專利名稱：作為轉(zhuǎn)化生長因子(tgf)抑制劑的吡唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型吡唑化合物，包括其衍生物，本發(fā)明還涉及用于其制備的中間體，含有它們的藥用組合物及其藥用用途。本發(fā)明的化合物是轉(zhuǎn)化生長因子(“TGF”)-β信號(hào)途徑的有效抑制劑。它們可用于治療TGF-β相關(guān)的疾病狀態(tài)，包括例如癌癥，以及纖維變性疾病。
TGF-β既激活抗增殖的信號(hào)級(jí)聯(lián)放大又激活促腫瘤的信號(hào)級(jí)聯(lián)放大。已鑒定了三種哺乳動(dòng)物TGF-β同種型(TGF-βI、-βII和-βIII)。TGF-β產(chǎn)生促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，而其阻斷強(qiáng)化抗腫瘤活性。TGF-β的阻斷增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)并抑制轉(zhuǎn)移。因此本領(lǐng)域需要抑制TGF-β信號(hào)途徑的化合物。如下所述，本發(fā)明滿足了這種要求。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了含有核心吡唑環(huán)的新型化合物，該核心吡唑環(huán)取代有至少一個(gè)取代或未取代的2-吡啶基部分和至少一個(gè)本文所述的R1部分；及其所有藥用可接受的鹽、前藥、互變異構(gòu)體、水合物和溶劑化物。在本發(fā)明的化合物中，取代或未取代的2-吡啶基部分和R1部分環(huán)繞核心吡唑環(huán)可以處于1，2-、1，3-或1，4-關(guān)系；優(yōu)選處于1，2-或鄰位關(guān)系。
本發(fā)明提供了式(Ia)的化合物 及其所有藥用可接受的鹽、前藥、互變異構(gòu)體、水合物和溶劑化物，其中R1、R3、R4、R6和s各自如本文所述，附帶條件是R1含有至少一個(gè)雜原子。
在如上所述的式(Ia)中R1是飽和、不飽和或芳族C3-C20一-、二-或多環(huán)，它任選含有至少一個(gè)選自N、O和S的雜原子，其中R1可以任選進(jìn)一步獨(dú)立地被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下組的部分所取代羰基、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、羥基、氧代、巰基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C6)烷氧基、(C5-C10)芳基或(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)芳氧基或(C5-C10)雜芳基氧基、(C5-C10)芳(C1-C6)烷基或(C5-C10)雜芳(C1-C6)烷基、(C5-C10)芳(C1-C6)烷氧基或(C5-C10)雜芳(C1-C6)烷氧基、HO-(C＝O)-、酯、酰氨基、醚、氨基、氨基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、(C5-C10)雜環(huán)基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-和二(C1-C6)烷基氨基、氰基、硝基、氨基甲?；?、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基氨基羰基、二(C1-C6)烷基氨基羰基、(C5-C10)芳基羰基、(C5-C10)芳氧基羰基、(C1-C6)烷基磺?；?C5-C10)芳基磺酰基；優(yōu)選，R1可以任選進(jìn)一步獨(dú)立地取代有0-2個(gè)獨(dú)立地選自如下組的部分(但不限于此)鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C5-C10)芳(C1-C6)烷氧基或(C5-C10)雜芳(C1-C6)烷氧基、氨基、氨基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基和(C5-C10)雜環(huán)基(C1-C6)烷基；每個(gè)R3獨(dú)立地選自如下基團(tuán)氫、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、苯氧基、(C5-C10)雜芳基-O-、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、(C1-C6)烷基-S-、(C1-C6)烷基-SO2-、(C1-C6)烷基-NH-SO2-、O2N-、NC-、氨基、Ph(CH2)1-6HN-、(C1-C6)烷基HN-、(C1-C6)烷基氨基、[(C1-C6)烷基]2-氨基、(C1-C6)烷基-SO2-NH-、氨基(C＝O)-、氨基O2S-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-[(((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、H2N(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-和(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-；優(yōu)選，R3是氫或(C1-C6)烷基；更優(yōu)選，R3是氫或甲基；其中R3中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基、氨基任選被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下組的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵代(C1-C6)烷基、鹵素、H2N-、Ph(CH2)1-6HN-和(C1-C6)烷基HN-；s是1-5的整數(shù)；優(yōu)選1-2；更優(yōu)選1；R4選自氫、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、苯氧基、(C5-C10)雜芳基-O-、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、(C1-C6)烷基-S-、(C1-C6)烷基-SO2-、(C1-C6)烷基-NH-SO2-、O2N-、NC-、氨基、Ph(CH2)1-6NH-、烷基NH-、(C1-C6)烷基氨基、[(C1-C6)烷基]2-氨基、(C1-C6)烷基-SO2-NH-、氨基(C＝O)-、氨基SO2-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-NH、苯基-(C＝O)-((C1-C6)烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、H2N(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2-N-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、苯基-((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-和(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-；優(yōu)選，R4是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷基-(C＝O)-或(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-；其中R4中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基和氨基任選被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下組的取代基取代C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵代(C1-C6)烷基、鹵素、H2N-、Ph(CH2)1-6-NH-和(C1-C6)烷基NH-；并且R6選自氫、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基-(SO2)-、苯基-(SO2)-、H2N-(SO2)-、(C1-C6)烷基-NH-(SO2)-、((C1-C6)烷基)2N-(SO2)-、苯基-NH-(SO2)-、(苯基)2N-(SO2)-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-O-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-(C＝O)-、H2N-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2N-(C＝O)-、(苯基)2N-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-和(C3-C10)環(huán)烷基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-；優(yōu)選，R6是氫或(C1-C6)烷基；更優(yōu)選，氫或甲基；其中R6中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、芐基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基、氨基任選取代有至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下基團(tuán)的部分鹵素、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、苯基、芐基、(C5-C10)雜環(huán)、(C5-C10)雜芳基、(C1-C6)烷基-SO2-、甲?