專利名稱：癌癥的治療和診斷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用生物學(xué)藥物的癌癥的治療和診斷。
背景技術(shù)：
盡管對(duì)某些類型的癌癥治療有所提高，但是在美國它仍然是死亡的主要原因。由于在大多數(shù)情況下，早期診斷可大大增加癌癥完全緩解的機(jī)會(huì)，所以非常希望醫(yī)生在實(shí)質(zhì)的腫瘤發(fā)生前能夠檢測到癌癥。然而，能快速并準(zhǔn)確地檢測許多類型癌癥的方法的發(fā)展繼續(xù)向醫(yī)學(xué)界(the medial community)提出挑戰(zhàn)。前列腺癌就是一個(gè)這類用作例證的癌癥。
前列腺癌是男性中最常見的癌癥，在美國1996年估計(jì)有317,000個(gè)病例。它是每年估計(jì)死于腫瘤的40,000名死亡的男性中第二個(gè)主要的死亡原因。需要及時(shí)檢測和治療以限制由前列腺癌導(dǎo)致的死亡率。
前列腺癌的檢測當(dāng)轉(zhuǎn)移時(shí)，前列腺癌對(duì)骨頭和淋巴結(jié)有獨(dú)特的偏愛。Saitoh等，“前列腺癌的轉(zhuǎn)移形式。涉及器官的位點(diǎn)和數(shù)量間的聯(lián)系，”Cancer，543078-3084(1984)。在臨床診斷的時(shí)候，通過放射性核素掃描多達(dá)25％的病人有可證實(shí)的骨轉(zhuǎn)移。Murphy，G.P.等，“由美國外科醫(yī)師學(xué)院在美國進(jìn)行的前列腺癌的國家調(diào)查”J.Urol.，127928-939(1982)。已證實(shí)要準(zhǔn)確估計(jì)關(guān)鍵的牽涉情況是困難的。諸如計(jì)算機(jī)X線斷層照相術(shù)(“CT”)或磁共振(“MR”)成像的成像技術(shù)通過標(biāo)準(zhǔn)而不是大小(即＞1cm)不能區(qū)別轉(zhuǎn)移的前列腺癌累及的淋巴結(jié)。因此，通過定義，這些成像形式在小體積(＜1cm)病變的檢測中是固有地不敏感，并且在較大體積腺病的檢測中是非特異性的。最近的研究評(píng)價(jià)了在臨床定位的前列腺癌的病人中MR的準(zhǔn)確度。Rifkin等，“在早期前列腺癌中磁共振成像與超聲波檢查的比較”N.Engel.J.Med.，323621-626(1990)。在這項(xiàng)研究中，194例病人進(jìn)行MR，而這些病人的185例有淋巴結(jié)解剖。23例(13％)病人有病理學(xué)累及的淋巴結(jié)。MR只對(duì)這23個(gè)病例的1例表示懷疑，導(dǎo)致敏感率為4％。用CT掃描也獲得類似的結(jié)果。Gasser等，“在早期前列腺癌中MRI與超聲波檢查”N.Engel.J.Med.(通訊)，324(7)49-495(1991)。
Gutman等，J.Clin.Invest17473(1938)首次報(bào)道了在有轉(zhuǎn)移的前列腺癌病人中血清酸性磷酸酶活性的升高。在前列腺的癌癥中，前列腺酸性磷酸酶從癌組織釋放到血流中，結(jié)果是總血清酸性磷酸酶水平大大增加至正常值以上。從那時(shí)起進(jìn)行了這個(gè)酶以及它與前列腺癌的關(guān)系的大量研究，如Yam，Amer.J.Med.56604(1974)。然而，在大約65-90％的有骨轉(zhuǎn)移的前列腺癌病人中、在大約30％X線診斷證實(shí)的無骨轉(zhuǎn)移的病人中、以及在大約只有5-10％的缺少臨床可證實(shí)的轉(zhuǎn)移的病人中測定的血清酸性磷酸酶活性升高。
嘗試發(fā)展對(duì)前列腺酸性磷酸酶的特異性檢測的先有技術(shù)僅僅獲得有限的成功，因?yàn)橐蕾囉趯?duì)所謂的“特異性”底物的酶活性技術(shù)不能考慮到在這許多的酸性磷酸酶中與前列腺來源的酶活性不相關(guān)的其它生物化學(xué)和免疫化學(xué)的差異。在同工酶的情況下，即遺傳學(xué)上限定的具有相同的酶活性特征和相似的分子結(jié)構(gòu)、但是氨基酸序列和/或含量不同并且因此在免疫化學(xué)上可區(qū)別的酶，似乎僅僅通過特定底物的選擇內(nèi)在地不可能區(qū)別不同的同工酶形式。因此，并不驚奇這些先有技術(shù)方法沒有一個(gè)對(duì)前列腺酸性磷酸酶活性的直接檢測有高度特異性，參見如Cancer5236(1952)；J.Lab.Clin.Med.82486(1973)；Clin.Chem.Acta.4421(1973)；和J.Physiol.Chem.3561775(1975)。
除了似乎在許多用于檢測前列腺酸性磷酸酶的在先技術(shù)試劑中固有的非特異性的前述問題，還有已報(bào)道的血清酸性磷酸酶的升高與其它疾病相關(guān)，這使獲得前列腺癌的準(zhǔn)確臨床診斷的問題更復(fù)雜。例如，Tuchman等，Am.J.Med.27959(1959)注意到在患高歇病的病人中血清酸性磷酸酶的水平似乎升高。
由于在開發(fā)對(duì)前列腺酸性磷酸酶的“特異性”底物的固有的困難，所以一些研究者開發(fā)了檢測前列腺酸性磷酸酶的免疫化學(xué)方法。然而，以前報(bào)道的免疫化學(xué)方法有其自身的缺點(diǎn)，這阻礙了它們的廣泛接受。例如，Shulman等，Immunology93474(1964)描述了檢測人前列腺酸性磷酸酶的免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。用由通過從患前列腺病的病人的直腸按摩獲得的前列腺液抗原制備的抗血清，在對(duì)正常腎、睪丸、肝和肺的抽提物的雙向擴(kuò)散技術(shù)中沒有觀察到交叉反應(yīng)沉淀線。然而，即使使用大量抗原時(shí)，以及使用大量可以與存在于前列腺液中與其它抗原性不相關(guān)的血清蛋白成分交叉反應(yīng)的抗血清時(shí)，這種方法有敏感性有限的缺點(diǎn)。
Chu等的WO 79/00475描述了檢測與前列腺癌相關(guān)的前列腺酸性磷酸酶同工酶形式的方法，該方法消除了許多上述缺點(diǎn)。然而，為制備其抗體，需要從中提取與前列腺癌相關(guān)的診斷學(xué)上相關(guān)的前列腺酸性磷酸酶同工酶形式的前列腺癌組織的來源，這提出了實(shí)際問題。
在最近幾年，為了開發(fā)特異性診斷試劑，已耗費(fèi)了相當(dāng)大的努力以鑒別對(duì)各種類型惡性腫瘤的酶或抗原標(biāo)志物。理想的腫瘤標(biāo)志物將連同其它的特征，表現(xiàn)出組織或細(xì)胞類型特異性。以前的研究人員已證實(shí)人類前列腺組織特異性抗原的出現(xiàn)。
前列腺癌的治療如W.J.Catalona在“前列腺癌的控制”New Engl.J.Med.，331(15)996-1004(1994)中描述，前列腺癌通過警惕的等待、有效的治療和緩解可以獲得控制。
對(duì)于預(yù)期壽命不到10年的人，當(dāng)對(duì)良性增生的部分進(jìn)行前列腺切除術(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)的輕度、早期的前列腺癌，警惕的等待是合適的。這種癌癥在檢測后的最初5年很少發(fā)展。在另一方面，對(duì)于更年輕的人，有效的治療通常更合適。
當(dāng)前列腺癌被定位并且病人的預(yù)期壽命為10年或更長時(shí)，前列腺根除切除術(shù)提供根除該疾病的最好機(jī)會(huì)。歷史上，這個(gè)方法的缺點(diǎn)是大多數(shù)癌癥在它們被檢測的時(shí)候已擴(kuò)散超過手術(shù)的范圍。然而，使用前列腺特異性抗原測試允許早期檢測前列腺癌。結(jié)果，外科手術(shù)擴(kuò)展得越小，則并發(fā)癥越少?；即蟮摹⑦M(jìn)行性腫瘤的病人通過前列腺根除切除術(shù)治療不太成功。
外科手術(shù)后，如果有可檢測的血清前列腺特異性抗原濃度，則表明癌癥頑固。在許多情況下，通過放射治療可以降低前列腺特異性抗原的濃度。然而，在2年內(nèi)，該濃度經(jīng)常再次增加。
放療也已作為對(duì)前列腺根除切除術(shù)的替代方法使用。通常用放療的病人是那些年紀(jì)較大和健康狀況較差的病人，以及那些患較嚴(yán)重的、臨床上更晚期的腫瘤的病人。特別推薦的方法是涉及三維的外束療法(external-beam therapy)、將該放射的區(qū)域設(shè)計(jì)為符合治療組織體積的保形放療(conformal radiation therapy)、用超聲制導(dǎo)(ultrasonund guidance)植入放射性化合物種子的組織內(nèi)放射治療、以及外束療法和組織內(nèi)放射治療的聯(lián)合。
對(duì)于患局部晚期疾病的病人的治療，在前列腺根除切除術(shù)或放療前或后已使用激素療法。激素療法是患播散性前列腺癌的男性的主要治療形式。睪丸切除術(shù)降低血清睪酮的濃度，而雌激素療法同樣是有利的。來自雌激素的己烯雌酚是另一個(gè)有用的激素療法，它有引起心血管毒性的缺點(diǎn)。當(dāng)給予促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑時(shí)，睪酮濃度最終降低。氟利坦和其它非類固醇化合物的抗雄激素藥物阻斷睪酮與其胞內(nèi)受體的結(jié)合。結(jié)果，它阻斷睪酮的作用，增加血清睪酮的濃度并且使病人能保持有性交能力，這是前列腺根除切除術(shù)和放療后的一個(gè)重要的問題。
細(xì)胞毒性化療在治療前列腺癌中大多無效。它的細(xì)胞毒性使這種治療不適于上了年紀(jì)的病人。另外，前列腺癌對(duì)細(xì)胞毒藥物有相對(duì)抗性。
在前列腺癌的檢測和治療中單克隆抗體的應(yīng)用理論上，放射性標(biāo)記的單克隆抗體(“mAb”)提供增強(qiáng)在淋巴結(jié)和在別處檢測前列腺癌的敏感性和特異性的潛力。盡管先前已針對(duì)前列腺相關(guān)抗原制備了許多mAb，但考慮到成像的目的，這些mAb沒有一種特異性地產(chǎn)生。盡管如此，臨床的需要已導(dǎo)致某些這類mAb作為可能的成像藥物的評(píng)估。Vihko等，“用前列腺酸性磷酸酶特異性抗體的前列腺癌的放射成像”Biotechology in Diagnostics，131-134(1985)、Babaian等，“用111-碘標(biāo)記的單克隆抗體PAY 276的轉(zhuǎn)移性前列腺癌的放射免疫學(xué)成像”J.Urol.，137439-443(1987)；Leroy等，“在前列腺癌中淋巴結(jié)侵害的放射免疫檢測。在體內(nèi)碘123(123-I)標(biāo)記的單克隆抗前列腺酸性磷酸酶(PAP)227 A F(ab’)2抗體片段的應(yīng)用，”Cancer，641-5(1989)、Meyers等，“轉(zhuǎn)移性前列腺癌的單克隆抗體成像的發(fā)展”The Prostate，14209-220(1989)。
在某些情況下，開發(fā)用于前列腺癌的檢測和/或治療的單克隆抗體識(shí)別惡性前列腺組織的特異性抗原。因此將這類抗體用于從良性的前列腺組織中區(qū)別惡性前列腺組織(用于治療和檢測)。參見Bazinet等的美國專利第4,970,299號(hào)和Freeman等的美國專利第4,902,615號(hào)。
其它的單克隆抗體與在所有的癌變或良性的前列腺上皮細(xì)胞上的表面抗原均反應(yīng)。參見Chu等的美國專利第4,446,122號(hào)和Re33,405號(hào)、McEwan等的美國專利第4,863,851號(hào)和Ueda等的美國專利第5,055,404號(hào)。然而，通過這些單克隆抗體檢測的抗原在血液中存在并且因此與在腫瘤位點(diǎn)的抗原競爭所述克隆抗體。這產(chǎn)生背景干擾，使這類抗體的使用不適于體內(nèi)成像。在治療中，如果這類抗體與細(xì)胞毒性藥物結(jié)合，則可能對(duì)其它器官有害。
Horoszewicz等“在前列腺上皮細(xì)胞和前列腺癌病人的血清中針對(duì)一種新的抗原標(biāo)志物的單克隆抗體”Anticancer Research，7927-936(1987)(“Horoszewicz”)以及Horoszewicz的美國專利第5,162,504號(hào)描述了一種抗體，稱為7E11，它識(shí)別前列腺特異性膜抗原(“PSMA”)。Israeli等的“編碼前列腺特異性膜抗原的互補(bǔ)DNA的分子克隆”Cancer Research，53227-230(1993)(“Israeli”)描述了PSMA的克隆和測序，并報(bào)道了PSMA是前列腺特異性的，并且顯示在轉(zhuǎn)移部位和激素不應(yīng)狀態(tài)中表達(dá)水平增加。其它研究已表明相對(duì)于正常前列腺或良性增生的前列腺的細(xì)胞，PSMA在前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)更強(qiáng)。而且，在血清中未發(fā)現(xiàn)PSMA(Troyer等“在組織提取物和體液中的前列腺特異性膜抗原(PSMA)的檢測和特征鑒定”Int.J.Cancer，62552-558(1995))。
這些特征使PSMA成為一個(gè)有吸引力的靶，用于前列腺癌的成像和治療的抗體介導(dǎo)的靶向。用銦標(biāo)記的7E11的成像研究已顯示，該抗體正好定位于前列腺和轉(zhuǎn)移的部位。另外，與其它常用的如CT和MR成像或骨掃描的成像技術(shù)比較，7E11似乎明顯提高檢測疾患的敏感性。Bander，“用于成像和前列腺癌治療的單克隆抗體的當(dāng)前狀況”Sem.In Oncology，21607-612(1994)。
然而，7E11和其它已知介導(dǎo)成像和治療的PSMA的抗體有幾個(gè)缺點(diǎn)。首先，PSMA是一個(gè)已知有短的胞內(nèi)尾和長的胞外域的完整膜蛋白。生物化學(xué)特性和圖譜(Troyer等“前列腺特異性膜抗原的7E11-C5.3抗原決定簇的生物化學(xué)特征和圖譜”Urol.Oncol.，129-37(1995))已顯示7E11抗體結(jié)合的抗原決定簇或抗原性位點(diǎn)存在于該分子的胞內(nèi)部分。因?yàn)榭贵w分子在正常環(huán)境中不能穿過細(xì)胞膜，除非它們與分子的胞外部分結(jié)合并在胞內(nèi)移位，所以7E11抗體在另外的健康、存活的細(xì)胞中不能利用其抗原靶位點(diǎn)。
因此，采用7E11的成像限于腫瘤保藏物內(nèi)的死細(xì)胞中的檢測。另外，7E11抗體的治療用途是有限的，因?yàn)閮H僅可以有效地導(dǎo)向已經(jīng)死亡或含有大比例死細(xì)胞的組織的細(xì)胞。
雖然在一種特殊類型的癌癥的診斷和治療中不適應(yīng)之處和問題是先前討論的焦點(diǎn)，但前列腺癌僅僅是一個(gè)代表模型。大量其它癌癥的診斷和治療有同樣的問題。
本發(fā)明的目標(biāo)在于克服先有技術(shù)抗體在診斷和治療前列腺癌和其它類型癌癥中的缺陷。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個(gè)方面涉及消除或殺傷癌細(xì)胞的方法。該方法涉及提供一種生物學(xué)藥物，該生物學(xué)藥物當(dāng)與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域。在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與鄰近所述癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合和殺傷或消除所述癌細(xì)胞均有效的條件下，將這些生物學(xué)藥物與鄰近所述癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞接觸。該生物學(xué)藥物可以單獨(dú)使用，或可在該生物學(xué)藥物與鄰近所述癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合時(shí)，將該生物學(xué)藥物與有效殺傷或消除所述癌細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合。
