H，d)，10.97(1H,s)，12.25(1H,s)。MS(ESI，m/z)448.3(M++1，100%)?！磳?shí)施例2>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-萘-1-磺酰胺(a)N-{5-叔丁氧羰基_4，6_二氫乙氧羰基卩比咯[3，4_c]吡唑-3-基}-萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(C)的方法，用實(shí)施例1步驟(b)的產(chǎn)物和1-萘磺酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率69%。MS(ESI，m/z)487(M++1，100%)。(b)N-{4，5，6-三氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}-萘磺酰胺鹽酸鹽的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(d)的方法制備，用實(shí)施例2步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率100%。MS(ESI，m/z)387(M++1，100%)。(c)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法制備，用實(shí)施例2步驟(b)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率72%。(d)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(f)的方法制備，用實(shí)施例2步驟(C)的產(chǎn)物制備，得到化合物1)，為白色粉末狀，收率58%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·85(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.24(2Η,m)，1.38(2Η,m)，3.03(2H,m)，4.20(2H,s)，4.25(2H,s)，6.20(1H,s)，7.32-7.60(1H,m)，7.67(1H,s)，7.70(1H,s)，8.21-8.24(1H,d)，8.40-8.43(1H,d)，8.63-8.65(1H,d)，10.07(1H,s)。MS(ESI,m/z):414(M++1，100%)?！磳?shí)施例3>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺(a)N-{5-叔丁氧羰基-4，6-二氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(c)的方法，用實(shí)施例1步驟(b)的產(chǎn)物和5-碘-1-萘磺酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率50%。MS(ESI,m/z):613·3(M++1，100%)。(b)N-{4，5，6-三氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺鹽酸鹽的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(d)的方法制備，用實(shí)施例3步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率100%。MS(ESI,m/z):513·2(M++1，100%)。(c)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法制備，用實(shí)施例3步驟(b)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率76%。MS(ESI,m/z):612(M++1，100%)。(d)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(f)的方法制備，用實(shí)施例3步驟(c)的產(chǎn)物制備，得到化合物3)，為白色粉末狀，收率60%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·83(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.26(2Η,m)，1.39(2Η,m)，3.01(2H,m)，4.22(2H,s)，4.24(2H,s)，6.23(1H,s)，7.22-7.35(1H,m)，7.42(1H,s)，7.58(1H,s)，7·90-7.92(1H,d),8.12-8.15(1H,d),8.29-8.33(1H,d)，11.07(1H,s)。MS(ESI，m/z)540(M++1，100%)。〈實(shí)施例4>N-{5_[(N-苯基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺(a)N-{5-[(N_苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法，用實(shí)施例1步驟(d)的產(chǎn)物和異氰酸苯酯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率71%。MS(ESI，m/z):541(M++1，100%)。(b)N-{5-[(N-苯基氨基)甲?