專利名稱：作為akt蛋白激酶抑制劑的環(huán)戊二烯并[d]嘧啶的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明的優(yōu)先權(quán)
本申請要求以美國臨時(shí)申請No.60/818,762(2006年7月6日申請)為優(yōu)先權(quán)，其在此以其全部與本文結(jié)合作為參考。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及新的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(例如，AKT和相關(guān)激酶)抑制劑，包含該抑制劑的藥物組合物，和用于制備該抑制劑的方法。該抑制劑可有效用于例如治療哺乳動物的過度增生性疾病例如癌癥和炎癥。
現(xiàn)有技術(shù)的說明 蛋白激酶(PK)是通過轉(zhuǎn)移ATP上的末端(γ)磷酸酯，催化蛋白的酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基上羥基的磷酸化的酶。通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，這些酶調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化和增殖，即細(xì)胞周期的幾乎所有方面均取決于PK活性(Hardie，G.和Hanks，S.(1995)The Protein Kinase Facts Book.I and II，Academic Press，San Diego，CA)。此外，PK活性異常與許多病癥有關(guān)，范圍從相對無生命危險(xiǎn)的疾病例如牛皮癬至極其致命的疾病例如惡性膠質(zhì)瘤(腦癌)。蛋白激酶是治療調(diào)節(jié)的重要靶向類別(Cohen，P.(2002)Nature Rev.Drug Discovery1309)。
顯著的是，非典型性蛋白磷酸化和/或表達(dá)常常報(bào)道為癌癥中的異常細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移病變和細(xì)胞存活的成因之一。多種激酶(包括Akt、VEGF、ILK、ROCK、p70S6K、Bcl、PKA、PKC、Raf、Src、PDK1、ErbB2、MEK、IKK、Cdk、EGFR、BAD、CHK1、CHK2和GSK3等)的異常調(diào)節(jié)和/或表達(dá)，特別與癌癥有關(guān)。
蛋白激酶包括兩種類型蛋白酪氨酸激酶(PTK)和絲氨酸-蘇氨酸激酶(STK)。蛋白激酶B/Akt酶是一組在多種人腫瘤中過表達(dá)的絲氨酸/蘇氨酸激酶。PI3K脂質(zhì)產(chǎn)物的一個(gè)最好表征的靶點(diǎn)是57KD絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Akt，在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的PI3K的下游(Hemmings，B.A.(1997)Science275628；Hay N.(2005)Cancer Cell 8179-183)。Akt是急劇轉(zhuǎn)化逆轉(zhuǎn)錄病毒AKT8的人類原癌基因v-akt的同系物。由于其與激酶A和C的高序列同源性，Akt也被稱為蛋白激酶B(PKB)，并且與A和C(RAC)有關(guān)。已經(jīng)知道Akt存在三種同工型，即Akt1、Akt2和Akt3，其顯示出整個(gè)同源性的80％(Staal，S.P.(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.845034；Nakatani，K.(1999)Biochem.Biophys.Res.Commun.257906；Li等人，(2002)Current Topics inMed.Chem.2939-971；WO 2005/113762)。Akt同工型共享由N-末端的普列克底物蛋白(pleckstrin)同源區(qū)域、激酶催化區(qū)域和C末端的短調(diào)節(jié)區(qū)組成的共同區(qū)域結(jié)構(gòu)。此外，Akt2和Akt3顯示出剪接變體。一旦通過PtdInd(3，4，5)P3對細(xì)胞膜進(jìn)行補(bǔ)充，Akt分別在T308、T309和T305處被PDK1磷酸化(活化)為異構(gòu)型Akt1(PKBα)、Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)，以及分別在S473、S474和S472處被磷酸化(活化)為同工型Akt1、Akt2和Akt3。通過至今未知的激酶(推定地命名為PDK2)發(fā)生這種磷酸化，不過已經(jīng)顯示PDK1(Balendran，A.，(1999)Curr.Biol.9393)，自身磷酸化作用(Toker，A.(2000)J.Biol.Chem.2758271)和整聯(lián)蛋白-連接的激酶(ILK)(Delcommenne，M.(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9511211)和這種過程有關(guān)。Akt活化需要其在C端疏水性基序中的殘基Ser 473上的磷酸化(Brodbeck等人，(1999)J.Biol.Chem.2749133-9136；Coffer等人，(1991)Eur.J.Biochem.201475-481；Alessi等人，(1997)Curr.Biol.7261-269)。盡管Akt的單磷酸化可以活化激酶，但雙(磷酸化)是最大激酶活性所需要的。
認(rèn)為Akt通過抑制細(xì)胞凋亡以及增加血管生成和增殖來實(shí)現(xiàn)對癌癥的作用(Toker等人，(2006)Cancer Res.66(8)3963-3966)。Akt在許多人類癌癥類型過表達(dá)，其包括，但不限于，結(jié)腸癌(Zinda等人，(2001)Clin.Cancer Res.72475)、卵巢癌(Cheng等人，(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 899267)、腦癌(Haas Kogan等人，(1998)Curr.Biol.81195)、肺癌(Brognard等人，(2001)Cancer Res.613986)、胰腺癌(Bellacosa等人，(1995)Int.J.Cancer 64280-285；Cheng等人，(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.933636-3641)、前列腺癌(Graff等人，(2000)J.Biol.Chem.27524500)和胃癌(Staal等人，(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 845034-5037)。
對于靶向的小分子抑制劑治療，已經(jīng)探究了雷帕霉素(mTOR)路徑的PI3K/Akt/哺乳動物靶點(diǎn)(Georgakis，G.和Younes，A.(2006)Expert Rev.Anticancer Ther.6(1)131-140；Granville等人，(2006)Clin.Cancer Res.12(3)679-689)。抑制PI3K/Akt信號可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且可以抑制具有Akt水平增加的腫瘤細(xì)胞的生長(Kim等人，(2005)Current Opinion in Investig.Drugs 6(12)1250-1258；Luo等人，(2005)Molecular Cancer Ther.4(6)977-986)。
靶向異常調(diào)節(jié)途徑并最終導(dǎo)致疾病的激酶抑制劑的開發(fā)，對于醫(yī)學(xué)和藥學(xué)團(tuán)體，具有巨大的倫理和商業(yè)利益。抑制下列的化合物可以是有價(jià)值的抗癌劑(1)Akt對細(xì)胞膜的補(bǔ)充，(2)被PDK1或PDK2活化，(3)底物磷酸化，或(4)Akt的下游靶點(diǎn)之一，其既可以作為單獨(dú)療法，也可以與其它可接受方法結(jié)合使用。
美國專利申請2005/0130954尤其公開了作為AKT抑制劑的多種化合物。據(jù)稱這些化合物可用于治療過度增生性疾病(hyperproliferative disease)，例如癌癥。
本發(fā)明概述 本發(fā)明提供了抑制AKT蛋白激酶的新的化合物。本發(fā)明的化合物具有作為疾病和病癥的治療劑的用途，該疾病和病癥可以通過抑制AKT蛋白激酶來得到治療。
本發(fā)明包括具有通式I的化合物
和其對映異構(gòu)體和鹽，其中A、R1、R1a、R2、R2a和R5如下面所定義。本發(fā)明的另外方面包括具有通式Ia的化合物
和其互變異構(gòu)體、拆分的對映異構(gòu)體、拆分的非對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物、鹽和可藥用前藥，其中R1、R2、R2a和R5如下面所定義。
本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式I或Ia的化合物，或其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽或前藥。
在另一方面，本發(fā)明提供了治療哺乳動物中AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法，包括向所述哺乳動物以有效治療或預(yù)防所述病癥的量給藥一種或多種式I或Ia的化合物，或其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽或前藥?？梢园凑毡景l(fā)明方法治療的AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥包括，但不限于，炎性、過度增生性、心血管、神經(jīng)變性、婦科和皮膚疾病和病癥。
在另一方面，本發(fā)明提供了抑制哺乳動物中AKT蛋白激酶產(chǎn)生的方法，該方法包括向所述哺乳動物以有效抑制AKT蛋白激酶產(chǎn)生的量給藥一種或多種式I或Ia的化合物，或其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽或前藥。
在另一方面，本發(fā)明提供了抑制AKT蛋白激酶活性的方法，包括將所述激酶與式I或Ia的化合物接觸。
本發(fā)明的化合物可以有利地與其它已知的治療劑組合使用。因此，本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含式I或Ia的化合物或其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽或前藥，以及第二治療劑。
本發(fā)明還提供了式I或Ia的化合物及其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物和可藥用鹽或前藥，其在治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥中用作藥物。
本發(fā)明的其它方面是式I或Ia的化合物或其對映異構(gòu)體、溶解合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽和前藥在治療中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，該治療包括AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥的治療。
本發(fā)明還提供了試劑盒，其用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或病癥，所述試劑盒包括式I或Ia的化合物或其對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物或可藥用鹽或前藥，容器和任選的包裝說明書或注明治療的標(biāo)簽。該試劑盒還可以包括第二化合物或制劑，所述第二化合物或制劑包括用于治療所述疾病或病癥的第二藥劑。
本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的制備方法、分離方法和純化方法。
在下列描述中部分地列出了本發(fā)明的其它優(yōu)勢和新性能，并且部分可通過閱讀本發(fā)明書對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，或可以從本發(fā)明的操作中得知。本發(fā)明的優(yōu)勢可通過所附權(quán)利要求書中特別指出的手段、組合、組合物和方法實(shí)現(xiàn)和獲得。
發(fā)明詳述 現(xiàn)在，對于本發(fā)明的某些實(shí)施方案詳細(xì)地進(jìn)行介紹，其例子在隨附的結(jié)構(gòu)和通式中示例性地說明。盡管本發(fā)明結(jié)合所列舉的實(shí)施方案來進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這并不意味著將本發(fā)明限制于那些實(shí)施方案。相反，本發(fā)明包括可以包含在權(quán)利要求書所定義范圍內(nèi)的所有的替換、改進(jìn)和等效內(nèi)容。本領(lǐng)域技術(shù)人員會認(rèn)識到與本文所描述的那些相似的許多方法和物質(zhì)或等效物，其可以在本發(fā)明的實(shí)踐中使用。本發(fā)明決不限于所述的方法和物質(zhì)。如果一個(gè)或多個(gè)所引用的文獻(xiàn)和類似的材料不同于或與本申請相矛盾，包括但不限于所定義的術(shù)語、術(shù)語用法、所述技術(shù)等，以本申請為準(zhǔn)。
定義 本文使用的術(shù)語“烷基”是指1至12個(gè)碳原子的飽和直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)如下所述的取代基獨(dú)立地取代。烷基的實(shí)例包括，但不限于，甲基(Me、-CH3)、乙基(Et、-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、正丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、異丙基、-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu、正丁基、-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、異丁基、-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu、仲丁基、-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔丁基、-C(CH3)3)、2，2-二甲丙基(CH2C(CH3)3)、1-戊基(正戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2，3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3，3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基、1-辛基等。
本文使用的術(shù)語“亞烷基”是指1至12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和二價(jià)烴基，其中亞烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代。實(shí)例包括，但不限于，亞甲基、亞乙基、亞丙基、2-甲基亞丙基、亞戊基等。
本文使用的術(shù)語“烯基”是指2至12個(gè)碳原子、且具有至少一個(gè)不飽和位置(即碳-碳sp2雙鍵)的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中烯基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代，并且包括具有“順式”和“反式”取向或“E”和“Z”取向的基團(tuán)。實(shí)例包括，但不限于，乙烯基(ethylenyl)或乙烯基(vinyl)(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)、1-丙烯基、1-丁烯-1-基、1-丁烯-2-基等。
本文使用的術(shù)語“炔基”是指2至12個(gè)碳原子、且具有至少一個(gè)不飽和位置(即碳-碳sp叁鍵)的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中炔基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文所述的取代基獨(dú)立地取代。實(shí)例包括，但不限于，乙炔基(-C≡CH)和丙炔基(炔丙基，-CH2C≡CH)。
本文使用的術(shù)語“環(huán)烷基”、“碳環(huán)(carbocycle)”、“碳環(huán)基(carbocyclyl)”和“碳環(huán)(carbocyclic ring)”可交換使用，并且指的是具有3至12個(gè)碳原子的飽和或部分不飽和的環(huán)狀烴基。術(shù)語“環(huán)烷基”包括單環(huán)和多環(huán)(例如，雙環(huán)和三環(huán))的環(huán)烷基結(jié)構(gòu)，其中多環(huán)結(jié)構(gòu)任選包含與飽和、部分不飽和或芳香環(huán)烷基或雜環(huán)稠合的飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)。環(huán)烷基的實(shí)例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。雙環(huán)碳環(huán)包括具有7至12個(gè)環(huán)原子的那些，例如，雙環(huán)[4，5]，[5，5]，[5，6]或[6，6]體系，或橋聯(lián)體系，例如雙環(huán)[2.2.1]庚烷，雙環(huán)[2.2.2]辛烷和雙環(huán)[3.2.2]壬烷。環(huán)烷基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
術(shù)語″(C3-C6-環(huán)烷基)-(CH2)″包括環(huán)丙基-CH2、環(huán)戊基-CH2和環(huán)己基-CH2。
術(shù)語″羥基(C1-C8烷基)″包括被羥基取代的1-8個(gè)碳的烷基。所述羥基可以取代在烷基的任何位置上。實(shí)例包括，但不限于CH2OH、CH2CH2OH、CH2CH(OH)CH3、CH2CH2CH2OH等。
本文使用的“芳基”是指6-20個(gè)碳原子的一價(jià)芳香烴基，其通過從母體芳香環(huán)體系的單一碳原子上除去一個(gè)氫原子而得到。芳基包括包含與飽和、部分不飽和的環(huán)，或芳香碳環(huán)或雜環(huán)稠合的芳環(huán)的雙環(huán)基團(tuán)。示例性的芳基包括，但不限于，衍生自下列的基團(tuán)苯、萘、蒽、聯(lián)苯、茚、茚滿、1，2-二氫萘、1，2，3，4-四氫萘等。芳基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
本文使用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”和“雜環(huán)狀環(huán)”可交換地使用，并且指的是3至8個(gè)環(huán)原子的飽和或部分不飽和的碳環(huán)基團(tuán)，且其中至少一個(gè)環(huán)原子是獨(dú)立地選自氮、氧和硫的雜原子，剩余的環(huán)原子是C，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子可以任選被一個(gè)或多個(gè)如下所述取代基獨(dú)立地取代。該基團(tuán)可以是碳原子基團(tuán)或雜原子基團(tuán)。術(shù)語“雜環(huán)”包括雜環(huán)烷氧基(heterocycloalkoxy)?！半s環(huán)基”還包括其中雜環(huán)基團(tuán)與飽和、部分不飽和或芳香碳環(huán)或雜環(huán)稠合的基團(tuán)。雜環(huán)的實(shí)例包括，但不限于，吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基、嗎啉代、硫嗎啉代(thiomorpholino)、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、高哌啶基、氧雜環(huán)庚烷基、硫雜環(huán)庚烷基、氧雜氮雜

基、二氮雜

基、硫雜氮雜

基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧雜環(huán)戊烷基、吡唑啉基、二硫雜環(huán)己烷基(dithianyl)、二硫雜環(huán)戊烷基(dithiolanyl)、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己基、3-氮雜雙環(huán)[4.1.0]庚基、氮雜雙環(huán)[2.2.2]己基、3H-吲哚基、喹嗪基和N-吡啶基脲。螺部分也包括在該定義范圍內(nèi)。如果可以的話，雜環(huán)可以進(jìn)行C連接或N-連接。例如，衍生自吡咯的基團(tuán)可以是吡咯-1-基(N-連接)或吡咯-3-基(C-連接)。此外，衍生自咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基(N-連接)或咪唑-3-基(C-連接)。其中2個(gè)環(huán)碳原子被氧代(＝O)部分取代的雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例是異二氫吲哚-1，3-二酮基和1，1-二氧代-硫嗎啉基。本文的雜環(huán)基團(tuán)可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
本文使用的術(shù)語“雜芳基”是指包含至少一個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧和硫雜原子的5-、6-或7-元環(huán)的一價(jià)芳基，并且包括5-10個(gè)原子的稠環(huán)體系(其中至少一個(gè)是芳香性的)。雜芳基的實(shí)例包括，但不限于，吡啶基、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基(indolizinyl)、酞嗪基(phthalazinyl)、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。螺環(huán)部分也包括在該定義范圍內(nèi)。雜芳基可以任選被一個(gè)或多個(gè)本文描述的取代基獨(dú)立地取代。
例如(非限制性)，碳連接的雜環(huán)和雜芳基是在吡啶的2、3、4、5或6位、噠嗪的3、4、5或6位、嘧啶的2、4、5或6位、吡嗪的2、3、5或6位、呋喃、四氫呋喃、噻吩(thiofuran)、硫茂(thiophene)、吡咯或四氫吡咯的2、3、4或5位、噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位、異噁唑、吡唑或異噻唑的3、4或5位、氮雜環(huán)丙烷的2或3位、氮雜環(huán)丁烷的2、3或4位、喹啉的2、3、4、5、6、7或8位，或異喹啉的1、3、4、5、6、7或8位連接。碳連接的雜環(huán)的其它實(shí)例包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-噠嗪基、4-噠嗪基、5-噠嗪基、6-噠嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。
例如(非限制性)，氮連接的雜環(huán)和雜芳基是在氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、二氫吡唑、2-二氫吡唑、3-二氫吡唑、哌啶、哌嗪、吲哚、二氫吲哚、1H-吲唑的1位、異吲哚或異二氫吲哚的2位、嗎啉的4位和咔唑或β-咔啉的9位連接。更加典型地，氮連接的雜環(huán)包括1-氮雜環(huán)丙烷基、1-氮雜環(huán)丁烷基、1-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-哌啶基。
本文使用的術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
本文使用的術(shù)語“a”是指一個(gè)或多個(gè)。
本文使用的術(shù)語“該發(fā)明的化合物”、“本發(fā)明的化合物”和“式I或Ia的化合物”包括式I或Ia的化合物及其互變異構(gòu)體、拆分的對映異構(gòu)體、拆分的非對映異構(gòu)體、外消旋混合物、溶劑合物、代謝產(chǎn)物和鹽(包括可藥用鹽)和可藥用前藥。
應(yīng)當(dāng)理解，在順序使用兩個(gè)或多個(gè)基團(tuán)來定義連接結(jié)構(gòu)的取代基的情況下，認(rèn)為第一個(gè)命名的基團(tuán)是端部基團(tuán)，認(rèn)為最后命名的基團(tuán)與所述結(jié)構(gòu)相連接。由此，例如，芳烷基基團(tuán)通過烷基與所述結(jié)構(gòu)相連接。
AKT抑制劑 本發(fā)明的式I或Ia化合物用于抑制AKT蛋白激酶。除了AKT之外，式I或Ia的化合物還可以用作酪氨酸激酶以及絲氨酸和蘇氨酸激酶的抑制劑。這種化合物具有作為疾病治療劑的用途，該疾病可以通過抑制AKT蛋白激酶信號傳導(dǎo)通路和酪氨酸和絲氨酸/蘇氨酸激酶受體通路來得到治療。
通常，本發(fā)明包括式I的化合物和其互變異構(gòu)體、拆分的對映異構(gòu)體、拆分的非對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物、鹽和可藥用前藥，
其中 R1和R1a獨(dú)立地選自H，Me，Et，CH＝CH2，CH2OH，CF3，CHF2或CH2F； R2和R2a獨(dú)立地選自H或F； R5是H，Me，Et或CF3； A是
G是任選被一個(gè)至四個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基或任選被鹵素取代的5-6元單環(huán)或9元雙環(huán)雜芳基； R6和R7獨(dú)立地是H，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)，V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)，W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me取代的苯基)，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，氟-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，4-6元雜環(huán)(其任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代)，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代OH，氧代基團(tuán)，O(C1-C6-烷基)，CN，F(xiàn)，NH2，NH(C1--C6-烷基)，N(C1-C6-烷基)2，四氫吡喃基，四氫呋喃基，嗎啉基，氧雜環(huán)丁烷基，哌啶基和吡咯烷基， 或R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代； Ra和Rb是H， 或Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； Rc和Rd是H或Me，或 Rc和Rd與它們相連接的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)； R8是H，Me或OH， 或R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； 每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素，C1-C6-烷基，C3-C6-環(huán)烷基，O-(C1-C6-烷基)，CF3，OCF3，S(C1-C6-烷基)，CN，OCH2-苯基，CH2O-苯基，NH2，NO2，NH-(C1-C6-烷基)，N-(C1-C6-烷基)2，哌啶，吡咯烷，CH2F，CHE2，OCH2F，OCHF2，OH，SO2(C1-C6-烷基)，C(O)NH2，C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和 m、n和p獨(dú)立地是0或1。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式Ia的化合物和其互變異構(gòu)體、拆分的對映異構(gòu)體、拆分的非對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物、鹽和可藥用前藥，
其中 R1是H，Me，Et，CF3，CHF2或CH2F； R2和R2a是H或F； R5是H，Me，Et或CF3； A是
G是任選被一個(gè)至四個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基； R6和R7獨(dú)立地是H，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)，V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)，W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基)，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，氟-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代OH，O(C1-C6-烷基)，CN，F(xiàn)，NH2，NH(C1-C6-烷基)，N(C1-C6-烷基)2，哌啶基和吡咯烷基， 或R6和R7與它們相連接的氮一起形成4-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代； Ra和Rb是H， 或Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； Rc和Rd是H或Me； R8是H，Me或OH， 或R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)； 每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素，C1-C6-烷基，C3-C6-環(huán)烷基，O-(C1-C6-烷基)，CF3，OCF3，S(C1-C6-烷基)，CN，CH2O-苯基，NH2，NH-(C1-C6-烷基)，N-(C1-C6-烷基)2，哌啶，吡咯烷，CH2F，CHF2，OCH2F，OCHF2，OH，SO2(C1-C6-烷基)，C(O)NH2，C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和 m、n和p獨(dú)立地是0或1。
關(guān)于式I或Ia的G基團(tuán)，實(shí)例包括任選被一個(gè)或多個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基，R9基團(tuán)獨(dú)立地選自F，Cl，Br，CN，甲基，乙基，異丙基，OCH3，OCH2CH3，CF3，OCF3，SCH3，OCH2Ph和環(huán)丙基。示范性的實(shí)施方案包括但不局限于苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基，2-氟苯基，3-氟苯基，4-氟苯基，2-溴苯基，3-溴苯基，4-溴苯基，2-甲基苯基，3-甲基苯基，4-甲基苯基，2-乙基苯基，3-乙基苯基，4-乙基苯基，2-異丙基苯基，3-異丙基苯基，4-異丙基苯基，2-三氟甲基苯基，3-三氟甲基苯基，4-三氟甲基苯基，2-氰基苯基，3-氰基苯基，4-氰基苯基，2-甲氧基苯基，3-甲氧基苯基，4-甲氧基苯基，2-乙氧基苯基，3-乙氧基苯基，4-乙氧基苯基，2-甲硫基苯基(2-thiomethylphenyl)，3-甲硫基苯基，4-甲硫基苯基，2-三氟甲氧基苯基，3-三氟甲氧基苯基，4-三氟甲氧基苯基，2-環(huán)丙基苯基，3-環(huán)丙基苯基，4-環(huán)丙基苯基，4-氯-3-氟苯基，3，4-二氟苯基，4-溴-3-氟苯基，3-氟-4-甲基苯基，3-氟-4-甲氧基苯基，3-氟-4-三氟甲基苯基，4-氰基-3-氟苯基，3，4-二氯苯基，2，4-二氯苯基，2，4-二氟苯基，2-氯-4-氟苯基，2-氟-4-氯苯基，3，5-二氯苯基，3，5-二氟苯基，3-氯-5-氟苯基，3-氯-4-氟苯基，3-溴-4-氟苯基，3，5-二氟-4-氯苯基，2，3-二氟-4-氯苯基，2，5-二氟-4-氯苯基，3，5-二氟-4-溴苯基，2，3-二氟-4-溴苯基，2，5-二氟-4-溴苯基和4-(OCH2Ph)-苯基。
式I或Ia的G基團(tuán)的其它例子包括當(dāng)R9獨(dú)立地選自I、NO2和叔丁基時(shí)的基團(tuán)。示范性的實(shí)施方案包括4-碘苯基、4-硝基苯基和4-叔丁基苯基。
關(guān)于式I的G基團(tuán)，短語“任選被鹵素取代的5-6元單環(huán)或9元雙環(huán)雜芳基”包括任選被鹵素取代的噻吩、吡啶和吲哚。具體例子包括但不局限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“(C3-C6-環(huán)烷基)-(CH2)”包括環(huán)丙基-CH2，環(huán)丁基-CH2，環(huán)戊基-CH2和環(huán)己基-CH2。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“V-(CH2)0-1”包括但不局限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，術(shù)語“羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)”包括但不局限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、OMe和CN的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基”包括但不局限于CH2OH，CH2CH2OH，CH2CH2CH2OH，CH2CH(OH)CH2，CH2CH2CH(OH)CH3，CH2C(OH)(CH3)2，CH2OMe，CH2CH2OMe，CH2CH2CH2OMe，CH2CH(OMe)CH2，CH2CH2CH(OMe)CH3，CH2C(OMe)(CH3)2，CH2CN，CH2CH2CN，CH2CH2CH2CN，CH2CH(CN)CH2，CH2CH2CH(CN)CH3，CH2C(CN)(CH3)2等。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，在某些實(shí)施方案中，術(shù)語“雜芳基”是指具有一個(gè)至兩個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S雜原子的5-6元雜芳基。
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“R6和R7與它們相連接的氮一起形成任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代的3-6元雜環(huán)”包括但不局限于下列結(jié)構(gòu)
關(guān)于式I或Ia的R6和R7基團(tuán)，短語“任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代的4-6元雜環(huán)”包括但不局限于下列結(jié)構(gòu)
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R2a是H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2和R2a是F。
在式I或Ia的另一個(gè)實(shí)施方案中，R2是H，R2a是F。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R5是H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5是甲基，其中所述甲基任選是(S)構(gòu)型。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5是乙基。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是甲基，其中所述甲基任選是(R)構(gòu)型。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1a是氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1和R1a獨(dú)立地選自氫，甲基，乙基，CH＝CH2(乙烯基)和CH2OH。在具體實(shí)施方案中，R1是甲基且R1a是氫，R1是乙基且R1a是氫，R1是CH＝CH2且R1a是氫，R1是CH2OH且R1a是氫，或R1和R1a兩個(gè)都是甲基。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是CH2OH。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是(R)構(gòu)型的CH2OH。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是(S)構(gòu)型的CH2OH。在另外的實(shí)施方案中，R1a可以是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是CH＝CH2。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是(R)構(gòu)型的CH＝CH2。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是(S)構(gòu)型的CH＝CH2。在另外的實(shí)施方案中，R1a可以是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是乙基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是(S)構(gòu)型的乙基。在另外的實(shí)施方案中，R1a可以是H。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，G是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代的苯基F，Cl，Br，Me，乙基，異丙基，CN，CF3，OCF3，SMe，OMe和CH2OPh。G的示范性實(shí)施方案包括苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基，4-氟苯基，4-溴苯基，4-甲基苯基，4-乙基苯基，4-異丙基苯基，4-三氟甲基苯基，4-氰基苯基，4-甲氧基苯基，4-乙氧基苯基，4-甲硫基苯基，4-三氟甲氧基苯基，4-環(huán)丙基苯基，4-氯-3-氟苯基，3，4-二氟苯基，4-溴-3-氟苯基，3-氟-4-甲基苯基，3-氟-4-甲氧基苯基，3-氟-4-三氟甲基苯基，4-氰基-3-氟苯基，3，4-二氯苯基，2，4-二氯苯基，2，4-二氟苯基，2-氯-4-氟苯基，2-氟-4-氯苯基，3，5-二氯苯基，3，5-二氟苯基，3-氯-5-氟苯基，3-氯-4-氟苯基，3-溴-4-氟苯基，3，5-二氟-4-氯苯基，2，3-二氟-4-氯苯基，2，5-二氟-4-氯苯基，3，5-二氟-4-溴苯基，2，3-二氟-4-溴苯基，2，5-二氟-4-溴苯基或4-(CH2OPh)-苯基。
在某些實(shí)施方案中，G是任選被一個(gè)或三個(gè)獨(dú)立地選自F、Cl、Br、OMe、CN和Me的基團(tuán)取代的苯基。在具體實(shí)施方案中，G選自4-氯苯基，2，4-二氯苯基，3，4-二氯苯基，4-氯-3-氟苯基，3-氯-4-氟苯基，3-氟-4-溴苯基，4-氟苯基，3，4-二氟苯基，2，4-二氟苯基、4-溴苯基，4-氯-2-氟苯基，4-甲氧基苯基，4-甲基苯基，4-氰基苯基和4-三氟甲基苯基。
在某些實(shí)施方案中，G是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自I、NO2、叔丁基和OCH2-苯基的基團(tuán)取代的苯基。在具體實(shí)施方案中，G選自4-碘苯基，4-硝基苯基，4-叔丁基苯基和4-(OCH2-苯基)苯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，G是2-氟苯基，3-三氟甲基苯基，2-氟-4-三氟甲基苯基，3-氟-4-三氟甲氧基苯基，3-氟-4-三氟甲基苯基或4-三氟甲氧基苯基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，G可以是任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代的5-6元單環(huán)雜芳基。在某些實(shí)施方案中，G可以是任選被鹵素取代的噻吩或吡啶。具體實(shí)施方案包括
在另一個(gè)實(shí)施方案中，G可以是任選被鹵素取代的9元雙環(huán)雜芳基。在某些實(shí)施方案中，G可以是任選被鹵素取代的吲哚。具體實(shí)施方案包括
在一個(gè)實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)，V-(CH2)0-1(其中V是5-6元雜芳基)，W-(CH2)1-2(其中W是任選被F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me取代的苯基)，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，氟-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代的4-6元雜環(huán)，或C1-C6-烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代OH，氧代基團(tuán)，O(C1-C6-烷基)，CN，F(xiàn)，NH2，NH(C1-C6-烷基)，N(C1-C6-烷基)2，四氫吡喃基，四氫呋喃基，嗎啉基，氧雜環(huán)丁烷基，哌啶基和吡咯烷基。
在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是H，(C3-C6-環(huán)烷基)-CH2，雜芳基-(CH2)，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，任選被C(＝O)CH3取代的5-6元雜環(huán)，或任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、氧代基團(tuán)、OMe、CN和F的基團(tuán)取代的(C1-6)-烷基。
在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是H。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、氧代基團(tuán)、CN或F的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基。在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是甲基，乙基，異丙基，-C(＝O)H，CH2CH2OH，CH2-tBu(新戊基)或CH2CF3。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)(C1-C6烷基)、OH、氧代基團(tuán)、CN或F的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是丙基，異丁基，叔丁基，3-戊基，CH(異丙基)2，CH2CH2CH2OH，CH(CH2CH2OH)2，CH2CH2OMe，CH(CH2CH2OMe)2，CH2CH2CH2OMe或CH2CN。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自四氫吡喃基、四氫呋喃基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、哌啶基和吡咯烷基的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基。在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2(四氫吡喃基)，CH2(四氫呋喃基)，CH2(嗎啉基)，CH2(氧雜環(huán)丁烷基)，CH2(哌啶基)或CH2(吡咯烷基)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自NH2、NH(C1-C6-烷基)或N(C1-C6-烷基)2的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基。在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2NH2，CH2CH2NH2，CH2NH(CH3)，CH2N(CH3)2或CH2N(CH3)(CH2CH3)。
在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2-環(huán)丙基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2-環(huán)丁基。
在具體實(shí)施方案中，R6和R7可以是CH2-(吡啶-3-基)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2-(吡啶-2-基)或CH2-(吡啶-4-基)。
在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是環(huán)己基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是環(huán)戊基。
在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是下列結(jié)構(gòu)之一
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2-苯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是4-羥基環(huán)己-1-基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH(CH3)CH(OH)苯基。
在其它實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代。在具體實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
在另一個(gè)實(shí)施方案中，NR6R7包括下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。在某些實(shí)施方案中，R7是H。在具體實(shí)施方案中，Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。
在某些實(shí)施方案中，R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。在某些實(shí)施方案中，R7是H。在具體實(shí)施方案中，R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。
在某些實(shí)施方案中，Rc和Rd獨(dú)立地是H或甲基。
在某些實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連接的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在式I或Ia的一個(gè)實(shí)施方案中，m是1，n是0，p是0，從而A由式1表示
其中G、R6、R7、R8、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，R8是H或OH。
在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連接的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R8是H或OH。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H，C3-C6-環(huán)烷基，雜芳基-(CH2)，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，或任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、OMe和CN的基團(tuán)取代的(C1-6)-烷基。在具體實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H，甲基，乙基，異丙基，異丁基，叔丁基，3-戊基，CH(異丙基)2，CH2CH2OH，CH2CH2CH2OH，CH(CH2CH2OH)2，CH2CH2OMe，CH(CH2CH2OMe)2，CH2CH2CH2OMe，CH2CN，CH2-環(huán)丙基，CH2-環(huán)丁基，CH2-tBu，環(huán)戊基，環(huán)己基，CH2-苯基，CH2-(吡啶-2-基)，CH2-(吡啶-3-基)，CH2-(吡啶-4-基)，4-羥基環(huán)己-1-基或CH(CH3)CH(OH)苯基。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被一個(gè)或多個(gè)F或氧代基團(tuán)取代的C1-C6-烷基。在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以是CH2CF3。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6和R7可以是-C(＝O)H。
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6或R7可以是任選被C(＝O)CH3取代的5-6元雜環(huán)。在具體實(shí)施方案中，R6或R7可以選自下列結(jié)構(gòu)
在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，NR6R7是NH2，NHMe，NHEt，NHPr，NHiPr，NHtBu，NH(CH2-tBu)，NH(CH2-環(huán)丙基)，NH(CH2-環(huán)丁基)，NH(環(huán)戊基)，NH(CH2-吡啶基)，NH(環(huán)己基)，NH(3-戊基)，NHCH(異丙基)2，NH(CH2CH2OH)，NH(CH2CH2CH2OH)，NH(CH2CH2OMe)，NH(CH2CH2CH2OMe)，NH(CH2CN)，NMe2，NMeEt，NMePr，NMe(iPr)，NMe(CH2-環(huán)丙基)，NMe(CH2-環(huán)丁基)，NMe(CH2CH2OH)，NMe(CH2CH2CH2OH)，NMe(CH2CH2OMe)，NMe(CH2CH2CH2OMe)，NEt2，NEtPr，NEt(iPr)，NEt(CH2-環(huán)丙基)，NEt(CH2-環(huán)丁基)，NEt(CH2CH2OH)，NEt(CH2CH2CH2OH)，
在具有式1的A基團(tuán)的其它實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的N一起形成4-6元雜環(huán)，該雜環(huán)具有環(huán)氮原子并且任選具有選自N和O的第二環(huán)雜原子，其中所述雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代。例如，在某些實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的N一起形成吡咯烷基，哌啶基，氮雜環(huán)丁烷基，嗎啉基或哌嗪基環(huán)，其中所述吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基和哌嗪基環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、F、甲基、CH2CF3和氧代基團(tuán)的基團(tuán)取代。在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)

