專利名稱：Rho激酶的苯并噻吩抑制劑的制作方法
本申請(qǐng)要求2006年7月20日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/832,634和2007年5月3日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/915,772的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益，其公開內(nèi)容在此引作參考，如同將其全部?jī)?nèi)容寫入本文。
本發(fā)明涉及新的苯并噻吩化合物和組合物及它們作為藥物用于治療疾病的應(yīng)用。還提供了在人類或動(dòng)物個(gè)體中抑制Rho激酶活性用于治療疾病如眼科疾病的方法。
許多細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件激活小的單體GTP酶超家族的一個(gè)或多個(gè)成員。GTP酶的Rho亞家族(由RhoA、RhoB和RhoC組成)傳遞信號(hào)，通常是從細(xì)胞表面受體傳遞至在控制細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)和基因調(diào)節(jié)中起重要作用的效應(yīng)器[Ridley，A.J.，2001，Trends Cell Biol.11471-477；Jaffe，A.B.和Hall，A.，2005，Annu Rev Cell Dev Biol.21247-269]。特別地，Rho介導(dǎo)的對(duì)細(xì)胞骨架的效應(yīng)影響非肌肉細(xì)胞形狀、平滑肌細(xì)胞收縮、細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)粘附、胞內(nèi)小泡運(yùn)輸、軸突和樹突生長(zhǎng)、血管構(gòu)筑、免疫和炎癥細(xì)胞遷移以及細(xì)胞分裂期間的卵裂溝的形態(tài)與功能[Bussey，H.，1996，Science.272224-225；Fukata，Y.等人，200 1，Trends Pharmnacol Sci.2232-39；Luo，L.，2000，NatRevNeurosci.1173-180；Hu，E.和Lee，D.，2003，Curr OpinInvestig Drugs.41065-1075；Bokoch，G.M.2005，Trends Cell Biol.15163-171；Wadsworth，P.，2005，Curr Biol.15R871-874]。
盡管Rho GTP酶循環(huán)是復(fù)雜的，但它可簡(jiǎn)要概括如下。與GDP離解抑制因子蛋白(GDI)復(fù)合的無活性的、GDP結(jié)合的Rho響應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件(如配體與細(xì)胞表面受體結(jié)合)而被募集至質(zhì)膜。GDI被置換，由此該無活性的GDP結(jié)合的Rho被膜定位的鳥嘌呤核苷酸交換因子轉(zhuǎn)化為有活性的GTP結(jié)合的Rho。接著GTP結(jié)合的Rho結(jié)合并激活質(zhì)膜上的許多效應(yīng)器。已鑒定了由Rho活性控制的許多蛋白質(zhì)，包括多種蛋白質(zhì)和脂質(zhì)激酶[Kaibuchi，K.等人，1999，Annu Rev Biochem.68459-486；Bishop，A.L.和Hall，A.，2000，Biochem J.348241-255]。GTP酶激活蛋白刺激的Rho的固有GTP酶活性將Rho轉(zhuǎn)化回?zé)o活性的、GDP結(jié)合的形式，于是可通過GDI從質(zhì)膜提取GDP結(jié)合的Rho(但是在一些情況中，GDI可能提取GTP結(jié)合的Rho以熄滅信號(hào)或?qū)TP結(jié)合的Rho重定向至不同的隔室)[Sasaki T.和TakaiY.，1998，Biochem Biophys Res Commun.245641-645；Olofsson，B.，1999，CellSignal.11545-554；Schmidt，A.和Hall，A.，2002，Genes Dev.161587-1609；Moon，S.Y.和Zheng，Y.，2003，Trends Cell Biol.1313-22]。
在已鑒定的Rho效應(yīng)器中，Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋激酶(在此稱為Rho激酶)已成為分子和細(xì)胞生物學(xué)研究中的熱門研究主題，并在多個(gè)治療領(lǐng)域作為藥物靶點(diǎn)。Rho激酶是大約160kD分子量的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，其含有氨基端激酶催化結(jié)構(gòu)域、長(zhǎng)的兩性α螺旋(卷曲螺旋)結(jié)構(gòu)域、活化的Rho結(jié)合結(jié)構(gòu)域和被富含半胱氨酸的鋅指樣結(jié)構(gòu)基元分開的羧基端血小板白細(xì)胞C激酶底物同源性結(jié)構(gòu)域(促進(jìn)與質(zhì)膜磷酸肌醇結(jié)合)[Ishizaki，T.等人，1996，EMBO J.15，1885-1893；Fujisawa，K.等人，1996，J Biol Chem.27123022-23028；Matsui，T.等人，1996，EMBO J.152208-2216]。有兩種已知的Rho激酶亞型，但是可能存在剪接變體。這些亞型被稱為Rho激酶(ROK)α(本文稱作ROCK2)和Rho激酶(ROK)β，也被稱為p160ROCK(本文稱作ROCK1)[Leung，T.等人，1996，Mol Cell Biol.165313-5327；Nakagawa，O.等人，1996，F(xiàn)EBS Lett.392189-193]。許多蛋白激酶受可逆的磷酸化事件控制，所述磷酸化事件使它們?cè)诨钚誀顟B(tài)和無活性狀態(tài)之間轉(zhuǎn)換。相反，Rho激酶通過與GTP結(jié)合的Rho的可逆結(jié)合從低的基底活性轉(zhuǎn)換為高活性。活性Rho激酶然后磷酸化質(zhì)膜附近的Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的其他效應(yīng)器。兩種Rho激酶均以低至中度水平以最普遍的方式在哺乳動(dòng)物組織中表達(dá)，但是在有些細(xì)胞類型中的表達(dá)是高度富集的。Rho激酶在它們的催化結(jié)構(gòu)域中與蛋白激酶A和C家族共享功能同源性，并且Rho激酶的多種小分子抑制劑也特別地結(jié)合和抑制蛋白激酶A[Breitenlechner，C.等人，2003，Structure.111595-1607]。ROCK1在整個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)上與ROCK2具有64％的序列同一性，并且其激酶結(jié)構(gòu)域高度保守(90％同一性)。
作為Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的效應(yīng)器，Rho激酶直接涉及控制細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)、基因調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分裂和細(xì)胞存活。Rho激酶的組成性激活突變體可通過截短羧基端區(qū)域(遠(yuǎn)至激酶結(jié)構(gòu)域)產(chǎn)生，暗示了羧基端序列的重要負(fù)調(diào)節(jié)。在細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，這些突變體產(chǎn)生與高活性的Rho激酶活性(例如增加的應(yīng)力纖維形成和細(xì)胞-底物局部粘著)一致的表型。相反，缺失Rho激酶的催化結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞中造成轉(zhuǎn)顯性抑制效應(yīng)[Amano，M.等人，1997，Science.2751308-1311；Leung，T.等人，1996，Mol Cell Biol.165313-5327；Amano，M.等人，1999，J Biol Chem.27432418-32424]。有數(shù)據(jù)與ROCK1和ROCK2在細(xì)胞中的可分離的功能一致，但是這些觀察結(jié)果可能是細(xì)胞類型特異性的[Yoneda，A.等人，2005，J Cell Biol.170443-453]。盡管ROCK1的基因敲除導(dǎo)致由于新生兒臍膨出的圍產(chǎn)期致死和ROCK2的基因敲除導(dǎo)致由于胎盤發(fā)育不良的胚胎致死的高發(fā)生率，但是沒有一種單獨(dú)的敲除與ROCK1或ROCK2對(duì)胚胎在發(fā)育期間的最正常的細(xì)胞行為的必要性一致[Shimizu，Y.等人，2005，J Cell Biol.168941-953；Thumkeo，D.等人，2003，Mol Cell Biol.235043-5055]。
Rho激酶可磷酸化多種底物以控制細(xì)胞骨架行為的不同方面[Riento，K.和Ridley，A.J.2003，Nat Rev Mol Cell Biol.4446-456]。許多研究已集中于控制肌球蛋白輕鏈(MLC)調(diào)節(jié)亞基。MLC調(diào)節(jié)亞基的磷酸化導(dǎo)致增加的肌動(dòng)球蛋白活性(例如平滑肌細(xì)胞收縮或增加的非肌細(xì)胞張力纖維)。Rho激酶通過MLC調(diào)節(jié)亞基的直接磷酸化和通過肌球蛋白輕鏈磷酸酯酶的失活(通過其肌球蛋白結(jié)合亞基的磷酸化)刺激肌動(dòng)球蛋白活性[Amano，M.等人，1996，J Biol Chem.27120246-20249；Kimura，K.等人，1996，Science.273245-248；Kureishi，Y.等人，1997，JBiol Chem.27212257-12260]。LIM激酶、埃茲蛋白/根蛋白/膜突蛋白(ERM)家族蛋白質(zhì)和內(nèi)收蛋白是Rho激酶的一些其他底物，且這些和其他蛋白的磷酸化改變細(xì)胞骨架功能的不同方面[Oshiro，N.等人，1998，J Biol Chem.27334663-34666；Kimura，K.等人，1998，J Biol Chem.2735542-5548；Matsui，T.等人，1998，J Cell Biol.140647-657；Fukata，Y.等人，1999，J Cell Biol.145347-361；Kosako，H.等人，1997，JBiol Chem.27210333-10336；Goto，H.等人，1998，J BiolChem.27311728-11736；Maekawa，M.等人，1999，Science.285895-898；Ohashi，K.等人，2000，J Biol Chem.2753577-3582]。
小分子化合物如Y-27632、Y-32885、Y-39983、HA-1077(法舒地爾)、羥基法舒地爾和法舒地爾的二甲基化的類似物(H-1152P或HMN-1152)已被證明直接抑制Rho激酶。這些Y化合物(它們是更具選擇性的Rho激酶抑制劑)含有共同的吡啶基團(tuán)，而法舒地爾及其類似物含有共同的異喹啉支架。已報(bào)告了與Y-27632、法舒地爾、羥基法舒地爾和H-1152P復(fù)合的ROCK1的激酶結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)(Jacobs，M.等人，2006，J Biol Chem.281260-268]。所有這些化合物均占據(jù)ATP-結(jié)合口袋的一部分，這與它們是可逆的ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的事實(shí)相符。
這些相同的Rho激酶抑制劑是細(xì)胞滲透性的，并可引起與喪失Rho激酶活性相符的細(xì)胞骨架功能和細(xì)胞行為的變化，類似于轉(zhuǎn)顯性抑制突變體的效應(yīng)。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中和在體內(nèi)生理學(xué)響應(yīng)的組織中均觀察到了效應(yīng)[Nagumo，H.等人，2000，Am J Physiol Cell Physiol.278C57-C65；Sinnett-Smith，J.等人，2001，Exp Cell Res.266292-302；Chrissobolis，S.和Sobey，C.G.，2001，Circ Res.88774-779；Honjo，M.等人，2001，InvestOphthalmol Vis Sci.42137-144；Takahara，A.等人，2003，Eur JPharmacol.46051-57；Fournier，A.E.等人，2003，J Neurosci.231416-1423；Rikitake，Y等人，2005，Stroke.362251-2257；Slotta，J.E.等人2006，Inflamm Res.55364-367；Ying，H.等人，2006，Mol Cancer Ther.52158-2164]。Rho激酶的小分子抑制與體外及體內(nèi)細(xì)胞行為的變化(例如血管平滑肌松弛、支氣管平滑肌松弛、抑制免疫和炎癥細(xì)胞遷移、抑制腫瘤細(xì)胞遷移、抑制試驗(yàn)誘導(dǎo)的纖維化、促進(jìn)神經(jīng)再生活性)之間的相關(guān)性支持Rho激酶是多種治療適應(yīng)證的重要藥物靶點(diǎn)的主張。此外，現(xiàn)在更傾向于認(rèn)為臨床上有用的HMG輔酶A還原酶抑制劑(即“他汀(statin)”藥物類)的一些“多效的”和有益的心血管效應(yīng)是減少的Rho和由此降低的Rho激酶活性的結(jié)果，特別是在內(nèi)皮細(xì)胞中[Eto，M.等人，2002，Circulation.1051756-1759；Rikitake，Y.和Liao，J.K.，2005，Circ Res.971232-1235；Kozai，T.等人，2005，Cardiovasc Res.68475-482；Girgis，R.E.等人，2007，Am J Physiol Lung CellMol Physiol.292L1105-L1110]。有趣的是，最近Rho激酶抑制已參與分離的人類胚胎干細(xì)胞的增強(qiáng)的存活和克隆率，其提示Rho激酶抑制劑用于干細(xì)胞治療的效用[Watanabe，K.等人，2007，Nat Biotechnol.25681-686]。
已發(fā)現(xiàn)抑制Rho激酶的一些新化合物和藥物組合物，以及合成和使用所述化合物的方法，包括通過給藥所述化合物治療患者中Rho激酶介導(dǎo)的疾病的方法。
本發(fā)明公開了一類由結(jié)構(gòu)式I定義的化合物，其中某些可用于治療Rho激酶介導(dǎo)的病癥和疾患
A是任選取代的雜芳基； G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基； G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在； m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4； Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在； Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基； n是0、1或2； Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基； G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；Ⅳ然?、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代； G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；⒎蓟然?、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且 R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
根據(jù)本發(fā)明的某些化合物具有有用的Rho激酶抑制活性并可用于治療或預(yù)防其中Rho激酶具有活性作用的疾病或疾患。因此，在寬泛的方面，本發(fā)明的某些實(shí)施方案還提供包含本文公開的一個(gè)或多個(gè)化合物以及藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物，以及制備和使用所述化合物和組合物的方法。本發(fā)明的某些實(shí)施方案提供用于抑制Rho激酶的方法。本發(fā)明的其他實(shí)施方案提供在需要治療的患者中治療Rho激酶介導(dǎo)的病癥的方法，其包括向所述患者給藥治療有效量的根據(jù)本發(fā)明的化合物或組合物。本發(fā)明還涵蓋了本文公開的某些化合物用于制備用于治療通過抑制Rho激酶改善的疾病或疾患的藥物的用途。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，A選自含有至少一個(gè)環(huán)氮的任選取代的單環(huán)5至6元雜芳基或包含與六元環(huán)稠合的五元環(huán)且含有至少一個(gè)環(huán)氮的任選取代的雙環(huán)雜芳基。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，G1選自
X1是N或C(R6)； X2是N或C(R7)； X3是N或C(R8)； X4是N或C(R9)； X5是N或C(R10)； X6是N或C(R11)； X7是N或C(R12)； X8是N或C(R13)； X9是N或C(R14)； X10是N或C(R15)； Y是O或S；且 R4-R15獨(dú)立地選自氫、鹵素、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、低級(jí)鹵代烷基、?；?、氨基、羧基、氰基和硝基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，A選自
其中任何一個(gè)均可被任選地取代。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中， G2是(CRaRb)mZ(CRcRd)p； m和p獨(dú)立地為0、1或2； Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、C(O)以及不存在； Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；且 n是0或2。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，其中G1是
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，A選自
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物具有結(jié)構(gòu)式II
其中 Y是O或S； G2是(CRaRb)mZ(CRcRd)p； m和p獨(dú)立地為0、1或2； Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、C(O)以及不存在； Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；且 n是0或2； G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；?、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代； G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；⒎蓟然?、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代； R16選自低級(jí)烯基、炔基、低級(jí)烷基、烷硫基、鹵代烷基、雜烷基、羥烷基、鹵素和氫；且 R17-R19獨(dú)立地選自?；?、低級(jí)烯基、炔基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基烷基、低級(jí)烷基、烷硫基、酰氨基、氨基、氨基烷基、氨基羰基、羧基、鹵代烷基、羥烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中， Y是S； R16選自低級(jí)烷基和氫；且 R17-R19全部是氫。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，G3選自芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中， 或者 m和p均為0；且 Z選自O(shè)、NH、S和C(O)； 或者 m是1； Z不存在；且 p是0。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R16選自甲基、乙基、雜烷基和鹵素。
在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，G4選自氫、鹵素、烷氧基、氨基、烷基酰氨基、羧基、烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基和雜環(huán)烷基烷基酰氨基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
在某些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)構(gòu)式I-IV化合物可用于抑制Rho激酶，用于治療疾病。
在某些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)構(gòu)式I-IV化合物可與至少一種其他治療劑組合給藥。
如本文所使用，以下術(shù)語(yǔ)具有所指定的含義。
當(dāng)公開了值的范圍并使用“從n1至n2”(其中n1和n2為數(shù)字)的表示法時(shí)，除非另外指明，此表示法意在包括數(shù)字本身和它們之間的范圍。此范圍可以是端值間的整數(shù)或連續(xù)范圍，且包括端值。例如，范圍“從2至6個(gè)碳”意在包括二、三、四、五和六個(gè)碳，因?yàn)樘紴檎麛?shù)單位。對(duì)比，例如，范圍“從1至3μM(微摩爾)，”其意在包括1μM、3μM以及在其間的所有數(shù)字至任何位數(shù)的有效數(shù)字(例如，1.255μM、2.1μM、2.9999μM等)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“約”意在限定其修飾的數(shù)值，表明這樣的值是誤差范圍內(nèi)的變量。當(dāng)沒有詳述特別的誤差范圍，如在數(shù)據(jù)圖或表中給定平均值的標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，術(shù)語(yǔ)“約”應(yīng)理解為表示可以包括所述值的范圍，以及考慮有效數(shù)字，可以被數(shù)字的上下舍入(rounding up or down)所包括的范圍。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“?；眴为?dú)或在組合中指連接到烯基、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜芳基、雜環(huán)烷基或任何其他基團(tuán)的羰基，其中連接至所述羰基的原子是碳。“乙?；??；囊环N)指-C(O)CH3基團(tuán)?！巴榛驶被颉巴轷；敝竿ㄟ^羰基連接到母體分子基團(tuán)的烷基。這樣的基團(tuán)的實(shí)例包括甲基羰基和乙基羰基。酰基的實(shí)例包括甲?；?、烷?；头减；?。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烯基”單獨(dú)或在組合中指具有一個(gè)或多個(gè)雙鍵并包含2至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基。在某些實(shí)施方案中，所述烯基會(huì)包含2至6個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“亞烯基”指連接在兩個(gè)或多個(gè)位置的碳碳雙鍵系統(tǒng)，如亞乙烯基[(-CH＝CH-)，(-C::C-)]。合適的烯基的實(shí)例包括乙烯基、丙烯基、2-甲基丙烯基、1，4-丁二烯基等。除非另外指明，術(shù)語(yǔ)“烯基”可以包括“亞烯基”基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烷氧基”單獨(dú)或在組合中指烷基醚基團(tuán)，其中術(shù)語(yǔ)烷基如下文所定義。合適的烷基醚基團(tuán)的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烷基”單獨(dú)或在組合中指含有1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。在某些實(shí)施方案中，所述烷基會(huì)包含1至10個(gè)碳原子。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述烷基會(huì)包含1至6個(gè)碳原子。烷基可以任選地如本文所定義地被取代。烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、辛基、壬基(noyl)等。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“亞烷基”單獨(dú)或在組合中指連接在兩個(gè)或多個(gè)位置的衍生自直鏈或支鏈飽和烴的飽和脂肪族基團(tuán)，如亞甲基(-CH2-)。除非另外指明，術(shù)語(yǔ)“烷基”可以包括“亞烷基”基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烷基氨基”單獨(dú)或在組合中指通過氨基連接到母體分子基團(tuán)的烷基。合適的烷基氨基可以是單或二烷基化的，形成比如例如N-甲基氨基、N-乙基氨基、N，N-二甲基氨基、N，N-乙基甲基氨基等的基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烷叉(alkylidene)”單獨(dú)或在組合中指其中碳碳雙鍵的一個(gè)碳原子屬于烯基所連接的基團(tuán)的烯基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“烷硫基”單獨(dú)或在組合中指烷基硫醚(R-S-)基團(tuán)，其中術(shù)語(yǔ)烷基如上文所定義，且其中所述硫可以是被單次或雙重氧化的。合適的烷基硫醚基的實(shí)例包括甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基、正丁硫基、異丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、甲磺?；?、乙磺酰基等。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“炔基”單獨(dú)或在組合中是含有一個(gè)或多個(gè)三鍵并含有2至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基。在某些實(shí)施方案中，所述炔基包含2至6個(gè)碳原子。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述炔基包括2至4個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“亞炔基”指連接在兩個(gè)位置的碳碳三鍵，如亞乙炔基(-C:::C-，-C≡C-)。炔基的實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、羥基丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔-2-基等。除非另外指明，術(shù)語(yǔ)“炔基”可以包括“亞炔基”基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“酰氨基”和“氨基甲酰基”單獨(dú)或在組合中指通過羰基連接到母體分子基團(tuán)的如下文所述的氨基，或反之亦然。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“C-酰氨基”單獨(dú)或在組合中指-C(＝O)-N(R)2基團(tuán)，其中R如本文所定義。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“N-酰氨基”單獨(dú)或在組合中指RC(＝O)N(R’)-基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“?；被眴为?dú)或在組合中包括通過氨基連接到母體基團(tuán)的酰基。“酰基氨基”基團(tuán)的實(shí)例是乙酰氨基(CH3C(O)NH-)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氨基”單獨(dú)或在組合中指-N(R)(R’)或-N+(R)(R’)(R”)，其中R、R’和R”獨(dú)立地選自氫、烷基、酰基、雜烷基、芳基、環(huán)烷基、雜芳基和雜環(huán)烷基，它們中任何一個(gè)本身可以被任選地取代。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氨基酸”單獨(dú)或在組合中指形式為-NRCH(R’)C(O)OH的取代基，其中R通常為氫，但可以與N環(huán)化(如在氨基酸脯氨酸的情況)，且R’選自氫、烷基、雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、氨基、酰氨基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷基、芳基烷基、雜芳基烷基、氨基烷基、酰氨基烷基、羥烷基、硫醇、硫代烷基、烷硫基烷基和烷硫基，它們中任何一個(gè)可以被任選地取代。術(shù)語(yǔ)“氨基酸”包括所有天然存在的氨基酸以及合成的類似物。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基”單獨(dú)或在組合中指含有一、二或三個(gè)環(huán)的碳環(huán)芳族系統(tǒng)，其中這樣的環(huán)可以按側(cè)鏈方式連接在一起或者可以被稠合。術(shù)語(yǔ)“芳基”包括如芐基、苯基、萘基、蒽基、菲基、茚滿基、茚基、輪烯基、甘菊環(huán)基、四氫萘基和聯(lián)苯基的芳族基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基烯基”或“芳烯基”單獨(dú)或在組合中指通過烯基連接到母體分子基團(tuán)的芳基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基烷氧基”或“芳烷氧基”單獨(dú)或在組合中指通過烷氧基連接到母體分子基團(tuán)的芳基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基烷基”或“芳烷基”單獨(dú)或在組合中指通過烷基連接到母體分子基團(tuán)的芳基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基炔基”或“芳炔基”單獨(dú)或在組合中指通過炔基連接到母體分子基團(tuán)的芳基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“芳基烷?；被颉胺纪轷；被颉胺减；眴为?dú)或在組合中指衍生自芳基取代的烷烴羧酸(alkanecarboxylic acid)的?；?，如苯甲?；?、萘甲酰基、苯乙酰基、3-苯丙?；?氫化肉桂酰基)、4-苯丁酰基、(2-萘基)乙酰基、4-氯氫化肉桂酰基等。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)芳氧基單獨(dú)或在組合中指通過氧連接到母體分子基團(tuán)的芳基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“苯并(benzo和benz)”單獨(dú)或在組合中指衍生自苯的二價(jià)基團(tuán)C6H4＝。實(shí)例包括苯并噻吩和苯并咪唑。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氨基甲酸酯”單獨(dú)或在組合中指氨基甲酸的酯(-NHCOO-)，其可以從氮或酸末端連接到母體分子基團(tuán)，且其可以任選地如本文所定義地被取代。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“O-氨基甲?；眴为?dú)或在組合中指-OC(O)NRR’基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“N-氨基甲?