；鵠-4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(f)的方法制備，用實(shí)施例4步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到化合物5)，為白色粉末狀，收率65%。IHNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm4.21(2H,s),4.28(2Η,s),6.30(1Η,s)，6.44(1H,d)，6.59(1H,s)，7.66-7.75(1H,m)，7.83(1H,s)，7.86(1H,s)，8.24-8.27(1H,d)，8.45-8.47(1H,d)，8.64-8.69(1H,d)，10.89(1H,s)，12.00(1H,s)。MS(ESI，m/z)469(M++1，100%)?！磳?shí)施例5>N-{5-乙?；?4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-1-磺酰胺(a)N-{5-乙?；?4，6-二氫-1-乙氧羰基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法，用實(shí)施例1步驟(d)的產(chǎn)物和乙酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率85%。MS(ESI，m/z)464(M++1，100%)。(b)N-{5-乙?；?4，6-二氫-IH-吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(f)的方法制備，用實(shí)施例5步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到化合物8)，為白色粉末狀，收率61%。1HWR(400MHz，DMS0-d6)δppm2.08(3H,s),4.25(2H,s),4.34(2H,s),6.20(1H,s)，7.66-7.70(1H,m)，7.82(1H,s)，7.85(1H,s)，8.21-8.23(1H,d)，8.50-8.53(1H,d)，8.69-8.72(1H,d)，10.95(1H,s)，12.15(1H,s)。MS(ESI，m/z):391(M++1，100%)?！磳?shí)施例6>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺(a)3-氨基-4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_5_羧酸叔丁基酯的制備N2保護(hù)下，將1-叔丁氧羰基-3-氰基-4-吡咯烷酮(9.Og,0.043mol)、鹽酸羥氨(3.03g,0.043mol)和乙醇(250ml)的混合物于60°C攪拌反應(yīng)3h，后冷卻至0°C緩慢滴加飽和的碳酸氫鈉水溶液600mL，繼續(xù)攪拌30min后，將所得反應(yīng)液減壓旋蒸除去大部分的乙醇和水，剩余液用乙酸乙酯(300mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，抽濾，濾液蒸除溶劑，粗品經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=61)，真空干燥得白色粉末狀固體2.9g，收率30%。MS(ESI，m/z)226(M++1,100%)(b)N-{5-叔丁氧羰基-4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺的制備將5-氯-1-萘磺酰氯(2.72g，10.5mmol)溶于40mL的無水乙腈中，N2保護(hù)，緩慢滴加至實(shí)施例6步驟(a)產(chǎn)物(2.41g，9.44mmol)、30mL的無水吡啶和60mL無水乙腈混合物中，4560°C反應(yīng)6小時(shí)，旋干，二氯甲烷(IOOmL)萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=101)，真空干燥得白色粉末狀固體2.12g，收率45%。MS(ESI，m/z):451(M++1，100%)。((川-{4，6-三氫-5!1-吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺鹽酸鹽的制備將實(shí)施例6步驟(b)產(chǎn)物(2.Og,4.4mmol)溶于60mL干燥的二氯甲烷中，通鹽酸氣35小時(shí)，有大量白色沉淀生成，抽濾，二氯甲烷洗滌，濾餅真空干燥得1.7g，收率100%。MS(ESI，m/z)350(M++1，100%)。(d)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲酰基]-4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備將異氰酸正丁酯(0.34g，3.4mmol)的二氯甲烷(5mL)混合液滴加入實(shí)施例6步驟(c)的產(chǎn)物(1.0g,2.9mmol)的二氯甲烷(20mL)和DIEA(2.25g，17.4mmol)的懸浮液中，室溫?cái)嚢?8小時(shí)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干，真空干燥，得白色粉末狀固體化合物11)1.17g，收率77%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm0.90(3H,t,J=7.2Hz),1.27(2Η,m)，1·41(2Η，m)，3.05(2H,m)，4.22(2H,s)，4.37(2H,s),6.31(1H,s)，7.69-7.80(1H,m)，7.84(1H,d)，7.87(1H,d)，8.23-8.25(1H,m)，8.49-8.51(1H,m)，8.69-8.73(1H,m)，10.91(1H,2s)。