專利名稱：：Il-31單克隆抗體的可變區(qū)序列和使用方法IL-31單克隆抗體的可變區(qū)序列和使用方法
背景技術(shù)：
：皮膚在免疫系統(tǒng)中起著重要的作用并由多層組成。表皮是表面層。表皮下面是真皮，一層結(jié)締組織。真皮下面是皮下組織，一層大量的脂肪組織。循環(huán)T淋巴細(xì)胞在正常和炎性條件下遷移至皮膚。皮膚淋巴細(xì)胞抗原(CLA)被認(rèn)為是一種對(duì)皮膚具有趨向性的T細(xì)胞的歸巢受體(homingreceptor)。Santamaria-Babi，L.，Swr./.Z^r/z^^/.14:13-18，2004。已知幾種皮膚疾病表達(dá)高水平的CLA+T細(xì)胞，包括特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物i秀發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性(skin-tropic)病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿(alopeciaaerata)、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡。存在對(duì)治療這類皮膚T細(xì)胞介導(dǎo)的疾病的需要。所證實(shí)了的細(xì)胞因子家族的體內(nèi)活性顯示了其它細(xì)胞因子、細(xì)胞因子激動(dòng)劑和細(xì)胞因子拮抗劑的巨大臨床潛力，以及對(duì)它們的需要。IL-31，一種新鑒定的細(xì)胞因子。IL-31當(dāng)在小鼠中過度表達(dá)時(shí)，導(dǎo)致皮炎樣癥狀。已經(jīng)將皮膚歸巢T細(xì)胞和表皮角質(zhì)細(xì)胞(kerationcyte)牽連于人類皮膚疾病的病理學(xué)中。本發(fā)明通過提供致炎細(xì)胞因子IL-31的拮抗劑來解決這些需要。本發(fā)明的這種拮抗劑可阻斷、抑制、減少、對(duì)抗或中和IL-31的活性，包括可溶性IL-31RA受體和抗-IL-31中和抗體。本發(fā)明進(jìn)一步提供了在炎性疾病中為此的用途，以及相關(guān)的組合物和方法。單克隆抗體技術(shù)已提供了大量的用于鑒定和治療疾病的治療劑以及診斷劑。許多臨床應(yīng)用已集中在于小鼠細(xì)胞中產(chǎn)生的但特異性結(jié)合人抗原的鼠抗人單克隆抗體。此外，還開發(fā)了由人和非人氨基酸序列組成的嵌合抗體。特別地，已描述了具有來源于例如鼠免疫球蛋參見例如，美國專利No.4,816,567;Winter等(1991)Nature349:293-299;和Lobuglio等(1989)Pro"Nat.Acad.Sci.USA86:4220-4224。此外，因?yàn)楹愣▍^(qū)不是抗原識(shí)別或結(jié)合所需要的，因此不含有Fc部分的抗體片段例如F(ab)、F(ab')2和Fv已表明示為用于臨床治療的有用候選物。已描述了許多包含嚙齒類抗原結(jié)合位點(diǎn)的重組或生物合成的分子。特別地，已描述了具有通過只將嚙齒類結(jié)合位點(diǎn)而非完整的可變結(jié)構(gòu)域嫁接入人免疫球蛋白重鏈和輕鏈結(jié)構(gòu)域而直接建立在人抗體上的嚙齒類抗原結(jié)合位點(diǎn)的分子。參見例如，Riechmann等(1988)Nature332:323-327和Verhoeyen等(1988)Science239:1534-1536。具有其中可變結(jié)構(gòu)域的至少一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDRS)來源于鼠單克隆抗已在1994年9月21日公布的英國專利公開號(hào)GB2，276，169中進(jìn)行了描述。也已描述了許多單鏈抗原結(jié)合位點(diǎn)多肽和單鏈Fv(sFv)分子。參見例如，屬于Huston等的美國專利Nos.5，132，405和5，091，513;以及以屬于Ladner等的美國專利No.4，946，778。抗體的Fc結(jié)構(gòu)域的效應(yīng)子作用包括吞噬作用、炎癥介質(zhì)的釋放、抗體產(chǎn)生的調(diào)控以及最重要地依賴抗體的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)和補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性(CDC)。這些效應(yīng)子作用的任一個(gè)被誘導(dǎo)的程度取決于Fc結(jié)構(gòu)域與相關(guān)蛋白質(zhì)介質(zhì)的相互作用、Fcy受體和Clq的相關(guān)作用，并且差異取決于IgG亞類恒定區(qū)(Fc)和它們與這些蛋白質(zhì)的相互作用。IgGl的Fc結(jié)構(gòu)域與免疫系統(tǒng)效應(yīng)細(xì)胞上的FcyRI,、FeyRIIa和FcvRIII相互作用。不同F(xiàn)cy受體的精確作用仍待闡明，但的最重要的ADCC介導(dǎo)受體。IgGl也結(jié)合Clq并且可觸發(fā)主要由表達(dá)FcyRIII的NK細(xì)胞介導(dǎo)的CDC。IgG4Fc結(jié)構(gòu)域具有大大減少的對(duì)不同F(xiàn)cy受體和Clq的結(jié)合親和力，相應(yīng)于減少的ADCC和CDC。然而IgGl通常顯示對(duì)ADCC和CDC兩者的高活性，IgG4據(jù)認(rèn)為具有低ADCC或CDC活性至無ADCC或CDC活性。當(dāng)與其他IgG同種型mAb相比，效應(yīng)器陰性IgG4mAb的結(jié)合親和力大大減少，如果不是被消除的話。然而，與Brambell受體(FcRn)相互作用的能力保持在IgG4中，從而通過延長的半衰期影響IgG4同種型mAb的藥物動(dòng)力學(xué)。因此，存在對(duì)提供與人IgG4Fc分子結(jié)合的用于治療IL-31介導(dǎo)的炎癥的抗人IL-31的氨基酸序列的分子的需要。附圖概述圖1是來自克隆292.12.3.1、292.84.1.6、292.63.5.3和294.144.3.5的輕鏈和重鏈的可變結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列的比對(duì)。圖2是來自克隆292.12.3.1和292.84.1.6的輕鏈和重鏈的可變區(qū)的氨基酸序列的比對(duì)。圖3和4是小鼠抗人IL-31單克隆抗體的輕鏈和重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的比對(duì)。發(fā)明詳述在更詳細(xì)地示于本發(fā)明之前，定義下列術(shù)語對(duì)于理解其是有幫助的。如在此使用的，術(shù)語"抗體"包括多克隆抗體、親和-純化的多克隆抗體、單克隆抗體，以及抗原-結(jié)合片段，例如F(ab')2和Fab蛋白水解片段。一般而言，工程化的完整抗體或片段，例如嵌合抗體、Fv片段、單鏈抗體等，以及合成的抗原-結(jié)合肽和多肽也包括在內(nèi)。非人抗體可通過移植非人CDR至人的框架區(qū)和恒定區(qū)，或通過整合整個(gè)非人的可變結(jié)構(gòu)域(任選通過置換暴露殘基用類似人的表面來"掩飾"它們，其中產(chǎn)物是一種"鑲嵌化的(veneered)"的抗體)來進(jìn)行人源化。在一些情況中，人源化抗體可在人可變區(qū)框架結(jié)構(gòu)域中保留非-人殘基，以增強(qiáng)正常的結(jié)合特性。通過人源化抗體，可延長生物半衰期，并減小在施用給人時(shí)不利的免疫反應(yīng)的可能性。術(shù)語"嵌合抗體"指其輕鏈和重鏈基因通常通過遺傳工程,從屬于不同種屬的免疫球蛋白可變區(qū)和恒定區(qū)基因構(gòu)建而來的抗體。例如，可將來自小鼠單克隆抗體的基因的可變區(qū)片段與人恒定區(qū)片段，例如Yl和Y3連接。因此，典型的治療性嵌合抗體是一種雜合蛋白，其由來自小鼠抗體的可變或抗原-結(jié)合結(jié)構(gòu)域和來自人抗體的恒定結(jié)構(gòu)域組成，雖然也可以使用其它哺乳動(dòng)物物種。如在此使用的，術(shù)語"免疫球蛋白"指由基本上通過免疫球蛋白基因編碼的一種或多種多肽組成的蛋白質(zhì)。一種形式的免疫球蛋白構(gòu)成了抗體的基本結(jié)構(gòu)單位。這種形式是一個(gè)四聚體并由相同的兩對(duì)免疫球蛋白鏈組成，每對(duì)鏈具有一條輕鏈和一條重鏈。在每對(duì)鏈中，輕鏈和重鏈的可變區(qū)一起負(fù)責(zé)結(jié)合至抗原，而恒定區(qū)負(fù)責(zé)抗體效應(yīng)子作用。全長的免疫球蛋白"輕鏈"(約25Kd或214個(gè)氨基酸)由NH2-末端的可變區(qū)基因(約110個(gè)氨基酸)和C00H-末端的k或入恒定區(qū)基因編碼。全長的免疫球蛋白"重鏈"(約50Kd或446個(gè)氨基酸)類似地由可變區(qū)基因(約116個(gè)氨基酸)和其它上述恒定區(qū)基因之一(約330個(gè)氨基酸)編碼。重鏈分為Y、n、oc、5或s，并分別定義抗體的同種型為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。在輕鏈和重鏈內(nèi)，可變區(qū)和恒定區(qū)由約12個(gè)或更多氨基酸的"J"區(qū)連接，且重鏈還包含約10個(gè)或更多氨基酸的"D"區(qū)。(通常參見，F(xiàn)undamentalImmunology(Paul,W.，ed.，第2版.RavenPress,N.Y.198"，Ch.7(為所有目的通過全文引入作為參考)。免疫球蛋白的輕鏈或重鏈可變區(qū)由通過3個(gè)高可變區(qū)中斷的"框架"區(qū)組成。因此，術(shù)語"高可變區(qū)"指負(fù)責(zé)抗原結(jié)合的抗體的氨基酸殘基。高可變區(qū)含有來自"互補(bǔ)性決定區(qū)"或"CDR"的氨基酸殘基(即，輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的殘基24-34(Ll)、50-56(L2)和89-97(L3)以及重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的31-35(HI)、50-65(H2)和95-102(H3))(Kabat等,SequencesofProteinsofImmunologicalinterest,第5版PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda，Md.(1991))，和/或來自"高可變loop區(qū)"的那些殘基(即，輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的殘基26-32(Ll)、50-52(L2)和91-96(L3)以及重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的26-32(HI)、53-55(H2)和96-101(H3);ChothiaandLesk，1987，J.Mol.Biol.196:901-917)(將兩者都在此通過引入作為參考)。"框架區(qū)"或"FR"殘基是那些可變結(jié)構(gòu)域的殘基，而不是如在此定義的高可變區(qū)的殘基。在一種物種中，不同輕鏈或重鏈的框架區(qū)序列是相對(duì)保守的。因此，"人框架區(qū)"是與天然存在的人免疫球蛋白的框架區(qū)基本一致的(約85%或更高，一般為90-95%或更高)?？贵w的框架區(qū)，即組成性輕鏈和重鏈的組合框架區(qū)，用來定位和對(duì)齊CDR。CDR主要負(fù)責(zé)結(jié)合至抗原表位。因此，術(shù)語"人源化的"免疫球蛋白指含有人框架區(qū)和來自非人(通常為小鼠或大鼠)免疫球蛋白的一個(gè)或多個(gè)CDR的免疫球蛋白。提供CDR的非人免疫球蛋白稱為"供體"，而提供框架的人免疫球蛋白稱為"受體"。不需要存在恒定區(qū)，但是如果它們存在，則它們必須與人免疫球蛋白的恒定區(qū)基本一致，即至少約85-90%，優(yōu)選約95°/?；蚋恢?。因此，人源化免疫球蛋白的所有部分(可能除了CDR)基本上與天然的人免疫球蛋白序列的對(duì)應(yīng)部分一致。"人源化抗體"指含有人源化輕鏈和人源化重鏈免疫球蛋白的抗體。例如，人源化抗體將不包括如上定義的典型的嵌合抗體，例如，因?yàn)榍逗峡贵w的整個(gè)可變區(qū)是非人的。術(shù)語"遺傳改變的抗體"表示其中氨基酸序列已與天然抗體的氨基酸序列不同的抗體。由于重組DM技術(shù)在抗體產(chǎn)生中的實(shí)用性，人們不需要受限于在天然抗體中發(fā)現(xiàn)的氨基酸序列；可重新設(shè)計(jì)抗體來獲得期望的特性。可能的改變有許多，從僅一個(gè)或少數(shù)氨基酸的改變到例如可變區(qū)或恒定區(qū)的完全重新設(shè)計(jì)。一般而言，將對(duì)恒定區(qū)作改變以便提高或改變特性，例如補(bǔ)體結(jié)合、與膜的相互作用以及其它效應(yīng)子作用。將會(huì)對(duì)可變區(qū)作改變以便提高抗原結(jié)合特性。[21]除了抗體，免疫球蛋白可以多種其它形式存在，包括例如單鏈或Fv、Fab和(Fab')2，以及雙體、線性抗體、多價(jià)體或多特異性雜合抗體(如上面描述的以及在Lanzavecchia等，Eur.J.Immunol.17，105(1987)中詳述的)，以及單鏈(例如，Huston等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,85，5879-5883(1988)和Bird等，Science,242，423-426(1988)，將其在此通過引入作為參考)。(通常參見，Hood等，"Immunology"，Benjamin,N.Y.，第2版.(1984)，以及Hunkapiller和Hood,Nature,323，15-16(1986)，將其在此通過引入作為參考)。如在此使用的，術(shù)語"單鏈Fv"、"單鏈抗體"、"Fv"或"scFv"指這樣的抗體片段其含有來自重鏈和輕鏈兩者的可變區(qū)，但缺少恒定區(qū)，但位于單個(gè)多肽鏈內(nèi)。通常，單鏈抗體另外含有在VH和VL結(jié)構(gòu)域之間的多肽連接物，其使得它能形成將會(huì)供抗原結(jié)合用的期望結(jié)構(gòu)。單鏈抗體由Pluckthun在ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies,vol,113，Rosenburg和Mooreeds.Springer-Verlag，NewYork,pp.269-315(1994)中詳細(xì)論述；還可參見國際專利申請(qǐng)案出版號(hào)WO88/01649和美國專利號(hào)4，946，778和5，260，203，將它們的公開內(nèi)容為任何目的通過引入作為參考。在特定的實(shí)施方案中，單鏈抗體也可以是雙特異性的和/或人源化的。U3]"Fab片段，，由一條輕鏈和一條重鏈的(V和可變區(qū)組成。Fab分子的重鏈不能與另一重鏈分子形成二硫鍵。"Fab'片段"含有一條輕鏈和一條重鏈，該重鏈在Cm和CH2結(jié)構(gòu)域之間具有多個(gè)恒定區(qū)的，這樣可在兩條重鏈之間形成鏈間二硫鍵而形成F(ab，)2分子。"F(ab，)2片段"含有兩條輕鏈和兩條重鏈，重鏈在CH1和ch2結(jié)構(gòu)域之間具有一部分恒定區(qū)，這樣鏈間二硫鍵在兩條重鏈之間形成。通過不精確的分析法(例如，凝膠電泳)測(cè)定的聚合物的分子量和長度應(yīng)該理解為是近似值。當(dāng)這種值表示為"大約"X或"近似，，X時(shí)，所述的X值將理解為將會(huì)精確到±10%。在此引用的所有參考文獻(xiàn)在這里通過全文引入作為參考。本發(fā)明部分基于2006年5月8日提交的共同擁有的美國專利申請(qǐng)系列No.11/430，066(其作為美國專利申請(qǐng)No.2006-O275296(通過在此引用作為參考)于2006年12月7日公開)中描述的單克隆抗體的氨基酸序列的確定。在布達(dá)佩斯條約下，將表達(dá)針對(duì)上述人IL-31的中和單克隆抗體的雜交瘤作為原始存放物交托給美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC;10801UniversityBlvd，ManassasVA20110-2209)patentdepository,并且給予下列ATCC登記號(hào)克隆292.12.3.1(ATCC專利保藏名稱PTA-6815，于2005年6月29日保藏)、克隆292.72.3.1(ATCC專利保藏名稱PTA-6816,于2005年6月29日保藏)、克隆292.63.5.3(ATCC專利保藏名稱PTA-6829,于2005年7月6日保藏)、克隆292.118.6.4(ATCC專利保藏名稱PTA-6830，于2005年7月6日保藏)、克隆294.163.2.1(ATCC專利保藏名稱PTA-6831,于2005年7月6日保藏)、克隆292.84.1.6(ATCC專利保藏名稱PTA-6871,于2005年7月19日保藏)、克隆294.35.2.6.3(ATCC專利保藏名稱PTA-6872,于2005年7月19日保藏)、克隆294.154.5.6(ATCC專利保藏名稱PTA-6875,于2005年7月19日保藏)和克隆294.144.3.5(ATCC專利保藏名稱PTA-6873，于2005年7月19日保藏)。本發(fā)明提供了由這些用于產(chǎn)生抗體和抗體片段的雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體的輕鏈和重鏈可變區(qū)的氨基酸序列，所述單克隆抗體的輕鏈和重鏈可變區(qū)結(jié)合IL-31配體且可通過例如表達(dá)為融合蛋白與人IgG4Fc分子結(jié)合使用，來拮抗IL-31，從而通常抑制、阻斷、減少或中和炎癥，以及皮炎和搔癢癥疾病的癥狀。這樣的抗體可包括含有或由輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)組成的抗體或抗體片段，其可以是中和、抑制、減少、防止或使IL-31對(duì)其受體的效應(yīng)最小化的嵌合抗體、人源化抗體或抗體片段。所述抗體或抗體片段的臨床結(jié)果可以是炎性疾病例如此處進(jìn)一步描述的皮炎和搔癢癥疾病的減輕。在一個(gè)實(shí)施方案中，皮炎是特應(yīng)性皮炎。在另一個(gè)實(shí)施方案中，皮炎是結(jié)節(jié)性癢疹。在另一實(shí)施方案中，皮炎是濕滲。IL-31是一種新發(fā)現(xiàn)的T細(xì)胞細(xì)胞因子，其在小鼠中過度表達(dá)時(shí)導(dǎo)致類似皮炎的癥狀。也參見，Dillon等，NatureImmunol.5:752-760，2004。已經(jīng)將皮膚歸巢T細(xì)胞和表皮角質(zhì)細(xì)胞牽連于人類皮膚疾病的病理學(xué)中。在特應(yīng)性皮炎(AD)患者和正常個(gè)體兩者中，IL-31mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)只限于皮膚歸巢CLA+T細(xì)胞群，同時(shí)通過免疫組織化學(xué)(IHC)對(duì)IL-31的受體IL-31RA的分析顯示，與正常個(gè)體比較，在急性和慢性AD患者的皮膚活組織檢查中，在皮膚角質(zhì)細(xì)胞上有稍微更高水平的IL-31RA的表達(dá)。IL-31是先前已在公開的美國專利申請(qǐng)案中描述為Zcytol7rlig的細(xì)胞因子的HUGO名稱(參見，出版號(hào)20030224487，Sprecher，Cindy等，2003，在此將其通過引入作為參考)。也參見，Dillon等，NatureImmunol.,同上。IL-31的異二聚體受體也在20030224487中描述為zcytorl7(HUGO名稱，IL-31RA),其與0ncostatinM受體(3(OSMRP)形成異二聚體。IL-31可從由才艮據(jù)CD3選擇的活化的人外周血細(xì)胞(hPBC)產(chǎn)生的cDNA文庫分離。CD3是淋巴源細(xì)胞，尤其是T細(xì)胞特有的細(xì)胞表面標(biāo)記。人IL-31的多肽序列在SEQIDNO:2中顯示。鼠IL-31的多肽序列在SEQIDNO:4中顯示。如在此使用的，術(shù)語IL-31表示如在美國專利出版號(hào)20030224487中使用的IL-31,如上文中顯示。IL-31的分泌信號(hào)序列由氨基酸殘基1(Met)至23(Ala)組成，而成熟的多肽由氨基酸殘基24(Ser)至164(Thr)組成(如在SEQIDNO:2中顯示)。對(duì)來自293T細(xì)胞的純化的IL-31的進(jìn)一步N-端序列測(cè)定分析顯示，如在SEQIDNO:2中顯示的N-端位于殘基27(Leu)，同時(shí)成熟的多肽由氨基酸殘基27(Leu)至164(Thr)組成(如在SEQIDNO:2中顯示)。IL-31是先前已在公開的美國專利申請(qǐng)案中描述為Zcytol7rlig的細(xì)胞因子的HUGO名稱(參見，出版號(hào)20030224487,Sprecher,Cindy等，2003,在此將其通過引入作為參考)。也參見，Dillon等，NatureImmunol.，同上。IL-31的異二聚體受體也在20030224487中描述為zcytorl7(HUGO名稱，IL-31RA)，其與OncostatinM受體P(0SMRP)形成異二聚體。IL-31可從由根據(jù)CD3選擇的活化的人外周血細(xì)胞(hPBC)產(chǎn)生的cDNA文庫分離。CD3是淋巴源細(xì)胞，尤其是T細(xì)胞特有的細(xì)胞表面標(biāo)記。人IL-31的多聚核苷酸和多肽序列分別在SEQIDNO:1和2中顯示。鼠IL-31的多聚核苷酸和多肽序列分別在SEQIDNO:3和4中顯示。如在此使用的，術(shù)語IL-31表示如在美國專利出版號(hào)20030224487中使用的IL-31，如上文中顯示。IL-31的分泌信號(hào)序列由氨基酸殘基1(Met)至23(Ala)組成，而成熟的多肽由氨基酸殘基24(Ser)至164(Thr)組成(如在SEQIDNO:2中顯示)。對(duì)來自293T細(xì)胞的純化的IL-31的進(jìn)一步N-端序列測(cè)定分析顯示，如在SEQIDNO:2中顯示的N-端位于殘基27(Leu)，同時(shí)成熟的多肽由氨基酸殘基27(Leu)至164(Thr)組成(如在SEQIDNO:2中顯示)。IL-31RA(IL-31受體)的多肽序列在SEQIDNO:5中顯示，而OncostatinM受體P(0SMRP)的多肽序列在SEQIDNO:6中顯示。IL-31RA和OSMRP受體屬于I型細(xì)胞因子受體亞家族，該亞家族包括，但不限于IL-2、IL-4、IL-7、Lif、IL-12、IL-15、EPO、TPO、GM-CSF和G-CSF的受體(關(guān)于綜述，參見Cosman，"TheHematopoietinReceptorS叩erfamily'，inCytokine5(2):95-106，1993)。IL-31RA亞基在公有的PCT專利申請(qǐng)案No.US01/20484(WIPO出版號(hào)W002/00721)中得以充分描述。對(duì)IL-31RA亞基的mRNA的組織分布分析顯示了在激活的CD4+和CD8+T細(xì)胞亞類、CD14+單核細(xì)胞中的表達(dá)，以及在CD19+B細(xì)胞中較弱的表達(dá)。此外，mRNA存在于休眠或活化的單核細(xì)胞系THP-1(ATCCNo.TIB-202)、U937(ATCCNo.CRL-1593,2)和HL60(ATCCNo.CCL-240)中。通過包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域和/或重鏈可變結(jié)構(gòu)域的分子(在此處稱為"IL-31結(jié)合分子"或"IL-31拮抗劑")抑制、中和、阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的大量測(cè)定法測(cè)量。例如，測(cè)量增生減少的測(cè)定法包括用于染料例如AlamarBlue(AccuMedInternational乂>司，Westlake，Ohio)、3-(4，5-二甲基塞嗤—2-基)-2，5-聯(lián)苯溴化四嗤(Mosman，J.Immunol.Meth.65:55-63，1983)、3，(4,5二甲基噻唑-2基)-5-3-羧基甲氧基苯基-2H-四唑、2，3-雙(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-5-[(苯基氨基)羰基]-2H-四唑氬氧化物(tetrazoliumhydroxide)，以及氰基聯(lián)甲苯(cyanoditolyl)-氯化四峻(其可從Polysciences公司，Warrington,PA商業(yè)獲得)減少的測(cè)定法；有絲分裂發(fā)生測(cè)定法(mitogenesisassays)，例如對(duì)力-胸苷的整合的測(cè)量；使用例如萘黑或錐蟲藍(lán)的染料排除測(cè)定法；使用二乙?；鶡晒馑氐娜玖衔辗ǎ灰约般t釋放法。通常，參見Freshney，CultureofAnimalCells:AManualofBasicTechnique,3rded.，Wiley-Liss，1994，將其在此通過引入作為參考。除了上述的，對(duì)于表達(dá)IL-31RA和全長OSMRP的BaF3細(xì)胞的實(shí)例，參見公開的美國專利出版號(hào)20030224487(Sprecher，Cindy等，2003)。用于制備編碼在此描述的抗體的多聚核苷酸(包括DNA和RNA)的方法是本領(lǐng)域熟知的?？刹捎卯惲蚯杷犭姨崛?，之后通過在CsCl梯度中離心分離來制備總RNA(Chirgwin等，BiochemistryH52-94,1979)?？刹捎肁viv和Leder的方法(Proc.Natl.Acad.Sci,USA69:1408-12，1972)，從總RNA制備聚(A)+RNA?；パa(bǔ)DNA(cDNA)用已知的方法從聚(A)+RNA制備。備選地，可分離基因組DNA。隨后，通過例如雜交或PCR來鑒定和分離編碼IL-31抗體的多聚核苷酸。本發(fā)明還包括結(jié)合IL-31多肽的功能片段和編碼這種功能片段的核苷酸分子的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。如在此定義的，"功能性"IL-31或其片段表征為它的增殖或分化活性、它誘導(dǎo)或抑制特定的細(xì)胞功能的能力，或者它特異性結(jié)合至抗-IL-31抗體或IL-31RA或抗體或這些受體的IL-31RA/0SMRP異二聚體(可溶的或固定的)的能力。如先前在這里描述的，IL-31表征為含有螺旋A(氨基酸殘基38-52)、螺旋B(氨基酸殘基83-98)、螺旋C(氨基酸殘基104-117)和螺旋D(氨基酸殘基137-152)的四-螺旋-束結(jié)構(gòu)，如SEQIDNO:2中顯示的。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了融合蛋白，所述的融合蛋白包含(a)含有一個(gè)或多個(gè)如上描迷的螺旋的多肽分子；和(b)含有一個(gè)或多個(gè)這些螺旋的功能性片段。該融合蛋白的其它多肽部分可由另外的四-螺旋-束細(xì)胞因子，例如IL-15、IL-2、IL-4和GM-CSF，或者由促使該融合蛋白分泌的非天然和/或不相關(guān)的分泌信號(hào)肽提供。本發(fā)明還提供了結(jié)合至多肽片段或肽的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，所述的多肽片段或肽含有在此描述的IL-31多肽的帶有表位的部分。這種片段或肽可含有"免疫原性表位"，其為當(dāng)整個(gè)蛋白質(zhì)用作免疫源時(shí)，引起抗體應(yīng)答的蛋白質(zhì)的一部分。帶有免疫原性表位的肽可用標(biāo)準(zhǔn)的方法鑒定(參見，例如Geysen等，Proc,Nat'1Acad.Sci.USA81.:3998(1983))?？贵w結(jié)合這些功能性片段導(dǎo)致抑制、阻斷、中和和/或減少了IL-31在其同源受體上的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。比較而言，多肽片段或肽可含有"抗原表位"，其為抗體可特異性與其結(jié)合的蛋白質(zhì)分子的區(qū)域。某些表位由線性或連續(xù)的一段氨基酸組成，并且這種表位的抗原性不會(huì)受變性劑破壞。本領(lǐng)域已經(jīng)知道，能模擬蛋白質(zhì)表位的相對(duì)短的合成肽可用于刺激產(chǎn)生對(duì)抗該蛋白質(zhì)的抗體(參見，例如Sutcliffe等，Science219:660(1983))。因此，本發(fā)明的帶有抗原表位的肽和多肽可用于產(chǎn)生與在此描述的多肽結(jié)合的抗體(例如，中和抗體)。Hopp/Woods親水性圖可用于確定具有最大抗原潛力的區(qū)域(Hopp等，1981，同時(shí)以及Hopp，1986，同上)。例如，在人IL-31中，親水性區(qū)域包括SEQIDN0:2的氨基酸殘基54-59、SEQIDNO:2的氨基酸殘基129-134、SEQIDNO:2的氨基酸殘基53-58、SEQIDNO:2的氨基酸殘基35-40，以及SEQIDNO:2的氨基酸殘基33-38。例如，在鼠IL-31中，親水性區(qū)域包括SEQIDNO:4的氨基酸殘基34-39、SEQIDNO:4的氨基酸殘基46-51、SEQIDNO:4的氨基酸殘基131-136、SEQIDNO:4的氨基酸殘基158-163，以及SEQIDNO:4的氨基酸殘基157-162。[40]帶有抗原表位的肽和多肽優(yōu)選含有SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的至少4至10個(gè)氨基酸，至少10至14個(gè)氨基酸，或者約14至約30個(gè)氨基酸。這種帶有表位的肽和多肽可通過片段化IL-31多肽，或通過化學(xué)肽合成產(chǎn)生，如在此描述的。此外，表位可通過隨機(jī)肽文庫的嗟菌體展示選擇(參見，例如Lane和Stephen,Curr.Opin.Immunol.5:268(1993);以及Cortese等，Curr.Opin.Biotechnol.2^616(1996))。