；眴为?dú)或在組合中指ROC(O)NR’-基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“羰基”單獨(dú)使用時(shí)包括甲?；鵞-C(O)H]，在組合中使用時(shí)為-C(O)-基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“羧基”指-C(O)OH、O-羧基、C-羧基或相應(yīng)的“羧酸根”陰離子(如在羧酸鹽中)。“O-羧基”基團(tuán)指RC(O)O-基團(tuán)，其中R如本文所定義?！癈-羧基”基團(tuán)指-C(O)OR基團(tuán)，其中R如本文所定義。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氰基”單獨(dú)或在組合中指-CN。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”，或可選地“碳環(huán)”單獨(dú)或在組合中指飽和或部分飽和的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)烷基，其中每個(gè)環(huán)基團(tuán)含有3至12個(gè)碳原子環(huán)成員，且其可任選地為如本文所定義的任選地被取代的苯并稠環(huán)系統(tǒng)。在某些實(shí)施方案中，所述環(huán)烷基會(huì)包含5至7個(gè)碳原子。這樣的環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、八氫萘基、2，3-二氫-1H-茚基、金剛烷基等。如本文所使用，“雙環(huán)”和“三環(huán)”均意在包括兩種稠環(huán)系統(tǒng)(如十氫化萘、八氫化萘)和多環(huán)(多中心)飽和或部分不飽和型。后一類型的異構(gòu)體的一般例示為雙環(huán)[1，1，1]戊烷、樟腦、金剛烷和雙環(huán)[3，2，1]辛烷。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“酯”單獨(dú)或在組合中指橋接兩個(gè)在碳原子處連接的基團(tuán)的羧基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“醚”單獨(dú)或在組合中一般指橋接兩個(gè)在碳原子處連接的基團(tuán)的氧基。“醚”還可以包括聚醚，比如例如-RO(CH2)2O(CH2)2O(CH2)2OR’、-RO(CH2)2O(CH2)2OR’、-RO(CH2)2OR’和-RO(CH2)2OH。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“鹵代”或“鹵素”單獨(dú)或在組合中指氟、氯、溴或碘。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“鹵代烷氧基”單獨(dú)或在組合中指通過氧原子連接至母體分子基團(tuán)的鹵代烷基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”單獨(dú)或在組合中指其中一個(gè)或多個(gè)氫被鹵素取代的具有上文所定義的含義的烷基。具體包括單鹵代烷基，二鹵代烷基和多鹵代烷基。例如，單鹵代烷基可以在基團(tuán)中有一個(gè)碘、溴、氯或氟原子。二鹵代和多鹵代烷基可以有兩個(gè)或多個(gè)相同的鹵原子或不同的鹵代基團(tuán)的組合。鹵代烷基的實(shí)例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基?！胞u代亞烷基”指在兩個(gè)或多個(gè)位置連接的鹵代烷基。實(shí)例包括氟亞甲基(-CFH-)、二氟亞甲基(-CF2-)、氯亞甲基(-CHCl-)等。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“雜烷基”單獨(dú)或在組合中指完全飽和或含有1至3個(gè)不飽和度，由規(guī)定數(shù)目的碳原子和一至三個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子組成的穩(wěn)定的直鏈或支鏈或環(huán)狀烴基，或其組合，且其中氮和硫原子可任選地被氧化，氮雜原子可任選地被季銨化。雜原子O、N和S可以置于雜烷基的任何內(nèi)部位置。上至兩個(gè)雜原子可以相連，比如例如，-CH2-NH-OCH3。術(shù)語(yǔ)雜烷基可以包括醚。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“雜芳基”單獨(dú)或在組合中指3至7元不飽和雜單環(huán)或其中至少一個(gè)稠環(huán)是不飽和的稠合多環(huán)，其中至少一個(gè)原子選自O(shè)、S和N。在某些實(shí)施方案中，所述雜芳基會(huì)包含5至7個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)還包括稠合多環(huán)基團(tuán)，其中雜環(huán)基與芳基稠合，其中雜芳基與其他雜芳基稠合，或者其中雜芳基與環(huán)烷基稠合。雜芳基的實(shí)例包括吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基、吡喃基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、吲哚基、異吲哚基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、吲唑基、苯并三唑基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基、苯并吡喃基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、四氫喹啉基、四唑并噠嗪基、四氫異喹啉基、噻吩并吡啶基、呋喃并吡啶基、吡咯并吡啶基等。示例性的三環(huán)雜環(huán)基團(tuán)包括咔唑基、苯并吲哚基(benzidolyl)、菲咯啉基、二苯并呋喃基、吖啶基、菲啶基、呫噸基等。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”和“雜環(huán)”可互換地單獨(dú)或在組合中均指含有至少一個(gè)雜原子作為環(huán)成員的飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)雜環(huán)基，其中每個(gè)所述雜原子可以獨(dú)立地選自氮、氧和硫。在某些實(shí)施方案中，所述雜環(huán)烷基會(huì)包含1至4個(gè)雜原子作為環(huán)成員。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述雜環(huán)烷基會(huì)包含1至2個(gè)雜原子環(huán)成員。在某些實(shí)施方案中，所述雜環(huán)烷基會(huì)在每個(gè)環(huán)中包含3至8個(gè)環(huán)成員。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述雜環(huán)烷基會(huì)在每個(gè)環(huán)中包含3至7個(gè)環(huán)成員。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述雜環(huán)烷基會(huì)在每個(gè)環(huán)中包含5至6個(gè)環(huán)成員?！半s環(huán)烷基”和“雜環(huán)”意在包括糖、砜、亞砜、叔氮環(huán)成員的N-氧化物以及碳環(huán)稠環(huán)系統(tǒng)和苯并稠環(huán)系統(tǒng)；此外，兩術(shù)語(yǔ)還均包括雜環(huán)被稠合到芳基(如本文所定義)或另一雜環(huán)基的系統(tǒng)。雜環(huán)烷基的實(shí)例包括氮丙啶基、吖丁啶基、1，3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯基、二氫異吲哚基、二氫異喹啉基、二氫噌啉基、二氫苯并二噁英基、二氫[1，3]噁唑并[4，5-b]吡啶基、苯并噻唑基、二氫吲哚基、二氫吡啶基、1，3-二噁烷基、1，4-二噁烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、異吲哚啉基、嗎啉基、哌嗪基、吡咯烷基、四氫吡啶基、哌啶基、硫嗎啉基等。除非明確禁止，所述雜環(huán)烷基可以被任選地取代。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“肼基”單獨(dú)或在組合中指通過單鍵連接的兩個(gè)氨基，即-N-N-。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氧肟酸”單獨(dú)或在組合中指-C(O)ON(R)O(R′)，其中R和R’如本文所定義，或者指相應(yīng)的“氧肟酸根”陰離子，包括任何相應(yīng)的氧肟酸鹽。氧戊酸根還包括-ON(R)O(O)CR’形式的反向(reverse)氧戊酸根。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“羥基(hydroxy)”或同等的“羥基(hydroxyl)”單獨(dú)或在組合中指-OH。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“羥烷基”單獨(dú)或在組合中指通過烷基連接到母體分子基團(tuán)的羥基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“亞氨基”單獨(dú)或在組合中指＝N-。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“亞氨基羥基”單獨(dú)或在組合中指＝N(OH)和＝N-O-。
術(shù)語(yǔ)“異氰酸基”指-NCO基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“異硫氰酸基”指-NCS基團(tuán)。
短語(yǔ)“原子的直鏈”指獨(dú)立地選自碳、氮、氧和硫的原子的最長(zhǎng)直鏈。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“低級(jí)”單獨(dú)或在組合中指含有1至6且包括6個(gè)碳原子。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“巰基”單獨(dú)或在組合中指RS-基團(tuán)，其中R如本文所定義。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“硝基”單獨(dú)或在組合中指-NO2。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氧基”或“氧雜”單獨(dú)或在組合中指-O-。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“氧代”單獨(dú)或在組合中指＝O。
術(shù)語(yǔ)“全鹵代烷氧基”指所有氫原子均被鹵素原子取代的烷氧基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“全鹵代烷基”單獨(dú)或在組合中指其中所有氫原子均被鹵素原子取代的烷基。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“磷酰胺”單獨(dú)或在組合中指其中一個(gè)或多個(gè)羥基已經(jīng)被氮、氨基或酰氨基取代的磷酸酯基團(tuán)[(OH)2P(O)O-]。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“膦酸酯”單獨(dú)或在組合中指ROP(OR′)(OR)O-形式的基團(tuán)，其中R和R’選自氫、烷基、酰基、雜烷基、芳基、環(huán)烷基、雜芳基和雜環(huán)烷基，它們中任何一個(gè)本身可以被任選地取代?！办⑺狨ァ卑ā傲姿狨(OH)2P(O)O-]和相關(guān)的可形成鹽的磷酸陰離子。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“磺酸酯(sulfonate)”、“磺酸”和“磺酸的(sulfonic)”單獨(dú)或在組合中指-SO3H基團(tuán)及其在磺酸用于形成鹽時(shí)的陰離子。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“硫烷基”單獨(dú)或在組合中指-S-。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“亞硫?；眴为?dú)或在組合中指-S(O)-。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“磺?；眴为?dú)或在組合中指-S(O)2-。
術(shù)語(yǔ)“N-磺酰氨基”指RS(＝O)2NR′-基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
術(shù)語(yǔ)“S-磺酰氨基”指-S(＝O)2NRR′基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“硫雜”和“硫基(thio)”單獨(dú)或在組合中指-S-基團(tuán)或其中氧被硫替代的醚。硫雜和硫基的定義中包括硫基的氧化衍生物，即亞硫酰基和磺?；?。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“硫醇”單獨(dú)或在組合中指-SH基團(tuán)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“硫代羰基”單獨(dú)使用時(shí)包括硫醛基-C(S)H，在組合使用時(shí)為-C(S)-基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“N-硫代氨基甲?；敝窻OC(S)NR′-基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
術(shù)語(yǔ)“O-硫代氨基甲?；敝?OC(S)NRR′基團(tuán)，其中R和R’如本文所定義。
術(shù)語(yǔ)“氰硫基”指-CNS基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“三鹵代甲磺酰氨基”指X3CS(O)2NR-基團(tuán)，其中X是鹵素且R如本文所定義。
術(shù)語(yǔ)“三鹵代甲磺酰基”指X3CS(O)2-基團(tuán)，其中X是鹵素。
術(shù)語(yǔ)“三鹵代甲氧基”指X3CO-基團(tuán)，其中X是鹵素。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“三取代的甲硅烷基”單獨(dú)或在組合中指其三個(gè)自由價(jià)由本文在取代氨基定義下列出的基團(tuán)取代的硅酮基團(tuán)。實(shí)例包括三甲基甲硅烷基、叔丁二甲基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基等。
本文的任何定義可以與任何其他定義組合使用以描述復(fù)合結(jié)構(gòu)基團(tuán)。按照慣例，任何這樣的定義的結(jié)尾元素均連接至母體基團(tuán)。例如，復(fù)合基團(tuán)烷基酰氨基會(huì)代表通過酰氨基連接至母體分子的烷基，術(shù)語(yǔ)烷氧基烷基會(huì)代表通過烷基連接至母體分子的烷氧基。
當(dāng)基團(tuán)被定義為“不存在”時(shí)，意思是沒有所述基團(tuán)。出現(xiàn)在兩個(gè)其他基團(tuán)之間的“不存在”的基團(tuán)也可以理解為側(cè)鏈基團(tuán)的斷裂。例如，如果在-(CH2)sG1G2G3中，元素G2不存在，則所述基團(tuán)會(huì)為-(CH2)sG1G3。
術(shù)語(yǔ)“任選地取代”指先前基團(tuán)可被取代或不被取代。當(dāng)被取代時(shí)，“任選取代的”基團(tuán)的取代基可以包括但不限于，單獨(dú)或在組合中的一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下基團(tuán)或一組特別指定的基團(tuán)的取代基低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)炔基、低級(jí)烷?；图?jí)雜烷基、低級(jí)雜環(huán)烷基、低級(jí)鹵代烷基、低級(jí)鹵代烯基、低級(jí)鹵代炔基、低級(jí)全鹵代烷基、低級(jí)全鹵代烷氧基、低級(jí)環(huán)烷基、苯基、芳基、芳氧基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)鹵代烷氧基、氧代、低級(jí)酰氧基、羰基、羧基、低級(jí)烷基羰基、低級(jí)羧酸酯、低級(jí)酰胺基(lowercarboxamido)、氰基、氫、鹵素、羥基、氨基、低級(jí)烷基氨基、芳基氨基、酰氨基、硝基、硫醇、低級(jí)烷硫基、低級(jí)鹵代烷硫基、低級(jí)全鹵代烷硫基、芳硫基、磺酸酯、磺酸、三取代甲硅烷基、N3、SH、SCH3、C(O)CH3、CO2CH3、CO2H、吡啶基、噻吩、呋喃基、低級(jí)氨基甲酸酯和低級(jí)脲。兩個(gè)取代基可以連接在一起形成稠合的五、六或七元碳環(huán)或由零至三個(gè)雜原子組成的雜環(huán)，例如形成亞甲二氧基或亞乙二氧基。任選取代的基團(tuán)可以是未取代的(例如-CH2CH3)、完全取代的(例如-CF2CF3)、單取代的(例如-CH2CH2F)或介于完全取代和單取代之間的任何水平的取代(如-CH2CF3)。如果列舉取代基時(shí)未對(duì)取代進(jìn)行限定，則取代和未取代形式均包括在內(nèi)。當(dāng)限定取代基為“取代的”時(shí)，則特別意指取代形式。此外，可以根據(jù)需要針對(duì)特定基團(tuán)定義不同組的任選取代基；在這些種情況下，所述任選取代基將如所定義的通常直接在短語(yǔ)“任選地被......取代”中。
除非另外說明，獨(dú)自出現(xiàn)且沒有數(shù)字指定的術(shù)語(yǔ)R和術(shù)語(yǔ)R’指選自氫、羥基、鹵素、烷基、環(huán)烷基、雜烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)烷基(其中任何一個(gè)可以被任選地取代)的基團(tuán)。如本文所定義，這樣的R和R’基團(tuán)應(yīng)理解為被任選地取代。不論R基團(tuán)是否指定了數(shù)字，每個(gè)R基團(tuán)(包括R、R’和Rn，其中n＝(1，2，3，...n))、每個(gè)取代基和每個(gè)術(shù)語(yǔ)均應(yīng)理解為獨(dú)立于組中所有其他的選擇。如果任何變量、取代基或術(shù)語(yǔ)(例如芳基、雜環(huán)、R等)在分子式或通用結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)超過一次，則其在每次出現(xiàn)的定義獨(dú)立于其在其他出現(xiàn)的定義。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)進(jìn)一步理解，某些基團(tuán)可以從所記錄的任何一端連接至母體分子或可占據(jù)元素鏈中的位置。因此，僅作為舉例，不對(duì)稱基團(tuán)如-C(O)N(R)-可在碳或氮上連接至母體基團(tuán)。
在本發(fā)明的化合物中存在不對(duì)稱中心。這些中心根據(jù)手性碳原子周圍的取代基的構(gòu)型通過符號(hào)“R”或“S”來指定。要理解，本發(fā)明包括所有的立體化學(xué)異構(gòu)形式，包括非對(duì)映異構(gòu)、對(duì)映異構(gòu)和差向異構(gòu)形式，以及d-異構(gòu)體和1-異構(gòu)體，及它們的混合物?；衔锏膯蝹€(gè)立體異構(gòu)體可以從可商購(gòu)的含有手性中心的原料合成制備，或通過制備對(duì)映異構(gòu)體產(chǎn)物的混合物，然后分離，如轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體的混合物接著通過分離或重結(jié)晶、色譜技術(shù)、在手性色譜柱上直接分離對(duì)映異構(gòu)體或本領(lǐng)域已知的其他合適的方法來制備。特定立體化學(xué)的起始化合物為可商購(gòu)或可通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)制備和拆分。此外，本發(fā)明的化合物可以存在幾何異構(gòu)體。本發(fā)明包括所有順式(cis)、反式(trans)、順(syns)、反(anti)、異側(cè)(entgegen)(E)和同側(cè)(zusammen)(Z)異構(gòu)體以及它們的合適的混合物。此外，化合物可以按互變異構(gòu)體存在，包含酮-烯醇互變異構(gòu)體；本發(fā)明提供所有的互變異構(gòu)體。此外，本發(fā)明的化合物可按非溶劑化形式以及與藥學(xué)可接受的溶劑(如水、乙醇等)的溶劑化形式存在。通常，就本發(fā)明的目的而言，認(rèn)為溶劑化形式等同于非溶劑化形式。
術(shù)語(yǔ)“鍵”指兩個(gè)原子或兩個(gè)基團(tuán)(當(dāng)通過所述鍵連接的原子被認(rèn)為是較大亞結(jié)構(gòu)的部分時(shí))之間的共價(jià)連接。除非另外指明，鍵可以是單鍵、雙鍵和三鍵。分子圖示中兩原子之間的虛線指示在該位置可以存在或不存在額外的鍵。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“疾病”意指通常與術(shù)語(yǔ)“病癥”和“疾患”(如在醫(yī)學(xué)疾患中)同義，且可以與之互換，因?yàn)槠渚从成眢w或身體的一個(gè)部分的異常情況，所述異常情況損害正常的功能，并通常通過有區(qū)別的體征和癥狀顯現(xiàn)。
術(shù)語(yǔ)“組合治療”指給藥兩種或多種治療劑，以治療在本公開中描述的治療學(xué)的疾患和病癥。這樣的給藥包括以基本同時(shí)的方式共同給藥這些治療劑，如以具有固定比例的活性成分的單個(gè)膠囊，或以每種活性成分的多個(gè)、分離的膠囊。此外，這樣的給藥也包括以順序方式使用每種類型的治療劑。在兩種情況下，治療方案會(huì)在治療本文所述的疾患和病癥中提供藥物組合的有益影響。
本文使用的“Rho激酶抑制劑”指在下文概述的Rho激酶測(cè)定中測(cè)量時(shí)，針對(duì)Rho激酶活性表現(xiàn)出的IC50不超過約100μM和更通常地不超過約50μM的化合物。“IC50”是將酶(例如Rho激酶)的活性降低至半數(shù)最大值水平的抑制劑濃度。已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的某些代表性化合物表現(xiàn)出針對(duì)Rho激酶的抑制。在某些實(shí)施方案中，在本文大所述的Rho激酶測(cè)定的測(cè)量中，化合物針對(duì)Rho激酶會(huì)顯示出不超過約10μM的IC50；在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，化合物針對(duì)Rho激酶會(huì)顯示不超過約5μM的IC50；在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，化合物針對(duì)Rho激酶會(huì)顯示不超過約1μM的IC50。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，化合物針對(duì)Rho激酶會(huì)顯示不超過約200nM的IC50。
術(shù)語(yǔ)“治療有效的”意在限定用于治療疾病或病癥的活性成分的量。該量會(huì)實(shí)現(xiàn)減輕或消除所述疾病和病癥的目標(biāo)。
如本文所使用，提及患者的“治療”意在包括預(yù)防。術(shù)語(yǔ)“患者”指包括人類在內(nèi)的所有哺乳動(dòng)物?；颊叩膶?shí)例包括人類、牛、狗、貓、山羊、綿羊、豬和兔。優(yōu)選地，所述患者為人類。
術(shù)語(yǔ)“前藥”指在體內(nèi)變得更有活性的化合物。某些本發(fā)明化合物也可以作為前藥存在，如Hydrolysis in Drug and Prodrug MetabolismChemistry，Biochemistry，and Enzymology(Testa，Bernard和Mayer，Joachim M.Wiley-VHCA，蘇黎世，瑞士2003)中所述。本文所述的化合物的前藥是所述化合物的結(jié)構(gòu)修飾形式，其容易在生理?xiàng)l件下經(jīng)歷化學(xué)變化以提供所述化合物。此外，前藥可以在離體環(huán)境中通過化學(xué)或生物化學(xué)的方法轉(zhuǎn)化為所述化合物。例如，當(dāng)與合適的酶或化學(xué)試劑置于透皮貼劑儲(chǔ)庫(kù)(reservoir)中時(shí)，前藥可緩慢轉(zhuǎn)化為化合物。前藥通常是有用的，因?yàn)樵谝恍┣闆r下，它們比所述化合物或母體藥物更容易給藥。例如，它們通過口服給藥是可以生物利用的，而母體藥物則不是。前藥還可以在藥物組合物中具有超過母體藥物的改善的溶解度。本領(lǐng)域中已知多種前藥衍生物，如依賴于前藥水解分裂或氧化活化的那些。前藥的非限制性實(shí)例是作為酯(所述“前藥”)給藥，但接著被代謝水解為羧酸，即其活性實(shí)體。其他的實(shí)例包括化合物的肽基衍生物。術(shù)語(yǔ)“治療可接受的前藥”指適合用于接觸患者組織且不產(chǎn)生異常毒性、刺激和過敏反應(yīng)，與合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比率相當(dāng)且對(duì)它們的預(yù)期用途而言有效的前藥或兩性離子。
本發(fā)明的化合物可以作為治療可接受的鹽存在。本發(fā)明包括上述列舉的化合物的鹽形式，包含酸加成鹽。合適的鹽包括與有機(jī)和無機(jī)酸形成的鹽。這樣的酸加成鹽一般會(huì)是藥學(xué)可接受的。然而，非藥學(xué)可接受的鹽的鹽可以被用于制備和純化所討論的化合物。也可以形成堿加成鹽，且為藥學(xué)可接受的。有關(guān)鹽的制備和選擇的更完整的討論，參見PharmaceuticalSaltsProperties，Selection，and Use(Stahl，P.Heinrich.Wiley-VCHA，蘇黎世，瑞士，2002)。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“治療可接受的鹽”代表本發(fā)明的化合物的鹽或兩性離子形式，其為水或油溶性的或可分散的以及治療可接受的(如本文所定義)。所述鹽可以在化合物的最后分離和純化過程中或單獨(dú)地通過使游離堿形式的適當(dāng)化合物與合適的酸反應(yīng)來制備。代表性的酸加成鹽包含乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、L-抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、二葡糖酸鹽(digluconate)、甲酸鹽、延胡索酸鹽、龍膽酸鹽、戊二酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽(hemisulfate)、庚酸鹽、己酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽(羥乙基磺酸鹽)、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、DL-扁桃酸鹽、均三甲苯磺酸鹽(mesitylenesulfonate)、甲磺酸鹽、亞萘磺酸鹽、煙酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽(pectinate)、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、膦酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、焦谷氨酸鹽、琥珀酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、L-酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、谷氨酸鹽、碳酸氫鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽(p-甲苯磺酸鹽)和十一酸鹽。而且，本發(fā)明化合物中的堿性基團(tuán)可以被以下基團(tuán)季銨化甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸鹽；癸基、十二烷基、十四烷基和甾基氯化物、溴化物、碘化物；以及芐基和苯乙基溴化物?？梢杂糜谛纬芍委熆山邮艿募映甥}的酸的實(shí)例包括無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸，以及有機(jī)酸如草酸、馬來酸、琥珀酸和檸檬酸。也可以通過化合物與堿金屬或堿土離子的配位作用來形成鹽。因此，本發(fā)明包括了本文公開的化合物的鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽和鈣鹽等。
堿加成鹽可以在化合物的最后分離和純化過程中通過使羧基與合適的堿(如金屬陽(yáng)離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽)或與氨或有機(jī)伯胺、仲胺或叔胺進(jìn)行反應(yīng)來制備。治療可接受的鹽的陽(yáng)離子包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂和鋁，以及無毒的季胺陽(yáng)離子如銨、四甲銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、二環(huán)己胺、普魯卡因、二芐胺、N，N-二芐基苯乙胺、1-二苯羥甲胺和N，N’-二芐乙烯二胺。其他用于形成堿加成鹽的代表性的有機(jī)胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
雖然本發(fā)明的化合物可能作為原狀化學(xué)品給藥，但是也可能作為藥物制劑提供它們。因此，本文提供的是包含一種或多種本發(fā)明的某些化合物，或其一種或多種藥學(xué)可接受的鹽、酯、前藥、酰胺或溶劑合物，以及它們的一種或多種藥學(xué)可接受的載體和任選的一種或多種其他治療成分的藥物制劑。在與所述制劑的其他成分相容和對(duì)其接受者無害的意義上，所述載體必須是“可接受的”。合適的制劑依賴于選擇的給藥路徑。任何熟知的技術(shù)、載體和賦形劑均可作為本領(lǐng)域合適和理解的進(jìn)行使用；如在Remington′sPharmaceutical Sciences中。本文公開的藥物組合物可以按本領(lǐng)域已知的任何方式生產(chǎn)，如通過常規(guī)的混合、溶解、?；?、制造錠劑(dragee-making)、研細(xì)、乳化、膠囊化、包埋或壓縮(compression)過程。
所述制劑包括適于口服、腸胃外(包括皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)和髓內(nèi))、腹膜內(nèi)、經(jīng)粘膜、經(jīng)皮、直腸和局部(包括皮膚、含服、舌下和眼內(nèi))給藥的那些，盡管最合適的路徑可依賴于例如，接受者的疾患和病癥。所述制劑可以方便地以單位劑量形式呈現(xiàn)并可以通過藥學(xué)領(lǐng)域任何公知的方法制備。通常，這些方法包括使本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、酯、酰胺、前藥或溶劑合物(“活性成分”)與組成一種或多種助劑的載體締合的步驟。通常，所述制劑通過以下方法來制備使活性成分和液體載體或細(xì)分的固體載體或兩者同時(shí)均勻且密切地締合，然后，如果需要，將所述產(chǎn)品制成需要的制劑。
適于口服給藥的本發(fā)明的制劑可以制成離散的單位，如各自含有預(yù)定量的活性成分的膠囊劑、扁囊劑或片劑；如散劑或顆粒劑；如在含水液體或非水液體中的溶液劑或混懸劑；或如水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。所述活性成分還可以制成推注劑(bolus)、藥糖劑(electuary)或糊劑。