；C-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-O-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2-N-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、苯氧基、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C5-C10)雜芳基-O-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-O-、苯基-(C＝O)-O-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-O-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-O-、O2N-、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基)2-氨基、甲酰氨基(formamidyl)、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-NH-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-NH-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-[(C1-C6)烷基-N]-、(C1-C6)烷基-SO2NH-、(C3-C10)環(huán)烷基-SO2NH-、苯基-SO2NH-、(C5-C10)雜環(huán)-SO2NH-和(C5-C10)雜芳基-SO2NH-；優(yōu)選，R6取代有0-2個(gè)獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基和(C3-C10)環(huán)烷基的基團(tuán)；其中R6取代基中的苯基或雜芳基部分任選進(jìn)一步取代有至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下組的基團(tuán)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、全氟(C1-C6)烷基和全氟(C1-C6)烷氧基；附帶條件是R1含有至少一個(gè)雜原子。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 或 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是
或 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 或 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 或 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 或 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是
或 其中R2a如本文中所述。
上面每個(gè)R1可以任選進(jìn)一步被至少一個(gè)R2a基團(tuán)取代，如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，是 其中R2a如本文中所述并且其中限制性語言不適用。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，選自如下 和 并且其中限制性語言不適用。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，選自如下 和 并且其中限制性語言不適用。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，式(Ia)中的R1，如上所述，選自如下 和 其中R2a如本文中所述并且其中限制性語言不適用。
本發(fā)明還提供了藥用組合物，包括至少一種本發(fā)明的化合物和藥用可接受的載體。
本發(fā)明還提供了本發(fā)明的化合物的制備方法。
本發(fā)明還提供了一種預(yù)防或治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的方法，包括步驟向患有TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的動(dòng)物或人施用治療有效量的至少一種本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明還提供了本發(fā)明的化合物在制備用于預(yù)防或治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的藥物中的用途。
定義本文所用的冠詞“一”既指單數(shù)形式又指復(fù)數(shù)形式的所指對(duì)象。
本文所用的術(shù)語“烷基”以及本文所指的其它基團(tuán)(例如烷氧基)的烷基部分是指直鏈或支鏈飽和烴(例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基)。
本文所用的術(shù)語“環(huán)烷基”是指單環(huán)或二環(huán)碳環(huán)(例如，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、二環(huán)[2.2.1]庚基、二環(huán)[3.2.1]辛基和二環(huán)[5.2.0]壬基)。
本文所用的術(shù)語“鹵素”或“鹵”是指包括氟、氯、溴或碘或者氟化物、氯化物、溴化物或碘化物。
本文所用的術(shù)語“鹵素取代的烷基”或“鹵代烷基”是指被一個(gè)或多個(gè)如上所述的鹵素取代的如上所述的烷基，包括但不限于，氯甲基、二氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基和2，2，2-三氯乙基。
本文所用的術(shù)語“全鹵代烷基”是指其中烷基上的每個(gè)氫都被如上所述的“鹵素”或“鹵”替換的如上所述的烷基。
本文所用的術(shù)語“鏈烯基”是指含有至少2個(gè)碳原子和至少一個(gè)雙鍵的直鏈或支鏈烴鏈基團(tuán)。實(shí)例包括但不限于，乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、異丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基和2-丁烯基。
本文所用的術(shù)語“炔基”是指含有至少一個(gè)三鍵的直鏈或支鏈烴鏈基團(tuán)，包括但不限于，乙炔基、丙炔基和丁炔基。
本文所用的術(shù)語“羰基”是指＞C＝O部分。烷氧基羰基氨基(即烷氧基(C＝O)-NH-)是指烷基氨基甲酸酯基團(tuán)。羰基在本文中也等同地定義為(C＝O)。
本文所用的術(shù)語“苯基-[(烷基)-N]-(C＝O)-”是指下式的N.N′-二取代的酰胺基團(tuán) 本文所用的術(shù)語“芳基”是指芳族基團(tuán)，例如苯基、萘基、四氫萘基和茚滿基。
本文所用的術(shù)語“雜芳基”是指含有至少一個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子的芳族基團(tuán)。例如，雜芳基包括但不限于，吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡咯基、噁唑基(例如，1，3-噁唑基、1，2-噁唑基)、噻唑基(例如，1，2-噻唑基、1，3-噻唑基)、吡唑基、四唑基、三唑基(例如，1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基)、噁二唑基(例如，1，2，3-噁二唑基)、噻二唑基(例如，1，3，4-噻二唑基)、喹啉基、異喹啉基、苯并噻吩基、苯并呋喃基和吲哚基。
本文所用的術(shù)語“雜環(huán)”是指飽和或不飽和C3-C20單環(huán)、二環(huán)或多環(huán)基團(tuán)，含有至少一個(gè)選自N、O和S的雜原子。雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于，氮雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、咪唑烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、噁唑烷基、噻唑烷基、吡唑烷基、硫代嗎啉基、四氫噻嗪基、四氫噻二嗪基、嗎啉基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫二嗪基、噁嗪基、噁噻嗪基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、奎寧環(huán)基、色滿基、異色滿基、benzocazinyl等。單環(huán)飽和或不飽和環(huán)系的實(shí)例是四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、咪唑烷-1-基、咪唑烷-2-基、咪唑烷-4-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-1-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌嗪-1-基、哌嗪-2-基、哌嗪-3-基、1，3-噁唑烷-3-基、異噻唑烷、1，3-噻唑烷-3-基、1，2-吡唑烷-2-基、1，3-吡唑烷-1-基、硫代嗎啉-基、1，2-四氫噻嗪-2-基、1，3-四氫噻嗪-3-基、四氫噻二嗪-基、嗎啉-基、1，2-四氫二嗪-2-基、1，3-四氫二嗪-1-基、1，4-噁嗪-2-基和1，2，5-噁噻嗪-4-基。
本文所用的術(shù)語“藥用可接受的酸加成鹽”是指無毒酸加成鹽，即，由藥理學(xué)可接受的陰離子衍生的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、糖二酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和撲酸鹽[即，1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸)]鹽。
本文所用的術(shù)語“藥用可接受的堿加成鹽”是指無毒堿加成鹽，即，由諸如以下的藥理學(xué)可接受的陽離子衍生的鹽堿金屬陽離子(例如，鉀和鈉)和堿土金屬陽離子(例如，鈣和鎂)，銨或水溶性胺加成鹽例如N-甲基葡糖胺-(葡甲胺)和低級(jí)鏈烷醇銨和藥學(xué)可接受的有機(jī)胺的其它堿鹽。
