專利名稱：有機化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機化合物、它們的制備和作為藥物的用途。
一方面，本發(fā)明提供了游離或鹽形式的式I化合物 其中Y是氮或氧；R1是氫或C1-C8-烷基；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、氰基、羥基、羧基、硝基、氨基羰基、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代，或R2是C1-C8-烷基或C1-C8-烷氧基，在每種情況下任選被羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C8-烷基磺酰氨基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代，或R2是C1-C8-烷基羰基、C3-C8-環(huán)烷基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基，或R1和R2一起形成C3-C8-環(huán)烷基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基；R3是氫、鹵代、氰基、羥基、硝基、羧基、氨基羰基、C1-C8-烷基、C1-C8-鏈烯基、C1-C8-炔基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-烷硫基、C3-C8-環(huán)烷基、C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基、羧基-C1-C8-烷氧基、-CO-NR6R7、-NH-SO2R8、-NH-COH或-SO2NH2，且R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、硝基、羧基、氨基羰基、C1-C8-烷基、C1-C8-鏈烯基、C1-C8-炔基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-烷硫基、C1-C8-烷氧基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C8-環(huán)烷基、C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基、C3-C8-環(huán)烷氧基、-CO-NR6R7、-NH-SO2R8、-NH-COH或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基；且R6、R7和R8獨立地是氫或C1-C8-烷基。
說明書中使用的術(shù)語具有下列含義“任選取代”是指提及的基團可以被所述基團中的任何一個或任意組合在一個或多個位置上取代。
“C1-C8-烷基”當用于本文中時表示含有1至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基。優(yōu)選的C1-C8-烷基是C1-C4-烷基。
“C2-C8-鏈烯基”當用于本文中時表示包含2至8個碳原子和一個或多個碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈烴鏈。優(yōu)選的“C2-C8-鏈烯基”是“C2-C4-鏈烯基”。
“C2-C8-炔基”當用于本文中時表示包含2至8個碳原子和一個或多個碳-碳三鍵的直鏈或支鏈烴鏈。優(yōu)選的“C2-C8-炔基”是“C2-C4-炔基”。
“C3-C8-環(huán)烷基”當用于本文中時可為例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、甲基環(huán)戊基、環(huán)己基、甲基環(huán)己基、二甲基環(huán)己基、環(huán)庚基、二環(huán)庚基、環(huán)辛基和二環(huán)辛基。優(yōu)選的“C3-C8-環(huán)烷基”是“C3-C6-環(huán)烷基”。
“C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基”當用于本文中時表示被上文定義的C3-C8-環(huán)烷基取代的上文定義的C1-C8-烷基。優(yōu)選的“C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基”是“C3-C6-環(huán)烷基-C1-C4-烷基”。
“C3-C15-碳環(huán)基”當用于本文中時表示含有3至15個環(huán)碳原子的碳環(huán)基，例如芳族或非芳族單環(huán)基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基或苯基，它可以被一個或多個、通常是一個或兩個C1-C4-烷基取代，或者二環(huán)基，例如二環(huán)辛基、包括茚滿基和茚基的二環(huán)壬基和包括萘基的二環(huán)癸基，它們中的任何一個都可以被一個或多個、通常是一個或兩個C1-C4-烷基取代。優(yōu)選的C3-C15-碳環(huán)基是C5-C10-碳環(huán)基，例如苯基或萘基。
“C3-C8-環(huán)烷氧基”當用于本文中時表示與氧基連接的上文定義的C3-C8-環(huán)烷基。優(yōu)選的“C3-C8-環(huán)烷氧基”是“C3-C6-環(huán)烷氧基”。
“C1-C8-鹵代烷基”當用于本文中時表示被一個或多個鹵原子、優(yōu)選一個、兩個或三個鹵原子取代的上文定義的C1-C8-烷基。優(yōu)選的“C1-C8-鹵代烷基”是“C1-C4-鹵代烷基”。
“C1-C8-烷基羰基”當用于本文中時表示與羰基連接的上文定義的C1-C8-烷基。優(yōu)選的“C1-C8-烷基羰基”是“C1-C4-烷基羰基”。
“C1-C8-烷硫基”當用于本文中時表示與-S-連接的上文定義的C1-C8-烷基。優(yōu)選的“C1-C8-烷硫基”是“C1-C4-烷硫基”。
“C1-C8-烷基磺酰氨基”當用于本文中時表示與-SO2-NH-連接的上文定義的C1-C8-烷基。優(yōu)選的“C1-C8-烷基磺酰氨基”是“C1-C4-烷基磺酰氨基”。
“C1-C8-烷氧基”當用于本文中時表示含有1至8個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。優(yōu)選的C1-C8-烷氧基是C1-C4-烷氧基。
“C1-C8-鹵代烷氧基”當用于本文中時表示被一個或多個鹵原子、優(yōu)選一個、兩個或三個鹵原子取代的上文定義的C1-C8-烷氧基。優(yōu)選的“C1-C8-鹵代烷氧基”是“C1-C4-鹵代烷氧基”。
“羧基-C1-C8-烷氧基”當用于本文中時表示被一個或多個羧基、優(yōu)選一個或兩個羧基取代的上文定義的C1-C8-烷氧基。優(yōu)選的“羧基-C1-C8-烷氧基”是“羧基-C1-C4-烷氧基”。
“鹵代”或“鹵素”當用于本文中時表示屬于元素周期表第17族(第VII主族)的元素，它可為例如氟、氯、溴或碘。優(yōu)選的鹵代或鹵素是氯或溴。
“氨基羰基”當用于本文中時表示通過氮原子與羰基連接的氨基。
“包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基”當用于本文中時可為例如吡咯、吡咯烷、吡唑、咪唑、三唑、四唑、噻二唑、異噻唑、噁二唑、吡啶、噁唑、異噁唑、吡嗪、噠嗪、嘧啶、哌嗪、嗎啉代、三嗪、噁嗪或噻唑。該雜環(huán)基團優(yōu)選是芳族的，可以是未取代的或取代的。優(yōu)選的取代基包括鹵代、氰基、羥基、羧基、硝基、酰氨基、C1-C8-烷基和任選被氨基羰基取代的C1-C8-烷氧基。
在說明書和下列權(quán)利要求書通篇中，除非上下文另外需要，術(shù)語“包含或其變型將被理解為表示包含指定的整數(shù)或步驟或整數(shù)或步驟的集合，但不排除任何其它整數(shù)或步驟或整數(shù)和步驟的集合。
在本發(fā)明的第一方面，優(yōu)選的化合物包括游離或鹽形式的式I化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；且R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C8-烷氧基或-CO-NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
