專利名稱：雙芳基磺酰胺化合物及其在癌癥治療中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雙芳基磺酰胺化合物。特別地，本發(fā)明涉及能夠結(jié)合癌蛋白HDM2同時還可以對活體細胞中腫瘤抑制因子p53和/或E2F轉(zhuǎn)錄因子的HDM2-依賴型調(diào)節(jié)作用進行調(diào)節(jié)的雙芳基磺酰胺化合物。本發(fā)明另一方面涉及含有這類化合物的藥物制劑，以及其例如在治療人或動物方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
MDM2癌基因最初被克隆為murine double-minute染色體上的放大因子；被編碼的主要癌蛋白被定義為MDM2，另外已知人類等價蛋白就是HDM2[Zhang，Wang H；Curr.Pharmaceut.Design 2000；6393-416]。目前已經(jīng)很好地確立了HDM2與人類癌癥之間的關(guān)系。由于基因放大或者轉(zhuǎn)錄或翻錄增加使得HDM2在各種腫瘤中被過分表達[Momand J，Jung D，Wilczynski S，Niland J；Nucleic Acids Res.1998；263453-3459]。
滅活p53腫瘤抑制蛋白是人腫瘤形成過程中頻繁出現(xiàn)的情形[Lane DP，Lain S；Trends Molec.Med.2002；8S38-S42.]。滅活除了歸因于突變?nèi)睋p以外，它還可能是由例如結(jié)合HDM2而引起的。HDM2和p53在體內(nèi)或體外的相互作用使得由p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)活化作用受到抑制。由于p53腫瘤抑制因子影響絡(luò)合作用，因此HDM2/p53絡(luò)合物(complexes)的形成更傾向于通過核質(zhì)轉(zhuǎn)化形成。HDM2通過與p53的N-末端活化區(qū)域結(jié)合形成負自身調(diào)節(jié)環(huán)，從而抑制p53的功能并促進p53的蛋白酶降解。干擾這個調(diào)節(jié)環(huán)可用于增加細胞中活性p53的濃度。
借助于一系列重復(fù)的合成肽確定了HDM2在p53上的結(jié)合位置[PicksleySM，Voijtesek B，Sparks A，Lane DP；Oncogene 1994；92523-2529]，并且被繪制成序列18TFSDLW23。盡管含有該序列的更長鏈肽也是p53/HDM2絡(luò)合物形成的強效抑制劑，但是六肽p53(18-23)本身具有很低的親和性[Bttger A，Bttger V，Garcia-Echeverria C，Chène P，Hochkeppel HK，Sampson W，Ang K，Howard SF，Picksley SM，Lane DP；J.Molec.Biol.1997；269744-756]。
對由噬菌體所顯示的肽庫進行篩選也顯示了含有HDM2結(jié)合基序的序列[Bttger V，Bttger A，Howard SF，Picksley SM，Chene P，Garcia-Echeverria C，Hochkeppel HK，Lane DP；Oncogene 1996；132141-2147]。其中起始的12鏈肽MPRFMDYWEGLN具有低于微摩爾級的親和性，比相應(yīng)的野生型p53衍生肽16QETFSDLWKLLF27效果更強28倍。取代和切斷研究顯示，8鏈肽FMDYWEGL是對HDM2具有微摩爾級親和性的最低活性序列[Bttger A等人，同上]。在相應(yīng)的p53序列的已知結(jié)合模型基礎(chǔ)之上[Kussie PH，Gorina S，Marechal V，Elenbaas B，Moreau J，Levine AJ，Pavletich NP；Science 1996；274948-953]，通過引入α，α-二取代氨基酸殘基α-氨基異丁(Aib)酸和1-氨基環(huán)丙烷羧酸(Ac3c)分別替代Asp和Gly殘基，建立了這種肽的螺旋結(jié)構(gòu)。分子模型顯示，Tyr側(cè)鏈對HDM2 Lys94殘基的ε-氨基具有親和性，而二氧磷基甲基苯丙氨酸(Pmp)殘基可用于替代Tyr。所得到的肽的效果大約更高7倍，這表明在膦酸酯和氨基之間建立鹽橋的假想在實踐中是具有可操作性的。最后，檢查Trp23的結(jié)合袋(pocket)顯示其并未被完全占滿，這表明在吲哚6-位上的取代基可以增強親和性。事實也是如此，從而由此可以達到獲得足夠的效果的目的。因此由野生型p53 12鏈序列出發(fā)，親和性增加＞1,700倍。
p53/HDM2絡(luò)合物的這種晶體結(jié)構(gòu)以及上述所討論的肽優(yōu)化工作表明，p53和HDM2的疏水性裂隙(cleft)之間的主要連接僅僅在于三個p53殘基(Phe19、Trp23、以及Leu26)。所討論的三個側(cè)鏈的分子量達到大約300Da，這表明使用非肽小分子調(diào)節(jié)p53/HDM2之間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用是可行的。這種假設(shè)的正確性已經(jīng)在一定程度上被證實。
對各種微生物提取液進行篩選以找出p53/HDM2相互作用的抑制劑，結(jié)果證實一種被稱作chlorofusin的真菌代謝物是微摩爾級的抑制劑[Duncan SJ，Grueschow S，Williams DH，McNicholas C，Purewal R，Hajek M，Gerlitz M，Martin S，Wrigley SK，Moore M；J.Am.Chem.Soc.2001；123554-560]。一直以來都知道查耳酮(1，3-二苯基-2-丙烯-1-酮)具有抗腫瘤活性[De Vincenzo R，F(xiàn)erlini C，Distefano M，Gaggini C，Riva A，Bombardelli E，Morazzoni P，ValentiP，Belluti F，Ranelletti FO，Mancuso S，Scambia G；Cancer ChemotherapyPharmacol.2000；46305-312]。某些查耳酮衍生物，特別是被稱作“B-1”的化合物{4-[3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯?；鵠-苯氧基}-乙酸及其某些類似物對于p53/HDM2絡(luò)合物的抑制具有高微摩爾級的親和性[Stoll R，Renner C，HansenS，Palme S，Klein C，Belling A，Zeslawski W，Kamionka M，Rehm T，MuehlhahnP，Schumacher R，Hesse F，Kaluza B，Voelter W，Engh RA，Holak TA；Biochemistry 2001；40336-344]。應(yīng)用多維NMR技術(shù)，已經(jīng)找到證據(jù)證明查耳酮衍生物直接結(jié)合于HDM2的p53結(jié)合裂隙的Trp23-結(jié)合袋的亞位。
最后，由p53-衍生化的HDM2-結(jié)合肽出發(fā)進行肽模擬設(shè)計得到乙?；滨；哙函B氮化物(acyltryptophanylpiperazides)，它是具有低微摩爾級親和性的p53/HDM2拮抗劑[Luke RWA，Hudson K，Hayward CF，F(xiàn)ielding C，Cotton R，Best R，Giles MB，Veldman MH，Griffiths LA，Jewsbury PJ，BreezeAL，Embrey KJ；Proc.Amer.Assoc.Cancer Res.1999；40#4099；Luke RWA，Jewsbury PJ，Cotton R；PCT Int.Patent Appl.Publ.WO 00/15657；Zeneca Ltd.，UK，2000]。
本發(fā)明目的在于提供一類可用于治療癌癥以及其它增殖性疾病的治療劑。
發(fā)明概述本發(fā)明第一方面涉及通式I化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途， 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或l；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其每個任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是
或 或 或 其中X是S、O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；Y是CH或N；E是N或CR4；R2、R3、R4、以及R14-16各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3。
本發(fā)明第二方面涉及上文所定義的化合物在治療增殖性疾病中的用途。
本發(fā)明第三方面涉及下文更具體描述的通式Ia、Ib、Ic和Id化合物。
本發(fā)明第四方面涉及一種藥物組合物，它含有與一種或多種可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明第五方面涉及本發(fā)明化合物在測定對HDM2結(jié)合力的方法中的應(yīng)用。
本發(fā)明第六方面提供了一種檢測配體對HDM2結(jié)合力的方法，所述方法包括下述步驟(i)在p53衍生肽存在下，使配體與HDM2接觸；和(ii)檢測在HDM2和所述p53衍生肽之間的相互作用所出現(xiàn)的任意變化；其中所述配體是根據(jù)本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明第七方面涉及一種并用藥物(combination)，它含有至少一種本發(fā)明的化合物和至少一種細胞毒素劑。
本發(fā)明第八方面涉及一種藥物組合物，它含有與可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合的至少一種本發(fā)明化合物、以及一種或多種細胞毒素劑。
本發(fā)明第九方面提供了一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種本發(fā)明的化合物，另外在給藥之前、同時或者之后還施用一種或多種其它的細胞毒素劑。
本發(fā)明第十方面涉及一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種本發(fā)明的化合物，另外在給藥之前、同時或者之后還結(jié)合使用放射治療。
詳細描述如上所述，本發(fā)明第一方面涉及如上文所定義的通式I化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的應(yīng)用。
本文所使用的短語“藥物制備”除了指本發(fā)明化合物在用于鑒定其它藥物的篩選程序中或者在制備這類藥物的任意情形中的應(yīng)用之外，還包括其直接作為藥物的應(yīng)用。這類篩選程序可以例如包括測定對HDM2結(jié)合力的方法，它用來測定候選物質(zhì)是否能夠模擬通式I化合物的活性。
本發(fā)明涉及在增殖性疾病的治療中作為治療劑的雙芳基磺酰胺。
在一實施優(yōu)選實施方案中，Ar1是 或 Ar2是 優(yōu)選地，X是S，E是CR4，或者X是S，E是N。
在另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 Ar2是 優(yōu)選Z是N。
在另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是
Ar2是 在另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 Ar2是 優(yōu)選Z是N。
在又一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 Ar2是 優(yōu)選R14-16都是H。
在另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 Ar2是
對于所有的上述方案，優(yōu)選地-R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、每個可任選被一個或多個OH或CORu基團取代的嗎啉代基、哌嗪子基(piperazino)或哌啶子基、或者選自吡啶基、嘧啶基、噁唑基、噻唑基和吡唑基的雜芳基，其中每個任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代，或者R2和R3一起形成飽和6-元環(huán)或不飽和5-元環(huán)，其中每個任選含有一個或多個雜原子；以及-R5、R6、R7、R8、以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-5烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHPh、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHPh、SO2NHRm、SO2Ph、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHPh、CONHRq、ORv、COPh或CORr。
更優(yōu)選地，R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHPh、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、吡啶基、嘧啶基、2-甲硫基嘧啶-5-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、嗎啉-4-基、4-乙?；?哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
進一步更優(yōu)選地，R2、R3和R4各自獨立地是H、鹵素、NO2、SO2Ph、S(CO)Me、COOH、COOEt、OPh、OMe、NHCH2CH2OMe、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基、N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、噁唑-2-基、C1-5烷基、NH2、嗎啉-4-基、4-乙?；?哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
在一特別優(yōu)選的實施方案中，Ar1是 X是S或N，優(yōu)選S；R2、R3和R4各自獨立地是C1-5烷基、S(CO)Me、COOH、NHCH2CH2OMe、COOEt、H、鹵素、NO2、SO2Ph、SO2NH-(4-氯苯基)、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、嗎啉-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基、N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、3-羥基-哌啶-1-基、吡啶-2-基；或者R2和R3形成任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
對于該實施方案更優(yōu)選的是-R2是鹵素、SO2Ph、NO2、Et、SOMe、嗎啉-4-基、NHCH2CH2OMe、3-羥基-哌啶-1-基、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基或2-甲硫基-嘧啶-5-基；-R3是鹵素、SO2NH-(4-氯苯基)、H、NO2、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基或N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基；以及-R4是H。
在另一特別優(yōu)選的實施方案中，Ar1是 Y是CH或N；以及R2、R3和R4各自獨立地是H、OH、COOH、CF3、OPh、OMe、NO2、4-乙酰基-哌嗪-1-基、NH2、鹵素、吡唑-1-基、噁唑-2-基或C1-5烷基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O-或-N-S-N-。
對于該實施方案更優(yōu)選的是當(dāng)Y是CH時-R2是H、NO2或Cl；-R3是NO2、NH2、Cl、CF3、COOH、4-乙?；?哌嗪-1-基；以及-R4是H、Cl、噁唑-2-基、OH、NO2、NH2、OMe或Me；或者當(dāng)Y是N時-R2是H；-R3是Br；-R4是Cl或OPh。
在本發(fā)明另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 R2和R4是C1-5烷基，R3是COOH或COOEt。
在一優(yōu)選實施方案中，-R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是H、鹵素、OMe、NO2、C1-5烷基、CF3或者OH；以及-R10、R11、R12和R13都是H。
進一步優(yōu)選的是-R5是H、C1-5烷基、或鹵素；-R6是H、鹵素、NO2、或CF3；-R7是H、鹵素、OMe、NO2、OH或CF3；-R8是H、鹵素或CF3；-R9是H。
在本發(fā)明一優(yōu)選實施方案中，-W是CH2、CH2CH2或CH(CH3)CH2；以及-R1是H、CH2Ph、CH2CH(Me)2、3-(三氟甲基)芐基、或Me。
在本發(fā)明第一方面的特別優(yōu)選實施方案中，通式I化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[1]；
5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)-酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[4]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[8]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[9]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[10]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[11]；5-(2-甲硫基-嘧啶-5-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[12]；4-噁唑-2-基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[13]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[14]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[15]；5-溴噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[16]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[17]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；N-(4-氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[19]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[20]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-硝基苯磺酰胺[21]；N-(2，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[22]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[23]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[24]；5-苯磺酰基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[25]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[26]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-氯-3-硝基苯磺酰胺[29]；4-氯-N-(3，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[30]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[31]；