在按照本發(fā)明的消除或殺傷癌細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，當(dāng)與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。推薦用于按照本發(fā)明的消除或殺傷癌細(xì)胞的方法的生物學(xué)藥物是抗體或其結(jié)合部分、探針或配體。本發(fā)明的方法對(duì)殺傷或消除腎癌、泌尿道上皮(Urothelial)癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌和乳腺癌的癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)移至肝臟的腺癌的癌細(xì)胞特別有用。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物學(xué)樣品中檢測癌組織的方法。這個(gè)方法涉及提供一種生物學(xué)藥物，當(dāng)該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，它與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合。當(dāng)該生物學(xué)藥物與鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合時(shí)，將該生物學(xué)藥物與有效允許檢測鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記結(jié)合。在有效允許該生物學(xué)藥物與該生物學(xué)樣品中鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合的條件下，將該生物學(xué)樣品與具有標(biāo)記的該生物學(xué)藥物接觸。通過檢測該標(biāo)記檢測在該生物學(xué)樣品中癌組織的存在。
在按照本發(fā)明的檢測癌組織的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，該生物學(xué)藥物是這樣一種藥物，當(dāng)它與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，它與該前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。推薦用于按照本發(fā)明的檢測癌組織的方法的生物學(xué)藥物是抗體或其結(jié)合部分、探針或配體。該方法可特別用于檢測腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌和乳腺癌的癌組織和轉(zhuǎn)移至肝臟的腺癌的癌組織。
本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及消除或殺傷正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法。該方法涉及提供識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域的生物學(xué)藥物。該生物學(xué)藥物可以單獨(dú)使用，或可以當(dāng)該生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞結(jié)合時(shí)，將其與有效殺傷所述細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合。然后在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合和殺傷或消除所述癌細(xì)胞均有效的條件下，將這些生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞接觸。
在按照本發(fā)明的消除或殺傷正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。推薦的用于按照本發(fā)明的消除或殺傷正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的生物學(xué)藥物是抗體或其結(jié)合部分、探針或配體。
本發(fā)明的另外一個(gè)方面涉及在生物學(xué)樣品中檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞或其部分的方法。該方法涉及提供與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的生物學(xué)藥物。當(dāng)該生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞或其部分結(jié)合時(shí)，將該生物學(xué)藥物與對(duì)允許檢測所述細(xì)胞或其部分有效的標(biāo)記結(jié)合。在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與該生物學(xué)樣品中任何所述細(xì)胞或其部分的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合有效的條件下，將該生物學(xué)樣品與具有標(biāo)記的該生物學(xué)藥物接觸。通過檢測該標(biāo)記檢測在該生物學(xué)樣品中任何細(xì)胞或其部分的存在。
在按照本發(fā)明的檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。推薦的用于按照本發(fā)明的檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的生物學(xué)藥物是抗體或其結(jié)合部分、探針或配體。
本發(fā)明的另外一個(gè)方面關(guān)于識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域的生物學(xué)藥物。在一個(gè)推薦的實(shí)施方案中，分離的該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。推薦的按照本發(fā)明的識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域的分離的生物學(xué)藥物是分離的抗體或其結(jié)合部分、探針或配體。也公開了產(chǎn)生這些類型的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系。
本發(fā)明的生物學(xué)藥物識(shí)別正常的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的抗原的胞外域。不象7E11抗體，該抗體識(shí)別僅僅在細(xì)胞裂解后暴露于細(xì)胞外的前列腺相關(guān)抗原的抗原決定簇，本發(fā)明的生物學(xué)藥物與暴露在細(xì)胞外的活的前列腺細(xì)胞中的抗原決定簇結(jié)合。使用本發(fā)明的生物學(xué)藥物，可將活的、正常的不固定的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞作為靶，它使治療和診斷更有效。在治療前列腺癌的一個(gè)推薦的實(shí)施方案中，本發(fā)明的生物學(xué)藥物也與前列腺特異性膜抗原結(jié)合并用其內(nèi)在化，這允許在治療上使用胞內(nèi)作用的細(xì)胞毒藥物。
附圖簡述

圖1是在4℃溫育后在LNCaP細(xì)胞表面上的金標(biāo)記的單克隆抗體J591的免疫電子顯微照片。
圖2是用金標(biāo)記的單克隆抗體J591處理的LNCaP細(xì)胞在37℃溫育5分鐘后的免疫電子顯微照片。
圖3是用金標(biāo)記的單克隆抗體J591處理的LNCaP細(xì)胞在37℃溫育10分鐘后的免疫電子顯微照片。
圖4是用金標(biāo)記的單克隆抗體J591處理的LNCaP細(xì)胞在37℃溫育15分鐘后的免疫電子顯微照片。
圖5是用金標(biāo)記的單克隆抗體J591處理的LNCaP細(xì)胞在37℃溫育10分鐘后的免疫電子顯微照片，顯示J591在核內(nèi)體內(nèi)。
圖6總結(jié)了單克隆抗體J591重鏈的測序策略。
圖7顯示單克隆抗體J591重鏈的核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.1)、對(duì)應(yīng)的反向非編碼鏈的核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.2)和對(duì)應(yīng)的推斷的氨基酸序列(稱為SEQ.ID.No.3、4和5)。
圖8是單克隆抗體J591的重鏈與小鼠重鏈亞組IIA的共有序列的比較。
圖9總結(jié)了單克隆抗體J591的κ輕鏈的測序策略。
圖10顯示單克隆抗體J591κ輕鏈的核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.9)、對(duì)應(yīng)的反向編碼鏈核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.10)和對(duì)應(yīng)的推斷的氨基酸序列(稱為SEQ.ID.No.11、12和13)。
圖11是單克隆抗體J591的κ輕鏈與小鼠κ鏈亞組V的共有序列的比較。
圖12A-12F是顯示mAbJ591對(duì)各種癌癥的新脈管系統(tǒng)的免疫化學(xué)反應(yīng)的顯微照片(250×放大倍數(shù))。
本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明的一個(gè)方面涉及消除或殺傷正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法。該方法涉及提供諸如抗體或其結(jié)合部分、探針、或配體的生物學(xué)藥物，該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原胞外域(即前列腺特異性膜抗原在這類細(xì)胞外面的一部分)結(jié)合。該生物學(xué)藥物可單獨(dú)使用，或當(dāng)該生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞結(jié)合時(shí)，可以將該生物學(xué)藥物與有效殺傷所述細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合。然后在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合和殺傷或消除所述細(xì)胞均有效的條件下，將這些生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞接觸。通過在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合和殺傷或消除所述癌細(xì)胞均有效的條件下，將該生物學(xué)藥物以其優(yōu)選形式給予哺乳動(dòng)物，在活的哺乳動(dòng)物中實(shí)施這類接觸。這種給藥可口服或腸胃外進(jìn)行。
在按照本發(fā)明的消除或殺傷正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。再者，該生物學(xué)藥物可以單獨(dú)使用?；蛘撸?dāng)該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原結(jié)合時(shí)，以及當(dāng)該生物學(xué)藥物用該前列腺特異性膜抗原內(nèi)在化時(shí)，將該生物學(xué)藥物與有效殺傷所述細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合。
該生物學(xué)藥物用該前列腺特異性膜抗原內(nèi)在化的機(jī)制對(duì)本發(fā)明的實(shí)施不是關(guān)鍵性的。例如，該生物學(xué)藥物可以誘導(dǎo)前列腺特異性膜抗原的內(nèi)在化?；蛘撸撋飳W(xué)藥物的內(nèi)在化可以是前列腺特異性膜抗原的常規(guī)內(nèi)在化的結(jié)果。
上述生物學(xué)藥物(即諸如抗體或其結(jié)合部分、探針或配體的生物學(xué)藥物，當(dāng)與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，該生物學(xué)藥物識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域，并且最好是用其內(nèi)在化)可以用于消除或殺傷癌細(xì)胞。在本發(fā)明的這個(gè)方面，該生物學(xué)藥物可以單獨(dú)使用，或當(dāng)該生物學(xué)藥物與鄰近癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合時(shí)，可以將該生物學(xué)藥物與有效殺傷所述癌細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合。將這些生物學(xué)藥物與鄰近所述癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞接觸。在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與鄰近所述癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合有效的條件下，并且另外，在對(duì)殺傷或消除所述癌細(xì)胞有效的條件下實(shí)施該接觸。殺傷或消除所述癌細(xì)胞的機(jī)制對(duì)本發(fā)明的實(shí)施不是關(guān)鍵性的。例如，通過作為該生物學(xué)藥物與鄰近它們的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合的結(jié)果，可以直接殺傷或消除所述癌細(xì)胞。或者，該生物學(xué)藥物可以殺傷、消除其結(jié)合的血管內(nèi)皮細(xì)胞或者改變所述細(xì)胞性質(zhì)，以使流向鄰近它的癌細(xì)胞的血液停止或者減少，因此導(dǎo)致所述癌細(xì)胞被殺傷或消除。因此，本發(fā)明的方法對(duì)殺傷或消除在癌組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞以及包含在癌組織內(nèi)的癌細(xì)胞特別有用。
在按照本發(fā)明的消除或殺傷癌細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，使用的該生物學(xué)藥物是這樣一種生物學(xué)藥物，當(dāng)它與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，它與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合并用其內(nèi)在化。本發(fā)明的方法對(duì)殺傷或消除癌變的前列腺上皮細(xì)胞以及非癌變前列腺上皮細(xì)胞的癌細(xì)胞特別有用。非癌變前列腺上皮細(xì)胞的癌細(xì)胞的例子是腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌和乳腺癌的癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)移至肝臟的腺癌的癌細(xì)胞。雖然本發(fā)明的方法可以用于殺傷或消除任何表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域或其一部分的細(xì)胞或其生存依賴于表達(dá)前列腺特異性抗原胞外域或其部分的細(xì)胞的細(xì)胞，但是本發(fā)明的方法對(duì)殺傷或消除癌細(xì)胞特別有用，因?yàn)椴徽摪┌Y涉及何種類型，供應(yīng)血液到癌組織(例如腫瘤、癌細(xì)胞的集合或其它癌塊)的血管內(nèi)皮細(xì)胞均表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域。相反，供應(yīng)血液到正常組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域。