特別優(yōu)選的化合物包括游離或鹽形式的式I化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C10-碳環(huán)基，優(yōu)選苯基或萘基，任選被鹵代、C1-C4-烷基或被C1-C4-烷氧基取代，C1-C4-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；和R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C4-烷氧基或-CO-NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
在本發(fā)明的第二方面，優(yōu)選的化合物包括游離或鹽形式的式I化合物，
其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；且R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
特別優(yōu)選的化合物包括游離或鹽形式的式I化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C10-碳環(huán)基，優(yōu)選苯基或萘基，任選被鹵代、C1-C4-烷基或被C1-C4-烷氧基取代，C1-C4-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；和R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
式I代表的化合物可以形成酸加成鹽，特別是藥學可接受的酸加成鹽。式I化合物的藥學可接受的酸加成鹽包括無機酸鹽，例如氫鹵酸如氫氟酸、鹽酸、氫溴酸或氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸的鹽；和有機酸鹽，例如脂肪族一元羧酸如甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸和丁酸、脂肪族羥酸如乳酸、檸檬酸、酒石酸或蘋果酸、二元羧酸如馬來酸或琥珀酸、芳香羧酸如苯甲酸、對氯苯甲酸、二苯乙酸或三苯乙酸、芳香羥酸如鄰羥基苯甲酸、對羥基苯甲酸、1-羥基萘-2-羧酸或3-羥基-萘-2-羧酸和磺酸如甲磺酸或苯磺酸的鹽。這些鹽可由式I化合物通過已知的成鹽方法制備。
包含酸性基團例如羧基的式I化合物也能夠與堿尤其是藥學可接受的堿形成鹽，例如本領(lǐng)域公知的那些；合適的這類鹽包括金屬鹽，尤其是堿金屬或堿土金屬鹽，如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，或與氨或藥學可接受的有機胺或雜環(huán)堿如乙醇胺、芐胺或吡啶形成的鹽。這些鹽可由式I化合物通過已知的成鹽方法制備。
具體的特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是下文實施例中描述的那些。
本發(fā)明也提供了制備式I化合物的方法，包括(i)(A)為制備其中Y是氮的式I化合物，使各自任選為受保護形式的式IIa或IIb化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、R4和R5如上文定義，必要時脫保護；或(B)為制備其中Y是氧的式I化合物，使任選為受保護形式的式IIc化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、R4和R5如上文定義，必要時脫保護；和(ii)回收游離或鹽形式的產(chǎn)物。
使用環(huán)化鄰氨基苯基硫脲以形成苯并咪唑的已知方法或類似于下文實施例中所述的方法，可進行方法變體(A)。反應(yīng)適宜地在有機溶劑例如乙醇中、在偶聯(lián)劑例如1-(-3-二甲氨基-丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)存在下進行。反應(yīng)在升高的溫度、例如70℃至120℃但適宜地在約80℃或回流溫度下進行。
使用環(huán)化鄰羥基苯基硫脲以形成苯并噁唑的已知方法或類似于下文實施例中所述的方法，可進行方法變體(B)。反應(yīng)適宜地在有機溶劑例如乙醇中、在偶聯(lián)劑例如EDCI存在下進行。反應(yīng)在升高的溫度下、例如70℃至120℃但適宜地在約80℃或回流溫度下進行。
式IIa或IIb化合物可通過分別使式IIIa或IIIb化合物 其中R1、R3、R4和R5如上文定義，與式IV化合物反應(yīng)來制備，S＝C＝N-R2IV使用將芳族二胺與硫代異氰酸酯縮合的已知方法或類似于下文實施例中所述的方法進行。反應(yīng)適宜地在有機溶劑、例如乙醇中進行。合適的反應(yīng)溫度是10℃至40℃，例如室溫。
式IIc化合物可通過使式IIIc化合物 其中R1、R3、R4和R5如上文定義，與式IV化合物反應(yīng)來制備，使用將芳族氨基酚與硫代異氰酸酯縮合的已知方法或類似于下文實施例中所述的方法進行。反應(yīng)適宜地在有機溶劑、例如乙醇中進行。合適的反應(yīng)溫度是10℃至40℃，例如室溫。
式IIIa或IIIb化合物是已知的或可通過使相應(yīng)的硝基苯胺與合適的還原劑反應(yīng)而制備。
式IIIc化合物是已知的或可通過已知方法制備，例如通過使相應(yīng)的硝基苯胺與合適的還原劑反應(yīng)。
式IV化合物是已知的或可通過已知方法制備。
在本文中提及受保護的官能團或保護基時，可根據(jù)官能團的性質(zhì)選擇保護基，例如如Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，John Wiley & Sons Inc，第3版，1999中所述，該參考文獻也描述了適合于用氫替代保護基的方法。
游離形式的式I化合物可以以常規(guī)方式轉(zhuǎn)化為鹽形式，反之亦然。游離或鹽形式的化合物可以以水合物或包含用于結(jié)晶的溶劑的溶劑化物形式獲得。式I化合物可以從反應(yīng)混合物中回收得到，并以常規(guī)方式純化。異構(gòu)體、例如對映異構(gòu)體，可以以常規(guī)方式獲得，例如通過分步結(jié)晶或從相應(yīng)的不對稱取代的、例如光學活性的原料不對稱合成。
游離或藥學可接受鹽形式的式I化合物，下文作為替代稱作本發(fā)明的活性劑，可用作藥物。相應(yīng)地，本發(fā)明也提供了用作藥物的游離或藥學可接受鹽形式的式I化合物。本發(fā)明的活性劑作為CXCR2受體拮抗劑，從而抑制炎性細胞、尤其是嗜中性粒細胞、單核細胞和CD8+T細胞以及參與慢性阻塞性肺病(COPD)的介質(zhì)的浸潤和激活。因此，本發(fā)明的活性劑因此提供癥狀緩解并減慢了疾病進程。
COPD個體的氣道顯示炎性應(yīng)答，它主要是嗜中性的。當氣道暴露于香煙煙云中時，巨噬細胞、CD8+T細胞和上皮細胞被激活，釋放促炎介質(zhì)、氧化劑、細胞因子和嗜中性粒細胞趨化因子、IL-8、GROα、ENA-78和白三烯。IL-8、GROα和ENA-78是嗜中性粒細胞的選擇性化學引誘物。在人嗜中性粒細胞中，IL-8與兩個具有類似親和力的不同受體CXCR1和CXCR2結(jié)合。密切相關(guān)的趨化因子、包括GROα、β、γ、NAP-2和ENA-78只與CXCR2結(jié)合。因此，抑制嗜中性粒細胞的補充是治療多種肺病的公認的治療策略。阻斷IL-8、GROα和ENA-78與趨化因子受體CXCR2的結(jié)合可以通過抑制關(guān)鍵炎癥細胞的浸潤和激活而在COPD患者中提供有益效果，從而減少繼發(fā)的組織損傷、粘液分泌、氣流梗阻和疾病進程。