本文所用的術(shù)語“合適的取代基”、“取代基”或“取代的”是指化學(xué)和藥學(xué)可接受的官能團(tuán)，即，不取消本發(fā)明化合物的抑制和/或治療活性的部分。這些合適的取代基可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)選擇。合適取代基的例示性實(shí)例包括但不限于，羰基、鹵素、鹵代烷基、全氟烷基、全氟烷氧基、烷基、鏈烯基、炔基、羥基、氧代、巰基、烷硫基、烷氧基、芳基或雜芳基、芳氧基或雜芳氧基、芳烷基或雜芳烷基、芳烷氧基或雜芳烷氧基、HO-(C＝O)-、酯、酰氨基、醚、氨基、烷基-和二烷基氨基、氰基、硝基、氨基甲酰基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、烷基磺?；?、芳基磺?；?。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解許多取代基可以被另外的取代基取代。
本文所用的術(shù)語“TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)”是指由TGF-β產(chǎn)生而介導(dǎo)的任意疾病狀態(tài)。
本文所用的術(shù)語“Ph”是指苯基。
本文所用的術(shù)語“任選含有至少一個(gè)雜原子的飽和、不飽和或芳族C3-C20一-、二-或多環(huán)環(huán)”是指，但不限于，

和 其中R2a獨(dú)立地選自如下基團(tuán)(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C10)環(huán)烷基、(C5-C10)芳基、(C1-C6)烷基芳基、氨基、羰基、羧基、(C2-C6)酸、(C1-C6)酯、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)基、(C1-C6)烷氧基、硝基、鹵素、羥基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)酯和美國申請(qǐng)No.10/094,717、10/094,760和10/115,952中所述的那些基團(tuán)，將這些文獻(xiàn)各自全文引入本文作為參考；并且其中R2a中的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、氨基、酸、酯、雜芳基、雜環(huán)基和烷氧基任選被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下的部分所取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C-C6)烷基、苯基、(C3-C10)環(huán)烷基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、甲?；?、NC-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2-N-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、O2N-、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基)2-氨基、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、H2N-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-NH-、((C1-C6)烷基)2N-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、((C1-C6)烷基)2N-(C＝O)-[(C1-C6)烷基-N]-、苯基-HN-(C＝O)-NH、(苯基)2N-(C＝O)-NH-、苯基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、(苯基-)2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-O-(C＝O)-NH-、苯基-O-(C＝O)-[(烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-SO2NH-、苯基-SO2NH-、(C1-C6)烷基-SO2-、苯基-SO2-、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、苯氧基、(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-、(C1-C6)酯-(C1-C6)烷基-O-、苯基-(C＝O)-O-、H2N-(C＝O)-O-、(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-O-、((C1-C6)烷基)2N-(C＝O)-O-、苯基-HN-(C＝O)-O-和(苯基)2N-(C＝O)-O-。
發(fā)明詳述以下反應(yīng)方案例示了本發(fā)明化合物的制備。本發(fā)明的化合物可以通過與美國申請(qǐng)No.10/094,717、10/094,760和10/115,952和WO02/40476中所述類似的方法制備。除非另有說明，反應(yīng)方案和其后討論中的R1、R3、R4、R6、R2a和s如上定義。
方案1 反應(yīng)方案1涉及式Ia的化合物的制備。參照反應(yīng)方案1，由式II的醛通過首先用芳香胺，例如苯胺，在極性溶劑中處理而制備式III的化合物。合適的溶劑包括乙酸乙酯、乙酸異丙酯或四氫呋喃，優(yōu)選乙酸異丙酯。將所得反應(yīng)混合物加熱至約50℃-約100℃的溫度，優(yōu)選約60℃，然后用亞磷酸二苯酯慢慢處理。將反應(yīng)混合物的溫度保持約30分鐘-約3小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)，然后冷卻至室溫過夜。按照下面所述的制備E制備式II的化合物。
式V的化合物是由式III的化合物通過與式IV的醛在堿，例如叔丁醇鉀的存在下，在極性溶劑中反應(yīng)而制得的。合適的溶劑包括乙酸乙酯、乙酸異丙酯或四氫呋喃，優(yōu)選四氫呋喃和乙酸異丙酯的混合物。前述反應(yīng)是在約0℃-約100℃的溫度，優(yōu)選約22℃(室溫)下，進(jìn)行約30分鐘-約5小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。所得反應(yīng)混合物然后用酸，例如鹽酸，處理約30分鐘-約5小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。
式Ia的化合物是由式V的化合物通過用過量二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛，DMF-DMA處理，并在約60℃-約100℃的溫度，優(yōu)選約80℃下，加熱neat約30分鐘-約4小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)而制得的。在除去過量的二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛后，加入在極性溶劑中的合適肼，例如H2NNHR6。對(duì)前述反應(yīng)合適的溶劑包括甲醇和乙醇。前述反應(yīng)在約0℃-約50℃的溫度，優(yōu)選約22℃(室溫)下，進(jìn)行約1-約4小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。
或者，式Va的化合物可以由式V的化合物通過與堿例如二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰于溶劑如四氫呋喃中在-78℃下反應(yīng)接著加入活化羧酸(R4CO2H)的簡單酯例如酰氯或?；溥蚨频?。然后通過加入合適的肼，例如H2NNHR6來形成式Ia的化合物。
或者，式Ia的化合物可以通過用堿例如氫化鈉在例如吡啶的溶劑中處理V然后加入異硫氰酸酯SCNR4制得。然后加入合適的肼，例如H2NNHR6，形成式Ia的化合物。
或者，可以按照WO 00/31063和WO 02/72576中所述的步驟制備式Ia的化合物。
方案2 反應(yīng)方案2涉及式V的化合物的制備，其為反應(yīng)方案1中制備式Ia的化合物的中間體。參照反應(yīng)方案2，式V的化合物是由式VI的化合物通過用堿，例如丁基鋰，在約-60℃的溫度下處理約90分鐘，然后慢慢加入在極性非質(zhì)子溶劑如四氫呋喃中的式VII的吡啶基酰胺(它可以商購獲得或者按照與如下所述制備C類似的方法制得，其中R1用下式替換)而制得。
上述反應(yīng)在約-78℃-約0℃的溫度，優(yōu)選約-20℃下，進(jìn)行約1小時(shí)-約10小時(shí)，優(yōu)選約3小時(shí)。
或者，式V的化合物可以按照Davies，I.W.；Marcoux，J.F.；Corley，E.G.；Journet，M.；Cai，D.-W.；Palucki，M.；Wu，J.；Larsen，R.D.；Rossen，K.；Pye，P.J.；DiMichele，L.；Dormer，P.；Reider，P.J.；J.Org.Chem.，第65卷第8415-8420頁(2000)的方法制得。
方案3 反應(yīng)方案3涉及式Ia的化合物的制備，其中R1是 參照反應(yīng)方案3，式IX的化合物是由式VIII的化合物按照如下所述制備A中所述化合物XII向化合物IV轉(zhuǎn)化的步驟制得的。按照如下所述的制備D制備式VIII的化合物。在反應(yīng)方案3中式Ia的化合物可以由化合物IX按照反應(yīng)方案1中所述的步驟制得。
方案4 反應(yīng)方案4涉及式V的化合物的制備，其為反應(yīng)方案1中制備式Ia化合物的中間體。參照反應(yīng)方案4，式V的化合物是由式X的化合物(它可以商購獲得或者按照如下所述的制備B制得)，通過與式R1-Cl的化合物在催化劑如乙酸鈀II、堿(例如，叔丁醇鉀)和AMPHOS_(即，2-二環(huán)己基膦基-2′-(N，N-二甲基氨基)聯(lián)苯，可從Strem Chemicals，Newburyport，MA商購獲得))的存在下在極性非質(zhì)子溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)制得的。上述反應(yīng)在約50℃-約100℃的溫度，優(yōu)選約75℃下，進(jìn)行約6小時(shí)-約24小時(shí)，優(yōu)選約18小時(shí)。