本發(fā)明的另外一個(gè)方面涉及在生物學(xué)樣品中檢測正常的、良性增生的和癌變的上皮細(xì)胞或其部分的方法。該方法涉及提供諸如抗體或其結(jié)合部分、探針或配體的生物學(xué)藥物，它與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合。當(dāng)該生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞或其部分結(jié)合時(shí)，將該生物學(xué)藥物與對(duì)允許檢測所述細(xì)胞或其部分(如從這類正常的、良性增生的和癌變的細(xì)胞釋放的前列腺特異性膜抗原或其片段)有效的標(biāo)記結(jié)合。在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與該生物學(xué)樣品中任何所述細(xì)胞或其部分的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合有效的條件下，將該生物學(xué)樣品與具有標(biāo)記的該生物學(xué)藥物接觸。通過檢測該標(biāo)記，檢測在該生物學(xué)樣品中任何細(xì)胞或其部分的存在。以其推薦的形式實(shí)施這類接觸，包括在對(duì)允許該生物學(xué)藥物與該生物學(xué)樣品中的任何細(xì)胞或其部分的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合有效的條件下，在活的哺乳動(dòng)物中給予該哺乳動(dòng)物該生物學(xué)藥物。而且，這種給藥可口服或腸胃外進(jìn)行。
可用本發(fā)明的方法篩選有與正常的、良性增生的、和癌變的上皮細(xì)胞或其部分相關(guān)的疾病的病人?；蛘?，可用它鑒別這類疾病的復(fù)發(fā)，特別是當(dāng)將該病定位在該病人的特定生物學(xué)材料中時(shí)。例如，在前列腺根除切除術(shù)后，在前列腺窩中可能遇到前列腺疾病的復(fù)發(fā)。用本發(fā)明的方法，通過給予該哺乳動(dòng)物短程放射標(biāo)記的抗體，然后例如用經(jīng)直腸檢測器探頭在直腸檢測該標(biāo)記，可以檢測復(fù)發(fā)。
或者，在血清或尿或其它體液樣品中可以進(jìn)行該接觸步驟，例如以在體液中檢測PSMA的存在。當(dāng)在血清或尿樣品中進(jìn)行該接觸時(shí)，最好是除了PSMA，該生物學(xué)藥物基本上不識(shí)別在血液中循環(huán)的抗原。因?yàn)橥暾那傲邢偌?xì)胞不排泄或分泌PSMA到胞外環(huán)境中，所以在血清、尿、或其它體液中檢測到PSMA通常表明前列腺細(xì)胞被裂解。因此，可以用本發(fā)明的生物學(xué)藥物和方法通過監(jiān)測血清、尿或其它體液中的PSMA的水平，測定前列腺癌治療方案的有效性。
在按照本發(fā)明的檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，諸如抗體或其結(jié)合部分、探針或配體的該生物學(xué)藥物與這類細(xì)胞的前列腺特異性膜抗原結(jié)合并且內(nèi)在化。此外，當(dāng)該生物學(xué)藥物與前列腺特異性膜抗原結(jié)合時(shí)以及該生物學(xué)藥物用前列腺特異性膜抗原內(nèi)在化時(shí)，將該生物學(xué)藥物與有效允許檢測所述細(xì)胞或其部分的標(biāo)記結(jié)合。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物學(xué)樣品中檢測癌組織的方法。這個(gè)方法涉及提供上述生物學(xué)藥物(即諸如抗體或其結(jié)合部分、探針或配體的生物學(xué)藥物，當(dāng)與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，該生物學(xué)藥物識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域)。當(dāng)該生物學(xué)藥物與鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合時(shí)，將該生物學(xué)藥物與有效檢測允許鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記結(jié)合。然后將該生物學(xué)樣品與具有標(biāo)記的該生物學(xué)藥物接觸。在有效允許該生物學(xué)藥物與該生物學(xué)樣品中鄰近該癌組織或在該癌組織內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合的條件下進(jìn)行接觸。通過檢測該標(biāo)記，檢測在該生物學(xué)樣品中癌細(xì)胞或其部分的存在。
與其使整個(gè)生物學(xué)樣品與該生物學(xué)藥物接觸，不如設(shè)想可以用該生物學(xué)樣品的一部分。例如，可將組織活檢樣品與該生物學(xué)藥物接觸，以確定在該組織活檢樣品中以及在從中獲取它的更大的生物學(xué)樣品中癌組織的存在。或者，可將該生物學(xué)藥物與血清或尿樣品接觸，以確定在其中是否存在任何表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域的血管內(nèi)皮細(xì)胞。因?yàn)樵诎┙M織的脈管系統(tǒng)而不是在正常組織的脈管系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域的血管內(nèi)皮細(xì)胞，所以在血清或尿樣品中檢測到該標(biāo)記表明，在活檢樣品取樣的更大的生物學(xué)樣品(如病人)中存在癌組織。
在按照本發(fā)明的檢測癌組織的方法的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案中，使用的該生物學(xué)藥物是這樣一種生物學(xué)藥物，當(dāng)它與前列腺特異性膜抗原胞外域接觸時(shí)，它與前列腺特異性膜抗原結(jié)合并用其內(nèi)在化?？梢杂帽景l(fā)明的方法檢測癌變的前列腺上皮細(xì)胞和含非癌變前列腺上皮細(xì)胞的癌細(xì)胞的癌組織?？捎帽景l(fā)明的方法檢測的含非癌變前列腺上皮細(xì)胞的癌細(xì)胞的癌組織，包括腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌和乳腺癌的癌組織以及轉(zhuǎn)移至肝臟的腺癌的癌組織。
如以上表明，或者適于殺傷、消除或者適于檢測癌細(xì)胞以及正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的生物學(xué)藥物包括諸如單克隆抗體或多克隆抗體的抗體。另外，可以使用抗體片段、半抗體、雜種衍生物、探針和其它分子構(gòu)成物。這些諸如抗體、其結(jié)合部分、探針或配體的生物學(xué)藥物與正常的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞中的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合。結(jié)果，當(dāng)實(shí)施本發(fā)明的方法來殺傷、消除或檢測正常的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞時(shí)，該生物學(xué)藥物與所有的這類細(xì)胞結(jié)合，而不僅僅是與固定的細(xì)胞或與另外的其胞內(nèi)抗原域暴露于細(xì)胞外環(huán)境的細(xì)胞接觸。因此，該生物學(xué)藥物的結(jié)合被濃縮在有前列腺上皮細(xì)胞的區(qū)域，不論這些細(xì)胞是固定還是非固定的、存活的還是壞死的。另外或或者，諸如抗體、其結(jié)合部分、探針或配體的這些生物學(xué)藥物與正常的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞中的前列腺特異性膜抗原或其部分結(jié)合并用其內(nèi)在化。
可以通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)實(shí)現(xiàn)單克隆抗體的生產(chǎn)。大體上，該方法包括首先從哺乳動(dòng)物(如小鼠)的脾中獲得免疫細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)，該哺乳動(dòng)物已事先在體內(nèi)或在體外用目的抗原免疫。然后將該抗體分泌淋巴細(xì)胞與(小鼠)骨髓瘤細(xì)胞或轉(zhuǎn)化的細(xì)胞融合，這些細(xì)胞能在細(xì)胞培養(yǎng)中無限復(fù)制，因此產(chǎn)生無限增殖的、免疫球蛋白分泌細(xì)胞系。將獲得的融合細(xì)胞或雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)，并且就所需要的單克隆抗體的產(chǎn)生篩選獲得的集落。將產(chǎn)生這類抗體的集落克隆，并且在體內(nèi)或體外生長以產(chǎn)生大量的抗體。融合這類細(xì)胞的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐方法的描述參見Kohler和Milstein，Nature256495(1975)，它通過引用結(jié)合在本文中。
通過用本發(fā)明的蛋白或多肽在體內(nèi)免疫動(dòng)物(如小鼠)免疫哺乳動(dòng)物的淋巴細(xì)胞。根據(jù)需要以最多至幾周的間隔重復(fù)這種免疫，以獲得足夠效價(jià)的抗體。最后一次抗原加強(qiáng)后，處死該動(dòng)物并取出脾細(xì)胞。
通過標(biāo)準(zhǔn)的和公知的技術(shù)，例如通過用聚乙二醇(“PEG”)或其它融合劑(參見Mistein和Kohler，Eur.J.Immunol.6511(1976)，它通過引用結(jié)合到本文中)實(shí)現(xiàn)與哺乳動(dòng)物骨髓瘤細(xì)胞或其它能在細(xì)胞培養(yǎng)中無限復(fù)制的融合伙伴(partner)的融合。該無限增殖細(xì)胞系最好是鼠的，但是也可以得自包括但不限于大鼠和人類的其它哺乳動(dòng)物種的細(xì)胞，選擇利用某些營養(yǎng)所需酶缺陷、能夠快速生長、和有良好的融合能力的所述無限增殖細(xì)胞系。許多這類細(xì)胞系是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且其它是經(jīng)常被描述的。
產(chǎn)生多克隆抗體的方法也是公知的。通?？梢酝ㄟ^將本發(fā)明的蛋白或多肽皮下給予新西蘭白兔產(chǎn)生這類抗體，該新西蘭兔已先抽血以獲得免疫前血清?？梢詫⑺隹乖悦總€(gè)部位100μl的總體積在6個(gè)不同的部位注射。每種注射的材料將包含合成的表面活性劑佐劑pluronic多元醇、或在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳后含該蛋白或多肽的磨碎的丙烯酰胺凝膠。然后在第一次注射2周后將所述兔抽血，并且每6周用同樣的抗原定期加強(qiáng)3次。然后在每次加強(qiáng)10天后收集血清樣品。然后通過親和層析用相應(yīng)的抗原捕獲該抗體，從所述血清中回收多克隆抗體。最后，用150mg/Kg IV戊巴比妥將所述兔安樂死。產(chǎn)生多克隆抗體的這種和其它的方法在E.Harlow等編輯的AntibodiesA Laboratory Manual(1989)中公開，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。
除了利用全抗體，本發(fā)明的方法還包括這類抗體的結(jié)合部分的使用。這類結(jié)合部分包括Fab片段、F(ab’)2片段和Fv片段。通過常規(guī)方法可以制備這些抗體片段，例如蛋白水解片段化方法，如J.Goding，在Monoclonal AntibodiesPrinciples and Practice，第98-118頁(N.Y.Academic Press 1983)中描述，它通過引用結(jié)合到本文中。
或者，本發(fā)明的方法可以利用在自然界發(fā)現(xiàn)的或通過重組DNA方法或其它生物學(xué)方法或分子方法合成制備的探針或配體。合適的探針或配體是與用本發(fā)明的單克隆抗體鑒別的前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的分子。其它合適的探針或配體是與前列腺特異性膜抗原結(jié)合并用其內(nèi)在化的分子。這類探針或配體可以是例如蛋白、肽、植物凝集素或核酸探針。
特別推薦使用以下表1中鑒定的單克隆抗體。
表1
可以單獨(dú)使用這些抗體，或作為與其它抗體或其它生物學(xué)藥物的混合物的成分，來治療癌癥或使癌組織(特別是其中的血管內(nèi)皮細(xì)胞)或有不同的表面抗原特征的前列腺上皮細(xì)胞成像。
無論該生物學(xué)藥物是用于治療還是用于診斷，它們均可通過口服、胃腸外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)滴注、腔內(nèi)或囊內(nèi)滴注、在眼內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、損害部位內(nèi)給予，或通過施用于粘膜給予該生物學(xué)藥物，所述粘膜例如鼻、喉和支氣管的粘膜。它們可以單獨(dú)給予或與藥學(xué)上或生理學(xué)上可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑一同給予，它們可以是固體或液體形式，例如片劑、膠囊劑、粉劑、溶液、懸液或乳液。
該固體單位劑量形式可以是常規(guī)類型的形式。該固體形式可以是諸如通常的明膠類型的膠囊劑，含所述生物學(xué)藥物(例如本發(fā)明的抗體或其結(jié)合部分)和載體(例如潤滑劑和諸如乳糖、蔗糖或玉米淀粉的惰性填充劑)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將這些成分用常規(guī)片劑基料(base)(諸如乳糖、蔗糖或玉米淀粉)與粘合劑(如阿拉伯膠、玉米淀粉、土豆淀粉或明膠)和崩解劑(如玉米淀粉、土豆淀粉或海藻酸)以及潤滑劑(像硬脂酸或硬脂酸鎂)結(jié)合制成片劑。
本發(fā)明的生物學(xué)藥物也可以通過生理學(xué)上可接受的稀釋劑和藥用載體中的這些材料的溶液或懸液以注射劑型給予。這類載體包括諸如水和油的無菌液體，加入或沒有加入表面活性劑和其它藥學(xué)上和生理學(xué)上可接受的載體，包括輔助劑、賦形劑或穩(wěn)定劑。例證性的油是那些石油、動(dòng)物、植物或合成來源的油，例如花生油、豆油或礦物油。通常，水、鹽水、含水葡萄糖和相關(guān)的糖溶液以及諸如丙二醇或聚乙二醇的二醇是優(yōu)選的液體載體，特別是對(duì)注射溶液而言。
對(duì)于用作氣霧劑，可以將含本發(fā)明生物學(xué)藥物的溶液或懸液隨同適當(dāng)?shù)膾伾鋭?例如與常規(guī)輔助劑一起的丙烷、丁烷或異丁烷的烴類拋射劑)包裝在加壓的氣霧劑容器中。也可以以諸如在噴霧器或霧化器中的非加壓形式給予本發(fā)明的材料。
可以用所述生物學(xué)藥物在體內(nèi)檢測癌組織(特別是其中的血管內(nèi)皮細(xì)胞)和正常的、良性增生的、和癌變的前列腺上皮細(xì)胞。這種檢測通過標(biāo)記該生物學(xué)藥物、給予哺乳動(dòng)物該生物學(xué)藥物、然后使該哺乳動(dòng)物成像獲得。
按照本發(fā)明可用于診斷成像的標(biāo)記的例子是諸如131I、111In、123I、99mTc、32P、3H、14C和188Rh的放射標(biāo)記、諸如熒光素和若丹明的熒光標(biāo)記、核磁共振活性標(biāo)記、通過正電子發(fā)射X射線斷層照相術(shù)(“PET”)掃描儀可檢測的發(fā)射正電子的同位素、諸如蟲熒光素的化學(xué)發(fā)光物以及諸如過氧化物酶或磷酸酶的酶標(biāo)記。也可以使用短程放射發(fā)射體，例如通過短程檢測器探頭(例如經(jīng)直腸探頭)可檢測的同位素。當(dāng)這些同位素和經(jīng)直腸探頭聯(lián)合使用時(shí)，它們?cè)跈z測前列腺窩復(fù)發(fā)和pelvicnodal病特別有用。通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)可以用這類試劑標(biāo)記該生物學(xué)藥物。例如，對(duì)于涉及抗體的放射標(biāo)記，參見Wensel和Meares，Radioimmunoimaging and Radioimmunotherapy，Elsevier，New York(1983)，它通過引用結(jié)合到本文中。也可參見D.Colcher等，“在無胸腺小鼠中作為用于人類癌癥異種移植物定位的放射藥物的單克隆抗體的用途”，Meth.Enzymol.121802-816(1986)，它通過引用結(jié)合到本文中。