用于鑒定表位和從含有表位的小肽獲得抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法例如,由Mole,"EpitopeMapping,，，inMethodsinMolecularBiology,第IO巻，Manson(ed.),pages105-116(TheHumanaPress公司,1992)、Price,"ProductionandCharacterizationofSyntheticPeptide-DerivedAntibodies,，,inMonoclonalAntibodies:Production,Engineering,andClinicalApplication,Ritter和Ladyman(eds.)，pages60-84(CambridgeUniversityPress1995)，以及Coligan等(eds.)，CurrentProtocolsinImmunology,pages9.3.1-9.3.5和pages9.4.1—9.4.11(JohnWiley&Sons1997)描述。如在此描述的抗體的活性可采用多種測(cè)量增殖和/或與表達(dá)IL-31RA受體的細(xì)胞結(jié)合的測(cè)定法，通過它們抑制或減少增殖的能力來測(cè)量。特別重要的是IL-31-依賴性細(xì)胞的改變。工程化為IL-31-依賴性的合適的細(xì)胞系包括IL-3-依賴性BaF3細(xì)胞系(Palacios和Steinmetz，Cell41:727-734，1985、Mathey-Prevot等，Mol.Cell.Biol.6:4133-4135，1986)、FDC-P1(Hapel等，Blood64:786-790，1984)和M07e(Kiss等，Leukemia7:235-240，1993)。生長因子-依賴性細(xì)胞系可根據(jù)公開的方法建立(例如，Greenberger等，LeukemiaRes.8:363-375，1984;Dexter等，Baum等編輯，ExperimentalHematologyToday,8thAnn.Mtg.Int.Soc.Exp.Hematol.1979，145—156，1980)。在此描述的抗-IL-31抗體的活性可通過基于硅的生物感受器微生理測(cè)量?jī)x測(cè)量，該儀器可測(cè)量與受體結(jié)合以及隨后的生理細(xì)胞反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞外酸化率(acidificationrate)或質(zhì)子分泌(protonexcretion)。一種示例性裝置是由MolecularDevices,Sunnyvale,CA生產(chǎn)的CytosensorTM微生理測(cè)量?jī)x測(cè)量。多種細(xì)胞反應(yīng)，例如細(xì)胞增殖、離子轉(zhuǎn)移、能量生產(chǎn)、炎癥應(yīng)答、調(diào)節(jié)和受體激活等都可通過本方法測(cè)量。參見，例如McComiell，H.M.等，ScienceH2]_1906-1912，1992;Pitchford，S.等，Meth.Enzymol.228:84-108，1997;Arimilli，S.等，JImmunol.Meth.212:49-59,1998;VanLiefde，I.等，Eur,J.Pharmacol.346:87-95,1998。拮抗劑還可用作用于鑒定配體-受體相互作用位點(diǎn)的研究試劑。拮抗劑可用于抑制參與調(diào)控紅細(xì)胞生成的細(xì)胞的擴(kuò)增、增殖、激活和/或分化。IL-31活性的抑制劑(IL-31拮抗劑)包括抗-IL-31抗體和可溶性IL-31受體，以及其它肽和非肽制劑(包括核酶)。抑制IL-31的活性可通過多種測(cè)定法測(cè)量。除了在此公開的那些測(cè)定法，可在多種設(shè)計(jì)用來測(cè)量受體結(jié)合、IL-31-依賴性細(xì)胞反應(yīng)的刺激/抑制或IL-31RA受體-表達(dá)細(xì)胞的增殖的測(cè)定法中，檢測(cè)樣品對(duì)IL-31活性的抑制。IL-31-結(jié)合多肽，包括IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，也可用于配體的純化。將該多肽固定在在使用條件下穩(wěn)定的固體栽體，例如瓊脂糖小球、交聯(lián)瓊脂糖、玻璃、纖維素樹脂、基于硅的樹脂(silica-basedresins)、聚苯乙烯、交聯(lián)聚丙烯酰胺或類似的材料上。用于將多肽連接至固體載體的方法是本領(lǐng)域已知的，并包括胺化學(xué)、溴化氰活化、N-羥基琥珀酰亞胺活化、環(huán)氧化物活化、巰基活化和酰肼活化。通常將會(huì)使得到的介質(zhì)成形為柱的形式，并且讓含有配體的流體通過該柱一次或多次以使得配體結(jié)合至受體多肽。隨后，改變鹽濃度、促溶劑(鹽酸胍)或pH，用以破壞配體-受體結(jié)合來洗脫出配體?？捎欣夭捎美门潴w-結(jié)合受體(或抗體，補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)的一個(gè)成員)或其結(jié)合片段的檢測(cè)系統(tǒng)，以及可商業(yè)獲得的生物感受器裝置(BIAcore，PharmaciaBiosensor,Piscataway，NJ)。將這種受體、抗體、補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)的成員或片段固定在受體芯片表面上。該裝置的《吏用由Karlsson，J.Immunol.Methods145:229-40，1991以及Cunningham和Wells,J.Mol.Biol.234:554-63，1993公開。使用胺或巰基化學(xué)，將受體、抗體、成員或片段共價(jià)連接至葡聚糖纖維上，葡聚糖纖維連接流式細(xì)胞儀(flowcell)中的金膜。讓試驗(yàn)樣品通過該儀器。如果樣品中存在配體、表位或補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)的相對(duì)的成員，則它會(huì)分別結(jié)合上述固定的受體、抗體或組成成分，導(dǎo)致介質(zhì)的屈光率改變，其可檢測(cè)為金膜的質(zhì)子表面共振的改變。該系統(tǒng)能夠測(cè)定結(jié)合速率和解離速率，可從中計(jì)算出結(jié)合親合力，并評(píng)估結(jié)合的化學(xué)定量關(guān)系。備選地，配體/受體結(jié)合可用SELDI(TM)技術(shù)(Ciphergen公司，PaloAlto，CA)分析。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可用于阻斷致炎性IL-31的生物作用，并可用作如在此描述的多種疾病的抗-炎性治療劑。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會(huì)理解，抗原性的、帶有表位的多肽含有至少6個(gè)，優(yōu)選至少9個(gè)，并且更優(yōu)選至少15至約30個(gè)IL-31多肽(例如SEQIDNO:2)的連續(xù)氨基酸殘基。含有更大部分的IL-31多肽，即從30至100個(gè)殘基直至全長的氨基酸序列的多肽也包括在內(nèi)?？乖蛎庖咴员砦贿€可包括連接的標(biāo)記、佐劑、賦形物和載體，如在此描述的。合適的抗原包括由SEQIDNO:2的氨基酸號(hào)24至氨基酸號(hào)164，或者其連續(xù)的9-141個(gè)氨基酸片段編碼的IL-31多肽。其它合適的抗原包括，全長和成熟的IL-31、如在此描述的IL-31四-螺旋-束結(jié)構(gòu)的螺旋A-D，以及單獨(dú)的或多個(gè)螺旋A、B、C和D。優(yōu)選用作抗原的肽是親水性肽，例如本領(lǐng)域技術(shù)人員從如在此描述的疏水性圖預(yù)測(cè)的那些親水性肽，如SEQIDN0:2的氨基酸殘基114-119、101-105、126-131、113-118和158-162，以及SEQIDNO:4的氨基酸殘基34-39、46-51、131-136、158-163和157-162。此外，將例如采用DNASTARProtean程序(DNASTAR公司，Madison,WI)，通過Jameson-Wolf圖預(yù)測(cè)的IL-31抗原表位用作優(yōu)選的抗原，并且很容易由本領(lǐng)域的技術(shù)人員確定。[48]如果1)IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑顯示出閾水平的結(jié)合活性，和2)它們不會(huì)與相關(guān)的多肽分子顯著交聯(lián)，則所述IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑被認(rèn)為是特異性結(jié)合。如果這里的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑以比與對(duì)照(非-IL-31)多肽的親合力大至少IO倍的親合力結(jié)合IL-31多肽、肽或表位，則測(cè)定了結(jié)合的閥水平。優(yōu)選的是，抗體顯示出106M—'或更大的親合力(Ka)，優(yōu)選IO7NT'或更大，更優(yōu)選108M^或更大，并且最優(yōu)選109M—'或更大。IL-1結(jié)合分子的結(jié)合親合務(wù)或IL-31拮抗劑的親合力可例如通過Scatchard分析(Scatchard，G.，Ann.NYAcad.Sci.51:660-672，1949)，由本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員容易地測(cè)定。例如通過IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑檢測(cè)IL-31多肽而不是已知的相關(guān)多肽的抗體，用標(biāo)準(zhǔn)的蛋白印跡分析(Ausubel等，同上)來顯示IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑是否不會(huì)與相關(guān)的多肽分子顯著交聯(lián)。已知的相關(guān)多肽的實(shí)例是在現(xiàn)有技術(shù)中公開的那些，例如已知的直系同源物，和paralog，以及蛋白質(zhì)家族中類似的已知成員。篩選也可釆用非人IL-31和IL-31突變型多肽完成。此外，IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可"針對(duì)已知的相關(guān)多肽來篩選"，以分離出特異性結(jié)合IL-31多肽的群體。例如，將IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑吸附至粘附在不溶解基質(zhì)上的相關(guān)多肽；對(duì)IL-31特異性的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑將會(huì)在適當(dāng)?shù)木彌_條件下流過基質(zhì)。Antibodies:ALaboratoryManual,Harlow和Lane(eds.),ColdSpringHarborLaboratoryPress,1988;CurrentProtocolsinImmunology,Cooligan，等(eds.)，NationalInstitutesofHealth,JohnWileyandSons,Inc.,1995。對(duì)從組織培養(yǎng)基中純化的單克隆抗體進(jìn)行鑒定，鑒定它們阻斷或減少BaF3/MPL-IL-31細(xì)胞上的純化的重組huIL-31的受體結(jié)合活性("中和測(cè)定")的能力。可以確定IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的結(jié)合親合力。將山羊-抗-大鼠IgG-Fcy特異性抗體(Jackson)固定在CM5Biacore芯片上。優(yōu)化該測(cè)定法以使每個(gè)mAb結(jié)合至抗-大鼠捕獲表面上，并隨后將一濃度系列的IL-31注射通過mAb來觀察結(jié)合常數(shù)(Ka)和解離常數(shù)(Kd)。在每次運(yùn)行后，通過2次注射20mMHC1來使表面再生為抗-大鼠抗體。產(chǎn)生了每種抗體的數(shù)據(jù)，并采用評(píng)估軟件(BIAevaluationsoftwareversion3.2，PharmaciaBlAcore，Uppsala,Sweden)來評(píng)估抗-IL-31抗體結(jié)合IL-31蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)。如實(shí)施例1中所示確定克隆編號(hào)292.12.3.1、292.84.1.6、292.63.5.3、294.144.3.5、292.39.5.3、292.51.5.2、292.64.6.5.5、292.105.4.1、292.109.4.4、292.118'6.4、292，72.3.1的輕鏈和重鏈可變區(qū)的多核苷酸和多肽序列。如實(shí)施例2中所示確定克隆編號(hào)的輕鏈和重鏈可變區(qū)的氨基端的多肽序列。就當(dāng)在純化的重組蛋白質(zhì)人IL-31存在的情況下培養(yǎng)時(shí)就它們阻斷、抑制、防止或減少受體結(jié)合的能力鑒定組織培養(yǎng)基中的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。例如，可以用許多方法包括框并法(即，確定每一種抗體是否可抑制任何其他結(jié)合的結(jié)合)、相對(duì)親和力和中和來鑒定IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑?？赏ㄟ^多種方法來檢測(cè)通過在此描述的方法產(chǎn)生的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的中和作用。例如，可采用如在公開的美國專利申請(qǐng)(參見出版號(hào)20030224487，Sprecher，Cindy等，2003)中描述的熒光素酶測(cè)定法。另外，中和作用可通過測(cè)量在存在配體和單克隆抗體時(shí)，角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物中致炎趨化因子例如TARC和MDC的產(chǎn)生的減少來檢測(cè)。中和作用還可通過在此描述的體內(nèi)模型測(cè)量。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑是本發(fā)明的人抗原-結(jié)合抗體片段，并且包括但不限于，F(xiàn)ab、Fab，和F(ab，)2、Fd、單鏈Fvs(scFv)、單鏈抗體、二硫鍵-連接的Fvs(sdFv)和含有VL或VH結(jié)構(gòu)域的片段。抗原-結(jié)合抗體片段(包括單鏈抗體)可以只含有可變區(qū)(例如，SEQIDNO:1、2、3或4)，或者含有可變區(qū)與全部或部分以下區(qū)域絞鏈區(qū)、CH1、Cm和Ch3結(jié)枸域的組合。還包含于本發(fā)明內(nèi)的是也含有可變區(qū)與絞鏈區(qū)、CH1、Ch2和Ch3結(jié)構(gòu)域的任意組合的抗原-結(jié)合片段。在另一實(shí)施方案中，IL-31的結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可以是單一特異性的、雙特異性的、三特異性的或有更多的多特異性。多特異性抗體可以是對(duì)本發(fā)明多肽的不同表位有特異性，或者可以是對(duì)本發(fā)明多肽以及異源表位，例如異源多肽或固體載體物質(zhì)兩者都有特異性。參見，例如PCT出版物W093/17715、W092/08802、W091/00360、W092/05793、Tutt等，J.Immunol.147:60-69(1991)、美國專利號(hào)4,474,893、4,714,681、4，925，648、5,573,920、5，601，819、Kostelny等，J.Immunol.148:1547-1553(1992)。本發(fā)明還包括功能上等價(jià)于上述抗體的經(jīng)遺傳改變的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。優(yōu)選提供增強(qiáng)的穩(wěn)定性和/或治療效果的經(jīng)修飾的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。經(jīng)修飾的抗體的實(shí)例包括，具有氨基酸殘基的保守置換，以及一個(gè)或多個(gè)不會(huì)顯著有害改變抗原結(jié)合效用的氨基酸的缺失或添加的那些抗體。置換可從改變或修飾一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基到完全重新設(shè)計(jì)一個(gè)區(qū)域，只要治療效果得以維持?？煞g后修飾(例如，乙?；土姿峄?或合成修飾(例如，連接標(biāo)記基團(tuán))本發(fā)明的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑還包括嵌合抗體或嵌合片段，基包含此處公開的可變區(qū)和來源于人的恒定區(qū)，這樣所述嵌合抗體或嵌合片段具有更長的半衰期，并且在對(duì)人受受試者施用時(shí)具有較少的免疫原性。制備嵌合抗體和嵌合片段的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的?？蓪⑦@些IL-31抗體分子或IL-31拮抗劑的可變區(qū)與人IgG的恒定區(qū)連接來形成期望的嵌合抗體。IgGFc分子可融合至IL-31結(jié)合分子。為避免效應(yīng)子作用的誘導(dǎo)，所述IgGFc分子可來自IgG4Fc分子。因其中恒定區(qū)是人IgG分子，輕鏈和重鏈可變區(qū)可選自克隆292.12.3.1、292.84.1.6、292.63.5.3、294.144.3.5、292.39.5.3、292.51.5.2、292.64.6.5.5、292.105.4.1、292.109.4.4、292.118.6.4和292.72.3.1的輕鏈和重鏈可變區(qū)。這樣的嵌合抗體可具有a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；或j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，以及與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。還可產(chǎn)生具有或不具有信號(hào)序列的這樣的可變區(qū)。因此，此處公開的可變區(qū)和可變區(qū)的氨基酸序列可用于產(chǎn)生嵌合抗體，其中恒定區(qū)是人IgG分子，輕鏈和重鏈可變區(qū)可選自克隆292.12.3.1、292.84.1.6、292.63.5.3、294.144.3.5、292.39.5.3、292.51.5.2、292.64,6.5.5、292.105.4.1、292.109.4.4、292.118.6.4和292.72.3.1的輕鏈和重鏈可變區(qū)。這樣的嵌合抗體可具有a)包含SEQIDNO:31的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:32的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDN0:2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包舍SEQIDNO:4的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:36的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:39的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:41的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:42的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:43的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:44的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:47的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:48的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；或j)包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，以及與人IgG4Fc分子結(jié)合使用?？僧a(chǎn)生具有或不具有信號(hào)序列的這樣的可變區(qū)。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑包括在此描述的人源化形式的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。人源化IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑含有小鼠供體免疫球蛋白的CDR以及人受體免疫球蛋白的重鏈和輕鏈框架區(qū)。制備人源化抗體的方法公開于美國專利號(hào)5301101、5585089、5693762和6180370中(將它們每一篇通過全文引入作為參考)。然后，可將這些抗體的CDR移植到任意選擇的人框架區(qū)內(nèi)，這是本領(lǐng)域已知的，以便產(chǎn)生期望的人源化抗體。本發(fā)明還提供了竟?fàn)幮砸种茊慰寺】贵w結(jié)合至本發(fā)明的多肽，優(yōu)選SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的多肽的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。竟?fàn)幮砸种瓶赏ㄟ^本領(lǐng)域的任何已知方法測(cè)定，例如，采用在此描述的竟?fàn)幮越Y(jié)合測(cè)定法。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的抗體至少90%、至少80%、至少70°/。、至60°/。或至少50%地竟?fàn)幮砸种票景l(fā)明的單克隆抗體結(jié)合至SEQIDNO:2或SEQIDNO:4的多肽。本發(fā)明還提供了竟?fàn)幮砸种瓶贵w結(jié)合至本發(fā)明的表位的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，如通過本領(lǐng)域中用于測(cè)定竟?fàn)幮越Y(jié)合的任意已知方法，例如在此描述的免疫測(cè)定法測(cè)定。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，該抗體至少90%、至少80°/。、至少70%、至60%或至少50%地竟?fàn)幮砸种屏伺c表位的結(jié)合。[63]本發(fā)明的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑包括經(jīng)修飾的衍生物，例如，但不作為限制，衍生物包括已例如通過糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通過已知的保護(hù)基團(tuán)/阻斷基團(tuán)的衍生、溶蛋白性裂解、連接至細(xì)胞配體或其它蛋白質(zhì)等修飾的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。眾多化學(xué)修飾的任意一種可通過已知的技術(shù)完成，包括，但不限于特異性化學(xué)裂解、乙?；?、甲?；⒁旅顾氐拇x合成等。另外，衍生物可含有一種或多種非-典型的氨基酸。本發(fā)明IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑也包括在哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人中具有長于15天，優(yōu)選長于20天、長于25天、長于30天、長于35天、長于40天、長于45天、長于2個(gè)月、長于3個(gè)月、長于4個(gè)月或長于5個(gè)月的半衰期(例如，血清半衰期)的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。在哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人中，本發(fā)明的抗體或其片段延長的半衰期導(dǎo)致哺乳動(dòng)物中所述抗體或抗體片段的血清滴定度更高，并從而減少了所述抗體或抗體片段的施用頻率和/或降低了要施用的上述抗體或抗體片段的濃度。可通過修飾(例如，取代、刪除或添加)已確定為參與Fc結(jié)構(gòu)域和FcRn受體之間的相互作用的氨基酸殘基來增加IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的體內(nèi)半衰期(參見，例如國際出版物號(hào)WO97/3"31和WO02/060919,將其在此通過全文引入作為參考)，或通過連接至聚合物分子例如高分子量的聚乙二醇(PEG)來增加IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的體內(nèi)半衰期。可以用或不用多功能連接物，通過將PEG位點(diǎn)-專一性綴合至所述抗體或抗體片段的N-或C-端，或者通過存在于賴氨酸殘基上的s-氨基基團(tuán)，將PEG連接至所述的抗體或抗體片段上。將會(huì)使用導(dǎo)致生物活性損失最小化的線性或分支聚合物。綴合水平將會(huì)通過SDS-PAGE和質(zhì)鐠法密切監(jiān)控，以確保PEG分子適當(dāng)?shù)鼐Y合至抗體。未反應(yīng)的PEG可通過，例如分子排阻色語或離子交換色譜來與抗體-PEG綴合物分離。應(yīng)理解，通過本發(fā)明方法設(shè)計(jì)的人源化來增加IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可具有另外的保守氨基酸置換，其基本上不會(huì)影響抗原結(jié)合或其它的免疫球蛋白功能。保守置換意指組合例如giy，ala;val，ile，leu;asp，glu;asn,gln;ser,thr;lys,arg;以及phe,tyr。用于使非-人抗體人源化的方法是本領(lǐng)域中所熟知的。通常，人源化免疫球蛋白，包括人源化抗體，已通過基因工程構(gòu)建。先前已描述的大多數(shù)人源化免疫球蛋白(Jones等，如前述所引用的；Verhoeyen等，如前述所引用的；Riechmann等，如前述所引用的)含有與特殊的人免疫球蛋白鏈(受體)的框架區(qū)一致的框架區(qū)、以及來自非-人供體免疫球蛋白鏈的三個(gè)CDR。特別地，人源化抗體是來自結(jié)合期望的抗原的非-人種抗體的、具有來自非-人種的一個(gè)或多個(gè)互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)和來自人免疫球蛋白分子的框架區(qū)的抗體分子。本發(fā)明包括這樣的標(biāo)準(zhǔn)，通過該標(biāo)準(zhǔn)，選擇人源化免疫球蛋白鏈的框架中的有限數(shù)量氨基酸，使其與供體而不是受體中那些位置處的氨基酸相同，以便增加含有人源化免疫球蛋白鏈的抗體的親合力。本發(fā)明的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑部分是基于這樣的模式產(chǎn)生在先前產(chǎn)生人源化抗體(例如，用小鼠抗體作為CDR的來源)的方法中導(dǎo)致親合力喪失的兩個(gè)起作用的原因是(1)當(dāng)小鼠CDR與人框架結(jié)合時(shí)，靠近CDR的框架區(qū)中的氨基酸變成是人的而不是小鼠的。盡管不愿受理論束綽，這些改變的氨基酸可能使CDR稍微變形，因?yàn)樗鼈儺a(chǎn)生了與供體小鼠抗體中不同的靜電力或疏水性力，并且變形的CDR可能不會(huì)與抗原產(chǎn)生與CDR在供體抗體中進(jìn)行的一樣有效的接觸；以及(2)靠近CDR，但不是它的一部分(即，仍然是框架區(qū)的一部分)的初始小鼠抗體中的氨基酸可與抗原進(jìn)行有助于親合性的接觸。當(dāng)抗體進(jìn)行人源化時(shí)喪失了這些氨基酸，因?yàn)樗械目蚣馨被岫际侨说臑榱吮苊膺@些問題，并且為了產(chǎn)生對(duì)期望的抗原具有非常強(qiáng)的親合力的人源化抗體，本發(fā)明釆用了一條或多條下列原則用于設(shè)計(jì)人源化免疫球蛋白。同樣，所述標(biāo)準(zhǔn)可單獨(dú)使用，或者當(dāng)需要時(shí)組合使用，來獲得期望的親合力或其它特性?！獥l原則是，作為受體，采用來自與要進(jìn)行人源化的供體免疫球蛋白顯著同源的特殊的人免疫球蛋白的框架區(qū)，或者采用來自許多人抗體的共有框架區(qū)。例如，比較數(shù)據(jù)庫(例如，NationalBiomedicalResearchFoundationProteinIdentificationResource)中的小鼠重鏈(或輕鏈)可變區(qū)與人重鏈(或輕鏈)可變區(qū)的序列顯示，對(duì)于不同的人區(qū)域，同源性程度變化4艮大，通常約40%至約60-70%。通過選擇與供體免疫球蛋白的重鏈(各自的輕鏈)可變區(qū)最同源的人重鏈(各自的輕鏈)可變區(qū)作為受體免疫球蛋白，在從供體免疫球蛋白變成人源化免疫球蛋白中將會(huì)改變較少的氨基酸。因此，盡管再次不愿受理論束綽，據(jù)信僅存在更小的可能性來改變CDR附近的氨基酸而使它們的構(gòu)象變形。此外，含有人源化免疫球蛋白鏈的人源化抗體的精確的總體形狀可更接近類似于供體抗體的形狀，這也減少了使CDR變形的可能性。通常，將會(huì)選擇代表性收集的至少約10至20種不同的人重鏈中的，3-5個(gè)最同源的重鏈可變區(qū)序列之一來作為受體，以提供重鏈框架，并且對(duì)輕鏈也類似操作。優(yōu)選地，將會(huì)使用l-3個(gè)最同源的可變區(qū)中的一種。所選擇的受體免疫球蛋白鏈將最優(yōu)選在框架區(qū)與供體免疫球蛋白具有至少約65%的同源性。在許多情形中，將來自相同人抗體的輕鏈和重鏈用作受體序列可認(rèn)為是優(yōu)選的，以確保人源化的輕鏈和重鏈將會(huì)彼此發(fā)生有利的接觸。