MS(ESI，m/z)450(M++1，100%)。〈實(shí)施例7>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺(a)N-{5-叔丁氧羰基-4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例6步驟(b)的方法，用實(shí)施例6步驟(a)的產(chǎn)物和5_碘萘磺酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率43%。MS(ESI，m/z):542(M++1，100%)。(13川-{4，6-三氫-5!1-吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺鹽酸鹽的制備根據(jù)實(shí)施例6步驟(c)的方法制備，用實(shí)施例7步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率100%。MS(ESI，m/z)442(M++1，100%)。(c)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫卩比咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5_碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例6步驟(d)的方法制備，用實(shí)施例7步驟(b)的產(chǎn)物制備，得到化合物12)，為白色粉末狀，收率74%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·90(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.27(2Η,m)，1.41(2Η,m)，3.05(2H,m)，4.22(2H,s)，4.37(2H,s)，6.31(1H,s)，7.24-7.36(1H,m)，7.45(1H,d)，7.61(1H,d)，7.91-7.94(1H,m)，8.14-8.17(1H,m)，8.31-8.34(1H,m)，10.96(1H,2s)。MS(ESI，m/z):541(M++1，100%)?！磳?shí)施例8>N-{5_[(N-苯基氨基)甲酰基]_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺根據(jù)實(shí)施例6步驟(d)的方法，用實(shí)施例6步驟(c)的產(chǎn)物和異氰酸苯酯反應(yīng)制備，得到化合物14)，為白色粉末狀，收率71%。IHNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm4.22(1H,s),4.31(1Η,s),6.30(1Η,s)，6.43(1Η,d)，6.58(1H,s)，7.67-7.78(1H,m)，7.83(1H,s)，7.87(1H,s)，8.25-8.28(1H,d)，8.46-8.48(1H,d),8.67-8.70(1H,d)，11.01(1H,s)，12.13(1H,s)。MS(ESI，m/z)470(M++1,100%)〈實(shí)施例9>N-{5_[(N-苯基氨基)甲酰基]_4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺根據(jù)實(shí)施例6步驟(d)的方法，用實(shí)施例7步驟(b)的產(chǎn)物和異氰酸苯酯反應(yīng)制備，得到化合物15)，為白色粉末狀，收率69%。IHNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm4.22(1H,s),4.31(1Η,s),6.30(1Η,s)，6.43(1Η,d)，6.58(1H,s)，7.22-7.35(1H,m)，7.42(1H,s)，7.58(1H,s)，7.92-7.95(1H,d)，8.12-8.15(1H,d),8.31-8.34(1H,d)，11.07(lH，2s)。MS(ESI，m/z):561(M++1，100%)。<實(shí)施例10>N-{5-乙酰基-4，6_二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法，用實(shí)施例6步驟(C)的產(chǎn)物和乙酰氯反應(yīng)制備，得到化合物17)，為白色粉末狀，收率86%。1HWR(400MHz，DMS0-d6)δppm2.07(3H,s),4.21(2H,s),4.33(2H,s),6.21(1H,s),7.65-7.69(1H,m),7.81(1H,s),7.83(1H,s)，8.27-8.30(1H,d)，8.51-8·53(1H，d)，8.69-8.71(1H,d)，10.90(1H,s)，12.10(1H,s)。MS(ESI，m/z)392(M++1，100%)。<實(shí)施例1DN-{5-乙酰基-4，6-二氫吡咯[3，4_c]異惡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法，用實(shí)施例7步驟(b)的產(chǎn)物和乙酰氯反應(yīng)制備，得到化合物18)，為白色粉末狀，收率89%。