在具有式1的A基團(tuán)的另外實(shí)施方案中，R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代。在具有式1的A基團(tuán)的具體實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
在具有式1的A基團(tuán)的某些實(shí)施方案中，R6和R8與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。在其它實(shí)施方案中，R6和R8與它們相連接的原子一起形成吡咯烷基或哌啶基環(huán)。
在具體實(shí)施方案中，A基團(tuán)選自下列通式

在另外的實(shí)施方案中，A基團(tuán)選自下列結(jié)構(gòu)


在另外的實(shí)施方案中，A基團(tuán)選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式1B表示
其中G、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的另一個(gè)實(shí)施方案中，m是1，n是1，p是0，從而A由式2表示
其中G、R6、R7、R8、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H或Me。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是甲基。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H，甲基，乙基，丙基，異丙基，環(huán)丙基甲基或環(huán)丁基甲基， 或R6和R7與N一起形成吡咯烷基、哌啶基或氮雜環(huán)丁烷基環(huán)， 或R6和R8與它們相連接的原子一起形成哌啶基或吡咯烷基環(huán)。
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，NR6R7是NH2，NHMe，NHEt，NHPr，NH(iPr)，NH(環(huán)丙基甲基)，NH(環(huán)丁基甲基)，NMe2，NMeEt，NMePr，NMe(iPr)，NEt2，NEtPr或NEt(iPr)。
在其它實(shí)施方案中，NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
在具有式2的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7是H。在具體實(shí)施方案中，A選自
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式2B表示
其中G、Rc、Rd、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的其它實(shí)施方案中，m是1，n是0，且p是1，從而A由式3表示
其中G、R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc和Rd如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H。
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，Rc和Rd是H。在其它實(shí)施方案中，Rc和Rd與它們相連接的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H，甲基，乙基，丙基，異丙基，叔丁基，CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基。
在某些實(shí)施方案中，式3的NR6R7是NH2，NHMe，NHEt，NHPr，NH(iPr)，NHtBu，NH(CH2-環(huán)丙基)，或NH(CH2-環(huán)丁基)。
在具有式3的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R6和R7是H。在具體實(shí)施方案中，A是
在具有式3的基團(tuán)A的其它實(shí)施方案中，Ra和R8是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成5-6元雜環(huán)，其中環(huán)原子之一是氮。在某些實(shí)施方案中，Rb和R6與它們相連接的原子一起形成吡咯烷基環(huán)。在某些實(shí)施方案中，R7是H。在某些實(shí)施方案中，R7是H。在具體實(shí)施方案中，A選自
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式3B表示
其中G、R6和R7如本文所定義。
在式I或Ia的某些實(shí)施方案中，m是0，n是0，且p是1，從而A由式4表示
其中G、R6、R7和R8如本文所定義。在某些實(shí)施方案中，A具有下列構(gòu)型
在具有式4的基團(tuán)A的某些實(shí)施方案中，R8是H。在某些實(shí)施方案中，R6和R7獨(dú)立地是H或Me。在具體實(shí)施方案中，A選自
在另外的實(shí)施方案中，A選自下列結(jié)構(gòu)
在另外的實(shí)施方案中，A選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物由式4B表示
其中G和R5如本文所定義。
本發(fā)明的化合物可以具有一個(gè)或多個(gè)不對稱中心；因此，這種化合物可以以其單一的(R)-或(S)-立體異構(gòu)體或混合物的形式制備。除非另外指明，否則說明書和權(quán)利要求書中的具體化合物的描述或命名包括單一的對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體，和其混合物，外消旋體。因此，本發(fā)明還包括所有的這種異構(gòu)體，包括本發(fā)明化合物的非對映異構(gòu)體的混合物，純的非對映異構(gòu)體和純的對映異構(gòu)體。術(shù)語“對映異構(gòu)體”是指不能彼此重疊的鏡像化合物的兩個(gè)立體異構(gòu)體。術(shù)語“非對映異構(gòu)體”是指彼此不是鏡象的一對旋光異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性能，例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、光譜性能和反應(yīng)性。
本發(fā)明的化合物還可以存在不同的互變異構(gòu)形式，所有的這些形式包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。術(shù)語“互變異構(gòu)體”或“互變異構(gòu)形式”是指可通過低能壘互相轉(zhuǎn)換的具有不同能量的結(jié)構(gòu)異構(gòu)體。例如，質(zhì)子互變異構(gòu)體(亦稱質(zhì)子遷移互變異構(gòu)體(prototripic tautomer))包括通過質(zhì)子的遷移而進(jìn)行的相互轉(zhuǎn)化，例如酮-烯醇和亞胺-烯胺異構(gòu)化。價(jià)鍵互變異構(gòu)體包括通過一些成鍵電子的重構(gòu)而進(jìn)行的相互轉(zhuǎn)化。
在本文顯示的結(jié)構(gòu)中，如果任何具體手性原子的立體化學(xué)沒有具體指出，那么包括所有的立體異構(gòu)體，并且被本發(fā)明的化合物所包括。如果立體化學(xué)用表示具體構(gòu)型的實(shí)體楔形或虛線來說明，那么該立體異構(gòu)體就為如此特定和定義的。
式I和Ia的化合物包括此類化合物的溶劑合物、可藥用前藥和鹽(包括可藥用鹽)。
短語“可藥用”表示物質(zhì)或組合物與構(gòu)成制劑的其它組分和/或用其治療的哺乳動物在化學(xué)上和/或毒理學(xué)上是相容的。
“溶劑合物”是指一種或多種溶劑分子與本發(fā)明化合物的締合或復(fù)合物。形成溶劑合物的溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。術(shù)語“水合物”還可以指其中溶劑分子是水的復(fù)合物。
“前藥”是可以在生理?xiàng)l件下轉(zhuǎn)換為或通過溶劑分解為具體化合物或此類化合物的鹽的化合物。前藥包括其中氨基酸殘基或兩個(gè)或多個(gè)(例如2、3或4個(gè))氨基酸殘基的多肽鏈通過酰胺鍵或酯鍵與本發(fā)明化合物的游離氨基、羥基或羧基共價(jià)結(jié)合的化合物。該氨基酸殘基包括但不限于通常以三字母符號表示的20種天然存在的氨基酸，也包括磷酸絲氨酸(phosphoserine)，磷酸蘇氨酸，磷酸酪氨酸，4-羥基脯氨酸，羥基賴氨酸，demosine，isodemosine，γ-羧基谷氨酸，苯甲酰甘氨酸，八氫吲哚-2-羧酸，抑胃酶氨酸，1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸，3-巰基纈氨酸，鳥氨酸，3-甲基組氨酸，正纈氨酸，β-丙氨酸，γ-氨基丁酸，cirtulline，高半胱氨酸，高絲氨酸，甲基-丙氨酸，對苯甲?；奖彼幔交拾彼?，炔丙基甘氨酸，肌氨酸，甲硫氨酸砜和叔丁基甘氨酸。
還包括其它類型的前藥。例如，式I或Ia化合物的游離羧基可以衍生為酰胺或烷基酯。作為另一個(gè)實(shí)例，通過將羥基轉(zhuǎn)化為基團(tuán)例如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基，包含游離羥基的本發(fā)明化合物可以衍生化為前藥，如Advanced Drug Delivery Reviews，1996，19，115中所列出的。羥基和氨基的氨基甲酸酯前藥還以羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯和硫酸酯形式被包括在內(nèi)。還包括羥基衍生為(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙醚，其中?；梢允侨芜x被(包括但不限于)醚、胺和羧酸官能團(tuán)取代的烷基酯，或其中?；侨缟纤龅陌被狨?。這種類型的前藥描述在J.Med Chem.，1996，39，10中。更具體的實(shí)例包括醇基團(tuán)的氫原子被基團(tuán)例如(C1-C6)烷?；趸谆?-((C1-C6)烷?；趸?乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧羰基氨基-甲基、琥珀?；?、(C1-C6)烷?；?、α-氨基(C1-C4)烷?；⒎蓟；挺?氨基酰基或α-氨基?；?α-氨基?；〈?，其中每個(gè)α-氨基?；?dú)立地選自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(由除去半縮醛式碳水化合物的羥基所產(chǎn)生的基團(tuán))。
式I或Ia化合物的游離胺還可以衍生化為酰胺、磺酰胺或磷酰胺。所有這些部分可以結(jié)合基團(tuán)(包括但不限于)醚、胺和羧酸官能團(tuán)。例如，前藥可以如下形成用基團(tuán)例如R-羰基、RO-羰基、NRR′-羰基取代氨基中的氫原子，其中R和R′各自獨(dú)立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基或芐基，或R-羰基是天然α-氨基酰基或天然α-氨基?；?天然α-氨基?；?C(OH)C(O)OY(其中Y是H、(C1-C6)烷基或芐基)、C(OY0)Y1(其中Y0是(C1-C4)烷基，且Y1是(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基)，或-C(Y2)Y3(其中Y2是H或甲基，Y3是單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基、嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基)。
對于前藥衍生物的其它實(shí)例，參見例如，a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard編，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology，Vol.42，p.309-396，K.Widder等人編，(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design andDevelopment，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編，第5章″Design andApplication of Prodrugs″，H.Bundgaard p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，81-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journalof Pharmaceutical Sciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等人，Chem.Pharm.Bull.，32692(1984)，將其每個(gè)具體引入作為參考。
或者，本發(fā)明的化合物可以具有充分酸性的基團(tuán)、充分堿性基團(tuán)，或者兩種官能團(tuán)，并且因此與許多無機(jī)或有機(jī)堿或酸的任一項(xiàng)進(jìn)行反應(yīng)，形成鹽。鹽的實(shí)例包括通過本發(fā)明化合物與無機(jī)或有機(jī)酸或無機(jī)堿反應(yīng)所制備的鹽，這種鹽包括但不限于硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲苯磺酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁桃酸鹽。由于本發(fā)明的單一化合物可以包含一個(gè)以上酸性或堿性部分，所以本發(fā)明的化合物可以在單一化合物中包括單、二或三-鹽。
如果本發(fā)明化合物是堿，可以通過本領(lǐng)域可利用的任一合適的方法來制備所需的鹽，例如，用酸性化合物例如無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等處理游離堿，或用有機(jī)酸例如乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥基乙酸、水楊酸、吡喃型糖苷酸(pyranosidyl)例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α羥基酸例如檸檬酸或酒石酸、氨基酸例如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸例如苯甲酸或肉桂酸、磺酸例如對甲苯磺酸或乙磺酸等處理游離堿。
如果本發(fā)明的化合物是酸，所需的鹽可以通過任一合適的方法制備，例如，用無機(jī)或有機(jī)堿處理游離酸。合適無機(jī)鹽的實(shí)例包括與堿和堿土金屬例如鋰、鈉、鉀、鋇和鈣形成的那些鹽。合適有機(jī)堿鹽的實(shí)例包括例如銨、二芐基銨、芐基銨、2-羥基乙基銨、雙(2-羥基乙基)銨、苯基乙基芐基胺、二芐基乙二胺等鹽。酸性部分的其它鹽可以包括例如與普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺形成的那些鹽，加上與堿性氨基酸例如甘氨酸、鳥氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸形成的鹽。
在某些實(shí)施方案中，除非另有陳述，鹽是“可藥用鹽”，其包括保持具體化合物的相應(yīng)游離酸或堿的生物有效性的鹽，并且不是生物學(xué)或其他不合需要的鹽。
式I或Ia的化合物還包括這種化合物的其它鹽，其不一定是可藥用鹽，并且其可以用作制備和/或純化式I或Ia化合物的中間體和/或分離式I或Ia化合物的對映異構(gòu)體的中間體。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，其與本文所列舉的相同，但事實(shí)是，在性質(zhì)上，一個(gè)或多個(gè)原子被具有不同于通常認(rèn)定的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子替代。所列舉的任何具體原子或元素的所有同位素均包括在本發(fā)明化合物和其用途范圍內(nèi)?？梢越Y(jié)合進(jìn)本發(fā)明化合物的示例性的同位素包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。某些同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物(例如用3H和14C標(biāo)記的)可用于化合物和/或底物組織分布測試中。由于其易于制備和檢測，氚代(即3H)和碳-14(即14C)同位素是有用的。此外，帶有較重同位素例如氘(即2H)的取代基可以提供某些治療優(yōu)勢，這是因?yàn)槠洚a(chǎn)生更大的代謝穩(wěn)定性(例如，體內(nèi)半衰期增加或劑量要求減低)，由此在一些情況下是優(yōu)選的。正電子發(fā)射同位素例如15O、13N、11C和18F可有效用于正電子發(fā)射成像術(shù)(PET)研究，以檢測底物受體占有率。同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物一般可以如下制備按照與反應(yīng)路線和/或本文下面實(shí)施例中所公開方法的類似方法，用同位素標(biāo)記的試劑替代無同位素標(biāo)記的試劑。
式I或Ia化合物的代謝產(chǎn)物 還屬于本發(fā)明范圍的是本文所描述的式I或Ia化合物的體內(nèi)代謝產(chǎn)物?！按x產(chǎn)物”是通過具體化合物或其鹽的體內(nèi)代謝而產(chǎn)生的藥理學(xué)活性產(chǎn)物。此類產(chǎn)物可以通過例如給藥化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、脫酰胺、酯化、脫酯、酶催化裂解等來產(chǎn)生。因此，本發(fā)明包括式I或Ia化合物的代謝產(chǎn)物，包括通過一定方法產(chǎn)生的化合物，該方法包括將本發(fā)明的化合物與哺乳動物接觸足以產(chǎn)生其代謝產(chǎn)物的一段時(shí)間。
代謝產(chǎn)物如下確定例如，制備放射性同位素(例如14C或3H)標(biāo)記的本發(fā)明化合物，將其以可測劑量(例如大于大約0.5mg/kg)胃腸外給藥至動物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人，保持足以發(fā)生代謝的時(shí)間(典型地為大約30秒鐘至30小時(shí))，從尿、血液或其它生物樣品中分離其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。由于這些產(chǎn)物是標(biāo)記的，所以容易分離(利用能夠結(jié)合代謝產(chǎn)物中殘存表位的抗體來分離其它產(chǎn)物)。代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)用常規(guī)方式例如MS、LC/MS或NMR分析來確定。通常，代謝產(chǎn)物的分析是用與本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)藥物代謝研究一樣的方法來進(jìn)行的。只要沒有在體內(nèi)發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物，這些代謝產(chǎn)物就可用于針對治療劑量的本發(fā)明化合物的診斷測試。
式I或Ia化合物的合成 本發(fā)明的化合物可以利用與化學(xué)領(lǐng)域中熟知的方法(尤其是按照本文所包含的描述內(nèi)容)類似的合成路線來合成。起始原料一般得自于商品渠道，例如Aldrich Chemicala(Milwaukee，WI)，或使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法方便地制備(例如，利用描述在下列中的方法來制備Louis F.Fieser和MaryFieser，Reagents for Organic Synthesis，v.1-19，Wiley，N.Y.(1967-1999 ed.)，或Beilsteins Handbuch der organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin，包括增刊)。
可以單獨(dú)制備式I或Ia的化合物，或以包括至少2個(gè)，例如5至1,000個(gè)化合物或10至100個(gè)化合物的化合物庫形式來制備。式I或Ia化合物庫可以利用組合化學(xué)的“裂分和混合”方法或通過許多平行合成來制備，其利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法、使用液相或固相化學(xué)過程進(jìn)行。因此，按照本發(fā)明的其它方面，提供了包括至少2個(gè)式I或Ia化合物或其鹽的化合物庫。
出于示例性的目的，反應(yīng)路線1-5和反應(yīng)路線A-K顯示了制備本發(fā)明化合物以及關(guān)鍵中間體的通用方法。為了更詳細(xì)說明單一反應(yīng)步驟，參見下面的實(shí)施例部分。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，可以使用其它合成路線來合成本發(fā)明的化合物。盡管在反應(yīng)路線中描述了具體起始原料和試劑并且在下面進(jìn)行了討論，但可以容易地替換為其它起始原料和試劑，以提供各種衍生物和/或反應(yīng)條件。此外，可以按照本公開，使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)化學(xué)過程，將通過如下所述方法制備的許多化合物進(jìn)行進(jìn)一步修飾。

反應(yīng)路線1 反應(yīng)路線1表示了制備式I或Ia的化合物9和11的方法，其中R1和R5是甲基。按照反應(yīng)路線1，中間體3可以如下制備將(+)-胡薄荷酮(pulegone)1溴化，提供二溴化物2，而后用堿例如乙醇鈉處理二溴化物2。將蒲勒烯酸酯(pulegenate)3進(jìn)行臭氧分解，得到酮酯(ketoester)4。在堿例如KOH的存在下，通過酮酯4與硫脲的反應(yīng)構(gòu)成嘧啶環(huán)。通過用催化劑例如阮內(nèi)Ni進(jìn)行還原，將化合物5的2位的巰基除去。羥基嘧啶6的氯化，提供4-氯嘧啶7。氯嘧啶7與哌嗪的SNAr反應(yīng)，提供中間體8和10。中間體8和10的脫保護(hù)之后，用合適的氨基酸將哌嗪衍生物?；?，而后進(jìn)行二次脫保護(hù)步驟，分別提供化合物9和11。

反應(yīng)路線2 反應(yīng)路線2說明了制備式I或Ia的化合物18的方法，其中R1是甲基，R2和R2a是F，且R5是H。按照反應(yīng)路線2，使用合適的氧化劑例如m-CPBA、Oxone等，在適宜的溫度下(例如0℃至室溫)，在合適的溶劑例如DCM或氯仿中，將化合物12(按照反應(yīng)路線1的方法制備)氧化，其中Pg是合適的胺保護(hù)基(參見Protective Groups in Organic Synthesis，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章，關(guān)于合適的胺保護(hù)基)，得到N-氧化物13，然后將其用合適的酸酐例如乙酸酐?；?，并加熱，提供酯14的混合物。使用堿例如NaOH或LiOH水溶液進(jìn)行酯水解，得到仲醇15的混合物，然后將其在標(biāo)準(zhǔn)條件下氧化(參見Larock′s Comprehensive OrganicTransformations for appropriate examples of the oxidation of alcohols toketones)，得到酮16。在合適的溶劑例如DCM或氯仿中，用氟化試劑例如DAST或Deoxo-Fluor處理，提供偕二氟化物(gemdifluro)化合物17。在合適的條件(參見Protective Groups in Organic Synthesis，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章)下，從化合物17上除去氮保護(hù)基，得到相應(yīng)的脫保護(hù)的胺(未表示)。在存在或不存在叔胺堿的條件下，在合適溶劑(例如DMF、DCM、氯仿、THF等)中，使用標(biāo)準(zhǔn)偶合試劑(參見例如Principlesof Peptide Synthesis，Miklos Bodanszky)用適當(dāng)保護(hù)的氨基酸，將脫保護(hù)的哌嗪?；?，而后除去保護(hù)基，得到化合物18。

反應(yīng)路線3 反應(yīng)路線3表示了制備化合物70和71的方法。按照反應(yīng)路線3，使用氨合成子(synthon)，將化合物4胺化，得到化合物4a。在甲酰胺的存在下，在50℃至250℃，和/或在高壓下，使用例如甲酸銨，形成嘧啶，得到雙環(huán)單元6。使用例如POCl3或SOCl2將化合物6活化，得到活化的嘧啶62。在0℃至150℃，使用合適保護(hù)的/取代的哌啶進(jìn)行離去基團(tuán)的置換，得到哌啶63。在-20℃至50℃，使用例如m-CPBA或Oxone進(jìn)行氧化，得到N-氧化物64。用?；瘎?例如乙酸酐)處理，而后加熱(40℃至200℃)，引起重排，得到化合物65。在0℃至50℃，使用例如LiOH或NaOH進(jìn)行水解，得到醇66。在合適的溫度下，使用例如Swern條件、MnO4或吡啶-SO3復(fù)合物進(jìn)行氧化，得到酮67。在氫、CBS催化劑或氫硼化物還原劑的存在下，在手性配體的存在下，使用例如催化手性的催化劑進(jìn)行不對稱還原，在醇68或69上產(chǎn)生(R)或(S)立體化學(xué)。或者，可以使用非手性還原劑(例如H2、Pd/C)，使環(huán)戊烷單元上的甲基提供面選擇性和非對映選擇性。如果還原給出低的非對映選擇性，可以通過例如色譜、結(jié)晶或衍生化來分離非對映異構(gòu)體。用氟化劑(例如DAST，在-20℃至100℃)處理化合物68或69，分別產(chǎn)生氟化的類似物70或71，其具有反向立體化學(xué)。最后，在0℃至50℃，使用例如酸進(jìn)行Boc基團(tuán)的脫保護(hù)，使用適當(dāng)功能化的氨基酸進(jìn)行?；驮摪被岬陌返淖詈蠊倌芑?例如除去任何保護(hù)基，烷基化，還原胺化或酰化，以引入新取代基)，產(chǎn)生最后的化合物72和73。

反應(yīng)路線4 反應(yīng)路線4表示了制備化合物78的方法。按照反應(yīng)路線4，使用氨合成子，將化合物74胺化，得到化合物75。在甲酰胺的存在下，在50℃至250℃，和/或在高壓下，使用例如甲酸銨，形成嘧啶，得到雙環(huán)單元76。使用例如POCl3或SOCl2，將化合物76活化，得到活化的嘧啶，在0℃至150℃，使用合適保護(hù)的/取代的哌啶進(jìn)行該離去基團(tuán)的置換，得到哌啶77。在0℃至50℃，使用例如酸進(jìn)行Boc基團(tuán)的脫保護(hù)，使用適當(dāng)功能化的氨基酸進(jìn)行?；?，和該氨基酸的胺的最后官能化(例如除去任何保護(hù)基，烷基化，還原胺化或酰化，以引入新取代基)，產(chǎn)生最后的化合物78。然后對這些類似物使用分離技術(shù)，得到單一對映異構(gòu)體。

反應(yīng)路線5 反應(yīng)路線5表示了制備化合物84、86和87的方法，其包括R1的后期官能化步驟。按照反應(yīng)路線5，使用氨合成子，將化合物79胺化，得到化合物80。在甲酰胺的存在下，在50℃至250℃，和/或在高壓下，使用例如甲酸銨，形成嘧啶，得到雙環(huán)單元81。使用例如POCl3或SOCl2，將化合物81活化，得到活化的嘧啶，在0℃至150℃，使用合適保護(hù)的/取代的哌啶進(jìn)行該離去基團(tuán)的置換，得到哌啶82。烯烴可以保持不動，或在-100℃至-50℃，使用例如臭氧進(jìn)行烯烴的官能化，而后進(jìn)行還原后處理(例如NaBH4)，可以得到羥甲基衍生物83?；蛘?，在0℃至50℃，在1atm至50atm下，使用例如H2/Pd/C，產(chǎn)生乙基衍生物85。隨后，在0℃至50℃，使用例如酸進(jìn)行Boc基團(tuán)的脫保護(hù)，使用適當(dāng)官能化的氨基酸進(jìn)行酰化，和該氨基酸的胺的最后的功能化(例如除去任何保護(hù)基，烷基化，還原胺化或?；?，以引入新取代基)，產(chǎn)生最后的化合物84、86和87。然后對這些類似物使用分離技術(shù)，得到單一對映異構(gòu)體。
相應(yīng)地，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了制備式I或Ia化合物的方法，包括 具有下式的化合物
其中R1、R1a、R2、R2a和R5如本文所定義，與具有下式的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，
其中G、R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n和p如本文所定義。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了制備式Ia化合物的方法，包括 具有下式的化合物
其中R1、R2、R2a和R5如本文所定義，與具有下式的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，
其中G、R6、R7、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n和p如本文所定義。
在式I或Ia化合物的合成(如反應(yīng)路線1-5和實(shí)施例中所說明)中使用的氨基酸可商購，或可以按照本文公開的方法制備。例如，在某些實(shí)施方案中，用于制備式I或Ia化合物的氨基酸包括具有式1A的β-苯基甘氨酸氨基酸，具有式2A的γ-苯基甘氨酸氨基酸，具有式3A的β-苯丙氨酸氨基酸，和具有式4A的γ-苯丙氨酸氨基酸。