在該情況下，供體的輕鏈和重鏈將會(huì)只與來自其整個(gè)序列已知的人抗體，例如Eu、Lay、Pom、Wol、Sie、Gal、0u和WEA抗體的鏈進(jìn)行比較(Kabat等，如前述所引用的；有時(shí)候，人鏈的最后幾個(gè)氨基酸是未知的并且必須根據(jù)與其它人抗體的同源性來推斷)。將會(huì)選擇其中輕鏈和重鏈可變區(qū)序列(一并考慮)整體與供體的輕鏈和重鏈可變區(qū)序列最同源的人抗體。有時(shí)，將會(huì)更偏重于重鏈序列。所選擇的人抗體則將會(huì)提供輕鏈和重鏈?zhǔn)荏w序列。實(shí)際上，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)人Eu抗體會(huì)起到該作用。根據(jù)所謂的"最佳-匹配，，方法，相對(duì)于已知的人可變-結(jié)構(gòu)域序列的整個(gè)庫，篩選嚙齒動(dòng)物抗體的可變結(jié)構(gòu)域序列。然后，把與嚙齒動(dòng)物的序列最接近的人序列用作人源化抗體的人框架(FR)(Sims等，J.Immunol.，151:2296(1993);Chothia等，J.Mol.Biol.，196:901(1987))。另一種方法采用了一種特殊框架，該框架源自特殊輕鏈或重鏈亞組的所有人抗體的共有序列。相同的框架可用于多種不同的人源化抗體(Carter等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89:4285(1992);Presta等，J.Immnol.，151:2623(1993))。不管怎樣選擇受體(acceptor)免疫球蛋白，更高的親合力可通過選擇人源化免疫球蛋白鏈框架中的少量氨基酸，使其與供體而不是受體中那些位置的氨基酸一樣來實(shí)現(xiàn)。通常，人框架區(qū)中的框架殘基將會(huì)用來自CDR供體抗體的相應(yīng)殘基取代，以改變，優(yōu)選提高抗原結(jié)合。這些框架取代可通過本領(lǐng)域熟知的方法確定，例如通過模擬CDR和框架殘基的相互作用來確定對(duì)抗原結(jié)合重要的框架殘基，并通過序列比較來確定在特殊位置的特殊框架殘基。(參見，例如Queen等，美國專利號(hào)5，585，089;Riechmann等,Nature332:323(1988)，其在此通過全文引入作為參考)。可采用多種本領(lǐng)于已知的技術(shù)來使抗體人源化，例如CDR-嫁接(EP239，400、PCT出版物W091/09967、美國專利5，225,539、5，530，101和5，585，089)、鑲嵌術(shù)(veneering)或表面重建(resurfacing)(EP592,106;EP519,596;Padlan，MolecularImmunology28(4/5):489-498(1991);Studnicka等，ProteinEngineering7(6):805-814(1994);Roguska.等，PNAS91:969-973(1994))，以及鏈替換(美國專利號(hào)5565332)。因此，這種"人源化"抗體是其中基本上少于完整的人可變結(jié)構(gòu)域已由非-人種的相應(yīng)序列取代的嵌合抗體(美國專利號(hào)4816567)。對(duì)于人治療中的使用，人源化抗體通常具有優(yōu)于小鼠或在某些情況下優(yōu)于嵌合抗體的至少3個(gè)潛在優(yōu)勢(shì)(1)由于效應(yīng)子部分是人的，它可與人免疫系統(tǒng)中的其它部分更好的相互作用(例如，通過補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)或抗體-依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)來更有效地破壞靶細(xì)胞)。(2)人免疫系統(tǒng)將不會(huì)將人源化抗體的框架或恒定區(qū)識(shí)別成外來物，并從而對(duì)抗這種注入的抗體的抗體反應(yīng)應(yīng)該比對(duì)抗完全外源的小鼠抗體或部分外源的嵌合抗體的抗體反應(yīng)弱。(3)已報(bào)道注入的小鼠抗體在人循環(huán)中具有比一般抗體的半衰期短許多的半衰期(D.Shaw等，J.Immunol.，138，4534-4538(1987))。注入的人源化抗體將大概具有與天然存在的人抗體更相似的半衰期，使得能施用更少以及較少頻率的劑量。在一個(gè)方面，本發(fā)明旨在設(shè)計(jì)通過表達(dá)連接至編碼受體人框架區(qū)的DNA片段的重組DNA片段產(chǎn)生的人源化抗體，所述的重組DNA片段編碼能夠結(jié)合至期望抗原，例如IL-31的供體免疫球蛋白的重鏈和輕鏈CDR。DNA片段通常將會(huì)進(jìn)一步含有可操作性地連接至人源化免疫球蛋白編碼序列的表達(dá)控制DM序列，包括天然-相關(guān)的或異源的啟動(dòng)子區(qū)。該表達(dá)控制序列將會(huì)是能夠轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染真核宿主細(xì)胞的載體中的真核啟動(dòng)子系統(tǒng)，但是也可使用用于原核宿主的控制序列。一旦載體已整合進(jìn)合適的宿主中，將該宿主保持在適合高水平表達(dá)所述核苷酸序列的條件下，并且，根據(jù)需要，之后可收集和純化人源化的輕鏈、重鏈、輕鏈/重鏈二聚體或完整的抗體、結(jié)合片段或其它免疫球蛋白形式(參見，S.Beychok，CellsofImmunoglobulinSynthesis,AcademicPress,N.Y.，(1979)，將其在此通過引入作為參考)。所述抗-IL—31分子，例如，可通過在哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞例如中國倉鼠卵巢和HEK293F細(xì)胞中表達(dá)來制備。人恒定區(qū)DNA序列可按照熟知的方法，從多種人細(xì)胞，但優(yōu)選從永生化B-細(xì)胞中分離(參見，Kabat(如前述所引用的)和WP87/02671)。用于產(chǎn)生本發(fā)明免疫球蛋白的CDR將會(huì)類似地源自能夠結(jié)合預(yù)定抗原，例如IL-31的單克隆抗體，并通過熟知的方法在能夠產(chǎn)生抗體的任何合適的哺乳動(dòng)物源(包括小鼠、大鼠、兔子或其它脊椎動(dòng)物)中產(chǎn)生。恒定區(qū)和框架DM序列的合適的源細(xì)胞，以及用于免疫球蛋白表達(dá)和分泌的宿主細(xì)胞可從許多來源，例如美國典型培養(yǎng)物保藏中心獲得("CatalogueofCellLinesandHybridomas，，，第6版(1988)Rockville，Md.U.S.A.,將其在此通過引入作為參考)。除了特別在此描述的人源化免疫球蛋白外，其它與天然序列"充分同源"的經(jīng)修飾的免疫球蛋白可采用本領(lǐng)域那些技術(shù)人員熟知的多種重組DNA技術(shù)容易設(shè)計(jì)和產(chǎn)生。多種不同的人框架區(qū)可單獨(dú)或組合使用，用作本發(fā)明的人源化免疫球蛋白的基礎(chǔ)。一般而言，基因的修飾可容易通過多種熟知的技術(shù)，例如定位誘變完成(參見，Gillman和Smith,Gene，8，81-97(1979)以及S.Roberts等，Nature:328，731-734(1987),將兩者在在此通過引入作為參考)。本發(fā)明的人源化抗體包括片段以及完整的抗體。通常，這些片段與它們?cè)醋缘耐暾贵w竟?fàn)幗Y(jié)合抗原。片段通常以至少107M.—1，并且通常以108或109M.^的親合力結(jié)合(即在與完整的抗體相同的范圍內(nèi))。人源化的抗體片段包括單獨(dú)的重鏈、輕鏈Fab、Fab，F(xiàn)(ab')2和Fv。片段通過重組DNA技術(shù)，或者通過完整的免疫球蛋白的酶學(xué)性或化學(xué)性分裂產(chǎn)生。對(duì)于人源化抗體的進(jìn)一步詳細(xì)的內(nèi)容，可參見歐洲專利No.EP239400、EP592106和EP519596;國際出版物No.W091/09967和W093/17105;美國專利No.5225539、5530101、5565332、5585089、5766886和6407213;以及Padlan，1991，MolecularInmumology28(4/5):489498;Studnicka等，1994，ProteinEngineering7(6):805814;Roguska等，1994，PNAS91:969973;Tan等，2002，J.Immunol.169:111925;Caldas等，2000，ProteinEng.13:35360;Morea等，2000，Methods20:26779;Baca等，1997，J.Biol.Chem.272:1067884;Roguska等，1996，ProteinEng.9:895904;Couto等，1995，CancerRes.55(23Supp):5973s5977s;Couto等，1995，CancerRes.55:171722;Sandhu，1994，Gene150:40910;Pedersen等，1994，J.Mol.Biol.235:95973;Jones等，1986，Nature321:522-525;Reichmann等，1988,Nature332:323-329;以及Presta，1992，Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596。已經(jīng)發(fā)展了多種技術(shù)來用于產(chǎn)生抗體片段。傳統(tǒng)上，這些片段通過蛋白水解消化完整的抗體產(chǎn)生(參見，例如Morimoto等，JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods24:107-117(1992)和Brennan等，Science,229:81(1985))。然而，這些片段目前可直接由重組宿主細(xì)胞產(chǎn)生。例如，抗體片段可從如上討論的抗體噬菌體文庫中分離。備選地，F(xiàn)ab，-SH片段可從大腸桿菌直接回收并經(jīng)化學(xué)偶聯(lián)而形成F(ab，)2片段(Carter等，Bio/Technology10:163-167(1992))。根據(jù)另一種方法，F(xiàn)(ab，)2片段可從直接重組宿主細(xì)胞培養(yǎng)物中分離。用于產(chǎn)生抗體片段的其它技術(shù)對(duì)熟練從業(yè)人員來說將是顯而易見的。此外，可用于產(chǎn)生單鏈Fv和抗體的技術(shù)的實(shí)例包括在美國專利4946778和5258498、Huston等，MethodsinEnzymology203:46-88(1991)、Shu等，PNAS90:7995-7999(1993)，以及Skerra等，Science240:1038-1040(1988)中描述的那些。本發(fā)明包括重組融合或化學(xué)綴合(包括共價(jià)和非共價(jià)綴合)至本發(fā)明的多肽(或其部分，優(yōu)選該多肽的至少10、20或50個(gè)氨基酸)來產(chǎn)生融合蛋白的抗體。因此，本發(fā)明還涉及含有在此描述的抗體的免疫綴合物，其中所述抗體綴合至細(xì)胞毒素劑，例如化學(xué)治療劑、毒素(例如細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物源的酶促活性毒素，或其片段)或放射性同位素(即，放射綴合物)。本發(fā)明包括重組融合或化學(xué)綴合(包括共價(jià)和非共價(jià)綴合)至本發(fā)明的多肽(或其部分，優(yōu)選該多肽的至少10、20或50個(gè)氨基酸)來產(chǎn)生融合蛋白的抗體。融合不一定是直接的，而是可通過連接序列發(fā)生?？贵w可以是對(duì)不同于本發(fā)明的多肽(或其部分，優(yōu)選多肽的至少10、20或50個(gè)氨基酸)特異性的。例如，抗體可通過融合或綴合本發(fā)明多肽至對(duì)特殊的細(xì)胞表面受體特異性的抗體，用于體外或體內(nèi)靶向本發(fā)明多肽至特殊的細(xì)胞類型。融合或綴合至本發(fā)明多肽的抗體也可采用本領(lǐng)域已知的方法，用于體外免疫測(cè)定法和提純方法。參見，例如Harbor等，同上，以及PCT出版物W093/21232、EP439,095、Naramura等，Immunol.Lett.39:91-99(1994)、美國專利5，474，981、Gillies等，PNAS89:1428-1432(1992)、Fell等，J.Immunol.146:2446-2452(1991)，將其通過全文引入作為參考。本發(fā)明進(jìn)一步包括含有融合或綴合至異源多肽序列(例如，不是可變區(qū)的抗體的結(jié)構(gòu)域)的本發(fā)明多肽(例如，含有免疫原性表位或抗原表位的那些多肽)的組合物。例如，本發(fā)明的多肽可融合或綴合至抗體的Fc區(qū)，或其部分。例如，本發(fā)明的多肽(包括其片段或變體)可與免疫球蛋白(IgA、IgE、IgG、IgM)的恒定結(jié)構(gòu)域，或其部分(CmCH2、CH3或它們以及其部分的任意組合)融合，產(chǎn)生嵌合多肽。融合至本發(fā)明多肽的抗體部分可包括恒定區(qū)、絞鏈區(qū)、(V結(jié)構(gòu)域、CH2結(jié)構(gòu)域和CH3結(jié)構(gòu)域，或者全部結(jié)構(gòu)域或其部分的任意組合。多肽也可融合或綴合至上述抗體部分而形成多聚體。例如，與本發(fā)明多肽融合的Fc部分可通過Fc部分之間的二硫鍵形成二聚體。更高的多聚體形式可通過將多肽與IgA和IgM部分融合而產(chǎn)生。用于融合或綴合本發(fā)明的多肽至抗體部分的方法是本領(lǐng)域已知的。參見，例如美國專利號(hào)5，336，603、5，622，929、5，359，046、5，349，053、5，447，851、5,112,946、EP307,434、EP367,166、PCT出版物WO96/04388、WO91/06570、Ashkenazi等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:10535-10539(1991)、Zheng等，J.Immunol.154:5590-5600(1995)，以及Vil等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:11337-11341(1992)(將所述的參考文獻(xiàn)通過全文引入作為參考)。作為另一個(gè)非限制性實(shí)例，本發(fā)明的多肽和/或抗體(包括其片段或變體)可與白蛋白(包括但不限于重組的人血清白蛋白或其片段或變體(參見，例如美國專利5，876，969，出版于1999年3月2日，EP專利0413622,以及美國專利5，766，883，出版于1998年6月16日，將其在這此通過全文引入作為參考))融合。本發(fā)明的多肽和/或抗體(包括其片段或變體)可融合至異源蛋白質(zhì)(例如免疫球蛋白Fc多肽或人血清白蛋白多肽)的N-或C-末端。編碼本發(fā)明的融合蛋白的多聚核苷酸也包括在本發(fā)明內(nèi)。如上討論的，本發(fā)明的多肽可采用本領(lǐng)域已知的方法，與上述抗體部分融合或綴合以延長該多肽的體內(nèi)半衰期或用于免疫測(cè)定。此外，可將本發(fā)明的多肽融合或綴合至上述抗體部分以促進(jìn)純化。一個(gè)報(bào)道的實(shí)例描述了由人CD4-多肽的前兩個(gè)結(jié)構(gòu)域和哺乳動(dòng)物免疫球蛋白的重鏈或輕鏈恒定區(qū)的多個(gè)結(jié)構(gòu)域組成的嵌合蛋白質(zhì)。(參見，例如EP394，827;Traunecker等，Nature331:84-86(1988))。已證實(shí)了關(guān)于與FcRn結(jié)合伴侶例如IgG或Fc片段綴合的抗原(例如，胰島素)具有增強(qiáng)的遞送抗原穿過上皮屏障到達(dá)免疫系統(tǒng)的能力(參見，例如PCT出版物W096/22024和W099/04813)。與具有二硫鍵-連接的二聚體結(jié)構(gòu)(由于IgG)的抗體融合或綴合的本發(fā)明多肽也比單獨(dú)的單體分泌性蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)片段更有效地結(jié)合和中和其它分子。(Fountoulakis等，J.Biochem.270:3958-3964(1995))。在許多情形中，融合蛋白中的Fc部分在治療和診斷中是有利的，并因此可導(dǎo)致，例如改善的藥代動(dòng)力學(xué)特性。(EPA232,262)。備選地，在融合蛋白已經(jīng)表達(dá)、檢測(cè)和純化后除去Fc部分將是期望的。例如，如果融合蛋白用作用于免疫接種的抗原，則Fc部分可能妨礙治療和診斷。在藥物發(fā)現(xiàn)中，例如，已將人蛋白質(zhì)，例如hlL-5與Fc部分融合，以用于鑒定hlL-5的拮抗劑的高通量篩選測(cè)定法。(參見，D.Bennett等，J.MolecularRecognition8:52-58(1995);K.Joha謂n等，J.Biol.Chem.270:9459-9471(1995)0)。該技術(shù)還包括(但不限于)利用雙功能綴合劑(參見例如，U.S.Pat.Nos，5,756,065、5，714，631、5,696,239、5,652,361、5，505，931、5,489,425、5,435,990、5,428,139、5，342，604、5，274，119、4,994,560和5，808，003，特此將它們每一個(gè)的內(nèi)容通過全文引入作為參考)。此外，可將本發(fā)明的多肽(例如抗體或其片段)融合至標(biāo)記序列，例如肽來幫助它們的純化。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，編碼本發(fā)明多肽的核酸(包括，但不限于編碼免疫原和/或抗原表位的核酸)也可與作為表位標(biāo)簽的目標(biāo)基因(例如，血凝素標(biāo)簽"HA"或flag標(biāo)簽)重組，來幫助檢測(cè)和純化所表達(dá)的多肽。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，標(biāo)記氨基酸序列是六-組氨酸肽，例如pQE載體(QIAGEN，Inc.，9259EtonAvenue,Chatsworth,Calif.，91311)中提供的標(biāo)記，其中，多數(shù)可商業(yè)獲得。如Gentz等，Proc.Natl.Acad.Sci，USA86:821-824(1989)中所描述的，例如，將六-組氨酸用于方便純化融合蛋白?？捎糜诩兓钠渌臉?biāo)簽包括，但不限于相應(yīng)源于流感血凝素蛋白質(zhì)的表位的"HA"標(biāo)記(Wilson等，Cell37:767(1984))，以及"flag"標(biāo)簽。本發(fā)明進(jìn)一步包括綴合至診斷劑或治療劑的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。所述IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可在診斷上用于，例如，監(jiān)控腫瘤的發(fā)生或進(jìn)展(作為臨床檢測(cè)程序的部分)，來例如測(cè)定所提供的治療、診斷、檢測(cè)和/或預(yù)防方案的效力?？赏ㄟ^將該抗體偶聯(lián)至可檢測(cè)物質(zhì)來方便檢測(cè)。可檢測(cè)物質(zhì)的實(shí)例包括多種酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)、使用多種正電子發(fā)射斷層掃描術(shù)的正電子發(fā)射金屬，以及非放射性順磁性金屬離子。關(guān)于可與抗體綴合而用作根據(jù)本發(fā)明的診斷劑的金屬離子，參見，例如美國專利4741900。合適的酶的實(shí)例包括辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、^-半乳糖苷酶或乙酰膽堿酯酶；合適的輔基復(fù)合物的實(shí)例包括抗生蛋白鏈菌素/生物素和抗生物素蛋白/生物素；合適的熒光物質(zhì)的實(shí)例包括7-羥基香豆素、熒光素、異硫氰酸焚光素、若丹明、二氯三嗪基氨基熒光素、丹磺酰氯或藻紅蛋白；發(fā)光物質(zhì)的實(shí)例包括魯米諾；生物發(fā)光物質(zhì)的實(shí)例包括熒光素酶、熒光素和水母發(fā)光蛋白；并且合適的放射性物質(zhì)的實(shí)例包括1251、1311、min或"Tc。本發(fā)明的綴合物可用于調(diào)節(jié)給定的生物應(yīng)答，不能把治療劑或藥物部分理解為限于傳統(tǒng)的化學(xué)治療劑。例如，藥物部分可以是具有期望的生物活性的蛋白質(zhì)或多肽。這種蛋白質(zhì)可包括，例如，毒素如相思豆毒素、篦麻毒素A、假單胞菌外毒素或白喉毒素；蛋白質(zhì)例如腫瘤壞死因子、oc-干擾素、P-干擾素、神經(jīng)生長因子、血小板衍生的生長因子、組織纖維蛋白溶酶原激活劑、血栓形成制劑(thromboticagent)或抗-血栓形成劑，例如血管他丁或內(nèi)皮他丁；或者生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑例如，淋巴因子、白細(xì)胞介素-l("IL-1")、白細(xì)胞介素-2("IL-2")、白細(xì)胞介素-6("IL-6")、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子("GM-CSF")、粒細(xì)胞集落刺激因子("G-CSF")，或其它生長因子。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑還可連接至固體載體，其尤其可用于靶標(biāo)抗原的免疫測(cè)定或純化。這種固體栽體包括，但不限于玻璃、纖維素、聚丙烯酰胺、尼龍、聚苯乙烯、聚氯乙烯或聚丙烯。用于將這種治療劑部分與抗體綴合的技術(shù)是熟知的，參見,例如Arnon等，"MonoclonalAntibodiesForImmunotargetingOfDrugsInCancerTherapy"，inMonoclonalAntibodiesAndCancerTherapy,Reisfeld等，(eds.)，pp.243-56(AlanR.Liss，Inc.1985);Hellstrom等，"AntibodiesForDrugDelivery"，inControlledDrugDelivery(第2版)，Robinson等,(eds.)，pp.623-53(MarcelDekker，Inc.1987);Thorpe,"AntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapy:AReview"，inMonoclonalAntibodies'84:BiologicalAndCIinicalApplications,Pinchera等，(eds.)，pp.475-506(1985);"Analysis,Results,AndFutureProspectiveOfTheTherapeuticUseOfRadiolabeledAntibodyInCancerTherapy"，inMonoclonalAntibodiesForCancerDetectionAndTherapy,Baldwin等,(eds.)，pp.303-16(AcademicPress1985)，以及Thorpe等，"ThePreparationAndCytotoxicPropertiesOfAntibody-ToxinConjugates"，Immunol.Rev.62:119-58(1982)。備選地，如由Segal在美國專利4676980中描述的，IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可與第二抗體綴合而形成抗體異綴合物(heteroconjugate)，將其在jt匕通過全文引入作為參考?？蓪为?dú)施用或與細(xì)胞毒素因子和/或細(xì)胞因子組合施用的、與或不與治療劑部分綴合的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑用作治療劑。本領(lǐng)域那些技術(shù)人員已知的多種測(cè)定法可用于檢測(cè)結(jié)合至IL-31蛋白質(zhì)或多肽的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。示例性的測(cè)定法在Antibodies:ALaboratoryManual,HarlowandLane(Eds,)，ColdSpringHarborLaboratoryPress,1988中詳細(xì)描述。這種測(cè)定法的代表性實(shí)例包括并行免疫電泳(concurrentimmu畫lectrophoresis)、放射免疫測(cè)定法、放射免疫沉淀法、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)、斑點(diǎn)印跡或蛋白質(zhì)印跡測(cè)定法、抑制或竟?fàn)帨y(cè)定法，以及夾心測(cè)定法。另外，可根據(jù)結(jié)合野生型對(duì)突變型IL-31蛋白質(zhì)或多肽來篩選抗體。針對(duì)IL-31的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可用于對(duì)表達(dá)IL-31的細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)簽；用于通過親和提純來分離IL-31;用于測(cè)定IL-31多肽的循環(huán)水平的診斷測(cè)定；用于測(cè)定或定量可溶性IL-31作為潛在的病理或疾病的標(biāo)志；用于采用FACS的分析方法；用于篩選表達(dá)庫；用于產(chǎn)生抗-個(gè)體基因型抗體；以及用作中和抗體或用作拮抗劑來阻斷體外和體內(nèi)的IL-31活性。合適的直接標(biāo)簽或標(biāo)記包括放射性核素、酶、底物、輔助因子、抑制因子、熒光標(biāo)記、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、磁性顆粒等；間接標(biāo)簽或標(biāo)記可特征性地使用生物素-親和素或其它補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)作為媒介物。在這里，還可以直接或間接地將抗體與藥物、毒素、放射性核素等綴合，并且這些綴合物用于體內(nèi)診斷或治療應(yīng)用。而且，IL-31的抗體或其片段可在測(cè)定法，例如本領(lǐng)域已知的蛋白質(zhì)印跡或其它測(cè)定法中，用于體外檢測(cè)變性的IL-31或其片段。Fc結(jié)構(gòu)域的選擇可牽連(i)抗體的效應(yīng)子作用(結(jié)合FcYR(ADCC)/結(jié)合Clq(CDC))和潛在地相伴的副作用，(ii)其藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)(結(jié)合FcRn)包括半衰期，以及(iii)可能地牽連免疫復(fù)合物的清除。Fc結(jié)構(gòu)域的效應(yīng)子功能包括吞噬作用、炎癥介質(zhì)的釋放、抗體產(chǎn)生的調(diào)控以及最重要地依賴抗體的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)和補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性(CDC)。這些效應(yīng)子作用的任一個(gè)被誘導(dǎo)的程度取決于Fc結(jié)構(gòu)域與相關(guān)蛋白質(zhì)介質(zhì)的相互作用、Fcy受體和Clq的相關(guān)作用，并且差異取決于IgG亞類恒定區(qū)(Fc)和它們與這些蛋白質(zhì)的相互作用。IgGl的Fc結(jié)構(gòu)域與免疫系統(tǒng)效應(yīng)細(xì)胞上的FcyRI，、FcYRIIa和FcYRIII相互作用。不同F(xiàn)cy受體的精確作用仍待闡明，但FcYRIIIA據(jù)認(rèn)為是在NK細(xì)胞而且還在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上主要表達(dá)的最重要的介導(dǎo)ADCC的受體。IgGl也結(jié)合Clq并且可觸發(fā)主要由表達(dá)FcyRIII的NK細(xì)胞介導(dǎo)的CDC。參見Gessner，j.E.,等，TheIgGFcReceptorFamily,Ann.Hematol.1998Jun:76(6):231-248。IgG4Fc結(jié)構(gòu)域具有大大減少的對(duì)不同F(xiàn)cy受體和Clq的結(jié)合親和力，相應(yīng)于減少的ADCC和CDC。例如，Sharma等檢查了IgGlmAb和其IgG4衍生物(其各自具有靶向CD4的相同的可變區(qū))的直接比較。兩種mAb都以等劑量水平減少CD4的表達(dá)并且具有相同的藥物代謝動(dòng)物力學(xué)性質(zhì)，但I(xiàn)gGl形式顯示更有效的ADCC效應(yīng)。參見SharmaA.，等，ComparativepharmacodynamicsofkeliximabandclenoliximabintransgenicmicebearinghumanCD4.JPharmacolExpTher.2000Apr;293(1):33-41。當(dāng)與其他IgG同種型mAb相比，效應(yīng)器陰性IgG4mAb的結(jié)合親和力大大減少，如果不是被消除的話。然而，與Brambell受體(FcRn)相互作用的能力保持在IgG4中，從而通過延長的半衰期影響IgG4同種型mAb的藥代動(dòng)力學(xué)。然而IgGl通常顯示對(duì)ADCC和CDC兩者的高活性，IgG4據(jù)認(rèn)為具有低ADCC或CDC活性至無ADCC或CDC活性。在市場(chǎng)上、臨床中或研究和開發(fā)的不同階段上使用的IgG4同種型mAb的幾個(gè)實(shí)例。這些治療用mAb被開發(fā)用于腫瘤學(xué)、自身免疫炎癥中的多種適應(yīng)癥以及用于抗病毒療法。如由Aalberse等報(bào)道的(參見AalberseRC，Schuurman，J.IgG4breakingtherules,I畫nology2002,105:9-19)，人(IgG4)由于分泌的人IgG4的一部分中的鉸鏈區(qū)中的重鏈內(nèi)二疏鍵的不均一性而以兩種分子形式存在。該不均一性僅在其中檢測(cè)到HL"半抗體"的變性、非還原條件下顯現(xiàn)出來，在其他人IgG同種型中未觀察到該現(xiàn)象。