5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氟苯基)-酰胺][32]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)-酰胺][33]；4-甲基-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[34]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[35]；3-氨基-4-甲基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[36]；N-(4-氯苯基)-4-甲基-3-硝基苯磺酰胺[37]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)-酰胺[40]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[41]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[42]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基芐基)酰胺[52]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-異丁基-酰胺[58]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；5-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[68]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；5-乙基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[71]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[76]；4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[77]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-3-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[78]；5-嗎啉-4-基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[79]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；4-氯-N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-3-硝基-苯磺酰胺[81]；N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺[82]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；6-氯-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[84]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷(dioxine)-6-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[85]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[86]；6-苯氧基-吡啶-3-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[87]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-吡唑-1-基-苯磺酰胺[89]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯[90]；
4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[91]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[92]；2-(4-氯-苯基氨磺?；?-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯[93]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[94]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3，5-二氯-4-羥基-苯磺酰胺[95]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[96]；N-(4-氯-苯基)-4-硝基-苯-磺酰胺[97]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[98]；4-氨基-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-苯磺酰胺[99]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[100]；3，5-二氯-N-(3，5-二氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[101]；4-氨基-3-氯-N-(4-氯-苯基)-苯磺酰胺[102]；3-氯-N-(4-氯-苯基)-4-甲氧基-苯磺酰胺[103]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；3-(4-乙?；?哌嗪-1-基)-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[106]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2-硝基-苯磺酰胺[107]；3-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺?；?-苯甲酸[108]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[109]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯甲基)-苯磺酰胺[110]；3，5-二氯-4-羥基-N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-苯磺酰胺[111]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；N-(3，5-二氯-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[113]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[114]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[115]；5-溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[116]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(2，4-二氯-苯基)-酰胺[118]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；
苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[121]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[123]；5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[124]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；3，5-二氯-N-(4-氟-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[127]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-酰胺[129]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
在進一步優(yōu)選的實施方案中，通式I化合物是根據(jù)其抑制人類腫瘤細胞體內(nèi)增殖活性(使用實施例5中描述的標準72-h MTT測定法)所具有的IC50值等于或小于20μM來進行選擇的。
在特別優(yōu)選的實施方案中，該化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯-磺酰胺[35]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基苯-磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；以及N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]。
更加優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[5]、[6]、[7]、[35]、[39]、[40]、[44]-[46]、[48]、[49]、[53]-[57]、[61]、[63]、[65]-[67]、[75]以及[83]。
尤其更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[5]、[6]、[39]、[40]、[46]、[48]、[49]、[53]、[56]、[57]、[61]、[63]、[66]以及[83]。
進一步更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[46]、[49]、[61]、[63]以及[83]。
在另一優(yōu)選實施方案中，通式I化合物是根據(jù)其抑制p53-HDM2相互作用(使用實施例3中描述的競爭性p53-衍生肽-HDM2結(jié)合力測定方法)所具有的IC50值等于或小于200μM來進行選擇的。
因此，在本發(fā)明特別優(yōu)選的實施方案中，通式I化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；
5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[9]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[23]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-氯-3-硝基苯-磺酰胺[29]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)酰胺][33]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯-磺酰胺[35]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基(4-三氟甲基-苯甲基)酰胺[52]5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺酰基)-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；5-溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[116]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
更加優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[6]、[7]、[33]、[39]、[40]、[44]-[46]、[48]-[57]、[59]-[61]、[63]、[65]-[67]、[72]、[75]、[130]以及[131]。
尤其更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[7]、[45]、[46]、[50]-[53]、[65]-[67]、[72]以及[75]。
進一步更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[50]、[51]、[65]、[67]以及[75]。
本發(fā)明另一優(yōu)選實施方案涉及通式Ic化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途， 其中W是C1-5支鏈或直鏈烷基或者C2-5鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基；Ar1是 或 其中X是S、O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；Y是CH或N；R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、或者任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；Ara-e各自獨立地是任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代的芳基；Ra-i各自獨立地是C1-5烷基；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是
或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHAr、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHAr、SO2NHRm、SO2Ar、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHAr、CONHRq、COAr或者CORr；Ri-r各自獨立地是C1-5烷基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8和R9中的至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或CF3。
在一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 在另一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 在一優(yōu)選實施方案中，Ar2是 在另一優(yōu)選實施方案中，Ar2是
在一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 并且Ar2是 優(yōu)選地，-R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHAr、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、COPh、CORh、或者選自吡啶基、嘧啶基、噁唑基、噻唑基和吡唑基的雜芳基，其中的每個可以任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代；以及-R5、R6、R7、R8、和R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-5烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHPh、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHPh、SO2NHR、SO2Ph、SO2Rm、CF3、CN、COOH、COORn、CONH2、CONHPh、CONHRp、COPh或CORq。
更優(yōu)選地，R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHPh、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、COPh、CORh、吡啶基、嘧啶基、2-甲硫基嘧啶-5-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、或者1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基。
進一步更優(yōu)選地，R2、R3和R4各自獨立地是H、鹵素、NO2、SO2Ph、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基，N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、噁唑-2-基、C1-5烷基或者NH2。
在一優(yōu)選實施方案中，Ar1是 X是S；R2、R3和R4各自獨立地是H、鹵素、NO2、SO2Ph、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基或N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基。
優(yōu)選地，-R2是鹵素、SO2Ph、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基或2-甲硫基-嘧啶-5-基；-R3是鹵素、H、NO2、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基或N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基；以及-R4是H。
更優(yōu)選地，Ar1是 Y是CH或N；以及R2、R3和R4各自獨立地是H、NO2、NH2、鹵素、噁唑-2-基或C1-5烷基。
更優(yōu)選地，當(dāng)Y是CH時，-R2是H；-R3是NO2或NH2；以及-R4是H、Cl、噁唑-2-基或Me；或者當(dāng)Y是N時-R2是H；-R3是Br；
-R4是Cl。
優(yōu)選地，-R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是H、鹵素、CF3或OH；以及-R10、R11、R12和R13都是H。
更優(yōu)選地，-R5是H或鹵素；-R6是H、鹵素或CF3；-R7是H、鹵素、OH或CF3；-R9是H。
優(yōu)選地，-W是CH2、CH2CH2或CH(CH3)CH2；以及-R1是H或Me。
醫(yī)療用途已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物具有抗增殖活性，因而認為其可用于治療增殖性疾病例如癌癥、白血病或者其它與細胞任意增殖相關(guān)的疾病例如牛皮癬和再狹窄。
如上所述，證明本發(fā)明所述的抗增殖活性效果可以通過例如使用任意一種細胞系A(chǔ)GS、H1299或SJSA-1測試其在體內(nèi)完整細胞分析中抑制細胞增殖的能力，或者通過在適合的分析試驗中測示其所顯示出的對HDM2和p53之間相互作用的抑制能力。這些分析測試包括評價其效能的方法將在下面的實施例中給以更詳細的描述。利用這樣的測試方法可以確定化合物是否具有本發(fā)明含義上的抗增殖活性。
因此，本發(fā)明一方面涉及一種或多種本發(fā)明化合物在治療增殖性疾病中的用途。
本文所使用的術(shù)語“增殖性疾病”廣義上包括任意一種需要控制細胞周期的疾病，例如心血管疾病例如再狹窄和心肌癥、自身免疫疾病例如腎小球腎炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚學(xué)疾病例如牛皮癬、抗炎、抗真菌、抗寄生物疾病例如瘧疾、肺氣腫和脫發(fā)。在這些疾病中，本發(fā)明化合物在目標細胞中可以如所希望的那樣誘導(dǎo)細胞凋亡或者維持停滯(stasis)。該增殖性疾病優(yōu)選為癌癥或白血病。
在本發(fā)明一優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明化合物按照足以調(diào)節(jié)HDM2和p53之間的相互作用的用量施用。
進一步更優(yōu)選的是，本發(fā)明化合物按照足以抑制HDM2和p53之間的相互作用的用量施用。
本領(lǐng)域已知HDM2通過結(jié)合p53的N-末端激活區(qū)域與p53形成負自身調(diào)節(jié)環(huán)，從而抑制p53功能同時加快p53的蛋白質(zhì)降解。對該調(diào)節(jié)環(huán)的干擾作用可用于增加活性p53在細胞中的濃度。因此，在野生型p53腫瘤細胞中，活性p53的平衡濃度可以通過拮抗HDM2和p53之間的相互作用來增加。這將導(dǎo)致在這類腫瘤細胞中由p53介導(dǎo)的促凋亡和抗增殖活性效果得到恢復(fù)。在對p53功能增加敏感的腫瘤型細胞中[Hansen R，Reddel R，BraithwaiteA；Oncogene 1995；112535-2545]，據(jù)期望本發(fā)明的化合物足以誘導(dǎo)細胞凋亡。
HDM2對p53的這種負調(diào)節(jié)作用可以限制目前所使用的DNA破壞劑(化學(xué)療法和放射療法)活化p53的數(shù)量級，從而限制其治療效果。因此，如果HDM2對p53的反饋抑制作用被阻斷，功能化p53水平的增加將會通過使導(dǎo)致細胞凋亡的野生型p53功能得以恢復(fù)和/或通過逆轉(zhuǎn)與p53相關(guān)的耐藥性而增強這類藥物的治療效果。由此說明，同時結(jié)合HDM2抑制作用[Wang H，Zeng X，Oliver P，Le LP，Chen J，Chen L，Zhou W，Agrawal S，Zhang R；Int.J.Oncol.1999；15653-660]和DNA體內(nèi)破壞療法可以導(dǎo)致協(xié)同地抗腫瘤效果。因此，本發(fā)明化合物在對化學(xué)療法和放射療法敏感的腫瘤細胞中也有治療應(yīng)用。
評價HDM2的致瘤能力不僅通過其抑制p53的能力，還通過其調(diào)節(jié)其它腫瘤抑制蛋白質(zhì)的能力，特別是視網(wǎng)膜母細胞腫瘤蛋白pRb以及與E2F1十分相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子。