制備通式1A-4A的氨基酸的方法示于反應(yīng)路線A-K中。

反應(yīng)路線A 反應(yīng)路線A示例性地顯示出了制備任選取代的式1A的β-苯基甘氨酸氨基酸25和26的方法，其中R8是H，且R6和R9如本文所定義，t為0-4，R7是H或胺的保護(hù)基團(tuán)。按照反應(yīng)路線A，酸20通過下列條件轉(zhuǎn)變?yōu)轷?1(其中R′是烷基)在催化量的酸例如濃H2SO4或偶合劑例如DCC/DMAP的存在下，使用標(biāo)準(zhǔn)條件，例如用合適的醇(例如MeOH)處理；或者，在堿例如NEt3/DMAP的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至100℃)，用合適的親電試劑(例如MeI，EtBr，BnBr)處理。酯的合適選擇是由合成最后的酸重新形成所需的條件來確定的，使用許多列于下面的實(shí)例和條件‘ProtectiveGroups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章。引入羥甲基提供化合物22可以通過在堿例如NaOEt的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至室溫)下，用合適的醛(例如甲醛)處理來實(shí)現(xiàn)?；衔?2的醇基團(tuán)的活化形成離去基團(tuán)(例如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、鹵化物)可以通過在過量的堿例如NEt3、DIPEA或DBU的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至室溫)下，用例如甲磺?；忍幚韥韺?shí)現(xiàn)。在很多情況下，可以直接由此方法分離烯烴24，在其它情況下，可能需要加熱(30℃至100℃)或額外的堿(例如在鹵素情況下需要DBU)，以完成消除反應(yīng)，提供化合物24。在合適溶劑例如THF中，在合適的溫度(例如-20℃至回流)下，可以用所需的伯胺(例如乙胺)處理活化的烯烴24，產(chǎn)生氨基酯中間體。在化合物24具有富電子芳香環(huán)或缺電子的/體積大的伯胺的情況下，可能需要加熱(例如30-240℃，在密封管中)或微波化學(xué)。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，使用Boc2O，可以實(shí)現(xiàn)氨基的保護(hù)(例如Boc-基團(tuán)形式)，提供化合物23，其中Pg是保護(hù)基。可以使用其它保護(hù)基，許多合適的實(shí)例列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。酯23皂化形成保護(hù)的氨基酸25可以使用適合于酯的條件實(shí)現(xiàn)(例如，對于甲基酯，使用LiOH水溶液，對于芐基酯，進(jìn)行氫化，對于叔丁基酯，使用酸)。
或者，在合適溶劑例如THF中，在合適的溫度(例如-20℃至回流)下，可以用仲胺(例如二乙胺)處理活化的烯烴24，產(chǎn)生氨基酯中間體(未顯示出來)。在化合物24具有富電子芳香環(huán)或缺電子的/體積大的仲胺的情況下，可能需要加熱(例如30-240℃，在密封管中)或微波化學(xué)過程。酯的皂化形成氨基酸26可以使用適合于酯的條件實(shí)現(xiàn)(例如，對于甲基酯，使用LiOH水溶液，對于芐基酯，進(jìn)行氫化，對于叔丁基酯，使用酸等)。

反應(yīng)路線B 反應(yīng)路線B顯示出了制備任選取代的式1A的β-苯基甘氨酸氨基酸30和31的方法，其中R8是OH，Rc和Rd是H，R6和R9如本文所定義，t為0-4，R7如本文所定義或是胺的保護(hù)基團(tuán)。使用標(biāo)準(zhǔn)氧化劑例如MCPBA，在合適的溫度(室溫至回流)下，將不飽和酯24(按照反應(yīng)路線A制備)氧化，其中t是0-4，R′是烷基，提供環(huán)氧化物中間體28。典型地在高溫下(例如50-300℃)和高壓(例如，在密封管或高壓容器中)下，可以用合適的胺處理中間體28，得到氨基醇29或30。如果使用仲胺(例如在化合物30的制備中)，那么可以使用列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章中的條件將酯脫保護(hù)(例如，對于甲基酯，使用LiOH，對于芐基酯，進(jìn)行氫化等)。當(dāng)使用伯胺時(shí)(例如在化合物29的制備中)，將胺進(jìn)行保護(hù)(例如，使用Boc酸酐作為Boc-基團(tuán)形式)，然后進(jìn)行酯的脫保護(hù)(使用上述條件)，提供羥基化的氨基酸31。

反應(yīng)路線C 反應(yīng)路線C顯示出了制備任選取代的式1A的β-苯基甘氨酸氨基酸36的方法，其中R8是甲基，R6是H，R7是H或胺的保護(hù)基團(tuán)，t為0-4，R9如本文所定義。在合適的溫度(例如0℃至回流)下，可以用堿(例如NaOtBu)處理酯32(其中R′″是烷基)，形成陰離子，然后在合適的溫度(例如78℃至室溫)下，加入親電試劑(例如2-溴乙酸叔丁基酯)，得到同系化的酯33。使用合適的酸例如TFA或HCl，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，化合物33的叔丁基酯進(jìn)行皂化反應(yīng)，提供化合物34。在弱堿例如NEt3的存在下，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，使用例如DPPA進(jìn)行化合物34的Curtius重排，然后任選在路易斯酸(例如SnCl2)的存在下，在高溫(例如40-200℃)下，用醇(例如tBuOH)處理活化的中間體，提供化合物35，其中Pg是胺保護(hù)基。用于制備化合物35所選擇的醇決定了胺的保護(hù)基團(tuán)(例如tBuOH，提供Boc-胺)。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，當(dāng)保護(hù)基是甲基酯時(shí)，用LiOH，對于芐基酯，進(jìn)行氫化等)，將化合物35的酯基進(jìn)行脫保護(hù)，得到酸化合物36。
或者，在反應(yīng)路線C中，R8可以是氫。

反應(yīng)路線D 反應(yīng)路線D顯示出了制備任選取代的式2A的γ-苯基甘氨酸氨基酸40的方法，其中Rc、Rd和R9如本文所定義，t為0-4，R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，例如Boc。按照反應(yīng)路線A制備的起始不飽和酯24，可以在堿例如DBU的存在下，在合適的溫度(例如0℃至室溫)下，用取代的硝基甲烷衍生物(例如硝基乙烷)處理，得到同系化加成物37。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如氫化，Zn/酸等)，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以將化合物37的硝基還原，并且可以將得到的中間體環(huán)化，得到內(nèi)酰胺中間體38。在標(biāo)準(zhǔn)條件下，使用Boc2O，可以實(shí)現(xiàn)氨基的保護(hù)(例如用Boc-基團(tuán))，提供化合物39?？梢允褂闷渌Ｗo(hù)基，許多合適的實(shí)例列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。在合適的溫度(例如0至100℃)下，用堿水溶液例如LiOH或KOH水溶液處理化合物39，實(shí)現(xiàn)內(nèi)酰胺的開環(huán)，得到適當(dāng)取代的保護(hù)氨基酸化合物40。

反應(yīng)路線E 反應(yīng)路線E顯示出了制備任選取代的式2A的γ-苯基甘氨酸氨基酸44的方法，其中R8是甲基，R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，t為0-4，R9如本文所定義。在合適的溫度(例如0℃至回流)下，可以用合適堿例如KOtBu處理酯32(其中R′″是烷基，t是0-4)，形成陰離子，然后在-78℃至室溫的溫度范圍下，加入丙烯酸酯單元(例如丙烯酸叔丁基酯)，得到同系化的酯41。在合適溫度(例如0℃至回流)下，使用合適酸例如TFA或HCl處理，將化合物41的叔丁基酯進(jìn)行皂化，提供化合物42。在弱堿例如NEt3的存在下，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，使用例如DPPA進(jìn)行化合物42的Curtius重排，然后任選在路易斯酸(例如SnCl2)的存在下，在高溫(例如40-200℃)下，用合適的醇(例如tBuOH)處理活化的中間體，提供化合物43。所選擇的醇決定了化合物43的胺的保護(hù)基團(tuán)(例如tBuOH，提供Boc-胺)。在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如，對于甲基酯，用LiOH，對于芐基酯，進(jìn)行氫化等)，將化合物43的酯基進(jìn)行脫保護(hù)，得到酸化合物44。
或者，在反應(yīng)路線E的反應(yīng)路線中，R8可以是氫。

反應(yīng)路線F 反應(yīng)路線F顯示出了制備任選取代的式3A的β-苯丙氨酸氨基酸48、49和50的方法，其中R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，t為0-4，且R9如本文所定義。在合適的堿例如哌啶的存在下，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以用式CN-CH2CO2R′″(其中R′″是烷基)的氰基乙酸酯(例如2-氰基乙酸乙酯)處理適當(dāng)取代的醛45，得到不飽和的酯46?？梢杂迷S多方式實(shí)現(xiàn)烯烴和化合物46的氰基的還原，提供化合物47。例如，可以用任何已知的試劑例如NaBH4來還原烯烴，實(shí)現(xiàn)1，4-還原。在路易斯酸例如BF3.OEt2或TFA的存在下，使用試劑例如LiAlH4或NaBH4，可以還原腈?？梢允褂迷S多其它還原劑，例如列于下列中的那些‘Reductions in Organic Chemistry’，Hudlicky，ACS monograph，第二版，第18章。如果需要的話，使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，使用合適的醛、路易斯酸和還原劑進(jìn)行還原胺化)，可以在此步驟中將伯胺47單烷基化或雙烷基化，提供可形成化合物48和49的中間體(未顯示出來)。為了制備伯和仲胺，可以使用許多保護(hù)基(例如‘Protective Groups in Organicsynthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章)實(shí)現(xiàn)保護(hù)，例如在0℃至室溫，使用Boc酸酐形成Boc-基團(tuán)。可以使用堿例如LiOH或KOH水溶液或列于上述‘Protective Groups’文本中的任何其它試劑(例如，對于芐基酯，進(jìn)行氫化)，實(shí)現(xiàn)酯基裂解形成氨基酸48、49或50。

反應(yīng)路線G 反應(yīng)路線G顯示出了制備任選取代的式4A的α-苯丙氨酸氨基酸54的方法，其中R6是H，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，t為0-4，且R9如本文所定義。在室溫至回流的溫度范圍下，使用例如LiAlH4，可以將適當(dāng)取代的酸51還原成苯甲醇52。使用例如PBr3、MsCl/NEt3等，可以將化合物52的醇基團(tuán)活化為離去基團(tuán)(例如鹵化物、甲磺酸酯等)。在強(qiáng)堿例如LDA、nBuLi的存在下，使用保護(hù)的甘氨酸衍生物例如2-(二苯亞甲基氨基)乙酸乙酯，將該離去基團(tuán)進(jìn)行置換，提供氨基酯中間體53，其中R1是烷基，Pg是保護(hù)基。合適的保護(hù)基列于‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience)。在此步驟中，可以改變胺的保護(hù)基團(tuán)，例如引入Boc-基團(tuán)。隨后，在合適的溫度(例如0℃至回流)下，將酯53進(jìn)行脫保護(hù)(例如對于芐基酯，使用3N HCl，LiOH，氫化等)，提供所需的N-保護(hù)的氨基酸54。

反應(yīng)路線H 反應(yīng)路線H顯示出了制備任選取代的式2A的γ-苯基甘氨酸氨基酸56的方法，R6和R8與它們相連的原子一起形成螺環(huán)雜環(huán)，R7是胺的保護(hù)基團(tuán)，t為0-4，且R9如本文所定義。按照反應(yīng)路線H，在無水條件(例如，加入分子篩)下，在合適的溫度(例如室溫至回流)下，可以用合適保護(hù)的甘氨酸衍生物(例如芐基甘氨酸)和甲醛處理不飽和酯24，產(chǎn)生化合物55。使用標(biāo)準(zhǔn)條件(例如，通過氫化，1-氯乙基甲酸酯等)，將芐基裂解，然后加入胺的保護(hù)基團(tuán)例如Boc-基團(tuán)，并在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如對于甲基酯，用LiOH，對于叔丁基酯，用酸等，在0℃至回流)將酯裂解，提供N-保護(hù)的氨基酸56。

反應(yīng)路線I 反應(yīng)路線I顯示出了制備任選取代的式3A的β-苯丙氨酸氨基酸61和62的方法，其中R6和Rb與它們相連的原子一起形成雜環(huán)，R7和R9如本文所定義，且t為0-4。酸57通過以下條件轉(zhuǎn)變?yōu)轷?8在催化劑酸(例如濃H2SO4或TMSCl)或偶合劑(例如DCC/DMAP)的存在下，使用標(biāo)準(zhǔn)條件例如用合適的醇(例如MeOH)處理；或者在合適堿例如NEt3/DMAP的存在下，在合適的溫度(例如-20℃至100℃)下，用合適的親電試劑(例如MeI，EtBr，BnBr)處理。酯的合適選擇是由合成最后中酸的重新形成所需的條件確定的，例如描述在下列中的條件‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第5章。在TFA的存在下，使用例如N-(甲氧基甲基)(苯基)-N-((三甲基甲硅基)甲基)甲胺，實(shí)現(xiàn)化合物58的環(huán)化，提供化合物59。這組具體試劑產(chǎn)生了芐胺，在標(biāo)準(zhǔn)條件(例如氫化，在-20℃至50℃)或任何其它標(biāo)準(zhǔn)條件例如列于下列中的那些條件下，可以將其裂解，提供化合物60‘Protective Groups in Organic Synthesis’，Greene和Wuts，Wiley-Interscience，第三版，第7章。使用列于上述的試劑例如Boc-酸酐，用其它保護(hù)基(例如Boc)保護(hù)化合物60的游離胺，然后使用適合于酯的標(biāo)準(zhǔn)條件(例如對于甲基酯，使用LiOH水溶液，對于芐基酯，使用氫化，對于叔丁基酯，使用酸)，將酯裂解，提供酸化合物61。或者，可以將游離胺進(jìn)一步官能團(tuán)化(例如使用烷基化、還原胺化或?；瘲l件)，然后進(jìn)行酯裂解，產(chǎn)生叔氨基酸化合物62。

反應(yīng)路線J 使用例如反應(yīng)路線J中所示的方法，制備β-氨基酸的任何一個(gè)對映異構(gòu)體?？梢杂脕啺坊騺嗕@離子合成子處理2-苯基乙酸酯92，其中亞胺或亞銨離子合成子通過例如在-100℃至+50℃，在路易斯酸(例如TiCl4)和適當(dāng)取代的烷氧基甲胺或N-(烷氧基甲基)酰胺/氨基甲酸酯的存在下原位制備，且其中2-苯乙酸酯與具有合適立體化學(xué)的合適的手性助劑(R*)(例如Evans′助劑或磺內(nèi)酰胺)偶合，其用于在氨基酸的β位產(chǎn)生所需的化學(xué)現(xiàn)象。不對稱加成可能需要存在Lewis酸(例如TiCl4)、胺堿(例如Hunig′s堿)和低溫(例如-100℃至0℃)，以產(chǎn)生最好水平的立體化學(xué)誘導(dǎo)作用。如果非對映選擇性比需要的低，可以在此步驟中通過(例如)色譜或結(jié)晶來分離單獨(dú)的非對映異構(gòu)體。使用裂解所選擇助劑的已知方法(例如對于Evans助劑，LiOH/H2O2，在-50℃至50℃)，將手性助劑裂解，然后得到所需的N-保護(hù)的β-氨基酸，其在β位具有所需的立體化學(xué)。另外，如果R6也是保護(hù)基團(tuán)(例如2，4-二甲氧基芐基)，可以在Boc-基團(tuán)的存在下將其除去(例如氫化或DDQ等)，得到Boc-氨基酸，除去Boc-基團(tuán)，提供伯胺，通過烷基化、酰化或還原胺化，可以將其進(jìn)一步官能團(tuán)化(在與嘧啶-哌嗪單元偶合之前或之后)。

反應(yīng)路線K 利用標(biāo)準(zhǔn)?；椒ǎ梢詫?shí)現(xiàn)向化合物96中引入手性助劑(例如Evans噁唑烷酮等)，得到軛合物97。例如，在胺堿的存在下，在-20℃至100℃，用活化試劑(例如COCl2)或混合酸酐形式(例如2，2-二甲基丙?；?處理酸，而后用合適的手性助劑(x)處理，得到97。手性助劑的立體化學(xué)和選擇可以決定新產(chǎn)生的手性中心的立體化學(xué)和非對映異構(gòu)體過量(de)。在低溫(例如-20℃至-100℃)，用路易斯酸(例如TiCl4)和胺堿(例如Hunig′s堿)處理，而后在低溫下使用適當(dāng)取代的亞銨離子前體物98，然后產(chǎn)生化合物99?？梢哉J(rèn)為溫度、路易斯酸和手性助劑都將影響加成加成物的de。最后，在溫和條件(例如LiOH/H2O，在-10℃至30℃)下的皂化反應(yīng)，產(chǎn)生所需酸100。
在式I或Ia化合物的制備中，可能需要保護(hù)中間體的遠(yuǎn)端官能團(tuán)(remotefunctionalities)(例如伯胺或仲胺等)。對這種保護(hù)的需要是變化的，這取決于遠(yuǎn)端官能團(tuán)的性質(zhì)和制備方法的條件。合適的氨基-保護(hù)基(NH-Pg)包括乙?；?，三氟乙酰基，叔丁氧羰基(BOC)，芐氧羰基(CBz)和9-芴基亞甲基氧基羰基(Fmoc)。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易確定需要的這種保護(hù)。對于保護(hù)基和其用途的概述，參見T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley& Sons，New York，1991。
分離方法 在制備式I或Ia化合物的任何合成方法中，將反應(yīng)產(chǎn)物互相分離和/或從起始原料中分離是有利的。利用本領(lǐng)域普通技術(shù)，將各個(gè)步驟或系列步驟的所需產(chǎn)物分離和/或純化至所需均勻度。典型地，這種分離包括多相萃取、從溶劑或溶劑混合物中結(jié)晶、蒸餾、升華或色譜。色譜可以包括許多方法，包括例如反相和正相色譜；體積排除色譜；離子交換色譜；高、中和低壓液相色譜法和裝置；小型分析；模擬移動床(SMB)和制備薄層色譜法或厚層色譜法，以及小規(guī)模薄層和快速色譜技術(shù)。
另一種分離方法包括用選擇的試劑處理反應(yīng)混合物，以與所需產(chǎn)物、未反應(yīng)的起始原料、反應(yīng)副產(chǎn)物等結(jié)合或使其分離。這種試劑包括吸附劑或吸收劑例如活性碳、分子篩、離子交換介質(zhì)等。或者，在堿性材料的情況下，試劑可以是酸，在酸性物質(zhì)的情況下，可以是堿，結(jié)合試劑例如抗體、結(jié)合蛋白、選擇性的螯合劑例如冠醚、液體/液體離子萃取試劑(LIX)等。
根據(jù)所涉及物質(zhì)的性質(zhì)選擇合適的分離方法。例如，在蒸餾和升華中的沸點(diǎn)和分子量，在色譜中的存在或不存在極性官能團(tuán)，在多相萃取中的酸性和堿性介質(zhì)中的物質(zhì)穩(wěn)定性等。本領(lǐng)域技術(shù)人員會應(yīng)用最合適的技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)所需的分離。
基于物理化學(xué)差異，利用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法，例如色譜和/或分級結(jié)晶，可以將非對映異構(gòu)體混合物分離為其單一非對映異構(gòu)體。對映異構(gòu)體可以如下分離通過與合適的旋光性化合物(例如手性助劑，例如手性醇或Mosher′s酰氯)反應(yīng)，將對映異構(gòu)體混合物轉(zhuǎn)化為非對映異構(gòu)體混合物，分離非對映異構(gòu)體，并將單一非對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如水解)為相應(yīng)的純對映異構(gòu)體。同樣，本發(fā)明的一些化合物可能是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如取代的聯(lián)芳基)，并且認(rèn)為其是本發(fā)明的一部分。還可以使用手性HPLC柱分離對映異構(gòu)體。
單一的立體異構(gòu)體，例如對映異構(gòu)體(基本上不含其立體異構(gòu)體)可以使用例如使用光學(xué)活性拆分試劑形成非對映異構(gòu)體的方法，通過拆分消旋混合物而獲得。(Eliel，E.和Wilen，S.″Stereochemistry ofOrganic Compounds，″JohnWiley & Sons，Inc.，New York，1994；Lochmuller，C.H.，J.Chromatogr.，(1975)113(3)283-302)。本發(fā)明手性化合物的消旋混合物通過任一合適的方法分開和分離，其包括(1)與手性化合物形成離子、非對映異構(gòu)體鹽，通過分級結(jié)晶或其它方法進(jìn)行分離，(2)與手性衍生化試劑形成非對映異構(gòu)體化合物，分離非對映異構(gòu)體，并轉(zhuǎn)化為純的立體異構(gòu)體，和(3)在手性條件下，直接分離基本上純的或富集的立體異構(gòu)體。參見″Drug Stereochemistry，Analytical Methods and Pharmacology，″Irving W.Wainer編，Marcel Dekker，Inc.，New York(1993)。
在方法(1)中，非對映異構(gòu)體鹽可以由對映異構(gòu)體純的手性堿例如番木鱉堿、奎寧、麻黃堿、馬錢子堿、α-甲基-β-苯乙胺(苯丙胺)等與攜帶酸性官能團(tuán)例如羧酸和磺酸的不對稱化合物的反應(yīng)形成。通過分級結(jié)晶或離子色譜，可以誘導(dǎo)分離非對映異構(gòu)體鹽。對于氨基化合物的旋光異構(gòu)體的分離，加入手性羧酸或磺酸，例如樟腦磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸，可以致使非對映異構(gòu)體鹽的形成。
或者，通過方法(2)，使所要拆分的底物與手性化合物的一個(gè)對映異構(gòu)體反應(yīng)，形成非對映異構(gòu)體對(E.和Wilen，S.″Stereochemistry of OrganicCompounds″，John Wiley & Sons，Inc.，1994，p.322)。非對映異構(gòu)體化合物可以由不對稱化合物與對映異構(gòu)體純的手性衍生化試劑例如薄荷基衍生物的反應(yīng)而形成，然后分離非對映異構(gòu)體，并水解，以產(chǎn)生純的或富集的對映異構(gòu)體。測定光學(xué)純度的方法包括在堿的存在下制備消旋混合物的手性酯，例如薄荷基酯，例如(-)氯甲酸薄荷基酯，或Mosher酯(-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(Jacob III.J.Org.Chem.(1982)474165)，并分析1H NMR光譜，確定兩種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體的存在。按照分離阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體萘基-異喹啉(WO 96/15111)的方法，通過正和反向色譜法，可以分開和分離阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體化合物的穩(wěn)定非對映異構(gòu)體。通過方法(3)，可以通過使用手性固定相的色譜來分離兩個(gè)對映異構(gòu)體的消旋混合物(″Chiral LiquidChromatography″(1989)W.J.Lough編，Chapman和Hall，New York；Okamoto，J.of Chromatogr.，(1990)513375-378)。通過辨別其它手性分子(帶有不對稱碳原子)所使用的方法(例如旋光和圓二色性)，可以區(qū)別富集的或純對映異構(gòu)體。
使用式I或Ia化合物的治療方法 本發(fā)明的化合物可以用作治療疾病或病癥的預(yù)防或治療劑，該疾病或病癥是通過調(diào)控或調(diào)節(jié)AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶介導(dǎo)的。可以按照本發(fā)明方法治療的AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥包括，但不限于，炎性(inflammatory)、過度增生性(hyperproliferative)、心血管(cardiovascular)、神經(jīng)變性(neurodegenerative)、婦科(gynecological)和皮膚(dermatological)疾病(disease)和病癥(disorder)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物用于治療過度增生性病癥，包括下列類型的癌癥(1)心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；(2)肺支氣管癌(鱗狀細(xì)胞癌、未分化的小細(xì)胞癌、未分化的大分子細(xì)胞癌、腺癌)、蜂窩狀(細(xì)支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤的錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌；(3)胃腸食道(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(管道(ductal)腺癌、胰島瘤、胰升血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、舒血管腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波斯肉瘤(Karposi′s sarcoma)、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、纖維神經(jīng)瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；(4)泌尿生殖道腎臟(腺癌、胚胎性癌肉瘤[韋母氏瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、絨膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；(5)肝臟肝癌(肝細(xì)胞癌)、肝膽管型肝癌、肝胚細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞性的腺瘤、血管瘤；(6)骨骼骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性的纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多重骨髓癌、惡性的巨細(xì)胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨黏液樣纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞瘤；(7)神經(jīng)體系頭骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)、腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、胚組織瘤[松果體瘤]、多形性惡性膠質(zhì)瘤、寡枝神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)、脊髓纖維神經(jīng)瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；(8)婦科疾病子宮(子宮內(nèi)膜癌)、宮頸(宮頸癌、腫瘤前子宮頸非典型增生)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、無類別的癌]、粒膜-膜的細(xì)胞腫瘤、卵巢塞萊二氏細(xì)胞瘤、無性細(xì)胞瘤、卵巢未成熟畸胎瘤)、外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)；(9)血液血液(骨髓性白血病[急性和慢性]、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓及外骨髓增殖疾病、多重骨髓癌、脊髓發(fā)育不良綜合癥)、淋巴肉芽腫病、非Hodgkin′s淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；(10)皮膚發(fā)展性黑素瘤、惡性黑色素瘤、皮膚基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波斯肉瘤、鼴鼠混合體型痣(moles dysplastic nevi)、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；(11)腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤；(12)乳房轉(zhuǎn)移性的乳房癌；乳房腺癌；(13)結(jié)腸；(14)口腔；(15)毛細(xì)胞白血病；(16)頭和頸；(17)及其它、包括難治療的轉(zhuǎn)移性疾??；卡波濟(jì)氏肉瘤；Bannayan-Zonana綜合癥；和考登病(Cowden disease)或Lhermitte-Duclos病，及其它種類的過度增生性疾病。
本發(fā)明的化合物和方法也可以用于治療下列疾病和病癥例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、節(jié)段性回腸炎(Chron′s disease)、血管纖維瘤、眼睛疾病(例如視網(wǎng)膜血管再生、糖尿病性視網(wǎng)膜病、年齡相關(guān)的黃斑變性、黃斑變性等)、多發(fā)性腦硬化、肥胖癥、阿爾海默氏疾病、再狹窄、自身免疫疾病、過敏、哮喘、子宮內(nèi)膜異位、動脈粥樣硬化、靜脈移植狹窄、迫位吻合修復(fù)移植狹窄、前列腺增生、慢性阻塞性肺病、牛皮癬、由于組織修復(fù)而造成的神經(jīng)損傷抑制、瘢痕組織形成(可以幫助創(chuàng)傷愈合)、多發(fā)性腦硬化、炎性疾病腸病、感染、尤其是細(xì)菌、病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒或寄生蟲感染(通過增加細(xì)胞程序死亡)、肺病、瘤、帕金森氏癥、移植排斥(免疫抑制劑)、膿毒性休克等。
因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了治療哺乳動物中AKT蛋白激酶介導(dǎo)的疾病或醫(yī)學(xué)病癥的方法，包括向所述哺乳動物給藥有效治療或預(yù)防所述病癥量的一種或多種式I或Ia的化合物或其可藥用鹽或前藥。
短語“有效量”是指當(dāng)給藥至有此治療需要的哺乳動物時(shí)，足以產(chǎn)生下列效果的化合物的量(i)治療或預(yù)防具體一種或多種AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶介導(dǎo)的疾病、病癥或障礙，(ii)減弱、改善或消除具體疾病、病癥或障礙的一或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或延遲本文所述的具體疾病、病癥或障礙的一種或多種癥狀的發(fā)作。在癌的情況下，有效量的藥物可以減少癌細(xì)胞數(shù)目；降低腫瘤大?。灰种?即在某種程度上減緩，優(yōu)選終止)癌細(xì)胞浸透到周圍器官中；抑制(即在某種程度上減緩，優(yōu)選終止)腫瘤轉(zhuǎn)移；在某種程度上抑制腫瘤生長；和/或在某種程度上減輕與癌相關(guān)的一種或多種癥狀。為了達(dá)到藥物可以預(yù)防所存在癌細(xì)胞的生長和/或?qū)⑵錃⑺赖某潭龋淇梢允羌?xì)胞生長抑制劑和/或細(xì)胞毒素。對于癌癥治療，可以例如通過評價(jià)疾病進(jìn)展的時(shí)間(TTP)和/或測定反應(yīng)率(RR)來測定其效果。
式I或Ia化合物的量會根據(jù)許多因素而變化，例如具體化合物、疾病和其嚴(yán)重程度、需要治療的哺乳動物的特性(例如體重)，然而，通常可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員來確定。
“治療”是指至少將由一種或多種AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶的活性所影響的(至少在某種程度上)的哺乳動物例如人的疾病減輕。術(shù)語“治療”和“醫(yī)治”指的是治療性治療以及預(yù)防或阻止性措施，其中目的是預(yù)防或延遲(衰減)不希望的生理變化或異常。對本發(fā)明來說，有利的或所需臨床效果包括，但不限于，癥狀減輕，疾病程度降低，疾病狀態(tài)穩(wěn)定化(即未惡化)，延遲或減緩疾病發(fā)展，改善或減緩疾病狀態(tài)，和癥狀緩解(不論是部分的或全部的)，不論是否是可檢測或不可檢測的?！爸委煛边€可以是指與不得到醫(yī)治而期望的存活相比，可以延長存活。需要治療的那些包括患有病癥或障礙的那些，以及發(fā)現(xiàn)傾向于患有疾病但還沒有診斷患有疾病的那些；需要調(diào)節(jié)和/或抑制疾病的那些。術(shù)語“治療”包括預(yù)防措施(preventative)，即預(yù)防性的(prophiactic)，和減輕療法。
本文使用的術(shù)語“哺乳動物”是指具有或處于本文所述疾病的發(fā)展危險(xiǎn)之中的溫血?jiǎng)游?，包括但不限于豚鼠，狗，貓，大鼠，小鼠，倉鼠和靈長類，包括人。
本發(fā)明也提供了式I或Ia化合物，其用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥。
本發(fā)明的其它方面是式I或Ia化合物在制備用于治療(例如治療或預(yù)防AKT蛋白激酶介導(dǎo)的)病癥的藥物中的用途。
組合治療 本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其它藥物(例如如下所述的藥物)組合使用。根據(jù)臨床使用劑量，可以適當(dāng)?shù)剡x擇第二種藥物的劑量。本發(fā)明化合物和第二種藥物的比例可以恰當(dāng)?shù)匕凑战o藥患者、給藥途徑、靶向疾病、臨床病癥、組合及其它因素來確定。如果給藥患者是人，例如，第二種藥物可以使用的量是每重量份數(shù)的本發(fā)明化合物的0.01至100重量份數(shù)。
優(yōu)選地，藥物組合制劑或劑量方案的第二種化合物對本發(fā)明的化合物具有輔助活性，以使它們不會相互不利地影響。這種藥物可以以有效用于所需目的的量合適地存在于組合中。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了組合物，其包含本發(fā)明的化合物以及(例如本文所述的)第二種藥物。
可以在單元藥物組合物中一起給藥本發(fā)明的化合物和其它藥學(xué)活性藥物，或單獨(dú)給藥，并且當(dāng)單獨(dú)給藥時(shí)，其可以以任何順序同時(shí)或順序地給藥。這種順序給藥可以在時(shí)間上是接近的，或在時(shí)間上間隔很長?？梢赃x擇本發(fā)明化合物和第二種藥物的量以及給藥的相對時(shí)機(jī)，以便實(shí)現(xiàn)所需的組合的治療效果。
組合治療(combination therapy)可以提供“協(xié)同作用”，并且證明是“協(xié)同的”，即，一起使用活性組分時(shí)獲得的效果大于由單獨(dú)使用化合物所產(chǎn)生效果的和。當(dāng)活性組分是下列時(shí)，可以獲得協(xié)同效應(yīng)(1)在組合的單元?jiǎng)┝恐苿┲泄餐渲坪屯瑫r(shí)給藥或遞送的；(2)以獨(dú)立制劑形式交替或平行遞送；或(3)通過其它方案。當(dāng)在交替性治療中遞送時(shí)，可以獲得協(xié)同效應(yīng)，此時(shí)化合物是順序給藥或遞送的，例如，通過獨(dú)立注射器中的不同注射液。通常，在交替治療期間，順序地給藥各個(gè)活性組分的有效劑量，即連續(xù)給藥，而在組合治療中，一起給藥兩種或多種活性組分的有效劑量。
“化學(xué)治療劑(chemotherapeutic agent)”是用于治療癌癥的化合物，與作用機(jī)理無關(guān)?；瘜W(xué)治療劑包括用于“靶向治療”和常規(guī)化學(xué)治療中的化合物。
化學(xué)治療劑的實(shí)例包括埃洛替尼(