Tay1or報(bào)導(dǎo)樣品操作過程中的人工假象例如當(dāng)暴露于還原劑時(shí)快速的二石?；锊灰?guī)則(rapiddisulfidescrambling)和再氧化可促成一定量的半抗體出現(xiàn)(TaylorFR，等，.SuppressionofSodiumDodecylSulfate-PolyacrylamideGelElectrophoresisSamplePreparationArtifactsforAnalysisofIgG4Half-Antibody.AnalyticalBiochemistry2006，353:204-208)。在天然條件下，非共價(jià)鍵要互作用確?？贵w以H2L2四聚體形式保持在一起。雖然，IgG4振報(bào)導(dǎo)與循環(huán)中的其他IgG4分子異二聚化。連接人IgG重鏈的抗體的F[ab]和Fc部分的鉸鏈序列的分析顯示在殘基241上絲氨酸的存在可能是該不均一性的原因IgG4鉸鏈區(qū)包含Cys-Pro-Ser-Cys序列而非IgGl中的Cys-Pro-Pro-Cys序列。小鼠/人嵌合重鏈中241上的絲氨酸至脯氨酸(見于IgGl和IgG2中的該位點(diǎn))的變化導(dǎo)致均一抗體的產(chǎn)生和消除不均一性。此外，與原始嵌合IgG4相比，變體IgG4具有顯著延長的血清半衰期和顯示提高的組織分布。合適的可檢測(cè)分子可直接或間接連接至多肽或抗體，并且包括放射性核素、酶、底物、輔助因子、抑制因子、熒光標(biāo)記、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、磁性顆粒等。合適的細(xì)胞毒素分子可直接或間接連接至多肽或抗體，并且包括細(xì)菌或植物毒素(例如白喉毒素、皂草素、假單胞菌外毒素、蓖麻毒素、相思豆毒素等)，以及治療性放射性核素，例如碘-131、錸-188或釔-90(可直接連接至多肽或抗體，或者通過利用例如螯合部分來間接連接)。多肽或抗體還可以與細(xì)胞毒類藥物，例如阿霉素綴合。為了間接連接可檢測(cè)分子或細(xì)胞毒素分子，可將可檢測(cè)分子或細(xì)胞毒素分子與補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)的一個(gè)成員綴合，而另一個(gè)成員則與多肽或抗體部分結(jié)合。為此目的，生物素/抗生蛋白鏈菌素是一種示例性的補(bǔ)體/抗補(bǔ)體對(duì)。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑還可用作IL-31"拮抗劑"來體外和體內(nèi)阻斷IL-31結(jié)合以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。這些IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑應(yīng)該可用于抑制IL-31活性或蛋白質(zhì)-結(jié)合多肽-毒素融合蛋白或抗體-毒素融合蛋白可用于靶向的細(xì)胞或組織的抑制或切除(例如，來治療癌細(xì)胞或組織)。備選地，如果所述的多肽具有多個(gè)功能結(jié)構(gòu)域(即，活化結(jié)構(gòu)域或受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域，加上靼向結(jié)構(gòu)域)，則僅包含靶向結(jié)構(gòu)域的融合蛋白可適合用于引導(dǎo)可檢測(cè)分子、細(xì)胞毒素分子或補(bǔ)體分子至目標(biāo)細(xì)胞或組織類型中。在其中僅有該結(jié)構(gòu)域的融合蛋白包括補(bǔ)體分子的情況下，可將抗-補(bǔ)體分子與可檢測(cè)分子或細(xì)胞毒素分子綴合。這種結(jié)構(gòu)域-補(bǔ)體分子融合蛋白因而代表了用于細(xì)胞/組織-特異性遞送通用的抗-補(bǔ)體-可檢測(cè)/細(xì)胞毒素分子綴合物的通用靶向載體或媒介物。本發(fā)明的另外的目的是分離的核酸分子或其互補(bǔ)鏈或簡(jiǎn)并序列，所述核酸分子編碼上本文中上述或下述的任何抗體。在這點(diǎn)上，術(shù)語"核酸分子"包括所有不同類型的核酸，包括但不限于脫氧核糖核酸(例如.，DNA、cDNA、gDNA、合成的DNA等)、核糖核酸(例如，RNA、mRNA等)以及肽核酸(PNA)。在優(yōu)選實(shí)施方案中，核酸分子是DNA分子，例如雙鏈DNA分子或cDNA分子。術(shù)語"分離的"指已鑒定的并且與通常在天然來源中與其結(jié)合的至少一種污染性核酸分子分離的核酸分子。分離的核酸分子不以其中它在自然界中被發(fā)現(xiàn)的形式或背景(setting)存在。分離的核酸分子因而與specific核酸分子相區(qū)別，因?yàn)槠浯嬖谟谔烊患?xì)胞中。簡(jiǎn)并序列是指編碼與參照核苷酸序列相同的氨基酸序列的任何核苷酸序列，但作為遺傳密碼簡(jiǎn)并性的結(jié)果，其包括不同的核苷酸序列。本發(fā)有的另外的目的是包含編碼上述或下述抗體的任一個(gè)的DNA的載體。所述載體可以是任何克隆或表達(dá)載體，整合復(fù)制或自主復(fù)制，在任何原核或真核細(xì)胞中具有功能。特別地，所述載體可以是質(zhì)粒、粘粒、病毒、噬菌體、附加體、人造染色體等。所述載體可包含調(diào)控元件例如啟動(dòng)子、終止子、增強(qiáng)子、選擇標(biāo)記、復(fù)制起始區(qū)等。這樣的載體的特定實(shí)例包括原核質(zhì)粒例如pBR、pUC或pcDNA質(zhì)粒；病毒栽體，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、腺病毒栽體或AAV載體；謹(jǐn)菌體；桿狀病毒；BAC或YAC等也將在下面討論。可通過多種方法將合適的核酸序列插入載體。一般而言主，使用本領(lǐng)域內(nèi)已知的技術(shù)將DNA插入合適的限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)。包含一個(gè)或多個(gè)這些組件的合適的栽體的構(gòu)建使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)連接技術(shù)。本發(fā)有的另外的目的是重組宿主細(xì)胞，其中所述細(xì)胞包含如上定義的核酸分子或載體。宿主細(xì)胞可以是原核細(xì)胞或真核細(xì)胞。原核細(xì)胞的實(shí)例包括細(xì)菌，例如大腸桿菌(E.coli.)。真核細(xì)胞的實(shí)例是酵母細(xì)胞、植物細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞，包括任何原代細(xì)胞培養(yǎng)物或已建立的細(xì)胞系(例如，3T3、V6ro、HEK293、TN5等)。用于表達(dá)糖基化蛋白的合適的宿主細(xì)胞來源于多細(xì)胞生物。無脊推動(dòng)物細(xì)胞的實(shí)例包括昆蟲細(xì)胞例如果蠅S2和果蠅Sf9以及植物細(xì)胞。有用的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系的實(shí)例包括用SV40轉(zhuǎn)化的猴腎CV1系(C0S-7，ATCCCRL1651);人胚腎系(用于懸浮培養(yǎng)的亞克隆的293或293細(xì)胞，Graham等.，J.GenVirol.，36:59(1977));中國倉鼠卵巢細(xì)胞/-DHFR(CHO，Urlaub和Chasin，Proc.Natl,Acad.Sci.USA,77:4216(1980));小鼠塞爾托利細(xì)胞(TM4，Mather,Biol.Reprod.，23:243-251(1980));人肺細(xì)胞(W138，ATCCCCL75);人肝細(xì)胞(HepG2，HB8065);和小鼠乳腺腫瘤(MMT060562，ATCCCCL51)。本發(fā)明的特別優(yōu)選哺乳動(dòng)物細(xì)胞是CH0細(xì)胞。如此處上面所公開的，本發(fā)明的抗體可通過本身在本領(lǐng)域內(nèi)已知的任何技術(shù)例如通過重組技術(shù)、化學(xué)合成、克隆、連接或其組合來產(chǎn)生。在特定的實(shí)施方案中，抗體通過重組技術(shù)例如通過在合適的宿主細(xì)胞中表達(dá)相應(yīng)的核酸來產(chǎn)生。本發(fā)明的另一個(gè)目的因而是產(chǎn)生本發(fā)明的抗體的方法，所述方法包括在允許所述核酸分子表達(dá)的條件下培養(yǎng)本發(fā)明的重組宿主細(xì)胞，和回收產(chǎn)生的多肽。產(chǎn)生的多肽可進(jìn)行糖基化或不進(jìn)行糖基化，或可包含其他翻譯后修飾，這取決于所使用的宿主細(xì)胞。許多書和綜述提供了關(guān)于如何使用栽體和原核或真核宿主細(xì)胞克隆和產(chǎn)生重組蛋白的教導(dǎo)，例如由OxfordUniversityPress出版的系列"APracticalApproach"中的一些書名("DNACloning2:ExpressionSystems",1995;"DNACloning4:MammalianSystems"，1996;"ProteinExpression"，1999;"ProteinPurificationTechniques"，2001)。用于產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的抗體的方法的載體可以是附加體或非同源/同源整合的載體，其要通過任何合適的方法(轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、綴合、原生質(zhì)體融合、電穿孔、磷酸鈣-沉淀、直接顯微注射等)導(dǎo)入合適的宿主細(xì)胞。選擇特定質(zhì)粒、病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的重要因素包括包含栽體的受體細(xì)胞可被識(shí)別和從不包含栽體的那些受體細(xì)胞中選擇的容易程度；在特定宿主中期望的栽體的拷貝數(shù)目；和是否想要能夠使栽體在宿主細(xì)胞或不同的物種之間"穿梭，，。栽體應(yīng)當(dāng)允許/終止調(diào)控序列的控制下表達(dá)，所述調(diào)控序列經(jīng)選擇在所述細(xì)胞中具有組成型活性或誘導(dǎo)型活性。然后可將在這樣的細(xì)胞中充分富集的細(xì)胞系分離，從而提供穩(wěn)定的細(xì)胞系。宿主細(xì)胞用此處描述的表達(dá)或克隆載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化以用于蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，將所述細(xì)胞培養(yǎng)在視適合于誘導(dǎo)啟動(dòng)子、選擇轉(zhuǎn)化子或擴(kuò)增編碼期望的序列的情況而改進(jìn)的常規(guī)培養(yǎng)基中。培養(yǎng)條件例如培養(yǎng)基、溫度、pH等可由本領(lǐng)域技術(shù)人員選擇而無需過度的實(shí)驗(yàn)。一般而言，用于使細(xì)胞培養(yǎng)物的產(chǎn)率最大化的原理、方案和實(shí)施技術(shù)見于MammalianCel1Biotechnology:aPracticalApproach,M.Butler，ed.(IRLPress,1991)和Sambrook等，同上。用于本發(fā)明的優(yōu)選細(xì)胞是真核宿主細(xì)胞例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞，例如人、猴、小鼠和中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞，因?yàn)樗鼈兲峁?duì)蛋白質(zhì)分子的翻譯后修飾，包括正確折疊或在正確的位點(diǎn)進(jìn)行糖基化。合適的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的實(shí)例包括非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero;ATCCCRL1587)、人胚腎細(xì)胞(293-HEK;ATCCCRL1573)、幼倉鼠腎細(xì)胞(BHK-21,BHK-570;ATCCCRL8544，ATCCCRL10314)、犬腎細(xì)胞(MDCK;ATCCCCL34)、中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CH0-K1;ATCCCCL61;CH0DG44(Chasin等.，Som.Cell.Molec.Genet.12:555，1986))、大鼠垂體細(xì)胞(GHl;ATCCCCL82)、HeLaS3細(xì)胞(ATCCCCL2.2)、大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞(H-4-II-E;ATCCCRL1548)、SV40-轉(zhuǎn)化的猴腎細(xì)胞(COS-l;ATCCCRL1650)、Bowes黑素瘤和人肝細(xì)胞癌(例如HepG2)、鼠胚細(xì)胞(NIH-3T3;ATCCCRL1658)和許多其他細(xì)胞系。備選的真核宿主細(xì)胞是用酵母表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的酵母細(xì)胞(例如，釀酒酵母(Saccharomyces)、克魯維酵母等)。同樣，酵母細(xì)胞可進(jìn)行翻譯后肽修飾，包括糖基化。存在許多利用強(qiáng)啟動(dòng)子序列和高拷貝數(shù)的質(zhì)粒的可用于在酵母中產(chǎn)生期望的蛋白質(zhì)的重組DNA策略。酵母細(xì)胞識(shí)別克隆的哺乳動(dòng)物基因產(chǎn)物中的前導(dǎo)序列和分泌具有前導(dǎo)序列的多肽(即，前肽)。關(guān)于重組多肽的長期、高產(chǎn)率的產(chǎn)生，穩(wěn)定的表達(dá)是優(yōu)選的。例如，穩(wěn)定地表達(dá)目的多肽的細(xì)胞系可使用可表達(dá)栽體進(jìn)行轉(zhuǎn)化，所述表達(dá)載體可在相同或分開的載體上包含病毒復(fù)制起始區(qū)和/或內(nèi)源表達(dá)元件和選擇標(biāo)記基因。在載體導(dǎo)入后，可在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至選擇培養(yǎng)之前讓它們?cè)诩痈慌囵B(yǎng)基上培養(yǎng)1至2天。選擇標(biāo)記的目的是賦予對(duì)選擇的抗性，并且其存在允許成功地表達(dá)導(dǎo)入的序列的細(xì)胞生長和回收?？墒褂眠m合于細(xì)胞類型的組織培養(yǎng)技術(shù)增殖穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的細(xì)胞的抗性克隆。然后分離在這樣的細(xì)胞中充分富庥的細(xì)胞系以提供穩(wěn)定的細(xì)胞系。本發(fā)明的重組多肽的重組多肽的高產(chǎn)率產(chǎn)生的特別優(yōu)選方法是通過在DHFR缺陷型CH0細(xì)胞中使用二氫葉酸還原酶(DHFR)，通過使用不斷增加的水平的甲氨喋呤來進(jìn)行的，如US4，889，803中所描述的。獲得的多肽可以以糖基化的形式存在。此處公開的抗體還可在其他真核細(xì)胞例如鳥類、真菌、昆蟲、酵母或植物細(xì)胞中表達(dá)。桿狀病毒系統(tǒng)提供有效的方法來將克隆的基因?qū)肜ハx細(xì)胞。用于桿狀病毒/昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的材料以試劑盒的形式從(除其他以外)Invitrogen商購獲得。除了重組DNA技術(shù)外，本發(fā)明的抗體可通過化學(xué)合成技術(shù)來制備?；瘜W(xué)合成技術(shù)的實(shí)例是固相合成和液相合成。對(duì)于固相合成，例如，將相應(yīng)于待合成的多肽的羧基端的氨基酸結(jié)合至不溶于有機(jī)溶劑的載體，并且通過交替重復(fù)的反應(yīng)(例如，通過氨基酸利用它們的用合適的保護(hù)基團(tuán)保護(hù)的氨基和側(cè)鏈官能團(tuán)進(jìn)行的連續(xù)縮合)使多肽延伸。取決于所使用的保護(hù)基團(tuán)的類型，固相合成方法大致分為tBoc法和Fmoc法。完全合成的蛋白質(zhì)爿^開于文獻(xiàn)(BrownA等，1996)?？僧a(chǎn)生、配制、施用本發(fā)明的抗體，或可在屬類上以根據(jù)期望的使用和/或生產(chǎn)方法可以是優(yōu)選的其他備選形式使用其。本發(fā)明的蛋白質(zhì)可進(jìn)行翻譯后修飾，例如通過糖基化修飾。本發(fā)明的多肽或蛋白質(zhì)可以以分離的(或純化的)生物活性形式或以其前體、衍生物和/或鹽的形式提供。在另一個(gè)實(shí)施方案中，IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑融合蛋白可用于體內(nèi)殺死其中表達(dá)IL-31受體的靶組織(通常參見，Hornick等Blood89:4437-47，1997)。所描述的融合蛋白能夠使IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑靶向至期望的作用位點(diǎn)，從而提供提高了局部濃度的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，靶向不期望的細(xì)胞或組織(即腫瘤或白血病)，并且融合的細(xì)胞因子介導(dǎo)了提高的由效應(yīng)細(xì)胞進(jìn)行的耙細(xì)胞溶解。用于此目的的杏適的細(xì)胞因子包括，例如白細(xì)胞介素2和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)?？蓽y(cè)量本發(fā)明的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑抑制、阻斷或中和IL-31配體的能力，如通過本領(lǐng)域已知的和在此描述的多種體內(nèi)模型，包括但不限于NC/Nga模型、0va上表皮模型(epicutaneousmodel)、慢性過敏反應(yīng)模型和慢性半抗原模型(chronichaptenmodel)測(cè)定。已經(jīng)將皮膚歸巢T細(xì)胞(skin-homingTCell)和表皮角質(zhì)細(xì)胞牽連于人類皮膚疾病的病理學(xué)中。在人中，IL-31mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)局限于皮膚-歸巢0^+T細(xì)胞群。參見2006年2月14日提交的美國專利申請(qǐng)?zhí)?1/353,427，在此引用作為參考。因而，IL-31的拮抗劑，包括抗體或受體拮抗劑將可用于治療具有CLA+T細(xì)胞表達(dá)的皮膚和表皮疾病。這種疾病包括，例如特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢疹以及大皰性類天皰瘡。趨化因子標(biāo)記例如TARC和MDC可用于測(cè)量中和性單克隆抗體對(duì)IL-31的效力。使用在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的治療的抑制效果可通過監(jiān)控TARC和MDC的水平測(cè)量。接觸性皮炎過敏性接觸性皮炎可定義為T細(xì)胞介導(dǎo)的對(duì)與皮膚接觸的抗原的免疫反應(yīng)。由于變應(yīng)原依賴性T細(xì)胞應(yīng)答很大程度上限于CLA+細(xì)胞群(參見Santamaria-Babi,L.F.，等,JExpMed:181，1935，(1995))，CLA+T細(xì)胞群被認(rèn)為涉及皮炎的引發(fā)。最近的數(shù)據(jù)已發(fā)現(xiàn)，只有記憶性(CD45R0+)CD4+CLA+而不是CD8+T細(xì)胞在響應(yīng)鎳(一種普通的接觸性過敏變應(yīng)原)時(shí)增殖并產(chǎn)生了1型(IFN-)和2-型(IL-5)細(xì)胞因子。此外，表達(dá)CLA與CD4、CD45RO(記憶)或CD69組合的細(xì)胞在鎳-特異性刺激后增加，并表達(dá)了趨化因子受體CXCR3、CCR4、CCR10而不是CCR6。參見MoedH.，等，BrJDermatol:51，32，(2004)。在動(dòng)物模型中，已證明過敏性接觸性皮炎是T-細(xì)胞依賴性的，而且過敏性-應(yīng)答T細(xì)胞遷移到了變應(yīng)原作用位點(diǎn)。一般參見EngemanT,M.，等,JImmunol:164，5207，(2000)、FergusonT.A.&KupperT.S.JImmunol:150，1172，(1993)，以及GorbachevA.V.&FairchildR.L.CritRevImmunol:21，451(2001)。由于CLA+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-31并且IL-31刺激皮膚角質(zhì)細(xì)胞可誘發(fā)炎癥促進(jìn)趨化因子，例如TARC和MDC，IL-31可能涉及接觸性皮炎的病理生理學(xué)。在接觸性過敏反應(yīng)的小鼠模型中使用中和性IL-31抗體。參見實(shí)施例5。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31可用于通過抑制、減少、中和、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓，來改善接觸性過敏反應(yīng)的臨床效果。特應(yīng)性皮炎特應(yīng)性皮炎(AD)是一種近十年來具有顯著增加的發(fā)病率的、慢性復(fù)發(fā)性炎性皮膚病。臨床上AD表征為高搔癢性的、通常為顯示一個(gè)慢性復(fù)發(fā)性病程的表皮剝脫斑和丘滲。AD的診斷主要基于重大的及較小的臨床發(fā)現(xiàn)。參見HanifinJ.M.，ArchDermatol;135，1551(1999)。組織病理學(xué)顯示為急性病患中的棘細(xì)胞層水胂、過度不全角化和灶性角化不全，然而伴隨有過度不全角化和灶性角化不全、棘皮癥/顆粒層增厚的明顯的表皮超常增生，以及淋巴細(xì)胞和大量肥大細(xì)胞在真皮的血管周圍浸潤是慢性病患的標(biāo)志。T細(xì)胞在組織的局部免疫應(yīng)答的引發(fā)中起著重要的作用，并且有證據(jù)顯示，皮膚-浸潤性T細(xì)胞尤其在皮膚的失調(diào)的免疫應(yīng)答的引發(fā)和維持中起關(guān)鍵作用。在表皮的炎性位點(diǎn)中，約90。/。的浸潤性T細(xì)胞表達(dá)結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞選擇素(在內(nèi)皮上的一種誘導(dǎo)性黏附分子)的皮膚淋巴細(xì)胞-相關(guān)的Ag(CLA+)(在Santamaria-BabiL.F.等，EurJDermatol.14，13，(2004)中綜述)。與對(duì)照個(gè)體比較，在AD患者中循環(huán)CLA+T細(xì)胞的顯著增加已得以證明(參見，TerakiY.等，BrJDermatol:143，373(2000))，同時(shí)其它研究已證明，與CLA-群比較，AD患者的記憶CLA+T細(xì)胞優(yōu)先相應(yīng)變應(yīng)原浸出物(參見Santamaria-Babi，L.F.等，JExpMed:181，1935，(1995))。在人中，已將皮膚特應(yīng)性疾病的發(fā)病機(jī)理與表達(dá)增加水平的Th-2-型細(xì)胞因子，如IL-5和IL-139、10的CLA+T細(xì)胞的增加聯(lián)系起來。參見，AkdisM等，EurJImmunol:30，3533(2000)，以及HamidQ等，JAllergyClinImmunol:98，225(1996)。約6-8周大的NC/Nga小鼠在無非特異性病原體的(非-SPF)條件下圏養(yǎng)時(shí)，會(huì)自發(fā)地產(chǎn)生類似AD的損傷，其在許多方面類似人AD,包括臨床過程和征兆、組織病理學(xué)和免疫病理學(xué)。相反，保持在SPF條件下的NC/Nga小鼠不會(huì)發(fā)生皮膚病損。然而，可通過每周皮內(nèi)注射粗的粉塵螨抗原，來使在SPF實(shí)驗(yàn)室中圏養(yǎng)的NC/Nga小鼠同步發(fā)生自發(fā)性皮膚病損和搔抓行為。參見MatsuokaH等，Allergy:58，139(2003)。因此，NC/Nga中AD的發(fā)生是用于評(píng)估用于治療AD的新治療劑的有用模型。除了自發(fā)性AD的NC/Nga模型，使用OVA的小鼠的上表皮致敏作用也可用作模型來在致敏的小鼠的皮膚中，誘導(dǎo)抗原-依賴性表皮和真皮增厚，同時(shí)單核細(xì)胞侵潤其中。這通常與總的和特異性IgE的血清水平升高同時(shí)發(fā)生，然而，在該模型中一般不會(huì)發(fā)生皮膚屏障機(jī)能障礙或搔癢癥。參見SpergelJ.M等，JClinInvest,101:1614，(1998)?？梢孕薷谋痉椒ㄒ员阃ㄟ^用OVA使DOll.lOOVATCR轉(zhuǎn)基因小鼠致敏來誘導(dǎo)皮膚屏障失調(diào)和搔癢癥。增加能夠識(shí)別致敏性抗原的抗原-特異性T細(xì)胞的數(shù)量可增加皮膚的炎癥水平而誘導(dǎo)明顯的皮膚搔抓行為和皮膚苔癬化/鱗屑化。NC/Nga自發(fā)性AD模型和0VA表皮D011.10模型都可用于評(píng)估在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑抑制、減少或中和IL-31的效果的能力。施用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可導(dǎo)致搔抓的減少，這可有效地治療搔癢性疾病，包括但不限于特應(yīng)性皮炎、結(jié)節(jié)性癢滲和濕滲，因?yàn)樯ψバ袨榈耐Ｖ箤?huì)使皮炎停止發(fā)展，皮炎的發(fā)生依賴于搔抓行為。用于測(cè)量在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的抑制效果的另外的模型由Umeuchi，H.等，EuropeanJournalofPharmacology,518:133-139，2005，以及由Yoo，J等，J.ExperimentalMedicine,202:541-549，2005描述。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善皮炎和搔癢性疾病，包括特應(yīng)性皮炎、結(jié)節(jié)性癢滲和濕滲的臨床結(jié)果。藥物-誘導(dǎo)的遲發(fā)型皮膚變應(yīng)性反應(yīng)藥物-引發(fā)的遲發(fā)型皮膚變應(yīng)性反應(yīng)是十分異質(zhì)性的，并且可反映出許多特殊的病理生理事件。參見BrockowK等，Allergy:57,45(2002)。涉及這些反應(yīng)的免疫機(jī)理已顯示為抗體或細(xì)胞介導(dǎo)的。在即發(fā)型藥物過敏中，IgE-介導(dǎo)的抗體反應(yīng)可通過陽性皮膚穿刺和/或皮內(nèi)試驗(yàn)在20分鐘后證明，而對(duì)藥物的非-即刻反應(yīng)可在最后用藥長于1小時(shí)后發(fā)生，并且通常是T-細(xì)胞介導(dǎo)的。非-即刻T-細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型反應(yīng)可例如在對(duì)青霉素類產(chǎn)生有害的藥物反應(yīng)的患者中發(fā)生。已顯示，對(duì)青霉素類的增殖性T細(xì)胞反應(yīng)局限于來自青霉素過敏患者的T細(xì)胞的記憶(CD45R0+)CLA+亞群，而CD45RO+CLA-亞群未顯示增殖反應(yīng)。參見BlancaM.，LeyvaL等，BloodCellsMolDis:31，75(2003)。遲發(fā)型過敏(DTH)反應(yīng)可在小鼠中人為地再現(xiàn)，使得能評(píng)估可參與DTH反應(yīng)的起始和維持的因子。11-31中和抗體或IL-31拮抗劑在遲發(fā)型變應(yīng)性反應(yīng)中是有效的。[137]中毒性表皮壞死溶解(TEN)是一種非常罕見但非常嚴(yán)重的藥物反應(yīng)，其特征在于伴隨有大量水皰的大范圍表皮細(xì)胞調(diào)亡。研究已經(jīng)顯示，浸潤水皰的淋巴細(xì)胞是CLA+T細(xì)胞并且可顯示出對(duì)表皮角質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞毒性。參見LeyvaL等，JAllergyClinImmunol:105，157(2000)，以及NassifA.，BensussanA等，JAllergyClinImmunol:114，12092004。已產(chǎn)生了一種轉(zhuǎn)基因小鼠系統(tǒng)來建立TEN的動(dòng)物模型，所述的轉(zhuǎn)基因小鼠系統(tǒng)中，OVA在角蛋白-5(K5)啟動(dòng)子的控制下在小鼠的表皮和毛嚢的角質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)。OVA特異性CD8+T細(xì)胞在獲得性地轉(zhuǎn)移進(jìn)K5-OVA小鼠中時(shí)，在皮膚-引流淋巴結(jié)中得到激活和增殖并靼向K5-OVA小鼠的皮膚，導(dǎo)致表明TEN的皮膚病損產(chǎn)生。參見AzukizawaH等，EurJImmunol:33，1879(2003)。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31，可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善TEN的臨床結(jié)果。大皰性類天皰瘡大皰性類天皰瘡是一種表皮下障礙，其表現(xiàn)為表皮下的水皰，伴隨有中性粒細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞的皮膚浸潤。診斷的特征是，對(duì)抗表皮和真皮-表皮交界部的特異性黏著蛋白的抗原-特異性抗體的存在。參見JordonR.E等，JAMA:200，751(1967)。