因此，在本發(fā)明更優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明化合物按照足以調(diào)節(jié)HDM2和E2F轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用的用量施用。
進一步更優(yōu)選的是，本發(fā)明化合物按照足以抑制HDM2和E2F轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用的用量施用。
已經(jīng)表明，HDM2直接與pRb調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子E2F1/DP1相互作用[MartinK，Trouche D，Hagemeier C，Sorensen TS，La Thangue NB，Kouzarides T；Nature 1995；375691-694]，后者可以自身調(diào)節(jié)活化能力。因此，HDM2的過度表達增加了由E2F1介導(dǎo)的轉(zhuǎn)活化作用[Daujat S，Neel H，Piette J；TrendsGenet，2001；17459-464]。在沒有p53的情況下，HDM2通過傾向于雜二聚物降解來抑制E2F1/DP1的促凋亡活性[Kowalik TF，Degregori J，Leone G，Jakoi L，Nevins JR；Cell Growth Differ.1998；9113-118]。然而，HDM2同時仍然與E2F1/DP1共同作用以刺激DNA的合成。上述完全對立的觀察結(jié)果與這樣的說法相一致，那就是腫瘤細胞中的高E2F1/DP1水平是通過HDM2降低至適合于G1-S相轉(zhuǎn)換的適當(dāng)水平[Loughran O，La Thangue NB；Mol.Cell.Biol.2000；202186-2197]。在某些情形下，HDM2的抗凋亡和生長促進活性看起來都是集中在單一目標E2F1上，E2F1對于HDM2的p53依賴型致瘤活性可能是相當(dāng)關(guān)鍵的[Daujat S等人，同上]。E2F1的區(qū)域(氨基酸390至406)顯示出與p53的HDM2結(jié)合區(qū)域相當(dāng)驚人的相似性。由于HDM2與p53和E2F1的相互作用都定位于HDM2上的相同結(jié)合位置，因此可以預(yù)料到，HDM2/p53拮抗劑例如本發(fā)明的化合物不僅會活化細胞p53，同時還會抑制E2F1活性，這在腫瘤細胞中與通常情況是相反的。另外，還可以預(yù)料到本發(fā)明的化合物在腫瘤細胞中顯示出抗增殖活性，即使這類細胞中缺乏功能化的p53。
化合物本發(fā)明另一方面涉及通式Ia的化合物 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其每個可任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是
或 或 或 其中X是O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；E是N或CR4；Y是N；R2、R3、R4、以及R14-16各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3；條件是，所述化合物不是5-[(4-氯苯基)氨基]磺?；?2-呋喃羧酸。
本發(fā)明另一方面涉及通式Ib化合物， 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其中的每個可以任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是 或 其中X是S、O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；E是N或CR4；Y是CH或N；R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或者任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3。
本發(fā)明另一方面涉及通式Id化合物，
其中W是C1-5支鏈或直鏈烷基或C2-5鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基；Ar1是 或 其中X是O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；Y是CH或N；R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、或者任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；Ra-i各自獨立地是C1-5烷基；條件是，R2、R3和R4中的至少一個不是H；Ar2是 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；
R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHAr、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHAr、SO2NHRm、SO2Ar、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHAr、CONHRq、COAr或者CORr；Ri-r各自獨立地是C1-5烷基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8和R9中的至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或CF3；條件是，所述化合物不是5-[(4-氯苯基)氨基]磺?；?2-呋喃羧酸；N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-4-氯-3-硝基苯磺酰胺；2，6-二氯-N-[4-氯-3-(3-二乙氨基丙基)-苯基]4-三氟甲基苯-磺酰胺；或2，6-二氯-N-[4-氯-3-(3-二甲氨基丙基)-苯基]4-三氟甲基苯-磺酰胺。
關(guān)于通式1a、1b和1d的化合物的優(yōu)選實施方案與上面通式I化合物的定義相同。
本發(fā)明另一方面涉及選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[1]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)-酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[4]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[8]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[11]；5-(2-甲硫基-嘧啶-5-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[12]；4-噁唑-2-基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[13]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[14]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[15]；5-溴噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[16]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[17]；
5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；N-(4-氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[19]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[20]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-硝基苯磺酰胺[21]；N-(2，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[22]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[23]；5-苯磺酰基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[24]；5-苯磺酰基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[25]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[26]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；4-氯-N-(3，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[30]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[31]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氟苯基)-酰胺][32]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)-酰胺][33]；4-甲基-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[34]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[35]；3-氨基-4-甲基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[36]；N-(4-氯苯基)-4-甲基-3-硝基苯磺酰胺[37]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)-酰胺[40]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[41]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[42]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；
5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基苯甲基)酰胺[52]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-異丁基-酰胺[58]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯基酰胺[62]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺[64]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；5-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[68]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；5-乙基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[71]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[76]；4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[77]；
5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-3-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[78]；5-嗎啉-4-基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[79]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；4-氯-N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-3-硝基-苯磺酰胺[81]；N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺[82]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；6-氯-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[84]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[85]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[86]；6-苯氧基-吡啶-3-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[87]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-吡唑-1-基-苯磺酰胺[89]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯[90]；4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[91]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[92]；2-(4-氯-苯基氨磺酰基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯[93]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[94]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3，5-二氯-4-羥基-苯磺酰胺[95]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[96]；N-(4-氯-苯基)-4-硝基-苯-磺酰胺[97]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[98]；4-氨基-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-苯磺酰胺[99]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[100]；3，5-二氯-N-(3，5-二氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[101]；4-氨基-3-氯-N-(4-氯-苯基)-苯磺酰胺[102]；3-氯-N-(4-氯-苯基)-4-甲氧基-苯磺酰胺[103]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；
3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基)-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[106]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2-硝基-苯磺酰胺[107]；3-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺?；?-苯甲酸[108]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[109]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯甲基)-苯磺酰胺[110]；3，5-二氯-4-羥基-N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-苯磺酰胺[111]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；N-(3，5-二氯-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[113]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[114]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[115]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(2，4-二氯-苯基)-酰胺[118]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[121]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[123]；5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[124]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；3，5-二氯-N-(4-氟-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[127]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-酰胺[129]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
優(yōu)選的化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；
5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯-磺酰胺[35]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基苯-磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺[64]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；以及N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]。
更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[5]、[6]、[7]、[35]、[39]、[40]、[44]-[46]、[48]、[49]、[53]-[57]、[61]、[63]-[67]、[75]以及[83]。
尤其更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[5]、[6]、[39]、[40]、[46]、[48]、[49]、[53]、[56]、[57]、[61]、[63]、[64]、[66]以及[83]。
進一步更優(yōu)選的通式I化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[46]、[49]、[61]、[63]和[83]。
在另一優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[23]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)酰胺][33]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯-磺酰胺[35]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基(4-三氟甲基-苯甲基)酰胺[52]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯酰胺[62]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺[64]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺酰基)-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
更優(yōu)選的化合物是選自下面的化合物[2]、[3]、[6]、[7]、[33]、[39]、[40]、[44]-[46]、[48]-[57]、[59]-[67]、[72]、[75]、[130]以及[131]。
尤其更優(yōu)選的化合物是選自下面的化合物[7]、[45]、[46]、[50]-[53]、[64]-[67]、[72]以及[75]。
進一步更優(yōu)選的化合物是選自下面的化合物[50]、[51]、[65]、[67]和[75]。
本發(fā)明還涉及上述化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途。