Genentech/OSIPharm.)、硼替佐米(Bortezomib)(

Millennium Pharm.)、Fulvestrant(

AstraZeneca)、舒尼替尼(sutent)(SU11248，Pfizer)、來曲唑(

Novartis)、伊馬替尼甲磺酸鹽(

Novartis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、奧沙利鉑(

Sanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、亞葉酸、雷帕霉素(Sirolimus，

Wyeth)、拉帕替尼(lapatinib)(

GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(lonafarnib)(SCH66336)、索拉非尼(sorafenib)(BAY43-9006，Bayer Labs)、依立替康(

Pfizer)和吉非替尼(

AstraZeneca)、AG 1478、AG1571(SU 5271；Sugen)、烷基化劑，例如硫替派和

環(huán)磷酰胺；烷基磺酸鹽，例如白消安、英丙舒凡(Improsulfan)和保釋芬；氮雜環(huán)丙烷例如苯佐替派、卡波醌、美妥替派和烏瑞替派；氮雜環(huán)丙烷和甲基蜜胺包括六甲蜜胺、曲他胺、三亞乙基磷酰胺、三乙撐硫代磷酰胺和三甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜樹堿(包括合成類似物托泊替康)；苔蘚抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多來新，卡折來新和比折來新合成類似物)；自念珠藻環(huán)肽(尤其是自念珠藻環(huán)肽1和自念珠藻環(huán)肽8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括其合成類似物，KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素；水鬼蕉堿(pancratistatin)；sarcodictyin；spongistatin；氮芥例如苯丁酸氮芥，萘氮芥，氯磷酰胺，雌莫司汀，異環(huán)磷酰胺，二氯甲二乙胺，鹽酸二氯甲二乙胺氧化物，苯丙氨酸氮芥，新氮芥，膽甾醇苯乙酸氮芥，松龍苯芥，氯乙環(huán)磷酰胺，尿嘧啶氮芥；亞硝基脲例如卡莫司汀，吡葡亞硝脲，福莫司汀，環(huán)己亞硝脲，嘧啶亞硝脲，和雷莫司??；抗生素例如烯二炔抗生素(例如，刺孢霉素，尤其是刺孢霉素gammalI和刺孢霉素omegaI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33183-186)；蒽環(huán)類抗生素，包括蒽環(huán)類抗生素A；雙磷酸鹽類，例如氯膦酸鹽；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素，放線菌素，authramycin，偶氮絲氨酸，博來霉素，放線菌素C，去甲柔紅霉素，洋紅霉素，嗜癌霉素，色霉素(chromomycinis)，放線菌素，柔紅霉素，地托比星，6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸，

(多柔比星)，嗎啉基-多柔比星，氰基嗎啉代-多柔比星，2-吡咯啉基-多柔比星和去氧多柔比星)，表柔比星，依索比星，伊達(dá)比星，麻西羅霉素，絲裂霉素例如絲裂霉素C，霉酚酸，諾加霉素，橄欖霉素，硫酸培洛霉素，波福霉素，嘌呤霉素，三鐵阿霉素，羅多比星，鏈黑菌素，鏈脲霉素，殺結(jié)核菌素，烏苯美司，新制癌菌素，佐柔比星；抗代謝產(chǎn)物例如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物例如二甲葉酸，氨甲喋呤，蝶羅呤，三甲曲沙；嘌呤類似物例如氟達(dá)拉濱，6-巰基嘌呤，硫咪嘌呤，硫鳥嘌呤；嘧啶類似物例如安西他濱，阿扎胞苷，6-氮尿苷，卡莫氟，阿糖胞苷，二脫氧尿苷，去氧氟尿苷，依諾他濱，氮尿苷；雄激素例如卡普睪酮，屈他雄酮丙酸鹽，環(huán)硫雄醇，美雄烷，睪內(nèi)酯；抗腎上腺藥例如氨魯米特，米托坦，曲洛司坦；葉酸補(bǔ)充劑例如亞葉酸；醋葡醛內(nèi)酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙；defofamine；秋水仙胺；地吖醌；依氟鳥氨酸(elfornithine)；依利醋銨；埃坡霉素；依托格魯；硝酸鎵；羥基脲；蘑菇多糖；lonidainine；美登素類例如美登素和美登木素；丙脒腙；米托蒽醌；莫哌達(dá)醇；二胺硝吖啶(nitraerine)；噴司他?。坏鞍钡?；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基異煙酰肼；普魯芐肼；

多糖復(fù)合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；丙亞胺；利索新；西佐喃；鍺螺胺；細(xì)交鏈孢菌酮酸；三乙撐亞胺苯醌；2，2′，2″-三氯三乙胺；單端孢霉烯族毒素類(尤其是T-2毒素，疣孢菌素(verracurin)A，桿孢菌素A和蛇形菌素)；尿烷；去乙酰長春酰胺；達(dá)卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴衛(wèi)矛醇；雙溴丙基哌嗪；gacytosine；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；環(huán)磷酰胺；硫替派；紫杉類藥物，例如，

(太平洋紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)、ABRAXANETM(不含Cremophor)、太平洋紫杉醇的白蛋白-工程化的納米顆粒制劑(American Pharmaceutical Partners，Schaumberg，Illinois)，和

(多西他賽(doxetaxel)；

-Poulenc Rorer，Antony，F(xiàn)rance)；氯氨布西；

(吉西他濱)；6-硫代鳥嘌呤；巰基嘌呤；氨甲喋呤；鉑類似物例如順鉑和卡鉑；長春花堿；依托泊苷(VP-16)；異環(huán)磷酰胺；米托蒽醌；長春花新堿；

(長春瑞賓)；諾安托；表鬼臼毒噻吩糖苷；依達(dá)曲沙；柔毛霉素；氨基蝶呤；卡培他濱(

)；依班膦酸鹽；CPT 11；局部異構(gòu)酶抑制劑RFS2000；二氟甲基鳥氨酸DMFO)；類視黃醇例如視黃酸；和上述任一項(xiàng)的可藥用鹽、酸和衍生物。
也包括在“化學(xué)治療劑”的定義中的是(i)起調(diào)節(jié)或抑制激素對腫瘤的作用的抗激素試劑例如抗雌激素劑和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，包括，例如，它莫西芬(包括

；檸檬酸它莫西芬)、雷諾昔酚、屈洛昔芬、4-羥基它莫西芬、曲沃昔芬、雷洛西芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮，和

(檸檬酸托瑞米芬)；(ii)抑制芳香酶的芳香酶抑制劑，其調(diào)節(jié)腎上腺中雌激素的產(chǎn)生，例如，4(5)-咪唑、氨魯米特、

(甲地孕酮)、

(依西美坦；輝瑞)、福美坦、法倔唑、

(伏氯唑)、

(來曲唑；Novartis)和

(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他濱(1，3-二氧戊烷核苷胞嘧啶類似物)；(iv)蛋白激酶抑制劑；(v)脂質(zhì)激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，尤其是抑制和異常細(xì)胞增殖有關(guān)的信號路徑中的基因表達(dá)的那些，例如，PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核糖酶，例如VEGF表達(dá)抑制劑(例如

)和HER2表達(dá)抑制劑；(viii)疫苗，例如基因治療疫苗，例如，

和

rIL-2；局部異構(gòu)酶1抑制劑例如


rmRH；(ix)抗生成血管試劑，例如阿瓦斯丁(

Genentech)；和(x)上述任一項(xiàng)的可藥用鹽、酸和衍生物。
還包括在“化學(xué)治療劑”的定義中的是治療抗體，例如阿侖單抗(Campath)，阿瓦斯丁(

Genentech)；西妥昔單抗(

Imclone)；帕尼單抗(panitumumab)(

Amgen)、美羅華(

Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠單抗(Pertuzumab)(

2C4，Genentech)、曲妥單抗(

Genentech)、托西莫單抗(Bexxar，Corixia)和抗體藥物共軛物，吉妥珠單抗奧唑米星(gemtuzumab ozogamicin)(

Wyeth)。
在與本發(fā)明的PI3K抑制劑的組合中，具有作為化學(xué)治療劑的治療潛力的人源化單克隆抗體包括阿侖單抗、阿泊珠單抗(apolizumab)、阿塞珠單抗(aselizumab)、atlizumab、bapineuzumab、貝伐單抗、比伐單抗mertansine、cantuzumab mertansine、西利珠單抗、塞妥珠單抗(certolizumab pegol)、cidfusituzumab、cidtuzumab、達(dá)(克)珠單抗、依庫珠單抗(eculizumab)、依法利珠(efalizumab)、依帕珠單抗、厄利珠單抗(erlizumab)、非維珠單抗、芳妥珠單抗(fontolizumab)、吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、inotuzumab奧佐米星、ipilimumab、拉貝珠單抗(labetuzumab)、林妥珠單抗、馬妥珠單抗(matuzumab)、美泊珠單抗、motavizumab、motovizumab、那他珠單抗(natalizumab)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、nolovizumab、numavizumab、ocrelizumab、奧馬珠單抗、帕利珠單抗、帕考珠單抗(pascolizumab)、pecfusituzumab、pectuzumab、帕妥珠單抗(Pertuzumab)、pexelizumab、ralivizumab、ranibizumab、reslivizumab、瑞利珠單抗(reslizumab)、resyvizumab、羅維珠單抗(rovelizumab)、盧利珠單抗(ruplizumab)、西羅珠單抗、希普利珠單抗(siplizumab)、索土珠單抗(sontuzumab)、tacatuzumab tetraxetan、tadocizumab、他利珠單抗(talizumab)、tefibazumab、托珠單抗(tocilizumab)、托利珠單抗(toralizumab)、曲妥珠單抗、tucotuzumab西莫白介素、tucusituzumab、umavizumab、烏珠單抗(urtoxazumab)，和維西珠單抗(visilizumab)。
給藥途徑 本發(fā)明的化合物可以通過任何適合于所治療病癥的途徑給藥。合適的途徑包括口服、腸胃外(包括皮下、肌注、靜脈內(nèi)、動脈注射、真皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)、透皮、直腸、經(jīng)鼻、局部(包括面頰和舌下)、陰道、腹腔內(nèi)、肺內(nèi)和鼻內(nèi)給藥。應(yīng)當(dāng)理解，優(yōu)選途徑可以隨例如受試者的病癥而變化。如果化合物是口服給藥的，可以將其與可藥用載體或賦形劑配制為丸劑、膠囊、片劑等。如果化合物是胃腸外給藥的，可以將其與可藥用腸胃外載體一起配制，并且以下面詳述的單位劑量可注射形式。
藥物制劑 為了使用本發(fā)明化合物治療(包括預(yù)防性治療)哺乳動物(包括人)，通常按照標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐將其配制為藥物組合物。按照本發(fā)明的該方面，提供了包含本發(fā)明化合物的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，藥物組合物包含式I或Ia化合物以及可藥用稀釋劑或載體。
本發(fā)明的藥物組合物以一定方式進(jìn)行配制、劑量化和給藥，即數(shù)量、濃度、進(jìn)度、歷程、載體和給藥途徑均符合良好的醫(yī)療實(shí)踐。在本文中考慮的因素包括所治療的具體病癥、所治療的具體哺乳動物、個(gè)體患者的臨床病癥、病癥的病因、藥劑的遞送位點(diǎn)、給藥方法、給藥的日程表，和醫(yī)學(xué)專業(yè)人員已知的其它因素。所給藥的化合物的治療有效量取決于這種考慮，并且是預(yù)防、改善或治療病癥需要的最低量。本發(fā)明的化合物通常配制為藥物劑型，以提供容易控制的藥物劑量，并且能夠使患者適應(yīng)預(yù)定方案。
優(yōu)選地，本文使用的組合物是無菌的。尤其是，用于體內(nèi)給藥的制劑必須是無菌的。這種殺菌很容易實(shí)現(xiàn)，例如，通過無菌過濾膜進(jìn)行過濾?；衔锿ǔ？梢砸怨腆w組合物、冷凍干燥制劑或水溶液的形式儲藏。
可以制備本發(fā)明化合物的藥物制劑，用于各種給藥途徑和類型。例如，具有所需純度的本發(fā)明化合物可以任選與可藥用稀釋劑、載體、賦形劑或穩(wěn)定劑混合(Remington′s Pharmaceutical ScienceS(1980)第16版，Osol，A.Ed)，以冷凍干燥制劑、碾碎粉末或水溶液形式。可以通過在環(huán)境溫度，在合適的pH值下，和在所需純度下，與生理學(xué)可接受的載體(即在使用劑量和濃度下對于受試者是無毒的)一起混合進(jìn)行配制。制劑的pH值主要取決于化合物的具體用途和濃度，但可以在大約3至大約8的范圍。在pH值5的乙鹽酸緩沖液中進(jìn)行配制是合適的實(shí)施方案?？梢允褂贸Ｒ?guī)溶解和混合方法來制備制劑。例如，在一種或多種賦形劑的存在下，將本體藥物物質(zhì)(即本發(fā)明的化合物或化合物的穩(wěn)定化形式(例如，與環(huán)糊精衍生物或其它已知的絡(luò)合試劑的復(fù)合物))溶于合適溶劑中。
所使用的具體載體、稀釋劑或賦形劑取決于本發(fā)明化合物的應(yīng)用方法和目的。溶劑的選擇一般基于本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為可安全(GRAS)給藥至哺乳動物的溶劑。通常，安全溶劑是無毒的含水溶劑，例如水，以及其它可在水中溶解或互溶的無毒溶劑。合適的含水溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG 400，PEG 300)等，和其混合物?？山邮艿南♂寗⑤d體、賦形劑和穩(wěn)定劑在使用劑量和濃度下對于受試者是無毒性的，并且包括緩沖液，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其它有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗環(huán)血酸和甲硫氨酸；防腐劑(例如十八烷基二甲基芐基氯化銨；氯化六烴季銨；苯扎氯銨，芐索氯銨；酚，丁基或苯甲醇；對羥基苯甲酸烷基酯例如對羥基苯甲酸甲基酯或?qū)αu苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；和間甲酚)；低分子量(小于大約10個(gè)殘基)多肽；蛋白，例如血清清蛋白，凝膠，或免疫球蛋白；親水性聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸例如甘氨酸，谷酰胺，天冬酰胺酸，組氨酸，精氨酸，或賴氨酸；單糖、二糖及其它碳水化合物，包括葡糖，甘露糖，或糊精；螯合劑例如EDTA；糖例如蔗糖，甘露糖醇，海藻糖或山梨糖醇；形成鹽的反離子，例如鈉；金屬配合物(例如，Zn-蛋白配合物)；和/或非離子型表面活性劑例如TWEENTM，PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。制劑還可以包含一種或多種穩(wěn)定劑，表面活性劑，濕潤劑，潤滑劑，乳劑，懸浮劑，防腐劑，抗氧化劑，遮光劑，助流劑，加工助劑，色素，甜味劑，香料，調(diào)味劑及其它已知的添加劑，以提供具有精美外觀的藥物(即本發(fā)明的化合物或其藥物組合物)或幫助制備藥學(xué)產(chǎn)品(即藥物)?；钚运帉W(xué)組分還可以收集在微膠囊中，微膠囊是例如利用凝聚技術(shù)或利用界面聚合來制備的，例如羥甲基纖維素或凝膠-微膠囊和聚(甲基丙烯酸甲基酯)微膠囊，分別在膠體的給藥體系(例如脂質(zhì)體、白蛋白微球體、微乳狀液、納米顆粒和毫微囊劑)或在乳狀液中。這種技術(shù)是公開在Remington′s Pharmaceutical Sciences第16版，Osol，A.Ed.(1980)?！爸|(zhì)體”是由各種型式脂質(zhì)、磷脂和/或表面活性劑組成的小囊泡，其可給哺乳動物有效遞送藥物(例如式I或Ia的化合物和任選其它的治療劑)。脂質(zhì)體的組分通常以雙層形式配置，與生物膜的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)相似。
可以制備本發(fā)明化合物的緩釋制劑。緩釋制劑的合適例子包括含有式I或Ia化合物的固體疏水性聚合物的半滲透性基質(zhì)，該基質(zhì)是成形物品形式，例如膜或微膠囊。緩釋基質(zhì)的實(shí)例包括聚酯、水凝膠(例如聚(2-羥基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(美國專利3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的亞乙基-乙烯基乙酸酯、可降解的乳酸-羥基乙酸共聚物例如LUPRON DEPOT((由乳酸-羥基乙酸共聚物和亮丙瑞林乙酸鹽組成的可注射的微球體)和聚D-(-)-3-羥丁酸。
本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是無菌注射制劑形式，例如無菌可注射的含水或含油懸浮液?？梢园凑毡绢I(lǐng)域已知的方法配制這種懸浮液，使用上述那些合適的分散或濕潤劑和懸浮劑。無菌注射制劑還可以是在無毒胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液，或制備成冷凍干燥粉末形式。在可接受的載體和溶劑之中，可以使用的是水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，可以傳統(tǒng)地使用無菌的不揮發(fā)油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。對于這種目的，可以使用任何柔和的不揮發(fā)油，包括合成的單或二甘油脂。此外，也可以在注射制劑中使用脂肪酸例如油酸。
適于腸胃外給藥的制劑包括含水和無水無菌注射液，其可以含有抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和溶質(zhì)，使制劑與預(yù)定受試者的血液等滲；和可以包含懸浮劑和增稠劑的含水和非水無菌的懸浮液。
本發(fā)明的組合物還可以是適于口服使用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊、水性或油性懸浮液、乳液、可分散性粉劑或顆粒、漿液或酏劑)，局部使用形式(例如乳膏、油膏、凝膠劑或水性或油性溶液或懸浮液)，吸入給藥形式(例如細(xì)分散的粉末或液體氣霧劑)，吹入給藥形式(例如細(xì)分散的粉末)。
片劑制劑的合適的可藥用賦形劑包括例如惰性稀釋劑，例如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，造粒劑和崩解劑例如玉米淀粉或海藻酸；粘結(jié)劑例如淀粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉；防腐劑例如對羥基苯甲酸乙基酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，和抗氧化劑，例如抗環(huán)血酸。片劑制劑可以是無涂層的或涂層的，以改良它們的崩解作用和活性組分在胃腸道內(nèi)的隨后吸收，或改善它們的穩(wěn)定性和/或外觀，在兩種情況下都使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)包衣劑和方法。
口服使用的組合物可以是硬膠囊形式，在硬膠囊中，活性組分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或軟膠囊形式，在其中，活性組分與水或油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性懸浮液一般含有細(xì)粉狀形式的活性組分以及一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素，海藻酸鈉，聚乙烯-吡咯烷酮，黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，例如卵磷脂或氧化烯烴與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如硬脂酸聚氧乙烯酯)，或氧化乙烯與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物，例如十七烷環(huán)氧丙烷鯨蠟醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。水性懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙基酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯)，抗氧化劑(例如抗環(huán)血酸)，著色劑，調(diào)味劑，和/或甜味劑(例如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。
通過將活性組分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中，可以配制油性懸浮液。油性懸浮液還可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳├缟厦媪谐龅哪切┖驼{(diào)味劑，以提供適口的口服制劑。通過加入抗氧化劑例如抗環(huán)血酸，可以保存這些組合物。
適于制備水懸浮液的可分散性粉劑和顆粒(通過加入水)一般含有活性組分以及分散劑或潤濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。通過上述那些可以舉例說明合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑。還可以存在其它的賦形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油乳劑形式。油相可以是植物油，例如橄欖油或花生油，或礦物油，例如液體石蠟或這些的混合物。合適的乳劑可以是例如天然存在的樹膠，例如阿拉伯膠或黃蓍膠，天然存在的磷脂，例如大豆，卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯(例如山梨糖醇酐單油酸酯)和所述偏酯與氧化乙烯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。乳液還可以含有甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
漿液和酏劑可以與甜味劑例如丙三醇、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜或蔗糖一起配制，并且還可以含有緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
栓劑可以通過將活性組分與合適的無刺激性賦形劑(其在常溫下是固體，但在直腸溫度下是液體，因此在直腸中溶解，以釋放藥物)混合來制備。合適的賦形劑包括例如可可脂和聚乙二醇。適于陰道給藥的制劑可以以陰道栓、塞、乳膏、凝膠劑、軟膏、泡沫膠或噴霧劑的形式提供，除了含有活性組分之外，還含有本領(lǐng)域已知的合適載體。
局部制劑例如乳膏、油膏、凝膠劑和水性或油性溶液或懸浮液，一般可以使用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法，通過將活性組分與常規(guī)的局部可接受的載體或稀釋劑一起配制來獲得。
透皮給藥的組合物可以是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的那些透皮皮膚貼劑的形式。
適于肺內(nèi)或經(jīng)鼻給藥的制劑具有例如0.1至500微米范圍內(nèi)的粒徑(包括介于0.1和500微米范圍中間的粒徑，增量微米為例如0.5、1、30微米、35微米等)，通過使其快速吸入鼻腔來給藥，或通過吸入口腔來給藥，以便達(dá)到肺泡囊中。合適的制劑包括活性組分的水性或油性溶液。適于氣霧劑或干粉給藥的制劑可以按照常規(guī)方法制備，并且可以與其它治療劑例如迄今用于治療或預(yù)防如下所述病癥的化合物一起遞送。
本申請的藥物組合物(或制劑)可以以各種方式包裝，這取決于給藥藥物所使用的方法。例如，用于分配的物品可以包括容器，在其中，藥物制劑以合適的形式放置。合適的容器對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，并且包括材料例如瓶(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金屬筒等。容器還可以包括防干擾體系，以防止不慎重使用包裝的內(nèi)含物。此外，容器具有設(shè)置在其上的標(biāo)簽，標(biāo)簽描述容器的內(nèi)含物。標(biāo)簽還可以包括合適的警告。制劑還可以包裝在單劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以保存在冷凍干燥(凍干)條件下，在使用之前，只需要加入無菌的液體載體，例如水，用于立刻注射。臨時(shí)的注射液和懸浮液是用先前描述的種類的無菌粉末、顆粒和片劑制備的。優(yōu)選的單位劑量制劑是含有本文上面列舉的活性組分的日劑量或單位日亞劑量、或其合適部分的那些制劑。
本發(fā)明還提供了獸用組合物，其包含至少一種如上所定義的活性組分以及獸用載體。獸用載體是可用于給藥組合物目的的材料，并且可以是固體、液體或氣態(tài)物質(zhì)，其是惰性的或在獸醫(yī)領(lǐng)域是可接受的，并且與活性組分相容。這些獸用組合物可以胃腸外、口服給藥，或通過任何其它所需途徑給藥。
與一種或多種賦形劑組合來制備單一劑型的本發(fā)明化合物的量必定是變化的，這取決于治療的患者、病癥或癥狀的嚴(yán)重程度、給藥速率、化合物的配置和處方醫(yī)師的判斷。在一個(gè)實(shí)施方案中，向需要的哺乳動物給藥合適數(shù)量的本發(fā)明化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，給藥數(shù)量在每天大約0.001mg/kg體重至大約60mg/kg體重之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給藥數(shù)量在每天0.5mg/kg體重至大約40mg/kg體重之間。在有些情況下，低于上述范圍下限的劑量水平可以可能是更合適的，而在其它情況下，可能使用大劑量，不會引起任何不良副作用，條件是，首先將這種大劑量分成幾個(gè)小劑量，用于全天給藥。對于給藥途徑和劑量方式的更加詳盡的資料，參見ComprehensiveMedicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，第5卷，第25.3章，Pergamon Press 1990，將其具體引入作為參考。
制品 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了含有可用于治療如上所述病癥的物質(zhì)的制品或“試劑盒”。在一個(gè)實(shí)施方案中，試劑盒包含容器，該容器包含本發(fā)明的化合物。合適的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包裝等。容器可以由各種材料例如玻璃或塑料形成。容器可以容納有效治療病癥的量的本發(fā)明化合物或其制劑，并且可以具有無菌的入口(例如，容器可以是靜脈內(nèi)溶液袋或具有塞子的小瓶，可以用皮下注射針刺穿)。
試劑盒可以在容器上或與容器相關(guān)地進(jìn)一步包括標(biāo)簽或包裝說明書。術(shù)語“包裝說明書”指的是通常包括在治療產(chǎn)品的商業(yè)包裝中的說明，其包括這種治療產(chǎn)品的有關(guān)指標(biāo)、用途、劑量、給藥、禁忌癥和/或涉及使用的警告的介紹。在一個(gè)實(shí)施方案中，標(biāo)簽或包裝說明書注明包含本發(fā)明化合物的組合物可用于治療例如AKT激酶介導(dǎo)的病癥。標(biāo)簽或包裝說明書還可以注明組合物可用于治療其它病癥。
在某些實(shí)施方案中，試劑盒適合于遞送固體口服形式的本發(fā)明化合物，例如片劑或膠囊。優(yōu)選，這種試劑盒包含許多單位劑量。這種試劑盒可以包含卡片，其上面表明了與它們所需的用途有關(guān)的劑量。這種試劑盒的實(shí)例是“泡罩包裝”。起泡填充物在包裝工業(yè)中為大家所熟知，并且廣泛地用于包裝藥物單位劑型。如果需要的話，可以提供記憶輔助工具，例如，以數(shù)目、字母或其它標(biāo)志形式，或用日程表，在可以給藥劑量的治療日程中標(biāo)明天數(shù)。
按照另一個(gè)實(shí)施方案，試劑盒可以包括(a)第一容器，具有含有在其中的本發(fā)明的化合物；和(b)第二容器，具有含有在其中的第二藥物制劑，其中第二種藥物制劑包括可用于治療AKT激酶介導(dǎo)病癥的第二化合物。或者，試劑盒可以進(jìn)一步包含第三容器，其包含可藥用的緩沖液例如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸緩沖鹽水、林格溶液和葡萄糖溶液。其可以進(jìn)一步包含其它合乎需要的材料(從商品和使用者觀點(diǎn)來說)，包含其它緩沖液、稀釋劑、過濾器、針和注射器。
試劑盒可以進(jìn)一步包含給藥本發(fā)明化合物和第二藥物制劑(如果存在的話)的指示。例如，如果試劑盒包含第一組合物(包含本發(fā)明化合物和第二藥物制劑)，試劑盒可以進(jìn)一步包含同時(shí)、順序或單獨(dú)給藥需要的患者第一和第二藥物組合物的指示。
在其中試劑盒包含本發(fā)明的組合物和第二治療劑的某些其它實(shí)施方案中，試劑盒可以包含容器，其用于容納單獨(dú)的組合物，例如分開的瓶或分開的薄箔包裝，然而，單獨(dú)的組合物還可以包含在單個(gè)未分開的容器之內(nèi)。在某些實(shí)施方案中，試劑盒包含給藥單獨(dú)組分的用法說明書。當(dāng)優(yōu)選以不同劑型(例如口服和腸胃外)給藥的分開的組分時(shí)，是以不同的劑量間隔給藥的，或當(dāng)處方醫(yī)師想要確定聯(lián)用藥的單一組分的劑量時(shí)，試劑盒形式是特別有利的。
相應(yīng)地，本發(fā)明的其它方面提供了用于治療Akt激酶介導(dǎo)的病癥或疾病的試劑盒，其中所述試劑盒包含a)第一藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽；和b)使用說明書。
在某些實(shí)施方案中，試劑盒還包含(c)第二藥物組合物，其中第二藥物組合物包含適于治療Akt激酶介導(dǎo)的病癥或疾病的第二化合物。在包含第二藥物組合物的某些實(shí)施方案中，試劑盒進(jìn)一步包含說明書，用于說明同時(shí)、順序或單獨(dú)給藥需要的患者所述第一和第二藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，所述第一和第二藥物組合物包含在單獨(dú)的容器中。在其它實(shí)施方案中，所述第一和第二藥物組合物包含在相同容器中。
盡管式I或Ia化合物作為哺乳動物的治療劑基本上是有價(jià)值的，但它們還可用于(根據(jù)需要)控制AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶。因此，它們可用作藥理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品，用于開發(fā)新的生物試驗(yàn)和尋找新的藥理學(xué)試劑。
本發(fā)明化合物可在體外、體內(nèi)或在細(xì)胞系中測試對于AKT蛋白激酶、酪氨酸激酶、其它絲氨酸/蘇氨酸激酶和/或雙重特異性激酶的活性。體外測試包括測定抑制激酶活性的測試。交替性體外測試可定量抑制劑與激酶結(jié)合的能力，并且可以通過在結(jié)合之前放射性標(biāo)記抑制劑、分離抑制劑/激酶復(fù)合物以及測定放射性同位素結(jié)合的量來測量，或通過運(yùn)行競爭性實(shí)驗(yàn)(其中用已知的放射性配體培養(yǎng)新的抑制劑)來測量。這些以及其它用于體外和細(xì)胞培養(yǎng)的測試對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是眾所周知的。
盡管已經(jīng)在某種程度上詳細(xì)地描述和說明了本發(fā)明，但應(yīng)當(dāng)理解，僅僅通過舉例完成了本公開，在不背離下文所要求的本發(fā)明的精神和范圍的條件下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借助于各個(gè)部分的組合和排列進(jìn)行許多變化。
生物學(xué)實(shí)施例 AKT-1激酶測試 本發(fā)明所述化合物的活性可以通過下列激酶測試測定，該測試通過全長人重組體活性AKT-1(使用可商購IMAP試劑盒進(jìn)行熒光偏振)，測定熒光標(biāo)記的肽的磷酸化。
測試材料得自于IMAP AKT Assay Bulk Kit(產(chǎn)品#R8059)，MolecularDevices，Sunnyvale，CA。試劑盒材料包括IMAP反應(yīng)緩沖液(5x)。稀釋的1x IMAP反應(yīng)緩沖液包含10mM Tris-HCl(pH 7.2)、10mM MgCl2、0.1％BSA、0.05％NaN3。通常在使用之前即刻將DTT加至1mM的最終濃度。還包含IMAP結(jié)合緩沖液(5x)和IMAP結(jié)合試劑。將IMAP結(jié)合試劑按照1∶400稀釋到1x IMAP結(jié)合緩沖液中，由此制備結(jié)合溶液。
熒光素標(biāo)記的AKT底物(Crosstide)具有序列(Fl)-GRPRTSSFAEG。在1xIMAP反應(yīng)緩沖液中配制20μM的儲備溶液。
使用的板包括Costar 3657(382孔，由聚丙烯制成，具有白色V形底)，用于化合物稀釋和制備化合物-ATP混合物。該測試板為PackardProxyPlateTM-384F。
使用的AKT-1由使用PDK1和MAP激酶2活化的全長人重組體AKT-1制得。
為了進(jìn)行測試，在DMSO中制備10mM的化合物儲備溶液。將儲備溶液和對照化合物連續(xù)稀釋(1∶2，9次)到DMSO(10μL化合物+10μL DMSO)中，得到超過所需劑量范圍的50x稀釋液系列。接下來，將2.1-μL等份化合物(在DMSO中)轉(zhuǎn)移至Costar 3657板中，該板包含50μL的10.4μM ATP(在含有1mM DTT的1x IMAP反應(yīng)緩沖液中)。徹底混合之后，將2.5-μL等分樣品轉(zhuǎn)移至ProxyPlateTM-384F板中。
測試通過加入2.5-μL等份溶液(含有200nM熒光標(biāo)記的肽底物和4nMAKT-1)來引發(fā)。將板在1000g下離心1分鐘，并在環(huán)境溫度下培養(yǎng)60分鐘。然后，通過加入15μL結(jié)合溶液來猝滅反應(yīng)，再次離心，在環(huán)境溫度下再培養(yǎng)30分鐘，然后在裝配的Victor 1420Multilabel HTS Counter上讀數(shù)，測量熒光偏振。
在上述測試中，對實(shí)施例1-168的化合物進(jìn)行測試，發(fā)現(xiàn)具有小于10μM的IC50值。
制備實(shí)施例 為了說明本發(fā)明，包括下列實(shí)施例。然而，應(yīng)該理解，這些實(shí)施例不是限制本發(fā)明的，而僅僅提出實(shí)踐本發(fā)明的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以認(rèn)識到，可以容易地修改所描述的化學(xué)反應(yīng)，以制備許多其它本發(fā)明的化合物，并且認(rèn)為制備本發(fā)明化合物的其它方法在本發(fā)明范圍之內(nèi)。例如，利用對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的改進(jìn)，可以成功地進(jìn)行未舉例說明的按照本發(fā)明化合物的合成，例如，通過恰當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)干擾基團(tuán)，通過使用本領(lǐng)域已知的其它合適試劑(不是所描述的那些試劑)，和/或通過進(jìn)行反應(yīng)條件的常規(guī)改進(jìn)?；蛘撸J(rèn)為本文公開的或本領(lǐng)域已知的其它反應(yīng)用于制備本發(fā)明的其它化合物具有實(shí)用性。
在如下所述實(shí)施例中，除非另有陳述，所有的溫度以攝氏溫度列出。試劑是從商品供應(yīng)商例如Aldrich Chemical Company，Lancaster，TCI或Maybridge購買的，并且不用進(jìn)一步純化就可以使用，除非另有陳述。四氫呋喃(THF)、二氯甲烷(DCM)、甲苯和二噁烷是從Aldrich購買的，在可靠的密封瓶中，并且可以原樣使用。
下面列出的反應(yīng)一般在氮或氬氣的正壓下進(jìn)行，或用干燥管(除非另有說明)，在無水溶劑中，反應(yīng)燒瓶典型地配備橡膠隔片，用于通過針筒引入底物(substrate)和試劑。玻璃器皿是烘干的和/或加熱干燥的。
1H NMR光譜是在Varian儀器(在400MHz下運(yùn)轉(zhuǎn))上記錄的。1H-NMR光譜是以CDCl3、CD3OD、D2O或d6-DMSO溶液獲得的(以ppm報(bào)道)，使用四甲基硅烷(0.00ppm)或剩余溶劑(CDCl37.25ppm；CD3OD3.31ppm；D2O4.79ppm；d6-DMSO2.50ppm)作為參考標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)報(bào)道峰值多重性時(shí)，使用下列縮寫s(單峰)，d(雙峰)，t(三重峰)，M(多重峰)，br(寬峰)，dd(雙二重峰)，dt(雙三重峰)。偶合常數(shù)(當(dāng)給出時(shí))是以赫茲(Hz)報(bào)道。
實(shí)施例1
2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1向1L圓底燒瓶中加入(R)-(+)-胡薄荷酮(Pulegone)(76.12g，0.5mmol)、無水NaHCO3(12.5g)和無水醚(500mL)。在氮?dú)夥罩?，用冰浴冷卻反應(yīng)混合物。用30分鐘逐滴加入溴(25.62mL，0.5mmol)。過濾混合物，將其仔細(xì)地加入到NaOEt(21％，412mL，1.11mmol)中(在冰冷卻浴中)。在室溫下攪拌混合物過夜，而后加入1L 5％HCl和300mL醚。用醚(2×300mL)萃取水相。用水洗滌合并的有機(jī)相，干燥，濃縮。將殘余物加入到鹽酸氨基脲(37.5g)和NaOAc(37.5g)的水(300mL)加熱溶液中，而后加入煮沸的乙醇(300mL)，得到澄清溶液。將混合物回流2.5小時(shí)，而后在室溫下攪拌過夜。用1L水和300mL醚處理混合物。用醚(2×300mL)萃取水相。用水洗滌合并的有機(jī)相，干燥，濃縮。將殘余物通過真空蒸餾(73-76℃，0.8mm Hg)純化，得到(2R)-2-甲基-5-(丙-2-亞基)環(huán)戊烷羧酸乙基酯(63g，64％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)