1HWR(400MHz，DMS0-d6)δppm2.02(3H,s),4.20(2H,s),4.23(2H,s),6.24(1H,s)，7.20-7.35(1H,m)，7.41(1H,s)，7.59(1H,s)，7.90-7.92(1H,d)，8.12-8.15(1H，d)，8.29-8.33(1H,d)，12.07(1H,s)。MS(ESI，m/z)484(M++1，100%)?！磳?shí)施例12>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲酰基]_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺(a)3-氨基-4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_5_羧酸叔丁基酯的制備N2保護(hù)下，將1-叔丁氧羰基-3-氰基-4-吡咯烷酮(10.5g，0.05mol)、40%甲基胼水溶液(5.8g，0.05mol)和乙醇(150mL)的混合物于室溫?cái)嚢璺磻?yīng)20h。反應(yīng)完畢蒸干溶齊IJ，所得殘余物溶于二氯甲烷(30mL)，用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=101)，真空干燥得白色固體4.76g，收率40%。MS(ESI，m/z)239(M++1,100%)(b)N-{5-叔丁氧羰基_4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-1-磺酰胺的制備將5-氯-1-萘磺酰氯(5.9g，22.7mmol)溶于60mL的無水乙腈中，N2保護(hù)，緩慢滴加至實(shí)施例12步驟a產(chǎn)物(4.5g，19mmol)、40mL的無水吡啶和IOOmL無水乙腈混合物中，4560°C反應(yīng)6小時(shí)，旋干，二氯甲烷(150mL)萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=101)，真空干燥得類白色粉末狀固體6.33g，收率72%。MS(ESI，m/z)464(M++1，100%)。((川-{4，6-二氫-5!1-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘磺酰胺鹽酸鹽的制備將實(shí)施例12步驟(b)產(chǎn)物(3.Og,5.8mmol)溶于60mL干燥的二氯甲烷中，通鹽酸氣35小時(shí)，有大量白色沉淀生成，抽濾，二氯甲烷洗滌，真空干燥得白色固體2.3g，收率100%。MS(ESI，m/z)363(M++1，100%)。(d)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備將異氰酸正丁酯(0.59g，6.Ommol)的二氯甲烷(5mL)混合液滴加入實(shí)施例12步驟(c)的產(chǎn)物(2.Og,5.Ommol)的二氯甲烷(40mL)和DIEA(3.88g，30mmol)的懸浮液中，室溫?cái)嚢?0小時(shí)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干，殘余物經(jīng)硅膠柱分離純化(石油醚/乙酸乙酯=31)，真空干燥得白色粉末狀固體化合物20)1.85g，收率80%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·82(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.25(2Η,m)，1.38(2Η,m)，3.04(2H,m),4.09(2Η,s),4.11(2Η,s),7.66-7.72(1Η,m),7.82-7.85(1Η,d)，8.21-8.24(1Η,m)，8.40-8.43(1H,m)，8.63-8.65(1H,m)，10.07(1H,s)。MS(ESI，m/z)464(M++1，100%)?！磳?shí)施例13>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺(&川-{5-叔丁氧羰基-4，6-二氫-2-甲基吡咯[3，4-(3]吡唑_3_基}_5_碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例12步驟(b)的方法，用實(shí)施例12步驟(a)的產(chǎn)物和5_碘萘磺酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率74%。MS(ESI，m/z)555(M++1，100%)。(13川-{4，6-二氫-5!1-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘磺酰胺鹽酸鹽的制備根據(jù)實(shí)施例12步驟(c)的方法，用實(shí)施例13步驟(a)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率100%。MS(ESI，m/z)455(M++1，100%)。(c)N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6_二氫-2-甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5_碘萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例12步驟(d)的方法，用實(shí)施例13步驟(b)的產(chǎn)物和異氰酸正丁酯反應(yīng)制備，得到化合物21)，為白色粉末狀，收率76%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·83(3Η,t,J=7.2Ηζ)，1.26(2Η,m)，1.39(2Η,m)，3.01(2H,m)，4.22(2H,s)，4.24(2H,s)，6.23(1H,s)，7.22-7.35(1H,m)，7.42(1H,s)，7.58(1H,s)，7·90-7.92(1H,d),8.12-8.15(1H,d),8.29-8.33(1H,d)，11.00(1H,s)。