可口服使用的藥物制劑包括片劑、明膠制備的推入配合式(push-fit)膠囊劑和由明膠和增塑劑(如甘油或山梨醇)制備的密封的軟膠囊?？梢匀芜x地與一種或多種助劑通過壓縮或模塑來制備片劑。壓制片劑可以通過在合適的機(jī)器中壓縮任選地與粘結(jié)劑、惰性稀釋劑或潤(rùn)滑劑、表面活性劑或分散劑混合的，自由流動(dòng)形式(如粉末或顆粒)的活性成分來制備。模制片可以通過在合適的機(jī)器中模塑用惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的粉末狀化合物的混合物來制備。所述片劑可以任選地被包衣或刻痕(scored)并可以被配制以提供其中活性成分的緩釋或控釋。所有口服給藥的制劑應(yīng)在劑量上適于這樣的給藥。所述推入配合式膠囊劑可以包含活性成分與填充劑(如乳糖)、粘結(jié)劑(如淀粉)和/或潤(rùn)滑劑(如滑石或硬脂酸鎂)，以及和任選的穩(wěn)定劑的混合物。在軟膠囊劑中，活性化合物可以溶解或懸浮于合適的液體中(如脂肪油、液體石蠟或液態(tài)聚乙二醇)。此外，可以加入穩(wěn)定劑。對(duì)錠芯提供合適的包衣。為此，可以使用濃縮糖溶液，其可以任選地包含阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波普凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液以及合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物?？梢韵蚱瑒┗蝈V劑包衣中加入染料或色素以鑒別或表征活性化合物劑量的不同組合。
所述化合物可被配制成通過注射(如通過快速推注或連續(xù)輸注)進(jìn)行腸胃外給藥。用于注射的制劑可以與添加的防腐劑制成單位劑量形式，如在安瓿中或在多劑量容器中。所述組合物可以采用如在油性或水性載體(vehicle)中的混懸劑、溶液劑或乳劑形式，并可以包含配制劑如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。所述制劑可以制成在單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并可以按粉末形式或冷凍干燥(凍干)狀態(tài)儲(chǔ)存，其只需要直接在使用前加入無菌液體載體，如鹽水或無菌無熱原水。即用注射溶液劑和混懸劑可以從上文所述種類的無菌散劑、顆粒劑和片劑制備。
用于腸胃外給藥的制劑包括活性化合物的含水和非含水(油性)無菌注射溶液劑，其可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和賦予所述制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及含水和非含水無菌混懸劑，其可以包括助懸劑和增稠劑。合適的親脂溶劑或載體包括脂肪油(如芝麻油)、或合成的脂肪酸酯(如油酸乙酯或甘油三酯)、或脂質(zhì)體。含水注射混懸劑可以包含增加所述混懸劑粘度的物質(zhì)，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或葡聚糖。任選地，所述混懸劑也可以包含合適的穩(wěn)定劑或增加化合物溶解度以允許制備高濃度溶液的試劑。
除前述制劑以外，所述化合物還可以配制為儲(chǔ)庫(kù)制劑(depotpreparation)。這樣的長(zhǎng)效制劑可以通過植入(如皮下或肌內(nèi))或通過肌內(nèi)注射給藥。因此，例如，所述化合物可以同合適的聚合材料或疏水材料(例如作為可接受的油中的乳劑)或離子交換樹脂進(jìn)行配制，或可以配制為微溶性衍生物，如作為微溶性鹽。
對(duì)于含服或舌下給藥，所述組合物可以采取以常規(guī)方式配制的片劑、錠劑、軟錠劑或凝膠劑的形式。這樣的組合物可以包含在調(diào)味基質(zhì)(flavoredbasis)(如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中的活性成分。
所述化合物也可被配制成直腸組合物，比如，例如包含常規(guī)栓劑基質(zhì)的栓劑或滯留型灌腸劑，所述常規(guī)栓劑基質(zhì)如可可脂、聚乙二醇或其他甘油酯。
本發(fā)明的某些化合物可以局部給藥，即通過非全身給藥。這包括本發(fā)明的化合物外部應(yīng)用至表皮或口腔以及這樣的化合物滴注至耳、眼和鼻，以便所述化合物不會(huì)明顯進(jìn)入血流。相反，全身給藥指口服、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)和肌內(nèi)給藥。
適于局部給藥的制劑包括適用于穿透皮膚到達(dá)炎癥位點(diǎn)的液體或半液體制劑，如凝膠劑、擦劑、洗劑、乳膏劑、軟膏劑或糊劑，以及適于給藥至眼、耳或鼻的滴劑。用于局部給藥的活性成分可以占所述制劑的，例如0.001％至10％w/w(按重量計(jì))。在某些實(shí)施方案中，活性成分可以占多達(dá)10％w/w。在其他實(shí)施方案中，其可以占少于5％w/w。在某些實(shí)施方案中，所述活性成分可以占2％w/w至5％w/w。在其他實(shí)施方案中，其可以占所述制劑的0.1％至1％w/w。
用于局部或經(jīng)皮給藥的凝膠劑通?？梢园瑩]發(fā)性溶劑、不揮發(fā)性溶劑和水的混合物。在某些實(shí)施方案中，緩沖溶劑系統(tǒng)的揮發(fā)性溶劑組分可以包含低級(jí)(C1-C6)烷基醇、低級(jí)烷基二醇和低級(jí)二醇聚合物。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述揮發(fā)性溶劑是乙醇。認(rèn)為揮發(fā)性溶劑組分充當(dāng)滲透促進(jìn)劑，且當(dāng)其蒸發(fā)時(shí)也在皮膚上產(chǎn)生冷卻效應(yīng)。所述緩沖溶劑系統(tǒng)的非揮發(fā)性溶劑的部分選自低級(jí)烷撐二醇和低級(jí)二醇聚合物。在某些實(shí)施方案中，使用丙二醇。所述非揮發(fā)性溶劑減緩所述揮發(fā)性溶劑的蒸發(fā)并降低所述緩沖溶劑系統(tǒng)的蒸氣壓。該非揮發(fā)性溶劑組分的量和所述揮發(fā)性溶劑的量一樣，由使用的藥物化合物或藥物確定。當(dāng)所述系統(tǒng)中的非揮發(fā)性溶劑太少時(shí)，所述藥物化合物可能由于揮發(fā)性溶劑的蒸發(fā)而結(jié)晶，而過量時(shí)則可能由于藥物從溶劑混合物的過少釋放而導(dǎo)致生物利用度不足。所述緩沖溶劑系統(tǒng)的緩沖組分可以選自本領(lǐng)域常用的任何緩沖液；在某些實(shí)施方案中，使用水。成分的通常比例為約20％的非揮發(fā)性溶劑、約40％的揮發(fā)性溶劑和約40％的水。所述局部組合物中但加入一些任選的成分。這些包括但不限于螯合劑和膠凝劑。合適的膠凝劑可以包括但不限于，半合成的纖維素衍生物(如羥丙基甲基纖維素)和合成的聚合物，以及化妝品(cosmeticagents)。
洗劑包括那些適合施用至皮膚或眼的。眼洗劑可以包含任選地含有殺菌劑的無菌水溶液，并可以通過與制備滴劑類似的方法來制備。施用至皮膚的洗液或擦劑還可包含加快干燥和冷卻皮膚的試劑(如乙醇或丙酮)和/或增濕劑(如甘油)或油(如蓖麻油或花生油)。
乳膏劑、軟膏劑或糊劑是外用的活性成分的半固體制劑。它們可以借助于合適的機(jī)器，將單獨(dú)或在含水或非含水流體的溶液或懸浮液中的細(xì)分的或粉末形式的活性成分與油脂性或非油脂性基質(zhì)混合制得。所述基質(zhì)可以包含烴如硬、軟或液體石蠟、甘油、蜂蠟、金屬皂；膠漿劑；天然來源如杏仁、玉米、花生、蓖麻或橄欖的油；羊毛脂或它們的衍生物，或脂肪酸(如硬脂酸或油酸)以及醇(如丙二醇)或大粒凝膠。所述制劑可以摻入任何合適的表面活性劑如陰離子、陽(yáng)離子或非離子型表面活性劑，如脫水山梨糖醇酯或其聚氧化乙烯衍生物。還可以包括助懸劑如天然樹膠、纖維素衍生物或無機(jī)材料(如硅酸鹽質(zhì)硅石(silicaceous silicas))，以及其他成分(如羊毛脂)。
滴劑可以包含無菌水性或油性溶液或懸浮液，并可通過將活性成分溶解在合適的殺菌劑和/或殺真菌劑和/或任何其他合適的防腐劑(且在某些實(shí)施方案中，包括表面活性劑)的水性溶液中來制備。然后所得溶液可通過過濾來澄清，轉(zhuǎn)移至合適的容器，然后將所述容器密封并通過高壓滅菌或在98-100℃下保持半小時(shí)來滅菌?？蛇x地，所述溶液可以通過過濾滅菌并通過無菌技術(shù)轉(zhuǎn)移至容器。適合包括在滴劑中的殺菌劑和殺真菌劑的實(shí)例是硝酸苯汞或乙酸苯汞(0.002％)、苯扎氯銨(0.01％)和乙酸氯己啶(0.01％)。制備油性溶液的合適溶劑包括甘油、稀釋的醇和丙二醇。
用于口中局部給藥(如含服或舌下)的制劑包括包含在調(diào)味基質(zhì)(如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中的活性成分的錠劑，以及包含在調(diào)味基質(zhì)(如凝膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠)中的活性成分的軟錠劑。
對(duì)于通過吸入給藥，可方便地從吹入器、噴霧加壓包(nebulizerpressurized pack)或遞送噴霧劑的其他方便的方式遞送化合物。加壓包可包含合適的推進(jìn)劑，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適氣體。就加壓氣溶膠而言，劑量單位可以通過提供閥以遞送計(jì)量的量來確定?？蛇x地，對(duì)于通過吸入或吹入的給藥，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以采取干粉組合物的形式，例如所述化合物和合適的粉末基質(zhì)(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。所述粉末組合物可以制成在例如，膠囊劑、彈射劑(cartridge)、明膠劑或泡罩包(blister pack)中的單位劑量形式，所述粉末可以借助于吸入器或吹入器進(jìn)行給藥。
優(yōu)選的單位劑量制劑是包含如下文所述的活性成分的有效劑量或其適當(dāng)部分的制劑。
應(yīng)理解，除上文特別提到的成分外，上文描述的制劑可以包括與討論的制劑類型有關(guān)的本領(lǐng)域其他常規(guī)試劑，例如適合口服給藥的制劑可以包括矯味劑。
可以通過口服或經(jīng)注射以每天0.1至500mg/kg的劑量給藥化合物。用于成人的劑量范圍通常是每天5mg至2g。以離散單位提供的片劑或其他成品形式可以方便地包含在這樣的劑量下有效的一種或多種化合物的量或作為其多倍，例如包含5mg至500mg的單位，通常約10mg至200mg。
可以與載體材料組合以生成單一劑量形式的活性成分的量會(huì)根據(jù)受治療的宿主和給藥的特定模式而不同。
可按多種模式給藥所述化合物，例如口服、局部給藥或通過注射。向患者給藥的化合物的精確量會(huì)由主治醫(yī)生負(fù)責(zé)。任何特定患者的具體劑量水平會(huì)取決于多種因素，包括使用的具體化合物的活性、年齡、體重、體質(zhì)、性別、飲食、給藥時(shí)間、給藥路徑、排泄速率、藥物組合、所治療的精確病癥，以及所治療的適應(yīng)證或疾患的嚴(yán)重性。同樣，給藥路徑可以根據(jù)疾患和其嚴(yán)重性而變化。
在某些情況下，將至少一種本文描述的化合物(或其藥學(xué)可接受的鹽、酯或前藥)與另一治療劑組合給藥會(huì)是合適的。僅作為實(shí)例，如果接受一種本文化合物的患者出現(xiàn)的副反應(yīng)之一是高血壓，則將抗高血壓劑和最初的治療劑組合給藥會(huì)是合適的?；蛘撸瑑H作為示例，可以通過給藥輔藥來增強(qiáng)本文所述化合物之一的治療效果(即所述輔藥自身可能只有極小的治療益處，但其與另一治療劑組合可增強(qiáng)對(duì)患者的總治療效果)?；蛘?，僅作為示例，可以通過給藥一種本文所述的化合物和也具有治療益處的另一治療劑(其也包括治療方案)來增加患者體驗(yàn)的益處。僅作為示例，在包括給藥本文所述的化合物之一的糖尿病治療中，可通過同時(shí)向所述患者提供用于糖尿病的另一治療劑來得到增加的治療益處。在任何情況下，不論所治療的疾病、病癥或疾患如何，患者體驗(yàn)到的總益處可以為兩種治療劑的簡(jiǎn)單加合，或者患者可體驗(yàn)到協(xié)同的益處。
在任何情況下，多種治療劑(其中至少一種是本發(fā)明的化合物)可以按任何順序給藥或甚至同時(shí)給藥。如果同時(shí)給藥，所述多種治療劑可按單個(gè)統(tǒng)一的形式或以多重形式提供(僅作為示例，作為一個(gè)藥丸或兩個(gè)單獨(dú)的藥丸)。治療劑中的一種可以按多重劑量給藥，或者二者均可以按多重劑量給藥。如果不是同時(shí)給藥，所述多個(gè)劑量之間的定時(shí)可以是幾分鐘至四周范圍內(nèi)的任意持續(xù)時(shí)間。
因此，在另一方面，本發(fā)明提供在需要這樣的治療的人類或動(dòng)物個(gè)體中治療Rho激酶介導(dǎo)的病癥的方法，所述方法包括向所述個(gè)體組合給藥有效減輕或阻止個(gè)體中的所述病癥的量的本發(fā)明化合物和至少一種本領(lǐng)域已知的用于治療所述病癥的其他試劑。在一個(gè)相關(guān)方面，本發(fā)明提供包含至少一種本發(fā)明的化合物和一種或多種用于治療Rho激酶介導(dǎo)的病癥的其他試劑的組合的治療組合物。
本發(fā)明的化合物可用于治療Rho激酶介導(dǎo)的疾病、病癥和疾患。在某些實(shí)施方案中，所述化合物可用于治療急性和慢性疼痛和炎癥。本發(fā)明的化合物可用于治療患者的神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛或炎性痛如反射交感性營(yíng)養(yǎng)不良/灼性神經(jīng)痛(神經(jīng)損傷)、周圍神經(jīng)病(包括糖尿病性神經(jīng)病變)、頑固性癌痛、復(fù)雜的區(qū)域性疼痛綜合征和壓迫性神經(jīng)病(腕管綜合征(carpel tunnel syndrome))。所述化合物也可用于治療急性帶狀皰疹(herpes zoster)(帶狀皰疹(shingles))伴隨的疼痛、皰疹后神經(jīng)痛(PHN)和相關(guān)的疼痛綜合征如眼痛。所述化合物還可用作治療疼痛的鎮(zhèn)痛藥如手術(shù)鎮(zhèn)痛藥，或者作為發(fā)熱治療中的解熱藥。疼痛適應(yīng)證包括但不限于各種外科手術(shù)的術(shù)后痛(包括心臟術(shù)后痛)、牙痛/拔牙、癌癥引起的疼痛、肌肉痛、乳腺痛、皮膚損傷引起的疼痛、下腰痛、各種病因?qū)W的頭痛(包括偏頭痛)等。所述化合物還可用于治療疼痛相關(guān)的病癥如觸覺異常性疼痛和痛覺過敏。所述疼痛可以是體因性的(感受傷害的或神經(jīng)性的)、急性和/或慢性的。本發(fā)明的Rho激酶抑制劑還可用于其中會(huì)傳統(tǒng)地給藥NSAID、嗎啡或芬太尼阿片制劑(fentanyl opiates)和/或其他阿片類鎮(zhèn)痛藥的疾患。
此外，本發(fā)明化合物可用于治療或預(yù)防需要延長(zhǎng)的阿片類鎮(zhèn)痛藥的患者的阿片耐受性，以及攝入苯二氮

類的患者的苯二氮

耐受性，及其他成癮行為，如尼古丁成癮、酒精中毒和進(jìn)食障礙。此外，本發(fā)明的化合物和方法可用于治療或預(yù)防藥物戒斷癥狀，例如治療或預(yù)防阿片、酒精或煙成癮的戒斷癥狀。
此外，本發(fā)明的化合物可用于治療胰島素抵抗和通常與放大的炎癥信號(hào)相關(guān)的其他代謝性疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化。
本發(fā)明包括使用新的選擇性Rho激酶抑制劑治療或預(yù)防呼吸疾病或疾患的治療方法，其包括在醫(yī)學(xué)上用于預(yù)防和治療呼吸疾病或疾患的治療方法，所述呼吸疾病或疾患包括哮喘疾患，包括變應(yīng)原誘發(fā)的哮喘、運(yùn)動(dòng)誘發(fā)的哮喘、污染誘發(fā)的哮喘、寒冷誘發(fā)的哮喘和病毒誘發(fā)的哮喘；哮喘相關(guān)疾病，如氣道高反應(yīng)性和小氣道疾?。宦宰枞苑尾?，包括正常氣流(normal airflow)的慢性支氣管炎、氣道阻塞的慢性支氣管炎(慢性阻塞性支氣管炎)、肺氣腫、哮喘性支氣管炎和大皰?。灰约吧婕把装Y的其他肺病，包括細(xì)支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、囊性纖維化病、飼鴿者病(pigeon fancier’sdisease)、農(nóng)民肺、急性呼吸窘迫綜合征、肺炎、局限性肺炎、誤吸或吸入性損傷、肺脂肪栓塞、肺酸中毒炎癥、急性肺水腫、急性高山病、急性肺動(dòng)脈高血壓、新生兒的持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓、圍產(chǎn)期吸入綜合征、肺透明膜病、急性肺血栓栓塞癥、肝素-魚精蛋白反應(yīng)、膿毒癥、哮喘持續(xù)狀態(tài)、缺氧、呼吸困難、呼吸過度、充氣過度、低氧血和咳嗽。此外，本文公開的化合物會(huì)用于治療變應(yīng)性病癥如遲發(fā)型超敏反應(yīng)、變應(yīng)性接觸性皮炎、變應(yīng)性鼻炎和慢性鼻竇炎。
本發(fā)明化合物可以治療的其他病癥或疾患包括炎癥和相關(guān)病癥。本發(fā)明的化合物可用作抗炎劑，其具有有害副反應(yīng)顯著更低的額外益處。所述化合物可以用于治療關(guān)節(jié)炎，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎關(guān)節(jié)病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、少年關(guān)節(jié)炎、急性風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、腸病性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎(萊特爾綜合征)和化膿性關(guān)節(jié)炎，以及自身免疫疾病，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、溶血綜合征、自身免疫性肝炎、自身免疫性神經(jīng)病、白癜風(fēng)(自體免疫性甲狀腺炎)、橋本甲狀腺炎、貧血癥、肌炎(包括多肌炎)、脫發(fā)、肺出血腎炎綜合征(Goodpasture′ssyndrome)、垂體炎(hypophytis)和肺纖維化。
所述化合物也可以用于治療骨質(zhì)疏松癥和其他相關(guān)骨疾(bonedisorder)。
這些化合物也可以用于治療胃腸疾患，如反流性食管炎、痢疾、炎性腸病、局限性腸炎、胃炎、腸易激綜合征、格雷夫斯病(甲狀腺機(jī)能亢進(jìn))、壞死性小腸結(jié)腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎。所述化合物也可以用于治療肺炎癥，如與病毒感染和囊性纖維化病有關(guān)的肺炎癥。
此外，本發(fā)明的化合物還可單獨(dú)或與常規(guī)免疫調(diào)節(jié)藥組合用于器官移植患者。在所述患者中要被治療的疾患的實(shí)例包括移植物抗宿主反應(yīng)(即移植物抗宿主病)、同種異體移植物排斥(例如急性同種異體移植物排斥和慢性同種異體移植物排斥)、移植再灌注損傷和早期移植排斥(如急性同種異體移植物排斥)。
又進(jìn)一步，本發(fā)明化合物可用于治療瘙癢癥和白癜風(fēng)(vitaligo)。
本發(fā)明的化合物還可用于治療疾病中的組織損傷，所述疾病如血管疾病、偏頭痛、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周圍炎、甲狀腺炎、再生障礙性貧血、霍奇金病、硬皮病(sclerodoma)、風(fēng)濕熱、I型糖尿病、肌神經(jīng)接點(diǎn)疾病(包括重癥肌無力)、白質(zhì)病(包括多發(fā)性硬化)、結(jié)節(jié)病、腎炎、腎病綜合征、朗格漢斯細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥、腎小球腎炎、再灌注損傷、胰腺炎、間質(zhì)性膀胱炎、貝赫切特綜合征、多肌炎、牙齦炎、牙周炎(periodontis)、超敏反應(yīng)、損傷后出現(xiàn)的腫脹、缺血(包括心肌缺血、心血管缺血和心臟停搏繼發(fā)的缺血)、肝硬化、感染性休克、內(nèi)毒素性休克、葛蘭氏陰性膿毒癥、中毒性休克綜合征、中風(fēng)、缺血再灌注損傷、多臟器功能障礙、再狹窄(包括冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)后的再狹窄)等。
本發(fā)明的化合物還可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)的某些疾病和病癥。其中Rho激酶抑制可能有效的中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥包括皮質(zhì)性癡呆包括阿爾茨海默病和輕度認(rèn)知障礙(MCI)、中風(fēng)引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷、缺血包括腦缺血(病灶缺血、血栓形成的中風(fēng)和全心缺血(例如繼發(fā)性心臟停搏)和創(chuàng)傷。其中Rho激酶抑制可能有效的神經(jīng)變性病癥包括病癥中的神經(jīng)變性或神經(jīng)壞死，所述病癥例如缺氧、低血糖癥、癲癇和以下情況中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)創(chuàng)傷(如脊髓和顱腦損傷)、高壓氧驚厥和中毒、癡呆(例如早老年性癡呆)，以及艾滋病相關(guān)的癡呆、惡病質(zhì)、西登哈姆舞蹈癥、亨廷頓跳舞病、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化(ALS)、多發(fā)性硬化、科爾薩科夫綜合征和涉及腦血管病癥的癡愚。其中Rho激酶抑制可能被證明有效的更多病癥包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)病(包括，例如IgA神經(jīng)病、膜神經(jīng)病和特發(fā)性神經(jīng)病)、慢性炎性脫髓鞘性多神經(jīng)病、橫貫性脊髓炎、Gullain-Barre病、腦炎和神經(jīng)系統(tǒng)癌癥。其中Rho激酶抑制可能發(fā)現(xiàn)有效的CNS功能紊亂包括睡眠障礙、精神分裂癥、抑郁癥、與月經(jīng)前期綜合征(PMS)有關(guān)的抑郁或其他癥狀，以及焦慮。
此外，本發(fā)明化合物還可用于抑制Rho激酶活性以緩解全身性病癥，所述全身性病癥包括由多種試劑誘導(dǎo)的膿毒性和/或中毒性失血性休克；包括作為與細(xì)胞因子如TNF、IL-1和IL-2的治療；以及包括作為移植治療中短期免疫抑制的輔藥。
可通過本發(fā)明的化合物治療的其他病癥或疾患包括癌癥的預(yù)防或治療，所述癌癥如結(jié)腸直腸癌和乳腺、肺、前列腺、膀胱、子宮頸和皮膚的癌癥。本發(fā)明的化合物可以用于治療和預(yù)防的瘤形成，包括但不限于腦癌、骨癌、白血病、淋巴瘤、上皮細(xì)胞衍生的瘤形成(上皮癌)(如基底細(xì)胞癌)、腺癌、胃腸癌如唇癌、口腔癌、食管癌、小腸癌和胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、肺癌、乳腺癌和皮膚癌(如扁平細(xì)胞和基底細(xì)胞癌)、前列腺癌、腎細(xì)胞癌和其他已知的影響整個(gè)機(jī)體上皮細(xì)胞的癌癥。所述瘤形成可以選自胃腸癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮頸癌、肺癌、乳腺癌和皮膚癌(如扁平細(xì)胞和基底細(xì)胞癌)。本發(fā)明的化合物和方法也可以用于治療伴隨放射治療出現(xiàn)的纖維化。本發(fā)明的化合物和方法可以用于治療具有腺瘤性息肉的個(gè)體，包含那些具有家族性腺瘤性息肉病(FAP)的個(gè)體。此外，本發(fā)明的化合物和方法可以用于預(yù)防息肉在具有FAP風(fēng)險(xiǎn)的患者中形成。
本發(fā)明的化合物可以用于治療眼病，如干眼、青光眼、角膜新生血管化、視神經(jīng)炎、干燥綜合征(Sjogren’s syndrome)、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)變性、眼缺血、視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜病變、葡萄膜炎、眼畏光(ocular photophobia)和治療與眼組織急性損傷有關(guān)的炎癥和疼痛。特別地，所述化合物可以用于治療青光眼性視網(wǎng)膜病變和/或糖尿病性視網(wǎng)膜病變。所述化合物也可以用于治療眼科手術(shù)(如白內(nèi)障手術(shù)和屈光手術(shù))的術(shù)后炎癥或疼痛。
本發(fā)明的化合物可用于治療經(jīng)期痙攣、痛經(jīng)、早產(chǎn)、子宮內(nèi)膜異位癥、腱炎、滑囊炎、皮膚相關(guān)疾患(如銀屑病、濕疹、燒傷、曬斑、皮炎)、胰腺炎、肝炎、扁平苔蘚、鞏膜炎、硬皮病、皮肌炎等?？梢允褂帽景l(fā)明的化合物的其他疾患包括糖尿病(I型或II型)、心肌炎、病理性血管發(fā)生和主動(dòng)脈瘤。
此外，本發(fā)明的化合物可用于治療心血管疾病，如咽峽炎、冠狀動(dòng)脈血管痙攣、心肌梗死、冠脈缺血、充血性心力衰竭、心臟同種異體移植物血管病變、靜脈移植病和血管再狹窄、缺血再灌注損傷、腦動(dòng)脈血管痙攣、中風(fēng)、腦缺血、原發(fā)性高血壓、肺動(dòng)脈高壓、腎性高血壓和其他繼發(fā)性高血壓病癥、動(dòng)脈粥樣硬化和勃起功能障礙。
本發(fā)明的化合物也可部分或完全地用于共同治療，代替其他常規(guī)抗炎療法，如與甾族化合物、NSAID、COX-2選擇性抑制劑、5-脂氧合酶抑制劑、LTB4拮抗劑和LTA4水解酶抑制劑用于共同治療。當(dāng)與抗菌劑或抗病毒劑組合治療時(shí)，本發(fā)明的化合物也可以用于預(yù)防組織損傷。
自hES細(xì)胞產(chǎn)生的分化細(xì)胞可用于治療退行性疾病，其癥狀是由缺失一些特定的細(xì)胞類型引起的。已從小鼠ES(mES)細(xì)胞產(chǎn)生特定類型的神經(jīng)元，并且類似的選擇性分化方法已應(yīng)用于hES細(xì)胞。然而，hES細(xì)胞在技術(shù)上比mES細(xì)胞難培養(yǎng)得多，顯示了有問題的性質(zhì)(如生長(zhǎng)緩慢和對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)白血病抑制因子(LIF)不敏感)。此外，hES細(xì)胞在細(xì)胞分離和離解后易受細(xì)胞凋亡攻擊。它們經(jīng)歷大量細(xì)胞死亡，特別是在完全離解后，離解的hES細(xì)胞的克隆率一般≤1％。因此，難以(如果不是不可能)在離解培養(yǎng)中使用hES細(xì)胞，所述離解培養(yǎng)對(duì)諸如基因轉(zhuǎn)移和分化誘導(dǎo)后的克隆分離的操作是重要的。細(xì)胞離解后人類胚胎干(hES)細(xì)胞的不良存活是研究的障礙，阻礙了如亞克隆的操作。
最近的證據(jù)表明添加Rho激酶的選擇性抑制劑可使hES細(xì)胞能在不利的培養(yǎng)條件如離解和懸浮下像mES細(xì)胞那樣生長(zhǎng)和分化。Rho激酶抑制已顯示顯著地減少離解誘導(dǎo)的凋亡、增加克隆率(從約1％至約27％)和促進(jìn)hES細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)移后的亞克隆。Rho激酶抑制賦予的克隆率的改善可對(duì)分離相對(duì)稀少的克隆(例如，用于同源重組的克隆)以及還對(duì)再克隆hES細(xì)胞以獲得一致的細(xì)胞質(zhì)量特別有利。此外，用Rho激酶的選擇性抑制劑處理的離解的hES細(xì)胞即使在無血清懸浮(SFEB)培養(yǎng)中也受保護(hù)使之免于凋亡，形成漂浮的聚集體，并存活和分化，如SFEB-培養(yǎng)的小鼠ES細(xì)胞的行為。
存在許多產(chǎn)生或衍生hES細(xì)胞的方法。例如，組織相容的單性生殖的人類胚胎干細(xì)胞(phESC)可衍生自人類單性生殖的胚泡。預(yù)期上文公開的Rho激酶抑制劑的效用和下文的方法會(huì)在任何hES細(xì)胞上適用，不考慮所述hES細(xì)胞的來源，其均顯示典型的hES細(xì)胞形態(tài)和/或性質(zhì)。
因此，本發(fā)明涵蓋本文公開的某些化合物和組合物的用途用于降低人類胚胎干細(xì)胞的凋亡；用于提高人類胚胎干細(xì)胞的存活；用于提高人類胚胎干細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)移后的克隆率；以及用于增加培養(yǎng)的人類胚胎干細(xì)胞的分化。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述防止人類胚胎干細(xì)胞凋亡和/或所述提高人類胚胎干細(xì)胞的存活發(fā)生在離解培養(yǎng)中，比如例如無血清懸浮(SFEB)培養(yǎng)。
除了用于人類治療，本發(fā)明的化合物和制劑也可用于寵物、外來動(dòng)物(exotic animal)和家畜(包括哺乳動(dòng)物、嚙齒目動(dòng)物等)的獸醫(yī)治療。更優(yōu)選的動(dòng)物包括馬、狗和貓。
制備化合物的通用合成方法 下述路線可用于實(shí)踐本發(fā)明。
路線1
實(shí)施例1-2可使用路線1中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線2
實(shí)施例3-12可使用路線2中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線3
實(shí)施例13-14可使用路線3中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線4
實(shí)施例15可使用路線4中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線5
實(shí)施例16可使用路線5中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線6
實(shí)施例17可使用路線6中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線7
實(shí)施例18-28可使用路線7中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線8
實(shí)施例29-31可使用路線8中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線9
實(shí)施例32-77可使用路線9中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線10
實(shí)施例78可使用路線10中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線11
實(shí)施例79-90可使用路線11中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
路線12
實(shí)施例92可使用路線12中闡述的下述通用合成操作進(jìn)行合成。
本發(fā)明通過下列實(shí)施例進(jìn)一步闡述。
實(shí)施例1
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基硼酸 在-78℃下15分鐘內(nèi)，向在4∶1 THF/甲苯中的2-溴-5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩(1g，3.8mmol)和三異丙基硼酸酯(0.85g，4.56mmol)的溶液中加入正丁基鋰(4.56mol，2.8mL在己烷中的1.6M溶液)。將該混合物逐漸升溫至室溫并攪拌30分鐘。通過加入鹽酸水溶液(2M)同時(shí)劇烈攪拌10分鐘終止反應(yīng)。用THF稀釋反應(yīng)混合物，然后加入固體NaCl(10g)。該混合物用EtOAc萃取，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，粗產(chǎn)物通過用10％甲醇(在二氯甲烷中)洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供0.73g(85％產(chǎn)率)灰白色固體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.99(d，1H)、7.87(d，1H)、7.39(dd，1H)、2.73(s，3H)。
步驟2
2-氯-4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶 向在3∶1THF/水中的5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基硼酸(0.3g，1.3mmol)和2，4-二氯嘧啶(0.2g，1.3mmol)的溶液加入Na2CO3的水溶液(1.6mL，2M)。將該混合物脫氣三次并回充氮?dú)猓缓笠淮涡约尤隤d(Ph3P)2Cl2(0.091g0.13mmol)。接著將反應(yīng)混合物加熱至70℃，保持2小時(shí)。LCMS確定反應(yīng)完成。將容器冷卻至室溫，并用乙酸乙酯(100mL)稀釋。有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，粗產(chǎn)物通過用在己烷中的0-50％乙酸乙酯洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供灰白色固體(0.22g，56％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(d，1H)、7.81-7.77(m，2H)、7.56(d，1H)、7.41(dd，1H)、2.77(s，3H)。
步驟3
