專利名稱：由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法
由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法本發(fā)明涉及一種制做綠原酸的方法，特別是由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法。綠原酸(chlorogenic acid簡(jiǎn)稱CA)是一種縮酚酸，屬酚類化合物。具有抗菌、抗 病毒、升高白細(xì)胞、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基等作用。因而在食療及制 藥業(yè)的應(yīng)用上受到人們高度重視。現(xiàn)有的由杜仲葉提取綠原酸產(chǎn)品提取工藝采用有機(jī)溶劑在酸性條件下提取，存在 下列缺點(diǎn)產(chǎn)品純度低、工序復(fù)雜、操作繁瑣、消耗溶劑多、材料不易再生、產(chǎn)生的污水較多， 能耗高、提取成本相對(duì)比較高，終產(chǎn)物的純度只能到60%。本發(fā)明的目的是提供一種以杜仲葉為原料，經(jīng)提取、分離、純化制備綠原酸的方 法。它能解決現(xiàn)有技術(shù)中消耗溶劑多、材料不易再生、產(chǎn)生的污水較多，能耗高的缺點(diǎn)。本 發(fā)明由于應(yīng)用了超濾、樹脂分離及納濾技術(shù)，它的分離、純化方法工藝簡(jiǎn)便，成本低，所用材 料能再生利用，不產(chǎn)生污染，利于工業(yè)化生產(chǎn)。提取分離杜仲葉中綠原酸的工藝流程為杜仲葉一干燥粉碎一乙醇溶液回流提取一減壓蒸除乙醇一絮凝去雜一脫色 —XDA-5樹脂吸附一純凈水洗脫糖和京尼平苷酸一20%乙醇洗脫得到綠原酸粗品一減壓 回收乙醇一過(guò)150Da納濾膜濃縮一乙醇重結(jié)晶一低溫干燥得綠原酸精品。它包括如下步 驟A.制備綠原酸提取液將干燥粉碎的杜仲葉過(guò)60目篩，加到乙醇水溶液中，調(diào)PH = 4，加熱攪拌提取，過(guò) 濾，將濾液減壓蒸出乙醇，得綠原酸水提取液。B.綠原酸提取液的分離濾液加活性碳脫色、過(guò)超濾膜去蛋白質(zhì)、多糖，得綠原酸粗品水提取液。C.純化綠原酸綠原酸粗品溶液用大孔吸附樹脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得綠原酸純品 溶液。D.制備綠原酸精品綠原酸純化液經(jīng)納濾，乙醇重結(jié)晶，得綠原酸純品。步驟A中用于提取綠原酸杜仲葉粉碎后過(guò)40-80目篩；步驟A中所述的加熱溫度為65度，攪拌提取時(shí)間為2小時(shí)，提取次數(shù)為2次；步驟A中所述的溶液為60%乙醇，固液比例為1 12，溶液的PH = 4。步驟B中所述的脫色劑為活性碳，添加比例為5%攪拌脫色時(shí)間為20分鐘，步驟B中所述的超濾膜為5000Da的中空纖維膜，超濾壓力0. 4PM，溫度為30度。步驟C中用于吸附的樹脂為XAD-5，樹脂和吸附液的比例為1 5，吸附時(shí)間4小 時(shí)；步驟C中用于解吸附的溶液為20%乙醇水溶液，溶液的PH = 3 ；解吸附的溶液與 樹脂的比例為4 1，解吸附時(shí)間為3小時(shí)。步驟D中所用納濾膜為截留分子量為150Da的陶瓷膜，工作壓力為0.4Mpa，溫度為常溫；步驟D中所用的重結(jié)晶溶液為無(wú)水乙醇及正己烷，二種溶液體積比為1 1，重結(jié) 晶溫度為0度。本發(fā)明中采用乙醇提取、超濾、樹脂吸附、納濾分離純化濃縮、乙醇重結(jié)晶的方法， 它替代了現(xiàn)有的有機(jī)溶劑在酸堿性條件下提取、萃取的工藝。本方法首先用60%乙醇溶液 從杜仲葉中提取綠原酸、蛋白、多糖及黃酮等物質(zhì)，經(jīng)脫色、超濾去除蛋白質(zhì)、多糖、色素，分 離得綠原酸粗品；經(jīng)大孔樹脂、納濾純化、乙醇重結(jié)晶，制備了綠原酸純品。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)污染、能耗低、所用材料可再生回收利用，提取成本低、可連續(xù) 生產(chǎn)。在提取過(guò)程中未使用有毒溶劑，產(chǎn)品安全，易實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)。下面以實(shí)施例對(duì)本發(fā)明具體說(shuō)明。實(shí)施例由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法，包括以下步驟A.制備含綠原酸的水提取物將粉碎過(guò)60目篩的干杜仲葉0. 5KG(綠原酸含量為4. 96% )放入IOL的三口瓶 中，用6L60%乙醇溶液，加HCL調(diào)PH = 4，攪拌加熱到65度，在該溫度下提取2小時(shí)，過(guò)濾， 得濾液(1)；濾渣加4L60%乙醇溶液調(diào)PH = 4，攪拌加熱到65度，在該溫度下提取2小時(shí)， 過(guò)濾，得濾液(2)。合并濾液(1)和(2)，減壓回收乙醇，得提取液3L。B.