制備A 制備A涉及式IV的化合物的制備，它們是可用于制備式Ia的化合物的中間體。在制備A中，R是簡單的烷基，例如甲基或乙基。參照制備A，式XII的化合物是由式XI的化合物(其中X是氯或溴)通過烷氧基羰基化反應(yīng)制得的。合適的條件包括與丁基鋰在溶劑如四氫呋喃中在約0℃的溫度下持續(xù)約30分鐘的金屬-鹵素交換，然后在約0℃的溫度下加入氯甲酸乙酯，接著在大約50℃下持續(xù)約2.4小時(shí)。式XI的化合物可以商購獲得。
式IV的化合物是由式XII的化合物通過兩步法制得的。首先式XII的化合物用還原劑處理。合適的還原劑包括硼氫化鋰、硼氫化納、氫化鋁鋰和硼烷的四氫呋喃溶液。對(duì)上述反應(yīng)合適的溶劑包括甲醇、乙醇、四氫呋喃、乙醚和二噁烷。上述反應(yīng)在約0℃-約100℃的溫度，優(yōu)選約65℃下進(jìn)行約10分鐘-約1小時(shí)，優(yōu)選約30分鐘。然后用氧化劑，例如N-甲基嗎啉N-氧化物/TPAP、Dess-Martin試劑、PCC或草酰氯-DMSO，優(yōu)選草酰氯-DMSO處理而將所得伯醇氧化成式IV的相應(yīng)醛。對(duì)上述反應(yīng)合適的溶劑包括氯仿、四氫呋喃或二氯甲烷。上述反應(yīng)在約-78℃-約22℃的溫度下進(jìn)行約15分鐘-約3小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。
制備B 制備B涉及式X的化合物的制備，它們是用于制備式Ia的化合物的中間體。參照制備B，式XIII的化合物由式II的化合物通過與甲基鎂化溴在極性溶劑如四氫呋喃和甲苯的混合物中反應(yīng)制得的。上述反應(yīng)在約-78℃-約0℃的溫度，優(yōu)選約-60℃下進(jìn)行約10分鐘-約1小時(shí)，優(yōu)選約40分鐘，然后在約-10℃下進(jìn)行約90分鐘。按照制備E制備式II的化合物，如下所述。
式X的化合物是由式XIII的化合物通過用氧化劑，例如N-甲基嗎啉N-氧化物/TPAP、Dess-Martin試劑、PCC或草酰氯-DMSO，優(yōu)選草酰氯-DMSO處理制得的。對(duì)上述反應(yīng)合適的溶劑包括氯仿、四氫呋喃或二氯甲烷。上述反應(yīng)在約-78℃-約22℃的溫度下進(jìn)行約15分鐘-約3小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。
制備C 制備C涉及式VII的化合物的制備，它們是在制備式Ia的化合物中有用的中間體。在制備C中，R是簡單的烷基，例如甲基或乙基。參照制備C，式XV的化合物是由式XIV的化合物(它可以按照制備A所述的步驟制備或者可以商購獲得)，通過用堿如氫氧化鋰，在極性質(zhì)子溶劑中處理制得的。對(duì)上述反應(yīng)合適的溶劑包括甲醇、乙醇和水。上述反應(yīng)在約0℃-約30℃的溫度，優(yōu)選約22℃(室溫)下進(jìn)行約15分鐘-約3小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。
式VII的化合物是由式XV的化合物通過與合適的活化劑和下式的化合物以及堿反應(yīng)制得的。
合適的活化劑包括亞硫酰氯、羰基二咪唑、EDCI和DCC，優(yōu)選草酰氯。合適的堿包括三乙胺、Hunig′s堿和DBU，優(yōu)選三乙胺。對(duì)上述反應(yīng)合適的溶劑包括二氯甲烷、N，N′-二甲基甲酰胺、四氫呋喃及其混合物，優(yōu)選二氯甲烷。上述反應(yīng)在約0℃-約30℃的溫度，優(yōu)選約22℃(室溫)下進(jìn)行約6小時(shí)-約48小時(shí)，優(yōu)選約12小時(shí)。
制備D 制備D涉及式VIII的化合物的制備，它們是用于制備式(Ia)的化合物的中間體，其中R1是 在制備D中，R是(C1-C6)烷基。式VIII的化合物是由式XVI的化合物通過用烷基鹵，例如甲基碘，在堿如氫化鈉的存在下，在極性非質(zhì)子溶劑如N，N′-二甲基甲酰胺中處理制得的。式XVI的化合物可商購獲得。
制備E 制備E涉及式II的化合物的制備，它們是用于制備式(Ia)的化合物的中間體。在制備E中，R是簡單的烷基，例如甲基或乙基。參照制備E，式XVIII的化合物是由式XVII的雜芳基鹵(其中X是氯或溴)按照制備A中由化合物XI制備化合物XII所述的步驟制備的。
式II的化合物是由式XVIII的化合物按照制備A中由化合物XII制備化合物IV所述的兩步法制備的。
制備F 制備F涉及式XXII的化合物的制備，它們是制備式(Ia)的化合物的中間體。參照制備F，式XXII的化合物是由式XXI的化合物通過甲?；磻?yīng)制得的。甲?；暮线m條件包括與異丙基鎂化氯在溶劑如四氫呋喃中在約0℃的溫度下持續(xù)約30分鐘的金屬鹵素交換，然后在約0℃的溫度下加入N，N-二甲基甲酰胺，接著在約50℃的溫度下持續(xù)約2.5小時(shí)。
式XX的化合物是如文獻(xiàn)(Moran，D.B.；Morton，G.O.；Albright，J.D.、J.Heterocycl.Chem.，Vol.23，pp.1071-1077(1986))中所述制得的，或者是由式XIX的化合物(其中L和L′可以相同或不同，是氯、溴或碘)通過與肼反應(yīng)制得的。式XXI的化合物是由式XX的化合物通過將化合物XX與環(huán)化劑如酰氯、酸酐、三烷基原乙酸酯或三烷基原甲酸酯縮合制得的。式XIX的化合物可商購獲得。
本發(fā)明化合物的所有藥用可接受的鹽、前藥、互變異構(gòu)體、水合物和溶劑化物也包括在本發(fā)明內(nèi)。
性質(zhì)上為堿性的本發(fā)明化合物能夠與多種無機(jī)酸和有機(jī)酸形成各種不同的鹽。盡管這些鹽必須為藥用可接受以施用于動(dòng)物和人，但是實(shí)踐中經(jīng)常希望最初從反應(yīng)混合物中將本發(fā)明的化合物作為藥用不可接受的鹽分離出來，然后用堿性試劑處理將后者簡單地轉(zhuǎn)化回到游離堿化合物，接著將該游離堿轉(zhuǎn)化為藥用可接受的酸加成鹽。通過在含水溶劑介質(zhì)中或者在合適的有機(jī)溶劑例如甲醇或乙醇中用大致等量的所選無機(jī)或有機(jī)酸處理該堿化合物可以容易地制備本發(fā)明的堿化合物的酸加成鹽。在小心蒸發(fā)溶劑之后，獲得所需固體鹽。
可用于制備本發(fā)明的堿化合物的藥用可接受的酸加成鹽的酸是形成無毒酸加成鹽的那些，即，含有藥理學(xué)可接受的陰離子的鹽，例如氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸鹽或硫酸氫鹽、磷酸鹽或酸式磷酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽或酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽或酒石酸氫鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、糖二酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽和撲酸鹽[即，1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸)]鹽。
性質(zhì)上也為酸性的本發(fā)明的化合物，例如，含有COOH或四唑部分，能夠與各種藥理學(xué)可接受的陽離子形成堿鹽。盡管這些鹽必須是藥用可接受的以給藥到動(dòng)物和人，但是實(shí)踐中經(jīng)常希望最初從反應(yīng)混合物中以藥理學(xué)不能接受的鹽分離本發(fā)明的化合物，然后通過用酸性試劑處理簡單地將后者轉(zhuǎn)化回游離酸化合物，接著將該游離酸轉(zhuǎn)化成藥用可接受的堿加成鹽。這種藥用可接受的堿加成鹽的實(shí)例包括堿金屬或堿土金屬鹽，特別是鈉和鉀鹽。這些鹽可以通過常規(guī)工藝制備?？捎米髦苽浔景l(fā)明的藥用可接受的堿加成鹽的試劑的化學(xué)堿是與本文所述的本發(fā)明的酸性化合物形成無毒堿鹽的那些。這些無毒堿鹽包括由諸如鈉、鉀、鈣和鎂等的藥理學(xué)可接受的陽離子衍生的鹽?？梢酝ㄟ^用含有所需藥理學(xué)可接受的陽離子的水溶液處理相應(yīng)酸性化合物，然后將所得溶液蒸發(fā)至干(優(yōu)選在減壓下)而容易地制備這些鹽?；蛘撸鼈円部梢酝ㄟ^將酸性化合物的低級(jí)鏈烷醇溶液與所需的堿金屬醇鹽混合在一起，然后以與前面相同的方式將所得溶液蒸發(fā)至干制得。在這兩種情況下，優(yōu)選使用化學(xué)計(jì)算量的試劑以確保反應(yīng)完全并且產(chǎn)率最大化。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的化合物。本文所用的“同位素標(biāo)記的化合物”是指本發(fā)明的化合物，包括其藥用鹽、前藥，各自如本文所述，其中一個(gè)或多個(gè)原子被原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)與在自然界通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的原子替換?？梢砸氲奖景l(fā)明的化合物內(nèi)的同位素的實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分別是2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
通過同位素標(biāo)記本發(fā)明的化合物，可以將這些化合物用于藥物和/或底物組織分布試驗(yàn)。因其容易制備和可檢測(cè)性，特別優(yōu)選氚化的(3H)和碳-14(14C)標(biāo)記的化合物。而且，用較重同位素如氘(2H)替代可以提供由較大代謝穩(wěn)定性獲得的某些治療優(yōu)勢(shì)，例如增加體內(nèi)半衰期或者降低劑量需求，因此在一些環(huán)境下可能是優(yōu)選的。
本發(fā)明的同位素標(biāo)記的化合物，包括其藥用鹽、前藥，可以通過本領(lǐng)域已知的任意方式制備。
本發(fā)明包括本發(fā)明的化合物的立體異構(gòu)體(例如，順式和反式異構(gòu)體)和所有光學(xué)異構(gòu)體(例如，R和S對(duì)映體)、以及外消旋、非對(duì)映體和這些異構(gòu)體的其它混合物。
本發(fā)明的化合物、鹽、前藥、互變異構(gòu)體、水合物和溶劑化物可以幾種互變異構(gòu)體形式存在，包括烯醇和亞胺形式，以及酮和烯胺形式及其幾何異構(gòu)體和混合物。所有這些互變異構(gòu)體形式都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。互變異構(gòu)體以互變異構(gòu)體組的混合物存在于溶液中。在固體形式中，經(jīng)常一種互變異構(gòu)體為主。盡管可以描述一種互變異構(gòu)體，但是本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)體。