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向在EtOH(3.4mL)中的2-氯-4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶的溶液加入在壓力管中的NH4OH(0.26mL，28％在水中)。密封該反應(yīng)容器，加熱至80℃過夜。將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取三次，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，通過用0-50％乙酸乙酯(在己烷中)洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供灰白色固體(0.085g，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.35(d，1H)、8.01-7.97(m，2H)、7.45(dd，1H)、6.98(d，1H)、6.80(s，br，2H)、2.65(s，3H)；LCMS(M+1)+278.93。
實(shí)施例2
4-(苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例1中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中苯并[b]噻吩-2-基硼酸替代了該程序步驟1中的5-氯苯并[b]噻吩-2-基硼酸。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.37(s，1H)、8.34(d，1H)、8.02-8.00(m，1H)、7.93-7.91(m，1)、7.47-7.40(m，2H)、7.35(d，1H)LCMS(M+1)+227.83。
實(shí)施例3
4-(3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基苯并呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮 向20mL螺口小瓶中充入1-(3-甲基苯并呋喃-2-基)乙酮(174mg，1.00mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(3mL)，然后將其置于100℃油浴中并攪拌16h，接著蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過硅膠層析法(用在己烷中的EtOAc洗脫)純化，得到作為淺黃色固體的產(chǎn)物(161mg，70％)。LCMS(M+1+)230.09。
步驟2
4-(3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺 向20mL螺口小瓶中充入(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基苯并呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮(153mg，0.667mmol)、鹽酸胍(191mg，2.00mmol)、K2CO3(277mg，2.00mmol)和2-甲氧基乙醇(3.3mL)，然后將其置于130℃油浴中，攪拌1.5h。濃縮反應(yīng)物，用H2O(10mL)調(diào)成漿，通過過濾收集所得固體物質(zhì)，用H2O(10mL)洗滌。將濾餅溶解于甲醇、過濾并蒸發(fā)得到作為灰白色固體的產(chǎn)物(125mg，83％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.34(d，1H)、7.71(m，1H)、7.60(m，1H)、7.41(m，1H)、7.31(m，1H)、7.00(d，1H)、6.72(bs，2H)、2.70(s，3H)。LCMS(M+1+)226.18。
實(shí)施例4
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例1中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中4-溴吡啶替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.71(d，2H)、7.77-7.73(m，2H)、7.45-7.43(m，2H)、7.35(dd，1H)、2.49(s，3H)LCMS(M+1)+259.38。
實(shí)施例5
3-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例1中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(按R.Robinson等人的J.Am.Chem.Soc.1956，78，1247中的描述制備)替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.22(s，1H)、8.31(d，1H)、8.12(d，2H)、7.99(d，1H)、7.85(s，2H)、7.40(d，1H)、7.2-7.15(m，1H)、2.41(s，3H)；LCMS(M+1)+300.63。
實(shí)施例6
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例1中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中4-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(按Org.Lett.2003，5，5023-5025中的描述制備)替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.96(s，1H)、8.33(d，1H)、8.06(d，2H)、7.94(d，1H)、7.60-7.59(m，1H)、7.46(dd，1H)、7.19(d，1H)、6.51-6.50(m，1H)、2.40(s，3H)；LCMS(M+1)+300.64。
實(shí)施例7
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶-2-胺 步驟1
2-氯-4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶 向在3∶1THF/水中的5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基硼酸(0.3g，1.3mmol)和2-氯-4-碘吡啶(0.32g，1.3mmol)的溶液中加入Na2CO3的水溶液(1.6mL，2M)。將該混合物脫氣三次并回充氮?dú)?，然后一次性加入Pd(Ph3P)2Cl2(0.091g，0.13mmol)。攪拌該反應(yīng)混合物，加熱至70℃，保持2小時(shí)，直至LCMS確定反應(yīng)完成。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取三次，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。真空濃縮濾液，以提供粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物通過用0-50％乙酸乙酯(在己烷中)洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供黃色固體(0.31g，79％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+293.76。
步驟2
4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶-2-胺 向在THF中的2-氯-4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶(0.05g，0.17mmol)的溶液中加入Pd2(dba)3(4.9mg，0.009mmol)和聯(lián)苯基-2-基二環(huán)己基膦(7.1mg，0.02mmol)。將該反應(yīng)混合物脫氣三次并回充氮?dú)?。一次性加入LHMDS(0.22mmol，0.22mL的1M THF溶液)。攪拌該混合物，加熱至65℃，保持4小時(shí)。冷卻該反應(yīng)混合物，用水稀釋。用乙酸乙酯(25mL)將其萃取三次，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，通過用30-100％乙腈(在水中，存在0.1％TFA)洗脫的反相C-18柱層析法純化，以提供灰白色固體(0.006g，13％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+274.87。
實(shí)施例8
6-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-4-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例7中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中4，6-二氯嘧啶替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.50(s，1H)、8.03(d，1H)、7.98(d，1H)、7.59(s，2H)、7.47(dd，1H)、6.90(s，1H)、2.62(s，3H)LCMS(M+1)+278.02。
實(shí)施例9
6-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2，4-二胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例7中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中6-氯嘧啶-2，4-二胺替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。LCMS(M+1)+291.09。
實(shí)施例10
5-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)-1H-吲唑 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例7中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中5-溴-1H-吲唑替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.17(s，1H)、7.99(d，1H)、7.95(s，1H)、7.86(d，2H)、7.67(d，1H)、7.53(dd，1H)、7.40(dd，1H)、2.42(s，3H)；LCMS(M+1)+298.96。
實(shí)施例11
3-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例7中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-溴吡啶-2-胺替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04-7.99(m，2H)、7.89(d，1H)、7.86(d，1H)、7.43(dd，1H)、7.05(dd，1H)、2.29(s，3H)LCMS(M+1)+275.01 實(shí)施例12
3-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)吡嗪-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例7中描述的4-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-溴吡嗪-2-胺替代了該程序步驟2中的2，4-二氯嘧啶。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04(d，2H)、7.92(d，1H)、7.88(d，1H)、7.84(d，1H)、7.40(dd，1H)、2.32(s，3H)LCMS(M+1)+275.99。
實(shí)施例13
4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
1-(4-溴苯硫基)丙-2-酮 向500mL圓底燒瓶中加入在Et2O(80mL)中的4-溴苯硫醇(9g，47.62mmol)、吡啶(20g，253.16mmol)的溶液。向該反應(yīng)混合物中分幾批加入1-溴丙-2-酮(6.9g，51.49mmol)，讓所得溶液在室溫下攪拌。然后過濾該混合物，用0.2N鹽酸(100mL)洗滌過濾的固體兩次。濾液經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，通過用10∶1石油醚/乙酸乙酯洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供10g(80％產(chǎn)率)作為白色固體的產(chǎn)物。
步驟2
5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩 向500mL圓底燒瓶中加入在含水H2SO4(250mL)中的1-(4-溴苯基硫代)丙-2-酮(12.2g，49.80mmol)。將所得溶液加熱至110℃，保持10小時(shí)。后處理將該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(100mL)萃取三次，用Na2CO3(20％水溶液)洗滌、經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮。粗產(chǎn)物通過用10∶1石油醚/乙酸乙酯洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供作為黃色油的8g(42％產(chǎn)率)的產(chǎn)物。
步驟3
1-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮 向250mL圓底燒瓶中加入在CS2(10mL)中的5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩(5g，21.81mmol)的溶液。向該混合物中加入AlCl3(5.9g，43.79mmol)，然后在0℃滴加乙酰氯(2.1g，26.48mmol)。攪拌所得溶液，讓其升溫至室溫，保持3小時(shí)。通過加入水/冰(20mL)終止該反應(yīng)，通過加入鹽酸(5％水溶液)將pH調(diào)節(jié)至4。所得混合物用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮。粗產(chǎn)物通過用10∶1石油醚/乙酸乙酯洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供3.5g(51％產(chǎn)率)作為白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟4
(E)-1-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮 向100mL圓底燒瓶中充入(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(3.5g，13.11mmol)和DMFDMA(10mL)。將所得溶液加熱至80℃，過夜。濃縮殘留物以提供2.5g(59％產(chǎn)率)作為黃色固體的產(chǎn)物。該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步 步驟5
4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向100mL圓底燒瓶中充入(E)-1-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮(1.5g，4.66mmol)、乙醇鈉(1.8g，26.47mmol)和鹽酸胍(1.5g，15.71mmol)和EtOH(50mL)的溶液。所得混合物回流36小時(shí)。過濾該混合物，并濃縮濾液以提供0.8g(54％產(chǎn)率)作為黃色粉末的標(biāo)題化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.36(d，1H)、8.10(s，1H)、7.95(d，1H)、7.57(d，1H)、6.98(d，1H)、6.79(s，2H)、2.66(s，3H)。LCMS(M+1)+321.00。
實(shí)施例14
4-(3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向10mL圓底燒瓶中充入按實(shí)施例13中的描述制備的4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.05g，0.15mmol)和THF(0.8mL)，然后冷卻至-78℃。在-78℃下，15分鐘內(nèi)向所得混合物滴加正丁基鋰(0.39mmol，0.24mL在己烷中的1.6M溶液)。后處理在-78℃下用甲醇終止該反應(yīng)，暖至室溫并濃縮。粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化(用在水(0.1％TFA)中的10-100％乙腈洗脫)，以提供0.02g(53％產(chǎn)率)淺黃色固體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.35(d，1H)、7.99-7.91(m，2H)、7.46-7.44(m，2H)、7.06(d，1H)、2.70(s，3H)。LCMS(M+1)+242.03。
實(shí)施例15
4-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
3-溴苯并[b]噻吩 向2L圓底燒瓶中充入苯并[b]噻吩(50g，373.13mmol)、CH2Cl2(800mL)和NaOAc(62g，756.10mmol)。在0℃，3小時(shí)內(nèi)向其中滴加Br2(34g，212.50mmol)和CH2Cl2(700mL)的溶液。所得溶液攪拌1小時(shí)，同時(shí)將溫度保持在0℃。通過TLC(EtOAc/石油醚＝1∶100)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理所得混合物用飽和NaHSO3(200mL)洗滌三次。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，并通過使用1∶1000EtOAc/石油醚的急驟層析法純化。得到70g(88％)作為無色油的產(chǎn)物。
步驟2
(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮 向1000mL圓底燒瓶中充入3-溴苯并[b]噻吩(30g，141.51mmol)和CS2(500mL)。分幾批向此溶液加入AlCl3(37.6g，284.85mmol)。在0℃伴隨攪拌，向上述溶液滴加乙酰氯(11.2g，143.59mmol)。所得溶液攪拌1.5小時(shí)，同時(shí)在冰浴中保持溫度為0℃。通過TLC(EtOAc/石油醚＝1∶5)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理然后通過加入1000g H2O/冰并攪拌10分鐘終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)。含水層用CH2Cl2(300mL)萃取三次。合并的有機(jī)層用鹽水(200mL)洗滌三次，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，以提供22g(62％)作為淡黃色固體的產(chǎn)物。
步驟3
4-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向500mL圓底燒瓶中充入1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(20g，78.74mmol)和DMFDMA(200mL)。所得溶液在回流下攪拌15小時(shí)。通過TLC(EtOAc/石油醚＝10∶1)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理冷卻反應(yīng)混合物，此時(shí)形成固體。過濾該固體并用己烷(100mL)洗滌三次。得到20g作為黃色固體的產(chǎn)物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
步驟4
4-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向500mL圓底燒瓶中充入1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮(20g，64.72mmol)、乙醇(300mL)和胍(9.5g，161.02mmol)。所得溶液在回流下攪拌1小時(shí)。通過TLC(EtOAc/石油醚＝1∶1)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理通過蒸發(fā)除去一半的溶劑，得到漿液。通過過濾分離固體，然后用80mL冷乙醇洗滌三次，以提供20.5g(94.6％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.45(d，1H)、8.09(d，1H)、7.88(m，1H)、7.64(m，1H)、7.60-7.54(m，2H)、6.90(s，2H)。LCMS(M+1)+306.10。
實(shí)施例16
4-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
1-(4-氯苯硫基)丁-2-酮 向100mL圓底燒瓶中充入4-氯苯硫醇(7g，48.28mmol)、K2CO3(115g，833.33mmol)和DMF(80mL)。在0℃下向該反應(yīng)混合物滴加1-溴丁-2-酮(7.4g，49.01mmol)。所得溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。后處理該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(200mL)稀釋、用水(400mL)洗滌三次、經(jīng)MgSO4干燥、過濾和濃縮。粗產(chǎn)物通過用EtOAc/PE(1/30)洗脫的硅膠層析法純化，以提供5g(48％產(chǎn)率)作為無色油的標(biāo)題化合物。
步驟2
5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩 向500mL三頸圓底燒瓶中充入在1-氯苯(300mL)中的多聚磷酸(50g)。向其中滴加1-(4-氯苯硫基)丁-2-酮(21g，97.67mmol)，同時(shí)回流。所得溶液回流過夜。冷卻反應(yīng)物，通過加入KOH(50％水溶液)將pH調(diào)節(jié)至7。該混合物用EtOAc(300mL)萃取三次，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過用EtOAc/PE(1/100)洗脫的硅膠柱純化，得到17g(89％產(chǎn)率)作為白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟3
1-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮 向500mL三頸圓底燒瓶中充入在CS2(125mL)中的5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩(8.5g，10.26mmol)和乙酰氯(800mg，10.26mmol)。在0℃下分幾批向該混合物中加入AlCl3(1.4g，10.37mmol)。讓所得溶液在0℃攪拌過夜。后處理將反應(yīng)物傾至200g冰水上，用二氯甲烷(50mL)萃取三次，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮。粗產(chǎn)物通過用1∶10EtOAc/PE洗脫的硅膠柱層析法純化。獲得1g(41％產(chǎn)率)白色固體標(biāo)題化合物。
步驟4
(E)-1-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮 在室溫下向100mL圓底燒瓶中充入1-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(1g，4.20mmol)和DMFDMA(10mL)。所得溶液回流1小時(shí)。后處理該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌三次，經(jīng)Na2SO4干燥。該反應(yīng)提供1.1g(92％產(chǎn)率)作為黃色固體的標(biāo)題化合物。該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。
步驟5
4-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向100mL圓底燒瓶中充入乙醇(20mL)。在室溫下分小份向其中加入Na(150mg，6.52mmol)，然后加入鹽酸胍(450mg，4.74mmol)。向所得混合物滴加在乙醇(40mL)中的(E)-1-(5-氯-3-乙基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮(1.2g，4.10mmol)。將該反應(yīng)混合物加熱至回流，持續(xù)3小時(shí)。后處理濃縮該混合物，中和，通過從乙醇重結(jié)晶純化，以提供1g(84％產(chǎn)率)作為白色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.37(d，1H)、8.01(dd，2H)、7.46(s，1H)、6.92(d，1H)、6.82(s，2H)、3.17(q，2H)、1.26(t，3H)LCMS(M+H)+290 實(shí)施例17
4-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
(4-氯苯基)(2，2-二乙氧基乙基)硫烷 向3L圓底燒瓶中充入4-氯苯硫醇(72.5g，500mol)、K2CO3(138g，1.00mol)和DMF(0.5L)。在0℃，3小時(shí)內(nèi)向此混合物中滴加在DMF(250mL)中的2-溴-1，1-二乙氧基乙烷(138g，0.60mol)的溶液。該反應(yīng)在0℃下攪拌2h。后處理該混合物用EtOAc(750mL)稀釋，用水(500mL)洗滌三次，經(jīng)MgSO4干燥。蒸餾(66-68℃，在17mm Hg)粗產(chǎn)物以除去過多的2-溴-1，1-二乙氧基乙烷。剩余的殘留物通過用1∶60EtOAc/PE洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供90g(55％產(chǎn)率)作為淺黃色油的標(biāo)題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ::7.24-7.35(m，4H)4.63-4.69(m，1H)、3.50-3.75(m，4H)、3.12(d，2H)、1.19-1.28(m，6H)。
步驟2
5-氯苯并[b]噻吩 向25mL圓底燒瓶中充入(4-氯苯基)(2，2-二乙氧基乙基)硫烷(500mg，1.92mmol)和氯苯(2mL)。在5分鐘內(nèi)將所得混合物滴加至沸騰的在氯苯(5mL)中的多聚磷酸(1g)。后處理將該混合物傾至冰水(25mL)上，用EtOAc(25mL)萃取三次，用鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。濃縮該混合物，通過用PE洗脫的SiO2急驟層析法純化，以提供290mg(90％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟3
3-溴-5-氯苯并[b]噻吩 在0℃下，5分鐘內(nèi)，將在二氯甲烷(5mL)中的Br2(160mg，1.00mmol)的溶液滴加至充有在二氯甲烷(10mL)中的5-氯苯并[b]噻吩(169mg，1.00mmol)和NaOAc(164mg，2.00mmol)的25mL圓底燒瓶中。在5分鐘內(nèi)將所得混合物滴加至沸騰的在氯苯(5mL)中的多聚磷酸(1g)中。后處理將該混合物傾入10％NaHSO3水溶液(20mL)中，用EtOAc(20mL)萃取三次，經(jīng)MgSO4干燥。濃縮該混合物，以提供0.247g(99％產(chǎn)率)作為淺黃色固體(mp84℃)的標(biāo)題化合物。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ::7.45-7.56(m，1H)、7.76-7.77(d，1H)、7.99-8.18(m，2H)。
步驟4
1-(3-溴-5-氯苯并[b]噻吩-2-基)乙酮 向25mL圓底燒瓶中充入3-溴-5-氯苯并[b]噻吩(148mg，0.60mmol)和CS2(5mL)。向所得混合物中加入AlCl3(0.153g，0.60mmol)，然后在0℃下滴加(10分鐘)在CS2(1mL)中的乙酰氯(55mg，0.70mmol)。所得溶液在0℃下攪拌3小時(shí)。后處理該混合物用水(5mL)洗滌，通過加入鹽酸(10％水溶液)將pH調(diào)節(jié)至4。所得混合物用EtOAc(10mL)萃取三次，并經(jīng)MgSO4干燥。濃縮該混合物，以提供0.17g(98％產(chǎn)率)作為淺黃色固體的標(biāo)題化合物。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ::8.17-8.20(d，1H)、7.93-7.94(d，1H)、7.66-7.70(dd，1H)、2.78(s，3H)。
步驟5
1-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮 向用氮?dú)獯迪吹?0mL圓底燒瓶中充入1-(3-溴-5-氯苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(1.2g，4.14mmol)、K2CO3(1.72g，12.45mmol)、苯基硼酸(600mg，4.92mmol)、EtOH(5mL)、Pd[(PPh3)]4(600mg，0.52mmol)和甲苯(20mL)。將該混合物回流4小時(shí)。后處理該混合物用水(5mL)洗滌，通過加入鹽酸(1M水溶液，10mL)將pH調(diào)節(jié)至7，用EtOAc(10mL)萃取三次，經(jīng)MgSO4干燥。濃縮粗材料(crude material)，通過用EtOAc/PE(1/25)洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供0.68g(57％產(chǎn)率)作為白色固體的標(biāo)題化合物。
步驟6
(E)-1-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮 在室溫下向25mL圓底燒瓶中充入1-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(240mg，0.84mmol)和DMFDMA(6mL)。所得溶液回流12h。后處理該混合物用EtOAc(10mL)稀釋，用水(50mL)洗滌三次，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，以提供0.25g(87％產(chǎn)率)的黃色固體。該粗產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。
步驟7
4-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 在室溫下將鹽酸胍(2.09g，21.88mmol)加至充有新鮮制備的在乙醇(50mL)中的EtONa(21.91mmol)的溶液的100mL圓底燒瓶中。將所得溶液回流0.5小時(shí)。冷卻并過濾該溶液以除去氯化鈉。向該濾液中加入(E)-1-(5-氯-3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)-3-(二甲氨基)丙-2-烯-1-酮(2.5g，7.31mmol)。所得溶液回流4小時(shí)，然后冷卻并過濾。過濾固體用冷乙醇(10mL)洗滌三次，以提供1.9g(80％產(chǎn)率)作為淺黃色固體的標(biāo)題化合物。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.13(d，1H)、8.02(d，1H)、7.42～7.61(m，6H)、7.23(d，1H)、6.84(s，2H)、5.96(d，1H)；LCMS(M+H)+338。
實(shí)施例18
4-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