4.13(m，2H)，3.38(d，J＝16Hz，0.5H)，2.93(m，0.5H)，2.50-2.17(m，2H)，1.98(m，1H)，1.76(m，1H)，1.23(m，6H)，1.05(m，6H)。
步驟2將(2R)-2-甲基-5-(丙-2-亞基)環(huán)戊烷羧酸乙基酯(24g，0.122mol)的乙酸乙酯(100mL)溶液用干冰/異丙醇冷卻至-68℃。將臭氧化的氧(5-7ft3h-1的O2)鼓泡通過溶液3.5小時(shí)。在室溫下，向反應(yīng)混合物中通入氮?dú)?，直到顏色消失為止。真空除去乙酸乙酯，并將殘余物溶?50mL乙酸中，用冰水冷卻。然后加入45g鋅粉。攪拌溶液30分鐘，而后過濾。用2N NaOH(1.3L)和NaHCO3中和濾液。用醚(3×200mL)萃取水相。合并有機(jī)相，用水洗滌，干燥，濃縮，得到(2R)-2-甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙基酯(20g，96％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)

4.21(m，2H)，2.77(d，J＝11.2Hz，1H)，2.60(m，1H)，2.50-2.10(m，3H)，1.42(m，1H)，1.33(m，3H)，1.23(m，3H)。
步驟3向(2R)-2-甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙基酯(20g，117.5mmol)和硫脲(9.2g，120.9mmol)混合物的乙醇(100mL)溶液中加入KOH(8.3g，147.9mmol)/水(60mL)。將混合物回流10小時(shí)。冷卻后，除去溶劑，在0℃，用濃HCl(12mL)中和殘余物，而后用DCM(3×150mL)萃取。除去溶劑，用硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到(R)-2-巰基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(12g，56％)。MS(APCI+)[M+H]+183。
步驟4向(R)-2-巰基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(12g，65.8mmol)的蒸餾水(100mL)懸浮液中加入阮內(nèi)鎳(15g)和NH4OH(20mL)?；亓骰旌衔?小時(shí)，然后過濾，濃縮濾液，得到(R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(9.89g，99％)。MS(APCI+)[M+H]+151。
步驟5將(R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(5.8g，38.62mmol)的POCl3(20mL)混合物回流5分鐘。真空除去過量POCl3，并將殘余物溶于DCM(50mL)中。然后將混合物加入到飽和NaHCO3(200mL)中。用DCM(3×100mL)萃取水相，干燥合并的有機(jī)相，濃縮。用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫，得到(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(3.18g，49％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.81(s，1H)，3.47(m，1H)，3.20(m，1H)，3.05(m，1H)，2.41(m，1H)，1.86(m，3H)，1.47(m，3H)。
步驟6向(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(0.5g，3.0mmol)的NMP(10mL)溶液中加入1-Boc-哌嗪(1.2g，2.17mmol)。將混合物在110℃下攪拌過夜。冷卻后，用乙酸乙酯(200mL)稀釋混合物，用水(6×100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫，得到(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.806g，86％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.48(s，1H)，3.68(m，2H)，3.60-3.40(m，7H)，2.84(m，2H)，2.30(m，1H)，1.67(m，1H)，1.49(m，9H)，1.18(d，J＝6.8Hz，3H)。MS(APCI+)[M+H]+319。
步驟7在DCM(20mL)中，將(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，6mL)處理6小時(shí)，提供(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.55g，99％)。MS(APCI+)[M+H]+219。
步驟8將2-(4-氯苯基)丙烯酸甲酯(1.00g，5.09mmol)的THF(2.5ml)溶液加入到i-PrNH2(650uL，7.63mmol)的THF(10ml)的攪拌溶液中。將反應(yīng)在室溫下攪拌過夜，通過LCMS分析至反應(yīng)完成。減壓除去溶劑，得到2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)丙酸甲酯(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 256.1，Rt1.97分鐘)，將其在室溫下再溶于DCM(15m1)中。通過移液管將Boc2O(1.29mL，5.59mmol)加入到攪拌的胺中，而后加入催化量(1mg)的DMAP。將反應(yīng)攪拌過夜，通過混合物的LCMS和TLC分析，至反應(yīng)完成。真空濃縮溶液，得到3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯油狀殘余物(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 256.1，Rt4.13分鐘)，將其再溶于THF(12.0mL)和水(4.0mL)中。用LiOH-H2O(1.07g，25.4mmol)處理不透明溶液，攪拌4小時(shí)，通過LCMS分析至反應(yīng)完成。用水稀釋溶液，用乙醚(除去)洗滌。用1M HCl溶液處理水溶液部分，直到獲得大約2至大約3的pH值為止，用乙酸乙酯萃取若干次。合并有機(jī)物，用鹽水洗滌，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸無色油狀物(1.04g，60％)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+242.0。
步驟9向(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，0.1mmol)的DCM(10mL)和三乙胺(1mL)溶液中加入3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(35mg，0.1mmol)和HBTU(39mg，0.1mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫，得到2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(25mg，44％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.44(s，1H)，7.30-7.20(m，4H)，3.90-3.18(m，9H)，3.18-2.70(m，4H)，2.28(m，1H)，1.83(m，1H)，1.65(m，1H)，1.47(s，9H)，1.12(m，3H)，0.98(m，3H)，0.68(m，3H)。MS(APCI+)[M+H]+542。
步驟10在DCM(10mL)中，將2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M在二噁烷，2mL)處理6小時(shí)，提供2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(24mg，99％)。MS(APCI+)[M+H]+442。
實(shí)施例2
(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1向(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(0.5g，3.0mmol)的NMP(5mL)溶液中加入(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.59g，3mmol)和二異丙基乙胺(0.52mL)。將混合物加熱至100℃，保持6小時(shí)。冷卻混合物，用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用水(6×100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。用硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到(S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.186g，19％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.46(s，1H)，4.66(m，1H)，4.30-3.80(m，3H)，3.47(m，1H)，3.20(m，1H)，3.20-2.80(m，4H)，2.22(m，1H)，1.70(m，1H)，1.49(s，9H)，1.29(m，3H)，1.17(m，3H)。MS(APCI+)[M+H]+333。
步驟2在DCM(20mL)中，將(S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，4mL)處理6小時(shí)，提供(R)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.18g，99％)。MS(APCI+)[M+H]+233。
步驟3向(R)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(32mg，0.14mmol)的DCM(5mL)溶液中加入三乙胺(1mL)、(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯苯基)丙酸(41mg，0.14mmol)和HBTU(52mg，0.14mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫得到(R)-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(60mg，88％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.44(s，1H)，7.23-7.01(m，4H)，5.40-5.15(m，1H)，4.85-4.60(m，1H)，4.46-4.30(m，1H)，4.20-4.00(m，1H)，3.82-3.60(m，1H)，3.40(m，1H)，3.00-2.70(m，2H)，2.28(m，1H)，1.70(m，1H)，1.40(s，9H)，1.30-0.98(m，6H)。MS(APCI+)[M+H]+514。
步驟4在DCM(5mL)中，將(R)-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，2mL)處理6小時(shí)，提供(R)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(58mg，99％)。MS(APCI+)[M+H]+414。
實(shí)施例3
(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1將1，1，3，3-四甲基胍(2.11mL，16.8mmol)加入到2-(叔丁氧羰基)-2-(二甲氧基磷?；?-乙酸甲酯(5.00g，16.8mmol)的DCM(70mL)的0℃溶液中。在0℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后用針筒加入4-氯-3-氟苯甲醛(2.67g，16.8mmol)的DCM(10mL)溶液。攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，而后加熱至室溫，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。然后加入水，用DCM萃取該混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。用IPA將得到的固體重結(jié)晶，得到(Z)-2-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙烯酸甲基酯(3.76g，67.8％產(chǎn)率)白色粉末(2批)。LCMS(APCI-)m/z 328[M-H]-。
步驟2在1∶1MeOH∶EtOAc(3mL；用氮?dú)饷摎?小時(shí)，而后使用)中，將(Z)-2-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙烯酸甲基酯(200mg)和Rh-(R，R)-[Et-DuPhos(COD)]OTf(大約4mg)在八個(gè)Argonaut EndeavorTM反應(yīng)管的每一個(gè)中溶解。在40psi H2下，將反應(yīng)混合物放在EndeavorTM上，在室溫下攪拌12小時(shí)。然后合并所有反應(yīng)混合物，濃縮，得到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸甲基酯(1.52g，94.4％產(chǎn)率)淺黃色固體，其不用進(jìn)一步純化就可在下一步中使用。
步驟3將LiOH-H2O(0.6246g，14.88mmol)加入到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸甲基酯(1.646g，4.961mmol)的1∶1THF∶H2O(26mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，而后將其用水稀釋，用EtOAc洗滌。然后用固體KHSO4酸化水層，用DCM萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，而后用DCM/己烷再濃縮，得到(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(1.31g，83.10％產(chǎn)率)白色粉末。LCMS(APCI-)m/z316[M-H]-。
步驟4向(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(0.5g，3.0mmol)的NMP(5mL)溶液中加入(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.59g，3mmol)和二異丙基乙胺(0.52mL)。將混合物加熱至100℃，保持6小時(shí)。冷卻混合物，用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用水(6×100mL)洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。用硅膠色譜純化殘余物，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到(S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.186g，19％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.46(s，1H)，4.66(m，1H)，4.30-3.80(m，3H)，3.47(m，1H)，3.20(m，1H)，3.20-2.80(m，4H)，2.22(m，1H)，1.70(m，1H)，1.49(s，9H)，1.29(m，3H)，1.17(m，3H)。MS(APCI+)[M+H]+333。
步驟5在DCM(20mL)中，將(S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，4mL)處理6小時(shí)，提供(R)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.18g，99％)。MS(APCI+)[M+H]+233。
步驟6向(R)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(32mg，0.14mmol)的DCM(5mL)溶液中加入三乙胺(1mL)、(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(44mg，0.14mmol)和HBTU(52mg，0.14mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫，得到(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(55mg，82％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.46(s，1H)，7.31-6.85(m，3H)，5.45-5.18(m，1H)，4.90-4.60(m，2H)，4.50-4.30(m，1H)，4.20-4.00(m，1H)，3.90-3.60(m，2H)，3.40(m，1H)，3.20-2.70(m，2H)，2.24(m，1H)，1.70(m，1H)，1.42(s，9H)，1.30-0.98(m，6H)。MS(APCI+)[M+H]+532。
步驟7在DCM(5mL)中，將(R)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，2mL)處理6小時(shí)，提供(R)-2-氨基-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(54mg，99％)。MS(APCI+)[M+H]+432。
實(shí)施例4
2-(氨基甲基)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1在室溫下，將4-氯-3-氟苯甲醛(1.0g，6.3mmol)加入到2-氰基乙酸乙酯(0.71g，6.3mmol)和哌啶(0.081mL，0.82mmol)的甲苯(10mL)溶液中。將混合物加熱至100℃，保持7小時(shí)。一旦冷卻至室溫，真空濃縮混合物，用己烷沖洗，得到3-(4-氯-3-氟苯基)-2-氰基丙烯酸乙酯(1.4g，88％)。LCMS(APCI+)[M+H]+ 253.1。
步驟2在室溫下，將NaBH4(15mg，0.39mmol)的EtOH(4mL)溶液用導(dǎo)管輸入到3-(4-氯-3-氟苯基)-2-氰基丙烯酸乙酯(200mg，0.79mmol)的EtOH(2mL)混合物中。5分鐘之后，用0.1N HCl淬滅混合物，真空濃縮，用水稀釋，用DCM萃取，用MgSO4干燥，濃縮，利用快速色譜(SiO2，用DCM)，得到3-(4-氯-3-氟苯基)-2-氰基丙酸乙酯(0.20g，58％)。LCMS(APCI+)[M+H]+254.3。
步驟3將TFA(1.6mL，21mmol)的THF(50mL)溶液用導(dǎo)管慢慢地輸入到NaBH4(0.78g，21mmol)的THF(6mL)溶液中。然后將3-(4-氯-3-氟苯基)-2-氰基丙酸乙酯(4.4g，17mmol)的THF(2mL)溶液用導(dǎo)管輸入到溶液中，攪拌過夜。用0.1N HCl淬滅混合物，真空濃縮，用水稀釋，用DCM(除去)萃取。用NaHCO3堿化水層，用DCM萃取。將DCM萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮。粗品3-氨基-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸乙酯不用純化，可在下面步驟中直接使用。
步驟4將Boc2O(1.3g，6.1mmol)和3-氨基-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸乙酯(1.6g，6.1mmol)的DCM(10mL)溶液攪拌過夜。真空濃縮混合物，色譜分離(SiO2)，使用DCM作為洗脫液，得到3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸乙酯。將LiOH-H2O(0.26g，6.1mmol)/水(7mL)加入到3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸乙酯(0.55g，1.5mmol)的THF/MeOH(7/7mL)溶液中，攪拌過夜。真空濃縮混合物，用1.0N HCl酸化至pH值1，用DCM萃取。將DCM萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮。色譜分離粗品(SiO2)，使用10％MeOH/DCM作為洗脫液，得到3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸(0.5g)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 232.0；Rf2.09分鐘。
步驟5向(R)-5-甲基-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(按照實(shí)施例3步驟1和2制備；32mg，0.14mmol)的DCM(5mL)溶液中加入三乙胺(1mL)、3-((叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯-3-氟芐基)丙酸(46mg，0.14mmol)和HBTU(52mg，0.14mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。除去溶劑，用硅膠色譜純化殘余物，用乙酸乙酯洗脫，得到2-(4-氯-3-氟芐基)-3-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(50mg，72％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