本發(fā)明的放射標(biāo)記的生物學(xué)藥物可以用于體外診斷試驗(yàn)。標(biāo)記的生物學(xué)藥物(例如標(biāo)記抗體、其結(jié)合部分、探針或配體)的比活取決于放射性標(biāo)記的半衰期、同位素的純度和該標(biāo)記怎樣加入該生物學(xué)藥物中。表2列出了幾種常用的同位素、它們的比活和半衰期。在免疫分析試驗(yàn)中，一般該比活越高，敏感性越好。
表2
用表2中列出的放射性同位素標(biāo)記生物學(xué)藥物的方法一般是本領(lǐng)域公知的。在美國專利第4,302,438號(hào)描述了氚標(biāo)記方法，該專利通過引用結(jié)合到本文中。Goding，J.W.(見上文，第124-126頁)和其中引用的參考文獻(xiàn)描述了特別適于鼠單克隆抗體的碘標(biāo)記、氚標(biāo)記和35S標(biāo)記的方法，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。Hunter和Greenwood在Nature144945(1962)、David等在Biochemistry131014-1021(1974)和美國專利第3,867,517和4,376,110號(hào)中描述了碘標(biāo)記諸如抗體、其結(jié)合部分、探針或配體的生物學(xué)藥物的其它方法，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。用于成像的放射標(biāo)記元素包括例如123I、131I、111In和99mTc。Greenwood，F(xiàn).等Biochem.J.89114-123(1963)；Marchalonis J.，Biochem.J.113299-305(1969)和Morrison，M.等在Immunochemistry，289-297(1971)中描述了碘標(biāo)記生物學(xué)藥物的方法，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。Rhodes，B.等在Burchiel，S.等(編輯)，Tumor ImagingThe Radioimmunchemical Detection ofCancer，紐約Masson 111-123(1982)和其中引用的參考文獻(xiàn)中描述了99mTc-標(biāo)記的方法，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。Hnatowich，D.J.等在J.Immul.Methods，65147-157(1983)、Hnatowich，D.等在J.Applied Radiation，35554-557(1984)和Buckley，R.G.等在F.E.B.S.166202-204(1984)中描述了適于111In-標(biāo)記生物學(xué)藥物的方法，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。
在放射標(biāo)記的生物學(xué)藥物的情況中，將該生物學(xué)藥物給予病人，它定位于具有該生物學(xué)藥物與之反應(yīng)的抗原的腫瘤上，并且在體內(nèi)用諸如放射核掃描(用如γ照相機(jī)或發(fā)射X射線斷層照相術(shù))的已知技術(shù)檢測或“成像”。參見例如A.R.Bradwell等，“抗體成像的發(fā)展”，Monoclonal Antihodies for Cancer Detection and Therapy、R.W.Baldwin等，(編輯)，第65-85頁(Academic Press 1985)，它通過引用結(jié)合到本文中?；蛘?，可以用諸如位于Brookhaven NationalLaboratory的稱為Pet VI的正電子發(fā)射經(jīng)軸X射線斷層照相掃描儀，其中該放射標(biāo)記發(fā)射正電子(如11C、18F、15O和13N)。
可以從本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)部分制備熒光團(tuán)和生色團(tuán)標(biāo)記的生物學(xué)藥物。因?yàn)榭贵w和其它蛋白吸收波長在大約310nm以下的光，所以應(yīng)當(dāng)選擇在波長310nm以上、最好是在400nm以上具有實(shí)際吸收的熒光部分。Stryer，在Science，162526(1968)和Brand，L.等在Annual Review of Biochemistry，41843-868(1972)中描述了種種合適的熒光物質(zhì)(flurescer)和生色團(tuán)，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。通過諸如那些在美國專利第3,940,475、4,289,747和4,376,110號(hào)中公開的方法，可以用熒光發(fā)色團(tuán)基團(tuán)標(biāo)記所述生物學(xué)藥物，這些文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。
具有以上描述的多種所需性質(zhì)的一組熒光物質(zhì)是釈噸染料，它包括得自3，6-二羥基-9-henylxanthhydrol和resamines的熒光素以及得自3，6-二氨基-苯基xanthhydrol和麗絲胺若丹明B的若丹明。9-鄰-羧苯基xanthhydrol的若丹明和熒光素衍生物具有一個(gè)9-鄰-羧苯基基團(tuán)。具有諸如氨基和異硫氰酸酯基團(tuán)的熒光素化合物(例如異硫氰酸鹽熒光素和熒光胺)是很容易得到的。另一組熒光化合物是萘胺，它在α或β位置有一個(gè)氨基基團(tuán)。
通過Goding，J.(見上文，第208-249頁)描述的方法，可以用熒光色素或生色團(tuán)標(biāo)記生物學(xué)藥物?？梢杂煤琋MR-活性的19F原子或多種這類原子的指示基團(tuán)標(biāo)記所述生物學(xué)藥物，因?yàn)?i)基本上所有的天然豐富的氟原子是19F同位素，由此基本上所有的含氟化合物均是NMR-活性的；(ii)諸如三氟乙酸酐的許多有化學(xué)活性的多氟代化合物以相對(duì)低的價(jià)錢市售，以及(iii)已發(fā)現(xiàn)許多氟代化合物在醫(yī)學(xué)上可接受用于人類，例如用來作為血紅蛋白替代物運(yùn)載氧的全氟化聚醚。在允許溫育這樣的時(shí)間后，用諸如那些Pykett在Scientific American，24678-88(1982)(通過引用結(jié)合到本文中)中描述的一種儀器進(jìn)行整體NMR測定，以將癌組織(特別是其中的血管內(nèi)皮細(xì)胞)和前列腺上皮細(xì)胞定位和成像。
在重要的是區(qū)別含活的前列腺上皮細(xì)胞區(qū)和含死的前列腺上皮細(xì)胞區(qū)或者區(qū)別活的和死的前列腺上皮細(xì)胞的情況下，可將如上述標(biāo)記的本發(fā)明的抗體(或其它本發(fā)明的生物學(xué)藥物)隨同用僅識(shí)別活的或僅識(shí)別死的前列腺上皮細(xì)胞的抗體和其它生物學(xué)藥物一起給予，所述細(xì)胞用可以區(qū)別于用來標(biāo)記該題述抗體的標(biāo)記物的標(biāo)記物標(biāo)記。通過監(jiān)測這兩種標(biāo)記物在不同位置或時(shí)間的濃度，可以確定活的和死的正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的空間和瞬時(shí)濃度變化。特別是，用既識(shí)別活的前列腺上皮細(xì)胞又識(shí)別死的前列腺上皮細(xì)胞的本發(fā)明標(biāo)記抗體和只識(shí)別死的前列腺上皮細(xì)胞的標(biāo)記7E11抗體可以實(shí)施這個(gè)方法。
也可以利用所述生物學(xué)藥物在體內(nèi)殺傷或消除癌細(xì)胞和正常的、良性增生的以及癌變的前列腺上皮細(xì)胞。這涉及用所述生物學(xué)藥物本身或用與本發(fā)明的生物學(xué)藥物(即識(shí)別正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的生物學(xué)藥物)結(jié)合的細(xì)胞毒藥物。這涉及給予需要這類治療的哺乳動(dòng)物與細(xì)胞毒藥物結(jié)合的所述生物學(xué)藥物。在正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞的情況中，因?yàn)樗錾飳W(xué)藥物識(shí)別前列腺上皮細(xì)胞，所以所述生物學(xué)藥物結(jié)合的任何這類細(xì)胞均被破壞。雖然這種給藥可能破壞正常的前列腺細(xì)胞，但是這不成問題，因?yàn)榍傲邢俨皇巧虼婊钏枰?。雖然前列腺可以間接影響生育力，但是這在接受本發(fā)明治療的病人中似乎不是一個(gè)實(shí)際的考慮。在癌組織的情況下，因?yàn)樗錾飳W(xué)藥物識(shí)別鄰近癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞，所以該生物學(xué)藥物/細(xì)胞毒藥物復(fù)合物與這些血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)合破壞這些血管內(nèi)皮細(xì)胞，因此切斷流向鄰近癌細(xì)胞的血液，并且因此殺傷或消除這些癌細(xì)胞?；蛘撸瑧{借所述生物學(xué)藥物與鄰近癌細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)合，將其定位于癌細(xì)胞附近。因此，利用適當(dāng)?shù)纳飳W(xué)藥物(包括那些有效非區(qū)別性殺傷但僅在短程內(nèi)殺傷細(xì)胞的生物學(xué)藥物)，可以選擇性地殺傷或消除在癌組織中的細(xì)胞(包括癌細(xì)胞)。
可以用本發(fā)明的生物學(xué)藥物來運(yùn)送各種細(xì)胞毒藥物，包括治療藥物、發(fā)出輻射的化合物、植物、真菌或細(xì)菌來源的分子、生物學(xué)蛋白和其混合物。所述細(xì)胞毒性藥物可以是胞內(nèi)作用的細(xì)胞毒性藥物，例短程放射發(fā)射體，包括例如短程高能α-發(fā)射體。
酶活性毒素和其片段的例子是白喉毒素A片段、白喉毒素的非結(jié)合活性片段、外毒素A(來自綠膿假單孢菌(Pseudomonasaeruginosa))、蓖麻毒蛋白A鏈、相思豆毒蛋白A鏈、modeccin A鏈、α-sacrin、某些油桐(Aleurites fordii)蛋白、某些Dianthin蛋白、美洲商陸(Phytolacca americana)蛋白(PAP、PAPII和PAP-S)、Morodica charantia抑制劑、麻瘋樹毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草(Saponaria officinalis)抑制劑、gelonin、絲林霉素、局限曲菌素、酚霉素和伊諾霉素。在WO84/03508和WO85/03508中描述了制備所述免疫毒素的酶活性多肽的方法，這些專利通過引用結(jié)合到本文中。某些細(xì)胞毒性部分得自例如阿霉素、苯丁酸氮芥、道諾霉素、氨甲喋呤、新制癌菌素(neocarzinostatin)和鉑。
所述生物學(xué)藥物與所述細(xì)胞毒藥物綴合的方法已先前描述。Flechner，I.European Journal of Cancer，9741-745(1973)；Ghose，T.等，British Medical Journal，3495-499(1972)和Szekerke，M.等，Neoplasma，19211-215(1972)中描述了苯丁酸氮芥與抗體綴合的方法，它們通過引用結(jié)合到本文中。Hurwitz，E.等在CancerResearch，351175-1181(1975)和Arnon，R等在Cancer Surveys，1429-449(1982)中描述了道諾霉素和阿霉素與抗體綴合的方法，它們通過引用結(jié)合到本文中。在美國專利第4,414,148和Osawa，T.等在Cancer Surveys，1373-388(1982)以及其中引用的參考文獻(xiàn)中描述了制備抗體-蓖麻毒蛋白綴合物的方法，它們通過引用結(jié)合到本文中。在EP 86309516.2中也描述了偶聯(lián)方法，它通過引用結(jié)合到本文中。
本發(fā)明的一個(gè)特別推薦的實(shí)施方案特別適于殺傷或消除正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞，在該實(shí)施方案中，將第一生物學(xué)藥物與僅在非常接近于前體藥物激活劑時(shí)被激活的前體藥物綴合。將該前體藥物激活劑與按照本發(fā)明的第二生物學(xué)藥物綴合，最好是與結(jié)合至前列腺特異性膜抗原分子上的非競爭性位點(diǎn)的第二生物學(xué)藥物綴合。可以通過常規(guī)的競爭結(jié)合測定，確定兩種生物學(xué)藥物是與競爭性結(jié)合位點(diǎn)還是與非競爭性結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。例如，單克隆抗體J591、J533和E99與前列腺特異性膜抗原分子上的競爭性結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。另一方面，單克隆抗體J415結(jié)合的結(jié)合位點(diǎn)不與J591、J533和E99結(jié)合的位點(diǎn)競爭。因此，例如，第一生物學(xué)藥物可以是J591、J533和E99的一個(gè)，而第二生物學(xué)藥物可以是J415?；蛘撸谝簧飳W(xué)藥物可以是J415，而第二生物學(xué)藥物可以是J591、J533和E99之一。在Blakely等“ZD2767，在結(jié)腸腫瘤異種移植物中導(dǎo)致腫瘤消退的抗體指導(dǎo)的酶前體藥物治療的改進(jìn)系統(tǒng)，”Cancer Research，563287-3292(1996)中描述了適用于本發(fā)明實(shí)踐的藥物-前體藥物對(duì)，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。
或者，可以將該生物學(xué)藥物與高能輻射體偶聯(lián)，所述發(fā)射體例如為放射性同位素如γ-發(fā)射體131I，當(dāng)它位于該腫瘤位點(diǎn)時(shí)，導(dǎo)致幾個(gè)細(xì)胞直徑范圍的殺傷。如參見S.E.Order，“在癌癥治療中放射標(biāo)記抗體的治療用途的分析、結(jié)果和未來展望，”Monoclonal Antibodies forCancer Detection and Therapy，R.W.Baldwin等(編輯)，第303-316頁(Academic Press 1985)，它通過引用結(jié)合到本文中。其它適合的放射性同位素包括α-發(fā)射體，如212Bi、213Bi和211At，以及β-發(fā)射體，如186Re和90Y。因?yàn)榍傲邢偕掀ぜ?xì)胞和癌內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)放射相對(duì)敏感，所以預(yù)期放射治療應(yīng)當(dāng)特別有效。
當(dāng)將所述生物學(xué)藥物單獨(dú)使用來殺傷或消除癌細(xì)胞或前列腺上皮細(xì)胞時(shí)，通過引發(fā)例如補(bǔ)體介導(dǎo)的或抗體依賴性細(xì)胞的細(xì)胞毒性的內(nèi)源宿主免疫功能，可以影響這種殺傷或消除作用。
本發(fā)明的生物學(xué)藥物可以作為試劑盒與設(shè)備一起使用和出售，來檢測特定的標(biāo)記。
本發(fā)明的生物學(xué)藥物可以與其它治療性治療方式聯(lián)用。這類其它治療包括外科手術(shù)、放療、低溫外科、熱療、激素治療、化療、疫苗和其它免疫治療。
本發(fā)明還包括涉及用所述生物學(xué)藥物殺傷或消除以用于預(yù)防的方法。例如，可以用這些材料來防止或延緩前列腺癌或其它癌癥的發(fā)展或進(jìn)程。