制備含綠原酸的粗品溶液將含綠原酸的水提取液加熱到50度，以5%比例添加活性碳150g，攪拌30分鐘，靜置30分鐘，離心過(guò)濾；將濾液在壓力為0. 4MP、溫度30度下超濾，截流液加去離 子水超濾3次。每次加水2L，得綠原酸粗品溶液約8L。C.純化綠原酸取XAD-5樹脂經(jīng)再生處理，綠原酸粗品溶液和樹脂量的比例是5:1，本實(shí)施例中 為1. 6KG，溶液調(diào)PH = 4，在20L攪拌罐中攪拌吸附4小時(shí)，離心過(guò)濾，樹脂用去離子水?dāng)嚢柘?次，直至洗出水不混濁；每次用水10L，收集洗 脫水可以過(guò)納濾膜脫多糖后再回收使用；水洗后的樹脂用10%乙醇3L洗1次，濾除溶液得 吸附有綠原酸的樹脂。取6.5L PH= 3的20%乙醇溶液(和樹脂比為4 1)，和樹脂一起 放入攪拌罐中，攪拌洗脫3小時(shí)，過(guò)濾，用去離子水洗一次，收集濾液約9L。D.制備綠原酸精品將純化的綠原酸溶液在常溫下過(guò)納濾膜，膜為截留分子量為150Da的陶瓷膜，工 作壓力為0. 4MP ；濃縮比例為10倍，得濃縮液900ml，減壓濃縮得固形物；用無(wú)水乙醇在60 度下溶解得150ml溶液，加入等體積正己烷在0度下重結(jié)晶16小時(shí)，得純度為92%的綠原 酸精品17. 86克。
權(quán)利要求
一種由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法A制備綠原酸提取液將干燥粉碎的杜仲葉過(guò)60目篩，加到乙醇水溶液中，調(diào)PH＝4，加熱攪拌提取，過(guò)濾，將濾液減壓蒸出乙醇，得綠原酸水提取液B.綠原酸提取液的分離濾液加活性碳脫色、過(guò)超濾膜去蛋白質(zhì)、多糖，得綠原酸粗品水提取液C.純化綠原酸綠原酸粗品溶液用大孔吸附樹脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得綠原酸純品溶液。D.制備綠原酸精品綠原酸粗品溶液過(guò)納濾膜，乙醇重結(jié)晶，得綠原酸純品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟A中 所述的提取溫度為65度，攪拌提取時(shí)間為2小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟A中 用于提取綠原酸的溶液為60%的乙醇溶液，其PH為4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟A中 用于提取綠原酸的固液比為1 12。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟B中 用于超濾的膜的截留分子量為5000Da的中空纖維膜，超濾時(shí)工作壓力為0. 4MPa，工作溫度 為30度。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟B中 所用的脫色劑為活性碳，添加比例為溶液的5%;攪拌脫色溫度為40度，攪拌脫色時(shí)間為30 分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟C中 所用的純化樹脂為XAD-5，樹脂用量和被純化溶液比例為1 5;吸附時(shí)間為4小時(shí)，溶液PH=4。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟C中 用于洗脫吸附的溶液為20%乙醇溶液，溶液PH = 3，洗脫時(shí)間為3小時(shí)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟D中 用于純化濃縮的膜是截留分子量為150Da的陶瓷膜，工作壓力為0. 4MPa，工作溫度為常溫， 純化后的溶液被濃縮倍數(shù)為10倍。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特征是步驟D中 用于重結(jié)晶的溶劑是乙醇和正己烷，重結(jié)晶的溫度為0度。
全文摘要
由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法包括A制備綠原酸提取液，B.綠原酸提取液的分離，C.純化綠原酸D.制備綠原酸精品；本發(fā)明將超濾膜及納濾膜技術(shù)和大孔吸附樹脂純化技術(shù)相結(jié)合，有效解決了綠原酸提取中工序復(fù)雜、操作繁瑣、消耗溶劑多、材料不易再生、產(chǎn)生的污水多，能耗高、提取成本相對(duì)比較高的缺點(diǎn)；提供了一種提取、分離、純化杜仲葉中綠原酸的新方法，該方法工藝簡(jiǎn)便，成本低，能耗低，所用材料能再生利用，不產(chǎn)生污染，利于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07C69/732GK101935278SQ200910147928
公開(kāi)日2011年1月5日 申請(qǐng)日期2009年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月11日
發(fā)明者丁松法, 喬玉環(huán), 吳美娟, 周大捷, 周宗明 申請(qǐng)人:周大捷