通過分析PBL和皮膚水泡T細(xì)胞，來分析T細(xì)胞在大皰性類天皰瘡的發(fā)病機(jī)理中的作用的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了占優(yōu)勢(shì)的CLA+T細(xì)胞，其表達(dá)增加水平的Th2-細(xì)胞因子，例如IL-4和IL-13。參見TerakiY等，JInvestDermatol:117，1097(2001)。在全身性皮質(zhì)類固醇治療后的大皰性類天皰瘡患者中，產(chǎn)生白細(xì)胞介素-13的CU+細(xì)胞而不是CLA-細(xì)胞的頻率顯著減少。皮質(zhì)類固醇治療后CLA+細(xì)胞的減少與臨床改善有關(guān)。參見Teraki，同上。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31，可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善大皰性類天皰瘡的臨床結(jié)果。斑殼(Alopeciaareata)斑先(AA)認(rèn)為是一種毛囊的組織-限制性自身免疫性疾病，其中毛嚢活性由于持續(xù)的淋巴細(xì)胞性浸潤活性而受到抑制。AA導(dǎo)致身體任何部位塊狀的全部毛發(fā)脫落，可是不發(fā)生實(shí)際上的毛嚢的喪失，甚至是在無毛病變處。雖然不存在炎癥的臨床征兆，但是活動(dòng)性疾病位置的皮膚活組織檢查顯示出毛囊周圍的原發(fā)性CD4+細(xì)胞的淋巴細(xì)胞性炎癥，伴隨有CD8+毛嚢內(nèi)的浸潤。參見KalishR.S.&GilharA.JInvestigDe醒to1S卿Proc:8,164(2003)。研究已顯示，頭皮皮膚浸潤性CD4+或CD8+淋巴細(xì)胞表達(dá)CLA并且，在患有AA的個(gè)體的外周血液中，CLA+CD4+或CD8+淋巴細(xì)胞的百分比明顯高于正常對(duì)照的百分比。此外，患有嚴(yán)重或進(jìn)行性AA的患者與該疾病痊愈的患者比較，顯示出高得多的CLA-陽性，并且CLA+細(xì)胞百分比的減少與良好的臨床過程一致。參見YanoS等，ActaDermVenereol:82，82(2002)。因此這些研究表明，CLA+'淋巴細(xì)胞可能在AA中起重要作用。異種移植模型已證實(shí)，活化的T細(xì)胞可能在AA的發(fā)病機(jī)理中起作用。移植在棵小鼠上的、來自AA患者的病患處的頭皮再生長了毛發(fā)，同時(shí)伴隨有移植物的浸潤性淋巴細(xì)胞的消失并且，將活化的病患處的T細(xì)胞轉(zhuǎn)移至SCID小鼠可使SCID小鼠上的人頭皮移植物毛發(fā)脫落。參見KalishR.S.&GilharA.JInvestigDermatolSympProc:8，164(2003)。多種免疫調(diào)節(jié)療法是對(duì)這種疾病的常見治療的一部分，可是這些治療的效力都不一致。參見TangL等，JInvestDermatol:120，400(2003);TangL等，(2004)，以及TangL等，JAmAcadDe簡(jiǎn)tol:49，1013(2003)。然而，它們?cè)谟行У膭?dòng)物模型中的使用提供了剖析治療效果的分子機(jī)理的工具。參見ShapiroJ等，JInvestigDermatolSympProc:4，239(1999);TangL等，Oldwineinnewbottles:revivingoldtherapiesforalopeciaareatausingrodentmodels(2003),以及VermaD.D等，EurJDermatol:14，332(2004)。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31，可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善斑禿的臨床結(jié)果。紅斑痤掩(AcneRosacea)/普通粉刺(Acnevulgaris)普通粉刺是一種毛嚢皮脂腺器障礙，為最常見的青春期皮膚問題。毛嚢角質(zhì)化異常認(rèn)為會(huì)引起痤瘡病患。紅斑痤瘡?fù)ㄟ^存在有紅色丘疹、膿皰、囊腫和大面積毛細(xì)管擴(kuò)張，但沒有粉刺(粟粒疹)來同普通粉刺區(qū)分。在普通粉刺的病理生理學(xué)中，皮脂腺增加的皮脂分泌是主要因素。其它的皮脂腺功能也與痤瘡的發(fā)生有關(guān)，包括皮脂的促炎癥反應(yīng)脂類；局部產(chǎn)生的不同的細(xì)胞因子；腺周圍肽和神經(jīng)肽，例如促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素，其通過皮脂細(xì)胞(sebocyte)產(chǎn)生；以及P物質(zhì)，其在痤疳患者看似健康的腺附近的神經(jīng)末梢中表達(dá)。參見ZouboulisC.C.ClinDermatol:22，360(2004)。雖然尚未知道普通粉刺和紅斑痤瘡的病理生理學(xué)，但臨床觀察和組織病理學(xué)研究表明，毛皮脂腺嚢炎癥可能對(duì)紅斑痤療和普通粉刺的發(fā)病機(jī)理來說是重要的。對(duì)T細(xì)胞亞群浸潤紅斑痤疳病患處分析的早期研究表明，大多數(shù)T細(xì)胞表達(dá)CD4。參見RufliT.&BuchnerS.A.Dermatologica:169，1(1984)。CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-31并且對(duì)皮膚的IL-31表達(dá)的IHC分析顯示，IL-n在皮脂腺和汗腺中表達(dá)。IL-31刺激表皮角質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)了可能導(dǎo)致細(xì)胞浸潤的趨化因子的表達(dá)，表明IL-31可能有助于皮膚中的促炎癥反應(yīng)。參見DillonS.R等，NatImmunol:5，752(2004)。從而，IL-M可能有參與紅斑痤瘡和普通粉刺的病理生理學(xué)。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31,可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善普通粉刺的臨床結(jié)果。結(jié)節(jié)性癢療(Prurigonodularis)結(jié)節(jié)性癢疹是由難治療的頑固性搔癢癥引起的、莒蘚化或表皮剝脫的結(jié)節(jié)的疹。當(dāng)長期摩擦導(dǎo)致苔蘚化，而搔抓導(dǎo)致線狀的表皮脫落，在他們發(fā)癢的、受刺激的皮膚處挖擠和摩擦的個(gè)體易于產(chǎn)生稱為癢疹結(jié)節(jié)的明顯增厚的丘疹。雖然結(jié)節(jié)性癢疹不是特應(yīng)性皮炎特異性的，但許多具有這些結(jié)節(jié)的患者也具有特應(yīng)性反應(yīng)，其表現(xiàn)為變應(yīng)性鼻炎、哮喘或食物過敏。T細(xì)胞代表了癢疹病患中的大多數(shù)浸潤細(xì)胞，并且這些病患常常代表了特應(yīng)性患者中的多數(shù)搔癢性皮膚病患。用辣椒堿(capsaicin)對(duì)結(jié)節(jié)性癢疹的局部治療已證明是一種導(dǎo)致皮膚病患消除的有效且安全的方案，所述辣椒堿是一種在小的感覺皮神經(jīng)中，通過耗盡神經(jīng)肽像P物質(zhì)來干擾對(duì)搔癢和疼痛的感覺的抗-搔癢生物堿。參見StanderS等，JAmAcadDermatol:44，471(2001)。用辣椒堿處理來研究NC/Nga小鼠中的搔癢反應(yīng)顯示，幾乎完全阻止了皮炎損傷的自發(fā)性發(fā)展。而且，血清IgE水平的升高受到明顯抑制，并且在辣椒堿治療的小鼠的受損皮膚中，浸潤性嗜酸性細(xì)胞和肥大細(xì)胞的數(shù)量減少。參見MiharaK等，BrJDermatol:151，335(2004)。對(duì)該群體的觀察表明，騷抓行為可通過增強(qiáng)多種免疫應(yīng)答來促進(jìn)皮炎的發(fā)展，從而意味著，阻止搔癢感覺和/或搔癢-相關(guān)的搔抓行為可能會(huì)是一種對(duì)AD的有效治療。參見MiharaK等，BrJDermatol:151，335(2004)。因此，在這里描述的抗-11-31抗體將可用于使AD、結(jié)節(jié)性癢疹和其它搔癢性疾病的影響最小化，因?yàn)樗鼈冊(cè)谶@里顯示能減少NC/Nga小鼠中的搔抓次數(shù)。IL-31的緩慢遞送可在小鼠中誘發(fā)搔癢癥和脫毛癥，之后發(fā)展類似皮炎的皮膚病患，表明IL-31可能誘發(fā)搔癢。參見Di1IonS.R等，NatImmunol:5，752(2004)。IL-31參與誘導(dǎo)搔癢反應(yīng)可通過兩種方法檢測(cè)(i)對(duì)用IL-31-處理的小鼠進(jìn)行辣椒堿治療和(ii)用IL-31處理敲除了Tac1基因小鼠，其中所述的敲除了Tac1基因小鼠由于缺乏實(shí)施例10中的神經(jīng)肽的表達(dá)而明顯減少了傷害性疼痛反應(yīng)。另夕卜，用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31在用IL-31處理的小鼠中是否能預(yù)防搔癢癥和脫毛癥已在實(shí)施例12中檢驗(yàn)。因此，通過在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31,可用于通過抑制、減少、防止或阻斷炎癥和/或與疾病相關(guān)的搔抓行為，來改善結(jié)節(jié)性癢滲的臨床結(jié)果。與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥外周血液中的單純皰滲病毒(HSV)-特異性CD8+T細(xì)胞和從皰疹病患處回收的HSV-特異性CD8+T細(xì)胞表達(dá)高水平的CLA，而非-皮膚向性皰疹病毒-特異性的CD8+T細(xì)胞缺少CLA表達(dá)。參見KoelleD,M等，JClinInvest:110，537(2002)。HSV-2反應(yīng)性CD4+T淋巴細(xì)胞也表達(dá)CLA，但以低于先前觀察到的關(guān)于CD8+T淋巴細(xì)胞的水平表達(dá)。參見GonzalezJ.C等，JInfectDis:191，243(2005)。搔癢癥還與皰滲病毒感染有關(guān)(參見HungK.Y等，BloodPurif16，147(1998))?？墒瞧渌《静±鏗IV也與搔癢性皮膚病患有關(guān)。通常與紅斑丘滲性(erythematopapular)皮膚病患以及嗜伊紅細(xì)胞增多癥有關(guān)的、嚴(yán)重的頑固性搔癢癥是一種在一些非特應(yīng)性、HIV-感染的患者36中觀察到的病狀。參見SinghF.&RudikoffD，AmJClinDe謹(jǐn)tol;4，177(2003)，以及MilazzoF.，Pi固iS等，Allergy:54,266(1999)。皮膚-向性病毒與搔癢癥以及CLA+T細(xì)胞之間的關(guān)聯(lián)表明，產(chǎn)生IL-31的T細(xì)胞可能涉及病毒感染的病理生理學(xué)。將10周大的BALB/c動(dòng)物(CRL)麻醉，并在皮下注入鹽水中10%乙醇+10%吐溫-80中的0.25ml4mg/ml的辣椒堿溶液進(jìn)頸背之前，皮下注入O.1mg/kg的長效止痛劑鹽酸丁丙諾啡。讓動(dòng)物在神經(jīng)毒素治療之后保持麻醉至少30分鐘。48小時(shí)后，皮下植入14天滲透泵用于持續(xù)遞送20pg/天的IL-31,遞送14天。采用下列標(biāo)準(zhǔn)0=無搔抓行為，動(dòng)物表現(xiàn)正常；1-小范圍內(nèi)毛發(fā)變稀疏，觀察到搔抓行為；2=不嚴(yán)重的脫毛(一小部分)，搔抓行為；3=中度脫毛，搔抓行為；以及4=嚴(yán)重脫毛，過度的搔抓行為，每天監(jiān)控小鼠的脫毛和搔癢，監(jiān)控6天。當(dāng)進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)時(shí)，結(jié)果表明，不用辣椒堿治療的小鼠在遞送IL-313天后顯示出2.625的平均的搔抓/脫發(fā)打分，而辣椒堿治療的小鼠顯示出顯著低的打分1。因此，在IL-31遞送之前用辣椒堿處理的小鼠在實(shí)驗(yàn)6天中既顯示出搔抓行為和脫毛發(fā)生的延遲，又顯示出較低的搔抓行為和脫毛的強(qiáng)度的打分。這些數(shù)據(jù)表明，IL-31的確誘導(dǎo)了有助于IL-31誘發(fā)的脫毛和搔癢的一些神經(jīng)元成分。因此，通過IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑產(chǎn)生的IL-31的中和可以減少患有涉及搔癢的皮膚障礙的患者中搔癢的發(fā)生和強(qiáng)度，并從而減少皮炎的發(fā)生和強(qiáng)度。方法II:Tacl基因純合無效的小鼠不表達(dá)可檢測(cè)的P物質(zhì)或神經(jīng)激肽A。這些小鼠顯著減小了對(duì)中度至劇烈刺激的傷害性疼痛反應(yīng)，有用工具。將12周大的，Tac1敲除的小鼠植入遞送1jug/天的IL-31蛋白質(zhì)的14-天滲透泵，并采用下列標(biāo)準(zhǔn)每天觀察脫毛和搔癢0=無搔癢行為，動(dòng)物表現(xiàn)正常；1-小范圍內(nèi)毛發(fā)變稀疏，觀察到搔抓行為；2=不嚴(yán)重的脫毛(小塊)，搔抓行為；3=中度脫毛，搔抓行為；以及4=嚴(yán)重脫毛，過度的搔抓行為。該研究結(jié)果顯示，與野生型對(duì)照小鼠比較，Tacl缺陷小鼠不易受IL-31誘發(fā)的搔抓/脫毛的影響。100%(10/10)的野生型小鼠在IL-31處理6天后已發(fā)生搔抓和脫毛跡象，而只有33.3%(2/6)的Tacl缺陷小鼠在相同的時(shí)間點(diǎn)表現(xiàn)出搔抓和脫毛現(xiàn)象。這些數(shù)據(jù)顯示，IL-31誘導(dǎo)了有助于IL-31-處理的小鼠中搔抓/脫毛表現(xiàn)型的神經(jīng)元成分，并且通過IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑產(chǎn)生的IL-31的中和可減少有關(guān)皮炎中的搔抓行為的發(fā)生和強(qiáng)度。方法III(IL-31中和抗體的施用)將約8-12周大的正常雌性BALB/c小鼠(CRL)皮下植入遞送1|ag/天的mIL-31的14-天滲透泵(Alzet，#2002)。從IL-31遞送前l(fā)周開始，小鼠組每周兩次接受腹膜內(nèi)(i.p.)注射10mg/kg(200yg/小鼠)的大鼠抗-小鼠IL-31單克隆抗體。小鼠對(duì)照組以相同給藥方案，接受i.p.注射的栽體(PBS/0.1%BSA)。釆用下列標(biāo)準(zhǔn)每天給小鼠的脫毛和搔癢打分0-無搔癢行為，動(dòng)物表現(xiàn)正常；1=小范圍內(nèi)毛發(fā)變稀疏，觀察到搔抓行為；2-不嚴(yán)重的脫毛(小塊)，搔抓行為；3=中度脫毛，搔抓行為；以及4=嚴(yán)重脫毛，過度的搔抓行為。在所有試驗(yàn)中，用大鼠抗-mlL-31mAb處理的小鼠的癥狀發(fā)作延遲了約5至7天，并具有較低的脫毛和搔癢的總體打分。通過13天的試驗(yàn)，所有mAb處理的小鼠組(不考慮給藥頻率或濃度)發(fā)生了與對(duì)照小鼠類似的脫毛和搔癢。這些數(shù)據(jù)表明，通過IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑產(chǎn)生的IL-31的中和可延緩由IL-31誘導(dǎo)的搔抓/脫毛反應(yīng)的發(fā)作。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的作用通過搔抓、搔癢、皮炎的抑制、角質(zhì)細(xì)胞中IL-31RA表達(dá)的減少和/或脫毛和搔癢的打分的減少來測(cè)量。此外，炎癥是生物體避開侵入物的保護(hù)性應(yīng)答。炎癥是涉及許多細(xì)胞和體液性介質(zhì)的級(jí)聯(lián)事件。在一個(gè)方面，對(duì)炎癥應(yīng)答的抑制可使宿主免疫妥協(xié)；然而，如果讓其未加抑制，炎癥可導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥，包括慢性炎性疾病(例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、炎性腸病等)、敗血癥性休克和多器官衰竭。重要地是，這些不同的疾病狀態(tài)擁有共同的炎癥介質(zhì)。表征為炎癥的全體疾病對(duì)人的發(fā)病率和死亡率有巨大影響。因此顯然，抗-炎性抗體和結(jié)合多肽，例如在此描述的抗-IL-31抗體和結(jié)合多肽可具有對(duì)大量人和動(dòng)物疾病(從哮喘和變態(tài)反應(yīng)到自身免疫和敗血癥性休克)的重大治療潛力。因而，在此描述的抗-炎性抗IL-31抗體和結(jié)合多肽可在治療上尤其在疾病例如關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素血癥、炎性腸病、銀屑病、相關(guān)疾病等中，用作在此描述的IL-31拮抗劑。1.關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎，包括骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、由損傷引起的關(guān)節(jié)炎性連接(arthriticjoint)等，是普通的炎性病癥，其將會(huì)受益于抗-炎性抗體和結(jié)合多肽，例如本發(fā)明的抗IL-31抗體和結(jié)合多肽的治療用途。例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是影響整個(gè)身體的全身性疾病，并且是一種最常見形式的關(guān)節(jié)炎。它表征為關(guān)節(jié)處的膜的炎癥，其引起疼痛、僵硬、發(fā)熱(warmth)、發(fā)紅和腫脹。炎癥細(xì)胞釋放出可消化骨和軟骨的酶。作為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的結(jié)果，發(fā)炎的關(guān)節(jié)襯里(滑膜)可侵入和損傷骨和軟骨，導(dǎo)致其它生理效應(yīng)中的關(guān)節(jié)變壞和重度疼痛。所涉及的關(guān)節(jié)可能會(huì)喪失它的形狀和對(duì)準(zhǔn)，導(dǎo)致疼痛和喪失運(yùn)動(dòng)能力類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種免疫-介導(dǎo)的疾病，特別是表征為炎癥和隨后的組織損傷，導(dǎo)致嚴(yán)重的殘疾和增加死亡率。多種細(xì)胞因子在患風(fēng)濕性關(guān)節(jié)中局部產(chǎn)生。許多研究已證明，IL-1和TNF-a這兩種原型的致炎性細(xì)胞因子，在涉及滑液炎癥和進(jìn)行性關(guān)節(jié)破壞的機(jī)制中起重要作用。的確，在RA患者中施用TNF-ot和IL-1抑制劑已導(dǎo)致炎癥的臨床和生物學(xué)病征顯著改善，以及骨質(zhì)侵蝕和軟骨破壞的放射性信號(hào)減少。然而，盡管有這些鼓舞人心的結(jié)果，但顯著比例的患者對(duì)這些制劑不響應(yīng)，表明其它介質(zhì)也涉及關(guān)節(jié)炎的病理生理學(xué)(Gabay,Expert.Opin.Biol.Ther.2(2):135-149，2002)。那些介質(zhì)之一可能是IL-31,并因而結(jié)合或抑制IL-31的分子，例如抗IL-31抗體或結(jié)合伴侶，可作為有用的治療劑來減少類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎疾病中的炎癥。在本領(lǐng)域中存在多個(gè)已知的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型。例如，在膠原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(CIA)模型中，小鼠產(chǎn)生了非常類似于人風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的慢性炎性關(guān)節(jié)炎。由于CIA具有與RA類似的免疫學(xué)和病理學(xué)特征，這使得它成為用于篩選潛在的人抗-炎癥化合物的理想模型。CIA模型是一種熟知的小鼠模型，其依賴于免疫反應(yīng)和炎癥應(yīng)答以便發(fā)生。免疫應(yīng)答包括B-細(xì)胞和CD4+T-細(xì)胞響應(yīng)作為抗原的膠原的相互作用，并導(dǎo)致抗-膠原抗體的產(chǎn)生。炎癥階段是炎癥介質(zhì)的組織反應(yīng)的結(jié)果，是由于這些抗體中的一些與小鼠的天然膠原交叉-反應(yīng)并激活了補(bǔ)體級(jí)聯(lián)。利用CIA模型的一個(gè)優(yōu)勢(shì)是，發(fā)病機(jī)理的基礎(chǔ)機(jī)制是已知的。已經(jīng)鑒定II型膠原上的相關(guān)T-細(xì)胞和B-細(xì)胞表位，并且已確定與免疫-介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎相關(guān)的多種免疫學(xué)參數(shù)(例如，遲發(fā)型超敏反應(yīng)和抗-膠原抗體)和炎性參數(shù)(例如，細(xì)胞因子、趨化因子和基質(zhì)-降解酶)，并因此可用于在CIA模型中評(píng)估試驗(yàn)化合物的效力(Wooley，Curr.Opin.Rheum.3:407-20，1999;Williams等，Immunol.89:9784-788，1992;Myers等，LifeSci.61:1861-78，1997，以及Wang等，Immunol.92:8955-959，1995)。將含有可溶性IL-31RA的多肽(包括在此描述的異二聚受體和多聚受體)，例如IL-31RA-Fc4或其它IL-31RA可溶蛋白和融合蛋白施用至這些CIA模型小鼠，可用來評(píng)估IL-31RA對(duì)改善癥狀和改變病程的用途。作為調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和炎癥應(yīng)答的分子，IL-31可誘導(dǎo)涉及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)理的SAA的產(chǎn)生，IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可減少SAA的體外和體內(nèi)活性，全身或局部施用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可潛在地抑制RA中的炎癥應(yīng)答。2.內(nèi)毒素血癥內(nèi)毒素血癥是一種通常由傳染原(例如細(xì)菌以及其它傳染性疾病媒介物)、膿毒癥、中毒性休克綜合征，或者在受機(jī)會(huì)性感染的免疫妥協(xié)的患者等中產(chǎn)生的嚴(yán)重病癥?？?炎癥抗體和結(jié)合多肽，例如本發(fā)明的抗-IL-31抗體和結(jié)合多肽的治療用途可幫助預(yù)防和治療人和動(dòng)物中的內(nèi)毒素血癥。其它潛在的治療劑包括本發(fā)明的IL-31RA多肽、可溶性異二聚受體多肽和多聚受體多肽，或抗IL-31抗體或結(jié)合伴侶等，可作為用于減輕內(nèi)毒素血癥中的炎癥和病理學(xué)影響的有用治療劑。脂多糖(LPS)誘發(fā)的內(nèi)毒素血癥涉及許多在傳染病中產(chǎn)生病理學(xué)效果的促炎介質(zhì)，并且嚙齒類中LPS誘發(fā)的內(nèi)毒素血癥是一種廣泛使用且可接受的模型，用于研究潛在的致炎劑或免疫調(diào)度劑的藥理學(xué)作用。革蘭氏陰性細(xì)菌中產(chǎn)生的LPS是敗血癥性休克的發(fā)病機(jī)理中主要的致病因子(Glausner等，Lancet338:732.1991)。通過單次注射LPS進(jìn)動(dòng)物中的確可在實(shí)驗(yàn)上誘導(dǎo)類似休克的狀態(tài)。由細(xì)胞相應(yīng)LPS而產(chǎn)生的分子可直接或間接地靶向病原體。雖然這些生物反應(yīng)可保護(hù)宿主對(duì)抗侵入的病原體，但它們也可導(dǎo)致傷害。因此，由于嚴(yán)重的革蘭氏陰性細(xì)菌感染而發(fā)生的先天免疫的大量刺激，導(dǎo)致細(xì)胞因子和其它分子的過量產(chǎn)生，以及致命性的綜合征即敗血癥性休克綜合征的發(fā)生，其表征為發(fā)熱、低血壓、播散性血管內(nèi)凝血和多器官衰竭(Dumitru等，Cell103:1071-1083，2000)。LPS的這些毒性作用通常與導(dǎo)致多種炎癥介質(zhì)釋放的巨噬細(xì)胞活化相關(guān)。在這些介質(zhì)中，TNF顯示起了重要作用，如通過施用中和性抗-TNF抗體來預(yù)LPS毒性所說明的(Beutler等，Science229:869，1985)。已很好地確定了，將大腸桿菌的LPS肺部注射進(jìn)C57B1/6小鼠中將會(huì)導(dǎo)致循環(huán)IL-6、TNF-cc、IL-1以及急性期蛋白質(zhì)(例如，SAA)在注射約2小時(shí)后顯著增加。由于對(duì)抗這些介質(zhì)的被動(dòng)免疫可導(dǎo)致死亡率減小，LPS的毒性顯示可通過這些細(xì)胞因子調(diào)節(jié)(Beutler等，Science229:869，1985)。用于預(yù)防和/或治療敗血癥性休克的可能的免疫干擾方案包括抗-TNFraAb、IL-1受體拮抗劑、LIF、IL-10和G-CSF。由于LPS誘導(dǎo)可能有助于內(nèi)毒素血癥病理學(xué)的促炎因子的產(chǎn)生，通過拮抗IL-31多肽來中和IL-31活性、SAA或其它促炎因子可用于減輕內(nèi)毒素血癥的癥狀，例如在內(nèi)毒素性休克中觀察到的癥狀。其它潛在的治療劑IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。3炎性腸病IBD在美國，有很多人患有炎性腸病(IBD),其可影響結(jié)腸和直腸(潰瘍性結(jié)腸炎)或兩者、小腸和大腸(克隆氏病)。這些疾病的發(fā)病機(jī)理尚未清楚，但它們伴隨有受影響組織的慢性炎癥。潛在的治療劑包括本發(fā)明的IL-31RA多肽、可溶性異二聚受體多肽和多聚受體多肽，或抗IL-31抗體或結(jié)合伴侶等，可作為用于減輕IBD和相關(guān)疾病中的炎癥和病理學(xué)影響的有用治療劑。潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種大腸(通常稱為結(jié)腸)炎性疾病，表征為結(jié)腸的粘膜或最內(nèi)層膜發(fā)炎和潰爛。該炎癥導(dǎo)致結(jié)腸頻繁地排空，導(dǎo)致腹瀉。癥狀包括糞便松散以及伴隨的腹部絞痛、發(fā)熱和體重減輕。雖然尚未知道uc的準(zhǔn)確原因，但最近的研究顯示，身體的自然防御對(duì)抗身體認(rèn)為是外來物的體內(nèi)蛋白質(zhì)("自身免疫反應(yīng)")?？赡芤?yàn)樗鼈冾愃颇c內(nèi)的細(xì)菌蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)可激起或刺激炎性過程，開始破壞結(jié)腸內(nèi)膜。由于結(jié)腸的內(nèi)膜受損，潰瘍形成，釋放出粘液、膿液和血液。該疾病通常開始于直腸區(qū)域并可最終延伸到整個(gè)大腸。炎癥的反復(fù)發(fā)作導(dǎo)致具有瘢痕組織的腸和直腸的壁增厚。嚴(yán)重的疾病可發(fā)生結(jié)腸組織的死亡或膿毒癥。潰瘍性結(jié)腸炎的癥狀在嚴(yán)重性程度不同，并且它們的發(fā)作可以是逐漸發(fā)生的或突然發(fā)作的。發(fā)作可由許多因素引起，包括呼吸道感染或壓力。雖然目前不能獲得對(duì)UC的治愈，但治療集中于抑制結(jié)腸內(nèi)膜中的異常炎性過程。包括皮質(zhì)激素免疫抑制劑(例如，硫唑噤呤、巰嘌呤和甲氨喋呤)和氨基水楊酸鹽的治療劑可用于治療該疾病。然而，免疫抑制劑例如皮質(zhì)激素和硫唑嘌呤的長期使用可產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，包括使骨變薄、白內(nèi)障、感染，以及肝和骨髓效應(yīng)。在當(dāng)前治療不起作用的患者中，手術(shù)是一種選擇。手術(shù)包括整個(gè)結(jié)腸和直腸的切除。存在多個(gè)可部分模擬慢性潰瘍性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型。最廣泛使用的模型是2，4,6-三硝基苯磺酸/乙醇(TNBS)誘發(fā)的結(jié)腸炎模型，其在結(jié)腸內(nèi)誘導(dǎo)了慢性炎癥和潰瘍。當(dāng)將TNBS通過直腸內(nèi)滴注引入易感小鼠的結(jié)場(chǎng)內(nèi)時(shí)，它在結(jié)腸粘膜中誘發(fā)了T-細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，在該情況中導(dǎo)致大塊的粘膜炎癥，表征為T-細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的密集浸潤整個(gè)大腸壁。此外，該組織病理學(xué)現(xiàn)象伴隨有體重逐漸減輕(消瘦)、血性腹瀉、直腸脫出以及大腸壁增厚的臨床現(xiàn)象(Neurath等，Intern.Rev.I隨nol.19:51-62，2000)。另一結(jié)腸炎模型使用葡聚糖硫酸鈉(DSS),其可誘導(dǎo)通過血性腹瀉、體重減輕、結(jié)腸縮短以及有中性粒細(xì)胞浸潤的粘膜潰瘍形成為征候的急性結(jié)腸炎。DSS-誘導(dǎo)的結(jié)腸炎在組織學(xué)上表征為炎癥細(xì)胞浸潤進(jìn)固有層中，伴隨有淋巴樣增生、病灶性隱窩損傷和上皮潰瘍。這些變化認(rèn)為是由于DSS對(duì)上皮組織的毒性作用，并通過對(duì)固有層細(xì)胞的吞噬作用以及TNF-oc和IFN-y的產(chǎn)生而發(fā)生。盡管它的普遍使用，有關(guān)DSS的機(jī)制與人疾病的相關(guān)性的多個(gè)問題仍然未得到解決。DSS被認(rèn)為是一種T細(xì)胞-非依賴性模型，因?yàn)樗稍赥細(xì)胞-缺陷的動(dòng)物例如SCID小鼠中觀察到。