4-甲基噻吩-2-甲醛 向氮?dú)庀碌?000mL圓底燒瓶中充入乙醚(500mL，無水)和nBuLi(163mL，325mmol)，然后冷卻至0℃，在15分鐘內(nèi)向其中滴加3-甲基噻吩(28.4mL，295mmol)。將此溶液在室溫?cái)嚢?hr。向該陰離子中滴加溶解在乙醚(100mL，無水)中的DMF(30mL，384mmol)的溶液。所得溶液在室溫下攪拌過夜。通過TLC(20％乙酸乙酯/己烷)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理將該混合物傾至冰上，用HCl(1N水溶液)、NaHCO3(1N水溶液)、鹽水洗滌，用MgSO4干燥，濃縮，在高真空下蒸餾。在92℃收集產(chǎn)物，具有30.6g的質(zhì)量，82％產(chǎn)率。NMR指示其含有17％的3-甲基異構(gòu)體。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.87(s，1H)、7.58(s，1H)、7.37(s，1H)、2.33(s，3H)。
步驟2
2，2-二乙氧基-N-((4-甲基噻吩-2-基)亞甲基)乙胺 向安裝有迪安-斯達(dá)克榻分水器的100mL圓底燒瓶中充入4-甲基噻吩-2-甲醛(5.93mL，55mmol)、2，2-二乙氧基乙胺(6.31g，50mmol)和甲苯(30mL)。將所得溶液回流過夜，在此時(shí)間中已收集理論量的水。在真空下將反應(yīng)物濃縮成油，其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。
步驟3
3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶 向500mL圓底燒瓶中充入多聚磷酸(216g)，加熱至120℃，在15分鐘內(nèi)緩慢向其中加入2，2-二乙氧基-N-((4-甲基噻吩-2-基)亞甲基)乙胺(55mmol，前一步的粗品)，同時(shí)劇烈攪拌。所得黑色混合物在此溫度下再攪拌20分鐘。通過TLC(40％乙酸乙酯/己烷，Rf＝0.4)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理該混合物傾至冰上(放熱)，用乙醚(2x200mL)萃取并棄去乙醚。用濃的NaOH/水的漿液小心地使剩下的水溶液變成堿性(強(qiáng)烈放熱)，同時(shí)在冰浴上冷卻。所得溶液用乙醚(4x500mL)萃取，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮并通過急驟層析法(30至80％乙酸乙酯/己烷，梯度洗脫)純化。這得到棕色油，其在在高真空下干燥過夜之后固化(1.95g，兩步達(dá)18％產(chǎn)率)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.12(s，1H)、8.53(d，1H)、7.61(d，1H)、7.33(s，1H)、2.46(s，3H)。LCMS(M+1)+150.11。
步驟4
1-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)乙酮 向在氮?dú)夥障碌?0mL圓底燒瓶中充入二異丙胺(1.90mL，13.4mmol)、THF(27mL，無水)，冷卻至0℃，用正丁基鋰(8.4mL，13.4mmol)處理。處于此溫度10分鐘后，一次性加入溶解在THF(7mL，無水)中的3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶(1.00g，6.7mmol)。將所得深綠色/黃色溶液攪拌1小時(shí)，然后用N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.38g，13.4mmol)處理并在室溫再攪拌2小時(shí)。通過TLC(40％乙酸乙酯己烷，Rf＝0.2)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理用NH4Cl(1N水溶液)終止反應(yīng)混合物的反應(yīng)，用乙醚(2x100mL)萃取，用MgSO4干燥，過濾并濃縮成漿液。通過過濾從該漿液中分離固體，用乙醚清洗并在高真空下干燥，得到作為褐色固體的產(chǎn)物(0.60g，47％產(chǎn)率)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.18(s，1H)、8.61(d，1H)、7.73(d，1H)、2.75(s，3H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1)+192.12。
步驟5
(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮 向10mL圓底燒瓶中充入1-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)乙酮(191mg，1.0mmol)和二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(3mL)。所得溶液在80℃油浴中攪拌過夜。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理將反應(yīng)物冷卻至室溫，形成固體，然后用乙醚稀釋并超聲得到漿液。通過過濾分離該固體，然后用乙醚清洗，并在高真空下干燥，得到作為亮黃色固體的產(chǎn)物(218mg，89％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.10(s，1H)、8.55(d，1H)、7.80(d，1H)、7.65(d，1H)、5.62(d，1H)、3.19(s，1H)、2.96(s，1H)、2.71(s，3H)。
步驟6
4-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)嘧啶-2-胺 向10mL圓底燒瓶中充入(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基噻吩并[2，3-c]吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮(123mg，0.5mmol)、鹽酸胍(143mg，1.5mmol)、K2CO3(207mg，1.5mmol)和2-甲氧基乙醇(2.0mL)。所得混合物在130℃油浴中加熱1.5hr。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理濃縮反應(yīng)物，用水稀釋，用2％甲醇/二氯甲烷(3x30mL)萃取，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并濃縮成漿液。通過過濾分離固體，用二氯甲烷清洗并在高真空下干燥，得到作為淡黃色粉末的標(biāo)題化合物(76mg，63％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.23(s，1H)、8.52(d，1H)、8.39(d，1H)、7.86(d，1H)、7.05(d，1H)、6.87(s，2H)、2.66(s，3H)。LCMS(M+1)+243.09。
實(shí)施例19
2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-羧酸 向用氮?dú)獯迪床⒒爻涞?0mL三頸圓底燒瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(1.2g，3.72mmol)和THF(10mL)的溶液。在-78℃下向其中滴加正丁基鋰(4.5mL，2.5M，在己烷中)。然后用CO2(固體)飽和該反應(yīng)混合物并在-78℃攪拌3小時(shí)。接著通過加入濃鹽酸(0.94mL，12M)終止反應(yīng)，濃縮并用EtOAc(20mL)萃取三次。粗產(chǎn)物在甲醇中重結(jié)晶，得到0.2g(20％產(chǎn)率)作為黃色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ::8.37(s，1H)、8.32(d，1H)、7.98(d，1H)、7.79(d，1H)、6.95(d，1H)、6.72(s，2H)、2.69(s，3H)LCMS(M+1)+286 實(shí)施例20
N-(3-乙酰氨基苯基)-2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中充入2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-羧酸(0.020g，0.07mmol)、N-(3-氨基苯基)乙酰胺(0.016g，0.1mmol)、TEA(0.020g，0.20mmol)、HATU(0.038g，0.1mmol)和DMF。讓所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。后處理該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌三次，經(jīng)Na2SO4干燥。粗材料通過用10-100％乙腈(在水中，存在0.1％TFA)洗脫的C18反相半制備性HPLC純化，提供20mg(69％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。LCMS(M+1)+417.91。
實(shí)施例21
2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基-N-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)苯并[b]噻吩-5-甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于N-(3-乙酰氨基苯基)-2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-甲酰胺進(jìn)行制備，其中4-(2-嗎啉代乙氧基)苯胺替代了實(shí)施例20中描述的N-(3-氨基苯基)乙酰胺。LCMS(M+1)+490.04。
實(shí)施例22
1-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-羰基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例20中描述的N-(3-乙酰氨基苯基)-2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-甲酰胺進(jìn)行制備，其中吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯替代了N-(3-氨基苯基)乙酰胺。LCMS(M+1)+453.98。
實(shí)施例23
(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)(3-氨基吡咯烷-1-基)甲酮 向5mL圓底燒瓶中充入在二氯甲烷(1mL)和三氟乙酸(1mL)中的1-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-羰基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(0.006g，0.013mmol)。所得混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。濃縮該混合物，將其溶解在甲醇(1mL)中。粗產(chǎn)物通過用10-100％乙腈(在水中，存在0.1％TFA)洗脫的反相C18柱層析法純化，提供3mg(38％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。LCMS(M+1)+353.95。
實(shí)施例24
4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向微波反應(yīng)容器中在THF(0.3mL)中的4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.01g，0.03mmol)的溶液加入Pd(PPh3)2Cl2(0.002g，0.003mmol)和CuI(0.001g，0.006mmol)。將該混合物脫氣并回充氮?dú)馊?。在室溫下一次性向該混合物中加入芐基溴化鋅(II)(0.0015g，0.12mL THF溶液，0.5M)。在150℃微波5分鐘。后處理該反應(yīng)物用水(2mL)稀釋，用乙酸乙酯(100mL)萃取三次，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。真空濃縮所述物質(zhì)以提供粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物通過用30-100％乙腈(在水中，存在0.1％TFA)洗脫的反相C18柱層析法純化。這提供3mg(29％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.80(d，1H)、7.77(d，1H)、7.35(dd，1H)、7.28-7.16(m，7H)、4.14(s，2H)、2.79(s，3H)；LCMS(M+1)+332.30。
實(shí)施例25
4-(5-(4-甲氧基芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(4-甲氧基芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(d，1H)、7.74(d，1H)、7.58(d，1H)、7.23(dd，1H)、7.14(d，2H)、6.98(d，1H)、6.84(d，2H)、5.21(s，2H)、4.07(s，2H)、3.78(s，3H)、2.68(s，3H)。LCMS(M+1)+362.61。
實(shí)施例26
4-(5-(3-甲氧基芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(3-甲氧基芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.34(d，1H)、7.74(d，1H)、7.60(d，1H)、7.23-7.20(m，3H)、6.99(d，1H)、6.81(d，1H)、6.76-6.75(m，1H)5.07(s，2H)、4.09(s，2H)、3.77(s，3H)、2.68(3H)。LCMS(M+1)+362.20。
實(shí)施例27
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯酚 標(biāo)題化合物類似于3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氧基)苯酚進(jìn)行制備，其中4-(5-(3-甲氧基芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺替代了實(shí)施例82中描述的4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.23(s，1H)、8.32(d，1H)、7.84(d，1H)、7.75(s，1H)、7.22(d，1H)、7.05(t，1H)、6.95(d，1H)、6.74(s，2H)、6.68(d，1H)、6.60(s，1H)、6.54(d，1H)、3.98(s，2H)、2.64(s，3H)。LCMS(M+1)+348.13。
實(shí)施例28
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯基乙酸酯 向20mL螺口小瓶中充入3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯酚(0.02g，0.057mmol，在實(shí)施例27中制備)、K2CO3(0.008g，0.057mmol)、DMF(1.1mL)和乙酸酐(0.006g，0.057mmol)。該反應(yīng)混合物然后在室溫下攪拌16h，通過LCMS監(jiān)控進(jìn)程。后處理該反應(yīng)混合物用EtOAc(3x50mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥和蒸發(fā)。粗材料通過用在己烷中的EtOAc洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(22mg，98％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(d，1H)、7.82-7.78(m，2H)、7.36(dd，1H)、7.28(d，1H)、7.10(t，1H)、6.72(d，1H)、6.65-6.60(m，2H)、4.06(s，2H)、2.80(s，3H)；LCMS(M+1)+348.04。
實(shí)施例29
4-(3-甲基-5-(3-(2-嗎啉代乙氧基)芐基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向8mL螺口小瓶中充入3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯酚(35mg，0.10mmol，按實(shí)施例27中的描述制備)、2-嗎啉代乙醇(0.024mL，0.20mmol)、三苯基膦(52mg，0.20mmol)、THF(1mL)和偶氮二羧酸二叔丁酯(46mg，0.20mmol)，然后攪拌16h并蒸發(fā)。向殘留物中加入CH2Cl2(1mL)和TFA(0.5mL)，將該混合物攪拌2h，然后蒸發(fā)至干燥。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，以提供作為微黃色(faintly yellow)固體的產(chǎn)物(雙TFA鹽，33mg，48％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.27(bs，1H)、7.82(m，2H)、7.35(m，2H)、7.26(m，1H)、6.94(m，1H)、6.87(m，2H)、4.34(m，2H)、4.12(s，2H)、4.01(bs，2H)、3.80(bs，2H)、3.59(m，2H)、3.54(bs，2H)、3.25(bs，2H)、2.82(s，3H)。LCMS(M+1+)461.22。
實(shí)施例30
4-(5-(3-(2-(二甲氨基)乙氧基)芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例29中的4-(3-甲基-5-(3-(2-嗎啉代乙氧基)芐基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中2-(二甲氨基)乙醇替代了2-嗎啉代乙醇。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(m，1H)、7.82(m，2H)、7.37(m，1H)、7.33(m，1H)、7.26(m，1H)、6.94(m，1H)、6.88(m，2H)、4.30(m，2H)、4.13(s，2H)、3.55(m，2H)、2.94(s，6H)、2.83(s，3H)。LCMS(M+1+)419.17。
實(shí)施例31
4-(5-(3-(3-氨基丙氧基)芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例29中的4-(3-甲基-5-(3-(2-嗎啉代乙氧基)芐基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-羥基丙基氨基甲酸叔丁酯替代了2-嗎啉代乙醇。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.24(m，1H)、7.81(m，2H)、7.36(m，1H)、7.32(m，1H)、7.22(m，1H)、6.83(m，3H)、4.10(s，2H)、4.07(m，2H)、3.12(m，2H)、2.82(s，3H)、2.11(m，2H)。LCMS(M+1+)405.19。
實(shí)施例32
4-(5-(氨基(3-甲氧基苯基)甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-腈 向50mL圓底燒瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(1.28g，4.00mmol，按實(shí)施例13中的描述制備)、氰化鋅(258mg，2.20mmol)、雙(三叔丁基膦)鈀(90mg，0.18mmol)和鋅(52mg，0.80mmol)，然后抽空并回充氮?dú)?。加入N，N-二甲基乙酰胺(20mL)，用氮?dú)鉀_洗三遍，使反應(yīng)容器真空。將該混合物置于95℃油浴中并攪拌16h。冷卻之后，通過硅藻土(Celite)過濾反應(yīng)混合物。向?yàn)V液中加入3N NH4OH(1.6mL)和H2O(80mL)。所得混合物攪拌2.5h。形成固體物質(zhì)，通過過濾收集該固體物質(zhì)，用水(60mL)洗滌并風(fēng)干。將所得固體溶解在熱的THF(50mL)中并過濾。濃縮濾液，通過用EtOAc和己烷洗脫的硅膠層析法純化，以提供作為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(650mg，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.48(m，1H)、8.37(m，1H)、8.20(m，1H)、7.28(m，1H)、7.02(m，1H)、6.84(bs，2H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1+)267.08。
步驟2
4-(5-(氨基(3-甲氧基苯基)甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向20mL螺口小瓶中充入2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-腈(67mg，0.25mmol)和THF(1.25mL)。向其中加入3-甲氧基苯基溴化鎂的溶液(1.0M，1.25mL，1.25mmol)。將反應(yīng)容器置于70℃油浴中并攪拌16h，然后讓其冷卻。小心地加入甲醇(2mL)，然后加入NaBH4(28mg，0.74mmol)，將該反應(yīng)混合物攪拌1h，然后蒸發(fā)，在H2O(20mL)和EtOAc(3x 30mL)之間分配。合并的有機(jī)相經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過用10％甲醇(在CH2Cl2中)洗脫的硅膠層析法純化，以提供被未知雜質(zhì)污染的作為薄膜的標(biāo)題化合物(45mg)。LCMS(M+1+)377.13。
步驟3
(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)(3-甲氧基苯基)甲基氨基甲酸叔丁酯 向8mL螺口小瓶中充入不純的4-(5-(氨基(3-甲氧基苯基)甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(43mg，0.11mmol)、三乙胺(0.032mL，0.23mmol)、甲醇(0.5mL)和THF(0.5mL)。加入二碳酸二叔丁酯(25mg，0.11mmol)，該反應(yīng)混合物攪拌1h，然后蒸發(fā)并將粗產(chǎn)物通過用10％甲醇和CH2Cl2洗脫的硅膠層析法純化，以提供作為薄膜的標(biāo)題化合物(32mg，59％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.32(m，1H)、8.04(bd，1H)、7.89(m，2H)、7.41(m，1H)、7.20(m，1H)、6.94(m，3H)、6.76(m，3H)、5.93(bd，1H)、3.70(s，3H)、2.65(s，3H)、1.39(bs，9H)。LCMS(M+1+)477.25。
步驟4
4-(5-(氨基(3-甲氧基苯基)甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向25mL圓底燒瓶中充入(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)(3-甲氧基苯基)甲基氨基甲酸叔丁酯(10mg，0.021mmol)、CH2Cl2(2mL)和TFA(1mL)。攪拌75分鐘后，將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，得到作為黃色薄膜的標(biāo)題化合物(雙TFA鹽，7.7mg，48％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.95(b、3H)、8.36(m，1H)、8.10(m，1H)、8.03(m，1H)、7.48(m，1H)、7.36(m，1H)、7.14(m，1H)、7.04(m，2H)、6.93(m，2H)、5.78(bm，1H)、3.75(s，3H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1+)377.14。
實(shí)施例33
4-(5-(氨基甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向50mL圓底燒瓶中充入在THF(20mL)中的2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-腈(500mg，1.88mmol，按實(shí)施例32中的描述制備)的溶液。向該混合物中加入LiAlH4(300mg，7.89mmol)。將所得混合物加熱至60℃，保持過夜。冷卻至室溫后，通過加入10mL水/冰終止該反應(yīng)混合物的反應(yīng)。所得溶液用EtOAc(50mL)萃取三次，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，以提供作為白色固體的產(chǎn)物0.5g(91％產(chǎn)率)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.31(d，1H)、7.85(s，1H)、7.83(d，1H)、7.43(d，1H)、7.05(d，1H)、3.95(s，2H)、2.76(s，3H)。
實(shí)施例34
N-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)噻吩-2-甲酰胺 向50mL圓底燒瓶中充入在DMF中的4-(5-(氨基甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.025g，0.09mmol，按實(shí)施例33中的描述制備)、噻吩-2-羧酸(0.013g，0.1mmol)、TEA(0.018g，0.18mmol)和HATU(0.051g)。讓所得混合物在室溫下攪拌4h。后處理該混合物用水(50mL)洗滌，用EtOAc(25mL)萃取三次，用鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)干燥Na2SO4。濃縮該混合物，通過用10-100％乙腈(在水中，存在0.1％TFA)洗脫的反相C18柱層析法純化，提供作為灰白色固體的產(chǎn)物10mg(27％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+380.90。
實(shí)施例35
N-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-2-(2-羥基苯基)乙酰胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例34中描述的N-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)噻吩-2-甲酰胺進(jìn)行制備，其中2-(2-羥基苯基)乙酸替代了該程序中的噻吩-2-羧酸。LCMS(M+1)+404.92。
實(shí)施例36
N-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-2，5-二甲氧基苯甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例34中描述的N-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)噻吩-2-甲酰胺進(jìn)行制備，其中2，5-二甲氧基苯甲酸替代了該程序中的噻吩-2-羧酸。LCMS(M+1)+434.94。
實(shí)施例37
4-(5-(2-甲氧基芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(2-甲氧基芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.73(d，1H)、7.63(d，1H)、7.28(dd，1H)、7.26-7.20(m，2H)、7.08(dd，1H)、6.98(d，1H)、6.90-6.86(m，2H)5.13(s，2H)、4.11(s，2H)、3.84(s，3H)、2.67(s，3H)。LCMS(M+1)+361.80。
實(shí)施例38
4-(5-(2，5-二甲氧基芐基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(2，5-二甲氧基芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.34(d，1H)、7.73(d，1H)、7.62(d，1H)、7.28(dd，1H)、6.82(d，1H)、6.73-6.66(m，2H)5.10(s，2H)、4.08(s，2H)、3.79(s，3H)、3.71(s，3H)、2.67(s，3H)。LCMS(M+1)+391.83。
實(shí)施例39
4-(3-甲基-5-(3-(三氟甲基)芐基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(3-(三氟甲基)芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(d，1H)、7.78(d，1H)、7.59(d，1H)、7.50-7.47(m，4H)、7.21(d，1H)、6.99-6.97(m，1H)5.12(s，2H)、4.18(s，2H)、2.68(s，3H)。LCMS(M+1)+400.03. 實(shí)施例40
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)芐腈 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(3-氰基芐基)溴化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(d，1H)、7.78(d，1H)、7.57(d，1H)、7.52-7.26(m，4H)、7.19(d，1H)、6.99(d，1H)5.08(s，2H)、4.15(s，2H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1)+357.04。
實(shí)施例41
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸 向25mL圓底燒瓶中充入3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)芐腈(0.040g，0.11mmol，在實(shí)施例40中制備)、甲醇(2.2mL)和NaOH水溶液(2M，2.3mL)，然后回流過夜。后處理濃縮反應(yīng)物，懸浮于EtOH，通過加入濃鹽酸水溶液將pH調(diào)節(jié)至5。形成白色沉淀，所述沉淀通過過濾收集，用EtOH洗滌，然后通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(0.02g、48％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(d，1H)、7.78-7.73(m，3H)、7.72-7.70(m，1H)、7.46-7.36(m，3H)、7.26(m，1H)、4.20(s，2H)、2.80(s，3H)；LCMS(M+1)+375.02。
實(shí)施例42
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸甲酯 向燒瓶中充入3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸(16.0mg，0.0426mmol，按實(shí)施例41中的描述制備)、(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(2.0M在Et2O中的溶液，4.9mg，0.0426mmol)和THF∶甲醇(0.5mL，1∶1)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。濃縮該混合物，然后通過用10％甲醇和二氯甲烷洗脫的SiO2急驟層析法純化，以提供7.2mg(43％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.38(d，1H)、7.89-7.78(m，4H)、7.59(d，1H)、7.44(t，1H)、7.39(d，1H)、6.97(d，1H)、6.73(s，2H)、4.18(s，2H)、3.81(s，3H)、2.64(s，3H)。LCMS(M+1)+390.11。
實(shí)施例43