本發(fā)明活性劑的IL-8和GROα趨化因子抑制性質(zhì)可以在下列試驗中證明受體結(jié)合測定[125I]IL-8(人重組體)得自Amersham Pharmacia Biotech，比活度為2000Ci/mmol。所有其它化學試劑均為分析級。在中國倉鼠卵巢細胞(CHO-K1)中表達的人重組CXCR2受體購自Euroscreen。中國倉鼠卵巢膜是根據(jù)Euroscreen提供的方案制備。使用Bio-Rad蛋白測定法測定膜蛋白濃度。根據(jù)White等人在J Biol Chem.，1998，273，10095中描述的方法在96孔微量培養(yǎng)板中進行測定。每一反應(yīng)混合物包含在pH 8.0的20mMBis-Tris-丙烷中的0.05mg/ml CXCR2膜蛋白，20mM Bis-Tris-丙烷包含1.2mM MgSO4、0.1mM EDTA、25mM NaCl和0.03％CHAPS。另外，加入有關(guān)化合物，該化合物已經(jīng)預先溶于二甲亞砜(DMSO)，以達到10μM至0.0005μM的終濃度(DMSO的終濃度為2％(v/v))。通過加入0.02nM125I-IL-8啟動結(jié)合。室溫2小時后，使用BrandellTM96-孔收獲器，將微量培養(yǎng)板收獲至用1％聚乙烯亞胺+0.5％BSA封閉并用25mM NaCl、10mMTrisHCl、1mM MgSO4、0.5mM EDTA、0.03％CHAPS、pH 7.4洗滌3次的玻璃纖維濾板上。濾液在50℃干燥過夜。然后將Backseal應(yīng)用于板，并加入50μl液體閃爍液。然后在Packard TopcountTM閃爍計數(shù)器上測量計數(shù)。
使用SPA技術(shù)的人CXCR2受體的[35S]-GTPγS結(jié)合測定[35S]-GTPγS(比活度1082Ci/mmol)和麥胚凝集素聚乙烯甲苯閃爍近似珠粒購自Amersham Pharmacia Biotech。表達人CXCR2受體的中國倉鼠卵巢細胞(CHO-K1)膜購自Biosignal Packard Inc。所有其它化學試劑均為分析級。從Packard獲得白色無結(jié)合表面的96孔OptiplateTM微量培養(yǎng)板。如先前所述(Lindley I等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，1988，85(23)9199)，合成重組人IL-8、克隆并在大腸埃希桿菌表達。
在96孔OptiplateTM微量培養(yǎng)板中，以每孔250μl的終體積進行測試，一式兩份?；衔锵♂屧贒MSO(0.5％終濃度)中，在pH 7.4的20mMHEPES緩沖液中培養(yǎng)，該緩沖液包含10mM MgCl2、100mM NaCl、1mMEDTA加100nM IL-8、50μM GDP和500pM[35S]GTPγS每孔。SPA珠粒(1mg/孔的終濃度)與膜(10μg/孔的終濃度)在試驗緩沖液中預先混和，試驗緩沖液是pH 7.4的20mM HEPES緩沖液，包含10mM MgCl2、100mMNaCl、1mM EDTA。然后將珠粒膜混合物加到每孔中，密封培養(yǎng)板，室溫培養(yǎng)60分鐘。然后將板離心，立即在Packard TopCountTM閃爍計數(shù)器上讀數(shù)，程序[35S dpm]運行1min/孔。數(shù)據(jù)表示成對于100nM IL-8負基線(minus basal)的響應(yīng)％。
趨化性測定在嗜中性粒細胞趨化性測定中測定這些化合物的體外抑制性質(zhì)。根據(jù)先前公開的方法(Frevert C W等人，J Imnounolog.Methods，1998，213，41)，在96孔板中進行測定。從Neuro Probe獲得96孔趨化性室5μm，從Invitrogen Paisley，UK獲得所有細胞緩沖液，葡聚糖-T500和Ficoll-PaquePlusTM密度梯度離心介質(zhì)購自Pharmacia Biotech Buckinghamshire，UK。鈣黃綠素-AM染料得自Molecular Probes。如先前所述(Haslett，C.等人，Am J Path.，1985，119101)分離嗜中性粒細胞。含檸檬酸鹽的全血與4％(w/v)葡聚糖-T500混和，在冰上保持30分鐘除去紅細胞。通過在15mlFicoll-Paque PLUS密度梯度上分層15ml細胞懸液，從外周血單核細胞中分離粒細胞(PMN)，并以250×g離心25分鐘。離心后，使用10ml冰冷的不含內(nèi)毒素的無菌水進行低滲休克溶胞50秒鐘，除去PMN片狀沉淀物的任何紅細胞污染物，并用10ml冷2×磷酸鹽緩沖鹽水中和。然后，用總體積1ml的熒光染料鈣黃綠素-AM(5μg)標記分離的嗜中性粒細胞(1×107)，并在37℃培養(yǎng)30分鐘。用不含酚紅的RPMI+0.1％牛血清白蛋白洗滌標記的細胞，在使用之前，對細胞計數(shù)，并調(diào)節(jié)至5×106細胞/ml的終濃度。然后將標記的嗜中性粒細胞與稀釋于DMSO(0.1％終濃度)中的試驗化合物(0.001-1000nM)混和，室溫培養(yǎng)10分鐘。將濃度0.1-5nM的化學引誘物(29μl)置于96孔趨化室的底室中。將聚碳酸酯濾器(5μm)覆蓋在培養(yǎng)板上，將細胞(25μl)裝載在頂部濾器上。，任細胞在37℃、在含5％CO2的潮濕的培養(yǎng)箱內(nèi)遷移90分鐘。培養(yǎng)結(jié)束時，使用多孔熒光板讀數(shù)器(Fluroskan IITM，Labsystems)在485nm激發(fā)和538nm發(fā)射條件下對移行細胞進行定量。每種化合物使用4種不同供體試驗4次。將陽性對照細胞即未用化合物處理過的細胞加到底孔內(nèi)。這些代表了細胞的最大趨化響應(yīng)。將陰性對照細胞即未經(jīng)化學引誘物刺激的那些細胞加到底室內(nèi)。陽性對照和陰性對照之間的差異代表了細胞的趨化活性。
本文以下的實施例化合物在以上試驗中通常具有低于2μM的IC50值。例如，實施例2和3的化合物分別具有0.322和0.137μM的IC50值。
考慮到它們抑制CXCR2的結(jié)合，本發(fā)明的活性劑可用于治療由CXCR2介導的病癥，例如炎性或過敏性病癥，尤其是慢性阻塞性肺氣道或肺病(COPD、COAD或COLD)，包括慢性支氣管炎或與其相關(guān)的呼吸困難、肺氣腫和嚴重的哮喘。本發(fā)明的治療可為對癥的或預防性的。
在治療慢性支氣管炎或COPD中的預防效力將通過發(fā)病頻率或嚴重性減少來證明，將提供癥狀的緩解并減慢疾病進程、改善肺功能。這可進一步由以下證明對其它對癥治療的需要減少，即用于或意欲限制或當癥狀發(fā)生時中止癥狀發(fā)作的治療，例如抗炎藥(例如皮質(zhì)類固醇)或支氣管擴張藥。
本發(fā)明可適用的其他炎性或阻塞性氣道疾病和病癥包括急性肺損傷(ALI)、急性/成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、特發(fā)性肺纖維變性、纖維性肺、氣道高反應(yīng)性、呼吸困難、肺纖維變性、過敏性氣道炎癥、小氣道疾病、肺癌、鐮狀細胞病和肺動脈高血壓患者的急性胸部綜合征，和激發(fā)于其他藥物治療、尤其是其他吸入性藥物治療的氣道高反應(yīng)性惡化。本發(fā)明也可應(yīng)用于治療任何類型或起源的支氣管炎，包括例如急性、花生仁吸入性、卡他性、croupus、慢性或結(jié)核性支氣管炎。本發(fā)明可適用的其他炎性或阻塞性氣道疾病包括任何類型或起源的肺塵病(一種炎性的、通常職業(yè)性的肺病，時常伴隨著氣道阻塞，無論是慢性或急性的，由反復吸入粉塵引起)，包括例如礬土肺、炭肺、石棉沉著病、石末沉著病、駝鳥毛塵肺、肺鐵末沉著癥、矽肺、煙塵肺和棉塵肺。
本發(fā)明的活性劑也可用于治療呼吸系統(tǒng)病毒感染，該病毒感染加劇了潛在的慢性病癥，例如哮喘、慢性支氣管炎、COPD、中耳炎和鼻竇炎。所治療的呼吸系統(tǒng)病毒感染可以與繼發(fā)的細菌感染如中耳炎、鼻竇炎或肺炎相關(guān)。
本發(fā)明的活性劑也可用于治療皮膚炎性病癥，例如銀屑病、特應(yīng)性皮炎、紅斑狼瘡和其他皮膚的炎性或過敏性病癥。
本發(fā)明的活性劑也可用于治療其他疾病或病癥，尤其是具有炎性成分的疾病或病癥，例如影響鼻部的疾病，包括過敏性鼻炎，例如萎縮性、慢性或季節(jié)性鼻炎，胃腸道的炎性病癥，例如炎性腸病如潰瘍性結(jié)腸炎和局限性回腸炎，骨和關(guān)節(jié)疾病，包括類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎，和其他疾病如動脈粥樣硬化、多發(fā)性硬化，和例如心、腎、肝、肺或骨髓移植之后的急性和慢性同種異體移植物排斥。