藥物組合物本發(fā)明第四方面涉及一種藥物組合物，它含有與一種或多種可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合的如所述第一方面和第三方面所定義的通式I化合物。即使本發(fā)明的化合物(包括其可藥用鹽、酯以及可藥用溶劑化物)可以單獨施用，但是通常它們與藥物載體、賦形劑或稀釋劑混合施用，特別是用于人的治療。該藥物組合物可以以人藥或獸藥的形式用于人或動物。
這類適合用于本文所描述的各種不同形式的藥物組合物的賦形劑實例可以參見由A Wade和PJ Weller編著的“Handbook of PharmaceuticalExcipients”，第二版，(1994)。
適合于醫(yī)療應(yīng)用的可接受載體或稀釋劑是藥物領(lǐng)域眾所周知的，其描述在例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack出版公司(A.R.Gennaro編著.1985)。
適宜載體的實例包括乳糖、淀粉、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、甘露醇、山梨醇等。適宜稀釋劑的實例包括乙醇、甘油和水。
對藥物載體、賦形劑或稀釋劑的選擇可以根據(jù)所希望的給藥方式和常規(guī)藥物操作經(jīng)驗。藥物組合物除了可以含有載體、賦形劑或稀釋劑之外，還可以含有任意適宜的粘合劑、潤滑劑、助懸劑、包衣劑、助溶劑。
適宜粘合劑的實例包括淀粉、明膠、天然糖類例如葡萄糖、無水乳糖、自由流動的乳糖、β-乳糖、玉米甜味劑、天然和合成樹膠例如阿拉伯樹膠、西黃芪膠或海藻酸鈉、羧甲基纖維素和聚乙二醇。
適宜潤滑劑的實例包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。
藥物組合物中可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、染料甚至調(diào)味劑。防腐劑的實例包括苯甲酸鈉、山梨酸以及對-羥基苯甲酸酯。還可以使用抗氧化劑和助懸劑。
鹽/酯本發(fā)明化合物可以以鹽或酯的形式存在，特別是可藥用鹽或酯。
本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括其適宜的酸加成鹽或堿式鹽。有關(guān)適宜的可藥用鹽的綜述可以參見Berge等人，J Pham Sci，66，1-19(1977)?？梢耘c例如下面的物質(zhì)形成鹽強的無機酸，例如無機酸如硫酸、磷酸或鹽酸；強的有機羧酸，例如未被取代或被取代(例如被鹵素取代)的具有1-4個碳原子的烷基羧酸如乙酸；飽和或不飽和二元羧酸，例如草酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、反丁烯二酸、鄰苯二甲酸或四酞酸(tetraphthalic)；羥基羧酸，例如抗壞血酸、羥基乙酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；苯甲酸；或者有機磺酸，例如未被取代或被取代(例如被鹵素取代)的(C1-C4)-烷基-或芳基-磺酸如甲磺酸或?qū)妆交撬帷?br>
使用有機酸或醇/氫氧化物可以形成酯，這取決于被酯化的官能團。有機酸包括羧酸，例如未被取代或被取代(例如被鹵素取代)的具有1-12個碳原子的烷基羧酸如乙酸；飽和或不飽和二元羧酸，例如草酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、反丁烯二酸、鄰苯二甲酸或四酞酸；羥基羧酸，例如抗壞血酸、羥基乙酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；苯甲酸；或者有機磺酸，例如未被取代或被取代(例如被鹵素取代)的(C1-C4)-烷基-或芳基-磺酸如甲磺酸或?qū)妆交撬?。適宜的氫氧化物包括無機氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁。醇包括未被取代或被取代(例如被鹵素取代)的具有1-12個碳原子的烷醇。
對映異構(gòu)體/互變異構(gòu)體在前面所討論的本發(fā)明各個方面中，本發(fā)明包括適宜的本發(fā)明化合物所有的對映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體在內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以識別出那些具有光學(xué)特性(一個或多個手性碳原子)或互變異構(gòu)特性的化合物。相應(yīng)的對映異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體可以按照本領(lǐng)域已知的方法分離/制備。
立體和幾何異構(gòu)體某些本發(fā)明化合物可能存在立體異構(gòu)體和/或幾何異構(gòu)體-例如它們可能具有一個或多個不對稱和/或幾何中心，因而可能存在兩種或更多種立體異構(gòu)和/或幾何異構(gòu)形式。本發(fā)明對這些化合物的所有單獨立體異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體、以及它們的混合物的應(yīng)用進行了預(yù)期。在權(quán)利要求書中所使用的術(shù)語均包括上述形式，只要所述形式仍然具有適宜的功能活性(雖然不必達到相同的程度)。
本發(fā)明還包括這些化合物或其可藥用鹽的所有適宜的同位素變化。將本發(fā)明化合物或其可藥用鹽的同位素變化定義為其中至少一個原子被具有相同原子序數(shù)但是原子質(zhì)量不同于自然界通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量的原子所取代?？刹⑷氡景l(fā)明化合物或其可藥用鹽的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟以及氯的同位素，分別如2H、3H、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F和36Cl。本發(fā)明化合物或其可藥用鹽的某些同位素變化，例如那些合并有具有放射活性的同位素如3H或14C的同位素變化，可用于藥物和/或底物組織分布研究。含氚即3H、和碳-14即14C的同位素由于易于制備和檢測因而尤其優(yōu)選。另外，被同位素例如氘即2H取代，由于更高的代謝穩(wěn)定性從而可以。提供某些治療優(yōu)勢，例如延長體內(nèi)半衰期或降低所需劑量，因此在某些情形下可能優(yōu)選這種情況。本發(fā)明所述的本發(fā)明化合物及其可藥用鹽的各種同位素變化通?？梢园凑粘Ｒ?guī)方法使用適宜試劑的適宜同位素變化制備得到。
溶劑化物本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的溶劑化物的用途。權(quán)利要求書中所使用的術(shù)語包括這些形式在內(nèi)。
多晶型物此外，本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物的各種晶型、多晶型以及無水/含水形式。在制藥工業(yè)領(lǐng)域應(yīng)該很容易理解，那就是這類化合物通過稍微改變純化方法和/或其合成制備過程中所使用的分離溶劑，就可以分離得到其任意一種上述形式。
前藥本發(fā)明另外還包括本發(fā)明化合物的前藥形式。前藥通常是指其中一個或多個適宜基團被結(jié)構(gòu)修飾過的化合物，這種結(jié)構(gòu)修飾在被給藥至人或哺乳動物客體之后可以發(fā)生逆轉(zhuǎn)。這種逆轉(zhuǎn)通常是通過天然存在于這類客體中的酶來完成，當(dāng)然為了在體內(nèi)完成這種逆轉(zhuǎn)也可以與前藥一起同時服用第二藥物。這種結(jié)構(gòu)修飾的實例包括酯化(例如上文所述的任意一種情形)，其中逆轉(zhuǎn)可以通過酯酶等來完成。其它的此類體系對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言也是眾所周知的。
給藥方法本發(fā)明的藥物組合物適合口服給藥、直腸給藥、陰道給藥、腸胃外給藥、肌肉給藥、腹膜內(nèi)給藥、動脈內(nèi)給藥、膜內(nèi)給藥、支氣管內(nèi)給藥、皮下給藥、皮內(nèi)給藥、靜脈內(nèi)給藥、鼻腔給藥、口腔給藥或者舌下給藥。
對于口服給藥，優(yōu)選使用的是制成壓制片劑、丸劑、片劑、gellules、滴劑、以及膠囊劑。這些組合物每個劑量優(yōu)選含有1-250mg、更優(yōu)選含有10-100mg活性成分。
其它的給藥形式包括溶液劑或乳劑，它們可以通過靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或者肌肉內(nèi)注射給藥，并且可以由無菌或滅菌溶液制備得到。本發(fā)明的藥物組合物還可以是栓劑、陰道栓劑、混懸劑、乳劑、洗劑、軟膏劑、乳膏、凝膠劑、噴霧劑、溶液劑或者撲粉的形式。
經(jīng)皮給藥的替代方式就是使用皮膚貼片(skin patch)。例如，可以將活性成分合并入由聚乙二醇的含水乳液或者液體石蠟組成的乳膏中。還可以將活性成分按照1-10重量％的濃度合并入軟膏中，該軟膏由白蠟或者混合有所需穩(wěn)定劑和防腐劑的白色軟石蠟基質(zhì)組成。
可注射制劑每個劑量可含有10-1000mg、優(yōu)選含有10-250mg活性成分。
可以將組合物制成單位劑量形式，也就是含有單位劑量的單個部分或者是單位劑量的多單元或亞單元形式。
劑量本領(lǐng)域普通技術(shù)人員未經(jīng)過度試驗完全可以很容易確定施用給客體的任意一種即時組合物的適宜劑量。典型的是，醫(yī)生可以確定最適合用于個體患者的實際劑量，其取決于各種因素包括所使用具體化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時間長短、年齡、體重、身體概況、性別、飲食、給藥方式和時間、排泄速度、聯(lián)合用藥情況、具體癥狀的嚴重程度、以及該個體正在接受的治療情況。本文所述的劑量可被解釋成一般情形下使用的劑量。當(dāng)然出現(xiàn)某些更高或者更低劑量范圍的個別情形也是應(yīng)該的，其也落入本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
根據(jù)需要，本發(fā)明藥物可以按照0.01-30mg/kg體重的劑量給藥，例如0.1-10mg/kg，更優(yōu)選0.1-1mg/kg體重。
在示例性實施方案中，為了治療惡性腫瘤向患者施用一個或多個10-150mg/天的劑量。
并用藥物本發(fā)明另一方面還涉及含有至少一種上述的本發(fā)明化合物和至少一種細胞毒素劑的并用藥物。
優(yōu)選這種并用藥物是協(xié)同并用。因此優(yōu)選本發(fā)明化合物能夠與一種或多種其它細胞毒素劑產(chǎn)生協(xié)同相互作用，例如增強其它藥物的細胞毒素活性。
在一優(yōu)選實施方案中，細胞毒素劑是化學(xué)治療劑。
在特別優(yōu)選的實施方案中，該化學(xué)治療劑是順鉑或依托泊苷。進一步優(yōu)選地，本發(fā)明化合物具有化學(xué)致敏活性，例如通過協(xié)同作用增強順鉑和依托泊苷的細胞毒素活性。換句話說，本發(fā)明化合物和細胞毒素劑的這種聯(lián)合作用產(chǎn)生了比通過每種成分的單獨活性相疊加的期望值更高的活性。在后文實施例中將會進一步具體描述這種協(xié)同效應(yīng)。
本發(fā)明另一方面涉及含有與可藥用稀釋劑、賦形劑或載體相混合的至少一種上述的本發(fā)明化合物、以及一種或多種細胞毒素劑。
在特別優(yōu)選的實施方案中，聯(lián)合施用一種或多種本發(fā)明的化合物和一種或多種其它的抗癌劑，例如市場上可得到的已有抗癌藥物。在這種情形中，在施用本發(fā)明化合物之前、同時或者之后還可以施用一種或多種其它的抗癌藥物。
因此，本發(fā)明一方面在于提供一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種上述的本發(fā)明化合物，另外在給藥之前、同時或者之后還施用一種或多種其它的細胞毒素劑。
抗癌藥物通常是聯(lián)合使用時更有效。特別是為了避免主要毒性反應(yīng)、作用機理和耐藥性機理的重復(fù)疊加，需要進行聯(lián)合治療。此外，為了在最短的時間間隔內(nèi)以最大耐受劑量服用最多的藥物也需要進行聯(lián)合用藥。并用化學(xué)治療藥物的主要優(yōu)勢在于它可以通過生物化學(xué)作用促進附加或可能的協(xié)同作用，并且它還可以在早期癌細胞中降低耐藥性出現(xiàn)的幾率，而耐藥性的出現(xiàn)幾率與最初使用單一藥物進行的化學(xué)治療有關(guān)。通過服用甲酰四氫葉酸以增強5-氟尿嘧啶的活性細胞內(nèi)代謝產(chǎn)物與其靶點胸苷酸合酶的結(jié)合，從而使其細胞毒素活性得到提高，上述實例也闡釋了在選擇藥物并用時如何利用各種生物化學(xué)相互作用。
很多不同的聯(lián)合療法被用于當(dāng)前癌癥和白血病的治療中。有關(guān)臨床實踐更深入的綜述可以參見E.E.Vokes和H.M.Golomb編著的″OncologicTherapies″，由Springer出版。
通過對測試化合物以及現(xiàn)有藥物或者在特定癌癥的治療初期或在來自于該類型癌癥的細胞系中被認為具有重要價值的藥物進行研究，可以尋求到有益的并用藥物。上述過程還可用于確定藥物服用的先后順序，也就是確定在之前、同時還是在之后進行給藥。這樣的給藥方案可能是本文所描述的所有周期活性藥物的共有特征之一。
本發(fā)明化合物還可以與放射治療進行聯(lián)合應(yīng)用。因此，本發(fā)明另一方面在于提供一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種上述的通式I化合物，另外在給藥之前、同時或者之后結(jié)合使用放射治療。
測定方法本發(fā)明第五方面涉及上述第一方面所定義的通式I化合物在測定對HDM2結(jié)合力的方法中的用途。
優(yōu)選地，該測定方法能夠識別出可以影響HDM2對p53和/或E2F相互作用的候選化合物。
進一步更優(yōu)選地，該測定方法能夠識別出可以抑制HDM2與p53和/或E2F之間相互作用的候選化合物。
尤其優(yōu)選地，該測定方法是競爭性結(jié)合測定方法。
優(yōu)選地，該競爭性結(jié)合測定方法包括在p53衍生肽存在下，使本發(fā)明上述第一方面所定義的通式I化合物與HDM2接觸，然后檢測在HDM2和所述p53衍生肽之間的相互作用中所出現(xiàn)的任意變化。
在特別優(yōu)選的實施方案中，所述p53衍生肽是熒光標記或者生物素化的p53衍生肽。
本發(fā)明第六方面提供了一種檢測配體對HDM2結(jié)合力的方法，所述方法包括下述步驟(i)在p53衍生肽存在下，使配體與HDM2接觸；并(ii)檢測在HDM2和所述p53衍生肽之間的相互作用中所出現(xiàn)的任意變化；其中所述配體是根據(jù)本發(fā)明上述第一方面的化合物。
本發(fā)明一方面涉及一種包括下述步驟的方法(a)完成上文所述的測定方法；(b)識別出能夠結(jié)合配體結(jié)合區(qū)域的一種或多種配體；和(c)制備一定量的所述一種或多種配體。
本發(fā)明另一方面提供了包括下述步驟的方法(a)完成上文所述的測定方法；(b)識別出能夠結(jié)合配體結(jié)合區(qū)域的一種或多種配體；然后(c)制備含有所述一種或多種配體的藥物組合物。
本發(fā)明另一方面提供了包括下述步驟的方法(a)完成上文所述的測定方法；(b)識別出能夠結(jié)合配體結(jié)合區(qū)域的一種或多種配體；(c)對所述一種或多種能夠結(jié)合配體結(jié)合區(qū)域的配體進行修飾；(d)完成上文所述的測定方法；(e)任選制備含有所述一種或多種配體的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及通過上文所述方法識別出來的配體。
本發(fā)明再一方面涉及含有通過上文所述方法識別出來的配體的藥物組合物。
本發(fā)明另一方面涉及通過上文所述方法識別出來的配體在制備用于治療增殖性疾病的藥物組合物中的用途。
優(yōu)選地，所述候選化合物是通過對本發(fā)明化合物進行常規(guī)SAR修飾而得到的。
本文所使用的術(shù)語“常規(guī)SAR修飾”是指本領(lǐng)域已知的通過化學(xué)衍生手段而對給定化合物進行變型的常規(guī)方法。
上述方法還可用于篩選可用作HDM2和p53之間相互作用的抑制劑的配體。
化學(xué)合成本發(fā)明化合物可以按照本領(lǐng)域已知的方法制備。特別地，可以使用芳基磺?；u化物與芳基胺之間的縮合反應(yīng)。通過在該反應(yīng)中使用芳基仲胺或者通過將伯雙芳基酰胺前體烷基化可以得到N-取代的雙芳基磺酰胺。利用烷基或芳烷基鹵化物通過磺酰基氨基脫鹵化反應(yīng)或者利用烷基或芳烷基鹵化物通過例如Tsunoda反應(yīng)[Tsunoda T，Otsuka J，Yamamiya Y，Ito S；Chem.Lett.1994539-542]可以完成烷基化。許多含有噻吩磺酰基官能團的本發(fā)明雙芳基磺酰胺以及用于磺酰胺縮合反應(yīng)的適宜噻吩磺?；u化物前體可以按照[Cremlyn RJ，Goulding KH，Swinbourne FJ，Yung K-M；Phosphorus Sulfur 1981；10111-119；Obafemi CA；Phosphorus Sulfur 1982；13119-131.]所描述的方法制備。
通過下面的非限制性實施例同時參照下面的附圖對本發(fā)明進行進一步描述，其中
圖1示出了化合物2或DNA破壞誘導(dǎo)劑在HDM2途徑中的關(guān)鍵蛋白水平上和細胞系范圍內(nèi)的細胞形態(tài)學(xué)方面的作用。更具體地說，圖1示出了(A)化合物2或依托泊苷對于AGS細胞中的細胞凋亡蛋白的誘導(dǎo)活性。AGS使用5倍[IC50]值的化合物2或依托泊苷處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用所述抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化(cell rounding)程度的評價是在各自電泳泳道(lane)的上方進行的。箭頭符號表示PARP的85-kDa分解產(chǎn)物(代表細胞凋亡)的位置。(B)化合物2在AGS細胞(野生型53)的細胞周期性蛋白水平上的作用。AGS細胞使用5倍[IC50]值的化合物2或依托泊苷處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用所述抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化程度的評價是在各自電泳泳道的上方進行的。(C)陰性對照化合物(參考實施例10)、化合物2、順鉑、以及茴香霉素在MCF7細胞中的關(guān)鍵蛋白水平上的作用。MCF7細胞使用13.5μM的陰性對照化合物或者5倍[IC50]值的化合物2處理。順鉑和茴香霉素(一種轉(zhuǎn)錄抑制劑)分別為50μM或37μM。在不同時間點上收獲細胞；然后制備得到溶菌液并通過SDS-PAGE分離，再用免疫印跡法分析。這里示出了被檢測到的蛋白質(zhì)。評價了圓形化或移動細胞的程度以及活細胞的百分比。(D)化合物2或依托泊苷在蛋白質(zhì)水平上和H1299細胞(p53裸細胞)的細胞形態(tài)學(xué)方面的作用。H1299使用5倍[IC50]值的化合物2或依托泊苷處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用所述抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化程度的評價是在各自電泳泳道的上方進行的。(E)5倍[IC50]值的化合物2在SJSA1細胞(過度表達HDM2)的細胞周期蛋白水平上的作用。SJSA1細胞使用5倍[IC50]值的化合物2處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用一系列抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化程度的評價是在各自電泳泳道的上方進行的。
圖2示出了化合物49對于AGS、SJSA1和H1299細胞的作用。每種細胞系使用5倍[IC50]值的化合物處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用所述抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化程度的評價是在各自電泳泳道的上方進行的。箭頭符號表示PARP的85-kDa裂解產(chǎn)物(代表細胞凋亡)的位置。
圖3示出了化合物2在MCF7和H1299細胞的形態(tài)學(xué)和細胞存活率方面的作用。細胞使用5倍[IC50]值的化合物2處理，然后在不同時間點上收集。在細胞被胰蛋白酶化之前計算圓形細胞的百分比，然后利用錐蟲藍計算細胞存活率。
圖4示出了化合物68和69對于MCF7細胞和H1299細胞的作用。更具體地說(A)將MCF7細胞使用5倍[IC50]值的化合物69以及相同濃度的68處理，然后在指定的時間點上收集。通過SDS-PAGE分離出等量的細胞溶菌液，然后利用各種抗體通過免疫印跡法進行分析。對細胞圓形化程度的評價是在各自電泳泳道的上方進行的。箭頭符號表示PARP的85-kDa裂解產(chǎn)物(代表細胞凋亡)的位置。(B)將H1299細胞使用5倍[IC50]值的化合物69和相同濃度的68處理，然后在指定的時間點上收集并分析。
圖5示出了化合物2和順鉑在MCF7和H1299細胞的細胞周期分布性方面的作用。細胞未經(jīng)處理，或者使用5倍[IC50]值的化合物2或順鉑處理，然后在指定的時間點上收集。細胞用碘化丙啶(propidium iodide)染色，并使用流式細胞測定器測定細胞周期位置。