8.44(m，1H)，7.28(m，1H)，7.05-6.80(m，2H)，5.10-4.90(m，1H)，4.70-4.30(m，1H)，4.10-3.70(m，1H)，3.40-3.20(m，2H)，3.00-2.80(m，2H)，2.20(m，1H)，1.70(m，1H)，1.43(s，9H)，1.25-0.70(m，6H)。MS(APCI+)[M+H]+546。
步驟6在DCM(5mL)中，將2-(4-氯-3-氟芐基)-3-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯用HCl(4M，在二噁烷中，2mL)處理6小時(shí)，提供2-(氨基甲基)-3-(4-氯-3-氟苯基)-1-((S)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(50mg，99％)。MS(APCI+)[M+H]+446。
按照上述方法，也可以制備下列化合物。
實(shí)施例5
(R，S)-2-(2，4-二氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.56(1H，app.d，J 3.1Hz)，7.68-7.66(1H，m)，7.43-7.41(1H，m)，7.32-7.30(1H，m)，4.30-3.44(12H，m)，3.23-3.09(3H，m)，3.00-2.93(1H，m)，2.49-2.39(1H，m)，1.91-1.86(1H，m)，1.39(6H，d，J 6.6Hz)，1.21-1.13(3H，m)。LCMS476.1。
實(shí)施例6
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-(環(huán)丙基甲基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS426.1。
實(shí)施例7
(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1將2-(4-氯苯基)乙酸甲酯(36.7g，199mmol)和低聚甲醛(6.27g，209mmol)溶解/懸浮在DMSO(400mL)中，用NaOMe(537mg，9.94mmol)處理。在室溫下攪拌混合物2小時(shí)，通過粗品的TLC分析，至反應(yīng)完成。將反應(yīng)物倒入冰冷水(700mL；白色乳液)中，用加入的1M HCl溶液中和。將含水部分用乙酸乙酯萃取(3X)，將有機(jī)物合并。將有機(jī)部分用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到粗品黃色油狀物。將殘余物裝填到大的玻璃過濾器(帶有硅膠)上，用9∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，直到收集起始原料/烯烴為止。然后用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫塞，直到純的所需產(chǎn)品完全洗脫為止。濃縮純品部分，得到2-(4-氯苯基)-3-羥基丙酸甲酯無色油狀物(39.4g，92％)。
步驟2將2-(4-氯苯基)-3-羥基丙酸甲酯(39.4g，184mmol)溶于DCM(500mL)中，并用TEA(64.0mL，459mmol)處理。將溶液冷卻至0℃，慢慢地用MsCl(15.6mL，202mmol)處理，而后攪拌30分鐘，通過TLC分析至反應(yīng)完成。將溶液用1N HCl溶液分配，用DCM萃取含水部分一次。用1N HCl溶液洗滌合并的有機(jī)部分一次以上，分離，用稀NaHCO3溶液洗滌，分離。將有機(jī)部分用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到橙色油狀物。將殘余物裝填到大的玻璃過濾器(帶有硅膠塞)上，用9∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到純所需產(chǎn)品(通過TLC分析)。濃縮純品部分，得到2-(4-氯苯基)丙烯酸甲酯無色油狀物(30.8g，85％)。在0℃，將該2-(4-氯苯基)丙烯酸甲酯(500mg，2.54mmol)以THF(1.35mL)溶液的形式加入到I-PrNH2(217uL，2.54mmol)的THF(5.0mL)攪拌溶液中。將反應(yīng)在室溫下攪拌過夜，通過LCMS分析至反應(yīng)完成。將Boc2O(584ul，2.54mmol)通過移液管加入到攪拌胺中。將反應(yīng)攪拌過夜，通過混合物的LCMS和TLC分析，至反應(yīng)完成。真空濃縮溶液，得到3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯無色油(854mg，94％)。LC/MS(APCI+)m/z 256.1[M-Boc]+。
步驟3在室溫下，將3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯(133g，374mmol)溶于THF(1.0L)中，并用KOTMS(56.0g，392mmol)處理。將混合物攪拌過夜，通過粗品的LCMS分析，至反應(yīng)完成。真空濃縮混合物，得到濕式的泡沫，將其真空干燥過夜，得到3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鉀白色固體(148.7g，105％)。LC/MS(APCI+)m/z242.1[M-Boc-K]+。
步驟4在室溫下，將3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鉀(77.2g，203mmol)溶于THF(515mL)中，并用新戊酰氯(26.3mL，213mmol)處理。攪拌混合物3小時(shí)，形成混合酸酐。在單獨(dú)的燒瓶中，將(S)-4-芐基噁唑烷-2-酮(46.1g，260mmol)溶于THF(600mL)中，冷卻到-78℃。用n-BuLi(102mL，2.50M溶液，在己烷中，254mmol)處理溶液，攪拌一小時(shí)。將制備的酸酐溶液通過套管加入到攪拌的噁唑烷酮-Li中，將混合物升溫至室溫過夜。加入飽和氯化銨溶液淬滅混合物，然后在更多的水和乙酸乙酯之間分配。將水溶液萃取若干次，將有機(jī)物合并。用水、然后鹽水洗滌有機(jī)物，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。通過色譜(硅膠，用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)純化/分離(非對映異構(gòu)體)殘余物，得到完全分離的非對映異構(gòu)體粘稠油狀物(R)-3-((S)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(12.16g，24％，基于1/2的酸外消旋體)和(S)-3-((S)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(39.14g，77％，基于1/2的酸外消旋體)。LC/MS(APCI+)m/z401.2[M-Boc]+。
步驟5在室溫下，將LiOH-H2O(168mg，4.00mmol)加入到THF(30mL)和水(15mL)的攪拌溶液中，直到溶解為止。用過氧化氫(658uL，35％wt.水溶液，8.00mmol)處理混合物，在室溫下攪拌10分鐘。將反應(yīng)在冰浴中冷卻至0℃，用10分鐘時(shí)間，通過加入漏斗逐滴加入(S)-3-((S)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(1.00g，2.00mmol)(以THF(15mL)溶液形式)。將混合物攪拌過夜，至室溫，通過粗品的LCMS分析，至反應(yīng)完成。將反應(yīng)冷卻至0℃，然后用1M Na2SO3(9.00mL)溶液處理(用10分鐘時(shí)間，通過加入漏斗)。加入完成之后，將混合物升溫至室溫，保持10分鐘。濃縮混合物，除去THF，然后用水稀釋。用乙酸乙酯(除去)洗滌含水部分兩次。用乙酸乙酯分配含水部分，然后逐滴處理，同時(shí)與1M HCl一起攪拌，直到獲得大約2至大約3的pH值為止。將含水部分用乙酸乙酯萃取兩次，將有機(jī)相合并。用鹽水洗滌有機(jī)部分，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。高真空干燥無色油狀產(chǎn)品一小時(shí)，得到(S)-3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸粘性油/泡沫(685mg，100％)。LC/MS(APCI+)m/z 242.1[M-Boc]+。
步驟6將HBTU(0.469g，1.24mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.360g，1.24mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.423g，1.24mmol)和DIEA(0.646mL，3.71mmol)的DCM(8mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，而后加入2M Na2CO3。用DCM萃取反應(yīng)混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 40S上進(jìn)行快速柱色譜(通入大約175mL 4∶1DCM∶EA，用DIEA洗脫，然后用1∶4DCM∶EA進(jìn)行梯度洗脫)，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.679g，101％得到)淺黃色漿液。LC/MS(APCI+)m/z 542.1[M+H]+。
步驟7將4M HCl/二噁烷(7.83mL，31.3mmol)加入到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.679g，1.25mmol)的二噁烷(8mL)的稍微渾濁的溶液中。在氮?dú)夥罩?，攪拌反?yīng)混合物過夜(16小時(shí))。濃縮反應(yīng)混合物至干，在高真空管中干燥。將得到的殘余物溶于最小量的MeOH中，將溶液逐滴加入到醚的攪拌溶液中，導(dǎo)致形成白色沉淀。將得到的沉淀通過中等玻璃漏斗(用氮?dú)鈮毫?過濾來進(jìn)行分離，用醚沖洗，在氮?dú)鈮毫ο赂稍?，真空干燥，而后進(jìn)一步在55℃高真空烘箱中放置2天，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.610g，94.6％產(chǎn)率)白色粉末。
1H NMR(CD3OD)8.55(1H，s)，7.47-7.38(4H，m)，4.58-4.55(1H，m)，4.24-4.11(1H，m)，3.99-3.54(11H，m)，3.48-3.37(2H，m)，3.19-3.09(2H，m)，2.99-2.92(1H，m)，2.47-2.38(1H，m)，1.91-1.86(1H，m)，1.37(6H，d，J 3.7Hz)，1.16(3H，d，J 6.3Hz)。LCMS442.2。
實(shí)施例8
(R，S)-2-(3，4-二氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.56(1H，app.d，J 2.5Hz)，7.43-7.31(2H，m)，7.30-7.20(1H，m)，4.65-4.60(1H，m)，4.22-4.08(1H，m)，4.00-3.57(11H，m)，3.46-3.40(2H，m)，3.20-3.09(2H，m)，3.00-2.93(1H，m)，2.49-2.36(1H，m)，1.93-1.82(1H，m)，1.37(6H，d，J 6.5Hz)，1.21-1.16(3H，m)。LCMS444.2。
實(shí)施例9
(R，S)-2-(4-氟苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.55(1H，app.d，J 2.8Hz)，7.43-7.40(2H，m)，7.21-7.16(2H，m)，4.52-4.88(1H，m)，4.29-3.53(12H，m)，3.48-3.38(2H，m)，3.19-3.08(2H，m)，3.00-2.90(1H，m)，2.46-2.36(1H，m)，1.93-1.83(1H，m)，1.36(6H，d，J 6.7Hz)，1.20-1.14(3H，m)。LCMS426.2。
實(shí)施例10
(R，S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1在0℃，將2-(4-氯苯基)丙烯酸甲酯(500mg，2.54mmol)在THF(6.0mL)中稀釋，并用吡咯烷(233uL，2.80mmol)處理。1小時(shí)之后，粗品LCMS表示反應(yīng)完成(LCMS(APCI+)[M+H]+ 268.1；Rf2.13分鐘)。分別用水(2.0mL)和LiOH-H2O(320mg，7.63mmol)處理溶液，攪拌反應(yīng)過夜，通過LCMS分析至反應(yīng)完成。將混合物在水和乙酸乙酯之間分配。將含水部分再次用乙酸乙酯洗滌，將有機(jī)相除去。用過量3N HCl溶液(3.82mL)處理含水部分，用乙酸乙酯洗滌。真空濃縮分離的含水部分，得到2-(4-氯苯基)-3-(吡咯烷-1-基)丙酸-HCl-3LiCl鹽白色固體(1.15g)。MS(APCI+)[M+H]+254.1；Rf1.30分鐘。
在室溫下，將DIPEA(44.4mg，0.343mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(20mg，0.69mmol)、2-(4-氯苯基)-3-(吡咯烷-1-基)丙酸(59.8mg，0.082mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(31.3mg，0.082mmol)的CH2Cl2(5.0mL)懸浮液中。將得到的混合物攪拌5天，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。通過硅膠柱(5.0g)純化殘余物，用MeOH和CH2Cl2(3∶97至5∶95)的混合物洗脫，得到2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(6mg，17％)類白色固體。
1H NMR(CD3OD)8.54(1H，s)，7.47-7.40(4H，m)，4.66-4.63(1H，m)，4.18-3.35(13H，m)，3.24-3.07(2H，m)，3.00-2.91(1H，m)，2.47-2.37(1H，m)，2.19-1.97(4H，m)，1.90-1.84(1H，m)，1.39-1.36(1H，m)，1.20-1.15(3H，m)。LCMS454.1。
實(shí)施例11
(R，S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(吡啶-3-基甲基氨基)丙-1-酮三鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)9.19(1H，s)，8.96(1H，d，J5.4Hz)，8.91(1H，d，J 8.6Hz)，8.55(1H，d，J 3.0Hz)，8.20-8.17(1H，m)，7.46-7.39(4H，m)，4.82-4.75(1H，m)，4.61(2H，s)，4.20-4.12(1H，m)，4.0-3.57(11H，m)，3.39-3.34(2H，m)，3.17-3.08(1H，m)，2.99-2.90(1H，m)，2.46-2.36(1H，m)，1.91-1.85(1H，m)，1.38(1H，t，J 5.9Hz)，1.17(3H，app dd，J 15.7和5.6Hz)。LCMS491.2。
實(shí)施例12
(R，S)-3-氨基-2-(4-氯-3-氟芐基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS432.2。
實(shí)施例13
(R，S)2-(4-氯苯基)-2-羥基-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1將MCPBA(35g，77％，156mmol)加入到2-(4-氯苯基)-丙烯酸甲酯(20g，102mmol)的CHCl3(200mL)溶液中。將混合物回流24小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，用氯仿(200mL)稀釋，用10％Na2S2O3、10％NaHCO3和水洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。對殘余物利用柱色譜，用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到2-(4-氯苯基)環(huán)氧乙烷-2-羧酸甲酯。將2-(4-氯苯基)環(huán)氧乙烷-2-羧酸甲酯(2g，9.4mmol)和乙醇(10mL)和異丙胺(1mL，11.7mmol)加入到50mL高壓氧彈(bomb)中。在氧彈中，將混合物加熱至90℃，保持12小時(shí)。冷卻后，除去溶劑，并將殘余物溶于DCM(20mL)和TEA(2mL)中。將(Boc)2O(4g，23.0mmol)加入到該混合物中。將混合物在室溫下攪拌48小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于THF(20mL)中。將LiOH(3M，14ml)加入到該混合物中。在室溫下攪拌混合物16小時(shí)，回流2小時(shí)。冷卻后，用2N HCl(21mL)淬滅混合物。除去溶劑，對殘余物利用柱色譜，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)-2-羥基丙酸。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+258.1；Rf3.66分鐘。
步驟2在室溫下，將DIPEA(35.5mg，0.275mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(20mg，0.69mmol)、3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)-2-羥基丙酸(29.5mg，0.082mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(31.3mg，0.082mmol)的CH2Cl2(5.0mL)懸浮液中。將得到的混合物攪拌過夜，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。用硅膠柱(5.0g)純化殘余物，用EtOAc和己烷(60∶40)的混合物洗脫，得到2-(4-氯苯基)-2-羥基-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯澄清油狀物(27mg，70％)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 558.1；Rf4.41分鐘。
步驟3向2-(4-氯苯基)-2-羥基-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(26mg，0.0466mmol)的DCM(2.5mL)溶液中加入4.0M HCl的二噁烷(0.8mL)溶液。將混合物在室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，得到2-(4-氯苯基)-2-羥基-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯二-HCl鹽(28mg)。
1H NMR(CD3OD)8.53(1H，app d，J 2.7Hz)，7.56-7.49(4H，m)，4.24-4.18(1H，m)，4.01-3.38(13H，m)，3.16-3.07(1H，m)，2.98-2.92(1H，m)，2.46-2.36(1H，m)，1.90-1.84(1H，m)，1.34(6H，app d，J4.7Hz)，1.16(3H，dd，J6.6和19.5Hz)。LCMS458.1。
實(shí)施例14
((3S，4R)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽和((3R，4S)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽 步驟1將TFA(0.2mL，2.63mmol)加入到(E)-3-(3，4-二氯苯基)丙烯酸甲基酯(2.6g，11.7mmol)的DCM(40mL)溶液中。將混合物冷卻至0℃。然后逐滴加入芐基甲氧基三甲基硅烷基甲胺(6.0mL，23.5mmol)，同時(shí)保持溫度在-5℃和5℃之間。加入完成之后，在室溫下攪拌混合物過夜。除去溶劑，并將殘余物溶于醚中，用1N HCl處理。搖動混合物，形成三層溶液。收集下部兩層，用2N NaOH堿化至pH值大約14。然后用CHCl3(3×100mL)萃取它們。干燥有機(jī)相，過濾，濃縮。對殘余物利用柱色譜，得到(3S，4R)-1-芐基-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲基酯(4.2g，99％)。(LCMS(APCI+)[M+H]+364.2；Rt2.63分鐘)。
步驟2在0℃，將1-氯乙基氯甲酸酯(1.5mL，13.9mmol)加入到(3S，4R)-1-芐基-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲基酯(4.20g，11.5mmol)的DCE(50mL)溶液中。將混合物回流1小時(shí)。冷卻后，在65℃，用1小時(shí)真空除去溶劑。將MeOH(50mL)加入到殘余物中，回流1小時(shí)。除去MeOH。將固體再溶于CHCl3中，用飽和Na2CO3處理。分離含水部分，用CHCl3(2×30mL)萃取。合并有機(jī)相，干燥。除去溶劑，得到(3S，4R)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲基酯(3.1g，98％)。(LCMS(APCI+)[M+H]+ 274.1；Rt2.25分鐘)。
步驟3將Boc酸酐(3.0g，13.7mmol)加入到(3S，4R)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲基酯(3.10g，11.3mmol)的THF(100mL)溶液中，并加入TEA(4mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。除去溶劑，對殘余物利用柱色譜，用己烷/乙酸乙酯(8∶1)洗脫，得到(3S，4R)-1-叔丁基3-甲基4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-1，3-二羧酸酯(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 274.1；Rt4.17分鐘)。將(3S，4R)-1-叔丁基3-甲基4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-1，3-二羧酸酯再溶于MeOH(50mL)中，加入LiOH(3M，10mL)。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。將2N HCl(15mL)加入到該混合物中。除去溶劑，對殘余物利用柱色譜，用DCM/MeOH(40∶1-10∶1)洗脫，得到(3S，4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸(1.95g)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 260.1；Rt3.67分鐘。
步驟4在室溫下，將DIPEA(35.5mg，0.275mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(20mg，0.069mmol)、1-(叔丁氧羰基)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-羧酸(29.7mg，0.082mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(31.3mg，0.082mmol)的CH2Cl2(5mL)懸浮液中。將得到的混合物攪拌2小時(shí)，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。用硅膠柱(5.0g)純化殘余物，用EtOAc和己烷(60∶40)的混合物洗脫，得到3-(3，4-二氯苯基)-4-(1-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-4-羰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯的非對映異構(gòu)體混合物(34mg，88％)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 560.0；Rt3.59分鐘。
步驟5將3-(3，4-二氯苯基)-4-(1-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-4-羰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(34mg，0.061mmol)的非對映異構(gòu)體混合物的DCM(3.1mL)溶液加入到4.0M HCl的二噁烷(1.1mL，4.25mmol)溶液中。將混合物在室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，得到((3S，4R)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽和((3R，4S)-4-(3，4-二氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽的非對映異構(gòu)體混合物(32mg，99％)。
1H NMR(CD3OD)8.58(1H，s)，7.70-7.63(1H，m)，7.59-7.55(1H，m)，7.45-7.40(1H，m)，4.25-3.40(18H，m)，3.19-3.10(1H，m)，3.00-2.93(1H，m)，2.46-2.41(1H，m)，1.93-1.87(1H，m)，1.21-1.15(3H，m)。LCMS460.2。
實(shí)施例15
((3S，4R)-4-(4-氯-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽和((3R，4S)-4-(4-氯-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.56(1H，s)，7.53-7.45(1H，m)，7.34-7.20(2H，m)，4-50-4.45(1H，m)，4.20-3.57(13H，m)，3.18-3.09(1H，m)，3.00-2.92(1H，m)，2.81-2.75(1H，m)，2.50-2.36(1H，m)，1.91-1.81(2H，m)，1.36(3H，s)，1.34(3H，s)，1.24-1.15(3H，m)。LCMS460.1。
實(shí)施例16
(R，S)-4-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.56(1H，s)，7.53-7.45(1H，m)，7.34-7.20(2H，m)，4-50-4.45(1H，m)，4.20-3.57(13H，m)，3.18-3.09(1H，m)，3.00-2.92(1H，m)，2.81-2.75(1H，m)，2.50-2.36(1H，m)，1.91-1.81(2H，m)，1.36(3H，s)，1.34(3H，s)，1.24-1.15(3H，m)。LCMS460.1。
實(shí)施例17
(R，S)4-氨基-2-(4-氟苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.55(1H，s)，7.457.38(2H，m)，7.17-7.05(2H，m)，4-40-4.33(1H，m)，4.27-3.25(13H，m)，3.20-3.06(1H，m)，3.00-2.92(1H，m)，2.81-2.72(1H，m)，2.47-2.37(1H，m)，1.95-1.78(2H，m)，1.42-1.29(6H，m)，1.24-1.10(3H，m)。LCMS426.1。
實(shí)施例18
(R，S)-4-氨基-2-(4-溴苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(CD3OD)8.55(1H，app d，J3.5Hz)，7.55(2H，dd，J8.3和3.6Hz)，4.27-3.43(14H，m)，3.17-3.08(1H，m)，3.00-2.81(3H，m)，2.44-2.30(2H，m)，2.03-1.97(1H，m)，1.91-1.86(1H，m)，1.20-1.14(3H，m)。LCMS460.1。
實(shí)施例19
(R，S)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-2-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-1-酮二鹽酸鹽 步驟1將2-(4-氯苯基)丙酸甲酯(1.50g，7.55mmol)溶于THF(14mL)中，并冷卻至0℃。用KOtBu(85mg，0.755mmol)處理溶液，攪拌15分鐘。將溶液冷卻至-78℃，而后用丙烯酸酯(1.22mL，8.31mmol)處理。將混合物攪拌過夜，至室溫，通過TLC分析至反應(yīng)完成。然后用飽和NH4Cl淬滅混合物。真空除去THF，得到黃色油。將殘余物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)相合并。將有機(jī)部分用水、然后鹽水洗滌，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到粗品黃色油狀物。用色譜(硅膠，用90∶10己烷∶乙酸乙酯洗脫，Rf＝0.35)純化該物質(zhì)，得到5-叔丁基1-甲基2-(4-氯苯基)-2-甲基戊二酸酯無色油狀物(1.69g，69％)。在室溫下，將該5-叔丁基1-甲基2-(4-氯苯基)-2-甲基戊二酸酯(1.69g，5.17mmol)溶于TFA(15.9mL；207mmol)中，攪拌2小時(shí)，通過LCMS(neg)分析至反應(yīng)完成。真空濃縮溶液，得到4-(4-氯苯基)-5-甲氧基-4-甲基-5-氧代戊酸無色油狀物(1.42g，100％)。
步驟2在0℃，將4-(4-氯苯基)-5-甲氧基-4-甲基-5-氧代戊酸(1.42g，5.25mmol)溶于甲苯(17.5mL)中，并分別用NEt3(1.46mL，10.5mmol)和DPPA(1.19mL，5.51mmol)處理。從冰浴中除去反應(yīng)，慢慢地加熱至室溫，保持3小時(shí)(通過TLC分析沒有起始原料剩余)。小心地(＜30℃)真空濃縮溶液，并將殘余物在乙酸乙酯和1％wt/wt檸檬酸液之間分配。將水溶液部分萃取一次，合并有機(jī)相。用鹽水洗滌有機(jī)部分，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。將殘余物再溶于t-BuOH(17.5mL)中，用SnCl(262uL，1.0M溶液，在DCM中，262umol)處理，加熱到80℃，保持5小時(shí)(氮?dú)夥罩嗅尫艤p弱)。通過TLC分析反應(yīng)完成，真空濃縮，得到油狀物。將油狀物在乙酸乙酯和稀釋的NaHCO3溶液之間分配。將水溶液部分萃取若干次，將有機(jī)相合并。將有機(jī)相用0.5M HCl溶液、然后鹽水洗滌，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到棕色油。通過色譜(硅膠，用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，Rf＝0.25)純化殘余物，得到純品4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-2-甲基丁酸甲酯無色油狀物(790mg，44％)。
步驟3將4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-2-甲基丁酸甲酯(720mg，2.11mmol)溶于THF(4.2mL)和水(1.8mL)中。用LiOH-H2O(265mg，6.32mmol)處理混合物，攪拌過夜，通過LCMS分析至反應(yīng)完成。用水稀釋混合物，用乙醚(除去)洗滌兩次。用3M HCl溶液處理水溶液，直到大約2至大約3的pH值為止(白色ppt)，用乙酸乙酯萃取若干次。用水、然后鹽水洗滌合并的有機(jī)部分，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-2-甲基丁酸無色油狀物(684mg，99％)。LCMS(APCI+)[M+H]+ 326.0；Rt2.26分鐘。
步驟4在室溫下，將DIPEA(35.5mg，0.275mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(20mg，0.69mmol)、4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-2-甲基丁酸(27.0mg，0.082mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(31.3mg，0.082mmol)的CH2Cl2(5.0mL)懸浮液中。將得到的混合物攪拌過夜，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。通過硅膠柱(5.0g)純化殘余物，用EtOAc和己烷(60∶40)的混合物洗脫，得到3-(4-氯苯基)-3-甲基-4-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁基酯澄清油狀物(27mg，74％)。LCMS(APCI+)[M+H]+528.1；Rt3.38分鐘。
步驟5向3-(4-氯苯基)-3-甲基-4-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁基酯(26mg，0.049mmol)的DCM(2.5mL)溶液中加入4.0M HCl的二噁烷(0.8mL)溶液。將混合物在室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，得到(R，S)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-2-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-1-酮二鹽酸鹽(18.4mg，70％)。LCMS(APCI+)[M+H]+428.1；Rt2.22分鐘。
LCMS428.1。
實(shí)施例20
(R，S)-(3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽 步驟1將TFA(0.34mL，4.41mmol)加入到N-(甲氧基甲基)(苯基)-N-((三甲基硅烷基)甲基)甲胺(3.9g，19.8mmol)的DCM(40mL)溶液中。將混合物冷卻至0℃。在0℃，逐滴加入芐基甲氧基三甲基硅烷基甲胺(10.5mL，41mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于醚中，用1N HCl處理。搖動混合物，分離水層，用2N NaOH堿化至pH值14。然后用CHCl3(3×100mL)萃取。干燥有機(jī)相，濃縮。對殘余物利用柱色譜，用己烷/EtOAc(10∶1)洗脫，得到1-芐基-3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲酯。(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 330.2；Rt2.46分鐘)。
步驟2在0℃，將1-氯乙基甲酸酯(1.0mL，9.27mmol)加入到1-芐基-3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲酯(3.05g，9.25mmol)的甲苯(40mL)溶液中。將混合物回流10小時(shí)。冷卻后，真空除去溶劑。將殘余物用MeOH(20mL)處理，回流1小時(shí)。除去溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用1NNaOH(50mL)而后水洗滌。干燥有機(jī)相，濃縮。對殘余物利用柱色譜，用EtOAc-DCM/MeOH(10∶1)洗脫。將得到的3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-羧酸甲酯(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 240.1；Rt2.06分鐘)溶于DCM(20mL)和TEA(1mL)中，而后用Boc酸酐(1g，4.58mmol)處理。攪拌2小時(shí)之后，除去溶劑，并將1-叔丁基3-甲基3-(4-氯苯基)吡咯烷-1，3-二羧酸酯(LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 240.1；Rt3.78分鐘)溶于THF(50mL)中。將LiOH(3M，6mL)加入到該混合物中。在室溫下攪拌混合物過夜，而后用2NHCl(9mL)淬滅。除去溶劑，對殘余物利用柱色譜，用己烷/EtOAc(4∶1)-DCM/MeOH(20∶1)洗脫，得到1-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-羧酸。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 224.1；Rt2.90分鐘。
步驟3在室溫下，將DIPEA(35.5mg，0.275mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(20mg，0.69mmol)、1-(叔丁氧羰基)-3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-羧酸(26.9mg，0.082mmol)和O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(31.3mg，0.082mmol)的CH2Cl2(5.0mL)懸浮液中。將得到的混合物攪拌過夜，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。用硅膠柱(5.0g)純化殘余物，用MeOH和CH2Cl2(1.5∶98.5)的混合物洗脫得到3-(4-氯苯基)-3-(1-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-4-羰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯澄清油(25mg，69％)。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+ 526.1；Rt3.49。
步驟4將3-(4-氯苯基)-3-(1-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-4-羰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(25mg，0.048mmol)的DCM(2.5mL)溶液加入到4.0M HCl的二噁烷(0.8mL)溶液中。將混合物在室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，得到(3-(4-氯苯基)吡咯烷-3-基)(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮二鹽酸鹽(24mg，100％)。LCMS(APCI+)[M+H]+426.2；Rt2.09。
1H NMR(CD3OD)8.54(1H，s)，7.51-4.49(2H，m)，7.41(2H，d，J7.2Hz)，4.26(1H，d，J11.0Hz)，4.10-3.37(12H)，3.16-3.08(2H，m)，2.98-2.85(2H，m)，2.71-2.64(1H，m)，2.45-2.36(1H，m)，1.87(1H，t，J 10.4Hz)，1.16(3H，app dd，J 12.5和7.0Hz)。LCMS426.2。
實(shí)施例21
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-((R)-3-甲基-4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS456.2 實(shí)施例22
(R，S)2-(4-氯苯基)-3-(4-羥基哌啶-1-基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS484.2 實(shí)施例23
(R，S)2-(4-氯苯基)-3-((S)-3-羥基吡咯烷-1-基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS470.2。
實(shí)施例24
(R，S)2-(4-氯苯基)-3-((R)-3-羥基吡咯烷-1-基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS470.2。
實(shí)施例25
(R，S)-2-(4-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(甲基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS398.2。
實(shí)施例26
(R，S)-3-(異丙基氨基)-2-(4-甲氧基苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(D2O)8.30(1H，app d，J 9.3Hz)，7.20-7.16(2H，m)，6.94-6.91(2H，m)，4.28-4.23(1H，m)，4.16-4.08(1H，m)，3.99-3.83(2H，m)，3.78-3.70(4H，m)，3.60-3.30(7H，m)，3.25-2.89(3H，m)，2.84-2.74(1H，m)，2.28-2.16(1H，m)，1.72(1H，t，J 10.8Hz)，1.21-1.18(6H，m)，0.99-0.91(3H，two d，J7.1和6.7Hz)。LCMS438.2。
實(shí)施例27
(R，S)-3-氨基-2-(3，4-二氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS434.2。
實(shí)施例28
(R，S)-3-(乙基氨基)-2-(4-氟苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(D2O)8.31(1H，app d，J 7.9Hz)，7.28-7.24(2H，m)，7.11-7.06(2H，m)，4.37-4.33(1H，m)，4.15-4.08(1H，m)，3.99-3.37(9H，m)，3.31-3.22(1H，m)，3.10-2.92(4H，m)，2.85-2.75(1H，m)，2.28-2.17(1H，m)，1.76-1.70(1H，m)，1.15(3H，t，J7.2Hz)，0.99-0.93(3H，two d，J6.9和6.5Hz)。LCMS412.2。
實(shí)施例29
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-(乙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS428.2。
實(shí)施例30
(R，S)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽 步驟1在0℃，在氮?dú)夥罩?，?，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(33.68mL，225.2mmol)加入到2-(4-氯苯基)丙烯酸甲酯(36.9g，187.7mmol)和2-硝基丙烷(20.23mL，225.2mmol)的CH3CN(500mL)溶液中。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，攪拌過夜。真空濃縮溶液，利用柱色譜(20％EtOAc/己烷)，得到2-(4-氯苯基)-4-甲基-4-硝基戊酸甲酯(52.9g，98.66％產(chǎn)率)無色油狀物。在40℃，用2分鐘將濃HCl(10mL)逐滴加入到2-(4-氯苯基)-4-甲基-4-硝基戊酸甲酯(10g，35.0mmol)和鋅(6.41mL，700mmol)的EtOH(250mL)懸浮液中。將混合物在40℃下攪拌過夜。LCMS表明了所需產(chǎn)物和還原(但非環(huán)化)產(chǎn)物。將溫度升至50℃，保持8小時(shí)。通過LCMS發(fā)現(xiàn)沒有變化，因此用EtOAc(200mL)稀釋反應(yīng)混合物，過濾。真空濃縮濾液，溶于EtOAc/EtOH(500mL，9∶1)中，用碳酸氫鹽溶液洗滌，用Na2SO4干燥，真空濃縮。粗品包含2-3個(gè)化合物，然而，3-(4-氯苯基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮(6.7g，85.6％產(chǎn)率)是主要一個(gè)，其在下一步中原樣使用。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+224.1；Rt2.90分鐘。
步驟2在-78℃，在氮?dú)夥罩?，將雙(三甲基硅烷基)氨基鋰(36mL，36mmol)加入到3-(4-氯苯基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮(6.7g，30mmol)的THF(200mL)的攪拌溶液中。在-78℃攪拌溶液30分鐘，而后一次加入焦碳酸二叔丁基酯(di-tert-butyl dicarbonate)(7.6mL，33mmol)的THF(30mL)溶液。將溶液加熱至室溫，攪拌過夜。將反應(yīng)物倒入0.5M HCl溶液中，用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)部分用水洗滌，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到接近純的產(chǎn)物(過量Boc2O)無色油。利用柱色譜(20％EtOAc/己烷)，得到純品4-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+224.1；Rt3.68分鐘。
步驟3在室溫下，將氫氧化鋰水合物(6.44mL，232mmol)加入到4-(4-氯苯基)-2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(7.5g，23.2mmol)的THF/MeOH/H2O(30mL/30mL/30mL)的攪拌溶液中。將混合物在室溫下攪拌過夜，并真空濃縮。將殘余物溶于水(200mL)中，用EtOAc(100mL)洗滌，用濃HCl酸化，并萃取到EtOAc(2×200mL)中。將產(chǎn)物用Na2SO4干燥，真空濃縮。從甲苯中蒸發(fā)除去殘余HCl，得到4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-4-甲基戊酸(5.0g，63.2％產(chǎn)率)白色固體。LCMS(APCI+)[M-Boc+H]+242.0；Rt2.8分鐘。
步驟4將HBTU(0.033g，0.086mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.025g，0.086mmol)、4-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)-4-甲基戊酸(0.029g，0.086mmol)和DIEA(0.045mL，0.26mmol)的DCM(1.2mL)溶液中。將反應(yīng)搖動過夜(16小時(shí))，而后用2M Na2CO3稀釋，用DCM萃取。將萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 12S上進(jìn)行快速柱色譜(通入大約100mL 3∶1DCM∶EA，用DIEA洗脫，然后用1∶3DCM∶EA洗脫推進(jìn))，得到(R)-4-(4-氯苯基)-2-甲基-5-(4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.044g，95％產(chǎn)率)殘余物。LCMS(APCI+)[M+H]+ 542.2；Rt2.94分鐘。