本發(fā)明還包括本發(fā)明的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體。阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體是指可以分離成旋轉(zhuǎn)受限的異構(gòu)體的本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的化合物，如上所述，可用于制備預(yù)防性或治療性治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的藥物。
本發(fā)明的化合物是轉(zhuǎn)化生長因子(“TGF”)-β信號(hào)途徑的有效抑制劑并因此用于治療。因此，本發(fā)明提供了一種預(yù)防或治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病的方法，包括步驟向患TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的動(dòng)物或人給藥治療有效量的至少一種本發(fā)明的化合物。
本文所用的術(shù)語“治療有效量”是指抑制TGF-β信號(hào)途徑所需的本發(fā)明的化合物的量。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解的，“治療有效量”將隨患者而變化，并且要基于各病例來確定?？紤]的因素包括但不限于，治療的患者、體重、健康、給藥的化合物等等。
通過抑制TGF-β信號(hào)途徑可以治療的疾病狀態(tài)有許多。這些疾病狀態(tài)包括但不限于，所有類型的癌癥(例如，乳腺、肺、結(jié)腸、前列腺、卵巢、胰腺、黑素瘤、所有血液惡性腫瘤，等等)以及所有類型的纖維變性疾病(例如，腎小球腎炎、糖尿病腎病、肝纖維化、肺纖維化、動(dòng)脈增生和再狹窄、硬皮病和皮膚瘢痕化)。
本發(fā)明還提供了一種藥用組合物，它包括至少一種本發(fā)明的化合物和至少一種藥用可接受的載體。藥用可接受的載體可以是本領(lǐng)域已知的任意這類載體，包括例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，(A.R.Gennaro edit.1985)中所述的那些。本發(fā)明的藥用組合物可以通過本領(lǐng)域已知的常規(guī)方式制備，例如包括，將至少一種本發(fā)明的化合物與藥用可接受的載體混合。
本發(fā)明的藥用組合物可用于預(yù)防或治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)，如上所述。因此，本發(fā)明的化合物可以配制成口服、含服、鼻內(nèi)、非腸道(例如，靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)、局部或直腸給藥或者適合通過吸入或吹入給藥的形式的藥用組合物。
就口服給藥而言，藥用組合物可以采取例如通過常規(guī)方式用藥用可接受的賦形劑例如粘合劑(例如，預(yù)糊化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填料(例如，乳糖、微晶纖維素或磷酸鈣)；潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、滑石或二氧化硅)；崩解劑(例如，馬鈴薯淀粉或羥基乙酸淀粉鈉)；或濕潤劑(例如，十二烷基硫酸鈉)制備的片劑或膠囊的形式?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域公知的方法將片劑包衣?？诜o藥用的液體制劑可以為例如溶液、糖漿或懸液的形式，或者它們可以干產(chǎn)品呈現(xiàn)并在使用之前用水或其它合適載體重組。
可以通過常規(guī)方式用藥用可接受的添加劑例如懸浮劑(例如，山梨糖醇糖漿、甲基纖維素或氫化可食用脂肪)；乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯膠)；非含水載體(例如，杏仁油、油性酯或乙醇)；和防腐劑(例如，對(duì)羥基苯甲酸甲酯或丙酯或者山梨酸)制備這些液體制劑。
就含服給藥而言，組合物可以為常規(guī)方式配制的片劑或錠劑的形式。
也可以根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方法將本發(fā)明的化合物配制成持續(xù)釋放。這些制劑的實(shí)例可以在美國專利3,538,214、4,060,598、4,173,626、3,119,742和3,492,397中找到，將它們?nèi)囊氡疚淖鳛閰⒖肌?br> 本發(fā)明的化合物可以配制成通過注射非腸道給藥，包括使用常規(guī)導(dǎo)管插入技術(shù)或輸注。注射用制劑可以單位劑量形式呈現(xiàn)，例如，在安瓿或多劑量容器中，同時(shí)加入防腐劑。這些組合物可以為在油性或含水載體中的懸液、溶液或乳液的形式，并且可以含有諸如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑的配制劑?；蛘撸钚猿煞挚梢詾榉勰┬问?，在用前與適當(dāng)載體例如無菌無致熱原的水重組。
本發(fā)明的化合物也可以配制成直腸組合物如栓劑或保留灌腸劑，例如，含有常規(guī)栓劑基質(zhì)如可可脂或其它甘油酯。
就鼻內(nèi)給藥或吸入給藥而言，本發(fā)明的化合物可以溶液或懸液形式從患者擠壓或泵送的泵式噴霧容器方便地遞送，或者使用合適推進(jìn)劑，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適氣體作為氣霧劑噴霧從加壓容器或噴霧器遞送。在加壓氣霧劑的情況下，可以通過提供遞送計(jì)量量的閥來確定劑量單位。加壓容器或噴霧器可以裝有本發(fā)明的化合物的溶液或懸液?？梢耘渲坪斜景l(fā)明的化合物和合適粉末基料如乳糖或淀粉的粉末混合物的吸入器或吹入器用的膠囊和藥筒(例如，由明膠制成)。
一般成人經(jīng)口、非腸道或含服給藥治療TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的建議劑量是每單位劑量中活性成分約0.1mg-約2000mg，優(yōu)選約0.1mg-約200mg，所述劑量可以例如每天1-4次給予。
一般成人中治療上面所述病癥的氣霧劑制劑優(yōu)選經(jīng)過安排使得氣霧劑的每一計(jì)量劑量或“噴”含有約20μg-約10000μg，優(yōu)選約20μg-約1000μg的本發(fā)明的化合物。氣霧劑的全天劑量將在100μg-約100mg的范圍內(nèi)，優(yōu)選約100μg-約10mg?？梢悦刻旖o藥幾次，例如2、3、4或8次，每次例如1、2或3個(gè)劑量。
一般成人中治療上面所述病癥的氣霧劑組合制劑優(yōu)選經(jīng)過安排使得氣霧劑的每一計(jì)量劑量或“噴”含有0.01mg-約1000mg，優(yōu)選約0.01mg-約100mg的本發(fā)明化合物，更優(yōu)選約1mg-約10mg的該化合物?？梢悦刻旖o藥幾次，例如2、3、4或8次，每次例如1、2或3個(gè)劑量。
一般成人中治療上面所述病癥的氣霧劑制劑優(yōu)選經(jīng)過安排使得氣霧劑的每一計(jì)量劑量或“噴”含有0.01mg-約20,000mg，優(yōu)選約0.01mg-約2000mg的本發(fā)明的化合物，更優(yōu)選約1mg-約200mg?？梢悦刻旖o藥幾次，例如2、3、4或8次，每次例如1、2或3個(gè)劑量。
就局部給藥而言，本發(fā)明的化合物可以配制成軟膏或乳霜。
本發(fā)明還包括含有至少一種本發(fā)明化合物的前藥的藥用組合物和包括給藥至少一種本發(fā)明的化合物的前藥的治療或預(yù)防方法。本文所用的術(shù)語“前藥”是指在生物體內(nèi)需要自發(fā)或者酶促生物轉(zhuǎn)化釋放活性藥物的母體藥物分子的藥理學(xué)無活性衍生物。前藥是具有在代謝條件下可以裂解的基團(tuán)的本發(fā)明化合物的變體或衍生物。前藥在生理?xiàng)l件下或者在酶促降解下經(jīng)過溶劑分解時(shí)，變成在體內(nèi)有藥學(xué)活性的本發(fā)明化合物。本發(fā)明的前藥化合物可以稱為單一、雙重、三重等，這取決于在生物體內(nèi)釋放活性藥物所需的生物轉(zhuǎn)化步驟數(shù)，并表明以前體型形式存在的官能團(tuán)的數(shù)目。前藥形式在哺乳動(dòng)物有機(jī)體內(nèi)經(jīng)常提供溶解度、組織相容性或延遲釋放的優(yōu)點(diǎn)(參見，Bundgard，Design ofProdrugs，pp.7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985和Silverman，The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，pp.352-401，Academic Press，San Diego，Calif.，1992)。本領(lǐng)域通常已知的前藥包括本領(lǐng)域從業(yè)者公知的酸衍生物，例如，母體酸與合適醇反應(yīng)制備的酯、或者母體酸化合物與胺反應(yīng)制備的酰胺、或者反應(yīng)形成?；瘔A衍生物的堿性基團(tuán)。而且，本發(fā)明的前藥衍生物可以與本文中教導(dǎo)強(qiáng)化生物利用率的其它特征組合。例如，具有游離氨基、酰氨基、羥基或羧基的本發(fā)明的化合物可以轉(zhuǎn)化成前藥。前藥包括氨基酸殘基、或者兩個(gè)或多個(gè)(例如，兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè))氨基酸殘基的多肽鏈與本發(fā)明化合物中的游離氨基、羥基或羧酸基團(tuán)通過肽鍵共價(jià)連接的化合物。氨基酸殘基包括20個(gè)通常用三字母符號(hào)命名的天然存在的氨基酸，并且還包括4-羥基脯氨酸、羥基賴氨酸、demosine、isodemosine、3-甲基組氨酸、原纈氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半氨酸、高絲氨酸、鳥氨酸和甲硫氨酸砜。前藥還包括碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和烷基酯與本發(fā)明的化合物的上面的取代基通過羰基碳前藥側(cè)鏈共價(jià)地相連的化合物。