圖6示出了化合物2在AGS和H1299細胞的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(caspase)活化方面的作用。更具體地說(A)將細胞使用3倍[IC50]值的化合物2或順鉑處理，然后在指定的時間點上收集。制備得到細胞溶菌液，利用caspACE測定方法測定出天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性，然后將數(shù)值描在圖上。(B)將細胞使用5倍[IC50]值的化合物2或順鉑處理，然后在指定的時間點上收集。AGS細胞還用化合物2在天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑Z-VAD.fmk存在下進行培養(yǎng)。制備得到細胞溶菌液，利用caspACE測定方法測定出天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性，然后將數(shù)值描在圖上。
圖7示出了HDM2和HDMX siRNA在MCF7細胞的p53和E2F-1水平上的作用。更具體地說(A)MCF7細胞未經(jīng)處理(電泳泳道1-3)模擬轉(zhuǎn)染(電泳泳道4-6)，使用g13對照siRNA(電泳泳道7-9)、HDM2 siRNA 1403(電泳泳道10-12)、或HDM2 siRNA 1403和1404(電泳泳道13-15)轉(zhuǎn)染。每隔24小時重復(fù)上述操作。每次轉(zhuǎn)染24小時之后收集細胞，這樣這些細胞就被轉(zhuǎn)染一次、兩次、或者三次，然后通過Western印跡法分析。(B)MCF7細胞未經(jīng)處理(電泳泳道1-3)模擬轉(zhuǎn)染(電泳泳道4-6)，使用g13對照siRNA(電泳泳道7-9)、HDM2 siRNA 1403(電泳泳道10-12)、HDMX siRNA(電泳泳道13-15)或HDM2和HDMX siRNA(電泳泳道16-18)轉(zhuǎn)染。在第24、48、和72小時收集細胞，然后通過Western印跡法分析。
實施例概述使用Vydac 218TP54柱(C18反相固定相；4.5×250mm柱)、用所述的線性梯度的乙腈水溶液(含有0.1％CF3COOH)以1mL/min的速度洗脫，然后再無梯度洗脫，這樣測得HPLC保留時間(tR)。HPLC方法B是指下面的方法Supercosil ABZ+Plus柱(21.2×250mm)，使用5-95％的線性梯度的乙腈水溶液以20mL/min的速度洗脫10分鐘，然后再無梯度洗脫。使用了UV監(jiān)視器(254nm)。除非另有說明，所有的純化操作均是使用硅膠60A(粒徑為35-70微米)、己烷/EtOAc(4∶1)洗脫來完成的。薄層色譜(TLC)是使用預(yù)先涂覆有0.2mm硅膠60 F254的鋁片完成的。1H NMR光譜是使用各種不同的裝置記錄的?；瘜W(xué)位移使用TMS為標準，以ppm給出的，耦合常數(shù)(J)單位為Hz。質(zhì)譜是在正離子或負離子電噴霧條件下記錄的。
實施例1制備伯雙芳基磺酰胺的一般方法將適宜的磺?；然?1.0mol當(dāng)量)懸浮在二氯甲烷中。懸浮液冷卻至0℃。反應(yīng)混合物在攪拌的同時，加入適宜的氨基組分(適宜的如苯胺、芐基胺等)(1.1mol當(dāng)量)和吡啶(1.5mol當(dāng)量)。反應(yīng)混合物慢慢溫?zé)嶂潦覝?。繼續(xù)攪拌直到TLC[庚烷∶乙酸乙酯(2∶1)]表明反應(yīng)進行完全。分離產(chǎn)物，按照下面的步驟純化將反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，然后連續(xù)用稀鹽酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液、水以及鹽水洗滌。有機部分用MgSO4干燥，減壓下濃縮得到粗產(chǎn)物磺酰胺。柱色譜處理[柱(Isolute SI；Jones Chromatography)，庚烷∶乙酸乙酯(12∶1→3∶1)]得到所需的雙芳基磺酰胺。
按照上述方法制備得到本發(fā)明的伯雙芳基磺酰胺化合物。代表化合物的具體解析結(jié)果如下所示5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺2。TLC RF＝0.72(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR17.08分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.64(1H，br s，NH)，7.05(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.27(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.84(1H，s，噻吩-H)；MS 352.94(M-H)-，C10H6Cl2N2O4S2＝353.20。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氟-苯基)-酰胺3。TLC RF＝0.35(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CDCl3.)δ6.83(1H，br s，NH)，6.99(2H，t，J8.5，9.0，Ph-H)，7.10(2H，dd，J8.5，9.0Ph-H)，7.82(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺6。TLC RF＝0.45(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CD3OD)δ7.37(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.62(2H，d，J8.5，Ph-H)，8.01(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺8。TLC RF＝0.44(己烷∶EtOAc，4∶1)；1H NMR(CDCl3.)δ6.86(d，1H，J4.1，噻吩-H)，6.95(s，1H，NH)，7.24(d，2H，J8.4，Ph-H)，7.36(d，1H，J4.1，噻吩-H)，7.57(d，2H，J8.4，Ph-H)；MS341[M]+，C11H7ClF3NO2S2＝341.76。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺9。HPLC tR7.48分鐘(方法B)；MS 532.1(M-H)-79Br81Br，C12H5Br2F6NO2S2＝533.10。
5-氯-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺10。HPLC tR8.45分鐘(方法B)；MS306.1(M-H)-35Cl2，C10H7Cl2NO2S2＝308.20。
5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺11。HPLC tR7.31分鐘(方法B)；)；1H NMR(CDCl3.)δ6.85(d，1H，J4.1，噻吩-H)，7.31(s，1H，NH)，7.34(d，1H，J4.1，噻吩-H)，7.54(s，2H，Ph-H)，7.60(s，1H，Ph-H)；MS408.0(M-H)-35Cl，C12H6ClF6NO2S2＝409.76。
5-(2-甲硫基-嘧啶-5-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺12。HPLC tR9.01分鐘(方法B)；MS 429.9(M-H)-35Cl2，Cl5H11Cl2N3O2S3＝432.3677。
4-噁唑-2-基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺13。HPLC tR9.02分鐘(方法B)；MS 367.1(M-H)-，C16H11F3N2O3S＝368.33。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺14。HPLC tR9.13分鐘(方法B)；MS 435.1(M-H)-，C17H10F6N2O3S＝436.33。
4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺15。HPLC tR8.25分鐘(方法B)；MS 419.9(M-H)-81Br35Cl，C11H6BrClF3NO2S2＝420.65。
5-溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺16。HPLC tR9.57分鐘(方法B)；MS352.0(M-H)-81Br35Cl，C10H7BrClNO2S2＝352.66。
5-溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺17。HPLC tR9.11分鐘(方法B)；MS 385.8(M-H)-81Br35Cl2，C10H6BrCl2NO2S2＝387.10。
5-溴-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺18。HPLC tR8.07分鐘(方法B)；MS 453.9(M-H)-81Br，C12H6BrF6NO2S2＝454.21。
N-(4-氯-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺19。HPLC tR9.06分鐘(方法B)；MS311.0(M-H)-35Cl，C12H9ClN2O4S＝312.73。
3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺20。MS 345.0(M-H)-，C13H9F3N2O4S＝346.28。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺21。MS 413.0(M-H)-，C14H8F6N2O4S＝414.29。
N-(2，4-二氯-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺22。MS 344.8(M-H)-35Cl2，C12H8Cl2N2O4S＝347.17。
5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺23。MS 446.0(M-H)-，C17H12F3NO4S3＝447.47。
5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺24。MS 411.9(M-H)-35Cl，C16H12ClNO4S3＝413.92。
5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺25。MS 446.0(M-H)-35Cl2，C16H11Cl2NO4S3＝448.36。
5-氯-噻吩-2-磺酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺26。MS 339.8[M-H]-35Cl3，C10H6Cl3NO2S2＝342.65。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)-酰胺27。1H NMR(CDCl3)δ6.69(s，1H，NH)，7.26(s，1H，Ph-H)，7.28(m，1H，Ph-H)，7.33(s，1H，噻吩-H)，7.42(d，2H，J4.2，Ph-H)；MS 463.8(M-H)-79Br81Br，C11H6Br2F3NO2S2＝465.10。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺28。MS 465.7(M-H)-81Br79Br37Cl35Cl2，C10H5Br2Cl2NO2S2＝466.00。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺29。TLC RF＝0.78(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CDCl3.)δ7.53(3H，s，Ph-H)，7.60(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.85(1H，m，Ph-H)8.30(1H，s，Ph-H)；MS 447.0(M-H)-35Cl，C14H7ClF6N2O4S＝448.72。
4-氯-N-(3，4-二氯-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺30。MS 380.9(M-H)-37Cl35Cl2，C12H7Cl3N2O4S＝381.62。
5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基苯基)-酰胺31。TLC RF＝0.39(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR22.14分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ3.915(3H，s，NCH3)，6.60(1H，s，二唑-H)，7.06(1H，d，J3.5，噻吩-H)，7.11(1H，br s，NH)，7.23(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.52(3H，m，Ph-H & 噻吩-H)；MS 456.24(M+H)+，C16H11F6N3O2S2＝455.40。
5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氟-苯基)-酰胺]32。HPLC tR19.68分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3)δ6.88(4H，m，Ph-H)，6.97(4H，m，Ph-H)，7.47(1H，s，噻吩-H)；MS 462.95(M-2H)-，C16H11ClF2N2O4S3＝464.92。
5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)-酰胺]33。HPLC tR22.54分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3)δ7.09(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.14(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.40(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.46(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.66(1H，s，噻吩-H)；MS 562.88(M-2H)-，C18H11ClF6N2O4S3＝564.93。
4-甲基-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺34。HPLC tR20.32分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3)δ2.90(3H，s，CH3)，7.15(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.38(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.41(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.81(1H，d，J8.5，Ph-H)，8.38(1H，s，Ph-H)；MS 359.11(M-H)-，C14H11F3N2O4S＝360.31。
4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺35。TLC RF＝0.40(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR15.45分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.16(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.43(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.57(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.83(1H，dd，J8.5，8.5，Ph-H)，8.29(1H，d，J2.5，Ph-H)。
3-氨基-4-甲基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺36。HPLC tR17.14分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ2.07(3H，s，CH3)，7.00(3H，m，Ph-H)，7.11(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.37(2H，d，J8.0，Ph-H)；MS 329.15(M-H)-，C14H13F3N2O2S＝330.33。
N-(4-氯-苯基)-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺37。1H NMR(CDCl3.)δ2.58(3H，s，CH3)，6.72(1H，br s，NH)，6.96(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.17(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.39(1H，d，J8.0，Ph-H)，7.74(1H，d，J8.0，Ph-H)，8.31(1H，s，Ph-H)。
4-氯-N-(4-氯-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺38。1H NMR(CDCl3.)δ6.74(1H，brs，NH)，6.98(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.19(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.57(1H，d，J8.0，Ph-H)，7.71(1H，d，J8.0，Ph-H)，8.20(1H，s，Ph-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺39。TLC RF＝0.75(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC 18.83分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.97(1H，br s，NH)，7.05(2H，m，Ph-H)，7.17(1H，m，Ph-H)，7.92(1H，s，噻吩-H).MS 386.84(M-H)-，C10H5Cl3N2O4S2＝387.65。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3，5-二氟-苯基)-酰胺40。HPLC tR16.59分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.63(1H，m，Ph-H)，6.70(2H，m，Ph-H)，7.01(1H，br s，NH)，7.93(1H，s，噻吩-H).MS 353.96(M-H)-，C10H5ClF2N2O4S2＝354.74。
5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺41。TLC RF＝0.75(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR21.09分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.17(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.47(2H，d，J8.5，Ph-H)，8.23(1H，m，吡啶-H)，8.62(1H，m，吡啶-H)；MS 414.88(M-H)-，C12H7BrClF3N2O2S＝415.61。
5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺42。HPLC tR23.17分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3)δ7.54(3H，s，Ph-H)，8.26(1H，m，吡啶-H)，8.65(1H，m，吡啶-H)；MS 482.80(M-H)-，C13H6BrClF6N2O2S＝483.61。