本發(fā)明的活性劑也可用于治療內(nèi)毒素性休克、腎小球腎炎、腦和心肌缺血、阿耳茨海默病、囊性纖維化、病毒感染和與它們相關(guān)的惡化、獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、多發(fā)性硬化癥(MS)、幽門螺旋桿菌相關(guān)性胃炎和癌癥，尤其是卵巢癌的生長。
本發(fā)明的活性劑也可用于在人中治療由病毒感染引起的癥狀，這些癥狀由人鼻病毒、其他腸道病毒、冠形病毒、皰疹病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸系統(tǒng)合胞病毒或腺病毒引起。
本發(fā)明活性劑在抑制炎癥例如炎性氣道疾病中的效果，可在動物模型中證明，例如氣道炎性病癥或其他炎癥的小鼠、大鼠或兔模型，例如Wada等人，J.Exp.Med(1994)1801135-40；Sekido等人，Nature(1993)365654-57；Modelska等人，Am.J.Respir.Crit.Care.Med(1999)1601450-56；和Laffon等人(1999)Am.J.Respir.Crit.Care Med.1601443-49中所述。
本發(fā)明的活性劑也可用作共同治療劑用于與其他藥物物質(zhì)如抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥物聯(lián)合，尤其用于治療阻塞性或炎性氣道疾病，例如上文提及的那些，例如作為這些藥物治療活性的增效劑或作為降低這些藥物的所需劑量或潛在副作用的手段。本發(fā)明的活性劑可與其他藥物物質(zhì)在固定藥物組合物中混合，或者它可單獨、在其他藥物物質(zhì)之前、同時或之后給藥。相應(yīng)地，本發(fā)明包括上文描述的本發(fā)明活性劑與抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥物物質(zhì)的組合，所述本發(fā)明的活性劑和所述藥物物質(zhì)在相同或不同的藥物組合物中。
合適的抗炎藥物包括類固醇，尤其是糖皮質(zhì)類固醇，如布地縮松、倍氯米松雙丙酸酯、丙酸氟地松、環(huán)縮松或糠酸莫米他松，或描述于WO02/88167、WO 02/12266、WO 02/100879、WO 02/00679(尤其是實施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和101中的那些)、WO 03/35668、WO 03/48181、WO 03/62259、WO 03/64445、WO 03/72592、WO 04/39827和WO 04/66920中的類固醇；非甾類糖皮質(zhì)激素受體激動劑，例如描述于DE 10261874、WO 00/00531、WO 02/10143、WO 03/82280、WO 03/82787、WO 03/86294、WO 03/104195、WO03/101932、WO 04/05229、WO 04/18429、WO 04/19935和WO 04/26248中的那些；LTD4拮抗劑，例如孟魯司特和扎魯司特；PDE4抑制劑，例如西洛司特(cilomilast)(ArifloGlaxoSmithKline)、羅氟司特(roflumilast)(Byk Gulden)、V-11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、阿羅茶堿(arofylline)(AlmirallProdesfarma)、PD189659/PD168787(Parke-Davis)、AWD-12-281(AstaMedica)、CDC-801(Celgene)、SelCID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(Kyowa HakkoKogyo)，和描述于以下的那些WO 92/19594、WO 93/19749、WO 93/19750、WO 93/19751、WO 98/18796、WO 99/16766、WO 01/13953、WO 03/104204、WO 03/104205、WO 03/39544、WO 04/000814、WO 04/000839、WO04/005258、WO 04/018450、WO 04/018451、WO 04/018457、WO 04/018465、WO 04/018431、WO 04/018449、WO 04/018450、WO 04/018451、WO04/018457、WO 04/018465、WO 04/019944、WO 04/019945、WO 04/045607和WO 04/037805；A2A激動劑，例如描述于以下的那些EP 1052264、EP1241176、EP 409595A2、WO 94/17090、WO 96/02543、WO 96/02553、WO 98/28319、WO 99/24449、WO 99/24450、WO 99/24451、WO 99/38877、WO 99/41267、WO 99/67263、WO 99/67264、WO 99/67265、WO 99/67266、WO 00/23457、WO 00/77018、WO 00/78774、WO 01/23399、WO 01/27130、WO 01/27131、WO 01/60835、WO 01/94368、WO 02/00676、WO 02/22630、WO 02/96462和WO 03/086408；和A2B拮抗劑，例如描述于WO 02/42298中的那些。
合適的支氣管擴張藥包括抗膽堿能藥或抗毒蕈堿劑，尤其是異丙托溴銨、溴乙東莨菪堿、tiotropium鹽和CHF 42269(Chiesi)，和格隆溴銨，還有描述于EP 424021、US 3714357、US 5171744、WO 01/04118、WO02/00652、WO 02/51841、WO 02/53564、WO 03/00840、WO 03/33495、WO 03/53966、WO 03/87094、WO 04/018422和WO 04/05285中的那些；和β-2腎上腺素受體激動劑，例如沙丁胺醇(salbutamol)、硫酸奧西那林、特布他林、沙美特羅、非諾特羅、丙卡特羅，尤其是福莫特羅、卡莫昔羅(carmoterol)及其藥學可接受的鹽，和WO 00/75114的式I化合物(游離或鹽或溶劑化物形式)，該文獻引入本文作為參考，尤其是其實施例中的化合物，特別下式化合物 及其藥學可接受的鹽，以及WO 04/16601的式I化合物(游離或鹽或溶劑化物形式)，還有EP 1440966、JP 05025045、WO 93/18007、WO 99/64035、US 2002/0055651、WO 01/42193、WO 01/83462、WO 02/66422、WO02/70490、WO 02/76933、WO 03/24439、WO 03/42160、WO 03/42164、WO 03/72539、WO 03/91204、WO 03/99764、WO 04/16578、WO 04/22547、WO 04/32921、WO 04/33412、WO 04/37768、WO 04/37773、WO 04/37807、WO 04/39762、WO 04/39766、WO 04/45618、WO 04/46083和WO 04/80964中的化合物。
這些抗組胺藥物物質(zhì)包括鹽酸西替立嗪、撲熱息痛、富馬酸氯苯芐咯、異丙嗪、氯雷他啶、desloratidine、苯海拉明和鹽酸非索那丁。
也可使用本發(fā)明的活性劑和抗膽堿能或抗毒蕈堿劑、類固醇、β-2激動劑、PDE4抑制劑、多巴胺受體激動劑、LTD4拮抗劑或LTB4拮抗劑的聯(lián)合。本發(fā)明的活性劑與抗炎藥的其他有用的聯(lián)合是與其他趨化因子受體拮抗劑的聯(lián)合，例如CCR-1、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5，尤其是CCR-5拮抗劑，例如Schering-Plough拮抗劑SC-351125、SCH-55700和SCH-D，Takeda拮抗劑如N-[[4-[[[6，7-二氫-2-(4-甲基苯基)-5H-苯并環(huán)庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]-四氫-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-氯化銨(TAK-770)，描述于US 6166037(尤其是權(quán)利要求18和19)、WO 0066558(尤其是權(quán)利要求8)和WO 0066559(尤其是權(quán)利要求9)中的CCR-5拮抗劑。