根據(jù)本發(fā)明，在治療TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)時(shí)，本發(fā)明的化合物，如本文所述，無論單獨(dú)還是作為藥用組合物的一部分，可以與本發(fā)明的另外化合物和/或與其它治療劑組合。合適治療劑的實(shí)例包括但不限于，標(biāo)準(zhǔn)的非甾體抗炎劑(本文后面的NSAID′s)(例如，吡羅昔康、雙氯芬酸)、丙酸類(例如，奈普生、氟苯布洛芬、非諾洛芬、酮洛芬和布洛芬)、芬那酯類(例如，甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸、阿扎丙宗)、吡唑啉酮類(例如，苯基保泰松)、水楊酸鹽類(例如，阿司匹林)、COX-2抑制劑(例如，塞來考昔、伐地考昔、羅非考昔和艾托考昔)、鎮(zhèn)痛藥和關(guān)節(jié)內(nèi)治療(例如，皮質(zhì)類固醇)和玻璃酸類(例如，海爾根和synvisc)、抗癌藥(例如，內(nèi)皮他丁和血管他丁)、細(xì)胞毒性藥物(例如，阿霉素、柔紅霉素、順鉑、依托泊苷、紫杉酚、泰索帝)、生物堿類(例如，長春新堿)和抗代謝物(例如，甲氨蝶呤)、心血管藥(例如，鈣通道阻滯劑)、降脂劑(例如，他汀類)、貝特類、β-阻滯劑、Ace抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑和血小板聚集抑制劑、CNS藥物(例如，作為抗抑郁藥(例如舍曲林))、抗帕金森藥(例如，塞利吉林、左旋多巴、Requip、普拉克索)、MAOβ抑制劑(例如，selegine和雷沙吉蘭)、comP抑制劑(例如，托卡朋)、A-2抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、NMDA拮抗劑、煙堿激動(dòng)劑、多巴胺激動(dòng)劑和神經(jīng)元氧化氮合酶的抑制劑)、抗阿爾茲海默氏病藥物(例如，多奈哌齊、他克林、COX-2抑制劑、丙戊茶堿或metryfonate)、骨質(zhì)疏松藥物(例如，roloxifene、屈洛昔芬、拉索昔芬或fosomax)和免疫抑制劑(例如，F(xiàn)K-506和雷怕霉素)。
生物活性本發(fā)明化合物對(duì)本文所述的各種TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的活性可以按照以下一種或多種試驗(yàn)測(cè)定。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的化合物顯示體外IC50值小于約10μM。例如，實(shí)施例7的化合物顯示TβRI IC50值為約51nM。
本發(fā)明的化合物還具有對(duì)TβRI相對(duì)于TβRII和TβRIII不同的活性(即選擇性的)。選擇性在標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定中以每一測(cè)定中抑制的IC50比測(cè)定。
TGF-βII型受體(TβRII)激酶測(cè)定方案如下測(cè)定TβRII激酶對(duì)髓鞘堿性蛋白(MBP)的磷酸化80微升稀釋于含有50mM MOPS、5mM MgCl2且pH為7.2的激酶反應(yīng)緩沖液(KRB)使得最終濃度為3微摩爾MBP的MBP(Upstate Biotechnology#13-104)，將其加入到Millipore 96孔multiscreen-DP 0.65微米過濾板(#MADPNOB50)的每一孔中。將20微升稀釋于KRB中的抑制劑加入到適當(dāng)孔中獲得所需最終濃度(10-0.03微摩爾)。加入10微升ATP(Sigma #A-5394)和33P-ATP(Perkin Elmer #NEG/602H)稀釋于KRB的混合物，每個(gè)孔中獲得0.25微摩爾ATP和0.02微居里33P-ATP的最終濃度。將10微升稀釋于KRB中的GST-TβRII融合蛋白(谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶在TβRII的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的N-末端-氨基酸193-567，在438位A變?yōu)閂)加入到每一孔中獲得27納摩爾GST-TβRII的最終濃度。將板混合并在室溫下培養(yǎng)90分鐘。反應(yīng)物培養(yǎng)之后，每個(gè)孔中加入100微升的冷20％三氯乙酸(Aldrich #25，139-9)并將板混合，4℃下培養(yǎng)60分鐘。然后使用Millipore真空多頭裝置除去孔內(nèi)的液體。用200微升/孔的冷10％三氯乙酸將板洗滌1次，然后用100微升/孔的冷10％三氯乙酸洗滌2次。使板在室溫下干燥過夜。向每一孔中加入20微升Wallac OptiPhase SuperMix閃爍混合液。將板密封并用Wallac 1450Microbeta液體閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。由抑制劑降低TβRII介導(dǎo)的MBP底物的磷酸化的能力來確定其效能。
ALK-5(TβRI)激酶測(cè)定方案用在50mM HEPES、5mM MgCl2、1mM CaCl2、1mM二硫蘇糖醇和3_M ATP中的65nM GST-ALK5和84nM GST-Smad3進(jìn)行激酶測(cè)定。用0.5_Ci的[33P]_ATP將反應(yīng)物在30℃下培養(yǎng)3小時(shí)。磷酸化蛋白被捕獲在P-81紙(Whatman，Maidstone，England)上，用0.5％磷酸洗滌，并經(jīng)液體閃爍計(jì)數(shù)?；蛘?，還將Smad3或Smad1蛋白包被到FlashPlate無菌基本微量培養(yǎng)板(PerkinElmer Life Sciences，Boston，MA)上。然后在Flash-Plate內(nèi)用相同的測(cè)定條件進(jìn)行激酶測(cè)定，使用ALK5的激酶區(qū)以Smad3作為底物或使用ALK6的激酶區(qū)(BMP受體)以Smad1作為底物。用磷酸鹽緩沖液將板洗滌3次并用TopCount(PackardBio-science，Meriden，CT)計(jì)數(shù)。(Laping，N.J.et al.MolecularPharmacology 6258-64(2002))。
以下實(shí)施例例示了本發(fā)明的化合物的制備。熔點(diǎn)未校正。NMR數(shù)據(jù)以百萬分之份(d)報(bào)道并且參考得自樣品溶劑(氘代氯仿，除非另有說明)的氘鎖信號(hào)。使用配備有Gilson梯度高效液相色譜儀的Micromass ZMD APCI質(zhì)譜儀獲得質(zhì)譜數(shù)據(jù)。使用以下溶劑和梯度分析。溶劑A；98％水/2％乙腈/0.01％甲酸和溶劑B；含有0.005％甲酸的乙腈。通常，梯度是在約4分鐘內(nèi)從95％溶劑A開始并以100％溶劑B結(jié)束。然后以正或負(fù)離子模式掃描165AMU-1100AMU的分子量范圍獲得主要洗脫組分的質(zhì)譜。在室溫下使用鈉D線(589nm)測(cè)定比旋光。利用商業(yè)制劑，不經(jīng)進(jìn)一步純化。THF是指四氫呋喃。DMF是指N，N-二甲基甲酰胺。色譜是指使用32-63mm硅膠并在氮?dú)鈮毫?快速色譜法)條件下進(jìn)行的柱色譜。室溫或環(huán)境溫度是指20-25℃。為了方便起見并使產(chǎn)率最大化，所有非水反應(yīng)都是在氮?dú)夥障逻M(jìn)行的。減壓下濃縮意味著使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)明白，在一些情況下在制備期間可能需要保護(hù)基團(tuán)。在制備目標(biāo)分子之后，可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方法除去保護(hù)基團(tuán)，例如Greene和Wuts，“Protective Groups inOrganic Synthesis”(2ndEd，John Wiley & Sons 1991)中所述的。
使用Polaris 2×20mm C 18柱進(jìn)行反相分析型高效液相色譜與質(zhì)譜測(cè)定(LSMS)。在3.75分鐘的時(shí)間內(nèi)在0.01％甲酸水溶液中乙腈濃度從5％增加到100％進(jìn)行梯度洗脫。將質(zhì)譜儀Micromass ZMD用于分子離子鑒定。
實(shí)施例14-[3-(6-甲基-吡啶基-2-基)-1H-吡唑-4-基-喹啉的制備步驟A[(6-甲基-吡啶基-2-基)-苯基氨基-甲基]-膦酸二苯酯的制備2L圓底燒瓶中裝入6-甲基-吡啶-2-甲醛(40g，330mmol)、苯胺(30.1mL，330mmol)和380mL乙酸異丙酯。將該反應(yīng)混合物加熱至65℃，并在60分鐘內(nèi)滴加二苯基亞磷酸酯(112mL，495mmol)。在65℃下將該混合物再攪拌60分鐘，然后在室溫下過夜。真空下濃縮獲得一糖漿，將其溶解在1升乙酸乙酯中并用飽和碳酸氫鈉(3×200mL)洗滌。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，過濾并濃縮到硅膠上。產(chǎn)物用10-20％乙酸乙酯/己烷溶劑梯度經(jīng)快速色譜法純化，得到126.5克純物質(zhì)。HPLC tR＝6.68分鐘，LC-MS＝431(M+1)。
步驟B1-(6-甲基-吡啶基-2-基)-2-喹啉-4-基-乙酮的制備2L圓底燒瓶裝入[(6-甲基-吡啶基-2-基)-苯基氨基-甲基]-膦酸二苯酯(24.5g，57mmol)、喹啉-4-甲醛(11.65g，74.1mmol)、90mL四氫呋喃和180mL異丙醇。將反應(yīng)混合物加熱至25℃并在90分鐘內(nèi)滴加叔丁醇鉀(1.0M，74.1mL，74.1mmol)。再攪拌30分鐘之后，加入鹽酸(2M，122mL)并將該混合物攪拌1小時(shí)。將該溶液加熱至45℃并用6M氫氧化鈉將pH調(diào)整至5，再攪拌1小時(shí)，然后在真空下濃縮。剩余物溶解在氯仿中并濃縮到硅膠上。產(chǎn)物用0-10％乙酸乙酯/己烷溶劑梯度經(jīng)快速色譜法純化，得到10.97克純物質(zhì)。HPLC tR＝5.02分鐘，LC-MS＝263(M+1)。