5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺43。TLC RF＝0.63(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CD3OD)δ3.97(3H，s，NCH3)，6.82(1H，s，二唑-H)，7.37(1H，dd，J4.0，4.0，噻吩-H)，7.64(1H，dd，J4.0，4.0，噻吩-H)，7.68(1H，s，Ph-H)，7.73(2H，s，Ph-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺44。HPLC tR19.49分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.19(1H，s，Ph-H)，7.58(2H，s，Ph-H)，7.67(1H，br s，NH)，7.95(1H，s，噻吩-H)；MS 452.51(M-2H)-，C12H5ClF6N2O4S2＝454.75。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氟-苯甲酰胺45。HPLC tR15.89分鐘(20-80％，20分鐘)；TLC RF＝0.64(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CDCl3.)δ4.20(2H，d，J6.0，ArCH2)，6.95(2H，t，J8.5，Ph-H)，7.17(2H，dd，J8.5，8.5，Ph-H)，7.82(1H，s，噻吩-H)；MS 348.96(M-2H)-，C11H8ClFN2O4S2＝350.78。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-三氟甲基-苯甲酰胺46。TLC RF＝0.71(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR15.16分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.30(2H，d，J6.0，ArCH2)，5.08(1H，br s，NH)，7.34(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.54(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.86(1H，s，噻吩-H)；MS 398.91(M-2H)-，C12H8ClF3N2O4S2＝400.78。
4-氯-N-(3，5-二氯-苯基)-3-硝基-苯磺酰胺47。HPLC tR18.64分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.98(2H，m，Ph-H)，7.01(1H，m，Ph-H)，7.60(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.84(1H，dd J2.0，8.5，Ph-H)，8.27(1H，d，J2.0，Ph-H)；MS 380.91(M-H)-，C12H7Cl3N2O4S＝381.62。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺48。TLC RF＝0.44(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR13.48分鐘(20-80％，20分鐘)；1HNMR(CD3OD.)δ2.91(2H，t，J6.5，CH2)，3.43(2H，t，J6.5，CH2)，6.89(1H，t，J8.0，吲哚-H)，6.97(1H，t，J8.0，吲哚-H)，7.01(1H，s，吲哚-H)，7.23(1H，d，J8.0，吲哚-H)，7.38(1H，d，J8.0，Ar)，7.47(1H，s，噻吩-H)；MS 384.21(M-H)-，C14H12ClN3O4S2＝385.85。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基-乙基]-酰胺49。TLCRF＝0.49(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR13.48分鐘(20-80％，20分鐘)；1HNMR(CDCl3.)δ1.40(3H，d，J6.5，CHCH3)，2.58(1H，dd，J10.5，10.5，CH2)，2.96(1H，dd，J3.5，3.5，CH2)，3.64(1H，m，CHCH3)，6.91(2H，m，吲哚-H)，7.04(1H，t，J8.0，7.0，吲哚-H)，7.17(1H，d，J8.0，吲哚-H)，7.25(2H，m，吲哚-H&噻吩-H)，8.105(1H，br s，NH)；MS 398.63(M-H)-，C15H14ClN3O4S2＝399.87。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺54。HPLC tR18.14分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.20(2H，d，J6.0，ArCH2)，5.16(1H，br s，NH)，7.07(2H，s，Ph-H)，7.23(1H，s，Ph-H)，7.84(1H，s，噻吩-H)；MS400.86(M-H)-，C11H7Cl3N2O4S2＝401.67。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺55。HPLC tR16.42分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.21(2H，d，J6.0，ArCH2)，5.20(1H，br s，NH)，6.69(1H，m，Ph-H)，6.75(2H，m，Ph-H)，7.87(1H，s，噻吩-H).MS367.16(M-H)-，C11H7ClF2N2O4S2＝368.77。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺56。HPLC tR16.82分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.20(2H，d，J6.0，ArCH2)，5.13(1H，br s，NH)，7.07(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.23(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.82(1H，s，噻吩-H)；MS366.95(M-H)-，C11H8Cl2N2O4S2＝367.23。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺57。HPLC tR16.25分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ1.45(3H，d，J7.0，CH3)，4.54(1H，m，PhCH)，5.18(1H，br s，NH)，6.90(2H，m，Ph-H)，7.10(2H，m，Ph-H)，7.55(1H，s，噻吩-H)；MS 363.18(M-H)-，C12H10ClFN2O4S2＝364.80。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-異丁基-酰胺58。HPLC tR20.04分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ0.85(6H，d，J7.0，CH3)，1.53(1H，m，CH(CH3)2)，5.18(2H，d，J7.5，NCH2)，7.08(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.26(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.61(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺59。HPLC tR17.89分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.10(1H，t，J8.0，苯并咪唑-5/6)，7.23(2H，m，苯并咪唑-4/7&5/6)，7.63(1H，d，J8.5，苯并咪唑-4/7)，8.15(1H，s，噻吩-H)；MS 359.03(M+H)+，C11H7ClN4O4S2＝358.78。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺60。HPLC tR23.16分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.91(2H，t，J6.5，CH2)，3.38(2H，t，J6.5，CH2)，4.70(1H，br s，NH)，6.89(1H，t，J8.0，吲哚-H)，6.95(2H，m，吲哚-H)，7.23(2H，m，吲哚-H)，7.59(1H，s，噻吩-H)，8.06(1H，br s，吲哚-NH)；MS 419.94(M-H)-，C14H11Cl2N3O4S2＝420.29。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺61。HPLC tR12.81分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ3.70(3H，s，OMe)，6.88(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.07(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.82(1H，s，噻吩-H)；MS 349.26(M+H)+，C11H9ClN2O5S2＝348.78。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯酰胺62。HPLC tR15.36分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.66(1H，s，NH)，7.10(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.20(1H，m，Ph-H)，7.28(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.82(1H，s，噻吩-H)；MS 317.22(M-H)-，C10H7ClN2O4S2＝318.76。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺63。HPLC tR16.59分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.27(3H，s，CH3)，6.54(1H，br s，NH)，6.98(2H，d，J7.5，Ph-H)，7.08(2H，d，J7.5，Ph-H)，7.79(1H，s，噻吩-H)；MS 331.24(M-H)-，C11H9ClN2O4S2＝332.78。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺64。HPLC tR15.73分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.24(2H，d，J5.5，CH2)，5.05(1H，br s，NH)，7.16(2H，m，Ph-H)，7.24(3H，m，Ph-H)，7.76(1H，s，噻吩-H)；MS 331.04(M-H)-，C11H9ClN2O4S2＝332.78。
5-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺68。HPLC tR22.61分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.11(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.32(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.38(1H，d，J6.0，噻吩3/4)，7.95(1H，d，J6.0，噻吩3/4)；MS 317.02(M-H)-，C10H7ClN2O4S2＝318.76。
4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺69。HPLC tR21.86分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.11(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.32(2H，d，J9.0，Ph-H)，8.00(1H，s，噻吩3/5)，8.43(1H，s，噻吩3/5).MS 317.08(M-H)-，C10H7ClN2O4S2＝318.76。
5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺]70。HPLC tR19.66分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.96(4H，d，J8.0，Ph-H)，7.04(1H，m，NH)，7.19(5H，m，Ph-H&NH)，7.57(1H，s，噻吩-H).MS 496.83(M-H)-，C16H11Cl3N2O4S3＝497.83。
5-乙基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺71。HPLC tR17.41分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ1.36(3H，t，J7.0，CH2CH3)，3.28(2H，dd，J7.0，7.0，CH2H3)，6.65(1H，br s，NH)，7.10(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.30(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.96(1H，s，噻吩-H)；MS 345.05(M-H)-，C12H11ClN2O4S2＝346.81。
硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯72。HPLC tR21.56分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ2.59(3H，s，CH3)，7.15(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.28(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.91(1H，s，噻吩-H)；MS391.15(M-H)-，C12H9ClN2O5S3＝392.86。
5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺73。HPLC tR17.95分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ2.66(3H，s，CH3)，7.13(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.32(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.70(1H，s，噻吩-H)；MS 333.50(M-H)-，C11H9ClN2O4S2＝332.78。
5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺]74。HPLC tR22.19分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.31(3H，s，CH3)，7.01(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.10(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.26(4H，m，Ph-H)，7.81(1H，s，噻吩-H)；MS476.94(M-H)-，C17H14Cl2N2O4S3＝477.41。
4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺76。HPLC tR15.99分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.28(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.53(2H，d，J8.5，Ph-H)，8.03(1H，s，噻吩3/5)，8.41(1H，s，噻吩3/5)；MS 351.18(M-H)-，C11H7F3N2O4S2＝352.31。
4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺77。HPLC tR14.01分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.97(2H，t，J6.5，CH2)，3.41(2H，t，J6.5，CH2)，7.01(2H，m，吲哚-H)，7.13(1H，t，J7.5，吲哚-H)，7.30(1H，d，J7.5，吲哚-H)，7.38(1H，d，J7.5，吲哚-H)，7.75(1H，s，噻吩3/5)，8.16(1H，s，噻吩3/5)；MS 350.24(M-H)-，C14H13N3O4S2＝351.40。
5-嗎啉-4-基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺79。HPLC tR18.52分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ3.33(4H，t，J5.0，嗎啉-H)，3.88(4H，t，J5.0，嗎啉-H)，7.03(1H，br s，NH)，7.13(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.29(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.91(1H，s，噻吩-H)；MS 404.26(M+H)+，C14H14ClN3O5S2＝403.86。
5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺80。HPLCtR18.38分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ3.33(3H，s，OMe)，3.37(2H，t，J5.5，CH2)，3.58(2H，t，J5.5，CH2)，7.06(2H，d，J7.0，Ph-H)，7.21(2H，d，J7.0，Ph-H)，7.33(1H，br s，NH)，7.70(1H，s，噻吩-H)，8.47(1H，br s，NH)；MS390.21(M-H)-，C13H14ClN3O5S2＝391.85。
4-氯-N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-3-硝基-苯磺酰胺81。HPLC tR16.63分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.83(2H，t，J6.0，CH2)，3.29(2H，t，J6.0，CH2)，6.54(1H，br s，NH)，6.90(2H，m，吲哚-H)，7.23(2H，m，吲哚-H)，7.34(1H，dd，J1.5，8.0，Ph-H)，7.62(1H，dd，J1.5，8.0，Ph-H)，8.15(1H，d，J1.5，Ph-H)，9.54(1H，br s，吲哚NH)；MS 412.19(M-2H)-，C16H13Cl2N3O4S＝414.26。
N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺82。HPLC tR16.25分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.73(3H，s，CH3)，2.82(2H，t，J6.0，CH2)，3.22(2H，t，J6.0，CH2)，6.86(1H，m，吲哚-H)，6.91(1H，s，吲哚-H)，7.15(2H，m，吲哚-H)，7.20(1H，m，Ph-H)，7.63(1H，dd，J2.0，8.0，Ph-H)，8.13(1H，d，J2.0，Ph-H)；MS 392.03(M-H)-，C17H16ClN3O4S＝393.85。
N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺83。HPLC tR17.55分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ7.07(1H，t，J8.0，Ph-H)，7.16(1H，t，J8.0，Ph-H)，7.22(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.64(2H，d，J7.5，Ph-H)，7.97(1H，dd，J2.5，9.0，Ph-H)，8.42(1H，d，J2.5，NH)；MS 351.25(M-H)-，C13H9ClN4O4S＝352.75。
6-氯-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺84。HPLCtR24.09分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ3.40(1H，br s，NH)，7.10(1H，d，J4.5，噻唑-H)，7.54(1H，s，Ph-H)，7.56(2H，s，Ph-H)，7.90(1H，d，J4.5，噻唑-H)；MS 447.86(M-2H)-，C13H6ClF6N3O2S2＝449.78。
2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺85。HPLC tR21.20分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.27(4H，m，CH2)，6.88(1H，d，J8.0，Ph-H)，7.04(3H，m，Ph-H)，7.19(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.25(1H，m，Ph-H)，7.31(1H，br s，NH)；MS 326.11(M+H)+，C14H12ClNO4S＝325.77。