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸異丙酯 向5mL圓底燒瓶中充入在中的1.0M H2SO4溶液中的按實(shí)施例41中的描述制備的3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸(24.4mg，0.0650mmol)。所得混合物在92℃下攪拌過夜。后處理該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液(50mL)洗滌，用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌三次，經(jīng)Na2SO4干燥。濃縮該混合物，然后通過用10％甲醇和二氯甲烷洗脫的SiO2急驟層析法純化，提供5.9mg(22％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.38(d，1H)、7.94-7.75(m，4H)、7.56(d，1H)、7.41(t，1H)，7.36(d，1H)、7.01(d，1H)、5.20(m，1H)、4.18(s，2H)、2.67(s，3H)、1.35(d，6H)。LCMS(M+1)+418.18。
實(shí)施例44
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)苯甲酰胺 向20mL螺口小瓶中充入3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸(0.050g，0.13mmol，在實(shí)施例41中制備)、4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯胺(0.029g，0.1mmol)、三乙胺(0.026g，0.26mmol)、HATU(0.049g，0.13mmol)和DMF。攪拌2h后，LCMS分析顯示反應(yīng)完成。后處理加入水，然后該混合物用EtOAc(3x25mL)萃取。合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(30mg，35％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.20(d，1H)、7.83(s，2H)、7.76(dd，1H)、7.61-7.59(m，2H)、7.49-7.38(m，3H)、7.29(d，1H)、7.02-6.99(m，2H)、4.38(t，2H)、4.21(s，2H)、4.10-3.70(m，4H)、3.63(t，2H)、3.62-3.57(m，2H)、2.80(s，3H)；LCMS(M+1)+580.17。
實(shí)施例45
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺 向燒瓶中充入在DMF(0.2mL)中的3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯甲酸(9.8mg，0.0261mmol，按實(shí)施例41中的描述制備)、4-嗎啉代苯胺(5.1mg，0.0287mmol)、HATU(10.9mg，0.0287mmol)、三乙胺(7.9mg，0.0783mmol)。所得混合物在室溫下攪拌過夜。后處理該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌三次，經(jīng)Na2SO4干燥。粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為白色固體的產(chǎn)物(單TFA鹽，2.4mg，17％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.04(s，1H)、8.35(d，1H)、7.91-7.84(m，3H)、7.75(d，1H)、7.59(m，2H)、7.48-7.35(m，3H)、7.06(d，1H)、6.93(d，2H)、4.17(s，2H)、3.73(t，4H)、3.06(t，4H)、2.70(s，3H)。LCMS(M+1)+536.12。
實(shí)施例46
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-甲氧基苯基)苯甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中對(duì)甲氧基苯胺替代了實(shí)施例45中描述的4-嗎啉代苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.24(d，1H)、7.84(m，3H)、7.79(d，1H)、7.54-7.41(m，5H)、7.32(d，1H)、6.91(d，2H)、4.24(s，2H)、3.79(s，3H)、2.83(s，3H)。LCMS(M+1)+481.01。
實(shí)施例47
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(2-(二乙基氨基)乙基)苯甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中N，N-二乙基乙二胺替代了實(shí)施例45中描述的4-嗎啉代苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(d，1H)、7.84-7.69(m，4H)、7.51-7.30(m，4H)、4.24(s，2H)、3.72(t，2H)、3.37-3.26(m，6H)、2.82(s，3H)、1.33(t，6H)。LCMS(M+1)+474.63。
實(shí)施例48
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(3-嗎啉代乙基)苯甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中2-嗎啉代乙胺(2-morpholinoethylamime)替代了實(shí)施例45中描述的4-嗎啉代苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(d，1H)、7.84-7.71(m，4H)、7.51-7.32(m，4H)、4.22(s，2H)、4.05(m，2H)、3.76(t，2H)、3.65(m，2H)、3.38(t，2H)、3.26(m，2H)、2.83(s，3H)。LCMS(M+1)+488.62。
實(shí)施例49
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(3-嗎啉代丙基)苯甲酰胺 標(biāo)題化合物類似于3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中4-(3-氨基丙基)-嗎啉替代了實(shí)施例45中描述的4-嗎啉代苯胺。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.25(d，1H)、7.84-7.68(m，4H)、7.49-7.32(m，4H)、4.21(s，2H)、4.05-4.03(m，2H)、3.76(t，2H)、3.48(t，2H)、3.20(t，2H)、3.15-3.10(m，2H)、2.83(s，3H)、2.05(m，2H)。LCMS(M+1)+502.64。
實(shí)施例50
(3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮 標(biāo)題化合物類似于3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)甲基)-N-(4-嗎啉代苯基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中1-甲基哌嗪替代了實(shí)施例45中描述的4-嗎啉代苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(d，1H)、7.91-7.85(m，2H)、7.46-7.26(m，5H)、7.06(d，1H)、4.14(s，2H)、3.29(m，4H)、3.04(m，4H)、2.79(s，3H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1)+458.17。
實(shí)施例51
4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向20mL螺口小瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.128g，0.4mmol，在實(shí)施例13中制備)、3-甲氧基苯胺(0.1g，0.8mmol)、t-BuONa(0.19g，2mmol)、1，3-雙(2，6-二異丙基苯基)氯化咪唑鎓(0.034g，0.08mmol)和Pd2(dba)3(0.023g，0.04mmol)。將此混合物脫氣并回充氮?dú)馊危缓蠹訜嶂?5-100℃，保持過夜。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理冷卻至室溫后，加入水(10mL)，該混合物用EtOAc(3x100mL)萃取。合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過用10％甲醇(在CH2Cl2中)洗脫的硅膠層析法純化，以提供作為黃色固體的標(biāo)題化合物(70mg，48％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.31(d，2H)、8.09(s，1H)、7.79(d，1H)、7.50(d，1H)、7.20(dd，1H)、7.13(t，1H)、6.92(d，1H)、6.73(s，2H)、6.69-6.63(m，2H)、6.39(dd，1H)、3.70(s，3H)、2.57(s，3H)；LCMS(M+1)+363.02。
實(shí)施例52
3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯酚 標(biāo)題化合物類似于3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氧基)苯酚進(jìn)行制備，其中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺替代了實(shí)施例82中描述的4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.27(d，1H)、7.69(d，1H)、7.53(d，1H)、7.23(d，1H)、7.20(d，1H)、7.04(t，1H)、6.99(d，1H)、6.62(t，1H)、6.59(dd，1H)、6.31(dd，1H)、2.65(s，3H)。LCMS(M+1)+349.05。
實(shí)施例53
4-(3-甲基-5-(3-苯氧基苯基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-苯氧基苯胺替代了3-甲氧基苯胺。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.24(d，1H)、7.74(d，1H)、7.76(d，1H)、7.37-7.33(m，2H)、7.28-7.19(m，3H)、7.10(t，1H)、7.07-7.02(m，2H)、6.86(dd，1H)、6.75(t，1H)、6.49(dd，1H)、2.72(s，3H)。LCMS(M+1)+425.00。
實(shí)施例54
4-(3-甲基-5-(3-(三氟甲氧基)苯基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-(三氟甲氧基)苯胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.63(s，1H)、8.34(d，1H)、7.88(d，1H)、7.57(d，1H)、7.32(t，1H)、7.24(d，1H)、7.09-6.96(m，4H)、6.72(d，1H)、2.61(s，3H)。LCMS(M+1)+416.86。
實(shí)施例55
4-(5-(3-(芐氧基)苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-(芐氧基)苯胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.34(d，1H)、7.81(d，1H)、7.51(d，1H)、7.43-7.02(m，9H)、6.70-6.69(m，2H)、6.48(dd，1H)、5.05(s，2H)、2.62(s，3H)。LCMS(M+1)+439.03。
實(shí)施例56
N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)甲基磺酰胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中N-(3-氨基苯基)甲基磺酰胺替代了3-甲氧基苯胺。LCMS(M+1)+425.95。
實(shí)施例57
N1-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)苯-1，3-二胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中苯-1，3-二胺替代了3-甲氧基苯胺。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.51(s，1H)、8.34(d，1H)、7.87(d，1H)、7.54(d，1H)、7.25-7.22(m，2H)、7.02(d，1H)、6.94-6.92(m，2H)、6.60(d，1H)、2.63(s，3H)。LCMS(M+1)+348.04。
實(shí)施例58
N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)乙酰胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中N-(3-氨基苯基)乙酰胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.22(d，1H)、7.74(d，1H)、7.66(s，2H)、7.31-7.29(m，2H)、7.18(t，1H)、6.86(dd，2H)、2.78(s，2H)、2.10(s，3H)。LCMS(M+1)+390.04。
實(shí)施例59
N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)-4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酰胺 向4mL螺口小瓶中充入N1-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)苯-1，3-二胺(0.050g、0.14mmol，在實(shí)施例57中制備)、4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酸(0.036g，0.14mmol)、三乙胺(0.042g，0.42mmol)、HATU(0.053g，0.13mmol)和DMF。反應(yīng)混合物攪拌過夜，通過LCMS監(jiān)控進(jìn)程。后處理加入水并將該混合物用EtOAc(3x25mL)萃取。合并的有機(jī)相用水、鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為棕色固體的標(biāo)題化合物(29mg，35％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.21(d，1H)、7.96-7.94(m，2H)、7.77-7.75(m，2H)、7.68(d，1H)、7.35(dd，1H)、7.32(d，1H)、7.24(d，1H)、7.13-7.05(m，2H)、6.92-6.89(m，1H)、4.48(t，2H)、4.06-4.05(m，2H)、3.82(m，2H)、3.67(t，2H)、3.59(m，2H)、3.32(m，2H)、2.80(s，3H)；LCMS(M+1)+581.18。
實(shí)施例60
4-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基氨基甲?；?苯基乙酸酯 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例59中N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)-4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中4-乙酰氧基苯甲酸替代了4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酸。LCMS(M+1)+510.05。
實(shí)施例61
N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)-4-羥基苯甲酰胺 向4mL螺口小瓶中充入4-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基氨基甲?；?苯基乙酸酯(0.020g，0.039mmol，在實(shí)施例60中制備)和甲醇(0.8mL)。加入NaOH水溶液(2M、0.03mL)，該反應(yīng)混合物攪拌過夜。后處理濃縮反應(yīng)物，通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為棕色固體的標(biāo)題化合物(9mg，49％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.23(s，1H)、7.83-7.74(m，4H)、7.69(d，1H)、7.33(dd，1H)、7.28(d，1H)、7.22(d，1H)、7.06-7.04(m，1H)、6.90-6.84(m，3H)、2.80(s，3H)；LCMS(M+1)+468.01。
實(shí)施例62
4-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基氨基甲?；?苯甲酸甲酯 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例60中N-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基)-4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酰胺進(jìn)行制備，其中4-(甲氧基羰基)苯甲酸替代了4-(2-嗎啉代乙氧基)苯甲酸。LCMS(M+1)+510.10。
實(shí)施例63
4-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基氨基甲?；?苯甲酸 向4mL螺口小瓶中充入4-(3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)苯基氨基甲酰基)苯甲酸甲酯(0.010g，0.019mmol，在實(shí)施例62中制備)和THF(0.4mL)。加入在水(0.1mL)中的LiOH(0.5mg)，該反應(yīng)混合物攪拌過夜。后處理蒸發(fā)至干燥后，粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為橙色固體的標(biāo)題化合物(4mg，41％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+496.01。
實(shí)施例64
4-(3-甲基-5-(吡啶-2-基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中吡啶-2-胺替代了3-甲氧基苯胺。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(d，1H)、8.10-8.03(m，3H)、7.88(d，1H)、7.50(dd，1H)、7.32(d，1H)、7.24(d，1H)、7.05(t，1H)、2.84(s，3H)。LCMS(M+1)+334.02。
實(shí)施例65
4-(3-甲基-5-(吡啶-3-基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中吡啶-3-胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(d，1H)、8.30(d，1H)、8.14(d，1H)、8.08(ddd、1H)、7.98(d，1H)、7.82(s，1H)、7.81(dd，1H)、7.44(dd，1H)、7.30(d，1H)、2.82(s，3H)。LCMS(M+1)+334.02。
實(shí)施例66
4-(3-甲基-5-(吡啶-4-基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中吡啶-4-胺替代了3-甲氧基苯胺。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.32(d，1H)、8.19-8.17(m，2H)、8.06(d，1H)、8.80(d，1H)、7.45(d，1H)、7.26(d，1H)、7.13(m，2H)、2.81(s，3H)。LCMS(M+1)+334.01。
實(shí)施例67
4-(5-(5-甲氧基吡啶-3-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向在1，4-二噁烷(2mL)中的4-(5-氨基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(199mg，0.560mmol，按實(shí)施例72中的描述制備)的脫氣溶液，按順序加入3-溴-5-甲氧基吡啶(105mg，0.560mmol)、t-BuONa(269mg，2.80mmol)、1，3-雙(2，6-二異丙基苯基)氯化咪唑鎓(47.6mg，0.112mmol)和Pd2(dba)3(32.2mg，0.0560mmol)。然后將此混合物脫氣并回充氮?dú)馊?。所得混合物加熱?5℃并攪拌過夜。通過LCMS確定完成后，將該反應(yīng)物冷卻至室溫并通過加入水(10mL)終止反應(yīng)。然后用乙酸乙酯(100mL)萃取該混合物三次，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。過濾所得混合物，濃縮濾液，通過用10％甲醇和二氯甲烷洗脫的硅膠柱層析法純化，提供140.4mg(69％產(chǎn)率)作為紅色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.28(m，1H)、7.91(m，1H)、7.78(m，1H)、7.68(m，1H)、7.57(m，1H)、7.26(m，1H)、7.08(m，1H)、7.00(m，1H)、3.83(s，3H)、2.66(s，3H)。LCMS(M+1)+364.13 實(shí)施例68
5-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)吡啶-3-醇 標(biāo)題化合物類似于3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氧基)苯酚進(jìn)行制備，其中4-(5-(5-甲氧基吡啶-3-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺替代了實(shí)施例82中描述的4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.29(m，1H)、7.81(m，1H)、7.77(s，1H)、7.57(m，1H)、7.25(m，1H)、7.02(m，2H)、2.68(s，3H)。LCMS(M+1)+350.14。
實(shí)施例69
4-(3-甲基-5-(苯基氨基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中苯胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.33(d，2H)、7.82(d，1H)、7.51(d，1H)、7.26-7.21(m，3H)、7.12-7.10(m，3H)、7.02(m，2H)、6.82(t，1H)、2.61(s，3H)。LCMS(M+1)+333.10。
實(shí)施例70
4-(5-(苯并[d][1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中苯并[d][1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-胺替代了3-甲氧基苯胺。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.22(d，1H)、7.70(d，1H)、7.42(d，1H)、7.26(d，1H)、7.18(dd，1H)、6.67-6.62(m，2H)、6.64(d，1H)、5.91(s，2H)、2.74(s，3H)。LCMS(M+1)+377.03。
實(shí)施例71
5-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)煙酸 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例51中4-(5-(3-甲氧基苯基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中5-氨基煙酸替代了3-甲氧基苯胺。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.60(s，2H)、8.51-8.46(m，2H)、8.29(d，1H)、8.01(d，1H)、7.88(s，1H)、7.49(dd，1H)、7.40(d，1H)、2.86(s，3H)；LCMS(M+1)+377.98。
實(shí)施例72
4-(5-氨基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
4-(5-(二苯基亞甲基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向20mL螺口小瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，0.3mmol，在實(shí)施例13中制備)、二苯基甲基亞胺(0.11g，0.62mmol)、Cs2CO3(0.29g，0.9mmol)、BINAP(0.028g，0.045mmol)、Pd(OAc)2(0.010g，0.015mmol)和甲苯(1.5mL)。然后將此混合物脫氣并回充氮?dú)馊?，然后加熱?00℃，保持過夜。后處理該反應(yīng)物用水(10mL)稀釋，用EtOAc(3x50mL)、鹽水萃取，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)，以提供粗產(chǎn)物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。
步驟2
4-(5-氨基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向20mL螺口小瓶中充入4-(5-(二苯基亞甲基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，0.24mmol)、THF(2.4mL)和鹽酸水溶液(1M，2.3mL)，然后攪拌6h。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理該反應(yīng)混合物用EtOAc(3x50mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為棕色固體的標(biāo)題化合物(51mg，83％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+257.04。
實(shí)施例73
N-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)-3，4，5-三甲氧基苯甲酰胺 向20mL螺口小瓶中充入4-(5-氨基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，0.39mmol，在實(shí)施例72中制備)、3，4，5-三甲氧基苯甲酸(0.083g，0.39mmol)、三乙胺(0.11g，1.12mmol)DMF和HATU(0.15g，0.39mmol)。反應(yīng)混合物攪拌過夜，LCMS分析顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。后處理加入水，該混合物用EtOAc(3x25mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗材料通過用在己烷中的EtOAc洗脫的硅膠柱層析法純化，以提供作為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.13g，76％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)、8.36-8.35(m，2H)、7.96(d，1H)、7.78(dd，1H)、7.32(s，2H)、7.05(d，1H)、3.87(s，6H)、3.73(s，3H)、2.67(s，3H)；LCMS(M+1)+451.06。
實(shí)施例74
4-(5-(2-甲氧基嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
4-(5-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向50mL圓底燒瓶中充入4-(5-氨基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.5g，1.95mmol，在實(shí)施例72中制備)、2，4-氯嘧啶(0.29g，1.95mmol)、N，N-二異丙基乙胺(0.25g、1.95mmol)和EtOH(6.5mL)，然后加熱至80℃，持續(xù)16h。LCMS分析顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。后處理冷卻至室溫后，加入水，固體材料通過過濾收集并用水洗滌。從熱的異丙醇中重結(jié)晶粗產(chǎn)物，以得到作為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.42g，58％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+368.98。
步驟2
4-(5-(2-甲氧基嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向25mL圓底燒瓶中充入4-(5-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，1.95mmol)、THF(1.35mL)和NaOMe(1.35mmol，25％w/w溶液，在THF中)。所得混合物加熱回流過夜。后處理冷卻至室溫后，加入水，該混合物用EtOAc(3x25mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。從熱的異丙醇中重結(jié)晶粗材料，以提供作為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.06g，61％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.36(s，1H)、8.31(d，1H)、8.04-7.99(m，2H)、7.67(d，1H)、7.25(d，1H)、6.67(d，1H)、4.02(s，3H)、2.81(s，3H)；LCMS(M+1)+364.99。
實(shí)施例75
4-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氨基)嘧啶-2-醇 向20mL螺口小瓶中充入4-(5-(2-甲氧基嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.05g，0.14mmol，在實(shí)施例74中制備)和CH2Cl2(1.4mL)，然后冷卻至-78℃。滴加BBr3(0.31g，1.23mmol)，讓該反應(yīng)混合物升溫至室溫，保持過夜。后處理該反應(yīng)混合物用NaHCO3水溶液終止反應(yīng)，然后用CH2Cl2(3x25mL)萃取。合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.009g，19％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+351.02。
實(shí)施例76
N4(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)-N2-甲基嘧啶-2，4-二胺 向微波容器中充入4-(5-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，0.27mmol，在實(shí)施例74步驟1中制備)、甲胺(2.7mmol)和異丙醇(1.35mL)，然后密封，在100℃下微波照射10分鐘。后處理加入水，該混合物用EtOAc(3x25mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗材料通過C18反相半制備性HPLC純化，以提供作為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.050g，51％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+364.01。
實(shí)施例77