步驟C4-[3-(6-甲基-吡啶基-2-基)-1H-吡唑-4-基-喹啉的制備500mL圓底燒瓶裝有1-(6-甲基-吡啶基-2-基)-2-喹啉-4-基-乙酮(5.0g，19mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(40.4mL，304mmol)并加熱至80℃。2小時(shí)之后，真空下將溶液濃縮并加入68mL乙醇，然后加入水合肼(6.74mL，108mmol)。將該混合物再攪拌2小時(shí)，然后濃縮至干。用20-60％乙酸乙酯/氯仿進(jìn)行硅膠色譜，得到3.26克所需產(chǎn)物。HPLC tR＝3.94分鐘，LC-MS＝287(M+1)。
實(shí)施例22-(4-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基-吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.38分鐘，LC-MS＝280(M+1)。
實(shí)施例31-甲基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1H-苯并三唑按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.52分鐘，LC-MS＝291(M+1)。
實(shí)施例44-(3-吡啶-2-基-1H-吡唑-4-基)-喹啉按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.6分鐘，LC-MS＝273(M+1)。
實(shí)施例52-(4-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基-吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.45分鐘，LC-MS＝294(M+1)。
實(shí)施例64-[1-甲基-3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-喹啉按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.17分鐘，LC-MS＝301(M+1)。
實(shí)施例72-(4-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-1H-吡唑-3-基)-吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.18分鐘，LC-MS＝266(M+1)。
實(shí)施例82-[4-(2，3-二氫-苯并[1，4]二噁英-6-基)-1H-吡唑-3-基]-吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.17分鐘，LC-MS＝280(M+1)。
實(shí)施例91-甲基-6-[1-甲基-3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1H-苯并三唑按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.79分鐘，LC-MS＝305(M+1)。
實(shí)施例104-(1-甲基-3-吡啶-2-基-1H-吡唑-4-基)-喹啉按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.73分鐘，LC-MS＝287(M+1)。
實(shí)施例114-(1-甲基-5-吡啶-2-基-1H-吡唑-4-基)-喹啉按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.9分鐘，LC-MS＝287(M+1)。
實(shí)施例126-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-2-三氟甲基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.77分鐘，LC-MS＝345(M+1)。
實(shí)施例132-異丙基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝4.08分鐘，LC-MS＝319(M+1)。
實(shí)施例143-甲基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝2.77分鐘，LC-MS＝291(M+1)。
實(shí)施例152-甲基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.38分鐘，LC-MS＝291(M+1)。
實(shí)施例162-甲基-5-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-2H-苯并三唑按照與實(shí)施例1中所述類似的步驟制備標(biāo)題化合物。HPLC tR＝3.72分鐘，LC-MS＝291(M+1)。
實(shí)施例174-甲氧基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-喹啉的制備步驟A2-(4-甲氧基-喹啉-6-基)-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙酮的制備向20mL螺紋耐壓管中加入6-氯-4-甲氧基-喹啉(298mg，1.54mmol)、乙酸鈀(II)(7mg，0.03mmol)、2-二環(huán)己基膦基-2′-(N，N-二甲基氨基)聯(lián)苯(a.k.a.AMPHOS，24mg，0.06mmol)和丁醇鉀(1M于THF中，3.7mmol)。攪拌該混合戊并加入1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙酮。然后將耐壓管密封并加熱至70℃。將該反應(yīng)混合物于70℃下攪拌18小時(shí)。LC-MS顯示產(chǎn)物。然后將反應(yīng)混合物冷卻并將其倒入600μL冰醋酸于30mL水中的溶液。用3×30mL氯仿萃取標(biāo)題化合物。將有機(jī)層合并，在硫酸鈉上干燥，過濾，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮。殘余物經(jīng)快速柱色譜(硅膠)用1％甲醇/氯仿溶劑體系純化，得到255mg所需產(chǎn)物(56％產(chǎn)率)。HPLC＝4.39分鐘，LC-MS＝293(M+H，mw＝292.34)。
步驟B4-甲氧基-6-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-喹啉的制備向10mL燒瓶中加入2-(4-甲氧基-喹啉-6-基)-1-(6-甲基-吡啶-2-基)-乙酮(70mg，0.17mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(1.4mL，10.9mmol)。該溶液在80℃下攪拌2.5小時(shí)，然后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至完全干。殘余物溶解在乙醇(1.5mL)中并加入水合肼(63mL，1.02mmol)。將該新的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時(shí)，LC-MS顯示產(chǎn)物。將該反應(yīng)混合物濃縮至干。殘余物用0-40％乙腈/水溶劑梯度(在兩種溶劑中都是0.1％甲酸)經(jīng)Shimodzu制備型HPLC純化，得到28mg標(biāo)題化合物(51％產(chǎn)率)。HPLC＝3.34分鐘，LC-MS＝317(M+H，mw＝316.37)。
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盡管上面參照公開的實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員易于理解，詳述的具體試驗(yàn)僅僅是例示本發(fā)明。應(yīng)理解的是，在不背離本發(fā)明精神的情況下可以進(jìn)行各種改進(jìn)。因此，本發(fā)明僅由以下權(quán)利要求限定。
權(quán)利要求
1.式(Ia)的化合物 或其藥用可接受的鹽、前藥、互變異構(gòu)體、水合物或者溶劑化物，其中R1是飽和、不飽和或芳族C3-C20一-、二-或多環(huán)，其任選含有至少一個(gè)選自N、O和S的雜原子，其中R1可以任選進(jìn)一步獨(dú)立地取代有至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下的部分羰基、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、羥基、氧代、巰基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C6)烷氧基、(C5-C10)芳基或(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)芳氧基或(C5-C10)雜芳基氧基、(C5-C10)芳(C1-C6)烷基或(C5-C10)雜芳(C1-C6)烷基、(C5-C10)芳(C1-C6)烷氧基或(C5-C10)雜芳(C1-C6)烷氧基、HO-(C＝O)-、酯、酰氨基、醚、氨基、氨基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、(C5-C10)雜環(huán)基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-和二(C1-C6)烷基氨基、氰基、硝基、氨基甲?；?C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基氨基羰基、二(C1-C6)烷基氨基羰基、(C5-C10)芳基羰基、(C5-C10)芳氧基羰基、(C1-C6)烷基磺?；?C5-C10)芳基磺?