將抗-IL-31抗體或結(jié)合伴侶、含有可溶性IL-31RA的多肽(包括異二聚受體和多聚受體)，例如IL-31RA-Fc4或其它IL-31RA可溶蛋白和融合蛋白施用至這些TNBS或DSS模型，可用于評(píng)估IL-31拮抗劑改善癥狀并改變胃腸道病癥的病程的用途。IL-31可在結(jié)腸炎的炎癥應(yīng)答中起作用，并且通過施用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑中和IL-31活性是IBD的潛在治療方法。4.銀屑病銀屑病是一種影響7百萬以上的美國人的慢性皮膚病。當(dāng)新皮膚細(xì)胞異常生長，導(dǎo)致在老皮膚還未足夠迅速脫落處的皮膚的發(fā)炎、腫脹且呈鱗狀的斑塊時(shí)發(fā)生銀屑病。斑塊狀銀屑病(最常見的形式)的特征是覆蓋有銀白色鱗片的發(fā)炎的皮膚斑塊("損傷")。銀屑病可以限于一些斑塊或涉及中度至大面積范圍的皮膚，最普遍出現(xiàn)在頭皮、膝、肘和軀干上。雖然它是非常明顯的，但銀屑病不是一種接觸性傳染病。該疾病的發(fā)病機(jī)理涉及受影響組織的慢性炎癥。本發(fā)明的IL-31RA多肽、可溶性異二聚受體多肽和多聚受體多肽，或抗IL-31抗體或結(jié)合伴侶等可作為用于減輕銀屑病、其它炎性皮膚病、皮膚和粘膜變態(tài)反應(yīng)以及相關(guān)疾病中的炎癥和病理學(xué)影響的有用治療劑。銀屑病是一種T-細(xì)胞介導(dǎo)的炎性皮膚障礙，其可以引起相當(dāng)?shù)牟贿m。它是一種不可治愈且侵襲所有年齡段的人的疾病。銀屑病影響了約百分之二的歐洲和美國人口。雖然患有輕度銀屑病的個(gè)體通常可用局部用藥劑來控制他們的疾病，但世界范圍內(nèi)多于一百萬的患者需要紫外線或全身性免疫抑制治療。不幸的是，紫外線照射的不便和風(fēng)險(xiǎn)以及許多療法的毒性限制了對(duì)它們的長期使用。而且，在一些情況下，患者通常會(huì)復(fù)發(fā)銀屑病。從已知具有重要免疫生物學(xué)功能以及舍有在免疫系統(tǒng)中起作用的細(xì)胞的組織中分離IL-31。IL-31在CDS+選擇的，活化的外周血細(xì)胞中表達(dá)，并且已顯示，IL-31的表達(dá)在T細(xì)胞活化后增強(qiáng)。此外，在這里的實(shí)施例部分描述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的多肽可影響單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、T-細(xì)胞、B-細(xì)胞、NK細(xì)胞和/或分化狀態(tài)的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、T-細(xì)胞、B-細(xì)胞、NK細(xì)胞或這些細(xì)胞的祖細(xì)胞的生長/擴(kuò)張。既刺激造血祖細(xì)胞的增殖又活化成熟細(xì)胞的因子通常已知，可是，增殖和激活還需要另外的生長因子。例如，研究已顯示，IL-7和青灰因子(SteelFactor)(c-kit配體)是NK祖細(xì)胞集落形成所需的。IL-15+IL-2與IL-7和青灰因子組合是更有效的(Mr6zek等，Blood87:2632-2640，1996)。然而，未鑒定的細(xì)胞因子可能是NK細(xì)胞和/或NK祖細(xì)胞的特異性亞群的增殖所需的(Robertson等，Blood76:2451-2438，1990)。同樣，IL-31可單獨(dú)或與其它細(xì)胞因子一致或者協(xié)同作用，來提高單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、T-細(xì)胞、B-細(xì)胞或NK細(xì)胞分化的生長、增殖擴(kuò)張和修飾。本發(fā)明提供了用于抑制單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的活化或分化的方法。單核細(xì)胞是不完全分化的細(xì)胞，其遷移至它們成熟和變成巨噬細(xì)胞的多種組織中。巨噬細(xì)胞通過遞呈抗原至淋巴細(xì)胞來在免疫應(yīng)答中起重要作用，并且通過分泌許多細(xì)胞因子來作為淋巴細(xì)胞的輔助細(xì)胞而起支持性作用。巨噬細(xì)胞可內(nèi)化細(xì)胞外的分子，并且一旦激活就具有增強(qiáng)的殺死細(xì)胞內(nèi)微生物和腫瘤細(xì)胞的能力?；罨木奘杉?xì)胞還參與刺激急性或局部性炎癥。給定細(xì)胞因子的受體的組織分布為該細(xì)胞因子的可能作用位點(diǎn)提供了強(qiáng)的指示。IL-31RA的表達(dá)可在單核細(xì)胞和B-細(xì)胞中觀察到，一旦激活CD3+、004+和008+T-細(xì)胞，表達(dá)就會(huì)顯著增加。另外，兩種單核細(xì)胞系，THP-l(Tsuchiya等，Int.J.Cancer26:171-176，1980)和U937(Sundstrom等，Int.J.Cancer17:565-577，1976)也對(duì)IL-31RA表達(dá)呈陽性。66[180]據(jù)報(bào)道0SMR的表達(dá)是非常廣泛的(Mosley等，巡271:32635-32643，1996)。IL-31RA和0SM受體的這種分布支持IL-31在免疫應(yīng)答，尤其是T-細(xì)胞在激活時(shí)的擴(kuò)張中的作用，或者支持它在免疫系統(tǒng)的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞武裝中的作用。因此，本發(fā)明特別的實(shí)施方涉及IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑在炎性和免疫性疾病或病癥，例如胰腺炎、I型糖尿病(IDDM)、胰腺癌、胰腺炎、格雷夫斯病(GravesDisease)、炎性腸病(IBD)、克隆氏病、結(jié)腸癌和腸癌、憩室病、自身免疫性疾病、膿毒癥、器官或骨髓移植、由損傷、手術(shù)或感染引起的炎癥、淀粉樣變性病、脾大、移植物抗宿主病中用作拮抗劑;并且其中抑制炎癥、抑制免疫、減少造血細(xì)胞、免疫細(xì)胞、炎癥細(xì)胞或淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T-細(xì)胞(包括Thl和Th2細(xì)胞，CD4+和CD8+細(xì)胞)的增殖，抑制病原體或抗原的免疫應(yīng)答的用途。此外，IL-31RA表達(dá)在活化的免疫細(xì)胞例如活化的CD4+和CD19+細(xì)胞中的存在說明，IL-31RA受體可能參與對(duì)抗外來侵入物例如微生物和細(xì)胞碎片的身體免疫防御反應(yīng)，并且能夠在炎癥和癌癥形成中的免疫應(yīng)答中起作用。這樣，對(duì)抗或拮抗IL-31RA受體功能的本發(fā)明抗體和結(jié)合伴侶，例如IL-31可用于調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和炎癥。[182]IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑還可在用于檢測(cè)循環(huán)的IL-31水平的診斷系統(tǒng)中使用。在相關(guān)的實(shí)施方案中，特異性結(jié)合IL-31多肽的抗體或其它制劑可用來檢測(cè)循環(huán)的IL-31多肽。升高或降低水平的配體多肽可指示病理狀態(tài)，包括癌。IL-31多肽可能有助于病理過程，并可作為潛在疾病的間接標(biāo)記。在動(dòng)脈粥樣硬化病患中，異常之一是單核細(xì)胞/巨謹(jǐn)細(xì)胞定位于上皮細(xì)胞。這些病患可以通過利用IL-31拮抗劑預(yù)防。IL-31結(jié)合分子或IL-M拮抗劑也可用作IL-31的拮抗劑。此外，單核母細(xì)胞白血病與多種臨床異常有關(guān)，所述的臨床異常反應(yīng)了巨噬細(xì)胞的生物產(chǎn)物的釋放，實(shí)例包括血清和尿液中高水平的溶菌酶以及高熱。而且，這種白血病表現(xiàn)出單核細(xì)胞的弄常增加。這些效應(yīng)可能可通過IL-S1拮抗劑，例如在此描述的IL-31拮抗劑預(yù)防。此外，如在此描述的，抗IL-31可與分子例如毒性部分和細(xì)胞因子綴合，來引導(dǎo)殺死白血病的單核細(xì)胞。由于IL-31以T-細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞-特異性的方式表達(dá)，并且這些疾病涉及單核細(xì)胞異常，例如細(xì)胞增殖、功能、定位和激活，本發(fā)明的多核苷酸、多肽和抗體可用作診斷劑來檢測(cè)這種單核細(xì)胞的異常，并指示疾病的存在。該方法包括從患者中提取生物樣品，例如血液、唾液或活組織檢查，并將其與正常的對(duì)照樣品比較。組織學(xué)方法、細(xì)胞學(xué)方法、流式細(xì)胞計(jì)數(shù)方法、生物化學(xué)方法和其它方法可用于測(cè)定與正常對(duì)照比較的患者樣品中IL-31，或表達(dá)IL-31的細(xì)胞即單核細(xì)胞的相應(yīng)水平或位置。與對(duì)照比較，IL-31表達(dá)水平的變化(增加或減少)或單核細(xì)胞的數(shù)量或位置的變化(例如，單核細(xì)胞在它們通常不存在的組織中增加或浸潤)將指示疾病。這種診斷方法還可包括使用連接至本發(fā)明的多聚核苷酸、多肽或抗體的放射性標(biāo)記、熒光標(biāo)記以及比色標(biāo)記。這些方法是本領(lǐng)域熟知的并在這里公開。已經(jīng)顯示IL-31在活化的單核細(xì)胞中表達(dá)，并且可能參與調(diào)節(jié)炎癥。這樣，可以檢測(cè)和利用本發(fā)明的多肽調(diào)節(jié)炎癥的能力，或可用作炎癥標(biāo)記。用于測(cè)定IL-31的促炎癥反應(yīng)和抗炎性質(zhì)的方法是本領(lǐng)域已知的，并在此討論。此外，它可參與上調(diào)急性期反應(yīng)物，例如血清淀粉樣蛋白A(SAA)、cxl-抗糜蛋白酶和結(jié)合珠蛋白的產(chǎn)生，而且一旦體內(nèi)注入?yún)⑴c炎癥應(yīng)答的脂多糖(LPS)，IL-31RA受體配體的表達(dá)可增加(D誦utier，L等，Proc.Nat'1.Acad.Sci.iZ:10144-10149，2000)。急性期蛋白質(zhì)例如SAA的產(chǎn)生被認(rèn)為是其中炎癥是有利的短期幸存機(jī)制；然而，急性期蛋白質(zhì)保持更長時(shí)間促進(jìn)慢性炎癥并對(duì)人健康有害。綜述可參見Uhlar，CM和Whitehead，AS,Eur.J.Biochem.265:501-523,1999,以及Ba醒nnH.和Gauldie，J.ImmunologyToday15:74-80，1994。此外，急性期蛋白質(zhì)SAA涉及幾種慢性炎性疾病的發(fā)病機(jī)理，涉及動(dòng)脈粥樣硬化和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，并且是淀粉樣變性病中沉積的淀粉樣A蛋白的前體(Uhlar，CM68和Whitehead,同上)。因此，如果配體例如IL-31用作促炎分子并誘發(fā)SAA的產(chǎn)生，拮抗劑可用于治療與由該配體誘導(dǎo)的急性期反應(yīng)蛋白質(zhì)相關(guān)的炎性疾病和其它疾病。這種拮抗劑由本發(fā)明提供。例如，減輕炎癥的方法包括，施用給患有炎癥的哺乳動(dòng)物足以減輕炎癥的量的IL-31，或抗-IL-31抗體(例如中和抗體)的組合物。此外，抑制患有炎癥的哺乳動(dòng)物中的炎癥應(yīng)答的方法可包括(1)測(cè)定血清淀粉樣A蛋白的水平；(2)施用可藥用栽體中的含有如在此描述的IL-31多肽或抗-IL-31抗體的組合物；(3)測(cè)定施用后的血清淀粉樣A蛋白水平；(4)將步驟(1)中的血清淀粉樣A蛋白水平與步驟(3)中的血清淀粉樣A蛋白水平比較，其中血清淀粉樣A蛋白水平未增加或減少表明抑制了炎癥應(yīng)答。對(duì)應(yīng)其IL-31RA受體cDNA的mRNA的組織分布顯示，mRM水平在單核細(xì)胞和前列腺細(xì)胞中最高，并且在活化的單核細(xì)胞，以及活化的CD4+、活化的CD8+，和活化的CD3+細(xì)胞中升高。因此，IL-31RA受體還涉及誘導(dǎo)炎癥應(yīng)答和免疫應(yīng)答。因此，本發(fā)明特定的實(shí)施方案指向于IL-31結(jié)合分子和IL-31拮抗劑在炎性和免疫性疾病或病癥，例如胰腺炎、I型糖尿病(IDDM)、胰腺癌、胰腺炎、格雷夫斯病(GravesDisease)、炎性腸病(IBD)、克隆氏病、結(jié)腸癌和腸癌、憩室病、自身免疫性疾病、膿毒癥、器官或骨髓移植、由損傷、手術(shù)或感染引起的炎癥、淀粉樣變性病、脾大、移植物抗宿主病中用作拮抗劑；并且其中抑制炎癥、抑制免疫、減少造血細(xì)胞、免疫細(xì)胞、炎癥細(xì)胞或淋巴細(xì)胞、巨嗟細(xì)胞、T-細(xì)胞(包括Thl和Th2細(xì)胞，CD4+和CD8+細(xì)胞)的增殖，抑制病原體或抗原的免疫應(yīng)答。此外，IL-31RA受體和IL-31表達(dá)在活化的免疫細(xì)胞例如活化的CD3+、單核細(xì)胞、CD4+和CD19+細(xì)胞中的存在說明，IL-31RA受體可參與對(duì)抗外來侵入物例如微生物和細(xì)胞碎片的身體免疫防御反應(yīng)，并且能夠在炎癥和癌形成過程中的免疫應(yīng)答中起作用。這樣，對(duì)抗或拮抗IL-31RA受體功能的本發(fā)明IL-31和IL-31-抗體可用于調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和炎癥。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可用于[188]1)在治療急性炎、由創(chuàng)傷、組織損傷、手術(shù)、膿毒癥或感染引發(fā)的炎癥，以及慢性炎性疾病例如哮喘、炎性腸病(IBD)、慢性結(jié)腸炎、脾大、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、復(fù)發(fā)性急性炎性發(fā)作(例如結(jié)核病)，以及治療淀粉樣變性病和動(dòng)脈粥樣硬化、卡斯?fàn)柭喜　⒔虼?，以及其它與誘導(dǎo)急性期反應(yīng)相關(guān)的疾病中，對(duì)抗或阻斷經(jīng)由含有IL-31RA的受體的信號(hào)傳導(dǎo)。2)在治療自身免疫性疾病例如IDDM、多發(fā)性硬化癥(MS)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、重癥肌無力、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和IBD中，對(duì)抗或阻斷經(jīng)由IL-31RA受體受體的信號(hào)傳導(dǎo)預(yù)防或抑制免疫細(xì)胞(例如淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、白細(xì)胞)中經(jīng)由IL-31RA受體受體的信號(hào)傳導(dǎo)(HughesC等，J.Immunol153:3M9-33"，1994)。備選地，抗體例如IL-31的單克隆抗體(MAb)也可用作拮抗劑來消滅不希望有的免疫細(xì)胞，用以治療自身免疫性疾病。哞喘、變態(tài)反應(yīng)和其它特應(yīng)性疾病可用對(duì)抗IL-31的MAb，例如抗IL-31抗體、可溶性IL-31RA受體或IL-31RA/CRF2-4異二聚體治療，來抑制免疫應(yīng)答或清空攻擊性細(xì)胞。使用本發(fā)明的多肽和抗體阻斷或抑制經(jīng)由IL-31RA的信號(hào)傳導(dǎo)，也可有益于胰腺、腎、垂體和神經(jīng)細(xì)胞的疾病。IDDM、NIDDM、胰腺炎和胰腺癌可能受益。IL-31RA可用作癌的MAb治療的靶標(biāo)，其中對(duì)抗性MAb抑制了癌生長并靶向免疫-介導(dǎo)殺死。(HolligerP.和Hoogenboom，H:NatureBiotech.16:1015-1016，1998)?？扇苄訧L-31RA受體單體、同型二聚體、異二聚體和多聚體的Mab也可用于治療腎病，例如腎小球硬化癥、膜性神經(jīng)病變(membranousneuropathy)、淀喻樣變性病(其在其它組織中也影響腎)、腎動(dòng)脈硬化癥、多種起因的腎小球炎、腎的纖維增生性疾病，以及與SLE、IDDM、II型糖尿病(NIDDM)、腎腫瘤和其它疾病相關(guān)的腎機(jī)能障礙。[190]3)在治療自身免疫性疾病例如IDDM、MS、SLE、重癥肌無力、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和IBD中，激動(dòng)或激發(fā)經(jīng)由IL-31RA受體的信號(hào)傳導(dǎo)。IL-31可傳遞信號(hào)給淋巴細(xì)胞或其它免疫細(xì)胞進(jìn)行分化、改變?cè)鲋郴蚋淖兏纳谱陨砻庖叩募?xì)胞因子或細(xì)胞表面蛋白的生產(chǎn)。特別是，調(diào)節(jié)T-輔助細(xì)胞對(duì)改變模式的細(xì)胞因子分泌的響應(yīng)可以偏離自身免疫應(yīng)答，來改善疾病(SmithJA等，.Immunol.1":48"—4849，1998)。同樣，IL-31可用來傳遞信號(hào)、排除和偏離涉及哮喘、變態(tài)反應(yīng)和特應(yīng)性疾病的免疫細(xì)胞。經(jīng)由IL-31RA受體的信號(hào)傳導(dǎo)也可有益于胰腺、腎、垂體和神經(jīng)細(xì)胞疾病。IDDM、NIDDM、胰腺炎和胰腺癌可能受益。IL-31RA可以用作胰腺癌的MAb治療的靶標(biāo)，其中信號(hào)MAb抑制了癌生長并靼向免疫-介導(dǎo)的殺傷(Tutt，AL等，JImnumol1^3175-3185，1998)。同樣，T-細(xì)胞特異性的白血病、淋巴瘤、漿細(xì)胞惡性增生(例如多發(fā)性骨髓瘤)以及癌瘤可用本發(fā)明的含有IL-31RA的可溶性受體的單克隆抗體(例如，中和抗體)治療。通常，施用的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的劑量將會(huì)不同，其取決于這些因素患者的年齡、體重、身高、性別、一般的醫(yī)學(xué)狀態(tài)和既往病史。通常，期望提供給受試者約1pg/kg至10mg/kg(劑量/患者的體重)范圍的IL-31多肽劑量，但也可按詳情所指示的施用更低或更高的劑量。本領(lǐng)域中的技術(shù)人員可采用本領(lǐng)域已知的方法，容易地確定這種劑量以及對(duì)它的調(diào)整。施用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑給受試者可以是局部、吸入、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、胸膜內(nèi)、鞘內(nèi)、通過局部導(dǎo)管灌注，或通過直接病患處注射。當(dāng)通過注射施用治療用蛋白質(zhì)時(shí)，施用可以是通過連續(xù)輸注或通過單次或多次推注。另外的施用途徑包括經(jīng)口、經(jīng)粘膜、經(jīng)肺和經(jīng)皮。經(jīng)口遞送適合于聚酯微球、玉米醇溶蛋白微球、類蛋白微球體、聚腈基丙烯酸酯微球，以及基于脂質(zhì)的系統(tǒng)(參見，例如DiBase和Morrel,"OralDeliveryofMicroencapsulatedProteins,，，inProteinDelivery:PhysicalSystems,Sanders和Hendren(eds.),pages255-288(PlenumPressI997))。鼻內(nèi)遞送的可行性通過胰島素施用的這樣一種模式來舉例說明(參見，例如Hinchcliffe和Ilium,Adv.DrugDeliv.Rev35:199(1999))?？芍苽浜蠭L-31的干的或流體顆粒并借助于干粉分散劑、液體煙霧發(fā)生器或噴霧器吸入(例如Pettit和Gombotz，TIBTECH16:343(1998);Patton等，Adv.DrugDeliv.Rev.35:235(1999))。這種方法可通過AERX糖尿病治療系統(tǒng)來舉例說明，其為遞送霧化的胰島素進(jìn)入肺中的手持電動(dòng)吸入器。研究已顯示，48000kDa大小的蛋白質(zhì)已借助于低頻率的超聲以治療用濃度遞送穿過皮膚，這說明了經(jīng)皮施用的可行性(MUragotri等，Science269:850(1995))。采用電穿孔的經(jīng)皮服遞送提供了另一種施用具有IL-31結(jié)合活性的分子的方法(Potts等，Pharm.Biotechnol.10:213(1997))。含有具有IL-31結(jié)合活性的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的藥物組合物可根據(jù)制備可藥用組合物的已知方法配制，從而將治療用蛋白質(zhì)與可藥用載體組合進(jìn)混合物中。如果組合物的施用是受試患者耐受的，則該組合物稱為"可藥用載體"。無菌磷酸鹽緩沖鹽水是可藥用栽體的一個(gè)實(shí)例。其它合適的載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。參見，例如Gennaro(ed.)，Remington'sPharmaceuticalSciences,第19版(MackPublishingCompany1995)。為治療目的，將具有IL-31結(jié)合活性的分子和可藥用栽體以治療有效量施用給患者。如果施用的劑量是生理學(xué)上有效的，則具有IL-31結(jié)合活性的蛋白質(zhì)、多肽或肽以及可藥用載體的組合稱為以"治療有效量"施用。如果制劑的存在導(dǎo)致受試患者的生理發(fā)生可檢測(cè)的變化，則該制劑是生理學(xué)上有效的。例如，如果用于治療炎癥的制劑的存在緩和了至少一部分炎癥應(yīng)答，則該制劑是生理學(xué)有效的。含有IL-31(或IL-31類似物或融合蛋白)的藥物組合物可以流體形式、氣溶膠或固體形式提供。流體形式通過可注射溶液、氣溶膠、小滴、局部溶液劑(topologicalsolution)和口服混懸劑來舉例說明。示例性的固體形式包括膠嚢劑、片劑和控釋劑型。后面的形式通過微滲透泵(miniosmoticpump)和埋植劑舉例說明(Bremer等，Pharm.Biotechnol.10:239(1997);Ranade，"ImplantsinDrugDelivery，，，inDrugDeliverySystems,RanadeandHoi1inger(eds.)，pages95-123(CRCPress1995);Bremer等，"ProteinDeliverywithInfusionPumps,"inProteinDelivery:PhysicalSystems,Sanders和Hendren(eds.)，pages239-254(PlenumPress1997);Yewey等，"DeliveryofProteinsfromaControlledReleaseInjectableImplant,"inProteinDelivery:PhysicalSystems,Sanders和Hendren(eds.)，pages93-117(PienumPress1997))。其它固體形式包括乳劑、糊劑、其它局部用敷貼劑(topologicalapplications)等。在此公開的抗IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑還可制備成免疫脂質(zhì)體。含有抗體的脂質(zhì)體可通過本領(lǐng)域已知的方法，例如在Epstein等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,82:3688(1985)、Hwang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77:4030(1980)，以及美國專利4485045和4544545中描述的方法制備。具有延長的循環(huán)時(shí)間的脂質(zhì)體在美國專利5013556中公開。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的治療用制劑通過將具有期望純度的抗體與任選生理可接受載體、賦形劑或穩(wěn)定劑混合，以凍干制劑或含水溶液劑形式制備用于儲(chǔ)存(Remington，sPharmaceuticalSciences第16版，Osol，A.Ed.(1980))。所采用的量和濃度的可接受栽體、賦形劑或穩(wěn)定劑是對(duì)受試者無毒性的，并且包括緩沖劑例如磷酸、檸檬酸和其它有機(jī)酸；包括抗壞血酸和甲硫氨酸的抗氧化劑；防腐劑(例如十八烷基二甲基千基氯化銨、氯己雙銨、氯化苯甲烴銨、氯化千乙銨、苯酚、丁醇或苯甲醇、烷基對(duì)羥苯甲酸酯例如對(duì)羥基苯曱酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯、鄰苯二酚、間苯二酚、環(huán)己醇、3-戊醇和間甲酚)；低分子量(少于約IO個(gè)殘基)的多肽；蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水聚合物例如聚乙烯吡咯酮；氨基酸例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、組氨酸、精氨酸或賴氨酸；單糖、二糖和其它糖類包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑例如EDTA;糖例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽平衡離子例如鈉；金屬絡(luò)合物(例如Zn-蛋白質(zhì)絡(luò)合物)；和/或非離子型表面活性劑例如TweenTM、PluronicsTM或聚乙二醇(PEG)。[199]根據(jù)接受治療的特殊適應(yīng)癥的需要，這里的制劑還可包含多于一種的活性化合物，優(yōu)選具有不會(huì)彼此不利影響的互補(bǔ)活性的那些活性化合物。例如，在一種制劑中另外提供結(jié)合IL-31的抗體可能是期望的。備選地，或此外，組合物可含有化學(xué)治療劑或細(xì)胞因子。該分子適合以有效用于期望目的的量組合。也可將活性成分圏閉(entrap)于分別通過，例如凝聚技術(shù)或通過界面縮聚法制備的微膠嚢，例如羥曱基纖維素或明膠-微膠嚢以及聚合(甲基丙烯酸甲脂)微膠嚢中，或圏閉于膠質(zhì)藥物遞送系統(tǒng)(如，脂質(zhì)體、白蛋白微球體、微乳液、納米粒和納米膠囊)中或巨乳液中。這類技術(shù)在Remington'sPharmaceuticalSciences第16版，Osol，A.Ed.(1980)中公開。用于體內(nèi)施用的制劑必須是無菌的。這容易通過濾過無菌濾膜完成。可制備緩釋制劑。緩釋制劑的合適實(shí)例包括，含有抗體的固體疏水性聚合物的半透性基質(zhì)，該基質(zhì)是成形的商品形式，例如薄膜或微膠嚢劑。緩釋基質(zhì)的實(shí)例包括聚酯、水凝膠(如聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(美國專利號(hào)3773919)、L-谷氨酸和y乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯-醋酸乙烯酯、可降解的乳酸-幾基乙酸共聚物如LupronDepot(由乳酸-羥基乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林組成的可注射微球體)和聚-D-(-)-3-羥基丁酸。聚合物例如乙烯-醋酸乙烯酯和乳酸-羥基乙酸能夠使分子釋放超過100天，而某些水凝膠在較短時(shí)間段內(nèi)釋放蛋白質(zhì)。當(dāng)膠嚢包封的抗體長時(shí)間保留在體內(nèi)時(shí)，它們由于暴露于37C的潮濕中而可能變性或聚集，導(dǎo)致生物活性喪失并可能使免疫原性改變。取決于所涉及的機(jī)理，可設(shè)計(jì)合理的策略來穩(wěn)定。例如，如果發(fā)現(xiàn)聚集機(jī)理是通過硫-二硫化物互換而形成分子間的S—S鍵，則穩(wěn)定可通過修飾巰基殘基、從酸性溶液中低壓凍干、控制濕度、采用合適的添加劑，以及研發(fā)出特殊的聚合物基質(zhì)組合物來實(shí)現(xiàn)。具有IL-31結(jié)合活性的多肽可用蛋白質(zhì)微膠嚢化的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)包被于脂質(zhì)體中(參見，例如Anderson等，Infect.I隨n.!1099(1981)、Anderson等，CancerRes.50:1853(1990)，以及Cohen等，Biochim.Biophys.Acta1063:95(1991)、Alving等，"PreparationandUseofLiposomesinImmunologicalStudies,"inLiposomeTechnology,第2版，第3巻,Gregoriadis(ed.)，page317(CRCPress1993)、Wassef等，Meth.Enzymol.149:124(1987))。如上提到的，在治療上有用的脂質(zhì)體可含有多種成分。例如，脂質(zhì)體可含有聚(乙二醇)的脂質(zhì)衍生物(Allen等，Biochim.Biophys.Acta1150:9(1993))。已經(jīng)設(shè)計(jì)了可降解的聚合物微球來保持高系統(tǒng)性水平的治療性蛋白質(zhì)。微球從可降解的聚合物例如聚乙丙交酯(PLG)、聚酐、聚(原酸酯)、非生物可降解的乙基乙烯基醋酸酯聚合物制備，其中蛋白質(zhì)被圏閉于聚合物中(Go邁botz和Pettit，Bio,jugateChem.k332(1995);Ranade，"RoleofPolymersinDrugDelivery,"inDrugDeliverySystems,Ranade和Hollinger(eds.)，pages51-93(CRCPress1995);Roskos和Maskiewicz，"DegradableControlledReleaseSystemsUsefulforProteinDelivery,"inProteinDelivery:PhysicalSystems,Sanders和Hendren(eds.)，pages45-92(PlenumPress1997);Bartus等，Science281:1161(1998);Putney和Burke，NatureBiotechnology16:153(1998);Putney,Curr.Opin.Chem.Biol.2:548(1998))。