2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺86。HPLC tR24.58分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.21(4H，m，CH2)，6.86(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.27(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.30(1H，d，J2.0，Ph-H)，7.47(2H，s，Ph-H)，7.50(1H，s，Ph-H)，7.56(1H，br-s，NH)；MS 425.9(M-2H)-，C16H11F6NO4S＝427.32。
6-苯氧基-吡啶-3-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺87。HPLC tR23.20分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.99(1H，d，J8.5，Ph-H)，7.11(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.26(1H，m，Ph-H)，7.41(2H，m，Ph-H)，7.57(3H，m，Ph-H)，7.63(1H，s，Ph-H)，8.03(1H，d，J8.5，Ph-H)，8.57(1H，br s，NH)；MS 463.90(M+2H)+，C17H13ClN2O3S＝360.82。
5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺88。HPLC tR22.79分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.55(3H，s，CH3)，7.38(2H，m，Ph-H)，7.42(1H，d，J8.0，Ph-H)，7.66(1H，s，Ph-H)，7.69(1H，d，J9.0，Ph-H)，7.73(1H，s，Ph-H)；MS 416.91(M-H)-，C15H10Cl2N2O4S2＝417.29。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-吡唑-1-基-苯磺酰胺89。HPLC tR21.58分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD)δ6.53(1H，s，Ph-H)，7.57(1H，s，Ph-H)，7.65(2H，s，Ph-H)，7.73(1H，s，Ph-H)，7.92(4H，s，Ph-H)，8.28(1H，s，Ph-H)；MS 434.03(M-H)-，C17H11F6N3O2S＝435.34。
4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙基酯90。HPLC tR20.99分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ1.32(3H，t，J7.0，CH2CH3)，2.30(3H，s，CH3)，2.40(3H，s，CH3)，4.26(2H，dd，J7.0，7.0，CH2CH3)，7.01(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.20(2H，d，J9.0，Ph-H)；MS 355.03(M-H)-，C15H17ClN2O4S＝356.83。
4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸91。HPLC tR23.28分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.42(3H，s，CH3)，2.47(3H，s，CH3)，7.45(3H，s，Ph-H)，10.35(1H，br s，COOH)；MS428.98(M-H)-，C15H12F6N2O4S＝430.32。
4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸92。HPLC tR19.59分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ2.37(3H，s，CH3)，2.45(3H，s，CH3)，6.99(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.07(1H，br s，NH)，7.21(2H，d，J8.5，Ph-H)，9.47(1H，br s，COOH)；MS 327.26(M-H)-，C13H13ClN2O4S＝328.77。
2-(4-氯-苯基氨磺?；?-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯93。HPLC tR21.74分鐘(10-70％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ1.26(3H，t，J7.5，CH2CH3)，2.47(3H，s，CH3)，4.21(2H，dd，J7.5，CH2CH3)，7.21(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.28(2H，d，J8.0，Ph-H)。
3，5-二氯-N-(4-氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺94。HPLC tR21.65分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ6.67(1H，s，OH)，7.06(2H，d，ArH，J8.9)，7.21(2H，d，ArH，J8.9)，7.72(2H，s，ArH)，8.30(1H，s，NH)；MS352.01(M-H)-，C12H8Cl3NO3S＝352.62。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3，5-二氯-4-羥基-苯磺酰胺95。HPLC tR24.06分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.8(2H，d，ArH，J8.7)，7.68(1H，s，ArH，)，7.67(2H，s，ArH)；MS 454.81(M)，C14H7Cl2F6NO3S＝454.17。
3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺96。HPLC tR22.46分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.28(2H，d，ArH，J8.7)，7.56(2H，d，ArH，J8.7)，7.67(2H，s，ArH)；MS 386.06(M)，C13H8Cl2F3NO3S＝386.17。
N-(4-氯-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺97。HPLC tR12.24分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.08(2H，d，ArH，J8.8)，7.23(2H，d，ArH，J8.8)，7.96(2H，d，ArH，J8.8)，8.32(2H，d，ArH，J 8.8).MS 311.33(M-1)-，C12H9ClN2O4S＝312.73。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺98。HPLC tR15.36分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.65(1H，s，ArH，)，7.66(2H，s，ArH)，8.06(2H，d，ArH，J9.0)8.39(2H，d，ArH，J9.0)；MS 413.43(M-1)-，C14H8F6N2O4S＝414.28。
4-氨基-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-苯磺酰胺99。HPLC tR18.38分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ6.78(1H，d，ArH，J7.8)，7.41(1H，d，ArH，J7.8)，7.56(1H，s，ArH)，7.62(2H，s，ArH)，7.72(1H，s，ArH)；MS419.77(M+H)+，C14H9ClF6N2O2S＝418.74。
3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺100。HPLC tR23.04分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.30(2H，d，ArH，J8.3)，7.63(2H，d，ArH，J8.3)，8.06(2H，d，ArH，J8.8)，8.38(2H，d，ArH，J8.8)，11.17(1H，s，NH)；MS345.05(M-H)-，C13H9F3N2O4S＝346.28。
3，5-二氯-N-(3，5-二氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺101。HPLC tR16.69分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD)δ7.08(2H，s，ArH)，7.30(1H，s，ArH)，7.71(2H，s，ArH)；MS 383.77(M-H)-，C12H7Cl4NO3S＝384.89。
4-氨基-3-氯-N-(4-氯-苯基)-苯磺酰胺102。HPLC tR14.17分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ6.75(1H，d，ArH，J8.3)，7.07，(2H，d，ArH，J8.8)，7.28(2H，d ArH，J8.3)，7.32(1H，d，ArH，J8.8)，7.49(1H，s，ArH)；MS317.43(M)，C12H10Cl2N2O2S＝317.19。
3-氯-N-(4-氯-苯基)-4-甲氧基-苯磺酰胺103。HPLC tR16.65分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ3.31(3H，s，OCH3)，7.08(2H，d，ArH，J8.3)，7.27(1H，d，ArH，J8.8)，7.30(2H，d，ArH，J8.3)，7.64(1H，d，ArH，J8.8)，7.74，(1H，s，ArH)，10.35，(1H，s，NH)；MS 332.02(M)，C13H11Cl2NO3S＝332.20。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯磺酰胺104。HPLC tR19.21分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ3.30(3H，s，OCH3)，7.31(1H，d，ArH，J8.8)，7.65(2H，s，ArH)，7.73(1H，dd，ArH，J8.8，2.4)，7.77(1H，s，ArH)，7.80(1H，d，ArH，J2.4)，11.12(1H，s，NH)；MS 433.98(M)，C15H10ClF6NO3S＝433.75。
N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺105。HPLC tR19.56分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.38(1H，dd，ArH，J8.8，2.4)，7.66(1H，d，ArH，J8.8)，7.76(1H，d，ArH，J2.4)，8.34(2H，s，ArH)，8.51(1H，s，ArH)，11.12(1H，s，NH)；MS 448.84(M)，C14H7ClF6N2O4S＝448.73。
3-(4-乙酰基-哌嗪-1-基)-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺106。HPLC tR22.57分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ2.15(3H，s，CH3)，3.20(4H，m，CH2)，3.68(2H，m，CH2)，3.84(2H，m，CH2)，7.12(2H，m，ArH)，7.46(1H，s，ArH)，8.26(1H，s，ArH)，8.38(2H，s，ArH)；MS 540.09(M)，C20H18F6N4O5S＝540.44。
N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2-硝基-苯磺酰胺107。HPLC tR16.25分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.58(2H，s，ArH)，7.82(1H，d，ArH，J8.6)，7.88(1H，dd，ArH，J8.6，8.6)，8.13(1H，dd，ArH，J8.6，8.6)，8.37(1H，s，ArH)，8.38(1H，d，ArH，J8.6)，11.60(1H，s，NH)；MS 414.85(M)，C14H8F6N2O4S＝414.28。
3-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-苯甲酸108。HPLC tR22.39分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ7.57(2H，s，ArH)，7.62(2H，s，ArH)，7.67(1H，dd，ArH，J7.8，7.8)，7.97(1H，dd，ArH，J7.8，1.0)，8.12(1H，dd，ArH，J7.8，1.0)，8.30(1H，d，ArH，J1.0)；MS 411.99(M-2H)-，C15H9F6NO4S＝413.29。
3，5-二氯-N-(4-氯-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺109。HPLC tR24.04分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ4.16(2H，s，CH2)，7.97(2H，d，ArH)，J8.8)，8.81(2H，s，ArH)8.39(2H，d，ArH，J8.8)；MS 365.26(M-H)-，C13H10Cl3NO3S＝366.65。
3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯甲基)-苯磺酰胺110。HPLC tR23.61分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ4.24(2H，s，CH2)，7.32(2H，d，ArH，J8.7)，7.54(2H，d，ArH，J8.7)，7.81(2H，s，ArH)；MS400.19(M)，C14H10Cl2F3NO3S＝400.20。
3，5-二氯-4-羥基-N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-苯磺酰胺111。HPLC tR16.56分鐘(10-60％，20分鐘)；1H NMR(CD3OD.)δ2.95(2H，d，CH2，J7.2)，3.32(2H，s，CH2，J7.2)，6.99(1H，s，ArH)，7.06(1H，dd，ArH，J8.1，8.1)，7.17(1H，dd，ArH，J8.1，8.1)，7.33(1H，d，ArH，J8.1)，7.39(1H，d，ArH，J8.1)，7.50(2H，s，ArH)；MS 382.82(M-2H)-，C16H14Cl2N2O3S＝385.27。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺112。HPLC tR8.21分鐘(方法B)；MS 463.9(M-H)-79Br81Br35Cl2，C10H5Br2Cl2NO2S2＝466.00。
N-(3，5-二氯-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺113。HPLC tR9.04分鐘(方法B)；MS 367.0(M-H)-35Cl2，C15H10Cl2N2O3S＝369.22。
4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺114。HPLC tR9.22分鐘(方法B)；MS 487.9(M-H)-81Br35Cl，C12H5BrClF6NO2S2＝488.65。
4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺115。HPLC tR9.12分鐘(方法B)；MS 419.9(M-H)-81Br35Cl3，C10H5BrCl3NO2S2＝421.54。
5-溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺116。HPLC tR8.28分鐘(方法B)；MS 385.9(M-H)-81Br，C11H7BrF3NO2S2＝386.21。
5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺117。MS514.2(M-H)-，C18H11F6NO4S3＝515.47。
5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(2，4-二氯-苯基)-酰胺118。MS 446.0(M-H)-35Cl2，C16H11Cl2NO4S3＝448.36。
5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺119。1HNMR(CDCl3)δ2.51(s，3H，CH3)，7.40(dd，1H，J2.0，8.7，Ar-H)，7.51(s，1H，NH)，7.55(s，3H，Ar-H)，7.67(d，1H，J8.7，Ar-H)，7.69(s，1H，Ar-H)；MS(FAB校正)472.97412(M)+35Cl，C17H10ClF6NO2S2＝472.9746。
苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺120。1H NMR(CDCl3)δ7.27(s，1H，NH)，7.45(m，5H，Ar-H)，7.83(m，1H，Ar-H)，8.06(m，1H，Ar-H)，8.24(s，1H，Ar-H)；MS(FAB校正)426.0049(MH)+，C16H9F6NO2S2＝424.9979。
苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺121。1H NMR(CDCl3)δ6.83(s，1H，NH)，7.00(m，2H，Ar-H)，7.16(m，2H，Ar-H)，7.79(dd，1H，J1.8，9.2，Ar-H)，8.03(dd，1H，J0.7，9.2，Ar-H)，8.46(dd，J0.7，1.8，1H，Ar-H)；MS(FAB校正)325.9821(MH)+，C12H8ClN3O2S2＝324.9746。
苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺122。1HNMR(CDCl3)δ7.43(s，1H，NH)，7.58(s，3H，Ar-H)，7.84(dd，1H，Ar-H)，8.09(dd，1H，J1.8，9.2，Ar-H)，8.03(dd，1H，J0.7，9.2，Ar-H)，8.57(dd，J0.7，1.8，1H，Ar-H)；MS(FAB校正)427.9960(MH)+，C14H7F6N3O2S2＝426.9884。
苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺123。1HNMR(CDCl3)δ7.19(d，2H，Ar-H)，7.44(m，3H，Ar-H&NH)，7.87(dd，1H，J1.8，9.2，Ar-H)，8.06(dd，1H，J0.7，9.2，AR-H)，8.58(dd，J0.7，1.8，1H，Ar-H)；MS(FAB校正)360.0080(MH)+，C13H8F3N3O2S2＝359.0010。
5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺124。1HNMR(CDCl3)δ7.21(m，1H，吡啶-H)，7.40(d，1H，J4.0，噻吩-H)，7.54(s，3H，Ph-H)，7.55(d，1H，J4.0，噻吩-H)，7.61(m，1H，吡啶-H)，7.68(m，1H，吡啶-H)，7.80(s，1H，NH)，8.51(m，1H，吡啶-H)；MS(FAB校正)453.0164(MH)+，C17H10F6N2O2S2＝452.0088。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺125。1H NMR(CDCl3)δ6.91(s，1H，NH)，7.04(d，2H，J6.7，Ph-H)，7.23(s，1H，噻吩-H)，7.24(d，2H，J6.7，Ph-H)；MS(FAB 校正)431.7963(MH)+81Br79Br35Cl，C10H6Br2ClNO2S2＝428.7895。
4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺126。1H NMR(CDCl3)δ7.20(d，2H，J8.4，Ph-H)，7.33(s，1H，噻吩-H)，7.35(s，1H，NH)，7.53(d，2H，J8.4，Ph-H)；MS(FAB校正)465.82122(MH)+79Br81Br，C11H6Br2F3NO2S2＝465.1040。
實施例2