MS(ESI，m/z)554(M++1，100%)?！磳?shí)施例14>N-{5_[(N-苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺根據(jù)實(shí)施例12步驟(d)的方法，用實(shí)施例12步驟(c)的產(chǎn)物和異氰酸苯酯反應(yīng)制備，得到化合物23)，為白色粉末狀，收率61%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm3.69(3H,s),4.09(2H,s),4.11(2H,s)，7.66-7.72(1H,m)，7.82-7.85(1H,d)，8.21-8.24(1H,m)，8.40-8.43(1H,m)，8.63-8.65(1H,m)，10.07(1H,s)。MS(ESI，m/z)483(M++1，100%)?！磳?shí)施例15>N-{5-[(N_苯基氨基)甲?；鵠_4，6_二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]口比唑-3-基}-5-碘萘-1-磺酰胺根據(jù)實(shí)施例12步驟(d)的方法，用實(shí)施例13步驟(b)的產(chǎn)物和異氰酸苯酯反應(yīng)制備，得到化合物24)，為白色粉末狀，收率54%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm4.12(1H,s),4.21(1H,s),6.33(1H,s)，6.43(1H,d)，6.58(1H,s)，7.22-7.35(1H,m)，7.42(1H,s)，7.58(1H,s)，7.92-7.95(1H,d)，8.12-8.15(1H,d),8.31-8.34(1H,d)，11.07(lH，2s)MS(ESI，m/z)574(M++1，100%)。<實(shí)施例16>N-{5-乙?；?4,6-二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_氯萘-1-磺)根據(jù)實(shí)施例12步驟(d)的方法，用實(shí)施例12步驟(c)的產(chǎn)物和乙酰氯反應(yīng)制備，得到化合物26)，為白色粉末狀，收率90%。1HWR(400MHz，DMS0-d6)δppm2.02(3H,s),4.20(2H,s),4.23(2H,s),6.23(1H,s)，7.68-7.79(1H,m)，7.86(1H,s)，7.88(1H,s)，8.24-8.26(1H,d)，8.47-8.49(1H,d)，8.68-8.70(1H,d)，10.97(1H,s)，12.25(1H,s)。MS(ESI，m/z)405(M++1，100%)。<實(shí)施例17>N-{5-乙酰基-4,6-二氫_2_甲基吡咯[3，4_c]吡唑_3_基}_5_碘萘-ι-磺胺根據(jù)實(shí)施例12步驟(d)的方法，用實(shí)施例13步驟(b)的產(chǎn)物和乙酰氯反應(yīng)制備，得到化合物27)，為白色粉末狀，收率89%。1HWR(400MHz，DMS0-d6)δppm2.02(3H,s),4.20(2H,s),4.23(2H,s),6.23(1H,s)，7.22-7.35(1H,m)，7.42(1H,s)，7.58(1H,s)，7.90-7.92(1H,d)，8.12-8.15(1H，d)，8.29-8.33(1H,d)，11.07(1H,s)。MS(ESI，m/z)497(M++1，100%)?！磳?shí)施例18>N-{5_[(N-正丁基氨基)甲?；鵠_4，6，7_三氫-IH-吡唑[4，3_c]吡啶-3-基}-5-氯萘-1-磺酰胺(a)1-叔丁氧羰基-3-氰基_4_吡咯烷酮的制備將184.2克(1.2mol)丙氨酸乙酯鹽酸鹽和600mL甲醇投入2000mL三口燒瓶中，機(jī)械攪拌、溶清。后加入NaOH固體16gX3次(1.2mol)，冰水浴50min，撤去冰浴，油浴下加熱至70°C，滴加丙烯腈80g(p=0.805，IOOmL)，滴加完畢，回流反應(yīng)4小時(shí)，冷卻至室溫，加218g(BOC)20(1.Omol)，分6次2小時(shí)內(nèi)加完，室溫反應(yīng)，呈白色懸濁液，繼續(xù)攪拌4小時(shí)后抽濾，濾餅用60mL甲醇洗滌1次，合并濾液、旋蒸除去甲醇，加入400mL乙酸乙酯提取，用200mLX3次水洗，有機(jī)層用40g無水硫酸鎂干燥，抽濾、旋蒸除去溶劑，得到淡黃色油狀液體268g。將43gNaH(含量70%)和700mL干燥過的甲苯加入2000mL三口燒瓶中，電動(dòng)攪拌，加熱回流110°C左右，回流后開始滴加之前所得淡黃色油狀液體268g，50min滴完，反應(yīng)3小時(shí)后冷卻，加水SOOmL使固狀物溶清，抽濾，合并濾液，于分液漏斗靜置分層，分出下層水層，水層用甲苯400mL反萃取一次，分出水層，再用石油醚(250mLX2)反萃取兩次，水層用冰醋酸調(diào)至PH6左右，底部析出大量油狀物，分液漏斗分層，下層油狀物用乙酸乙酯600mL溶清，300mLX3次水洗，有機(jī)層無水硫酸鎂干燥，抽濾，減壓旋蒸除去溶劑，得黃色粘稠狀液體191g，收率71%。