步驟5將4M HCl/二噁烷(0.609mL，2.43mmol)加入到(R)-4-(4-氯苯基)-2-甲基-5-(4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-5-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.044g，0.0812mmol)的二噁烷(1mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物2天，而后將其濃縮至干。將得到的殘余物溶于最小量的MeOH中，通過加入醚來研磨產(chǎn)物。通過定量膜過濾紙(用氮?dú)鈮毫?過濾來分離固體，用醚沖洗，真空干燥，得到(R)-4-氨基-2-(4-氯苯基)-4-甲基-1-(4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)戊-1-酮二鹽酸鹽(0.035g，83.7％產(chǎn)率)白色粉末。LC/MS(APCI+)m/z 442[M+H]+。非對映異構(gòu)體的1∶1混合物。
1H NMR(D2O)8.31(1H，app d，J 9.1Hz)，7.31-7.18(4H，m)，4.12-3.36(10H，m)，3.23-3.16(1H，m)，3.02-2.92(1H，m)，2.85-2.78(1H，m)，2.52(1H，dd，J 14.9和8.6Hz)，2.27-2.20(1H，m)，1.88-1.83(1H，m)，1.73(1H，t，J 10.5Hz)，1.23(3H，s)，1.16(3H，s)，1.05(1H，t，J7.1Hz)，0.99-0.93(3H，兩個(gè)d，J7.1和7.1Hz)。LCMS442.2。
實(shí)施例31
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-(2-羥基乙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS444.2。
實(shí)施例32
(R，S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(新戊基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS470.2 實(shí)施例33
(R，S)-2-(4-溴苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 1H NMR(D2O)8.31(1H，app d，J 10.4Hz)，7.52-7.49(2H，m)，7.16-7.14(2H，m)，4.31-4.27(1H，m)，4.10-4.06(1H，m)，4.00-3.07(12H，m)，3.02-2.93(1H，m)，2.85-2.78(1H，m)，2.25-2.19(1H，m)，1.73(1H，t，J 10.1Hz)，1.21-1.15(6H，m)，0.99-0.93(3H，兩個(gè)d，J6.5和6.9Hz)。LCMS486.2。
實(shí)施例34
(S)-3-氨基-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1將2，4-二甲氧基芐基氨基甲酸叔丁基酯(3.96g，14.8mmol)溶于THF(74mL)中，并冷卻至-78℃。用5分鐘將丁基鋰(7.44mL，16.3mmol)逐滴加入到溶液中，得到淺黃色溶液。攪拌溶液15分鐘，而后逐滴加入(純的)氯(甲氧基)甲烷(1.35mL，17.8mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)10分鐘，慢慢地加熱到環(huán)境溫度過夜。真空濃縮反應(yīng)，得到黃色凝膠，將其在半飽和NH4Cl溶液和醚之間分配。將水溶液部分萃取一次，將有機(jī)相合并。用水、然后鹽水洗滌有機(jī)部分，分離，用Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。1H NMR證明所需的接近純的(＞90％)2，4-二甲氧基芐基(甲氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(4.81g，104％產(chǎn)率)淺黃色油狀物，其不用純化就可以使用。
步驟2將(R)-4-芐基-3-(2-(4-氯苯基)乙?；?噁唑烷-2-酮(3.00g，9.10mmol)溶于DCM(91mL)中，并冷卻到-78℃。將TiCl4(11.4mL，11.4mmol)的1M甲苯溶液加入到該溶液中，而后加入DIEA(1.66mL，9.55mmol)，得到暗紫色反應(yīng)物。將其攪拌15分鐘，而后以DCM(10mL)溶液形式逐滴加入2，4-二甲氧基芐基(甲氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(3.40g，10.9mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)15分鐘，而后在鹽水-冰浴中升溫至-18℃，保持一小時(shí)。用2.5小時(shí)將該反應(yīng)慢慢地加熱至0℃，而后加入飽和NH4Cl溶液(100mL)淬滅。分離各層，用DCM萃取有機(jī)部分一次。將合并的有機(jī)部分用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到黃色油狀物。通過色譜(硅膠，用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)純化殘余物，得到純物質(zhì)無色油狀物，(S)-3-((R)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基(2，4-二甲氧基芐基)氨基甲酸叔丁基酯(4.07g，73.5％產(chǎn)率)。在環(huán)境溫度下，將(S)-3-((R)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基(2，4-二甲氧基芐基)氨基甲酸叔丁基酯(680mg，1.12mmol)溶于DCM(10.6mL)和水(560uL；19∶1DCM∶水)中。將該溶液用DDQ(380mg，1.67mmol)處理，攪拌反應(yīng)一天，通過TLC和LCMS分析反應(yīng)完成。用DCM稀釋反應(yīng)，用半飽和的NaHCO3溶液洗滌兩次。將有機(jī)部分用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到橙黃色油狀物。通過色譜(硅膠，用9∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)純化殘余物，得到醛副產(chǎn)物和(S)-3-((R)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(未分離)的混合物淺黃色油狀物(729mg，合并物質(zhì))。LC/MS(APCI+)m/z359.1[M-BOC+H]+。
步驟3將35％H2O2(0.240mL，2.91mmol)加入到LiOH-H2O(0.0978g，2.33mmol)的2∶1THF∶H2O(33mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物35分鐘，而后冷卻至0℃。通過加入漏斗逐滴加入包含(S)-3-((R)-4-芐基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.535g，1.17mmol)和2，4-二甲氧基苯甲醛(0.194g，1.17mmol)混合物的THF(7mL)溶液。將反應(yīng)混合物放置在冰浴中，慢慢地加熱反應(yīng)混合物，攪拌過夜。然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并將1M Na2SO3(7mL)加入到混合物中。攪拌混合物5分鐘，而后加熱至室溫，同時(shí)攪拌20分鐘。然后將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用醚(3X)洗滌。用KHSO4酸化水層，用DCM(2X)萃取混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，得到(S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.329g，94.2％產(chǎn)率)白色殘余物。LC/MS(APCI+)m/z200[M-BOC+H]+。
步驟4將4M HCl/二噁烷(5.49mL，22.0mmol)加入到(S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.329g，1.10mmol)的2∶1二噁烷∶DCM(10mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜(16小時(shí))，而后濃縮至1/3體積。將得到的渾濁混合物用醚稀釋，再次將混合物濃縮至1/3體積。再次用醚(20mL)稀釋混合物，通過中等玻璃漏斗(用氮?dú)鈮毫?過濾來分離固體。用醚(5×10mL)沖洗固體，在氮?dú)鈮毫ο赂稍?，真空干燥，得?S)-3-氨基-2-(4-氯苯基)丙酸鹽酸鹽(0.199g，76.8％產(chǎn)率)白色粉末。HPLC＞99面積％純度。LC/MS(APCI+)m/z 200。
步驟5將Boc2O(0.368g，1.69mmol)加入到(S)-3-氨基-2-(4-氯苯基)丙酸鹽酸鹽(0.199g，0.843mmol)和氫氧化四甲銨五水合物(0.382g，2.11mmol)的10∶1MeCN∶H2O(7.7mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜(12小時(shí))，而后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去MeCN。用水稀釋混合物，用醚(2X)洗滌。用KHSO4酸化水層。用DCM萃取混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，濃縮，得到(S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.229g，90.6％產(chǎn)率)泡沫。HPLC＞99面積％純度。LC/MS(APCI+)m/z 200[M-BOC+H]+。
步驟6將HBTU(0.033g，0.086mmol)加入到(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.025g，0.086mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.026g，0.086mmol)和DIEA(0.045mL，0.26mmol)的DCM(1.2mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌90分鐘。加入2M Na2CO3，用DCM萃取該混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 12S上進(jìn)行快速柱色譜(通入大約100mL 4∶1DCM∶EA，用DIEA洗脫，然后用1∶9DCM∶EA洗脫產(chǎn)物)，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.043g，100％產(chǎn)率)黃色殘余物。LC/MS(APCI+)m/z 500.1[M+H]+；Rf2.68。
步驟7將4M HCl/二噁烷(0.860mL，3.44mmol)加入到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.043g，0.0860mmol)的二噁烷(1.2mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜(16小時(shí))，而后濃縮，在高真空管中干燥。將得到的殘余物溶于最小量的MeOH中，通過加入醚來研磨產(chǎn)物。通過Varian定量膜式過濾紙過濾(用氮?dú)鈮毫?來分離得到的固體，用醚沖洗，在氮?dú)鈮毫ο赂稍?，進(jìn)一步的真空干燥，得到(S)-3-氨基-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.032g，78.7％產(chǎn)率)白色粉末。LC/MS(APCI+)m/z 400[M+H]+。
1H NMR(D2O)8.30(1H，s)，7.37(2H，d，J8.3Hz)，7.23(2H，d，J 8.5Hz)，4.30(1H，t，J6.2Hz)，4.12-4.05(1H，m)，3.90-3.60(3H，m)，3.55-3.23(9H，m)，3.02-2.93(1H，m)，2.86-2.79(1H，m)，2.28-2.18(1H，m)，1.73(1H，t，J 10.7Hz)，0.94(3H，d，J6.5Hz)。LCMS400.2。
實(shí)施例35
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基(甲基)氨基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS456.2。
實(shí)施例36
(R，S)-2-(4-氯苯基)-3-((S)-3-氟吡咯烷-1-基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽 LCMS472.2。
實(shí)施例37
(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽 步驟1在氮?dú)夥罩校?R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.0g，3.14mmol)的20mL CHCl3的0℃溶液中分次加入固體77％max.mCPBA(1.27g，5.65mmol)。攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，加熱至室溫，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，再分次加入77％max.mCPBA(0.4當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，另外攪拌15小時(shí)，而后冷卻至0℃。通過加入漏斗慢慢地加入Na2S2O3(0.993g，6.28mmol)的6mL水溶液，而后通過加入漏斗慢慢地加入Na2CO3(0.999g，9.42mmol)的8mL水溶液。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后用3×100mL CHCl3萃取。干燥(Na2SO4)合并的萃取物，通過硅藻土過濾，而后真空濃縮，得到(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基-1-氧化物)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯褐色泡沫，其不用純化就可立即使用。將(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基-1-氧化物)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯溶于乙酸酐(5.92mL，62.8mmol)中，并將溶液加熱至90℃，攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空除去過量乙酸酐，并將得到的油狀物溶于DCM中，慢慢地傾倒入冰飽和的Na2CO3攪拌溶液中。用2×100mL DCM萃取混合物，將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮，得到(R)-4-(7-乙酰氧基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.11g，93.9％產(chǎn)率)褐色泡沫。MS(APCI+)m/z 377[M+H]+，其不用純化就可以在下一步中使用。
步驟2向(R)-4-(7-乙酰氧基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.16g，3.08mmol)的12mL THF溶液中加入3MLiOH(2.57mL，7.70mmol)和3mL水。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)，而后加入水，用3×75mL EtOAc萃取混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮。將粗品在硅膠(Biotage 40S)上純化，首先用1∶1至1∶6DCM∶EtOAC梯度，而后用20∶1DCM∶MeOH，得到(R)-4-(7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.556g，54.0％產(chǎn)率)的非對映異構(gòu)體1∶1混合物褐色泡沫。MS(APCI+)m/z 335[M+H]+。
步驟3通過針筒向-78℃的草酰氯(0.203mL，2.33mmol)的10mLDCM溶液中逐滴加入DMSO(0.330mL，4.66mmol)的3mL DCM溶液。攪拌反應(yīng)混合物35分鐘，然后通過針筒慢慢地加入(R)-4-(7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.556g，1.66mmol)的5mL DCM溶液。在-78℃，另外攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，而后加入純的TEA(1.09mL，7.81mmol)。然后將反應(yīng)混合物升溫至室溫，攪拌30分鐘，加入水。用3×75mL DCM萃取混合物，將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮。在硅膠(Biotage 40M)上純化粗品，用大約300mL 4∶1DCM∶EtOAc沖洗柱，然后梯度至1∶4DCM∶EtOAc，得到(R)-4-(5-甲基-7-氧代-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.440g，79.6％產(chǎn)率)褐色泡沫。MS(APCI+)m/z 333[M+H]+。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.73(s，1H)，3.93-3.82(m，2H)，3.74-3.48(m，7H)，2.96(dd，J＝19.6，7.3Hz，1H)，2.34(dd，J＝19.6，1.5Hz，1H)，1.50(s，9H)，1.32(d，J＝6.8Hz，3H)。
步驟4(在20mL塑料瓶中進(jìn)行反應(yīng))向(R)-4-(5-甲基-7-氧代-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.250g，0.752mmol)的5mL DCM溶液中加入DAST(0.795mL，6.02mmol)。封蓋反應(yīng)混合物，在室溫下攪拌45小時(shí)，而后將其倒入冰飽和的NaHCO3中。用2×40mL DCM萃取混合物，將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，真空濃縮。在硅膠(Biotage40S)上純化粗品，用6∶1至3∶1己烷∶EtOAc洗脫，得到(R)-4-(7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.092g，34.5％產(chǎn)率)黃色油狀物。MS(APCI+)m/z 355[M+H]+。
步驟5向(R)-4-(7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.092g，0.260mmol)的2mL二噁烷溶液中加入4MHCl/二噁烷(2.27mL，9.09mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)，而后濃縮至干，真空干燥，得到(R)-7，7-二氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.079g，93.0％產(chǎn)率)淺黃色粉末。MS(APCI+)m/z 255[M+H]+。
步驟6向(R)-7，7-二氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.015g，0.046mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.016g，0.046mmol)和DIEA(0.024mL，0.14mmol)的1.7mLDCM溶液中加入HBTU(0.017g，0.046mmol)。攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)，而后加入2M Na2CO3。用DCM萃取反應(yīng)混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，真空濃縮。在硅膠(Biotage 12S)上純化粗品(首先用大約120mL5∶1DCM∶EA沖洗，然后梯度至1∶1DCM∶EA)，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊烷并[d]-嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.018g，68％產(chǎn)率)白色泡沫。MS(APCI)+m/z 578[M+H]+。
步驟7向(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(異丙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.018g，0.0311mmol)的0.8mL二噁烷溶液中加入4M HCl/二噁烷(0.545mL，2.18mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)，而后將其濃縮至干。將得到的固體溶于最小量的MeOH中，通過加入醚來研磨產(chǎn)物。通過0.2mm尼龍濾紙過濾(用氮?dú)鈮毫?來分離得到的固體，用醚沖洗，真空干燥，得到(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-7，7-二氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.011g，64.1％產(chǎn)率)白色粉末。MS(APCI+)m/z 478[M+H]+。1H NMR(D2O)δ8.28(s，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，2H)，4.28(dd，J＝8.5.5.0Hz，1H)，3.94-3.79(m，2H)，3.58-3.28(m，8H)，3.19(dd，J＝12.8，4.8Hz，1H)，3.12-3.02(m，1H)，2.76-2.56(m，1H)，2.20-2.04(m，1H)，1.18(dd，J＝6.4，4.1Hz，6H)，0.98(d，J＝7.0Hz，3H)。
實(shí)施例38
(S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙-1-酮 步驟1使用干冰-異丙醇浴，將蒲勒烯酸乙酯(130g，662mmol)的EtOAc(900mL)溶液冷卻至-78℃。對該混合物進(jìn)行臭氧分解，直到反應(yīng)轉(zhuǎn)向紫色為止。此時(shí)，臭氧產(chǎn)生停止，從干冰浴中除去反應(yīng)。將氧氣鼓入反應(yīng)中，直到反應(yīng)變黃為止。真空濃縮反應(yīng)，并將得到的殘余物溶于冰醋酸(400mL)中。將溶液冷卻至0℃，用30分鐘分批地加入鋅粉(65g，993mmol)。然后攪拌反應(yīng)2小時(shí)，此時(shí)，將反應(yīng)混合物通過硅藻土墊過濾，除去鋅粉。用NaOH和NaHCO3水溶液將乙酸中和至pH值7，用醚(3×800mL)萃取。用鹽水、MgSO4干燥合并的有機(jī)物，得到(2R)-2-甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙基酯褐色液體(107g，95％)。
步驟2將乙酸銨(240.03g，3113.9mmol)加入到(R)-2-甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙基酯(106.0g，622.78mmol)的MeOH(1.2L)溶液中。在氮?dú)夥罩?，在室溫下攪拌反?yīng)混合物20小時(shí)，而后根據(jù)TLC和HPLC判斷反應(yīng)完成。濃縮反應(yīng)混合物，除去MeOH。將得到的殘余物溶于DCM中，用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，得到(R)-2-氨基-5-甲基環(huán)戊-1-烯羧酸乙基酯(102g，97％產(chǎn)率)橙色油狀物。LC/MS(APCI+)m/z170[M+H]+。
步驟3將包含(R)-2-氨基-5-甲基環(huán)戊-1-烯羧酸乙基酯(161.61g，955.024mmol)和甲酸銨(90.3298g，1432.54mmol)的甲酰胺(303.456mL，7640.19mmol)溶液加熱至150℃的內(nèi)部溫度，攪拌17小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，并轉(zhuǎn)入2L單獨(dú)的萃取燒瓶中。通過高真空蒸餾除去過量甲脒。一旦甲脒終止出現(xiàn)，將蒸餾釜中的剩余油狀物溶于DCM中，用鹽水(3×200mL)洗滌。用DCM(1X)萃取合并的水溶液部分。將合并的有機(jī)萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將得到的棕色油溶于最小量的DCM中，使用分液漏斗將此溶液加入到醚的攪拌溶液(大約5體積醚對DCM溶液)中。這導(dǎo)致形成一些褐色沉淀。通過中等玻璃漏斗過濾來除去該褐色沉淀，將其用醚沖洗，并處理。濃縮濾液。用醚研磨，重復(fù)兩次以上，而后在高真空管中干燥，得到(R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(93.225g，65.00％產(chǎn)率)黃褐色糊狀固體。LC/MS(APCI-)m/z 149.2。
步驟4將純的POCl3(463.9mL，5067mmol)通過加入漏斗慢慢地加入到(R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-醇(152.2g，1013mmol)的DCE(1.2L)的0℃溶液中。加入完成之后，將反應(yīng)混合物加熱到室溫，而后加熱到回流，同時(shí)回流攪拌70分鐘，而后通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，過量的POCl3被分4部分猝滅。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)入分液漏斗中，緩慢地滴入燒杯(在冰浴中冷卻)中，燒杯包含冰和飽和NaHCO3溶液。一旦每個(gè)部分的反應(yīng)混合物加入完成，將猝滅的混合物攪拌30分鐘，以確保POCl3的完全消除，而后將其轉(zhuǎn)移到分液漏斗中。將混合物轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用DCM(2X)萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。在硅膠(1kg硅膠，在9∶1己烷∶乙酸乙酯中成漿到3L玻璃漏斗上，真空沉積的硅膠，頂部用沙)上純化粗品。用DCM/己烷裝填粗品，使用1L側(cè)口燒瓶(用真空條件)洗脫化合物。首先洗脫高Rf副產(chǎn)物，然后洗脫(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(104.4g，61.09％產(chǎn)率)棕色油。將三乙胺(93.0mL，534mmol)和哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(34.8g，187mmol)加入到(R)-4-氯-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶(30.0g，178mmol)的n-BuOH(250mL)溶液中。在氮?dú)夥罩?，將反?yīng)混合物加熱至回流，攪拌過夜(17小時(shí))。將反應(yīng)混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。將得到的油狀物溶于DCM中，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。在硅膠上純化得到的棕色油狀物，首先用2∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，直到產(chǎn)物洗脫干凈為止，然后用梯度1∶1至1∶5的DCM∶乙酸乙酯，得到(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(42.0g，74.1％產(chǎn)率)米色粉末。LC/MS(APCI+)m/z 319.1[M+H]+。
步驟5將固體77％max.MCPBA(23.9g，107mmol)分批地加入到(R)-4-(5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(20.0g，62.8mmol)的CHCl3(310mL)0℃溶液中。攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，而后加熱至室溫，同時(shí)攪拌90分鐘。7.5小時(shí)之后，HPLC表現(xiàn)類似。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。將NaHCO3(13.2g，157mmol)和m-CPBA(0.5當(dāng)量)加入到該反應(yīng)混合物中，將其攪拌過夜(14小時(shí))。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，通過加入漏斗逐滴加入Na2S2O3(29.8g，188mmol)的水(50mL)溶液。通過加入漏斗加入Na2CO3(24.6g，232mmol)的水(70mL)溶液(混合物變均勻)。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，用CHCl3(3×150mL)萃取混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，得到N-氧化物。LC/MS(APCI+)m/z335.1[M+H]+。
步驟6將Ac2O(77.0mL，816mmol)加入到得自于步驟5的N-氧化物(21.0g，62.8mmol)中。在氮?dú)夥罩校?0℃沙浴中加熱反應(yīng)混合物，攪拌100分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去過量乙酸酐。將得到的油狀物溶于DCM中，然后將其小心地傾倒入冰飽和的Na2CO3中。用DCM萃取混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，濃縮，得到(5R)-4-(7-乙酰氧基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(23.6g，100％)褐色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 377.1[M+H]+。
步驟7將LiOH-H2O(6.577g，156.7mmol)加入到(5R)-4-(7-乙酰氧基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(23.6g，62.69mmol)的2∶1THF∶H2O(320mL)的0℃溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，而后加熱至室溫。在3和4.5小時(shí)的LC/MS是相同的。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入飽和NH4Cl。將反應(yīng)混合物攪拌5分鐘，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分THF。用EtOAc(3×250mL)萃取混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，濃縮。將粗品在Biotage 65M上進(jìn)行快速柱色譜用4∶1DCM∶乙酸乙酯洗脫，然后用1∶1至1∶4DCM∶乙酸乙酯梯度洗脫。一旦產(chǎn)物洗脫后，然后用乙酸乙酯快速通過柱，然后用30∶1DCM∶MeOH洗脫其余的產(chǎn)物(8.83g)，使用相同條件將混合餾分用Biotage 40M再進(jìn)行快速柱色譜，得到另外的2.99g，得到合并產(chǎn)率的(5R)-4-(7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(11.82g，產(chǎn)率56.38％)褐色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 335.1[M+H]+。
步驟8將DMSO(5.45mL，76.8mmol)的DCM(50m)溶液通過加入漏斗逐滴加入到-78℃的草酰氯(3.35mL，38.4mmol)的DCM(150mL)溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌35分鐘。通過加入漏斗慢慢地加入(5R)-4-(7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(9.17g，27.4mmol)的DCM(80mL)溶液。在-78℃，另外攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，而后加入純的NEt3(18.0mL，129mmol)。然后將反應(yīng)混合物升溫至室溫，攪拌30分鐘，而后加入水。用DCM(3×200mL)萃取混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，真空濃縮。在硅膠(Biotage 65M)上純化粗品用大約800mL4∶1DCM∶EtOAc沖洗柱，然后梯度至1∶1DCM∶乙酸乙酯，直到產(chǎn)物洗脫為止，然后用1∶4DCM∶EtOAc洗脫產(chǎn)物，得到(R)-4-(5-甲基-7-氧代-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(7.5g，82.3％產(chǎn)率)褐色泡沫。從DCM/己烷中濃縮(3X)泡沫，得到極淺的棕色泡沫。HPLC＞95％面積。LC/MS(APCI+)m/z 333[M+H]+。
步驟9將三乙胺(4.33mL，31.1mmol)(用氮?dú)饷摎?0分鐘，而后使用)和甲酸(1.36mL，36.1mmol)(用氮?dú)饷摎?0分鐘，而后使用)加入到(R)-4-(5-甲基-7-氧代-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(9.75g，29.3mmol)的DCM(210mL；用氮?dú)饷摎?0分鐘，而后使用)溶液中。攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，而后加入Ru催化劑(0.0933g，0.147mmol)。在正的氮?dú)鈮毫ο?，攪拌反?yīng)過夜(18小時(shí))。濃縮反應(yīng)混合物至干，高真空干燥。粗品的1H NMR顯示85％的非對映選擇性。將粗品在Biotage 65M上進(jìn)行快速柱色譜(通入1∶1DCM∶乙酸乙酯500mL進(jìn)行裝填，然后用1∶4DCM∶乙酸乙酯，直到產(chǎn)物出現(xiàn)為止(第二個(gè)斑點(diǎn)))，然后用純的乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，然后用25∶1DCM∶MeOH洗脫出其余的產(chǎn)物。將餾份合并，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。再次從DCM/己烷中濃縮殘余物，得到4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(主要)和4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(次要的)的混合物(9.35g，95.3％產(chǎn)率)米色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 335[M+H]+。通過對原醇(carbinol)次甲基積分，1HNMR(CDCl3)顯示88％的非對映選擇性。
步驟10將4-硝基苯甲酰氯(4.27g，23.0mmol)加入到4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(7.0g，20.9mmol)和三乙胺(4.38mL，31.4mmol)的DCM(110mL)0℃溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜，而后加入飽和NaHCO3。將混合物攪拌10分鐘，而后用DCM萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。在Biotage 65M上進(jìn)行快速柱色譜(用3∶1己烷∶乙酸乙酯裝填粗品，然后用2∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫出4-((5R，7R)-5-甲基-7-(4-硝基苯甲酰基氧基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯和少許混合餾份)。然后使用1∶2己烷∶乙酸乙酯洗脫4-((5R，7S)-5-甲基-7-(4-硝基苯甲酰氧基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮含有產(chǎn)物的餾份，得到4-((5R，7R)-5-甲基-7-(4-硝基苯甲酰氧基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(8.55g，產(chǎn)率84.5％)黃色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 484[M+H]+。1H NMR(CDCl3)顯示了單一非對映異構(gòu)體。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮含有其它非對映異構(gòu)體的餾份，得到4-((5R，7S)-5-甲基-7-(4-硝基苯甲酰氧基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.356g，產(chǎn)率3.52％)褐色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 484[M+H]+。
步驟11將LiOH-H2O(0.499g，11.9mmol)加入到0℃的4-((5R，7R)-5-甲基-7-(4-硝基苯甲酰氧基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(2.30g，4.76mmol)的2∶1THF∶H2O(40mL)溶液中。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，攪拌1小時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去THF，并加入飽和NaHCO3。用乙酸乙酯萃取混合物。用飽和NaHCO3(1X)洗滌合并的萃取物，干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮，得到4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.59g，100.0％產(chǎn)率)黃色泡沫。LC/MS(APCI+)m/z 335[M+H]+。使用類似的方法制備4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯。
步驟12將4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.190g，3.558mmol)溶于二氯甲烷(55mL)中，并冷卻至-20℃。將溶液用DAST(1.410mL，10.68mmol)處理，在-20℃攪拌1小時(shí)。用冰淬滅反應(yīng)，而后加熱至環(huán)境溫度。用飽和NH4Cl稀釋混合物，分離。用二氯甲烷(2X)萃取水相，用Na2SO4干燥合并的有機(jī)物，濃縮，得到深色油狀物。將該油在SiO2(Biotage 40S，用二氯甲烷裝填)上進(jìn)行色譜分離，然后用2.5％MeOH/DCM洗脫，然后用3.5％MeOH/DCM洗脫。濃縮混合餾分，將該物質(zhì)再在SiO2(Biotage 40S，用DCM裝填)上進(jìn)行色譜分離，用2己烷/EtOAc洗脫。收集產(chǎn)物深色油狀物，得到4-((5R，7S)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.725g，61％)。LCMS(APCI+)m/z 337.0[M+H]+；Rf3.13分鐘。
步驟13將4-((5R，7S)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.725g，2.155mmol)溶于二噁烷(5mL)中，并冷卻至0℃。逐滴加入HCl的二噁烷溶液(13.47mL，53.88mmol；4M)。將反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，攪拌16小時(shí)。大約8小時(shí)之后形成白色沉淀。真空濃縮反應(yīng)混合物，再懸浮在MeOH中，再濃縮(3X)。將殘余物溶于MeOH(大約2至3mL)中，逐滴加入到快速攪拌的、含有醚(80mL)的燒瓶中。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下過濾白色固體，在氮?dú)夥罩懈稍铮玫?5R，7S)-7-氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽白色固體(555mg，83％)。LCMS(ESI+)m/z 237.2[M+H]+；Rf1.70分鐘。
步驟14將HBTU(0.153g，0.404mmol)加入到(5R，7S)-7-氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.125g，0.404mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯-3-氟苯基)丙酸(0.128g，0.404mmol)和DIEA(0.225mL，1.29mmol)的DCM(6mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1.5小時(shí)，而后加入2M Na2CO3。用DCM萃取反應(yīng)混合物，干燥(Na2SO4)合并的萃取物，過濾，濃縮。將粗品在硅膠上純化(Biotage 40S，通入200mL5∶1DCM∶EA，用DIEA洗脫，然后用梯度1∶4DCM∶EA洗脫產(chǎn)物)，得到(S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-3-(4-((5R，7S)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.210g，0.392mmol，產(chǎn)率96.9％)白色蠟狀殘余物。LC/MS(APCI+)m/z 536[M+H]+。
步驟15將4M HCl/二噁烷(2.46mL，9.85mmol)加入到(S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-3-(4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁基酯(0.263g，0.492mmol)的二噁烷(3mL)和DCM(2mL)溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物13小時(shí)，而后濃縮至干。將殘余物溶于最小量的MeOH中，將溶液逐滴加入到大力攪拌的醚(40mL)中，導(dǎo)致形成細(xì)小的沉淀。將固體通過中等玻璃漏斗(用氮?dú)鈮毫?過濾來進(jìn)行分離，用醚沖洗，在氮?dú)鈮毫ο赂稍铮M(jìn)一步的真空干燥，得到(S)-3-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.224g，0.442mmol，產(chǎn)率89.7％)淺黃色粉末。LC/MS(APCI+)m/z 434[M+H]+。
步驟16將NaBH(OAc)3(0.03764g，0.1776mmol)加入到稍微渾濁的(S)-3-氨基-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.060g，0.1184mmol)、二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮(0.1093mL，1.184mmol)和DIEA(0.06186mL，0.3551mmol)的DCE(1mL)和DMF(0.4mL)溶液中。1小時(shí)之后，加入另外3當(dāng)量的二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮和2當(dāng)量的NaBH(OAc)3。將反應(yīng)混合物攪拌過夜。加入另外1當(dāng)量的Na(OAc)3BH，另外攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。加入飽和NaHCO3，用DCM萃取該混合物。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。將粗品在硅膠上快速通過(Biotage 12M，20∶1DCM∶MeOH裝填的化合物，通入150mL，用DIEA洗脫；然后用9∶1DCM∶MeOH洗脫產(chǎn)物)。將含有產(chǎn)物的餾份濃縮，并將殘余物溶于1∶1DCM∶醚(1.5mL)中。加入過量2M HCl/醚，導(dǎo)致沉淀。攪拌混合物5分鐘，然后濃縮，在高真空管中干燥。將固體懸浮在醚中，通過20微米尼龍濾片過濾來進(jìn)行分離(用氮?dú)鈮毫?，用醚沖洗，在氮?dú)鈮毫ο赂稍铮婵崭稍?，得?S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-1-(4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽(0.035g，0.05923mmol，產(chǎn)率50.03％)白色粉末。LC/MS(APCI)+m/z 518。
實(shí)施例39
2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(2，2，2-三氟乙基氨基)丙-1-酮 步驟1在室溫下，將2-(4-氯苯基)乙酸(20.0g，117mmol)的無水甲醇(235mL)溶液用5滴濃H2SO4(催化劑(cat.))處理。將混合物攪拌過夜，至反應(yīng)完成，真空濃縮至大約40mL。在醚和半飽和的NaHCO3溶液之間分配濃縮物。將含水部分用醚反萃取一次，合并有機(jī)相。用水、然后鹽水洗滌有機(jī)部分，用MgSO4干燥，真空濃縮。將該物質(zhì)在高真空下放置一小時(shí)，得到純2-(4-氯苯基)乙酸甲酯淺黃色油狀物(19.8g，92％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