用本發(fā)明的治療方法來治療前列腺癌和其它癌癥有許多益處。因?yàn)榘凑毡景l(fā)明的生物學(xué)藥物只導(dǎo)向癌細(xì)胞(例如含血管內(nèi)皮細(xì)胞的癌組織的細(xì)胞)和前列腺上皮細(xì)胞，所以不損害其它組織。結(jié)果，用這類生物學(xué)藥物的治療更安全，特別是對(duì)于年齡較大的病人。預(yù)期按照本發(fā)明的治療特別有效，因?yàn)樗鼘⒏咚降纳飳W(xué)藥物(例如抗體或其結(jié)合部分、探針或配體)導(dǎo)向前列腺癌轉(zhuǎn)移的和許多其它主要癌癥轉(zhuǎn)移癌占優(yōu)勢的骨髓和淋巴結(jié)。并且，本發(fā)明的方法特別適于治療前列腺癌，因?yàn)榍傲邢侔┑哪[瘤位點(diǎn)在大小上傾向于更小，因此容易用細(xì)胞毒藥物破壞?？梢杂门R床參數(shù)有效地監(jiān)測按照本發(fā)明的治療，例如，在前列腺癌的情況下，血清前列腺特異性抗原和/或病人的癌癥的病理學(xué)特征，包括階段、Gleason評(píng)分、囊外的侵害、精液的侵害、小泡的侵害或神經(jīng)周的侵害、陽性界限、累及的淋巴結(jié)等?；蛘?，可以用這些參數(shù)來表明何時(shí)應(yīng)當(dāng)使用這類治療。
因?yàn)楸景l(fā)明的生物學(xué)藥物與活的前列腺細(xì)胞結(jié)合，用這些生物學(xué)藥物治療前列腺癌的治療方法比那些導(dǎo)向裂解的前列腺細(xì)胞的治療方法有效得多。由于同樣的原因，通過使用本發(fā)明的生物學(xué)藥物大大提高了確定活的正常的、良性增生的或癌變的前列腺上皮細(xì)胞(以及在癌內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞)的位置的診斷方法和成像方法。另外，區(qū)別活的和死的前列腺細(xì)胞的能力特別有助于監(jiān)測特定治療制度的有效性。
按照國際承認(rèn)用于專利程序的微生物保藏布達(dá)佩斯條約的要求，并作為其補(bǔ)償，已經(jīng)將雜交瘤E99、J415、J533和J591保藏在12301 Parklawn Drive，Rockville，Maryland 20852的美國典型培養(yǎng)物保藏中心(“A.T.C.C.”)。雜交瘤E99于1996年5月2日保藏，并且被A.T.C.C.接受的保藏號(hào)為HB-12101。雜交瘤J415于1996年5月30日保藏，并且被A.T.C.C.接受的保藏號(hào)為HB-12109。雜交瘤J533和J591于1996年6月6日保藏，并且被A.T.C.C.接受的保藏號(hào)分別為HB-12127和HB-12126。
通過以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例實(shí)施例1--人組織從New York Hospital Cornel Univrsity Medical Center(“NYH-CUMC”)的病理學(xué)系獲得良性和惡性組織的新鮮樣本。
實(shí)施例2--組織培養(yǎng)從NYH-CUMC的泌尿腫瘤學(xué)實(shí)驗(yàn)室獲得人類癌癥的培養(yǎng)細(xì)胞系。從美國典型培養(yǎng)物保藏中心(Rockville，MD)獲得前列腺癌細(xì)胞系PC-3(Mickey，D.D.等，“在無胸腺小鼠中作為單層培養(yǎng)物和作為實(shí)體瘤的人類前列腺腺癌細(xì)胞系(DU145)的特征，”Prog.Clin.Biol.Res.，3767-84(1980)，它通過引用結(jié)合到本文中)、DU145(Mickey，D.D.等，“在無胸腺小鼠中作為單層培養(yǎng)物和作為實(shí)體瘤的人類前列腺腺癌細(xì)胞系(DU145)的特征，”Prog.Clin.Biol.Res.，3767-84(1980)，它通過引用結(jié)合到本文中)和LNCaP(Horoszewicz，J.S.等，“人類前列腺癌的LNCaP模型，”Cancer Res.，431809-1818(1983)，它通過引用結(jié)合到本文中)。最初在補(bǔ)加10％FCS、0.1mM非必需氨基酸、2mM L-谷氨酰胺、100單位/ml的青霉素、100μg/ml的鏈霉素和HAT培養(yǎng)基(GIBCO，Grand Island，NY)的RPMI-1640培養(yǎng)基中克隆雜交瘤。在沒有氨基喋呤的同樣的培養(yǎng)基中培養(yǎng)亞克隆。
實(shí)施例3--小鼠單克隆抗體的制備用LNCaP(6×106細(xì)胞)以2周間隔腹膜內(nèi)免疫雌性BALB/c小鼠3次。用已在體外生長的新鮮前列腺上皮細(xì)胞給予最終的腹膜內(nèi)加強(qiáng)免疫。3天后，采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將脾細(xì)胞與SP-2小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合(Ueda，R.，等，“用小鼠單克隆抗體定義的人類腎癌的細(xì)胞表面抗原組織特異性腎糖蛋白的鑒定，”Proc.Natl.Acad.Sci.USA，785122-5126(1981)，它通過引用結(jié)合到本文中)。通過對(duì)存活的LNCaP的玫瑰花結(jié)和補(bǔ)體細(xì)胞毒性分析篩選獲得的克隆的上清液。通過免疫化學(xué)對(duì)正常的腎、結(jié)腸和前列腺篩選被這些分析確定為陽性的克隆。通過有限稀釋將LNCap+/Nml腎-/結(jié)腸-/前列腺+的克隆選擇并亞克隆3次。通過用特化(specified)的兔抗血清(Calbiochem，San Diego，CA)的免疫擴(kuò)散，確定來自每個(gè)克隆的培養(yǎng)上清液的免疫球蛋白類別。用MAPS-II試劑盒(Bio-Rad，Richmond，CA)純化mAb。
實(shí)施例4--mAb的生物素標(biāo)記將純化的mAb在0.1M NaHCO3中透析2小時(shí)。將1ml 1mg/ml的mAb與0.1ml二甲亞砜中的生物素酰胺己酸N-羥基丁二酰胺酯(Sigma)(1mg/ml)混合，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。通過對(duì)磷酸緩沖鹽水(“PBS”)透析，除去未結(jié)合的生物素。
實(shí)施例5--前列腺組織的免疫組化染色將前列腺組織的冷凍切片置于預(yù)先用0.45％明膠溶液包被的Falcon 3034板套(plate cover)(Becton Dickenson，Lincoln Park，NJ)環(huán)內(nèi)，如Marusich，M.F.，在“加工大量的組織切片以進(jìn)行免疫組化雜交瘤篩選的快速方法，”J.Immunol.Methods，111143-145(1988)中描述，它通過引用結(jié)合到本文中。將所述板貯存在-80℃。在室溫下用PBS中的2％多聚甲醛固定冷凍切片10分鐘，并且在用PBS沖洗后，通過用PBS中的0.3％過氧化氫處理10分鐘，封閉內(nèi)源性過氧化物酶活性。將切片與PBS中的2％BSA溫育20分鐘后，在室溫下加入mAb 60分鐘。用PBS充分沖洗玻片，并且在室溫下與在PBS中的10％正常人血清1∶100稀釋的過氧化物酶結(jié)合的兔抗小鼠Ig(DAKOCorp.，Santa Barbara，CA)溫育。在二氨基聯(lián)苯胺反應(yīng)后，將切片用蘇木精復(fù)染色。
實(shí)施例6--血清學(xué)分析如Ueda，R.，等，在“用小鼠單克隆抗體定義的人類腎癌的細(xì)胞表面抗原組織特異性腎糖蛋白的鑒定，”Proc.Natl.Acad.Sci.USA，785122-5126(1981)(它通過引用結(jié)合到本文中)中描述，進(jìn)行抗鼠免疫球蛋白混合紅細(xì)胞吸附分析。用0.01％氯化鉻將抗小鼠Ig(DAKOCorp.)與O型人類紅細(xì)胞綴合以制備指示細(xì)胞。在先前在Terasaki平板(Nunc，Denmark)中預(yù)先倒板的細(xì)胞上進(jìn)行血清學(xué)分析?？贵w與靶細(xì)胞在室溫下溫育1小時(shí)。然后洗靶細(xì)胞，并且加入指示細(xì)胞1小時(shí)。
實(shí)施例7--免疫沉淀將LNCaP細(xì)胞在冰上用生物素-NHSS(以5mM的終濃度)生物素標(biāo)記30分鐘。洗滌后，在冰上將生物素標(biāo)記的細(xì)胞重新懸浮在1ml裂解緩沖液(20mM Tris/HCl pH8.0、1mM EDTA、1mM PMSF、1％ tritonX-100)中30分鐘。將懸浮液在4℃以1500g×100分鐘離心，并且將上清液在4℃以12,000rpm×15分鐘離心。在4℃用兔或山羊抗小鼠IgG-包被的pansorbin預(yù)吸收獲得的溶胞產(chǎn)物1小時(shí)。在4℃將該預(yù)吸收的溶胞產(chǎn)物與該mAb一起溫育過夜。在4℃加入兔或山羊抗小鼠Ig-包被的瓊脂糖珠2小時(shí)，然后洗滌。將這些珠重新懸浮在Tris堿/NaCl中，加入到具有2-巰基乙醇的樣品緩沖液并煮沸5分鐘。離心后，將上清液在SDS-PAGE 12％凝膠上電泳。將該凝膠轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上，用鏈霉抗生物素蛋白-過氧化物酶封閉并染色。將該膜用二氨基聯(lián)苯胺(“DAB”)顯色。
繼續(xù)的免疫沉淀是相似的，除了最初用一種mAb在4℃過夜預(yù)清除該溶胞產(chǎn)物。然后用第二mAb來免疫沉淀該預(yù)清除的溶胞產(chǎn)物。
篩選了接近2000個(gè)克隆，其中如在以上實(shí)施例3中描述的方法選擇4個(gè)克隆。亞克隆后，通過對(duì)存活的(即未固定的)LNCaP的免疫熒光、免疫沉淀和繼續(xù)的免疫沉淀分析來自4個(gè)雜交瘤(E99、J415、J533和J591)的上清液，以證實(shí)對(duì)PSMA的反應(yīng)性。
用LNCaP靶細(xì)胞(最初由Horoszewicz描述，在這里通過引用結(jié)合到本文中，以制備7E11抗體和表達(dá)PSMA的原型細(xì)胞系)的免疫熒光研究表明，E99抗體結(jié)合活的LNCaP細(xì)胞并賦予活的LNCaP細(xì)胞免疫熒光。這與7E11抗體相反(最初由Horoszewicz注意到，在這里通過引用結(jié)合)，7E11抗體僅僅很少或不與活的LNCaP細(xì)胞結(jié)合，但是一旦所述細(xì)胞被固定(殺傷)，則顯示出極強(qiáng)的結(jié)合。
用免疫組化檢查這4種mAb與正常的人組織的反應(yīng)性；這些結(jié)果表示在表3中。
表3通過間接免疫過氧化物酶(immunoperosidase)染色的mAb與人類正常組織的反應(yīng)性
●-陽性；■-弱，異種；○-陰性以上繼續(xù)的免疫沉淀研究表明7E11、E99、J415、J533和J591與同一分子(即PSMA)結(jié)合。
實(shí)施例8--蛋白質(zhì)印跡分析為了證實(shí)抗體E99、J415、J533和J591沉淀與7E11抗體相同的帶(即PSMA)，進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。將精漿(400μg/泳道)或LNCaP溶胞液點(diǎn)樣到12％ SDS-PAGE凝膠的泳道中。電泳后，將該凝膠轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜。將該膜用5％奶粉/Tris緩沖鹽水-吐溫20(“TBST”)在室溫封閉60分鐘。洗滌后，將該膜與第一mAb溫育60分鐘。重復(fù)洗滌后，將該膜與5％奶粉/TBST中的綿羊抗小鼠Ig-過氧化物酶的1/5000稀釋液于室溫下溫育60分鐘。重復(fù)洗滌后，將該腹膜按照廠商指南用稱為“ECL”的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記(Amersham Life Science，International，Arlington Heights，Illinois)顯色。蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示在表4。
表4蛋白印跡數(shù)據(jù)樣品7E11 E99 J415 J533 J591前列腺液100KD帶 100KD帶 100KD帶 100KD帶 100KD帶(精漿)LNCaP細(xì)胞 100Kd和 100Kd和 100Kd和 100Kd和 100Kd和溶胞產(chǎn)物200KD帶 200KD帶 200KD帶 200KD帶 200KD帶實(shí)施例9--mAb與PSMA外域的反應(yīng)性在體外，通過免疫熒光測試(不用固定)新鮮的、活的LNCaP細(xì)胞，以證實(shí)細(xì)胞表面(外面)該檢測的PSMA的表達(dá)。將LNCaP細(xì)胞洗滌并且在室溫下與mAb溫育1小時(shí)，然后與兔抗-鼠Ig-熒光素(DAKO Corp.，Santa Barbara，CA)溫育。這些孔用熒光顯微鏡讀數(shù)。陰性對(duì)照由同型匹配的不相干的mAb組成，而抗I類MHC mAb作為陽性對(duì)照。
免疫熒光和玫瑰花結(jié)分析結(jié)果顯示在表5。
表57E11與新mAb的比較LNCaP活細(xì)胞7E11E99J415J533J591免疫熒光 陰性3+ 3+ 4+ 4+玫瑰花結(jié)測定 陰性+ + + +LNCaP固定的+++ ++++ +++ ++ +++
實(shí)施例10--競爭研究用以下方法進(jìn)行競爭研究，以確定J591、J533、E99和J415是檢測相同的前列腺特異性膜抗原分子的抗原位點(diǎn)(抗原決定簇)還是檢測不同的前列腺特異性膜抗原分子的抗原位點(diǎn)。
將板用作為前列腺特異性膜抗原來源的LNCaP細(xì)胞系溶胞產(chǎn)物包被并洗滌，以除去未結(jié)合的材料。在室溫下將“冷的”(未標(biāo)記的)單克隆抗體在板上溫育1小時(shí)，以允許與其抗原位點(diǎn)結(jié)合。接著，加入或用生物素或用125I標(biāo)記的第二單克隆抗體1小時(shí)。洗滌這些板以除去未結(jié)合的材料。通過在酶聯(lián)免疫測定中用抗生物素蛋白-堿性磷酸酶(在生物素標(biāo)記的第二單克隆抗體的情況下)、或者通過在γ計(jì)數(shù)器中對(duì)所述孔物理計(jì)數(shù)(在125I標(biāo)記的第二單克隆抗體的情況下)，測定與前列腺特異性膜抗原-包被板結(jié)合的第二單克隆抗體的量。對(duì)照由用冷的和標(biāo)記的同一單克隆抗體組成以限定“100％競爭”，或用總體上不同的分子的單克隆抗體(如單克隆抗體I-56，它檢測抑制素，一種與前列腺特異性膜抗原不同的前列腺相關(guān)蛋白)組成以限定“0％競爭”。
結(jié)果表明J591、J533和E99各自干擾、競爭或阻礙另一個(gè)的結(jié)合，但是不阻礙J415的結(jié)合，反之亦然。已知在不同(細(xì)胞內(nèi))位點(diǎn)結(jié)合PSMA的7E11/CYT356不阻礙J591、J533、E99和J415中的任何一個(gè)。
具有與非競爭性位點(diǎn)結(jié)合的單克隆抗體對(duì)允許檢測例如體液中的可溶性抗原的抗體夾層分析的發(fā)展，所述抗原例如為溶解的前列腺特異性膜抗原或其片段。例如，可以用J591從體液中“捕捉”該抗原(如前列腺特異性膜抗原或其片段)，并且在另一個(gè)步驟，通過標(biāo)記的J415檢測該抗原。
在另一種設(shè)置中，例如治療，通過用非競爭性單克隆抗體的聯(lián)合可以增強(qiáng)抗體結(jié)合。例如，假設(shè)在前列腺特異性膜抗原分子上所述非競爭位點(diǎn)每個(gè)出現(xiàn)一個(gè)(represented once)，加入J591加J415的組合物結(jié)合的單克隆抗體分子將比結(jié)合單獨(dú)的每一種單克隆抗體多一倍。結(jié)合兩個(gè)非競爭性抗原結(jié)合位點(diǎn)也可以導(dǎo)致更大的抗原交聯(lián)，并且也許增加內(nèi)在化。而且，因?yàn)樗鰞蓚€(gè)檢測位點(diǎn)在物理學(xué)上位于相同的前列腺特異性膜抗原分子上，所以兩個(gè)單克隆抗體分子與該單個(gè)前列腺特異性膜抗原分子的結(jié)合將所述兩個(gè)單克隆抗體分子互相鄰近放置，這是一種提供最佳藥物-前體藥物互相作用的設(shè)置。例如，可以將單克隆抗體J591與無活性的前體藥物綴合，并且可以將J415與前體藥物激活劑綴合。因?yàn)榍绑w藥物和激活劑將僅結(jié)合在鄰近前列腺特異性膜抗原表達(dá)細(xì)胞(如前列腺癌細(xì)胞)的部位，所以只在那些部位發(fā)生前體藥物活化為該活性形式。