MS(ESI,m/z):224(M++1,100%)(b)3-氨基-4，6，7-三氫-IH-吡唑[4，3_c]吡啶_5_羧酸叔丁基酯的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(a)的方法，用1-叔丁氧羰基-3-氰基-4-哌啶烷酮和鹽酸胼反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為類白色粉末狀，收率27%。MS(ESI，m/z)239(M++1,100%)(C)l-乙氧羰基-5-叔丁氧羰基-3-氨基-4，6，7-三氫吡唑[4，3_c]吡啶的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(b)的方法，用實(shí)施例18步驟(b)的產(chǎn)物和氯甲酸乙酯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為類白色粉末狀，收率72%。MS(ESI,m/z)311(M++l,100%)(d)N-{5-叔丁氧羰基-4，6，7-三氫乙氧羰基吡唑[4，3_c]吡啶_3_基}_5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(c)的方法，用實(shí)施例18步驟(c)的產(chǎn)物和5-氯萘磺酰氯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為類白色粉末狀，收率63%。MS(ESI，m/z)536(M++1，100%)。(e)N-{4，6，7-三氫-1-乙氧羰基_5H_吡唑[4，3_c]吡啶_3_基}_5_氯萘磺酰胺鹽酸鹽的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(d)的方法，用實(shí)施例18步驟(d)的產(chǎn)物制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率100%。MS(ESI，m/z):436(M++1)。(f)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲酰基]-4，6，7-三氫-1-乙氧羰基吡唑[4，3-c]吡啶-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟(e)的方法，用實(shí)施例18步驟(e)的產(chǎn)物和異氰酸正丁酯反應(yīng)制備，得到副標(biāo)題化合物，為白色粉末狀，收率58%。MS(ESI，m/z)535(M++1，100%)。(g)N-{5-[(N-正丁基氨基)甲?；鵠-4，6，7-三氫-IH-吡唑[4,3-c]口比啶-3-基}-5_氯萘-1-磺酰胺的制備根據(jù)實(shí)施例1步驟⑴的方法，用實(shí)施例18步驟⑴的產(chǎn)物制備，得到化合物29)，為白色粉末狀，收率45%。1HNMR(400MHz,DMS0_d6)δppm:0·86(3Η,t,J=7.2Ηz)，1.26(2Η,m)，1.40(2Η,m)，2.91(2H,t)，3.04(2H,m)，4.02(2H,s)，4.47(2H,s)，6.31(1H,s)，7.68-7.80(1H,m)，7.84(1H,d)，7.87(1H,d)，8.23-8.25(1H,m)，8.49-8.51(1H,m)，8.69-8.73(1H,m)，10.90(lH，2s)。MS(ESI，m/z)463(M++1，100%)。<實(shí)施例19>本發(fā)明化合物的抗瘤活性試驗(yàn)本發(fā)明采用磺基羅丹明B法(sulforhodamineB,SRB)，以ML-7作為陽性對照藥，計(jì)算腫瘤細(xì)胞生長的抑制率。根據(jù)腫瘤細(xì)胞生長速率，將處于對數(shù)生長期的乳腺癌細(xì)胞MCF7以200μL/孔接種于96孔培養(yǎng)板，各孔細(xì)胞密度為3000/孔，貼壁生長24h后，分別加入實(shí)施例化合物1)、2)、3)、5)、8)、11)、12)、14)、15)、17)、18)、20)、21)、23)、24)、26)、27)、29)，每個(gè)濃度設(shè)3復(fù)孔，并設(shè)相應(yīng)濃度的生理鹽水溶媒對照及細(xì)胞調(diào)零孔。腫瘤細(xì)胞在37°C、5%CO2條件下培養(yǎng)48h。取出培養(yǎng)板，每孔加入50%(m/v)的三氯乙酸(TCA)50μL固定細(xì)胞，4°C放置lh。棄固定液，用蒸餾水洗滌5次，空氣中自然干燥，每孔加SRB溶液(1%醋酸配制的0.4%的磺基羅丹明B溶液，磺基羅丹明B是一種在酸性條件下可特異性地與細(xì)胞內(nèi)蛋白結(jié)合的染料)100μL，室溫下放置10-30min，去上層清液，用1%醋酸洗滌5次，空氣干燥，最后加入150μL/孔的Tris緩沖溶液(三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液，ρΗ7.29.0)，在平板器上振蕩5min。在酶聯(lián)免疫檢測儀(Model3550，Bio-Rad)測定OD值，用空白對照調(diào)零，所用波長為492nm，按以下公式計(jì)算腫瘤細(xì)胞生長的抑制率抑制率=[(OD492對照孔-OD492給藥孔)/(OD492對照孔]X100%。實(shí)施例的18個(gè)化合物，終濃度為100μmol/L,同時(shí)設(shè)立相應(yīng)濃度的ML-7為對照?；衔镌跐舛葹?00μmol/L時(shí)，乳腺癌細(xì)胞生長抑制率如表1所示。