；幻總€(gè)R3獨(dú)立地選自如下基團(tuán)氫、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、苯氧基、(C5-C10)雜芳基-O-、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、(C1-C6)烷基-S-、(C1-C6)烷基-SO2-、(C1-C6)烷基-NH-SO2-、O2N-、NC-、氨基、Ph(CH2)1-6HN-、(C1-C6)烷基HN-、(C1-C6)烷基氨基、[(C1-C6)烷基]2-氨基、(C1-C6)烷基-SO2-NH-、氨基(C＝O)-、氨基O2S-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-[(((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、H2N(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-和(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-；其中R3中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基、氨基任選被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵代(C1-C6)烷基、鹵素、H2N-、Ph(CH2)1-6HN-和(C1-C6)烷基HN-；s是1-5的整數(shù)；R4選自氫、鹵素、鹵代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、苯氧基、(C5-C10)雜芳基-O-、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、(C1-C6)烷基-S-、(C1-C6)烷基-SO2-、(C1-C6)烷基-NH-SO2-、O2N-、NC-、氨基、Ph(CH2)1-6NH-、烷基NH-、(C1-C6)烷基氨基、[(C1-C6)烷基]2-氨基、(C1-C6)烷基-SO2-NH-、氨基(C＝O)-、氨基SO2-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-((C1-C6)烷基)-N]-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、環(huán)烷基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、H2N(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2-N-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、苯基-((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-和(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-；其中R4中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基和氨基任選被至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵代(C1-C6)烷基、鹵素、H2N-、Ph(CH2)1-6-NH-和(C1-C6)烷基NH-；并且R6選自氫、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、苯基、(C5-C10)雜芳基、(C5-C10)雜環(huán)、(C3-C10)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基-(SO2)-、苯基-(SO2)-、H2N-(SO2)-、(C1-C6)烷基-NH-(SO2)-、((C1-C6)烷基)2N-(SO2)-、苯基-NH-(SO2)-、(苯基)2N-(SO2)-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-O-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-(C＝O)-、H2N-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2N-(C＝O)-、(苯基)2N-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-和(C3-C10)環(huán)烷基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-；其中R6中的烷基、鏈烯基、炔基、苯基、芐基、雜芳基、雜環(huán)、環(huán)烷基、烷氧基、苯氧基、氨基任選取代有至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下基團(tuán)的部分鹵素、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C2-C6)炔基、全鹵代(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、苯基、芐基、(C5-C10)雜環(huán)、(C5-C10)雜芳基、(C1-C6)烷基-SO2-、甲酰基、NC-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-、苯基-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-、HO-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-O-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-O-(C＝O)-、(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-、(C3-C10)環(huán)烷基-NH-(C＝O)-、苯基-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜環(huán)-NH-(C＝O)-、(C5-C10)雜芳基-NH-(C＝O)-、((C1-C6)烷基)2-N-(C＝O)-、苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-、羥基、(C1-C6)烷氧基、全鹵代(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環(huán)烷基-O-、苯氧基、(C5-C10)雜環(huán)-O-、(C5-C10)雜芳基-O-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-O-、苯基-(C＝O)-O-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-O-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-O-、O2N-、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基)2-氨基、甲酰氨基、(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-、(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-NH-、苯基-(C＝O)-NH-、(C5-C10)雜環(huán)-(C＝O)-NH-、(C5-C10)雜芳基-(C＝O)-NH-、(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-、苯基-(C＝O)-[(C1-C6)烷基-N]-、(C1-C6)烷基-SO2NH-、(C3-C10)環(huán)烷基-SO2NH-、苯基-SO2NH-、(C5-C10)雜環(huán)-SO2NH-和(C5-C10)雜芳基-SO2NH-；其中R6取代基中的苯基或雜芳基部分任選進(jìn)一步取代有至少一個(gè)獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、全氟(C1-C6)烷基和全氟(C1-C6)烷氧基；附帶條件是R1含有至少一個(gè)雜原子。
2.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
3.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
4.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
5.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
6.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
7.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
8.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1是 或
9.如權(quán)利要求1的化合物，其中s是1-2；R3是氫或(C1-C6)烷基；R4是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷基-(C＝O)-或(C3-C10)環(huán)烷基-(C＝O)-；并且R6是H或(C1-C6)烷基。
10.藥用組合物，包括權(quán)利要求1的化合物和藥用可接受的載體。
11.預(yù)防或治療動(dòng)物或人中TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的方法，包括步驟向患有TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)的動(dòng)物或人施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
12.如權(quán)利要求11的方法，其中所述TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)選自如下癌癥、腎小球腎炎、糖尿病腎病、肝纖維化、肺纖維化、內(nèi)膜增生和再狹窄、硬皮病和皮膚瘢痕化。
全文摘要
本發(fā)明描述了式(Ia)的新型吡唑衍生物，用于其制備的中間體，含有它們的藥用組合物及其藥用用途。本發(fā)明的化合物是轉(zhuǎn)化生長因子(“TGF”)－β信號(hào)途徑的有效抑制劑。它們可用于治療各種TGF相關(guān)的疾病狀態(tài)，包括例如癌癥和纖維變性疾病。
文檔編號(hào)C07D401/14GK1681501SQ03822265
公開日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2003年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月18日
發(fā)明者M·J·芒奇霍夫, L·C·布朗伯格 申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司