實(shí)施例11--顯微鏡檢查聚焦顯微鏡檢查和免疫電鏡檢查證實(shí)E99、J591、J533和J415在網(wǎng)格蛋白覆蓋的凹處結(jié)合于細(xì)胞膜，并且然后快速內(nèi)在化進(jìn)入核內(nèi)體(細(xì)胞質(zhì)囊)。圖1-4是金標(biāo)記的單克隆抗體J591與細(xì)胞表面互相作用后，隨時(shí)間變化的免疫電子顯微照片。在這些圖中，用黑點(diǎn)表示單克隆抗體的位置。
將活的LNCaP細(xì)胞與J591在4℃溫育1小時(shí)。將這些細(xì)胞洗滌并置于37℃ 0、5、10或15分鐘，這些時(shí)間后，將細(xì)胞固定并加工以進(jìn)行免疫電鏡觀察。圖1顯示37℃溫育前的細(xì)胞?？梢砸姷絁591沿該細(xì)胞膜的外面結(jié)合于該細(xì)胞。在該圖中，“M”表示細(xì)胞的線粒體，而“N”表示細(xì)胞核。圖2顯示在37℃溫育5分鐘后的細(xì)胞。箭頭指示網(wǎng)格蛋白覆蓋的凹陷的形成。圖3顯示37℃溫育10分鐘后的細(xì)胞，可見網(wǎng)格蛋白覆蓋的凹陷的箍斷(pinching off)或胞吞作用，如箭頭所示。圖4顯示在37℃溫育15分鐘后的細(xì)胞，單克隆抗體J591也被包含進(jìn)該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)囊(endocytic vesicle)內(nèi)，如箭頭指示。在圖5中可以看出，在37℃溫育15分鐘后，單克隆抗體J519也包含于核內(nèi)體中，如箭頭指示。
實(shí)施例12--單克隆抗體J591可變區(qū)的測序從107鼠雜交瘤J591細(xì)胞中制備總RNA。測試來自這些細(xì)胞的條件培養(yǎng)基樣品與在前列腺細(xì)胞上的J591與該特異性抗原的結(jié)合。通過ELISA和蛋白印跡，該條件培養(yǎng)基對(duì)于結(jié)合該抗原為陽性。
用逆轉(zhuǎn)錄酶以及小鼠κ恒定區(qū)和小鼠IgG恒定區(qū)的引物制備VHcDNA和VK cDNA。通過PCR用各種小鼠信號(hào)序列引物(對(duì)VH為6個(gè)，對(duì)VK為7個(gè))擴(kuò)增第一鏈cDNA。將擴(kuò)增的DNA凝膠純化并且克隆到pT7Blue載體中。
通過PCR篩選正確插入的獲得的VH和VK克隆，并且通過雙脫氧鏈終止法測定選定克隆的DNA序列。
除引物區(qū)外(因?yàn)檫@個(gè)序列依賴于使用的引物序列)，所有獲得的VH克隆均給出同樣的序列。從用3個(gè)不同的5’引物產(chǎn)生的克隆中獲得這個(gè)序列。一個(gè)克隆在該信號(hào)序列內(nèi)有一個(gè)堿基對(duì)變化，而一個(gè)克隆包含一個(gè)異常的PCR產(chǎn)物。用圖6所示的測序策略，獲得了重鏈的核苷酸序列。它稱為SEQ.ID.No.1，它于對(duì)應(yīng)的反向非編碼鏈(稱為SEQ.ID.No.2)顯示在圖7中。這些序列包括該抗體的部分信號(hào)序列和部分恒定區(qū)。對(duì)應(yīng)的推斷的J591 VH的氨基酸序列稱為SEQ.ID.No.3、SEQ.ID.No.4和SEQ.ID.No.5，也顯示在圖7中。J591重鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.6)GAGGTCCAGCTGCAACAGTCTGGACCTGAACTGGTGAAGCCTGGGACTTCAGTGAGGATATCCTGCAAGACTTCTGGATACACATTCACTGAATATACCATACACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAAACATCAATCCTAACAATGGTGGTACCACCTACAATCAGAAGTTCGAGGACAAGGCCACATTGACTGTAGACAAGTCCTCCAGTACAGCCTACATGGAGCTCCGCAGCCTAACATCTGAGGATTCTGCAGTCTATTATTGTGCAGCTGGTTGGAACTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCAJ591重鏈可變區(qū)(除信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的反向編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.7)
TGAGGAGACTGTGAGAGTGGTGCCTTGGCCCCAGTAGTCAAAGTTCCAACCAGCTGCACAATAATAGACTGCAGAATCCTCAGATGTTAGGCTGCGGAGCTCCATGTAGGCTGTACTGGAGGACTTGTCTACAGTCAATGTGGCCTTGTCCTCGAACTTCTGATTGTAGGTGGTACCACCATTGTTAGGATTGATGTTTCCAATCCACTCAAGGCTCTTTCCATGGCTCTGCTTCACCCAGTGTATGGTATATTCAGTGAATGTGTATCCAGAAGTCTTGCAGGATATCCTCACTGAAGTCCCAGGCTTCACCAGTTCAGGTCCAGACTGTTGCAGCTGGACCTCJ591重鏈可變區(qū)(除信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)相應(yīng)的蛋白序列具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.8)EVQLQQSGPELVKPGTSVRISCKTSGYTFTEYTIHWVKQSHGKSLEWIGNINPNNGGTTYNQKFEDKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCAAGWNFDYWGQGTTLTVSSJ591VH屬于小鼠重鏈IIA亞組(Kabat等，Sequences of Proteinsof Immunological Interest，U.S.Department of Health and HumanServices(1991)(“Kabat”)，它通過引用結(jié)合到本文中)。在圖8中比較了J591 VH的序列與該亞組的共有序列。
與該VH相反，獲得了一個(gè)以上的VK序列。在檢查的15個(gè)VK克隆中，4個(gè)給出了來自融合伙伴的異常小鼠Igk的序列(Carol等，Molecular Immunology，25991-995(1988)，它通過引用結(jié)合到本文中)。這些克隆源于兩個(gè)特異性5”引物。對(duì)這些克隆沒有做更進(jìn)一步的工作。在剩余的克隆中，10個(gè)給出了相同的核苷酸序列，并且一個(gè)克隆VK17給出了另一個(gè)VK序列。這10個(gè)相同的克隆源于3個(gè)5’引物(與給出異常序列的2個(gè)引物不同)，其中一個(gè)也產(chǎn)生VK17。圖9顯示使用的測序策略。
對(duì)應(yīng)于這10個(gè)相同克隆的J591VK的核酸序列(稱為SEQ.ID.No.9)以及對(duì)應(yīng)的反向非編碼鏈的核酸序列(稱為SEQ.ID.No.10)和推斷的稱為SEQ.ID.No.11、SEQ.ID.No.12和SEQ.ID.No.13的氨基酸序列表示在圖10中。這些序列包括該抗體的部分信號(hào)序列和部分恒定區(qū)。對(duì)應(yīng)于這10個(gè)相同克隆的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.14)AACATTGTAATGACCCAATCTCCCAAATCCATGTCCATGTCAGTAGGAGAGAGGGTCACCTTGACCTGCAAGGCCAGTGAGAATGTGGTTACTTATGTTTCCTGGTATCAACAGAAACCAGAGCAGTCTCCTAAACTGCTGATATACGGGGCATCCAACCGGTACACTGGGGTCCCCGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGCAACAGATTTCACTCTGACCATCAGCAGTGTGCAGGCTGAAGACCTTGCAGATTATCACTGTGGACAGGGTTACAGCTATCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA對(duì)應(yīng)于這10個(gè)相同克隆的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的反向非編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.15)TTTTATTTCCAGCTTGGTCCCCCCTCCGAACGTGTACGGATAGCTGTAACCCTGTCCACAGTGATAATCTGCAAGGTCTTCAGCCTGCACACTGCTGATGGTCAGAGTGAAATCTGTTGCAGATCCACTGCCTGTGAAGCGATCGGGGACCCCAGTGTACCGGTTGGATGCCCCGTATATCAGCAGTTTAGGAGACTGCTCTGGTTTCTGTTGATACCAGGAAACATAAGTAACCACATTCTCACTGGCCTTGCAGGTCAAGGTGACCCTCTCTCCTACTGACATGGACATGGATTTGGGAGATTGGGTCATTACAATGTT對(duì)應(yīng)于這10個(gè)相同克隆的相應(yīng)的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的蛋白序列具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.16)NIVMTQSPKSMSMSVGERVTLTCKASENVVTYVSWYQQKPEQSPKLLIYGASNRYTGVPDRFTGSGSATDFTLTISSVQAEDLADYHCGQGYSYPYTFGGGTKLEIK對(duì)應(yīng)于克隆VK17的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.17)
GACATTGTGATGACCCAGTCTCACAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCAGCATCATCTGTAAGGCCAGTCAAGATGTGGGTACTGCTGTAGACTGGTATCAACAGAAACCAGGACAATCTCCTAAACTACTGATTTATTGGGCATCCACTCGGCACACTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATTACTAATGTTCAGTCTGAAGACTTGGCAGATTATTTCTGTCAGCAATATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGGTGCTGGGACCATGCTGGACCTGAAA對(duì)應(yīng)于克隆VK17的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的反向非編碼鏈具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.18)TTTCAGGTCCAGCATGGTCCCAGCACCGAACGTGAGAGGATAGCTGTTATATTGCTGACAGAAATAATCTGCCAAGTCTTCAGACTGAACATTAGTAATGGTGAGAGTGAAGTCTGTCCCAGATCCACTGCCTGTGAAGCGATCAGGGACTCCAGTGTGCCGAGTGGATGCCCAATAAATCAGTAGTTTAGGAGATTGTCCTGGTTTCTGTTGATACCAGTCTACAGCAGTACCCACATCTTGACTGGCCTTACAGATGATGCTGACCCTGTCTCCTACTGATGTGGACATGAATTTGTGAGACTGGGTCATCACAATGTC對(duì)應(yīng)于克隆VK17的相應(yīng)的J591輕(κ)鏈可變區(qū)(除了信號(hào)序列和恒定區(qū)組成部分)的蛋白序列具有以下核苷酸序列(稱為SEQ.ID.No.19)DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSIICKASQDVGTAVDWYQQKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSEDLADYFCQQYNSYPLTFGAGTMLDLKJ591VK屬于小鼠κ鏈V亞組(Kabat，它通過引用結(jié)合到本文中)。在圖11中比較了對(duì)應(yīng)于10個(gè)相同克隆的J591 VK的序列與該亞組的共有序列。
推薦的J591是那些其重鏈可變區(qū)DNA編碼鏈序列對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.6和其重鏈可變區(qū)DNA的非編碼(反義)鏈對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.7的J591。J591的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列最好對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.8。J591的輕鏈可變區(qū)的DNA編碼鏈序列最好對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.17、DNA非編碼鏈(反義)序列對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.18和氨基酸序列對(duì)應(yīng)于SEQ.ID.No.19。
實(shí)施例13--正常組織和癌組織的免疫組化染色將來自23例癌癥的癌組織在液氮中預(yù)冷凍，在干冰上的OCT化合物(Miles，Elkhart，Indiana)中快速冷凍，并且貯存在-80℃。在冷丙酮(4℃)中固定冷凍切片(5μm)10分鐘。在室溫下將mAb(5μm/ml或雜交瘤上清液)溫育1小時(shí)。用作為第二抗體的兔抗鼠Ig-過氧化物酶(Dako，Carpinteria，California)和作為色原的DAB(Sigma，St.Louis，Missouri)檢測抗體結(jié)合。將同型匹配的不相干的抗體用作陰性對(duì)照。
在所有研究的23例癌癥中，包括9/9腎癌、5/5泌尿道上皮癌、6/6結(jié)腸癌、1/1肺癌和1/1乳腺癌以及1/1轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌，mAbJ591、J533、J415和E99與血管內(nèi)皮強(qiáng)烈反應(yīng)。圖2A-2F分別顯示mAb J591與腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌以及轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌的新脈管系統(tǒng)的免疫組化反應(yīng)性。
雖然為了說明的目的已經(jīng)詳細(xì)描述了本發(fā)明，但是不用說，這些細(xì)節(jié)僅僅是為了說明，那些本領(lǐng)域技術(shù)人員可以做變化而不脫離由以下權(quán)利要求書限定的本發(fā)明的精神和范圍。
序列表(1)一般資料(i)申請(qǐng)人Cornell Research Foundation，Inc.
(ii)發(fā)明名稱癌癥的治療和診斷(iii)序列數(shù)19(iv)通信地址(A)收信人Nixon，Hargrave，Devans & Doyle LLP(B)街道Clinton Square，P.O.Box 1051(C)城市Rochester(D)州紐約(E)國家美國(F)郵政編碼14603-1051(v)計(jì)算機(jī)可讀形式(A)媒體類型軟盤(B)計(jì)算機(jī)IBM PC兼容機(jī)(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件PatentIn Release #1.0，版本1.30(vi)當(dāng)前申請(qǐng)數(shù)據(jù)(A)申請(qǐng)?zhí)?B)提交日期(C)分類(vii)在先申請(qǐng)數(shù)據(jù)(A)申請(qǐng)?zhí)朥S 06/022,125(B)提交日期1996年7月18日(vii)在先申請(qǐng)數(shù)據(jù)(A)申請(qǐng)?zhí)朥S 08/838,623(B)提交日期1997年4月9日(viii)代理律師/代理人資料(A)姓名Goldman，Michael L.