聚乙二醇(PEG)-包被的毫微球還可提供用于靜脈內(nèi)施用治療用蛋白質(zhì)的載體(參見，例如Gref等，Pharm.Biotechnol10:167(1997))。其它劑型可由本領(lǐng)域的那些技術(shù)人員設(shè)計(jì)，如例如由Ansel和Popovich，PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems,第5版(Lea&Febiger1990)，Gennaro(ed.)，Remington'sPharmaceuticalSciences,第19版(MackPublishingCompany1995)，以及由Ranade和Hollinger,DrugDeliverySystems(CRCPress1996)所顯示的。75[206]作為一個(gè)示例性說明，藥物組合物可作為試劑盒提供，所述試劑盒包括含有IL-31多肽或IL-31拮抗劑(例如結(jié)合IL-31多肽的抗體或抗體片段)的容器。治療用多肽可以單次劑量或倍劑量的可注射溶液劑的形式提供，或作為將在注射前重構(gòu)的無菌粉劑提供。備選地，這種試劑盒可包含用于施用治療用多肽的干粉擴(kuò)散器、液體煙霧發(fā)生器或噴霧器。[207]在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及結(jié)合人IL31的分離的抗體，其中所述抗體是人源化抗體，其來源于由美國典型菌種保藏中心保藏的具有選自下列ATCC專利保藏名稱的雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體a)ATCC專利保藏名稱PTA-6815、b)ATCC專利保藏名稱PTA-6816、c)ATCC專利保藏名稱PTA-6829、d)ATCC專利保藏名稱PTA-6830、e)ATCC專利保藏名稱PTA-6831、f)ATCC專利保藏名稱PTA-6871、g)ATCC專利保藏名稱PTA-6872、h)ATCC專利保藏名稱PTA-6875，以及i)ATCC專利保藏名稱PTA-6873;并且其中所述抗體包含重鏈免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域，所述抗體為人IgG4的。在一個(gè)實(shí)施方案中，人IgG4恒定結(jié)構(gòu)域是在溶液中穩(wěn)定的突變形式，其具有少量或無補(bǔ)體激活活性。在特別的實(shí)施方案中，重鏈免疫球蛋白恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域是在位置241(Kabat編號(hào))上具有Ser至Pro突變的人IgG4恒定結(jié)構(gòu)域。[208]在另一個(gè)方面，這些抗體用于治療疾病包括特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。[209]在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中免疫球蛋白輕鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域選自k或入人免疫球蛋白輕鏈。優(yōu)選，所述免疫球蛋白輕鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域是k人免疫球蛋白輕鏈的恒定區(qū)。[210]在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中重鏈可變結(jié)構(gòu)域和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含克隆292.12.3.1、292.84.1.6、292.63.5.3、294.144.3.5、292.39.5.3、292.51.5.2、292.64.6.5.5、292.105.4.1、292.109.4.4、292.118.6.4和292.72.3.1的CDR序列。所述CDR序列示于下面的圖和表3中。在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:51組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:52或SEQIDNO:57組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:53組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:54組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:55組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:56組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢疹以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:51組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:58組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:59組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:60組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:61組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:62組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包舍由氨基酸序列SEQIDNO:63組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:64組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:65組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:66組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:67組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:68組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。[214]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:69組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:70或SEQIDNO:79組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:71組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:72組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:73組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:74組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。[215]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:75組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:76組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:65組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:77組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:78組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:68組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢滲以及大皰性類天皰瘡，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。[216]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:80組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:81組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:82組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:83組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:84組成的第二CDR序列，以及由SEQIDNO:85組成的第三CDR序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體用于治療疾病包括應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、藥物誘發(fā)的變應(yīng)性反應(yīng)、與皮膚向性病毒和病毒相關(guān)的搔癢癥、白癜風(fēng)、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、斑禿、紅斑痤瘡、普通粉刺、結(jié)節(jié)性癢疹以及大皰性類天皰療，如此處所討論的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)量趨化因子例如TARC或MDC。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及i)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中所述單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc抗體結(jié)合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段抑制、阻斷或中和IL-31(SEQ79IDNO:2)與IL-31RA(SEQIDN0:5)的相互作用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段選自(a)鼠單克隆抗體或抗體片段；(b)人源化抗體或抗體片段或抗體片段；以及(c)人單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體還包括PEG化。[218]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了包含輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)的單克隆抗體或抗體片段，所述單克隆抗體或抗體片段選自a)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iii)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iv)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；v)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vi)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vii)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及vii)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，以及其中所述單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc抗體結(jié)合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段抑制、阻斷或中和IL-31(SEQIDNO:2)與IL-31RA(SEQIDN0:5)的相互作用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及其中所述單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc抗體結(jié)合使用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體選自(a)鼠單克隆抗體或抗體片段；(b)人源化抗體或抗體片段或抗體片段；以及(c)人單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體還包含PEG化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體選自(a)鼠單克隆抗體或抗體片段；(b)人源化抗體或抗體片段或抗體片段；以及(c)人單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體還包括PEG化。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的炎癥的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDN0:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)哺乳動(dòng)物施用抗體減少、阻斷、抑制或中和致炎性趨化因子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，致炎性趨化因子是TARC或MDC。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)82和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDN0:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDN0:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的搔癢癥的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用單克隆抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:IO的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDN0:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDN0:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段的施用減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的皮炎的方法。在另外的實(shí)施方案中，皮炎是特應(yīng)性皮炎或結(jié)節(jié)性癢滲。[221]在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的搔抓的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用單克隆抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDN0:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDN0:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；以及j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述單克隆抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，其中單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDN0:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDN0:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在另一方面，本發(fā)明提供了用于用一種組合物來抑制IL-31-誘導(dǎo)的造血細(xì)胞及造血細(xì)胞祖細(xì)胞(包括培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞)的增殖和分化的方法，其中所述的組合物含有一定量的如在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，與缺少可溶性細(xì)胞因子受體時(shí)培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞比較，所述抗體足以減少骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞中造血細(xì)胞的增殖或分化。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于抑制IL-31-誘導(dǎo)的造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖或分化的方法是如上面公開的，其中所述的造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞是淋巴樣細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于抑制IL-31-誘導(dǎo)的造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖或分化的方法是如上面公開的，其中淋巴樣細(xì)胞是巨噬細(xì)胞或T細(xì)胞。在另一方面，本發(fā)明提供了減輕IL-31-誘導(dǎo)的炎癥的方法，該方法包括施用給患有炎癥的哺乳動(dòng)物足以減輕炎癥的量的如在此公開的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的組合物。在另一方面，本發(fā)明提供了抑制患有炎癥的哺乳動(dòng)物中的炎癥應(yīng)答的方法，該方法包括(1)測(cè)定炎性分子的水平；(2)施用含有在可藥用栽體中的如在此公開的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑86的組合物；(3)測(cè)定施用后的炎性分子的水平；(4)將步驟(1)中的炎性分子水平與步驟(3)中的炎性分子水平比較，其中炎性分子水平?jīng)]有增加或炎性分子水平減小指示抑制了炎癥應(yīng)答。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是如上面公開的，其中所述抗體另外含有放射性核素、酶、底物、輔助因子、熒光標(biāo)記、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、肽標(biāo)簽、磁性顆粒、藥物或毒素。在另一方面，本發(fā)明提供了用于用一種組合物來抑制IL-31-誘導(dǎo)的造血細(xì)胞及造血細(xì)胞祖細(xì)胞(包括培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞)的增殖或分化的方法，所述的組合物含有一定量的如在此公開的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑，與缺少可溶性細(xì)胞因子受體時(shí)培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞比較，所述的抗體足以減少骨髓細(xì)胞或外周血細(xì)胞中造血細(xì)胞的增殖或分化。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于抑制IL-31-誘導(dǎo)的造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖或分化的方法是如上面公開的，其中造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞是淋巴樣細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于抑制IL-31-"i秀導(dǎo)的造血細(xì)胞和造血細(xì)胞祖細(xì)胞的增殖或分化的方法是如上面公開的，其中淋巴樣細(xì)胞是巨噬細(xì)胞或T細(xì)胞。在另一方面，本發(fā)明提供了減輕IL-31-誘導(dǎo)的炎癥的方法，該方法包括施用給患有炎癥的哺乳動(dòng)物足以減輕炎癥的量的如在此公開的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的組合物。在另一方面，本發(fā)明提供了抑制患有炎癥的哺乳動(dòng)物中的炎癥應(yīng)答的方法，該方法包括(1)測(cè)定炎性分子的水平；(2)施用含有可接受的藥物載體中的此處公開的抗體IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的組合物；(3)測(cè)定施用后的炎性分子的水平；(4)將步驟(1)中的炎性分子水平與步驟(3)中的炎性分子水平比較，其中炎性分子水平?jīng)]有增加或炎性分子水平減小指示抑制了炎癥應(yīng)答。在另一方面，本發(fā)明提供了治療受其中IL-31起作用的炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法，所述的方法包括施用IL-31拮抗劑給哺乳動(dòng)物，這樣炎癥得以減輕，其中所述的拮抗劑選自特異性結(jié)合IL-31(SEQIDNO:2)的多肽或多肽片段的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，治療受炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法是如上面公開的，其中所述的疾病是慢性炎性疾病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療受炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法是如上面公開的，其中所述的疾病選自炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克隆氏病、特應(yīng)性皮炎、濕滲和銀屑病的慢性炎性疾病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療受炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法是如上面公開的，其中所述的疾病是急性炎性疾病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療受炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法是如上面公開的，其中該疾病選自內(nèi)毒素血癥、敗血病、中毒性休克綜合征和傳染性疾病的急性炎性疾病。在另一實(shí)施方案中，治療受炎性疾病折磨的哺乳動(dòng)物的方法是如上面公開的，其中所述抗體另外含有放射性核素、酶、底物、輔助因子、熒光標(biāo)記、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、肽標(biāo)簽、磁性顆粒、藥物或毒素。在另一方面，本發(fā)明提供了用于檢測(cè)患者中的炎癥的方法，該方法包括從患者體內(nèi)獲取組織或生物樣品；在其中IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑可結(jié)合組織或生物樣品中它的互補(bǔ)性多肽的條件下，將該組織或生物樣品與如在此公開的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑一起孵育；顯影組織或生物樣品中結(jié)合的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑；以及將來自患者的組織或生物樣品中結(jié)合的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的水平與正常對(duì)照組織或生物樣品中結(jié)合的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的水平比較，其中相對(duì)于正常的對(duì)照組織或生物樣品，結(jié)合患者的組織或生物樣品的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑水平增加指示患者中的炎癥。本發(fā)明進(jìn)一步通過下面的非限制性實(shí)例來說明。實(shí)施例實(shí)施例1可變區(qū)的確定以下列方法測(cè)定輕鏈和重鏈可變區(qū)的序列RNA的提取/5，RACEReadycDNA的產(chǎn)生在IXPBS中清洗后通過離心收集雜交瘤細(xì)胞系(大約4.5x106個(gè)細(xì)胞)。按照廠商說明書，使用Qiagen，sRNeasyminipurification試劑盒純化RNA。將所得的RNA展示在1，2%E-凝膠上以進(jìn)行驗(yàn)證。使用提供5，RACEReadycDNA的BDBiosciencesBDSMARTRACEcDNAAmplification試劑盒進(jìn)行第一鏈cDNA的合成。輕鏈和重鏈可變區(qū)序列的擴(kuò)增5'RACEreadyc腿用作用于BDBiosciencesBDSMARTRACEcDNAAmplification試劑盒中所述的PCR的模板。重鏈和輕鏈PCR擴(kuò)增都使用由試劑盒以5，PCR寡核苷酸形式提供的10XUPM(通用引物混合物)。3，PCR寡核苷酸如下；小鼠k(zc54289:5,-CGACTGAGCCACCTCCAGATGTTAACTGCTCAC-3，SEQIDNO:28)小鼠IgGl(zc54983:5，-CAGGGGCCAGTGGATAGACAGATGGGGG-3，SEQIDNO:29)小鼠IgG2a(zc55640:5，-CAGGGGCCAGTGGATAGACCGATGGGG-3，SEQIDNO:30)使用GEHealthcareillustraGFXtmPCR駆和GelBandPurification試劑對(duì)輕鏈和重鏈可變區(qū)序列的PCR產(chǎn)生進(jìn)行純化，然后通過InvitrogenTOPOTACloning試劑盒進(jìn)行克隆。通過使用M13R和M13F試劑盒引物的集落PCR篩選每可變區(qū)每雜交瘤8個(gè)單個(gè)的集落，然后將其進(jìn)行測(cè)序。使用ABIPRISMBigDyeTerminatorv3.0CycleSequencing試劑盒(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity,CA)進(jìn)孑亍測(cè)序。使用EdgeBioSystemsCentriflexGelFiltrationCartridges(GaUhersburg,MD)純化測(cè)序反應(yīng)物,然后在ABIPRISM377DNA測(cè)序儀(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)是進(jìn)行測(cè)序。使用Sequencherv4.1軟件(GeneCodesCorporation,AmiArbor,MI.)拼接和編輯所得的序列數(shù)據(jù)。表1顯示可變區(qū)的序列的SEQIDNO:，其進(jìn)一步描述于圖1至4。表1:可變輕鏈和可變生鏈區(qū)的序列列表編號(hào)<table>tableseeoriginaldocumentpage91</column></row><table>表2顯示可變區(qū)的序列的SEQIDNO:，其進(jìn)一步在圖1至4中進(jìn)行描述。200780036666.0轉(zhuǎn)溢*被80/89到<table>tableseeoriginaldocumentpage92</column></row><table>[237]雜交瘤292.12.3.1和292.84.1.6表達(dá)相互之間共有廣泛的序列同一性的輕鏈和重鏈。292.12.3.1和292.84.1.6的輕鏈和重鏈可變區(qū)的氨基酸序列比對(duì)示于圖2中。高度的共有序列同一性表明輕鏈可變區(qū)來源于相同的輕鏈可變區(qū)胚系基因，同時(shí)重鏈可變區(qū)也來源于相同的重鏈可變區(qū)胚系基因。此外，在整個(gè)輕鏈和重鏈CDR3以及FR4上的同一性表明相同JL在輕鏈上的使用以及相同JH和D區(qū)以及N和P核苷酸的添加在重鏈CDR3的使用。兩種雜交瘤292.12.3.1和292.84.1.6都表達(dá)K輕鏈，但292.12.3.1表達(dá)IgGl重鏈而292-84s1,6表達(dá)IgG2a重鏈。這兩種雜交瘤似乎都是相同初始B細(xì)胞免疫球蛋白基因座重排事件的衍生物，292.84.1.6似乎是隨后至IgG2a重鏈的類別轉(zhuǎn)換的結(jié)果。在類別轉(zhuǎn)換之前或之后，292.12.3.1和292.84.1.6的差異在于包含另外的體細(xì)胞突變，所述體細(xì)胞突變導(dǎo)致輕鏈中的單個(gè)氨酸相異和重鏈中的4個(gè)氨基酸相異。實(shí)施例2氨基末端蛋白質(zhì)序列的測(cè)定[238]N-末端蛋白質(zhì)測(cè)序用于測(cè)定重鏈和輕鏈抗體序列。使用或不使用吡咯(型)谷氨酸氨基肽酶(PGAP)處理來處理抗體。未處理的樣品通過加入100皮摩(pmol)蛋白質(zhì)和水來進(jìn)行處理。PGAP處理的樣品通過加入100pmol蛋白質(zhì)、水、0.03%SDS、5XPGAP緩沖液(TakaraBioInc.,Japan)和IXPGAP緩沖液中的PGAP酶(lmU)來進(jìn)行處理。