根據(jù)以上所述，本發(fā)明也提供了治療由CXCR2介導的病癥的方法，例如炎性或過敏性病癥，尤其是炎性或阻塞性氣道疾病，該方法包括給予有需求的個體、尤其是人類個體有效量的上文所述的游離或藥學可接受鹽形式的式I化合物。另一方面，本發(fā)明提供了如上文所述的游離或藥學可接受鹽形式的式I化合物在制備用于治療由CXCR2介導的病癥、例如炎性或過敏性病癥、尤其是炎性或阻塞性氣道疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明的活性劑可通過任何合適的途徑給藥，例如口服給藥，例如以片劑或膠囊的形式；胃腸外給藥，例如靜脈內(nèi)；通過吸入給藥，例如在炎性或阻塞性氣道疾病的治療中；鼻內(nèi)給藥，例如在過敏性鼻炎的治療中；皮膚局部給藥，例如在特應(yīng)性皮炎的治療中；或直腸給藥，例如在炎性腸病的治療中。
另一方面，本發(fā)明也提供了藥物組合物，包含作為活性成分的游離或藥學可接受鹽形式的式I化合物，任選連同藥學可接受的稀釋劑或載體。該組合物可包含共同治療劑，例如上文所述的抗炎性支氣管擴張藥或抗組胺藥。這類組合物可使用常規(guī)的稀釋劑或賦形劑和制劑領(lǐng)域已知的技術(shù)制備。因此，口服劑型可包括片劑和膠囊。用于局部給藥的劑型可采用乳膏、軟膏、凝膠劑或經(jīng)皮遞送系統(tǒng)例如貼劑的形式。吸入組合物可包括氣霧劑或其他可霧化的制劑或干粉制劑。
當該組合物包含氣霧劑制劑時，其優(yōu)選包含例如氫-氟-烷烴(HFA)拋射劑，如HFA134a或HFA227或它們的混合物，且可包含一種或多種本領(lǐng)域已知的共溶劑，如乙醇(至多20％重量)，和/或一種或多種表面活性劑，如油酸或失水山梨醇三油酸酯，和/或一種或多種填充劑，如乳糖。當該組合物包含干粉制劑時，其優(yōu)選包含例如粒徑至多10微米的式I化合物，任選連同所需粒徑分布的稀釋劑或載體如乳糖，和有助于對抗由于潮濕造成的產(chǎn)品性能變質(zhì)的化合物，如硬脂酸鎂。當該組合物包含霧狀制劑時，其優(yōu)選包含例如溶解或懸浮于載體中的式I化合物，該載體包含水、共溶劑如乙醇或丙二醇和穩(wěn)定劑，其可為表面活性劑。
本發(fā)明包括(A)可吸入形式的本發(fā)明活性劑，例如氣霧劑或其他可霧化的組合物或吸入性微粒，例如微粉形式，(B)包含吸入形式的本發(fā)明活性劑的吸入性藥物；(C)包含吸入形式的本發(fā)明活性劑連同吸入裝置的藥學產(chǎn)品；和(D)包含吸入形式的本發(fā)明活性劑的吸入裝置。
用于實施本發(fā)明的本發(fā)明活性劑的劑量將根據(jù)例如所治療的具體病癥、所需效果和給藥模式而異。通常，吸入給藥合適的日劑量等級是0.01至1mg/kg每天，而用于口服給藥合適的日劑量等級是0.005至100mg/kg總體重。每日胃腸外給藥劑量是約0.001至約80mg/kg總體重。每日局部給藥劑量優(yōu)選0.1mg至150mg，每日給藥1至4次，優(yōu)選2或3次。
通過下列實施例舉例說明本發(fā)明。
實施例特別優(yōu)選的式I化合物也是式V化合物 其中Y、R2、R3和R4如下表1中所示，制備方法在下文描述。所有化合物均為游離形式。該表也顯示了特征質(zhì)譜數(shù)據(jù)。
表1
特別優(yōu)選的式I化合物顯示在下表2中，制備方法在下文描述。所有化合物均為游離形式，實施例30除外，它是三氟乙酸鹽。該表也顯示了特征質(zhì)譜數(shù)據(jù)。
表2

制備起始化合物2-甲氧基-6-硝基苯胺將碘化四丁基銨(400mg)、氫氧化鈉(含4g的水溶液，40ml)和碘代甲烷(3.4ml)加到2-氨基-3-硝基苯酚(4g)的四氫呋喃(THF，80ml)溶液中，在室溫攪拌該混合物過夜。然后真空濃縮該混合物，加入鹽水(200ml)和乙酸乙酯(200ml)。用乙酸乙酯再次萃取水層，用飽和碳酸氫鈉水溶液然后用鹽水洗滌合并的有機層，并干燥(MgSO4)。過濾，然后真空濃縮，得到標題化合物，為褐色固體。MS(AP+)168。
4-溴-2-甲氧基-6-硝基-苯胺將乙酸鈉(3.37g)和溴(1.3ml)加到2-甲氧基-6-硝基苯胺(4.16g)的乙酸(50ml)溶液中。20分鐘后，濾出生成的沉淀，用水洗滌，真空干燥，得到標題化合物，為橙色固體。M.p.137-8℃。MS(AP+)247。
4-氨基-3-甲氧基-5-硝基芐腈將氰化銅(I)(2.22g)加到4-溴-2-甲氧基-6-硝基-苯胺(2.04g)的DMF/吡啶(7ml/1ml)溶液中，在160℃加熱混合物6小時。冷卻后，用乙酸乙酯稀釋該混合物，通過CeliteTM過濾材料襯墊。用水洗滌濾液，用乙酸乙酯再次萃取水層。用稀鹽水然后用飽和鹽水洗滌合并的有機萃取物，干燥(MgSO4)。過濾，并真空濃縮，然后在柱色譜上用30-50％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標題化合物，為黃色固體。MS(AP+)193。
3，4-二氨基-5-甲氧基-芐腈在15分鐘內(nèi)將濃HCl(7ml)滴加到4-氨基-3-甲氧基-5-硝基芐腈(1.05g)和氯化錫(II)粉末(2.13g)在乙醇(40ml)中的混合物中。將混合物加熱到40℃，引起顏色從橙色變?yōu)榫G色到無色，然后在室溫攪拌1.5小時?；旌衔锝?jīng)CeliteTM過濾材料過濾，用甲醇洗滌，然后真空濃縮濾液。用飽和碳酸氫鈉水溶液使水層呈堿性，加入二氯甲烷(DCM)。然后將混合物經(jīng)CeliteTM過濾物質(zhì)過濾，用DCM再次萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機萃取物，干燥(MgSO4)，過濾，真空干燥，得到標題化合物，為淡黃色固體。MS(AP+)163。
制備最終化合物實施例12-(2-溴苯基氨基)-7-羥基-1H-苯并咪唑-5-腈(a)2-(2-溴苯基氨基)-7-甲氧基-1H-苯并咪唑-5-腈將異硫氰酸2-溴苯基酯(487μl)加到3，4-二氨基-5-甲氧基-芐腈(590mg)的乙醇(35ml)溶液中。在室溫攪拌混合物19小時后，形成沉淀。將DCM(30ml)加到該混合物中，然后加入1-(-3-二甲氨基-丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI，832mg)，將該混合物加熱到80℃達6小時。此后，加入更多的EDCI(300mg)，持續(xù)加熱1小時。冷卻后，真空濃縮反應(yīng)混合物，使殘余物在DCM和水之間分配。用鹽水洗滌有機相，然后干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過柱色譜完成純化，用25-30％乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到所需產(chǎn)物。MS(AP+)343。
(b)2-(2-溴苯基氨基)-7-羥基-1H-苯并咪唑-5-腈將2-(2-溴苯基氨基)-7-甲氧基-1H-苯并咪唑-5-腈(82mg)溶于含碘化鋰(64mg)的2，4，6-三甲基吡啶(4ml)中，將該混合物在180℃加熱6小時。此間形成沉淀。過濾沉淀，用水洗滌，得到標題化合物。MS(AP+)329。
實施例22-(2，3-二氯-苯基氨基)-7-羥基-1H-苯并咪唑-5-腈(a)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-7-甲氧基-1H-苯并咪唑-5-腈將3，4-二氨基-5-甲氧基-芐腈溶液溶于乙醇(30ml)中，用異硫氰酸2，3-二氯苯基酯(1.24g)處理。在室溫攪拌該混懸液過夜。過濾除去所得固體，用乙醚研磨，干燥，得到硫脲中間體(1.56g)，為米色固體。將該中間體(1.47g)和EDCI(0.92g)的混合物在乙醇(25ml)中回流3小時。濃縮反應(yīng)混合物成固體，并用50％水/甲醇(100ml)研磨，過濾，干燥后，得到2-(2，3-二氯-苯基-氨基)-7-甲氧基-1H-苯并咪唑-5-腈，為米色固體。M.P.291℃分解。M.S.(AP+)333。