表1濃度為100μmol/L時(shí)乳腺癌細(xì)胞生長抑制率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，表1中所有測試化合物均對腫瘤細(xì)胞有抑制作用，其中近半數(shù)化合物在細(xì)胞水平上抑制率要優(yōu)于ML-7陽性對照藥。權(quán)利要求α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物，其結(jié)構(gòu)如通式(1)所示式中n＝1或2；R1獨(dú)立代表H、F、Cl、Br、I；R2獨(dú)立代表H或者R4、-COR4，-COOR4、-CONHR4、-CONR4R5、-NH-C(＝NH)NHR4、-C(＝NH)NHR4、-SO2R4、-SO2NHR4、-SO2NR4R5，其中R4和R5各自獨(dú)立代表氫原子或者任選被C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C4-C6鏈烯基、C4-C6鏈炔基、芳基、雜芳基取代；A代表O或NR；R獨(dú)立代表氫原子或者R3、-COR3、-SO2R3，其中R3獨(dú)立代表C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基或者C2-C4炔基、C4-C10環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基，每個(gè)C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基或者C2-C4炔基、C4-C10環(huán)烷基烷基任選被1～3個(gè)獨(dú)立選自下列取代基取代C1-C4烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-NR6COR8、-NR6COOR9、COR8、-OR9、-CONR6R7、-CO(NOR8)R9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；芳基為苯基或萘基，每個(gè)任選被1～5個(gè)獨(dú)立選自下列的取代基取代C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-CONR6R7、-NR6COR8、-OR9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；雜芳基為吡啶基、嘧啶基、三嗪基、呋喃基、吡喃基、喹啉基、異喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、惡唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、異惡唑基、吡唑基、2，3-二氫苯并噻吩基或2，3-二氫苯并呋喃基，每個(gè)任選被1～5個(gè)獨(dú)立選自下、下列的取代基取代C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、鹵素、C1-C4鹵代烷基、氰基、硝基、-NR6R7、-CONR6R7、-NR9COR8、-OR9、-COOR9、-SR9、-SO2R9、-SO2NR6R7、-NR6SO2R9；R6、R7、R8、R9各自獨(dú)立代表氫原子或者C1-C6烷基或苯基。FSA00000037112900011.tif2.如權(quán)利要求1所述的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物，其特征是，通式(1)的化合物以幾何學(xué)和光學(xué)異構(gòu)體存在，并且所有異構(gòu)體為分離的、純的或部分純化的立體異構(gòu)體或其外消旋混合物。3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物，其特征是，通式(1)的化合物可選擇性地以藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，金屬鹽或者選擇性烷基化銨鹽存在，包括無機(jī)和有機(jī)酸加成鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、琥珀酸鹽、延胡索酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、扁桃酸鹽、草酸鹽或者類似的藥學(xué)上可接受的無機(jī)或者有機(jī)酸加成鹽，也可按常規(guī)轉(zhuǎn)化方法制備它們的堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽、鋇鹽等。4.權(quán)利要求1、2或3所述化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其在抗腫瘤治療中的應(yīng)用，研究結(jié)果表明，α-萘磺酰胺基五元雜環(huán)類化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前體物，均對腫瘤細(xì)胞有抑制作用，其中近半數(shù)化合物在細(xì)胞水平上抑制率優(yōu)于ML-7陽性對照藥，可望為研發(fā)抗腫瘤藥物奠定基礎(chǔ)。文檔編號C07D471/04GK101812063SQ20101012702公開日2010年8月25日申請日期2010年3月18日優(yōu)先權(quán)日2010年3月18日發(fā)明者任開環(huán),李祎亮,王玉成,王菊仙,白曉光,邵榮光,郭欣申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所