將PGAP反應(yīng)在95'C下進(jìn)行IO分鐘。該酶促處理除去N末端封閉吡咯谷氨酸基團(tuán)。向未處理的和PGAP處理的樣品中加入還原性SDSPAGE緩沖液，然后將樣品在沸水浴中加熱5分鐘。將樣品在SDSPAGE梯度凝膠上跑膠。將凝膠轉(zhuǎn)移至PVDF膜并且用考馬斯藍(lán)染色。對(duì)于每一個(gè)樣品觀察到具有明顯的的50kDa和25kDa的SDSPAGE分子量的兩條可見條帶。切取每一條帶并且將其經(jīng)歷N末端蛋白質(zhì)測(cè)序。進(jìn)行20個(gè)序列循環(huán)以測(cè)定序列。實(shí)施例3通過使用腺病毒STAT/SRE報(bào)告基因的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染對(duì)人轉(zhuǎn)化上皮細(xì)胞系進(jìn)行的熒光素酶測(cè)定法可通過焚光素酶測(cè)定法測(cè)量IL-31活性的抑制、減少和/或中和。例如，可將人轉(zhuǎn)化細(xì)胞系以10，000個(gè)細(xì)胞/孔于對(duì)于各細(xì)胞類型指明的常規(guī)培養(yǎng)基中接種在96孔平底板中。第二天，用腺病毒報(bào)告構(gòu)建體KZ136以5000的復(fù)合感染來感染細(xì)胞。KZ136報(bào)告基因除了血清應(yīng)答元件外還包含STAT元件。使用含有2mML-谷氨酰胺(GibcoBRL)、1mM丙酮酸鈉(GibcoBRL)和lx胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒補(bǔ)充物(GibcoBRL)的DMEM(在下文中稱為無血清培養(yǎng)基)，總體積為100ul/孔。將細(xì)胞培養(yǎng)過夜。第二天，取出培養(yǎng)基，然后用100pl誘導(dǎo)培養(yǎng)替換。誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以100ng/ml，50ng/ml、25ng/ml、12.5ng/ml、6.25ng/ml、3.125ng/ml和1.56ng/ml在無血清培養(yǎng)基中稀釋的人IL-31。20%FBS的陽性對(duì)照用于驗(yàn)證測(cè)定和確保通過腺病毒的感染是成功的。誘導(dǎo)細(xì)胞，進(jìn)行5小時(shí)，此時(shí)吸出培養(yǎng)基。然后在50inl/孔PBS中清洗細(xì)胞，然后在3Gpl/孔的IX細(xì)胞裂解緩沖液(Promega)中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解。在室濕下溫育10分鐘后，將25pl/孔的裂解物轉(zhuǎn)移至不透明的白色96孔板中。然后通過使用5秒的與40pl/孔的注射的熒光素酶底物(Promega)的混合，在發(fā)光計(jì)上讀板。實(shí)施例4IL-31的生物學(xué)檢定[241]將使用hzCYT0R17(IL-31RA)、hOSMRB和KZ134轉(zhuǎn)染的BAF3細(xì)胞培養(yǎng)至5xl(^和lxl(^個(gè)細(xì)胞/mL。將細(xì)胞用測(cè)定培養(yǎng)基(RPMI1640、10%FBS、L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉和Pen/Strep(全都來自Gibco))清洗并且以3xl(T個(gè)細(xì)胞/mL重懸浮于測(cè)定緩沖液中。在96孔不透明板中，通過IOOj^L/孔，1:2系列稀釋以一式兩份重復(fù)從測(cè)定培養(yǎng)基中的600pg/mL至9.38pg/mL滴定hIL-31標(biāo)準(zhǔn)。以一式兩份以100中350pg/mL和35pg/mL向板中加入質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。受試樣品通常以1:2或1:4進(jìn)行稀釋，并且以一式兩份加入樣品孔。以3xl(T個(gè)細(xì)胞/孔的終濃度向各孔中加入100)iL清洗過的BAF3細(xì)胞。將板在+37。C下在5%0)2的溫箱中溫育16至24小時(shí)。以1200RPM將板離心5分鐘，彈掉培養(yǎng)基，向各孔中加入25juL/孔裂解緩沖液(Promega)。10分鐘后，在光度計(jì)(Berthold)上讀板。光度計(jì)加入40inL/孔的熒光素酶底物混合物(Proniega)并且混合發(fā)光物，？進(jìn)行4秒的時(shí)間。將發(fā)光值輸出至表格程序，在該表達(dá)程序中對(duì)其進(jìn)行分析和將其轉(zhuǎn)化成IL-31的皮克/106個(gè)細(xì)胞/mL體積。實(shí)施例5IL-31參與體內(nèi)起始和維持接觸性過敏反應(yīng)方法I用于FACS和/或ELISA分析的全部血液和血清在處死小鼠之前采集并且釆集耳用于組織學(xué)。方法II(誘導(dǎo)Th2應(yīng)答)[244]在第1、2天和第8天，用吸管操縱器將1:1丙酮/酞酸丁酯(MSDS可獲得)溶液中的100jaLO.5%的FITC(異硫氰酸熒光素)涂于BALB/c小鼠的剃了毛的背部中部。在第13天，將小鼠在吸入室中用異氟烷麻醉，并用工程測(cè)微計(jì)(Mitutoyo)測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物的兩個(gè)耳廓以獲得基線測(cè)量值。通過施用25jaL0.5%的FITC(在l:1的丙酮/酞酸二丁酯中)至每只耳朵的背側(cè)來攻擊小鼠。在24小時(shí)和48小時(shí)后測(cè)量接觸性過敏反應(yīng)作為右耳(受刺激)和左耳(未受刺激)之間的不同。所有的測(cè)量用工程測(cè)微計(jì)完成。通過首次接受試驗(yàn)的小鼠的受刺激和未受刺激的耳之間的耳腫脹的不同來測(cè)定背景值。用于FACS和/或ELISA分析的全部血液和血清在處死小鼠之前采集并且采集耳用于組織學(xué)。方法III(誘發(fā)Thl應(yīng)答)用吸管操縱器將25yL2%的oxazalone(在4:1的丙酮/橄欖油中)涂于BALB/c小鼠的剃了毛的背部中部。在第7天，將小鼠在吸入室中用異氟烷麻醉，并用工程測(cè)微計(jì)(Mitutoyo)測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物的兩邊耳廓以獲得基線測(cè)量值。通過施用8juLoxazalone至每只耳朵的背側(cè)來攻擊小鼠。在24小時(shí)和48小時(shí)后測(cè)量接觸性過敏反應(yīng)作為右耳(受刺激)和左耳(未受刺激)之間的不同。所有的測(cè)量用工程測(cè)微計(jì)完成。通過首次接受試驗(yàn)的小鼠的受攻擊和未受攻擊的耳之間的耳肺脹的不同來測(cè)定背景值。用于FACS和/或ELISA分析的全部血液和血清在處死小鼠之前采集并且采集耳用于組織學(xué)。在實(shí)驗(yàn)的致敏階段和攻擊階段，用在此描述的IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑檢測(cè)了起始和永存化接觸性過敏反應(yīng)中IL-31的參與。實(shí)施例6體內(nèi)特應(yīng)性皮炎中IL-31的參與方法I(NC/Nga小鼠的致敏)將4周大的雄性NC/Nga小鼠(CRL,Japan)在SPF檢疫條件下圏養(yǎng)4周以適應(yīng)新環(huán)境。在抗原致敏開始時(shí)小鼠約10-11周大。將小鼠用異氟烷麻醉并用電動(dòng)剪給背部剃毛。在5至6周內(nèi)，每周3次在頸部背面皮內(nèi)注射約10jug的屋塵螨(Dp)(IndoorBiotechnologies,特別訂購)提取物直到小鼠發(fā)生了皮膚病患。對(duì)照動(dòng)物每周接受10juLPBS皮內(nèi)注入3次。所述Dp提取物根據(jù)Matsuoka及其同事(MatsuokaH.，等，Allergy:58，139(2003))的方法制備。簡(jiǎn)而言之，將595mg低壓凍干的Dp耗盡培養(yǎng)提取物(spentcultureextract)溶解于12mL的無菌PBS(Gibco)中。將Dp在振蕩器上的50mLFalcon試管中混合30分鐘。將該提取物以2000rpm離心10分鐘，收集上清液并等分進(jìn)lmL的冷凍管中并在-20'C下保存。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的作用通過搔抓、搔癢和/或皮炎的抑制來測(cè)量。方法II(D011.10小鼠的致敏)D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠由室內(nèi)群體繁殖并在抗原致敏開始時(shí)為9.5至14周大。在表皮致敏前24小時(shí)，將小鼠用異氟烷麻醉并用電動(dòng)剪給小鼠的整個(gè)軀千(背部和腹部)剃毛。然后用Elastin外科帶(Johnson和Johnson)在小鼠的背部進(jìn)行膠帶剝脫。將lcn^無菌紗布片用500卵清蛋白(Calbiochem32467)或無菌PBS(Gibco)弄濕，并用DuoDermExtraThin敷料(ConvaTec187932)將其粘貼在小鼠的背部左側(cè)。然后，讓布片和敷料覆蓋于Elastin外科帶的軀體包裹中以便小鼠不會(huì)移動(dòng)或破壞該布片。讓布片粘貼7天并除去。讓小鼠在進(jìn)行另一輪表皮致敏之前休息2周。小鼠受到總共為三次一周的致敏。IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的作用通過搔抓、搔癢和/或皮炎的抑制和/或表皮角質(zhì)細(xì)胞中IL-31RA的表達(dá)的減少在來測(cè)量。實(shí)施例7在AD小鼠模型中TARC和MDC響應(yīng)抗IL-31抗體的減少方法i將6周大的雄性NC/Nga小鼠(CRLJapan)每周三次用50jag粉塵螨提取物(D.pteronyssinus，IndoorBiotechnologies)在背部通過皮內(nèi)致敏，并對(duì)類似AD病患打分。在致敏5周后，對(duì)小鼠實(shí)施安樂死，并且切離右耳并置于補(bǔ)充有RPMI+2%FBS(GIBC0Invitrogen)的48孔培養(yǎng)皿(Corning)的單個(gè)孔中。將平板置于5%c02的濕度控制保溫箱中。在24小時(shí)后收集上清液并在-20'C下冷凍直到進(jìn)一步分析。方法II將12周大的雌性NC/Nga小鼠(CRLJapan)每周3次用10jugSEB(ToxinTechnology)在耳內(nèi)和背上通過皮內(nèi)致敏。對(duì)小鼠類似AD的病患打分。在致敏5周后，讓小鼠安樂死，并從每只小鼠接受注射的耳朵取出6mm活檢穿孔器提取物并置于補(bǔ)充有RPMI+2%FBS的48孔培養(yǎng)皿的單個(gè)孔中。將平板置于5%0)2的濕度控制保溫箱中。在24小時(shí)后收集上清液并在-20C下冷凍直到進(jìn)一步分析。在1至2周的致敏作用后開始，每周兩次用IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑腹膜內(nèi)處理兩個(gè)研究中的小鼠組。U5"24-小時(shí)上清液樣品中的TARC和MDC濃度通過常規(guī)的ELISA(R&DSystems)測(cè)量。實(shí)施例8IL-31中和抗體的施用[255]將約8-12周大的正常雌性BALB/c小鼠(CRL)皮下植入遞送1mg/天的mIL-31的14-天滲透泵(Alzet，#2002)。從IL-31遞送前1周開始，數(shù)組小鼠每周兩次接受腹膜內(nèi)(i.p.)注射lOmg/kg(200Mg/小鼠)的大鼠抗-小鼠IL-31單克隆抗體。小鼠對(duì)照組以相同給藥方案，接受i.p.注射的栽體(PBS/0.1%BSA)。采用下列標(biāo)準(zhǔn)每天給小鼠的脫毛和搔癢打分0-無搔癢行為，動(dòng)物表現(xiàn)正常；1=小范圍內(nèi)毛發(fā)變稀疏，觀察到搔抓行為；2=不嚴(yán)重的脫毛(小塊)，搔抓行為；3-中度脫毛，搔抓行為；以及4-嚴(yán)重脫毛，過度的搔抓行為。通過大約5至7天的癥狀的延遲發(fā)生以及脫毛和搔癢的更低的總體打分來測(cè)量IL-31結(jié)合分子或IL-31拮抗劑的作用。實(shí)施例9重組嵌合抗人IL-31單克隆抗體的表達(dá)[257]通過PCR獲得來自兩個(gè)獨(dú)立的小鼠抗人IL31單克隆抗體292.12.3.1和292.63.5.3的重鏈和輕鏈可變區(qū)序列。測(cè)定DNA序列，使用人恒定區(qū)DNA序列產(chǎn)生表達(dá)構(gòu)建體。輕鏈表達(dá)構(gòu)建體由指導(dǎo)融合至人免疫球蛋白k恒定區(qū)的嵌合小鼠抗人IL31可變區(qū)的表達(dá)的雜種MPSV/CMV啟動(dòng)子/增強(qiáng)子組成。重鏈表達(dá)構(gòu)建體由指導(dǎo)融合至人免疫球蛋白IgG4的恒定區(qū)(在鉸鏈區(qū)具有氨基酸置換，絲氨酸228轉(zhuǎn)變成脯氨酸)的嵌合小鼠抗人IL31可變區(qū)的表達(dá)的雜種MPSV/CMV啟動(dòng)子/增強(qiáng)子組成。將編碼來自各雜交瘤的嵌合輕鏈和重鏈的輕鏈和重鏈表達(dá)構(gòu)建體共轉(zhuǎn)染入HEK293F細(xì)胞。在4天后收獲條件化培養(yǎng)基。蛋白印跡分析在非還原SDS-PAGE上顯示預(yù)期大小的完整嵌合抗體。嵌合抗體的抗原結(jié)合能力通過基于ELISA的方案，測(cè)量表觀EC50(在固定濃度上，結(jié)合50%的抗原的有效濃度)來進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定版式使用固定的山羊抗人Fc以從未處理的細(xì)胞培養(yǎng)物條件化培養(yǎng)基中捕獲人單克隆抗體的固定的山羊抗人Fc固定。生物素化的IL31的稀釋系列檢測(cè)導(dǎo)致以ng/mL或nM的IL31表示的表觀kd(或EC50)的4-參數(shù)擬合的"C"參數(shù)。測(cè)定的靈敏性高至足以可評(píng)估稀釋的單克隆抗體或嵌合抗體細(xì)胞培養(yǎng)物條件化的培養(yǎng)基。通過該方法測(cè)定的Kd通常接近對(duì)使用Biacore測(cè)量的純化的、均一的單克隆抗體測(cè)量的Kd。兩種嵌合抗-IL31抗體顯示與表3中顯示的對(duì)照"親本"小鼠雜交瘤單克隆抗體292.63.5.3相比，相似的EC50值。99表3<table>tableseeoriginaldocumentpage100</column></row><table>來自一式兩份重復(fù)測(cè)量的平均數(shù)根據(jù)上述內(nèi)容，將理解，盡管本發(fā)明的特定實(shí)施方案在此描述僅為了舉例說明，但可進(jìn)行多種修飾而背離本發(fā)明的精神和范圍。因此，本發(fā)明除了由所述的權(quán)利要求限制外，不受其他限制。權(quán)利要求1.競(jìng)爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和j)包含SEQIDNO26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)以及其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。2.用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的炎癥的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用單克隆抗體或抗體片段，所述單克隆抗體或抗體片段爭(zhēng)對(duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人igG4Fc分子結(jié)合使用。3.權(quán)利要求2的方法，其中對(duì)哺乳動(dòng)物施用抗體減少、阻斷、抑制或中和促炎趨化因子的產(chǎn)生。4.權(quán)利要求2的方法，其中促炎趨化因子是TARC或MDC。5.用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的搔癢癥的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用單克隆抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。6.權(quán)利要求5的方法，其中施用單克隆抗體或抗體片段減少、阻斷、抑制或中和皮炎。7.權(quán)利要求5的方法，其中皮炎是特應(yīng)性皮炎或結(jié)節(jié)性癢滲。8.用于減少、阻斷、抑制或中和哺乳動(dòng)物的搔抓的方法，所述方法包括對(duì)哺乳動(dòng)物施用單克隆抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；h)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；i)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和j)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。9.權(quán)利要求1的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段抑制、阻斷或中和IL-31(SEQIDNO:2)與IL-31RA(SEQIDNO:5)的相互作用。10.權(quán)利要求2、5或8的方法，其中所述單克隆抗體或抗體片段抑制、阻斷或中和IL-31(SEQIDNO:2)與IL-31RA(SEQIDNO:5)的相互作用。11.權(quán)利要求1的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段選自(a)鼠單克隆抗體或抗體片段；(b)人源化抗體或抗體片段；和(c)人單克隆抗體。12.權(quán)利要求2、5或8的方法，其中所述單克隆抗體或抗體片段選自(a)鼠單克隆抗體或抗體片段；(b)人源化抗體或抗體片段；和(c)人單克隆抗體。13.權(quán)利要求1的單克隆抗體或抗體片段，其中所述抗體還包括PEG化。14.權(quán)利要求2、5或8的方法，其中所述抗體還包括PEG化。15.權(quán)利要求1的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，其中所述單克隆抗體或抗體片段選自a)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包舍SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；ii)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iii)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iv)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；v)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vi)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vii)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和vii)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。16.權(quán)利要求2、5或8的方法，其中所述單克隆抗體或抗體片段包舍輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，其中所述單克隆抗體或抗體片段選自a)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和ii)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合的單克隆抗體或抗體片段，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)i)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；ii)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iii)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；iv)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；v)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vi)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；vii)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和vii)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。17.權(quán)利要求15或16的單克隆抗體或方法，其中所述單克隆抗體或抗體片段竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和b)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。18.權(quán)利要求15或16的單克隆抗體或方法，其中所述單克隆抗體或抗體片段竟?fàn)帉?duì)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的特異性結(jié)合，其中所述單克隆抗體或抗體片段包含選自下列區(qū)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)a)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；b)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；c)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；d)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；e)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；f)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；g)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；和h)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；并且其中將單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合使用。19.結(jié)合人IL31的分離的抗體，其中所述抗體是來源于由美國典型菌種保藏中心保藏的具有選自下列ATCC專利保藏名稱的雜交瘤產(chǎn)生的單克隆抗體的人源化抗體a)ATCC專利保藏名稱PTA-6815、b)ATCC專利保藏名稱PTA-6816、c)ATCC專利保藏名稱PTA-6829、d)ATCC專利保藏名稱PTA-6830、e)ATCC專利保藏名稱PTA-6831、f)ATCC專利保藏名稱PTA-6871、g)ATCC專利保藏名稱PTA-6872、h)ATCC專利保藏名稱PTA-6875,和i)ATCC專利保藏名稱PTA-6873，并且其中所述抗體包含重鏈免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域，所述抗體為人IgG4。在一個(gè)實(shí)施方案中，人IgG4恒定結(jié)構(gòu)域是在溶液中穩(wěn)定的突變形式，其具有少量或無補(bǔ)體激活活性。在特別的實(shí)施方案中，重鏈免疫球蛋白恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域是在位置241(Kabat編號(hào))上具有Ser至Pro突變的人IgG4恒定結(jié)構(gòu)域。20.權(quán)利要求19的分離的抗體，其中所述免疫球蛋白輕鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)域選自k或A人免疫球蛋白輕鏈的恒定區(qū)。21.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:51組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:52或SEQIDNO:57組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:53組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:54組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:55組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:56組成的第三CDR序列。22.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:51組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:58組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:59組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:60組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:61組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:62組成的第三CDR序列。23.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:63組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:64組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:65組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:66組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:67組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:68組成的第三CDR序列。24.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:69組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:70或SEQIDNO:79組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:71組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:72組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:73組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:74組成的第三CDR序列。25.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:75組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:76組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:65組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:77組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:78組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:68組成的第三CDR序列。26.此處公開的分離的抗體，其中a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:80組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:81組成的第二CDR序列、以及由SEQIDN0:82組成的第三CDR序列；和b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含由氨基酸序列SEQIDNO:83組成的第一CDR序列、由SEQIDNO:84組成的第二CDR序列、以及由SEQIDNO:85組成的第三CDR序列。全文摘要提供了來源于具有對(duì)于IL-31的親和力的免疫球蛋白的抗原結(jié)合位點(diǎn)的新型組合物。組合物展示能夠特異性結(jié)合人IL-31的抗體分子的免疫結(jié)合特性。提供了來源于相同或不同免疫球蛋白部分的CDR區(qū)域。還提供了其中V_H和V_L結(jié)構(gòu)域相連接的單鏈多肽。sFv分子可包括可具有生物活性或提供其他有用部分的附著位點(diǎn)的輔助多肽部分。組合物用于特異性結(jié)合測(cè)定、親和純化方案、藥物或毒素靶向、成像以及用于炎性疾病的遺傳或免疫治療。因此本發(fā)明提供了新的多肽、編碼此類多肽的DNA、包含此類DNA的表達(dá)盒以及誘導(dǎo)所述多肽產(chǎn)生的方法。本發(fā)明還提供了單克隆抗體的可變區(qū)的氨基酸序列和這些單克隆抗體或抗體片段與人IgG4Fc分子結(jié)合的用途。文檔編號(hào)C07K16/24GK101522713SQ200780036666公開日2009年9月2日申請(qǐng)日期2007年9月4日優(yōu)先權(quán)日2006年9月1日發(fā)明者A·W·西亞戴克,J·比爾斯伯勒,S·萊納申請(qǐng)人:津莫吉尼蒂克斯公司