(b)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-7-羥基-1H-苯并咪唑-5-腈將2-(2，3-二氯-苯基氨基)-7-甲氧基-1H-苯并咪唑-5-腈(492mg)溶于2，4，6-三甲基吡啶(10ml)中，與碘化鋰(176mg)在180℃加熱3小時。冷卻反應(yīng)混合物，用水(15ml)處理，用乙酸乙酯洗滌兩次(2×15ml)。合并乙酸乙酯萃取物，用水洗滌，并干燥(MgSO4)，濃縮成褐色油。用30％乙酸乙酯/己烷層析，得到米色固體產(chǎn)物。M.p.299℃分解。M.S.(AP+)319。
實施例3至14使用適當?shù)脑?，利用類似于實施?中使用的方法制備實施例3至14的化合物。
實施例15至26使用適當?shù)脑?，利用類似于實施?中使用的方法制備這些化合物。
實施例272-(2，3-二氯-苯基氨基)-5-氟-3H-苯并咪唑-4-甲酸(a)2，3-二氨基-6-氟-苯甲酸乙酯將可商購的2-氨基-6-氟-3-硝基苯甲酸乙酯(1g)在60℃于含氯化錫(II)二水合物(2.5g)的乙酸乙酯(40mL)中攪拌6小時。冷卻到室溫過夜后，將反應(yīng)混合物加熱到70℃達4小時。然后真空除去溶劑，用冰浴冷卻的同時，將產(chǎn)物在二乙醚和4M氫氧化鈉(約60mL)之間分配。用少許冰冷的水、然后用鹽水洗滌醚層。濃縮有機層，得到暗褐色膠狀產(chǎn)物。
(b)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-5-氟-3H-苯并咪唑-4-甲酸乙酯向含2，3-二氨基-6-氟苯甲酸乙酯(600mg)粗品的乙醇(15mL)中加入2，3-二氯異硫氰酸酯(620mg)，在40℃攪拌混合物2小時。然后將N，N′-羰二咪唑(300mg)加至反應(yīng)混合物中，在50℃繼續(xù)攪拌3小時。然后將混合物在室溫放置過夜。將反應(yīng)混合物經(jīng)冰浴冷卻，加入二乙醚(約200mL)，攪拌至冷(＜10℃)。向醚溶液中加入4M氫氧化鈉(200mL)，在冰浴中攪拌混合物直至固體溶解。然后用少許冰冷的水、然后用鹽水洗滌該醚層。粗產(chǎn)物吸附在二氧化硅上，通過快速柱色譜純化，用10∶1的異己烷∶乙酸乙酯洗脫。獲得所命名的產(chǎn)物，為黃色固體。
(c)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-5-氟-3H-苯并咪唑-4-甲酸向40℃下攪拌著的2-(2，3-二氯苯基氨基)-5-氟-3H-苯并咪唑-4-甲酸乙酯(280mg)的乙醇(30mL)溶液中加入2M氫氧化鈉(3mL)。在40℃1小時后，在真空下除去一半溶劑，然后將混合物維持在50℃過夜。在真空下除去剩下的一半溶劑，加入1M HCl直至pH達到4。攪拌所得沉淀15分鐘，然后過濾，用水洗滌。在50℃真空干燥該產(chǎn)物，得到標題化合物，為淡褐色粉末。
實施例282-(2，3-二氯-苯基氨基)-4-羥基-3H-苯并咪唑-5-甲酰胺(a)4-乙酰氨基-5-氯-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯在20分鐘內(nèi)將發(fā)煙硝酸(33cm3)在室溫滴加到4-乙酰氨基-5-氯-2-甲氧基-苯甲酸甲酯(16.0g)中。在該溫度另外攪拌10分鐘后，將混合物傾入冰水中，加入EtOAc(100cm3)。分離有機層后，用EtOAc(100cm3)萃取水層。用鹽水(100cm3)洗滌合并的有機層，干燥(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，為橙色固體。
(b)4-氨基-5-氯-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯將濃硫酸(8cm3)滴加到含硝基-化合物(12.5g)的MeOH(140cm3)中，將所得混合物加熱至回流達9小時。反應(yīng)冷卻到室溫后，將混合物傾入冰(1200cm3)中，過濾收集形成的沉淀。加入EtOAc(100cm3)，用鹽水(100cm3)和水(100cm3)洗滌有機層，干燥(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)，得到褐色油狀的胺(9.6g，89％)。
(c)3，4-二氨基-2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯在室溫，將Pd-C(10wt％，4.5g)一次性加到經(jīng)攪拌的胺(5g)的甲醇(250cm3)溶液中。然后加入三乙胺(30cm3)，將所得混合物轉(zhuǎn)移到parr裝置中。攪拌8小時后，將反應(yīng)混合物通過CeliteTM過濾材料過濾，用甲醇(100cm3)洗滌。減壓蒸發(fā)，得到包含殘余三乙胺的粗產(chǎn)物。通過柱色譜在二氧化硅上純化，用異己烷-EtOAc(1∶4)作為洗脫劑，得到棕色固體二胺。
(d)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-4-甲氧基-3H-苯并咪唑-5-甲酸甲酯在室溫、氬氣下，將2，3-二氯異硫氰酸酯(1.0g)滴加到含二胺(1.0g)的EtOH(20cm3)中。攪拌1小時后，加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.2g)，使用微波輻射在120℃加熱所得混合物。12分鐘后，將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，過濾收集所得固體，得到苯并咪唑(1.5g，78％)，為灰白色固體。
(e)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-4-羥基-3H-苯并咪唑-5-甲酸將濃氫溴酸(4cm3)滴加到含苯并咪唑(400mg)的AcOH(4cm3)中，將所得混合物加熱至回流達2小時。反應(yīng)混合物冷卻到室溫后，加入水(10cm3)，過濾收集所得固體，用水(10cm3)洗滌，得到羥酸(330mg，89％)，為白色固體。
(f)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-4-羥基-3H-苯并咪唑-5-甲酰胺在室溫、氬氣下，將1-羥基-7-氮雜苯并三唑(13mg)一次性加到羥酸(30mg)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(13mg)在DMF(0.5cm3)中的混合物中。攪拌1小時后，加入氫氧化銨(12μl)，在室溫攪拌所得混合物。攪拌2小時后，減壓蒸發(fā)反應(yīng)混合物，通過反相柱色譜在Isolute SPE固相萃取吸著劑上純化，用MeCN(0.1％TFA)-H2O(0.1％TFA)作為梯度洗脫劑。減壓下部分蒸發(fā)合并的柱級分，除去過量的MeCN。然后，加入EtOAc(10cm3)和飽和NaHCO3(10cm3)的混合物。分離各層，干燥有機層(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)，得到甲酰胺，為白色-橙色固體。
實施例296-氯-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸(a)3-氨基-5-氯-2-硝基苯甲酸在室溫、氬氣下，將1，1，1-三甲基碘化肼(12.0g)一次性加到含5-氯-2-硝基-苯甲酸(10.0g)的無水DMSO(500cm3)中。然后，分批加入叔戊醇鈉(16.3g)，在室溫攪拌所得深紅色溶液。攪拌16小時后，將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，用1M鹽酸(150cm3)猝滅至pH3。然后，用EtOAc(3×200cm3)萃取水性混合物，干燥(Na2SO4)合并的有機萃取物，減壓蒸發(fā)，得到黃色粘稠油狀的酸粗品。