N4-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)-N2-(2-(二乙基氨基)乙基)嘧啶-2，4-二胺 標(biāo)題化合物類似于實(shí)施例76中N4-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)-N2-甲基嘧啶-2，4-二胺進(jìn)行制備，其中N1，N1-二乙基乙烷-1，2-二胺替代了甲胺。LCMS(M+1)+449.06。
實(shí)施例78
4-(5-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向8mL可穿入(pierceable)螺口小瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(128mg，0.400mmol，按實(shí)施例13中的描述制備)、3-甲氧基-N-甲基苯胺(0.105mL，0.803mmol)、三(二芐叉丙酮)二鈀(0)(23mg，0.025mmol)、1，3-雙(2，6-二異丙基苯基)氯化咪唑鎓(34mg，0.080mmol)和叔丁醇鈉(192mg，2.00mmol)，然后抽空并回充氮?dú)?3x)。加入二噁烷(2mL，無水)，向該反應(yīng)混合物鼓入氮?dú)饧s10分鐘。密封該反應(yīng)容器，在95℃油浴中攪拌16h，然后讓其冷卻，接著通過硅藻土過濾。蒸發(fā)濾液，粗產(chǎn)物通過用甲醇(在CH2Cl2中)洗脫的硅膠層析法純化，然后進(jìn)一步通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為橙色固體的產(chǎn)物(單TFA鹽，1.1mg，0.6％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(m，1H)、7.78(m，1H)、7.53(m，1H)、7.24(m，2H)、7.16(m，1H)、6.56(m，3H)、3.73(s，3H)、3.37(s，3H)、2.76(s，3H)。LCMS(M+1+)377.00。
實(shí)施例79
4-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 步驟1
1-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮 向250mL圓底燒瓶中充入在甲苯(50mL)中的1-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(1.34g，4.98mmol，按實(shí)施例12中的描述制備)、苯酚(470mg，4.99mmol)、K3PO4(2.12g，9.99mmol)、Pd(OAc)2(100mg，0.450mmol)、2-(二叔丁基膦基)聯(lián)苯(220mg，0.740mmol)。所得混合物在回流和氮?dú)夥罩袛嚢?4小時(shí)，通過TLC(EtOAc/石油醚＝1/50)監(jiān)控。冷卻該反應(yīng)混合物并過濾。濃縮濾液，通過用EtOAc/石油醚(1/50)洗脫硅膠柱進(jìn)行純化，以獲得0.32g(23％)作為白色固體的產(chǎn)物。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.79-7.62(m，1H)、7.45-7.00(m，7H)、2.66(s，3H)、2.63(s，3H)。
步驟2
(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮 向10mL圓底燒瓶中充入1-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(320mg，1.13mmol)和DMFDMA(5mL)。所得溶液在回流下攪拌24小時(shí)。濃縮殘留物，以提供作為黃色固體的產(chǎn)物(350mg)。該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。
步驟3
4-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向25mL圓底燒瓶中充入新鮮制備的EtONa(322mg，4.13mmol)、鹽酸胍(396mg，4.15mmol)和乙醇(5mL)的溶液。所得混合物在回流下攪拌0.5小時(shí)，然后冷卻至室溫并過濾以除去氯化鈉。向該濾液加入(E)-3-(二甲氨基)-1-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮(350mg，1.04mmol)，然后將其在回流下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)通過用EtOAc/TEA(1mL/1滴)洗脫的TLC監(jiān)控。過濾后，冷卻反應(yīng)混合物，形成固體。通過過濾分離該固體，用乙醇(2mL)洗滌。通過用EtOAc洗脫的急驟層析法的純化提供了作為白色固體的產(chǎn)物(136mg，39％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.35(d，1H)、7.99(d，1H)、7.54-6.97(m，8H)、6.80(s，2H)、2.61(s，3H)。LCMS(M+1)+334.10。
實(shí)施例80
4-(3-甲基-5-(3-硝基苯氧基)苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于4-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-硝基苯酚替代了實(shí)施例79中描述的苯酚。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.36(m，1H)、8.10(m，1H)、7.98(m，1H)、7.68(m，3H)、7.52(m，1H)、7.28(m，1H)、7.00(m，1H)、6.81(s，2H)、2.64(s，3H)。LCMS(M+1)+379。
實(shí)施例81
4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于4-(3-甲基-5-苯氧基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中3-甲氧基苯酚替代了實(shí)施例79中描述的苯酚。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.35(d，1H)、7.99(d，1H)、7.55(d，1H)、7.28(t，1H)、7.17(dd，1H)、6.97(d，1H)、6.61(t，1H)、6.58-6.52(m，1H)、3.74(s，3H)、2.62(s，3H)。LCMS(M+1)+391。
實(shí)施例82
3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氧基)苯酚 向5mL圓底燒瓶中充入4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(15.8mg，0.0435mmol，按實(shí)施例81中的描述制備)和二氯甲烷(0.5mL)。所得溶液在氮?dú)夥障吕鋮s至-78℃，向其中滴加BBr3(98.0mg，0.391mmol)。反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。后處理該混合物傾至冰水(25mL)上，用EtOAc(25mL)萃取三次，用鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。濃縮該混合物，通過用10％甲醇和二氯甲烷洗脫的SiO2急驟層析法純化，以提供11.2mg(74％產(chǎn)率)作為灰白色固體的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.55(s，1H)、8.34(d，1H)、7.97(d，1H)、7.52(d，1H)、7.14(m，2H)、6.96(d，1H)、6.76(s，2H)、6.49(d，1H)、6.42(d，1H)、6.35(s，1H)、2.62(s，3H)。LCMS(M+1)+350.01。
實(shí)施例83
4-(5-(3-甲氧基苯硫基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 在氮?dú)夥障孪?0mL圓底燒瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(96mg，0.3mmol，參見實(shí)施例13)、3-甲氧基苯硫醇(37μL，0.3mmol)、二異丙基乙胺(209μL，1.2mmol)、4，5-雙二苯基膦-9，9-二甲基氧雜蒽(Xantphos)(17mg，0.03mmol)、Pd2(dba)3(13.7mg，0.015mmol)和二噁烷(1.0mL，無水)。所得混合物在98℃油浴中加熱3小時(shí)。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理濃縮反應(yīng)物，通過急驟層析法(梯度洗脫，30-50％乙酸乙酯/己烷)純化，得到作為淡黃色粉末的標(biāo)題化合物(102mg，90％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.35(d，1H)、7.99(m，2H)、7.40(d，1H)、7.25(t，1H)、6.98(d，1H)、6.79(m，4H)、3.69(s，3H)、2.64(s，3H)。LCMS(M+1)+379.99。
實(shí)施例84
3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基硫代)苯酚 在氮?dú)夥障孪?0mL圓底燒瓶中充入4-(5-(3-甲氧基苯硫基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(33mg，0.081mmol，實(shí)施例83中描述)、二氯甲烷(0.36mL)，冷卻至-78℃，用BBr3(31μL，0.327mmol)處理。讓所得混合物緩慢升溫至室溫，攪拌過夜。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理該反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用NaHCO3(1N水溶液)洗滌，濃縮，通過C18半制備性反相HPLC純化。產(chǎn)物是淡黃色粉末(4.3mg，33％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.55(bs，1H)、8.36(d，1H)、8.00(d，1H)、7.99(s，1H)、7.43(m，1H)、7.12(t，2H)、6.70(d，1H)、6.62(m，1H)、6.57(m，1H)、2.66(s，3H)。LCMS(M+1)+366.12。
實(shí)施例85
3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基硫代)苯甲酸甲酯 標(biāo)題化合物類似于4-(5-(3-甲氧基苯硫基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(實(shí)施例83)進(jìn)行制備，其中3-巰基苯甲酸甲酯替代了該程序最后一步中的3-甲氧基苯硫醇。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.39(d，1H)、7.98(s，1H)、7.91(s，1H)、7.87(d，1H)、7.85(d，1H)、7.42(m，2H)、7.32(t，1H)、7.00(d，1H)、5.11(bs，2H)、3.89(s，3H)、2.68(s，3H)。LCMS(M+1)+408.15。
實(shí)施例86
3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基硫代)苯甲酸 將含有NaOH(5.6mg，0.243mmol)、水(100μL)、甲醇(700μL)和THF(700μL)的溶液的10mL圓底燒瓶用3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基硫代)苯甲酸甲酯(33mg，0.081mmol，實(shí)施例85中描述)處理。所得混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理該反應(yīng)物用檸檬酸(1M水溶液)中和，用水(1mL)稀釋，濃縮直至形成固體。通過過濾分離該固體，用水和醚清洗，在高真空下干燥，得到作為淡黃色粉末的產(chǎn)物(22mg，69％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ13.11(s，1H)、8.35(d，1H)、8.05(m，2H)、7.77(d，1H)、7.71(s，1H)、7.46(m，3H)、6.98(d，1H)、6.79(s，2H)、2.64(s，3H)。LCMS(M+1)+394.13。
實(shí)施例87
(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基)(苯基)甲酮 向25mL圓底燒瓶中充入2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-腈(0.010g、0.037mmol，在實(shí)施例32步驟1中制備)和THF，然后冷卻至0℃。加入苯基鋰(0.148mmol)，該反應(yīng)混合物攪拌1h。后處理加入甲醇，將該混合物在EtOAc(2x10mL)和鹽水之間分配。合并的有機(jī)相經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(2mg，15％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.32-8.31(m，2H)、8.07(dd，1H)、7.90(dd，1H)、7.84-7.82(m，2H)、7.70-7.66(m，1H)、7.59-7.55(m，2H)、7.30(d，1H)、2.82(s，3H)；LCMS(M+1)+345.81。
實(shí)施例88
4-(3-甲基-5-苯基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向微波容器中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.015g，0.047mmol，在實(shí)施例13中制備)、苯基硼酸(0.0086g，0.07mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.003g，0.005mmol)、Na2CO3水溶液(2M，0.060mL)和3∶1的THF和水的混合物(0.47mL)。然后將此混合物脫氣并回充氮?dú)馊?，然后密封所述容器，?00℃下微波照射10分鐘。通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理加入水(2mL)，該混合物用EtOAc(2x10mL)萃取，合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(2mg，41％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+317.93。
實(shí)施例89
4-(5-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向10mL圓底燒瓶中充入4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.1g，0.31mmol，在實(shí)施例13中制備)、Pd(PPh3)2Cl2(0.022g，0.031mmol)、CuI(0.012g，0.062mmol)和THF(1.5mL)。將此混合物脫氣三次并回充氮?dú)?，充?-乙炔基-3-甲氧基苯(0.041g，0.31mmol)。該反應(yīng)混合物回流過夜，通過LCMS監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。后處理用水(2mL)稀釋，用EtOAc(100mL)萃取，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(52mg，47％產(chǎn)率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.37(m，1H)、8.13(s，1H)、8.04(d，1H)、7.60-7.58(m，1H)、7.36-7.32(m，1H)、7.16-6.98(m，4H)、3.79(s，1H)、2.52(s，3H)；LCMS(M+1)+372.00。
實(shí)施例90
4-(5-(3-甲氧基苯乙基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺 向25mL圓底燒瓶中充入4-(5-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺(0.02g，0.05mmol，在實(shí)施例89中制備)、Pd/C(0.006g，10％德古薩型)和甲醇(5mL)。該反應(yīng)混合物用氮?dú)獯迪矗缓笥脷錃鉀_洗，攪拌過夜。后處理該反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過C18反相半制備性HPLC純化，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物(15mg，75％產(chǎn)率)。LCMS(M+1)+380.18。
實(shí)施例91
4-(5-溴-3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例13中描述的4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中4-溴苯酚替代了該程序步驟1中的4-溴苯硫醇。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.38(m，1H)、7.74(m，1H)、7.47(m，1H)、7.38(m，1H)、7.18(m，1H)、5.13(bs，2H)、2.68(s，3H)。LCMS(M+1)+304.05。
實(shí)施例92
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并呋喃-5-基)甲基)苯酚 步驟1
4-(5-(3-甲氧基芐基)-3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺 標(biāo)題化合物類似于如實(shí)施例24中描述的4-(5-芐基-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行制備，其中(3-甲氧基芐基)氯化鋅(II)替代了芐基溴化鋅(II)，且4-(5-溴-3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺替代了4-(5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺。LCMS(M+1)+346.20。
步驟2
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并呋喃-5-基)甲基)苯酚 標(biāo)題化合物類似于3-(2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-基氧基)苯酚進(jìn)行制備，其中4-(5-(3-甲氧基芐基)-3-甲基苯并呋喃-2-基)嘧啶-2-胺替代了實(shí)施例82中描述的4-(5-(3-甲氧基苯氧基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.35(m，1H)、7.58(m，1H)、7.54(m，1H)、7.30(m，1H)、7.08(m，2H)、6.68(m，1H)、6.60(m，1H)、6.56(m，1H)、3.96(s，2H)、2.69(s，3H)。LCMS(M+1)+332.21。
實(shí)施例93
3-((2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并呋喃-5-基)甲基)苯酚 使用BBr3對(duì)如實(shí)施例32中的描述制備的4-(5-(氨基(3-甲氧基苯基)甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺進(jìn)行如實(shí)施例82中所描述的去甲基化，以提供標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.64(br，1H)、8.92(bm，3H)、8.36(m，1H)、8.09(m，1H)、8.03(m，1H)、7.45(m，1H)、7.23(m，1H)、7.02(m，1H)、6.93(m，1H)、6.83(m，1H)、6.74(m，1H)、5.72(m，1H)、2.70(s，3H)。LCMS(M+1)+363.17。
實(shí)施例94
實(shí)施例93是可商購(gòu)的。
通過平行合成制備的化合物 本發(fā)明通過下列路線闡述 路線12
實(shí)施例94-327可使用如路線12中闡述的下列通用合成程序合成。
起始核4-(5-(氨基甲基)-3-甲基苯并[b]噻吩-2-基)嘧啶-2-胺按實(shí)施例33中的描述制備。其中R-COOH是選擇用來提供實(shí)施例91-324的羧酸，實(shí)施例91-324通過通用程序1制備。
路線13
實(shí)施例328-570可使用路線13中闡述的下列通用合成程序合成。
起始核2-(2-氨基嘧啶-4-基)-3-甲基苯并[b]噻吩-5-羧酸如實(shí)施例19中所描述的進(jìn)行制備。其中選擇1°胺和2°胺用來提供實(shí)施例325-567，其通過通用程序2制備。
通用條件 通用條件1 將在DMF(8μL)中的羧酸單體(4μmol)轉(zhuǎn)移至384孔板的各孔中，然后用在DMF(18μL)中的核(1.8μmol)和Et3N(6.0μmol)的溶液處理，接著用在DMF(8μL)中的HATU(2.0μmol)溶液處理。將該反應(yīng)板熱封，在室溫下振蕩16小時(shí)。在真空下除去溶劑。測(cè)試前通過LCMS分析產(chǎn)物純度。
通用條件2 將在DMF(8μL)中的胺單體(4μmol)轉(zhuǎn)移至384孔板的各孔中，然后用在DMF(30μL)中的核(4.0μmol)和Et3N(8.8μmol)的溶液處理，接著用在DMF(10μL)中的HATU(4.4μmol)溶液處理。將該反應(yīng)板熱封，在室溫下振蕩16小時(shí)。在真空下除去溶劑。測(cè)試前通過LCMS分析產(chǎn)物純度。
本發(fā)明進(jìn)一步通過下列實(shí)施例闡述。
本文使用簡(jiǎn)化的分子輸入線進(jìn)入系統(tǒng)(Simplified Molecular Input LineEntry System)，或SMILES來表示下述化合物。SMILES是嵌入(built into)所有主要的商品化化學(xué)結(jié)構(gòu)繪圖軟件包的現(xiàn)代化學(xué)表示系統(tǒng)，由DavidWeininger和Daylight Chemical Information Systems，Inc.開發(fā)。SMILES文本字符串的解釋不需要軟件，有關(guān)如何將SMILES翻譯成結(jié)構(gòu)的解釋可在Weininger，D.，J.Chem.Inf.Comput.Sci.1988，28，31-36中找到。本文使用的所有SMILES串以及許多IUPAC名稱是使用CambridgeSoft′sChemDraw 10.0生成的。
下述化合物通?？梢允褂蒙鲜龇椒ㄖ苽?。期望的是制得的這些化合物會(huì)與已在上述實(shí)施例中制得的化合物具有相似的活性。
CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC＝CN64 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝CC＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝CC＝CN64 NC1＝NC＝CC(C2＝C(CC)N3C＝CN＝CC3＝N2)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)N6C＝CN＝CC6＝N5 NC1＝NC＝CC(C2＝C(CC)N3C＝CC＝CC3＝N2)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)N6C＝CC＝CC6＝N5 CC1＝C2C＝CN＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝CN＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C2C＝CN＝CN2C＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝CN＝CN5C＝C4C6＝NON＝C6N NC1＝NC＝CC(C2＝CN3C＝NC＝CC3＝C2CC)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝CN6C＝NC＝CC6＝C5CC CC1＝C2C＝CC＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝CC＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N NC1＝NC＝CC(C2＝NN3C＝CC＝CC3＝C2CC)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝NN6C＝CC＝CC6＝C5CC CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC(OC)＝CN64 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝CC(OC)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝CC(OC)＝CN64 CC1＝C2C＝C(OC)N＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(OC)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C2C＝C(OC)C＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(OC)C＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC(NC)＝CN64 CC1＝C2C＝C(NC)N＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(NC)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)OC3＝CN＝CC＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)OC6＝CN＝CC＝C64 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC＝NC＝C3O2)＝CC＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)C6＝CC＝NC＝C6O5 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝CN＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)SC6＝CN＝CN＝C64 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝CN＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)SC6＝CC＝CN＝C64 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝NC＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)SC6＝CC＝NC＝C64 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝NC＝CC＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)SC6＝NC＝CC＝C64 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝NC＝NC＝C3S2)＝CC＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)C6＝NC＝NC＝C6S5 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CN＝CN＝C3S2)＝CC＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)C6＝CN＝CN＝C6S5 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(CC4＝CC＝CC＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(CC8＝CC＝CC＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC4＝CC＝CC＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(OC8＝CC＝CC＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(SC4＝CC＝CC＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(SC8＝CC＝CC＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(S(C4＝CC＝CC＝C4)(＝O)＝O)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(S(C8＝CC＝CC＝C8)(＝O)＝O)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CC＝CC＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CC＝CC＝C8)＝CN75 CC1＝C2C＝C(CC3＝CC＝CC＝C3)N＝CN2N＝C 1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(CC7＝CC＝CC＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(OC3＝CC＝CC＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(OC7＝CC＝CC＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(SC3＝CC＝CC＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(SC7＝CC＝CC＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(S(C3＝CC＝CC＝C3)(＝O)＝O)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(S(C7＝CC＝CC＝C7)(＝O)＝O)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(NC3＝CC＝CC＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(NC7＝CC＝CC＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(CC4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CN31.CC5＝C(C6＝ NON＝C6N)N＝C7C＝NC(CC8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(OC8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(SC4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(SC8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(S(C4＝CC＝CC(O)＝C4)(＝O)＝O)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(S(C8＝CC＝CC(O)＝C8)(＝O)＝O)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(CC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(CC8＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(OC8＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(SC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(SC8＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(CC4＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(CC8＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC4＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(OC8＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(SC4＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(SC8＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CC＝CC(C(NC)＝O)＝C8)＝CN75 CC1＝C2C＝C(CC3＝CC＝CC(O)＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(CC7＝CC＝CC(O)＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(OC3＝CC＝CC(O)＝C3)N＝CN2N＝C 1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(OC7＝CC＝CC(O)＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(SC3＝CC＝CC(O)＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(SC7＝CC＝CC(O)＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C2C＝C(NC3＝CC＝CC(O)＝C3)N＝CN2N＝C1C4＝NC(N)＝NC＝C4 CC5＝C6C＝C(NC7＝CC＝CC(O)＝C7)N＝CN6N＝C5C8＝NON＝C8N CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(CC4＝CN＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(CC8＝CN＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OC4＝CN＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(OC8＝CN＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(SC4＝CN＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(SC8＝CN＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(S(C4＝CN＝CC(O)＝C4)(＝O)＝O)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(S(C8＝CN＝CC(O)＝C8)(＝O)＝O)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CN＝CC(O)＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CN＝CC(O)＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NC4＝CN＝CC＝C4)＝CN31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)N＝C7C＝NC(NC8＝CN＝CC＝C8)＝CN75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(CC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CN＝C(CC8＝CC＝CC(OC)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝C(CC4＝CN＝CC(C(O)＝O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CC＝C(CC8＝CN＝CC(OC)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(CC4＝CN＝CC(C(O)＝O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CN＝C(CC8＝CN＝CC(OC)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(NC4＝CC＝CC(C(O)＝O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CN＝C(NC8＝CC＝CC(OC)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝C(CC4＝CN＝CC(O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CN＝C(CC8＝CC＝CC(O)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(CC4＝CN＝CC(O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CN＝C(NC8＝CC＝CC(O)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝C(NC4＝CNC＝N4)C＝C31 CC5＝C(C6＝CC＝NC(N)＝N6)SC7＝CC＝C(CC8＝CNN＝C8)C＝C75 NC1＝NC＝CC(C2＝C(CC)N3C＝C(NC4＝CNN＝C4)N＝CC3＝N2)＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)N7C＝C(NC8＝CNC＝N8)N＝CC7＝N6 CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NCCCO)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC(NCCCO)＝CN64 CC1＝C2C＝C(NCCCO)N＝CN2N＝C 1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(NCCCO)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(OCCCO)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC(OCCCO)＝CN64 NC1＝NC＝CC(C2＝C(CC)N3C＝C(OCCO)N＝CC3＝N2)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)N6C＝C(OCCO)N＝CC6＝N5 NC1＝NC＝CC(C2＝C(CC)N3C＝C(NCCO)N＝CC3＝N2)＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)N6C＝C(NCCO)N＝CC6＝N5 CC1＝C2C＝C(NCCO)N＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(NCCO)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C2C＝C(OCCCO)N＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(OCCCO)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C2C＝C(OCCO)N＝CN2N＝C 1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(OCCO)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C(C2＝NC(N)＝NC＝C2)N＝C3C＝NC(NCC(N)CO)＝CN31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)N＝C6C＝NC(NCC(N)CO)＝CN64 CC1＝C2C＝C(NCC(N)CO)N＝CN2N＝C1C3＝NC(N)＝NC＝C3 CC4＝C5C＝C(NCC(N)CO)N＝CN5N＝C4C6＝NON＝C6N CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)OC3＝CN＝C(OC4＝CC＝CC(O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)OC7＝CN＝C(OC8＝CC＝CC(O)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)OC3＝CN＝C(OC4＝CN＝CC(O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)OC7＝CN＝C(OC8＝CN＝CC(O)＝C8)C＝C75 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)OC3＝CN＝C(NCCO)C＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)OC6＝CN＝C(NCCO)C＝C64 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)OC3＝CN＝C(NCCCO)C＝C31 CC4＝C(C5＝NON＝C5N)OC6＝CN＝C(NCCCO)C＝C64 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝NC(OC4＝CC＝CC(O)＝C4)＝NC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝NC(OC8＝CC＝CC(O)＝C8)＝NC＝C7S6 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝NC(OCCCO)＝NC＝C3S2)＝CC＝N1 NC4＝NON＝C4C5＝C(CC)C6＝NC(OCCCO)＝NC＝C6S5 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N)C4＝CC＝CC(OC)＝C4)＝CC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N)C8＝CC＝CC(OC)＝C8)＝CC＝C7S6 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N)C4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N)C8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CC＝C7S6 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N)C4＝CC＝CC(OC)＝C4)＝NC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N)C8＝CC＝CC(OC)＝C8)＝NC＝C7S6 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N)C4＝CC＝CC(O)＝C4)＝NC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N)C8＝CC＝CC(O)＝C8)＝NC＝C7S6 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(C(N)C4＝CC＝CC(O)＝C4)C＝C31 CC5＝C(C6＝NON＝C6N)SC7＝CN＝C(C(N)C8＝CC＝CC(O)＝C8)C＝C75 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N)C4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CC＝C3O2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N)C8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CC＝C7O6 NC1＝NC(C2＝C(CC)C3＝CC(C(N(C)C)C4＝CC＝CC(O)＝C4)＝CC＝C3S2)＝CC＝N1 NC5＝NON＝C5C6＝C(CC)C7＝CC(C(N(C)C)C8＝CC＝CC(O)＝C8)＝CC＝C7S6 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CN＝C(C(N4CCOCC4)C5＝CC＝CC(O)＝C5)C＝C31 CC6＝C(C7＝NON＝C7N)SC8＝CN＝C(C(N9CCOCC9)C％10＝CC＝CC(O)＝C％10)C＝C86 CC1＝C(C2＝CC＝NC(N)＝N2)SC3＝CC＝C(C(N4CCNCC4)C5＝CC＝CC(O)＝C5)C＝C31 CC6＝C(C7＝NON＝C7N)SC8＝CC＝C(C(N9CCNCC9)C％10＝CC＝CC(O)＝C％10)C＝C86 在下列測(cè)定中闡述了實(shí)施例1-570中的化合物作為Rho激酶抑制劑的活性。預(yù)期上文列出的其他化合物(其尚未制得或測(cè)試)在此測(cè)定中也具有活性。
生物活性測(cè)定 體外Rho激酶測(cè)定 下文描述的Rho激酶生物化學(xué)測(cè)定依賴于與底物和ATP溫育后該激酶消耗的總ATP的基于螢火蟲螢光素酶的間接測(cè)量。將含有0.82μg/ml重組的N-末端GST-標(biāo)記的人類Rho激酶1(ROCK1，氨基酸1-535，InvitrogenInc.，目錄號(hào)PV-3691)或重組的N-末端GST-標(biāo)記的人類Rho激酶2(ROCK2，氨基酸1-552，Invitrogen Inc.，目錄號(hào)PV3759)、100μg/ml S6肽底物(與人類40S核糖體蛋白質(zhì)S6的氨基酸218-249有關(guān)，且適合用于ROCK1或ROCK2，例如Upstate/Millipore Inc.，目錄號(hào)12-420)和3μM ATP的25μl Rho激酶測(cè)定緩沖液(20mM Tris-HCL[pH 7.5]、10mM MgCl2、0.4mM CaCl2、0.15mM EGTA、0.1mg/ml牛血清白蛋白)分配至384多孔不透明板的孔中。所述板在約200xg下離心30秒。在DMSO中的240n1測(cè)試化合物通過被動(dòng)針轉(zhuǎn)移(passive pin transfer)分配至各個(gè)孔。此體外激酶反應(yīng)的滯后期允許在反應(yīng)引發(fā)后不久加入化合物。讓反應(yīng)在30℃下溫育2小時(shí)。密封測(cè)定板，并維持在濕潤(rùn)環(huán)境中。2小時(shí)后，分配25μl easylite蛋白激酶測(cè)定試劑(Perkin-Elmer，Inc.)。在室溫(約22℃)下再溫育10分鐘后，在Molecular Devices Analyst多模式平板讀取儀或其他合適的平板讀取儀上測(cè)量發(fā)光活性。激酶抑制導(dǎo)致更少的ATP消耗，因此增加發(fā)光信號(hào)。使用無任何測(cè)試化合物的DMSO測(cè)量陰性對(duì)照活性。陽(yáng)性對(duì)照是2-甲基-1-(4-甲基異喹啉-5-基磺酰基)全氫化-1，4-二氮雜

鹽酸化物(aka H-1152P，HCl鹽)。測(cè)量效能作為陽(yáng)性對(duì)照活性的百分?jǐn)?shù)。50％抑制的化合物濃度(IC50)通過劑量響應(yīng)測(cè)定來測(cè)量。在一些情況下，激酶反應(yīng)和化合物測(cè)試在1536多孔板中在類似的條件下進(jìn)行，按比例相應(yīng)調(diào)整測(cè)定體積。符號(hào)NT表示未測(cè)試的被引用的實(shí)施例。
表1.生物學(xué)活性 體內(nèi)測(cè)定 有意識(shí)食蟹猴的激光的(高血壓的)眼中的急性IOP響應(yīng) 可在用0.1％丙美卡因光學(xué)角膜麻醉(light corneal anesthesia)后使用阿爾孔氣動(dòng)測(cè)量?jī)x(Alcon Pneumatonometer)確定眼內(nèi)壓(IOP)。每次測(cè)量后用生理鹽水洗眼?；€IOP測(cè)量后，將測(cè)試化合物按30pL一等分份滴注至僅九只食蟹猴的右眼。將載體滴注至另外六只動(dòng)物的右眼。隨后的IOP測(cè)量在1、3和6小時(shí)進(jìn)行，IOP的峰值降低報(bào)告于下述表2中，作為IOP降低占化合物的每個(gè)給定濃度的對(duì)照的百分比。NT指示未在給定濃度測(cè)試該化合物。
表2.
本文使用的測(cè)定的更詳細(xì)的描述，可參見May等人的“Evaluation of theOcular Hypotensive Response of Serotonin 5-HT1A and 5-HT2Receptor Ligandsin Conscious Ocular Hypertensive Cynomolgus Monkeys”，J.of Pharmacologyand Experimental Therapeutics，第306(1)卷，第301-309頁(yè)(2003)，其公開內(nèi)容在此引作參考，如同將其完整寫入本文。
從上文的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地確定本發(fā)明的本質(zhì)特征，并可在不背離其主旨和范圍的情況下，進(jìn)行本發(fā)明的多種變化和修飾以使其適應(yīng)多種用法和條件。
權(quán)利要求
1.抑制Rho激酶的方法，其包括將Rho激酶與結(jié)構(gòu)式I的化合物或其鹽、酯或前藥接觸，
其中
A是任選取代的雜芳基；
G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基；
G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在；
m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；
n是0、1或2；
Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；?、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；?、芳基羧基、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且
R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
2.抑制Rho激酶的方法，其包括將Rho激酶與選自實(shí)施例1至571的化合物接觸。
3.在需要治療的患者中治療Rho激酶介導(dǎo)的疾病的方法，其包括給藥治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物或其鹽、酯或前藥，
其中
A是任選取代的雜芳基；
G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基；
G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在；
m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；
n是0、1或2；
Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；?、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；?、芳基羧基、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且
R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述Rho激酶介導(dǎo)的疾病選自咽峽炎、冠狀動(dòng)脈血管痙攣、心肌梗死、冠脈缺血、充血性心力衰竭、心臟同種異體移植物血管病變、靜脈移植病和血管再狹窄、缺血再灌注損傷、移植再灌注損傷、腦動(dòng)脈血管痙攣、中風(fēng)、腦缺血、原發(fā)性高血壓、肺動(dòng)脈高壓、腎性高血壓、繼發(fā)性高血壓病癥、動(dòng)脈粥樣硬化、支氣管哮喘、急性或慢性阻塞性肺疾病、急性或慢性炎性肺病、勃起功能障礙、神經(jīng)變性病癥、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、腦或脊髓損傷、疾病或創(chuàng)傷相關(guān)的神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛、自身免疫性疾病、慢性肌肉骨骼炎性疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、慢性炎性腸病、局限性腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、急性或慢性炎性痛、骨質(zhì)疏松、骨疾病、癌癥、病理性血管生成疾病和眼科疾病。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述Rho激酶介導(dǎo)的疾病是眼科疾病。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述眼科疾病選自升高的眼內(nèi)壓和青光眼。
7.在需要治療的患者中治療Rho激酶介導(dǎo)的疾病的方法，其包括給藥治療有效量的選自實(shí)施例1至571的化合物。
8.治療Rho激酶介導(dǎo)的疾病的方法，其包括給藥
a.治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物或其鹽、酯或前藥，
其中
A是任選取代的雜芳基；
G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基；
G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在；
m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；
n是0、1或2；
Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；?、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；?、芳基羧基、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且
R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；和
b.另一治療劑。
9.用于下述用途的方法
a.減少人類胚胎干細(xì)胞的凋亡；
b.增加人類胚胎干細(xì)胞的存活；
c.增加人類胚胎干細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)移后的克隆率；和
d.加強(qiáng)培養(yǎng)的人類胚胎干細(xì)胞的分化
所述方法的任何一種均包括將至少一個(gè)人類胚胎干細(xì)胞與有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物或其鹽、酯或前藥接觸，
其中
A是任選取代的雜芳基；
G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基；
G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在；
m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；
n是0、1或2；
Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、酰基、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；⒎蓟然?、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且
R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
10.結(jié)構(gòu)式I的化合物或其鹽、酯或前藥，
其中
A是任選取代的雜芳基；
G1是任選取代的稠合雙環(huán)雜芳基；
G2選自(CRaRb)mZ(CRcRd)p以及不存在；
m和p獨(dú)立地為0、1、2、3或4；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、N(Re)SO2、SO2N(Re)、C(O)、任選取代的環(huán)烷基以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；
n是0、1或2；
Ra、Rb、Rc和Rd獨(dú)立地選自氫、烷基、氨基、氨基烷基、酰氨基烷基、氨基烷基羧基、羧基烷基、鹵代、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、羥烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基烷基羧基；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、?；Ⅳ然?、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；?、芳基羧基、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；且
R1選自烷基、烷基羰基、亞烷基、炔基、氨基、烷基氨基、羰基、環(huán)烷基、酯、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
11.如權(quán)利要求10所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中
A選自含有至少一個(gè)環(huán)氮的任選取代的單環(huán)5至6元雜芳基或包含與六元環(huán)稠合的五元環(huán)并且含有至少一個(gè)環(huán)氮的任選取代的雙環(huán)雜芳基。
12.如權(quán)利要求11所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中G1選自
X1是N或C(R6)；
X2是N或C(R7)；
X3是N或C(R8)；
X4是N或C(R9)；
X5是N或C(R10)；
X6是N或C(R11)；
X7是N或C(R12)；
X8是N或C(R13)；
X9是N或C(R14)；
X10是N或C(R15)；
Y是O或S；且
R4-R15獨(dú)立地選自氫、鹵素、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、低級(jí)鹵代烷基、?；?、氨基、羧基、氰基和硝基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中A選自
其中任何一個(gè)均可被任選地取代。
14.如權(quán)利要求13所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中
G2是(CRaRb)mZ(CRcRd)p；
m和p獨(dú)立地為0、1或2；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、C(O)以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；且
n是0或2。
15.如權(quán)利要求14所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中G1是
16.如權(quán)利要求15所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中A選自
17.如權(quán)利要求16所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其具有結(jié)構(gòu)式II或其鹽、酯或前藥，
其中
Y是O或S；
G2是(CRaRb)mZ(CRcRd)p；
m和p獨(dú)立地為0、1或2；
Z選自O(shè)、N(R1)、S(O)n、N(Re)CO、CON(Re)、C(O)以及不存在；
Re選自氫和任選取代的C1-C4烷基；且
n是0或2；
G3選自低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、酰基、羧基、磺酰胺、羥基以及不存在，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
G4選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、氨基、氨基烷基、酰氨基、酰氨基烷基、烷基酰氨基、氨基烷基羧基、羧基、烷基羧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基羰基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基酰氨基、芳基、芳基烷氧基、芳基酰氨基、芳基烷基、芳基?；?、芳基羧基、雜芳基烷基和脲，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代；
R16選自低級(jí)烯基、炔基、低級(jí)烷基、烷硫基、鹵代烷基、雜烷基、羥烷基、鹵素和氫；且
R17-R19獨(dú)立地選自?；?、低級(jí)烯基、炔基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基烷基、低級(jí)烷基、烷硫基、酰氨基、氨基、氨基烷基、氨基羰基、羧基、鹵代烷基、羥烷基和氫，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
18.如權(quán)利要求17所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中
Y是S；
R16選自低級(jí)烷基和氫；且
R17-R19全部為氫。
19.如權(quán)利要求18所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中G3選自芳基、雜環(huán)烷基、雜芳基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
20.如權(quán)利要求19所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中或者
m和p均是0；且
Z選自O(shè)、NH、S和C(O)；
或者
m是1；
Z不存在；且
p是0。
21.如權(quán)利要求20所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中R16選自甲基、乙基、雜烷基和鹵素。
22.如權(quán)利要求21所述的化合物或其鹽、酯或前藥，其中G4選自氫、鹵素、烷氧基、氨基、烷基酰氨基、羧基、烷基羧基、雜環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基烷氧基、雜環(huán)烷基烷基羧基和雜環(huán)烷基烷基酰氨基，它們中任何一個(gè)均可被任選地取代。
23.化合物，其選自實(shí)施例3-93和95-571。
24.如權(quán)利要求10所述的化合物，其用作藥物。
25.如權(quán)利要求10所述的化合物，其用于制備用于預(yù)防或治療通過抑制Rho激酶進(jìn)行改善的疾病或疾患的藥物。
26.藥物組合物，其包含權(quán)利要求10所述的化合物和藥學(xué)可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作Rho激酶抑制劑用于治療或預(yù)防疾病的化合物和方法。
文檔編號(hào)C07D407/04GK101790527SQ200780035062
公開日2010年7月28日 申請(qǐng)日期2007年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月20日
發(fā)明者穆罕德默·卡爾曼, 艾倫·J.·博爾夏特, 特拉維斯·G.·庫(kù)克, 羅伯特·L.·戴維斯, 伊麗莎白·M.m.·加爾迪內(nèi), 詹姆斯·W.·馬萊哈, 斯圖爾特·A.·諾布爾, 托馬斯·J.·普林斯 申請(qǐng)人:凱利普西斯公司