(B)注冊(cè)號(hào)30,727(C)參考/檔案號(hào)19603/1174(ix)電訊資料(A)電話(716)263-1304(B)傳真(716)263-1600(2)SEQ ID NO1的信息(i)順序特征(A)長度391個(gè)堿基對(duì)
(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO1TCTCCTGTCA GGAACTGCAG GTGTCCTCTC TGAGGTCCAG CTGCAACAGT CTGGACCTGA 60ACTGGTGAAG CCTGGGACTT CAGTGAGGAT ATCCTGCAAG ACTTCTGGAT ACACATTCAC120TGAATATACC ATACACTGGG TGAAGCAGAG CCATGGAAAG AGCCTTGAGT GGATTGGAAA180CATCAATCCT AACAATGGTG GTACCACCTA CAATCAGAAG TTCGAGGACA AGGCCACATT240GACTGTAGAC AAGTCCTCCA GTACAGCCTA CATGGAGCTC CGCAGCCTAA CATCTGAGGA300TTCTGCAGTC TATTATTGTG CAGCTGGTTG GAACTTTGAC TACTGGGGCC AAGGCACCAC360TCTCACAGTC TCCTCAGCCA AAACGACACC C 391(2)SEQ ID NO2的信息(i)順序特征(A)長度391個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO2GGGTGTCGTT TTGGCTGAGG AGACTGTGAG AGTGGTGCCT TGGCCCCAGT AGTCAAAGTT 60CCAACCAGCT GCACAATAAT AGACTGCAGA ATCCTCAGAT GTTAGGCTGC GGAGCTCCAT120GTAGGCTGTA CTGGAGGACT TGTCTACAGT CAATGTGGCC TTGTCCTCGA ACTTCTGATT180GTAGGTGGTA CCACCATTGT TAGGATTGAT GTTTCCAATC CACTCAAGGC TCTTTCCATG240GCTCTGCTTC ACCCAGTGTA TGGTATATTC AGTGAATGTG TATCCAGAAG TCTTGCAGGA300TATCCTCACT GAAGTCCCAG GCTTCACCAG TTCAGGTCCA GACTGTTGCA GCTGGACCTC360AGAGAGGACA CCTGCAGTTC CTAGCAGGAG A 391(2)SEQ ID NO3的信息(i)順序特征(A)長度123個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性
(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO3Ser Pro Val Arg Asn Cys Arg Cys Pro Leu Gly Pro Ala Ala Thr Val1 5 10 15Trp Thr Thr Gly Glu Ala Trp Asp Phe Ser Glu Asp Ile Leu Gln Asp20 25 30Phe Trp Ile His Ile His Ile Tyr His Thr Leu Gly Glu Ala Glu Pro35 40 45Trp Lys Glu Pro Val Asp Trp Lys His Gln Ser Gln Trp Trp Tyr His50 55 60Leu Gln Ser Glu Val Arg Gly Gln Gly His Ile Asp Cys Arg Gln Val65 70 75 80Leu Gln Tyr Ser Leu His Gly Ala Pro Gln Pro Asn Ile Gly Phe Cys85 90 95Ser Leu Leu Leu Cys Ser Trp Leu Glu Leu Leu Leu Gly Pro Arg His100 105 110His Ser His Ser Leu Leu Ser Gln Asn Asp Thr115 120(2)SEQ ID NO4的信息(i)順序特征(A)長度130個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO4Leu Leu Ser Gly Thr Ala Gly Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln1 5 10 15Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Thr Ser Val Arg Ile Ser Cys20 25 30Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Tyr Thr Ile His Trp Val Lys35 40 45Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly Asn Ile Asn Pro Asn50 55 60Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe Glu Asp Lys Ala Thr Leu65 70 75 80Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu85 90 95Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Gly Trp Asn Phe100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr115 120 125Thr Pro130(2)SEQ ID NO5的信息(i)順序特征(A)長度125個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO5Leu Ser Cys Gln Glu Leu Gln Val Ser Ser Leu Arg Ser Ser Cys Asn15 10 15Ser Leu Asp Leu Asn Trp Ser Leu Gly Leu Gln Gly Tyr Pro Ala Arg20 25 30Leu Leu Asp Thr His Ser Leu Asn Ile Pro Tyr Thr Gly Ser Arg Ala35 40 45Mat Glu Arg Ala Leu Sar Gly Leu Glu Thr Ser Ile Leu Thr Met Val50 55 60Val Pro Pro Thr Ile Arg Ser Ser Arg Thr Arg Pro His Leu Thr Ser65 70 75 80Pro Pro Val Gln Pro Thr Trp Ser Ser Ala Ala His Leu Arg Ile Leu85 90 95Gln Ser Ile Ile Val Gln Leu Val Gly Thr Leu Thr Thr Gly Ala Lys100 105 110Ala Pro Leu Ser Gln Pro Ser Gln Pro Lys Arg His Pro115 120 125(2)SEQ ID NO6的信息(i)順序特征(A)長度345個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO6GAGGTCCAGC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTGGTGAAGC CTGGGACTTC AGTGAGGATA 60TCCTGCAAGA CTTCTGGATA CACATTCACT GAATATACCA TACACTGGGT GAAGCAGAGC120
CATGGAAAGA GCCTTGAGTG GATTGGAAAC ATCAATCCTA ACAATGGTGG TACCACCTAC180AATCAGAAGT TCGAGGACAA GGCCACATTG ACTGTAGACA AGTCCTCCAG TACAGCCTAC240ATGGAGCTCC GCAGCCTAAC ATCTGAGGAT TCTGCAGTCT ATTATTGTGC AGCTGGTTGG300AACTTTGACT ACTGGGGCCA AGGCACCACT CTCACAGTCT CCTCA345(2)SEQ ID NO7的信息(i)順序特征(A)長度345個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO7TGAGGAGACT GTGAGAGTGG TGCCTTGGCC CCAGTAGTCA AAGTTCCAAC CAGCTGCACA 60ATAATAGACT GCAGAATCCT CAGATGTTAG GCTGCGGAGC TCCATGTAGG CTGTACTGGA120GGACTTGTCT ACAGTCAATG TGGCCTTGTC CTCGAACTTC TGATTGTAGG TGGTACCACC180ATTGTTAGGA TTGATGTTTC CAATCCACTC AAGGCTCTTT CCATGGCTCT GCTTCACCCA240GTGTATGGTA TATTCAGTGA ATGTGTATCC AGAAGTCTTG CAGGATATCC TCACTGAAGT300CCCAGGCTTC ACCAGTTCAG GTCCAGACTG TTGCAGCTGG ACCTC345(2)SEQ ID NO8的信息(i)順序特征(A)長度115個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO8Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Thr1 510 15Ser Val Arg Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Tyr20 25 30Thr Ile His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile35 40 45Gly Asn Ile Asn Pro Asn Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe50 55 60
Glu Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr65 70 75 80Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys85 90 95Ala Ala Gly Trp Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr100 105 110Val Ser Ser115(2)SEQ ID NO9的信息(i)順序特征(A)長度363個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO9TTATATGGAG CTGATGGGAA CATTGTAATG ACCCAATCTC CCAAATCCAT GTCCATGTCA 60GTAGGAGAGA GGGTCACCTT GACCTGCAAG GCCAGTGAGA ATGTGGTTAC TTATGTTTCC120TGGTATCAAC AGAAACCAGA GCAGTCTCCT AAACTGCTGA TATACGGGGC ATCCAACCGG180TACACTGGGG TCCCCGATCG CTTCACAGGC AGTGGATCTG CAACAGATTT CACTCTGACC240ATCAGCAGTG TGCAGGCTGA AGACCTTGCA GATTATCACT GTGGACAGGG TTACAGCTAT300CCGTACACGT TCGGAGGGGG GACCAAGCTG GAAATAAAAC GGGCTGATGC TGCACCAACT360GTA 363(2)SEQ ID NO10的信息(i)順序特征(A)長度363個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO10TACAGTTGGT GCAGCATCAG CCCGTTTTAT TTCCAGCTTG GTCCCCCCTC CGAACGTGTA 60CGGATAGCTG TAACCCTGTC CACAGTGATA AICTGCAAGG TCTTCAGCCT GCACACTGCT120GATGGTCAGA GTGAAATCTG TTGCAGATCC ACTGCCTGTG AAGCGATCGG GGACCCCAGT180
GTACCGGTTG GATGCCCCGT ATATCAGCAG TTTAGGAGAC TGCTCTGGTT TCTGTTGATA240CCAGGAAACA TAAGTAACCA CATTCTCACT GGCCTTGCAG GTCAAGGTGA CCCTCTCTCC300TACTGACATG GACATGGATT TGGGAGATTG GGTCATTACA ATGTTCCCAT CAGCTCCATA360TAA 363(2)SEQ ID NO11的信息(i)順序特征(A)長度121個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO11Leu Tyr Gly Ala Asp Gly Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser1 5 10 15Met Ser Met Ser Val Gly Glu Arg Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser20 25 30Glu Asn Val Val Thr Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln35 40 45Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val50 55 60Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr65 70 75 80Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr His Cys Gly Gln85 90 95Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile100 105 110Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val115 120(2)SEQ ID NO12的信息(i)順序特征(A)長度114個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO8Tyr Met Glu Leu Met Gly Thr Leu Pro Asn Leu Pro Asn Pro Cys Pro1 5 10 15
Cys Gln Glu Arg Gly Ser Pro Pro Ala Arg Pro Val Arg Met Trp Leu20 25 30Leu Met Phe Pro Gly Ile Asn Arg Asn Gln Ser Ser Leu Leu Asn Cys35 40 45Tyr Thr Gly His Pro Thr Gly Thr Leu Gly Ser Pro Ile Ala Ser Gln50 55 60Ala Val Asp Leu Gln Gln Ile Ser Leu Pro Ser Ala Val Cys Arg Leu65 70 75 80Lys Thr Leu Gln Ile Ile Thr Val Asp Arg Val Thr Ala Ile Arg Thr85 90 95Arg Ser Glu Gly Gly Pro Ser Trp Lys Asn Gly Leu Met Leu His Gln100 105 110Leu Tyr(2)SEQ ID NO13的信息(i)順序特征(A)長度116個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO13Ile Ile Trp Ser Trp Glu His Cys Asn Asp Pro Ile Ser Gln Ile His1 5 10 15Val His Val Ser Arg Arg Glu Gly His Leu Asp Leu Gln Gly Gln Glu20 25 30Cys Gly Tyr Leu Cys Phe Leu Val Ser Thr Glu Thr Arg Ala Val Ser35 40 45Thr Ala Asp Ile Arg Gly Ile Gln Pro Val His Trp Gly Pro Arg Ser50 55 60Leu His Arg Gln Trp Ile Cys Asn Arg Phe His Ser Asp His Gln Gln65 70 75 80Cys Ala Gly Arg Pro Cys Arg Leu Ser Leu Trp Thr Gly Leu Gln Leu85 90 95Ser Val His Val Arg Arg Gly Asp Gln Ala Gly Asn Lys Thr Gly Cys100 105 110Cys Thr Asn Cys115(2)SEQ ID NO14的信息(i)順序特征(A)長度321個(gè)堿基對(duì)
(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO14AACATTGTAA TGACCCAATC TCCCAAATCC ATGTCCATGT CAGTAGGAGA GAGGGTCACC 60TTGACCTGCA AGGCCAGTGA GAATGTGGTT ACTTATGTTT CCTGGTATCA ACAGAAACCA120GAGCAGTCTC CTAAACTGCT GATATACGGG GCATCCAACC GGTACACTGG GGTCCCCGAT180CGCTTCACAG GCAGTGGATC TGCAACAGAT TTCACTCTGA CCATCAGCAG TGTGCAGGCT240GAAGACCTTG CAGATTATCA CTGTGGACAG GGTTACAGCT ATCCGTACAC GTTCGGAGGG300GGGACCAAGC TGGAAATAAA A 321(2)SEQ ID NO15的信息(i)順序特征(A)長度321個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO15TTTTATTTCC AGCTTGGTCC CCCCTCCGAA CGTGTACGGA TAGCTGTAAC CCTGTCCACA 60GTGATAATCT GCAAGGTCTT CAGCCTGCAC ACTGCTGATG GTCAGAGTGA AATCTGTTGC120AGATCCACTG CCTGTGAAGC GATCGGGGAC CCCAGTGTAC CGGTTGGATG CCCCGTATAT180CAGCAGTTTA GGAGACTGCT CTGGTTTCTG TTGATACCAG GAAACATAAG TAACCACATT240CTCACTGGCC TTGCAGGTCA AGGTGACCCT CTCTCCTACT GACATGGACA TGGATTTGGG300AGATTGGGTC ATTACAATGT T 321(2)SEQ ID NO16的信息(i)順序特征(A)長度107個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQ ID NO16
Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Ser Val Gly1 5 10 15Glu Arg Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser Glu Asn Val Val Thr Tyr20 25 30Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile35 40 45Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly50 55 60Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala65 70 75 80Glu Asp Leu Ala Asp Tyr His Cys Gly Gln Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr85 90 95Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys100 105(2)SEQ ID NO17的信息(i)順序特征(A)長度321個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO17GACATTGTGA TGACCCAGTC TCACAAATTC ATGTCCACAT CAGTAGGAGA CAGGGTCAGC 60ATCATCTGTA AGGCCAGTCA AGATGTGGGT ACTGCTGTAG ACTGGTATCA ACAGAAACCA120GGACAATCTC CTAAACTACT GATTTATTGG GCATCCACTC GGCACACTGG AGTCCCTGAT180CGCTTCACAG GCAGTGGATC TGGGACAGAC TTCACTCTCA CCATTACTAA TGTTCAGTCT240GAAGACTTGG CAGATTATTT CTGTCAGCAA TATAACAGCT ATCCTCTCAC GTTCGGTGCT300GGGACCATGC TGGACCTGAA A 321(2)SEQ ID NO18的信息(i)順序特征(A)長度321個(gè)堿基對(duì)(B)類型核酸(C)鏈型單鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型cDNA(xi)順序描述SEQ ID NO18
TTTCAGGTCC AGCATGGTCC CAGCACCGAA CGTGAGAGGA TAGCTGTTAT ATTGCTGACA 60GAAATAATCT GCCAAGTCTT CAGACTGAAC ATTAGTAATG GTGAGAGTGA AGTCTGTCCC120AGATCCACTG CCTGTGAAGC GATCAGGGAC TCCAGTGTGC CGAGTGGATG CCCAATAAAT180CAGTAGTTTA GGAGATTGTC CTGGTTTCTG TTGATACCAG TCTACAGCAG TACCCACATC240TTGACTGGCC TTACAGATGA TGCTGACCCT GTCTCCTACT GATGTGGACA TGAATTTGTG300AGACTGGGTC ATCACAATGT C 321(2)SEQ ID NO19的信息(i)順序特征(A)長度107個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)順序描述SEQID NO19Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly1 5 10 15Asp Arg Val Ser Ile Ile Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala20 25 30Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile35 40 45Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly50 55 60Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser65 70 75 80Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu85 90 95Thr Phe Gly Ala Gly Thr Met Leu Asp Leu Lys100 10權(quán)利要求
1.結(jié)合前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域的抗體或其抗原結(jié)合部分在制備檢測病人體內(nèi)鄰近癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織中的細(xì)胞的藥物中的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測表達(dá)PSMA的鄰近非前列腺癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織中的細(xì)胞。
2.按照權(quán)利要求1的用途，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG。
3.按照權(quán)利要求1的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
4.按照權(quán)利要求3的用途，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞。
5.按照權(quán)利要求1的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用。
6.結(jié)合前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分在制備檢測病人體內(nèi)正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的藥物中的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞。
7.結(jié)合前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域的抗體或其抗原結(jié)合部分在制備檢測病人體內(nèi)正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的藥物中的用途，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞。
8.結(jié)合前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域且通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫非人哺乳類動(dòng)物產(chǎn)生的抗體或其抗原結(jié)合部分在制備檢測病人體內(nèi)正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的藥物中的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞。
9.按照權(quán)利要求8的用途，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞。
10.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體是單克隆抗體或多克隆抗體。
11.按照權(quán)利要求10的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是選自E99、J415、J533和J591的單克隆抗體。
12.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的。
13.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與前列腺特異性膜抗原的一個(gè)表位結(jié)合，該表位可被由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體識(shí)別。
14.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體競爭結(jié)合。
15.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分選自J591重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J591輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
16.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有J591重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J591輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
17.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分選自J415重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J415輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
18.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有J415重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J415輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
19.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分的氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))、SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))、由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列。
20.權(quán)利要求19的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))的氨基酸序列和由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))的氨基酸序列和由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列。
21.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))和SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))。
22.按照權(quán)利要求21的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有氨基酸序列是SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))的抗原結(jié)合部分和氨基酸序列是SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))的抗原結(jié)合部分。
23.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列以及由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
24.按照權(quán)利要求23的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列如由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列如ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
25.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分的氨基酸序列由選自以下的核酸序列編碼編碼SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列、編碼SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列、編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列，以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的核酸序列。
26.權(quán)利要求25的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列編碼；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的核酸序列編碼。
27.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由選自SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))和SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列編碼。
28.按照權(quán)利要求27的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列編碼。
29.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的核酸序列以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的核酸序列。
30.按照權(quán)利要求29的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
31.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
32.按照權(quán)利要求31的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
33.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分的核酸序列以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分的核酸序列。
34.按照權(quán)利要求33的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)。
35.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗原結(jié)合部分選自Fab片段、F(ab’)2片段和Fv片段。
36.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分可以與前列腺特異性膜抗原內(nèi)在化。
37.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述標(biāo)記選自熒光標(biāo)記、生物學(xué)活性酶標(biāo)記、放射性標(biāo)記、核磁共振活性標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記和生色團(tuán)標(biāo)記。
38.按照權(quán)利要求37的用途，其中所述放射性標(biāo)記是短程輻射體。
39.按照權(quán)利要求37的用途，其中所述放射性標(biāo)記選自32P、125I、3H、14C、188Rh、131I、99mTc和111In。