(b)3-氨基-5-氯-2-硝基苯甲酸甲酯在室溫、氬氣下，將碘代甲烷(0.73cm3)滴加到粗酸(2.5g)和K2CO3(2.1g)在DMF(17cm3)中的混合物中。將所得混合物60℃微波加熱10分鐘。冷卻到室溫后，將混合物小心地傾入EtOAc(50cm3)和1M鹽酸(50cm3)的混合物中。然后分離各層，用飽和Na2CO3(50cm3)、鹽水(50cm3)和水(50cm3)洗滌有機層，干燥(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)，得到棕色油狀的粗產(chǎn)物。通過柱色譜在二氧化硅上純化，用異己烷-EtOAc(3∶1)作為洗脫劑，得到酯，為黃色固體。
(c)2，3-二氨基-5-氯苯甲酸甲酯將1M鹽酸(0.7cm3)滴加到含酯(2.0g)的冰AcOH(70cm3)中。然后，分批加入鋅粉(4.5g)，在室溫、氬氣下攪拌所得混懸液。攪拌1小時后，用過量的飽和碳酸鉀溶液處理該混合物。用EtOAc(2×50cm3)萃取水性混合物，用鹽水(50cm3)和水(50cm3)洗滌合并的有機萃取物，干燥(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)，得到暗褐色固體粗產(chǎn)物。通過柱色譜在二氧化硅上純化，用異己烷-EtOAc(2∶1)作為洗脫劑，得到粉紅色固體二胺。
(d)6-氯-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯在室溫、氬氣下，將2，3-二氯異硫氰酸酯(243mg)滴加到含二胺(150mg)的MeOH(6cm3)中。攪拌2小時后，加入碘代甲烷(0.46cm3)，將所得混合物在室溫攪拌。16小時后，減壓蒸發(fā)反應(yīng)混合物，得到棕色固體粗產(chǎn)物。通過柱色譜在二氧化硅上純化，用DCM作為洗脫劑，得到灰白色固體苯并咪唑。
(e)6-氯-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸將2M氫氧化鈉(0.87cm3)滴加到含苯并咪唑(65mg)的THF(2cm3)和MeOH(0.2cm3)中，將所得混合物在40℃加熱16小時。反應(yīng)混合物冷卻到室溫后，加入1M鹽酸(2cm3)至pH 2，過濾收集所得固體，得到酸，為白色固體。
實施例306-溴-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸(a)2-氨基-5-溴-3-硝基-苯甲酸甲酯在室溫，向攪拌的可商購的2-氨基-3-硝基-苯甲酸甲酯(5g)的乙酸(25mL)溶液中滴加溴(1.286mL)的乙酸(5mL)溶液。攪拌所得混合物45分鐘，然后傾入到冰上。濾出黃色沉淀，真空干燥，得到所需溴化合物，為黃色固體。
(b)2，3-二氨基-5-溴-苯甲酸甲酯向攪拌的2-氨基-5-溴-3-硝基-苯甲酸甲酯(1g)的乙醇(25mL)溶液加入無水氯化錫(II)(4.19g)。將反應(yīng)混合物加熱到70℃，攪拌16小時。將混合物冷卻到室溫，蒸發(fā)溶劑，用水稀釋殘余物，用40％氫氧化鈉溶液堿化至pH＝13，用二氯甲烷萃取，得到二胺產(chǎn)物，為棕色固體。
(c)6-溴-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯在室溫、氮氣下，向攪拌的異硫氰酸2，3-二氯苯基酯(280μL)的乙腈(8mL)溶液中加入2，3-二氨基-5-溴-苯甲酸甲酯(415mg)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物0.5小時，然后一次性加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(474mg)，在室溫攪拌混合物4小時。用水淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物吸附在isolute固相萃取吸著劑上，通過快速色譜在硅膠上純化，用己烷∶乙酸乙酯4∶1洗脫，得到黃色固體。
(d)6-溴-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸在室溫，向攪拌的6-溴-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯(30mg)的四氫呋喃(0.8mL)溶液中加入氫氧化鋰(29mg)的水(0.4mL)溶液。在室溫攪拌混合物16小時。用1N鹽酸溶液使反應(yīng)淬滅并酸化至pH＝4-5，用乙酸乙酯萃取。合并有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空干燥。將粗產(chǎn)物吸附在isolute固相萃取吸著劑上，通過反相色譜在C18硅膠上純化，用水(+0.1％三氟乙酸)∶乙腈(+0.1％三氟乙酸)梯度(經(jīng)過30分鐘從80∶20至40∶60)洗脫，得到所需羧酸的三氟乙酸鹽，為白色凍干粉末([M]+＝401)。
實施例312-(2，3-二氯-苯基氨基)-6-甲氧基-3H-苯并咪唑-4-甲酸(a)3-氨基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酸在室溫、30分鐘內(nèi)，向可商購的5-氟-2-硝基-苯甲酸(1g)和O-甲基-羥胺(0.498g)的二甲氧基乙烷(25mL)溶液中滴加叔丁醇鉀(4.2g)和乙酸銅(II)(96.16mg)的DME(18mL)混懸液。在室溫15分鐘后，用水使反應(yīng)淬滅。用1N HCl將混合物酸化至pH＝3，用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機層，用硫酸鎂干燥，真空濃縮。通過快速柱色譜在硅膠上純化粗產(chǎn)物，用二氯甲烷∶甲醇∶乙酸8∶2∶0.1洗脫，得到暗黃色固體。
(b)3-氨基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酸甲酯向3-氨基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酸(0.36g)的溶液加入濃硫酸(1.88mL)，將所得溶液加熱到90℃，再攪拌16小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用氫氧化鈉6N中和，用乙酸乙酯萃取。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮。將粗產(chǎn)物吸附在isolute固相萃取吸著劑上，通過快速色譜在硅膠上純化，用己烷∶乙酸乙酯4∶1洗脫，得到褐色固體。
(c)2，3-二氨基-5-甲氧基-苯甲酸甲酯
向3-氨基-5-甲氧基-2-硝基-苯甲酸甲酯(100mg)的乙醇溶液中加入氯化錫(II)(509mg)。將反應(yīng)混合物加熱到70℃，再攪拌16小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空蒸發(fā)。用40％氫氧化鈉水溶液處理殘余物至pH＝12。用水稀釋混合物，用氯仿萃取，用無水硫酸鈉干燥有機層，過濾，真空蒸發(fā)，得到褐色固體。
(d)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-6-甲氧基-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯在室溫、氮氣下，向攪拌的異硫氰酸2，3-二氯苯基酯(44.4μL)的乙腈(1.5mL)溶液中加入2，3-二氨基-5-甲氧基-苯甲酸甲酯(50mg)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌1.5小時，然后一次性加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(60.1mg)，將該混合物在室溫再攪拌4小時。用水使反應(yīng)淬滅，用乙酸乙酯萃取。合并有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物吸附在isolute固相萃取吸著劑上，通過快速色譜在硅膠上純化，用己烷∶乙酸乙酯4∶1洗脫，得到淡黃色固體。