7.30(d，J＝8.4Hz，2H)，7.21(d，J＝8.4Hz，2H)，3.70(s，3H)，3.60(2，2H)。
步驟2將n-BuLi(1.60M，在己烷中，35.6mL，56.9mmol)加入到0℃的二異丙胺(8.35mL，59.6mmol)的THF(200mL)溶液中。在0℃攪拌混合物30分鐘，而后冷卻至-78℃。將2-(4-氯苯基)乙酸甲酯(10.0g，54.2mmol)的THF(10mL)溶液通過注射器加入到-78℃的LDA溶液中，然后攪拌45分鐘。通過注射器加入純的溴乙酸叔丁基酯(9.60mL，65.0mmol)，在-78℃攪拌反應(yīng)15分鐘。除去水浴，將反應(yīng)升溫至室溫。另外攪拌5小時(shí)之后，用飽和NH4Cl溶液淬滅反應(yīng)混合物，真空除去溶劑。將油性混合物用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)物合并。將有機(jī)部分用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。在硅膠上純化粗品油狀物(95∶5己烷∶EtOAc)，得到4-叔丁基1-甲基2-(4-氯苯基)琥珀酸酯淺黃色油(14.3g，88％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

7.29(d，J＝7.2Hz，2H)，7.22(d，J＝7.2Hz，2H)，4.00(dd，J＝9.6，5.6Hz，1H)，3.67(s，3H)，3.07(dd，J＝16.4，9.6Hz，1H)，2.58(dd，J＝16.8，6.0Hz，1H)，1.40(m，3H)。
步驟3在室溫下，將4-叔丁基1-甲基2-(4-氯苯基)琥珀酸酯(14.3g，47.7mmol)的DCM(75mL)溶液用純的TFA(75mL)處理。攪拌混合物5小時(shí)，至反應(yīng)完成，而后濃縮反應(yīng)混合物，真空干燥過夜，得到白色固體。將固體懸浮在甲苯(160mL)中，冷卻至0℃，連續(xù)地用二苯基膦?；B氮化物(11.2mL，52.1mmol)和三乙胺(13.2mL，94.7mmol)處理。使反應(yīng)混合物(均勻)升溫至室溫，攪拌四個(gè)小時(shí)，至反應(yīng)完成。用1％檸檬酸溶液淬滅溶液，用EtOAc(3X)萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，用Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮，得到淺棕色油。將粗品疊氮化物溶于叔丁醇(160mL)中，用純的SnCl4(1.0M溶液，2.37mL，2.37mmol)處理，小心地加熱到90℃，放出氮?dú)?。?0℃攪拌混合物2.5小時(shí)，冷卻至室溫。用飽和NaHCO3溶液淬滅溶液，而后濃縮。用EtOAc(3X)萃取油性混合物，用鹽水洗滌合并的有機(jī)物，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。在硅膠上純化殘余物(4∶1己烷∶EtOAc)，得到3-(叔丁氧基羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯淺黃色油(11.7g，79％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ7.31(d，J＝8.0Hz，2H)，7.20(d，J＝8.0Hz，2H)，4.86(br s，1H)，3.88(m，1H)，3.69(s，3H)，3.58(m，1H)，3.49(m，1H)，1.42(s，9H)。
步驟4在室溫下，將3-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯(451mg，1.44mmol)的二噁烷(6.0mL)溶液用4M HCl/二噁烷(大約6.0mL，23.0mmol)處理。攪拌混合物18小時(shí)，至反應(yīng)完成，而后用醚稀釋反應(yīng)混合物，得到沉淀。在氮?dú)夥罩羞^濾漿液，得到白色固體，將其用醚洗滌。真空干燥固體，得到3-氨基-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽白色固體(321mg，89％)。LCMS(APCI+)m/z 214.0[M+H]+。
步驟5在室溫下，將3-氨基-2-(4-氯苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽(215mg，0.86mmol)的1∶1THF∶DMF(3.0mL)溶液用DIEA(389uL，2.23mmol)處理。將三氟甲磺酸三氟乙基酯(299mg，1.29mmol)加入到混合物中，攪拌反應(yīng)20小時(shí)，至反應(yīng)完成。將混合物在乙酸乙酯和稀釋的NaHCO3溶液之間分配。將含水部分萃取兩次，將合并的有機(jī)物用水(3X)洗滌。用鹽水洗滌有機(jī)部分，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。通過色譜純化殘余物(硅膠，用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，Rf＝0.18)，得到純2-(4-氯苯基)-3-(2，2，2-三氟乙基氨基)丙酸甲酯(235mg，93％)無色油狀物。LCMS(APCI+)m/z296.0[M+H]+。
步驟6在室溫下，將2-(4-氯苯基)-3-(2，2，2-三氟乙基氨基)丙酸甲酯(235mg，0.795mmol)的THF(3.0mL)溶液用KOTMS(153mg，1.19mmol)處理。攪拌反應(yīng)18小時(shí)，至反應(yīng)完成，用醚稀釋混合物。過濾分離得到的沉淀，在高真空下放置兩個(gè)小時(shí)，得到2-(4-氯苯基)-3-(2，2，2-三氟乙基氨基)丙酸鉀(299mg，118％，過量鹽)白色固體。LCMS(APCI+)m/z282.0[M+H]+。
步驟7在室溫下，將(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(30mg，103umol)和酸(33.0mg，103umo1)溶解/懸浮在DMF(1.0mL)中。分別用DIEA(38uL，216umol)和HBTU(43mg，113umol)處理混合物。將混合物攪拌過夜，通過粗品的LCMS分析，至反應(yīng)完成。將反應(yīng)物在乙酸乙酯和水之間分配。將含水部分用乙酸乙酯萃取(2X)，將有機(jī)相合并。用水(3X)、然后鹽水洗滌有機(jī)部分，分離，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。通過色譜純化殘余物(硅膠，用4％MeOH/乙酸乙酯洗脫，Rf＝0.17)，得到純酰胺無色油狀物(28mg，56％)。將殘余物溶于最小量的醚中，用過量HCl/醚處理。將得到的鹽懸浮液真空濃縮，然后減壓干燥過夜，得到2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(2，2，2-三氟乙基氨基)丙-1-酮二鹽酸鹽(28mg，56％)白色粉末。LCMS(APCI+)m/z482.3[M+H]+；Rf3.19分鐘。
實(shí)施例40
(S)-2-(4-氯苯基)-3-(環(huán)丙基甲基氨基)-1-(4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟1將4-((5R，7S)-7-羥基-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.843g，2.521mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，并冷卻至-20℃。將溶液用DAST(0.9992mL，7.562mmol)處理，在-20℃攪拌100分鐘。3小時(shí)之后，用冰淬滅反應(yīng)，而后加熱至環(huán)境溫度。分離混合物。用二氯甲烷(2X)萃取水相(pH值大約1)，用6％NaHCO3(2X)洗滌合并的有機(jī)相，用Na2SO4干燥，濃縮至深色油狀物(0.91g)。將該物質(zhì)在SiO2(Biotage40S，用洗脫液裝填)上進(jìn)行色譜分離，用2∶1己烷/EtOAc洗脫。干凈地回收所需4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.6138g，72％)。將4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(0.6138g，1.825mmol)溶于二噁烷(5mL)中，并冷卻至0℃。逐滴加入HCl的二噁烷溶液(11.40mL，45.61mmol；4M)，而后使反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，同時(shí)攪拌60小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，再懸浮在MeOH中，再濃縮(3X)。將殘余物溶于MeOH(3.7mL)中，逐滴加入到快速攪拌的、含有醚(100mL)的燒瓶中。在氮?dú)夥罩羞^濾白色固體，用醚洗滌，在氮?dú)夥罩懈稍?，得?5R，7R)-7-氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽白色固體(539mg，96％)。LC/MS(APCI)+m/z 237.2。
步驟2將(5R，7R)-7-氟-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶二鹽酸鹽(0.535g，1.730mmol)和(S)-3-(叔丁氧羰基(環(huán)丙基甲基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.6122g，1.730mmol)在二氯甲烷(15mL)中混合，用二異丙基乙胺(0.9041mL，5.191mmol)處理。然后加入HBTU(0.6579g，1.730mmol)。將反應(yīng)在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。ESI MS極好的顯示了所需產(chǎn)物。用10％Na2CO3淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷稀釋，分離。用二氯甲烷(2X)洗滌水溶液部分，用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，真空濃縮。將該物質(zhì)施加到40mmSamplet上，空氣干燥。將其放在柱(Biotage 40S)上，用3∶2己烷/EtOAc洗脫。收集主要斑點(diǎn)，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(環(huán)丙基甲基)氨基甲酸叔丁基酯白色固體(955mg，96％)。LC/MS(APCI+)m/z 571.9[M+H]+。
步驟3將(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(環(huán)丙基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.955g，1.669mmol)溶于二噁烷(20mL)中。用HCl/二噁烷(10.43mL，41.73mmol；4M)處理溶液，在環(huán)境溫度下攪拌混合物16小時(shí)。HPLC顯示沒有SM剩余，因此真空濃縮反應(yīng)混合物，再溶于MeOH中，并再濃縮(3X)。將殘余物再溶于MeOH(大約4.5mL+2mL洗滌物)中，并逐滴加入到攪拌醚(大約190mL)中。攪拌懸浮液30分鐘，然后過濾，在氮?dú)夥罩懈稍?，得?S)-2-(4-氯苯基)-3-(環(huán)丙基甲基氨基)-1-(4-((5R，7R)-7-氟-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮二鹽酸鹽(797mg，88％)固體。LC/MS(APCI+，F(xiàn)IA)m/z 472.2/474.2[M+H]+。
實(shí)施例41
(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-(5，5-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮 步驟1將4-甲基戊酸(valertic acid)(7.688g)和羰基二咪唑(11.805g)的THF(265mL)混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。加入丙二酸一乙基酯鎂鹽(19.493g)。將混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。將殘余物用2∶1EtOAc-醚(200mL)和0.5N HCl(200mL)處理。分離有機(jī)相，用0.5NHCl(2×200mL)、飽和NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)。過濾后，真空蒸發(fā)溶劑。將殘余物6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(15.02g)溶于THF(200mL)(含有對乙酰氨基苯磺酰疊氮化物(15.90g))中，冷卻到0℃。加入DBU(9.90mL)。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。真空濃縮內(nèi)含物(浴＜35℃)。將1∶1EtOAc-DCM(300mL)和硅膠(25g)加入到殘余物中?；旌现?，濾出固體，用1∶1EtOAc-DCM洗滌。濃縮濾液。用快速色譜法純化粗品，得到2-重氮基-6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(8.30g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

(ppm)4.30(q，J＝7.2Hz，2H)，2.87-2.83(m，2H)，1.62-1.49(m，3H)，1.33(t，J＝7.2Hz，3H)，0.91(d，J＝6.5Hz，6H)。
步驟2將乙酸銠(170mg)加入到2-重氮基-6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(0.5g)的DCM(80mL)溶液中。分次加入2-重氮基-6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(7.652g)的DCM(50mL)溶液。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入1N HCl(100mL)。分離有機(jī)相。用DCM(100mL)萃取水相。將合并的DCM溶液干燥(Na2SO4)。過濾和濃縮之后，用快速色譜法純化粗品，得到2，2-二甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙酯(7.54g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

(ppm)4.25-4.09(m，2H)，2.52-2.37(m，2H)，2.03-1.99(m，2H)，1.80-1.67(m，1H)，1.33-1.26(m，9H)。
步驟3在85℃(浴)，將2，2-二甲基-5-氧代環(huán)戊烷羧酸乙酯(3.426g)和乙酸銨(14.33g)的混合物在EtOH(100mL)中加熱1小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。將殘余物在水和DCM之間分配。分離有機(jī)相。用DCM萃取水溶液。將合并的DCM溶液用水洗滌，干燥(Na2SO4)。一旦過濾和濃縮，得到固體2-氨基-5，5-二甲基環(huán)戊-1-烯羧酸乙酯(2.933g)。將2-氨基-5，5-二甲基環(huán)戊-1-烯羧酸乙酯與甲酸銨(5.054g)和甲酰胺(7mL)混合，并在150℃加熱16小時(shí)。將混合物用水稀釋，并用5∶1DCM-IPA萃取。將合并的萃取物干燥(Na2SO4)，濃縮，得到5，5-二甲基-6，7-二氫-3H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4(5H)-酮粘性油狀物(1.185g)。將5，5-二甲基-6，7-二氫-3H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4(5H)-酮(1.063g)溶于乙腈(20mL)(含有POCl3(1.78mL))中。將混合物在80℃加熱10小時(shí)。將混合物冷卻至0℃。逐滴加入50％KOH(15.3mL)。加入哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(3.615g)。將混合物在80℃加熱24小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。加入水。將混合物用DCM(2X)萃取，干燥(Na2SO4)。用快速色譜法純化粗品，得到4-(5，5-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.021g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

(ppm)8.57(s，1H)，3.56-3.54(m，4H)，3.37-3.34(m，4H)，2.90(t，J＝7.3Hz，2H)，1.89(t，J＝7.3Hz)，3H)1.48(s，9H)，1.40(s，6H)。MS333.2(M+1)。
步驟4在0℃，將4-(5，5-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(56mg)的DCM(1mL)溶液用TFA(0.25mL)處理10分鐘，而后在室溫下處理2小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。在0℃，將DCM(2mL)、DIPEA(0.139mL)和HBTU(76mg)加入到殘余物中。將混合物在室溫下攪拌過夜。用DCM稀釋之后，加入水。分離DCM層，用DCM(2X)萃取水層。將合并的DCM溶液用飽和NaHCO3溶液洗滌，干燥(Na2SO4)。過濾和濃縮后，將殘余物溶于DCM(1mL)中，在0℃用TFA(0.25mL)處理10分鐘，而后在室溫下處理2小時(shí)。將內(nèi)含物濃縮，用HPLC純化，得到(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-(5，5-二甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮的TFA鹽(82mg，71％)。MS456.3(M+1)。
實(shí)施例42
(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-乙烯基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮 步驟12-氧代-5-乙烯基環(huán)戊烷羧酸乙酯的制備描述在下列中Nugent，W.A.；Hobbs，Jr，F(xiàn).W.，J.Org.Chem，1986，51，3376-3378。
步驟2將2-氧代-5-乙烯基環(huán)戊烷羧酸乙酯(0.48g，2.79mmol)與乙酸銨(2.15g，27.9mmol)在MeOH(10mL)中混合。將混合物加熱至50℃，保持2小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。將殘余物在DCM和水之間分配。分離DCM層，用DCM萃取水層。將合并的DCM溶液干燥(Na2SO4)。用快速色譜法純化粗品，得到2-氨基-5-乙烯基環(huán)戊-1-烯羧酸乙酯(0.19g，41％，2步)。1HNMR(CDCl3，400MHz)

(ppm)5.59-5.58(m，1H)，5.05-4.88(m，2H)，3.68(s，3H)，3.52-3.46(m，1H)，2.66-2.56m，1H)，2.38-2.30(m，1H)，2.13-2.03(m，1H)，1.70-1.62(m，1H)，1.61(br s，2H)。MS168.0(M+1)。
步驟3將2-氨基-5-乙烯基環(huán)戊-1-烯羧酸乙酯(2.132g，12.75mmol與甲酸銨(4.02g，63.75mmol)和甲酰胺(5.56mL，127.5mmol)混合，并在140℃加熱16小時(shí)。將混合物用水(50mL)和20％IPA-DCM(100mL)稀釋。濾出固體(硅藻土)。分離有機(jī)層。用20％IPA-DCM(3X50mL)萃取水層。用鹽水(20mL)洗滌合并的有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。過濾和濃縮后，將甲苯(10mL)加入到粗品(1.543g)中，混合，蒸發(fā)。將得到的5-乙烯基-6，7-二氫-3H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4(5H)-酮與乙腈(30mL)和POCl3(2.62mL，28.54mmol)混合，并在80℃加熱20小時(shí)。將混合物冷卻至0℃。逐滴加入50％KOH(11.25mL，142.7mmol)。加入哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(5.31g，28.53mmol)。將混合物在80℃加熱24小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。加入水。將混合物用DCM(2X)萃取，干燥(Na2SO4)。用快速色譜法純化粗品，得到4-(5-乙烯基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(855mg，20％，2步)。1H NMR(CDCl3，400MHz)

(ppm)8.47(s，1H)，5.95-5.86(m，1H)，5.12-5.09(，.1H)，4.92-4.87(m，1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.67-3.60(m，4H)，3.51-3.39(m，4H)，2.94-2.76(m，2H)，2.35-2.27(m，1H)，1.90-1.82(m，1H)，1.47(d，1.47(s，9H)。MS331.3(M+1)。
步驟4在0℃，將4-(5-乙烯基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(117mg，0.354mmol)的DCM(2mL)溶液用TFA(0.5mL)處理15分鐘，而后在室溫下處理2小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。在0℃，將DCM(2mL)、DIPEA(0.293mL，1.77mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(145mg，0.425mmol)和HBTU(161mg，0.425mmol)加入到殘余物中。將混合物在室溫下攪拌過夜。用DCM稀釋之后，加入水。分離DCM層，用DCM(2X)萃取水層。將合并的DCM溶液用水洗滌，干燥(Na2SO4)。過濾和濃縮后，利用快速色譜法純化，得到粘性油狀物(139mg)。將物質(zhì)溶于DCM(1mL)中，在0℃用TFA(0.25mL)處理15分鐘，而后在室溫下處理2小時(shí)。濃縮內(nèi)含物，用HPLC和手性色譜純化，得到(S)-2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基)-1-(4-((S)-5-乙烯基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-1-酮的TFA鹽(14mg，6％)。MS454.2(M+1)。
實(shí)施例43
(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-(羥基甲基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮 步驟1將4-(5-乙烯基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(566mg，1.73mmol)的DCM(20mL)溶液冷卻到-78℃。鼓入臭氧流15分鐘。在-78℃，鼓入氧氣，而后鼓入氮?dú)?。加入乙基甲基硫?2mL)。用1小時(shí)使混合物溫?zé)嶂潦覝?。濃縮內(nèi)含物。將殘余物在DCM和半飽和的NaCl溶液之間分配。分離有機(jī)層。用DCM(2X)萃取水層。將合并的有機(jī)溶液干燥(Na2SO4)。將粗品溶于MeOH(10mL)中，并冷卻到0℃。分次加入NaBH4(150mg)。將混合物在0℃攪拌2小時(shí)。用10％HOAc(5mL)淬滅反應(yīng)。濃縮混合物，并在水和EtOAc之間分配。分離有機(jī)層。用EtOAc(2X)萃取水層。將合并的有機(jī)溶液干燥(Na2SO4)。利用快速色譜法，得到4-(5-(羥甲基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(73mg，13％，大約70％純度)。MS335.2(M+1)。
步驟2在0℃，將化合物4-(5-(羥甲基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(71mg)的DCM(1.5mL)溶液用TFA(0.5mL)處理15分鐘，而后在室溫下處理3小時(shí)。濃縮內(nèi)含物。在0℃，將DCM(2mL)、DIPEA(0.210mL，1.27mmol)、(S)-3-(叔丁氧羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(80mg，0.234mmol)和HBTU(89mg，0.234mmol)加入到殘余物中。將混合物在室溫下攪拌過夜。用DCM稀釋之后，加入水。分離DCM層，用DCM(2X)萃取水層。將合并的DCM溶液干燥(Na2SO4)。過濾和濃縮后，利用快速色譜法純化，得到粘性油狀物(86mg)。將物質(zhì)溶于DCM(1.5mL)中，在0℃用TFA(0.25mL)處理15分鐘，而后在室溫下處理2小時(shí)。濃縮內(nèi)含物，用HPLC和手性色譜純化，得到(S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((R)-5-(羥甲基)-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮的TFA鹽(4mg，3％)。MS458.2(M+1)。
表1中所示的的實(shí)施例44-168也可以按照上述所描述的方法制備 表1
























應(yīng)該認(rèn)為先前的描述僅僅是說明性的本發(fā)明原理。進(jìn)一步的，由于許多改進(jìn)和變化對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，所以不希望本發(fā)明被上述顯示的精確構(gòu)成和方法所限制。相應(yīng)地，可以認(rèn)為，所有合適的改進(jìn)和等效內(nèi)容在下述權(quán)利要求書所定義的本發(fā)明范圍之內(nèi)。
當(dāng)在說明書和下面的權(quán)利要求中使用時(shí)，單詞″包含″、″包括″意欲具體說明所敘述的性能、整體、組分或步驟的存在，但不排除存在或填加一或多種其它性能、整體、組分、步驟或基團(tuán)。
權(quán)利要求
1.下式的化合物和其對映異構(gòu)體和鹽，
其中
R1和R1a獨(dú)立地選自H、Me、Et、CH＝CH2、CH2OH、CF3、CHF2或CH2F；
R2和R2a獨(dú)立地選自H或F；
R5是H、Me、Et或CF3；
A是
其中
G是任選被一個(gè)至四個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基或任選被鹵素取代的5-6元單環(huán)或9元雙環(huán)雜芳基；
R6和R7獨(dú)立地是H；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)；(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)；V-(CH2)0-1，其中V是5-6元雜芳基；W-(CH2)1-2，其中W是任選被F、Cl、Br、I、OMe、CF3或Me取代的苯基；C3-C6-環(huán)烷基；羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)；氟-(C3-C6-環(huán)烷基)；CH(CH3)CH(OH)苯基；任選被F、OH、環(huán)丙基甲基、C1-C3烷基或C(＝O)(C1-C3烷基)取代的4-6元雜環(huán)；或任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基OH、氧代基團(tuán)、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、四氫吡喃基、四氫呋喃基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、哌啶基和吡咯烷基，
或R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代；
Ra和Rb是H，
或Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
Rc和Rd是H或Me，或
Rc和Rd與它們相連接的原子一起形成環(huán)丙基環(huán)；
R8是H、Me或OH，
或R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、OCH2-苯基、CH2O-苯基、NH2、NO2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和
m、n和p獨(dú)立地是0或1。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R2a是H。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是H，R2a是F。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R2a是F。
5.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R5是H。
6.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R5是甲基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R5是(S)構(gòu)型。
8.權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R5是乙基。
9.權(quán)利要求1至8的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1和R1a獨(dú)立地選自H、甲基、乙基、CH＝CH2和CH2OH。
10.權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1是甲基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1是(R)構(gòu)型。
12.權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1是H。
13.權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1是CH2OH。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R1是(R)構(gòu)型。
15.權(quán)利要求13的化合物，其中R1是(S)構(gòu)型。
16.權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1是CH＝CH2。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R1是(R)構(gòu)型。
18.權(quán)利要求16的化合物，其中R1是(S)構(gòu)型。
19.權(quán)利要求1至9的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1是乙基。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中R1是(S)構(gòu)型。
21.權(quán)利要求1至20的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1a是H。
22.權(quán)利要求1至20的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R1a是甲基。
23.權(quán)利要求1至22的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中G是任選被一個(gè)至三個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基，R9基團(tuán)獨(dú)立地選自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、異丙基、叔丁基、CN、OCH3、CF3、OCF3、SCH3、NO2、環(huán)丙基和OCH2Ph。
24.權(quán)利要求1至23的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中G是4-氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、4-氯-3-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-氟-4-溴苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、2，4-二氟苯基、4-溴苯基、4-氯-2-氟苯基、4-甲氧基苯基、4-甲基苯基、4-氰基苯基、4-三氟甲基苯基、2-氟苯基、3-三氟甲基苯基、2-氟-4-三氟甲基苯基、3-氟-4-三氟甲氧基苯基、3-氟-4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-碘苯基、4-硝基苯基或4-叔丁基苯基。
25.權(quán)利要求1至22的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中G是任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代的5-6元單環(huán)雜芳基。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中G是任選被鹵素取代的噻吩或吡啶。
27.權(quán)利要求25或26的化合物，其中G選自下列結(jié)構(gòu)
28.權(quán)利要求1至22的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中G是任選被鹵素取代的9元雙環(huán)雜芳基。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中G是任選被鹵素取代的吲哚。
30.權(quán)利要求28或29的化合物，其中G是
31.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6或R7可以是H，(C3-C6-環(huán)烷基)-CH2，雜芳基-(CH2)，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，任選被C(＝O)CH3取代的5-6元雜環(huán)，或任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、氧代基團(tuán)、OMe、CN和F的基團(tuán)取代的(C1-6)-烷基。
32.權(quán)利要求1至31的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6或R7選自H、甲基、乙基、異丙基，-C(＝O)H、CH2CH2OH、CH2-tBu(新戊基)或CH2CF3、CH2-環(huán)丙基、CH2-(吡啶-3-基)、環(huán)己基或選自下列結(jié)構(gòu)
33.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7與它們相連接的氮一起形成3-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3、CH2CH2OH、C(＝O)CH3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代。
34.權(quán)利要求33的化合物，其中NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
35.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。
36.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)。
37.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中m是1，n是0，且p是0，從而A由下式表示
38.權(quán)利要求37的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
39.權(quán)利要求37或38的化合物，其中Rc和Rd是H。
40.權(quán)利要求37至39的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R8是H或OH。
41.權(quán)利要求37至39的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、3-戊基、CH(異丙基)2、CH2CH2OH、CH2CH2CH2OH、CH(CH2CH2OH)2、CH2CH2OMe、CH(CH2CH2OMe)2、CH2CH2CH2OMe、CH2CN、CH2-環(huán)丙基、CH2-環(huán)丁基、CH2-tBu、環(huán)戊基、環(huán)己基、CH2-苯基、CH2-(吡啶-2-基)、CH2-(吡啶-3-基)、CH2-(吡啶-4-基)、4-羥基環(huán)己-1-基、CH(CH3)CH(OH)苯基、CH2CF3，-C(＝O)H或選自下列結(jié)構(gòu)
或R6和R7與N一起形成吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基或哌嗪基環(huán)，其中所述吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)丁烷基、嗎啉基或哌嗪基環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自Me、Et、OH、CH2CH2OH、C(＝O)CH3、異丙基和F的基團(tuán)取代，
或R6和R8與它們相連接的原子一起形成吡咯烷基環(huán)。
42.按照權(quán)利要求37至41的任一項(xiàng)的化合物，其中NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
43.權(quán)利要求37的化合物，其中A選自
44.權(quán)利要求37的化合物，其中A選自
45.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中m是1，n是1，p是0，從而A由下式表示
46.權(quán)利要求45的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
47.權(quán)利要求45或46的化合物，其中R8是H。
48.權(quán)利要求45或46的化合物，其中R8是甲基。
49.權(quán)利要求45至48的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中Rc和Rd是H。
50.權(quán)利要求45至48的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中Rc和Rd是甲基。
51.權(quán)利要求45至50的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基甲基或環(huán)丁基甲基，
或R6和R7與N一起形成吡咯烷基、哌啶基或氮雜環(huán)丁烷基環(huán)，
或R6和R8與它們相連接的原子一起形成哌啶基或吡咯烷基環(huán)。
52.權(quán)利要求45至51的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中NR6R7是NH2、NHMe、NHEt、NHPr、NH(iPr)、NH(環(huán)丙基甲基)、NH(環(huán)丁基甲基)、NMe2、NMeEt、NMePr、NMe(iPr)、NEt2、NEtPr或NEt(iPr)。
53.權(quán)利要求45至51的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中NR6R7選自下列結(jié)構(gòu)
54.權(quán)利要求45至51的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H或Me。
55.權(quán)利要求45的化合物，其中A選自
56.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中m是1，n是0，p是1，從而A由下式表示
57.權(quán)利要求56的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
58.權(quán)利要求56或57的化合物，其中R8是H。
59.權(quán)利要求56至58的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基、CH2-環(huán)丙基或CH2-環(huán)丁基。
60.權(quán)利要求56至59的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中NR6R7是NH2，NHMe，NHEt，NHPr，NH(iPr)，NHtBu，NH(CH2-環(huán)丙基)或NH(CH2-環(huán)丁基)。
61.權(quán)利要求56的化合物，其中A是
62.權(quán)利要求56的化合物，其中Ra和R8是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成5-6元雜環(huán)。
63.權(quán)利要求62的化合物，其中Rb和R6與它們相連接的原子一起形成吡咯烷基環(huán)。
64.權(quán)利要求62或63的化合物，其中R7是H。
65.權(quán)利要求54的化合物，其中A選自
66.權(quán)利要求1至30的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中m是0，n是0，且p是1，從而A由下式表示
67.權(quán)利要求66的化合物，其中A具有下列構(gòu)型
68.權(quán)利要求66的化合物，其中R8是H。
69.權(quán)利要求66至68的任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6和R7獨(dú)立地是H或Me。
70.權(quán)利要求69的化合物，其中A選自
71.權(quán)利要求69的化合物，其中A選自
72.權(quán)利要求1的化合物及其對映異構(gòu)體和鹽，所述化合物具有下式
其中
R1是H、Me、Et、CF3、CHF2或CH2F；
R2和R2a是H或F；
R5是H、Me、Et或CF3；
A是
其中
G是任選被一個(gè)至四個(gè)R9基團(tuán)取代的苯基；
R6和R7獨(dú)立地是H，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2)，(C3-C6環(huán)烷基)-(CH2CH2)，V-(CH2)0-1其中V是5-6元雜芳基，W-(CH2)1-2其中W是任選被F、Cl或Me取代的苯基，C3-C6-環(huán)烷基，羥基-(C3-C6-環(huán)烷基)，氟-(C3-C6-環(huán)烷基)，CH(CH3)CH(OH)苯基，或任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下列的基團(tuán)取代的C1-C6-烷基OH、O(C1-C6-烷基)、CN、F、NH2、NH(C1-C6-烷基)、N(C1-C6-烷基)2、哌啶基和吡咯烷基，
或R6和R7與它們相連接的氮一起形成4-6元雜環(huán)，該雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自O(shè)H、鹵素、氧代基團(tuán)、CF3、CH2CF3和(C1-C3)烷基的基團(tuán)取代；
Ra和Rb是H，
或Ra是H，且Rb和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
Rc和Rd是H或Me；
R8是H、Me或OH，
或R8和R6與它們相連接的原子一起形成具有一或兩個(gè)環(huán)氮原子的5-6元雜環(huán)；
每個(gè)R9獨(dú)立地是鹵素、C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、O-(C1-C6-烷基)、CF3、OCF3、S(C1-C6-烷基)、CN、CH2O-苯基、NH2、NH-(C1-C6-烷基)、N-(C1-C6-烷基)2、哌啶、吡咯烷、CH2F、CHF2、OCH2F、OCHF2、OH、SO2(C1-C6-烷基)、C(O)NH2、C(O)NH(C1-C6-烷基)和C(O)N(C1-C6-烷基)2；和
m、n和p獨(dú)立地是0或1。
73.權(quán)利要求1或72所定義的和實(shí)施例1-168中所命名的化合物。
74.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至73的任一項(xiàng)所要求的化合物。
75.治療哺乳動物中的AKT介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物給藥有效量的權(quán)利要求1至74的任一項(xiàng)所要求的化合物。
76.權(quán)利要求75的方法，其中所述疾病或病癥是炎癥、過度增生性疾病、心血管疾病、神經(jīng)變性疾病、婦科疾病或皮膚疾病。
77.抑制哺乳動物中AKT蛋白激酶產(chǎn)生的方法，該方法包括向所述哺乳動物給藥有效量的權(quán)利要求1至74的任一項(xiàng)所要求的化合物。
78.權(quán)利要求1至74的任一項(xiàng)所要求的化合物，其用作治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥中的藥物。
79.權(quán)利要求1至74的任一項(xiàng)所要求的化合物在制備藥物中的用途，該藥物用于治療AKT蛋白激酶介導(dǎo)的病癥。
80.用于治療AKT蛋白激酶所介導(dǎo)病癥的試劑盒，其中所述試劑盒包含
a)第一藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至74的任一項(xiàng)所要求的化合物；和
b)使用說明書。
81.權(quán)利要求80的試劑盒，進(jìn)一步包含(c)第二藥物組合物，其中第二藥物組合物包含第二化合物，所述第二化合物是AKT蛋白激酶抑制劑。
82.制備權(quán)利要求1的化合物的方法，所述方法包括
具有下式的化合物
與具有下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)
83.制備權(quán)利要求1或72的化合物的方法，所述方法包括
具有下式的化合物
與具有下式的化合物進(jìn)行反應(yīng)
全文摘要
本發(fā)明提供了式I的化合物，包括其互變異構(gòu)體、拆分的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、溶劑合物、代謝產(chǎn)物、鹽和可藥用前藥。本發(fā)明還提供了使用本發(fā)明化合物作為AKT蛋白激酶抑制劑和用于治療過度增生性疾病例如癌癥的方法。
文檔編號C07D239/70GK101631778SQ200780033054
公開日2010年1月20日 申請日期2007年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月6日
發(fā)明者伊恩·S·米切爾, 詹姆斯·F·布萊克, 睿 徐, 尼古拉斯·C·卡蘭, 校登明, 基思·L·斯潘塞, 約瑟夫·R·本克西克, 軍 梁, 布賴恩·薩費(fèi)納, 軍 李, 克里斯琴·沙博特, 伊萊·M·華萊士, 安娜·L·班卡, 斯帝芬·T·施拉克特 申請人:陣列生物制藥公司, 健泰科生物技術(shù)公司