40.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或抗原結(jié)合部分在還包含藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑的組合物中。
41.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述標(biāo)記是可以用成像工具檢測的。
42.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述標(biāo)記是可以用直腸檢測器探頭檢測的。
43.按照權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)的用途，其中所述標(biāo)記指示正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞在哺乳類動(dòng)物體內(nèi)的定位。
44.按照權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的用途，其中所述標(biāo)記指示非前列腺癌變組織在哺乳類動(dòng)物體內(nèi)的定位。
45.按照權(quán)利要求43或44任一項(xiàng)的用途，其中所述個(gè)體是哺乳類動(dòng)物，優(yōu)選是人。
46.按照權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或抗原結(jié)合部分與鄰近非前列腺癌組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞或非前列腺癌組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合。
47.按照權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的用途，其中所述非前列腺癌選自腎癌細(xì)胞、泌尿道上皮癌細(xì)胞(urothelialcancerous cell)、結(jié)腸癌細(xì)胞、直腸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌的癌細(xì)胞。
48.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述抗體或抗原結(jié)合部分與活細(xì)胞結(jié)合。
49.按照權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)的用途，其中所述前列腺癌細(xì)胞是轉(zhuǎn)移性的前列腺癌細(xì)胞。
50.按照權(quán)利要求49的用途，其中所述轉(zhuǎn)移性的前列腺癌涉及骨或淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。
51.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物是在體外用于一個(gè)樣本。
52.按照權(quán)利要求51的用途，其中所述樣本是血清樣本、尿液樣本或組織活檢樣本。
53.按照權(quán)利要求51的用途，其中所述樣本是人類樣本。
54.按照權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物是在體內(nèi)使用的。
55.一個(gè)用于檢測鄰近非前列腺癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織的體內(nèi)方法，包括提供一種與所述前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測鄰近非前列腺癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織中的細(xì)胞；在允許結(jié)合的條件下，將鄰近非前列腺癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織中的細(xì)胞與所述抗體或其抗原結(jié)合部分接觸；和通過檢測所述標(biāo)記，檢測表達(dá)PSMA的鄰近非前列腺癌組織的細(xì)胞或非前列腺癌組織中的細(xì)胞的存在。
56.按照權(quán)利要求55的方法，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG。
57.按照權(quán)利要求55的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
58.按照權(quán)利要求57的方法，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞。
59.按照權(quán)利要求55的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用。
60.一個(gè)用于檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的體內(nèi)方法，包括提供一種與所述前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞；在允許結(jié)合的條件下，將正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞與所述抗體或其抗原結(jié)合部分接觸；和通過檢測所述標(biāo)記，檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的存在。
61.一個(gè)用于檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的體內(nèi)方法，包括提供一種與所述前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞；在允許結(jié)合的條件下，將正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞與所述抗體或其抗原結(jié)合部分接觸；和通過檢測所述標(biāo)記，檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的存在。
62.一個(gè)用于檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的體內(nèi)方法，包括提供一種與所述前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合且通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，所述標(biāo)記可有效檢測良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞；在允許結(jié)合的條件下，將正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞與所述抗體或其抗原結(jié)合部分接觸；和通過檢測所述標(biāo)記，檢測正常的、良性增生的和癌變的前列腺細(xì)胞的存在。
63.按照權(quán)利要求62的方法，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞
64.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體是單克隆抗體或多克隆抗體。
65.按照權(quán)利要求64的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是選自E99、J415、J533和J591的單克隆抗體。
66.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的。
67.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與前列腺特異性膜抗原的一個(gè)表位結(jié)合，該表位可被由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體識(shí)別。
68.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與由ATCC保藏號(hào)選自HB-12101、HB-12109、HB-12127和HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體競爭結(jié)合。
69.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分選自J591重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J591輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
70.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有J591重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J591輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
71.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分選自J415重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J415輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
72.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有J415重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分和J415輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分。
73.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分的氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))、SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))、由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列。
74.權(quán)利要求73的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))的氨基酸序列和由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))的氨基酸序列和由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的一個(gè)氨基酸序列。
75.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))和SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))。
76.按照權(quán)利要求75的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有氨基酸序列是SEQ ID NO8(重鏈可變區(qū))的抗原結(jié)合部分和氨基酸序列是SEQ ID NO19(輕鏈可變區(qū))的抗原結(jié)合部分。
77.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列以及由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
78.按照權(quán)利要求77的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列如由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列如ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
79.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，所述抗原結(jié)合部分的氨基酸序列選自以下核酸序列編碼SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列、編碼SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列、編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列，以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的核酸序列。
80.權(quán)利要求79的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列編碼；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的核酸序列編碼。
81.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由選自SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))和SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列編碼。
82.按照權(quán)利要求81的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO6(重鏈可變區(qū))的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO17(輕鏈可變區(qū))的核酸序列編碼。
83.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的核酸序列以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的核酸序列。
84.按照權(quán)利要求83的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的核酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列。
85.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
86.按照權(quán)利要求85的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
87.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分的核酸序列以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)的抗原結(jié)合部分的核酸序列。
88.按照權(quán)利要求87的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的重鏈可變區(qū)，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的輕鏈可變區(qū)。
89.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗原結(jié)合部分選自Fab片段、F(ab’)2片段和Fv片段。
90.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分可以與前列腺特異性膜抗原內(nèi)在化。
91.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述標(biāo)記選自熒光標(biāo)記、生物學(xué)活性酶標(biāo)記、放射性標(biāo)記、核磁共振活性標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記和生色團(tuán)標(biāo)記。
92.按照權(quán)利要求91的方法，其中所述放射性標(biāo)記是短程輻射體。
93.按照權(quán)利要求91的方法，其中所述放射性標(biāo)記選自32P、125I、3H、14C、188Rh、131I、99mTc和111In。
94.按照權(quán)利要求55-59任一項(xiàng)的方法，其中所述非前列腺癌選自腎癌細(xì)胞、泌尿道上皮癌細(xì)胞(urothelialcancerous cell)、結(jié)腸癌細(xì)胞、直腸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌的癌細(xì)胞。
95.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或抗原結(jié)合部分與活細(xì)胞結(jié)合。
96.按照權(quán)利要求60-63任一項(xiàng)的方法，其中所述前列腺癌細(xì)胞是轉(zhuǎn)移性的前列腺癌細(xì)胞。
97.按照權(quán)利要求96的方法，其中所述轉(zhuǎn)移性的前列腺癌涉及骨或淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。
98.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述樣本是血清樣本、尿液樣本或組織活檢樣本。
99.按照權(quán)利要求55-63任一項(xiàng)的方法，其中所述樣本是人類樣本。
100.檢測非前列癌的試劑盒包括結(jié)合前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域的抗體或其抗原結(jié)合部分，其與一個(gè)標(biāo)記連接，以及檢測所述標(biāo)記的工具。
101.按照權(quán)利要求100的試劑盒，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG。
102.按照權(quán)利要求100的試劑盒，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
103.按照權(quán)利要求102的試劑盒，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞。
104.按照權(quán)利要求100的試劑盒，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用。
105.按照權(quán)利要求100-104的試劑盒，其中的癌癥選自腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、乳腺癌或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌、轉(zhuǎn)移到骨髓的癌癥、轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)的癌癥或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌。
106.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，以及檢測所述標(biāo)記的工具。
107.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG且所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，以及檢測所述標(biāo)記的工具。
108.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合且通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分與一個(gè)標(biāo)記連接，以及檢測所述標(biāo)記的工具。
109.按照權(quán)利要求100-108任一項(xiàng)的試劑盒，其中所述標(biāo)記選自熒光標(biāo)記、生物學(xué)活性酶標(biāo)記、放射性標(biāo)記、核磁共振活性標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記和生色團(tuán)標(biāo)記。
110.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，一個(gè)標(biāo)記；以及檢測所述標(biāo)記的工具。
111.按照權(quán)利要求110的試劑盒，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG。
112.按照權(quán)利要求110的試劑盒，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
113.按照權(quán)利要求112的試劑盒，其中所述表達(dá)PSMA的細(xì)胞是LNCaP細(xì)胞。
114.按照權(quán)利要求110的試劑盒，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用。
115.按照權(quán)利要求110-114的試劑盒，其中的癌癥選自腎癌、泌尿道上皮癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、乳腺癌或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌、轉(zhuǎn)移到骨髓的癌癥、轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)的癌癥或轉(zhuǎn)移到肝臟的腺癌。
116.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分；一個(gè)標(biāo)記；以及檢測所述標(biāo)記的工具。
117.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG；一個(gè)標(biāo)記；以及檢測所述標(biāo)記的工具。
118.檢測非前列癌的試劑盒包括一種與前列腺特異性膜抗原(PSMA)胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的；一個(gè)標(biāo)記；以及檢測所述標(biāo)記的工具。
119.按照權(quán)利要求110-118任一項(xiàng)的試劑盒，其中所述標(biāo)記選自熒光標(biāo)記、生物學(xué)活性酶標(biāo)記、放射性標(biāo)記、核磁共振活性標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記和生色團(tuán)標(biāo)記。
120.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQID NO8(可變重鏈)的氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO19(可變輕鏈)的氨基酸序列。
121.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(可變重鏈)的氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO19(可變輕鏈)的氨基酸序列。
122.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO8(可變重鏈)的氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自SEQ ID NO19(可變輕鏈)的氨基酸序列。
123.按照權(quán)利要求120的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
124.按照權(quán)利要求121的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
125.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的一個(gè)氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的一個(gè)氨基酸序列。
126.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的一個(gè)氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的一個(gè)氨基酸序列。
127.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的一個(gè)氨基酸序列和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列是由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的一個(gè)氨基酸序列。
128.按照權(quán)利要求125的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
129.按照權(quán)利要求126的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
130.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO6(可變重鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列編碼；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
131.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO6(可變重鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列編碼；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
132.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO6(可變重鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列編碼；和一個(gè)抗原結(jié)合部分，其由選自SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列或由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
133.按照權(quán)利要求130的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
134.按照權(quán)利要求131的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
135.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ IDNO6(可變重鏈)的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列編碼。
136.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO6(可變重鏈)的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列編碼。
137.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO6(可變重鏈)的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由SEQ ID NO17(可變輕鏈)的核酸序列編碼。
138.按照權(quán)利要求135的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
139.按照權(quán)利要求136的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
140.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列。
141.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列。
142.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的核酸序列，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12126的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列。
143.按照權(quán)利要求140的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
144.按照權(quán)利要求141的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
145.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
146.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
147.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列選自由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
148.按照權(quán)利要求145的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
149.按照權(quán)利要求146的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
150.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
151.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
152.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分，以及由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的氨基酸序列的抗原結(jié)合部分。
153.按照權(quán)利要求150的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
154.按照權(quán)利要求151的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
155.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列，以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列。
156.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列，以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列。
157.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由一個(gè)核酸序列編碼，所述核酸序列選自編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列，以及編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的抗原結(jié)合部分的核酸序列。
158.按照權(quán)利要求155的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
159.按照權(quán)利要求156的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
160.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合且容許具細(xì)胞內(nèi)活性的細(xì)胞毒性劑的治療性應(yīng)用的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
161.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體是IgG或其抗原結(jié)合部分是衍生自IgG，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
162.一種與前列腺特異性膜抗原胞外域結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的，以及所述抗體或其抗原結(jié)合部分含有一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變重鏈的的核酸序列編碼，以及一個(gè)抗原結(jié)合部分，其氨基酸序列由編碼由ATCC保藏號(hào)HB-12109的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的可變輕鏈的核酸序列編碼。
163.按照權(quán)利要求160的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
164.按照權(quán)利要求161的抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分是通過用表達(dá)PSMA的細(xì)胞致免疫小鼠產(chǎn)生的。
全文摘要
本發(fā)明涉及或者識(shí)別前列腺特異性膜抗原胞外域，或者與前列腺特異性膜抗原結(jié)合并用其內(nèi)在化的抗體或其結(jié)合部分、探針、配體或其它生物學(xué)藥物的用途。可以將這些生物學(xué)藥物標(biāo)記并用于檢測癌組織，特別是鄰近或包含表達(dá)前列腺特異性膜抗原胞外域的血管內(nèi)皮細(xì)胞的癌組織。也可以將所述標(biāo)記的生物學(xué)藥物用于檢測正常的、良性增生的或癌變的前列腺上皮細(xì)胞或其部分。它們也可以單獨(dú)使用或與有效消除或殺傷這類細(xì)胞的物質(zhì)結(jié)合，作為前列腺癌或其它癌癥的治療。還公開了四個(gè)雜交瘤細(xì)胞系，它們每個(gè)均產(chǎn)生識(shí)別正常的、良性增生的和癌變的前列腺上皮細(xì)胞或其部分的前列腺特異性膜抗原胞外域的單克隆抗體。
文檔編號(hào)C07K16/30GK1673744SQ20041005442
公開日2005年9月28日 申請(qǐng)日期1997年7月17日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月18日
發(fā)明者N·H·邦德 申請(qǐng)人:康乃爾研究基金會(huì)有限公司