(e)2-(2，3-二氯-苯基氨基)-6-甲氧基-3H-苯并咪唑-4-甲酸在室溫，向攪拌的2-(2，3-二氯-苯基氨基)-6-甲氧基-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯(45mg)的四氫呋喃(1mL)溶液中加入氫氧化鋰(52mg)的水(0.5mL)溶液。將混合物在室溫攪拌24小時。用1N鹽酸溶液使反應(yīng)淬滅并酸化至pH＝4-5，用乙酸乙酯萃取。合并有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到淡黃色粉末狀所需羧酸([M]+＝352)。
實施例326-氰基-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸(a)6-氰基-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯在經(jīng)氮吹掃的燒瓶中裝入6-溴-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯(41mg)、碘化銅(I)(19mg)和四-(三苯基膦)鈀(58mg)，加入新鮮干燥的脫氧甲苯，密封燒瓶。然后將混懸液在暗處加熱到120℃達16小時。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，用乙酸乙酯和30％氫氧化銨稀釋。分離各層，用鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物吸附在isolute固相萃取吸著劑上，通過快速色譜在硅膠上純化，用己烷∶乙酸乙酯∶氫氧化銨6∶4∶0.1洗脫，得到淡黃色固體。
(b)6-氰基-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸在室溫，向攪拌的6-氰基-2-(2，3-二氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-4-甲酸甲酯粗品(1mg)的THF(0.4mL)溶液加入氫氧化鋰(15mg)的水(0.2mL)溶液。將所得溶液在室溫再攪拌16小時。通過制備型TLC直接純化粗產(chǎn)物，使用己烷∶乙酸乙酯∶甲酸4∶6∶0.1作為洗脫劑，得到所需產(chǎn)物。
權(quán)利要求
1.游離或鹽形式的式I化合物 其中Y是氮或氧；R1是氫或C1-C8-烷基；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、氰基、羥基、羧基、硝基、氨基羰基、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代，或R2是C1-C8-烷基或C1-C8-烷氧基，在每種情況下任選被羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C8-烷基磺酰氨基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代，或R2是C1-C8-烷基羰基、C3-C8-環(huán)烷基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基，或R1和R2一起形成C3-C8-環(huán)烷基或包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基；R3是氫、鹵代、氰基、羥基、硝基、羧基、氨基羰基、C1-C8-烷基、C1-C8-鏈烯基、C1-C8-炔基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-烷硫基、C3-C8-環(huán)烷基、C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基、羧基-C1-C8-烷氧基、-CO-NR6R7、-NH-SO2R8、-NH-COH或-SO2NH2，且R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、硝基、羧基、氨基羰基、C1-C8-烷基、C1-C8-鏈烯基、C1-C8-炔基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-烷硫基、C1-C8-烷氧基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C8-環(huán)烷基、C3-C8-環(huán)烷基-C1-C8-烷基、C3-C8-環(huán)烷氧基、-CO-NR6R7、-NH-SO2R8、-NH-COH或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基，且R6、R7和R8獨立地是氫或C1-C8-烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；且R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C8-烷氧基或-CO-NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C10-碳環(huán)基，優(yōu)選苯基或萘基，任選被鹵代、C1-C4-烷基或被C1-C4-烷氧基取代，C1-C4-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；且R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基、-SO2NH2、C1-C4-烷氧基或-CO-NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C15-碳環(huán)基，任選被鹵代、C1-C8-烷基或被C1-C8-烷氧基取代，C1-C8-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y是氮或氧；R1是氫；R2是C3-C10-碳環(huán)基，優(yōu)選苯基或萘基，任選被鹵代、C1-C4-烷基或被C1-C4-烷氧基取代，C1-C4-烷氧基任選被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基取代；且R3、R4和R5獨立地是氫、鹵代、氰基、羥基、羧基或-SO2NH2，或連接于相鄰環(huán)碳原子上的R3、R4和R5中的兩個一起形成包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-或6-元雜環(huán)基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它也是式V化合物 其中Y、R2、R3和R4如下表所示 7.權(quán)利要求1的化合物，如下表所示
8.與另一種藥物聯(lián)合的根據(jù)前述任一權(quán)利要求的化合物，所述另一種藥物是抗炎藥、支氣管擴張藥或抗組胺藥。
9.根據(jù)前述任一權(quán)利要求的化合物，用作藥物。
10.藥物組合物，包含作為活性成分的任一權(quán)利要求1至7的化合物。
11.任一權(quán)利要求1至7的化合物在制備用于治療由CXCR2受體介導的病癥的藥物中的用途。
12.任一權(quán)利要求1至7的化合物在制備用于治療炎性或過敏性病癥、尤其是炎性或阻塞性氣道疾病的藥物中的用途。
13.制備權(quán)利要求1所述的式I化合物的方法，包括(i)(A)為制備其中Y是氮的式I化合物，使各自任選為受保護形式的式IIa或IIb化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、R4和R5如權(quán)利要求1中定義，必要時脫保護；或(B)為制備其中Y是氧的式I化合物，使任選為受保護形式的式IIc化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、R4和R5如權(quán)利要求1中定義，必要時脫保護；和(ii)回收游離或鹽形式的產(chǎn)物。
全文摘要
游離或鹽形式的式(I)化合物，其中Y、R
文檔編號C07D498/04GK1910164SQ200580002894
公開日2007年2月7日 申請日期2005年1月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月21日
發(fā)明者N·J·普雷斯, D·波特, C·勒布朗, C·麥卡錫, N·索爾德曼, L·N·布朗 申請人:諾瓦提斯公司