制備N-烷基化的伯雙芳基磺酰胺的一般方法將實施例1的伯雙芳基磺酰胺(1.0mol當(dāng)量)溶解于無水丙酮中，溶液冷卻至0℃，然后慢慢加入三乙胺(5.0mol當(dāng)量)。30分鐘后，慢慢加入烷基化試劑(烷基或芳烷基鹵化物；5.0mol當(dāng)量)，攪拌溶液直到TLC[庚烷∶乙酸乙酯(2∶1)]表明反應(yīng)完全。然后將反應(yīng)混合物濃縮，用水稀釋，乙酸乙酯萃取。萃取液濃縮之后，殘余物經(jīng)柱色譜處理[柱(Isolute SI；Jones Chromatography)，庚烷∶乙酸乙酯(12∶1→3∶1)]，得到所需的烷基化的磺酰胺。
按照上述方法制備本發(fā)明的N-烷基化的雙芳基磺酰胺化合物。代表性化合物的具體解析結(jié)果如下所示5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氟-苯基)-甲基-酰胺7。TLC RF＝0.72(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；1H NMR(CDCl3.)δ3.22(3H，s，NCH3)，7.02(2H，m，Ph-H)7.12(2H，m，Ph-H)，7.73(1H，d，J1.0，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)-酰胺50。1HNMR(CDCl3)δ3.27(3H，s，NMe)，7.30(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.60(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.75(1H，s，噻吩)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-甲基-酰胺51。TLC RF＝0.69(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR18.49分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3)δ3.22(3H，s，NCH3)，7.08(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.29(2H，d，J9.0，Ph-H)，7.38(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺52。TLC RF＝0.70(庚烷∶乙酸乙酯，2∶1)；HPLC tR19.72分鐘(20-80％，20分鐘)；1HNMR(CDCl3.)δ2.71(3H，s，NCH3)，4.25(2H，s，ArCH2)，7.39(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.58(2H，d，J8.0，Ph-H)，7.91(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺53。1HNMR(CDCl3.)δ4.70(2H，s，CH2)，6.92(2H，m，Ph-H)，6.97(2H，m，Ph-H)，7.14(2H，m，Ph-H)，7.19(3H，m，Ph-H)，7.75(1H，s，噻吩)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺65。HPLC tR20.98分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.78(2H，s，CH2)，7.00(2H，m，Ph-H)，7.20(2H，m，Ph-H)，7.26(5H，m，Ph-H)，7.76(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺66。HPLC tR22.76分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ3.70(3H，s，OMe)，4.69(2H，s，CH2)，6.72(2H，d，J8.5，Ph-H)，6.89(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.19(5H，m，Ph-H)，7.74(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-芐基)-酰胺67。HPLCtR23.62分鐘(0-60％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.77(2H，s，CH2)，6.95(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.19(1H，s，Ph-H)，7.24(2H，d，J8.5，Ph-H)，7.37(3H，m，Ph-H)，7.46(1H，m，Ph-H)，7.79(1H，s，噻吩-H)。
5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基苯甲基)-酰胺75。HPLC tR22.73分鐘(20-80％，20分鐘)；1H NMR(CDCl3.)δ4.38(4H，s，CH2)，7.19(3H，m，Ph-H)，7.30(2H，m，Ph-H)，7.45(3H，m，Ph-H)，7.80(1H，s，噻吩-H)。
5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-3-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺78。HPLC tR24.01分鐘(10-70％，20分鐘)；1HNMR(CDCl3.)δ4.03(3H，s，NCH3)，4.92(2H，s，CH2)，6.73(1H，s，吡唑-H)，7.23(1H，dd，J1.0，4.0，Ph-H)，7.26(1H，d，J1.0，Ph-H)，7.46(3H，m，Ph-H)，7.55(2H，m，Ph-H)，7.59(1H，d，J7.5，Ph-H)，7.80(1H，s，Ph-H)；MS682.08(M+H)+，C25H15F12N3O2S2＝681.52。
實施例3熒光偏振競爭性結(jié)合測定使用96-孔微量滴定法(Costar)完成該測定。將重組體HDM2(1.5μg/孔)的TBS-BSA緩沖溶液(50mM Tris pH7.4、150mM NaCl、和0.1％BSA)在室溫下、在連續(xù)稀釋的測試化合物存在下(在最終濃度為5％DMSO的TBS-BSA緩沖溶液中)培養(yǎng)5分鐘。向每個孔中加入熒光標記的p53衍生肽(熒光素-Met-Pro-Arg-Phe-Met-Asp-Tyr-Trp-Glu-Gly-Leu-Asn-NH2，0.2μM)，然后滴定板在室溫下培養(yǎng)45分鐘。測量該肽的熒光偏振現(xiàn)象(激發(fā)485nm，發(fā)射520nm)。根據(jù)劑量-響應(yīng)曲線計算出IC50值。
ELISA-類型競爭性結(jié)合測定使用TBS/BSA(25mM Tris-HCl pH7.5、150mM NaCl、0.05％Tween 20、0.1％BSA)洗滌涂覆有Streptavidin的96孔板(Pierce Chemical Co.，St.Louis，MO，USA)。生物素化的p53衍生肽(生物素-Ahx-Met-Pro-Arg-Phe-Met-Asp-Tyr-Trp-Glu-Gly-Leu-Asn-NH2)用25mMTris-HCl、pH7.5稀釋至1μM，其中等分部分加入至每個小孔中(0.1mL/孔)。在室溫下恒速振搖培養(yǎng)1小時之后，滴定板用TBS/BSA緩沖溶液充分洗滌。將HDM2(50μL/孔，10μg/mL溶于TBS/BSA緩沖溶液中的儲存溶液)和連續(xù)稀釋的(溶于TBS/BSA緩沖溶液)測試化合物(50μL/孔)混合，然后在室溫下培養(yǎng)30分鐘。隨后將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至涂覆有肽的streptavidin板中，在室溫下繼續(xù)恒速振搖培養(yǎng)1小時。然后再將板用TBS/BSA緩沖溶液充分洗滌。加入抗-HDM2抗體(SMP14 mAb，Santa Cruz Biotechnology，Inc.，Santa Cruz，CA，USA；0.1mL/孔、0.125μg/mL TBS/BSA緩沖稀釋液)，并在室溫下培養(yǎng)1小時。再次洗滌之后，加入第二抗體(anti-mouse Ab，Sigma Cat.No.A 4789；0.1mL/孔、1∶10,000 TBS/BSA緩沖稀釋液)，在室溫下培養(yǎng)1小時。充分洗滌之后，加入TMB ELISA試劑(Pierce；0.1mL/孔)培養(yǎng)1分鐘，通過加入2MH2SO4溶液(0.1mL/孔)以停止顏色反應(yīng)。然后計算在450nm處的吸收值。根據(jù)劑量響應(yīng)曲線計算出IC50值。
實施例4代表性雙芳基磺酰胺化合物的初步篩選數(shù)據(jù)匯總在表1中。利用實施例3所述的熒光素偏振競爭性HDM2結(jié)合測定方法。此外，還測定了這些化合物對于具有不同基因組成的三種人類腫瘤細胞系的抗增殖活性。統(tǒng)計于表1中的抗增殖性IC50值是使用標準72-h MTT細胞毒性測定方法[Haselsberger K，Peterson DC，Thomas DG，Darling JL；Anti Cancer Drugs 1996；7331-338]測得的。所用的細胞系如下AGS，胃腺癌，野生型p53；H1299，大細胞肺癌，裸p53，低HDM2；SJSA-1，原發(fā)性多病因骨癌，野生型p53，HDM2表達過度。
在相應(yīng)的ELISA-型測定形式(實施例3)中還連續(xù)測試了在熒光素偏振競爭性HDM2結(jié)合測定方法中具有活性的化合物。根據(jù)兩種測定形式獲得類似的IC50值?？偟膩碚f，在雙芳基磺酰胺的體內(nèi)競爭性HDM2結(jié)合力和細胞抗增殖活性之間觀察到很好的相關(guān)性。因此，只有能夠拮抗p53肽結(jié)合體內(nèi)HDM2的化合物才具有抗增殖活性。此外，化合物在體內(nèi)的效力大小順序也與細胞分析結(jié)果很相似。上述結(jié)果清楚表明，觀察到的抗增殖活性歸因于該雙芳基磺酰胺調(diào)節(jié)細胞的HDM2功能所致。下面的事實也支持了這樣的結(jié)論，那就是通常其中HDM2過渡表達的細胞系(SJSA-1)比另外兩種被測試的細胞系對于活性雙芳基磺酰胺測試化合物具有更低的敏感性。通過調(diào)節(jié)HDM2，在缺乏功能化p53的腫瘤細胞中也可以獲得抗增殖活性的事實可以這樣來解釋，那就是p53-/-細胞系H1299對測試化合物具有與另外兩種具有正常p53的細胞系類似的響應(yīng)性。
實施例5應(yīng)用標準72-h MTT細胞毒素測定方法[Haselsberger K等人，同上]，將代表性雙芳基磺酰胺化合物在具有變形(transform)和非變形人類細胞系的滴定板上進行了測試。其結(jié)果匯總在表2中。
可以看出，化合物2、3、6、和7對于變形細胞系的抗增殖活性比對于非變形細胞系的抗增殖活性高3-4倍。此外，這些化合物對抗癌癥的平均效力也高于對肉瘤細胞系的平均效力，這與對照化合物roscovitine相反，該對照化合物是通過不同機理也就是抑制細胞周期蛋白依賴型激酶而產(chǎn)生抗增殖活性[Wang S，McClue SJ，F(xiàn)erguson JR，Hull JD，Stokes S，Parsons S，Westwood R，F(xiàn)ischer PM；TetrahedronAsymmetry 2001；122891-2894]。這種不同的選擇性進一步表明雙芳基磺酰胺可以調(diào)節(jié)細胞的HDM2功能。已知HDM2放大現(xiàn)象通常在軟組織肉瘤和骨肉瘤中尤其普遍[Momand J等人，同上；Bartel F，Meye A，Wurl P，Kappler M，Bache M，Lautenschlager C，Grunbaum U，Schmidt H，Taubert H；Int.J.Cancer 2001；95168-175]。
實施例6p53報道基因(reporter gene)測試進行可以同時評價細胞存活率和p53響應(yīng)的二重測試。將U2OS衍生細胞系穩(wěn)定地用p53響應(yīng)元件(response element)轉(zhuǎn)染，生成熒光素酶報道基因。用于該目的的這種基因表達盒式結(jié)構(gòu)先前已有描述[Zhu J，Gao B，Zhao J，Balmain A；Cancer Gene Ther.2000；74-12]。在將細胞接種到96孔組織培養(yǎng)板之后，用測試化合物處理，然后培養(yǎng)一定時間，使用細胞增殖試劑WST-1(Roche Molecular Biochemicals)測量細胞存活率。使用Bright-GloTM熒光素酶分析系統(tǒng)(Promega)測試熒光素酶活性。使用由細胞存活率分析方法得到的數(shù)據(jù)來標準化(normalise)由熒光素酶分析方法得到的數(shù)據(jù)。分析方法先前已有描述[Krausz E，Watt K，Cummings L，Baxter C，Blake DG；Biochemica200126-27]。
E2F報道基因測試使用與上述p53報道分析系統(tǒng)相類似的系統(tǒng)，除了該系統(tǒng)被設(shè)計為對E2F轉(zhuǎn)錄因子而不是對p53響應(yīng)之外。將A549衍生細胞系穩(wěn)定地用E2F響應(yīng)元件轉(zhuǎn)染，生成熒光素酶報道基因。所使用的基因表達盒式結(jié)構(gòu)來自Clontech(MercuryTMCell Cycle Profiling System)。按照上述方法進行測試。
實施例7在實施例6描述的p53基因報道分析試驗中對代表性的雙芳基磺酰胺進行了測試。其結(jié)果匯總在表3中。
先前已經(jīng)報道過，p53衍生優(yōu)化的細胞滲透性肽(上表中的陽性對照肽)能夠通過抑制HDM2/p53相互作用來活化腫瘤細胞中的p53途徑[Chène P，F(xiàn)uchs J，Bohn J，García-Echeverría C，F(xiàn)uret P，F(xiàn)abbro D；J.Molec.Biol.2000；299245-253]。我們的結(jié)果證實了該發(fā)現(xiàn)(參見上文)。此外，代表性的雙芳基磺酰胺在相同的測試系統(tǒng)中還顯著地誘導(dǎo)了p53響應(yīng)熒光素酶活性。通常發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)競爭性HDM2結(jié)合測試中不具有活性的化合物也不具有誘導(dǎo)細胞p53的這種能力。例如，邊緣活性(marginally active)化合物4的作用效果比更具活性的化合物微弱得多。雙芳基磺酰胺確實能夠活化細胞p53轉(zhuǎn)活活性的事實證實了它們可以調(diào)節(jié)細胞HDM2活性。
實施例8在實施例6描述的E2F基因報道分析試驗中對代表性的雙芳基磺酰胺進行了測試。其結(jié)果匯總在表4中。
只有具有HDM2拮抗劑活性的雙芳基磺酰胺才能夠反向調(diào)節(jié)基因報道分析試驗中的E2F轉(zhuǎn)錄活性。不管是否使用了不同步的細胞群體或者同步處于G1/S晚期的細胞，均可以觀察到這種活性[Ji C，Marnett LJ，Pietenpol JA；Oncogene 1997；152749-2753]。雙芳基磺酰胺確實能夠抑制E2F轉(zhuǎn)錄活性的事實證實了它們可以調(diào)節(jié)細胞HDM2/E2F的相互作用。
實施例9已經(jīng)充分認識到，放射治療和目前最通用的化學(xué)治療方式會引起嚴重的基因損傷，同時還會誘導(dǎo)p53依賴型細胞凋亡生物途徑，這就決定了這種腫瘤抑制蛋白在癌癥治療方面的重要作用。另一方面，HDM2作為p53的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物和負調(diào)節(jié)物可以使p53不穩(wěn)定化同時還可以消除其促凋亡功能。p53-HDM2負反饋圈的抑制劑(例如破壞p53-HDM2絡(luò)合物的化合物)被期望能夠與細胞毒素劑一起協(xié)同用于誘導(dǎo)p53以及接下來的細胞凋亡。為了研究該假設(shè)，我們使用了已知可以誘導(dǎo)p53和細胞凋亡的三種細胞系作為模型系統(tǒng)AGS(胃腺癌，野生型p53)、H1299(結(jié)腸腺癌，裸p53)和SJSA-1(骨肉瘤，野生型p53，HDM2過度表達)以及兩種細胞毒素劑順鉑(DNA烷基化試劑)和依托泊苷(拓撲異構(gòu)酶抑制劑)。作為HDM2-p53相互作用的抑制劑的代表性雙芳基磺酰胺，化合物2是按照每種細胞系所測得的抗增殖IC50濃度使用的，也就是分別為1、5和15μM。聯(lián)合治療方案包括在施用順鉑或依托泊苷的同時、之前6小時或者之后6小時還向細胞中加入2。這兩種化學(xué)治療藥物都是按照濃度范圍為100-0.19μM使用的。在總共培養(yǎng)72小時之后，使用標準MTT分析方法測量在有或沒有HDM2-p53抑制劑存在的條件下依托泊苷和順鉑的細胞毒素活性。順鉑的細胞毒性結(jié)果如表5所示。
化合物2增強了順鉑對所用三種細胞系的細胞毒素活性。當(dāng)2在使用順鉑進行治療之前加入，此時的協(xié)同效應(yīng)是最高的，在AGS、H1299和SJSA-1細胞中效力分別增加18.5、16和357倍。
當(dāng)化合物與依托泊苷聯(lián)合使用時，也觀察2的類似協(xié)同效應(yīng)。其結(jié)果如表6所示。
在存在2的情況下，依托泊苷的細胞毒素活性顯著增強，并且當(dāng)該HDM2-p53相互作用的抑制劑在依托泊苷之前6小時加入的話，此時達到最高效應(yīng)。依托泊苷在預(yù)先使用2進行治療后的AGS、H1299和SJSA-1細胞中的IC50計算值比沒有使用2的情況低3.5、25和726倍。
雙芳基磺酰胺和細胞毒素劑的協(xié)同效應(yīng)在SJSA-1細胞中是最高的。該結(jié)果可以推斷為SJSA-1細胞過度表達HDM2，這表明DNA破壞誘導(dǎo)的p53可以脫穩(wěn)定化從而使得細胞毒素劑的活性消失。SJSA-1對于使用依托泊苷和順鉑治療所產(chǎn)生的相對抗藥性(resistance)可能歸因于HDM2的抗細胞凋亡作用。破壞HDM2和p53之間的這種相互作用可以很快地使p53堆積和穩(wěn)定下來，從而誘導(dǎo)細胞死亡。雙芳基磺酰胺的化學(xué)致敏活性涉及到p53依賴型機理，同時還因為在裸p53的H1299細胞中也發(fā)現(xiàn)這種活性。
實施例10作用研究模型很多不同類型的細胞應(yīng)激(cellular stress)匯集于(converge)p53生物途徑并誘導(dǎo)其活性。因此，重要的是需要證明本發(fā)明的化合物之所以能夠活化p53是直接定位于p53和HDM2之間的相互作用而不是間接定位于活化例如上游的激酶。利用代表性化合物(主要是化合物2)和一系列具有不同HDM2和p53組成的細胞系研究了雙芳基磺酰胺在細胞水平上的生理活性。這些細胞系是過度表達的Hdm2(SJSA1-骨肉瘤)、野生型p53以及正常水平的HDM2(AGS-胃腺癌、MCF7-乳腺癌)、或者裸p53、低水平的HDM2(H1299-大細胞肺癌)。在HDM2生物途徑中的關(guān)鍵蛋白質(zhì)的細胞水平上分析雙芳基磺酰胺的活性，并將其與那些由效果明顯的抗癌藥物例如依托泊苷和順鉑所誘導(dǎo)的活性進行比較。
將AGS、H1299、MCF7或SJSA1細胞使用5倍抗增殖活性IC50濃度的化合物2或者在某些情形中使用依托泊苷或順鉑處理(圖1)。在不同間隔收集細胞，并且在收集的時候注意形態(tài)學(xué)的變化。細胞溶解后，相同量的溶菌液通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和免疫印跡法分析。使用依托泊苷或順鉑處理的AGS或MCF7細胞得到標準的應(yīng)激響應(yīng)(stress response)(圖1B、1C和1D)，其誘導(dǎo)了p53在絲氨酸15位置上的磷酸化，還提高了p53和E2F-1蛋白質(zhì)水平。在較晚的時間點上，它還與PARP分裂有關(guān)；85-kDa分裂產(chǎn)物的產(chǎn)生標志細胞凋亡，這與細胞死亡的形態(tài)學(xué)變化特征相一致。相反，使用化合物2處理AGS、H2199、MCF7或SJSA1細胞之后，可以很快誘導(dǎo)HDM2和E2F-1水平(而不是E2F-2)降低，而不會誘導(dǎo)p53或者誘導(dǎo)p53在絲氨酸15位置的磷酸化(圖1A、1B、1D和1E)。E2F-1水平的降低與通過E2F依賴型熒光素酶報道分析試驗測得的E2F轉(zhuǎn)錄活性降低有關(guān)(參見實施例6)。MCF7細胞使用4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸4-三氟甲基-苯甲酰胺(陰性對照化合物)處理，該化合物在體內(nèi)不會抑制HDM2-p53相互作用但是具有與化合物2相類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，這樣的處理并沒有在所測試的蛋白質(zhì)水平上或者細胞形態(tài)學(xué)方面產(chǎn)生任何顯著的變化(圖1D)。
化合物2所迅速誘導(dǎo)的形態(tài)學(xué)變化在SJSA1細胞中最為顯著，該細胞具有很重要的細胞質(zhì)組分。在被測試的所有細胞類型中檢測了細胞快速圓形化的能力。
對使用化合物2處理之后的MCF7細胞中的其它應(yīng)激途徑進行分析，表明出現(xiàn)短暫的誘導(dǎo)JNK磷酸化現(xiàn)象，但是并沒有明顯誘導(dǎo)p38 MAPK生物途徑。使用茴香霉素(mRNA翻譯抑制劑)作為誘導(dǎo)這些應(yīng)激途徑的陽性對照(圖1D)。在其它細胞類型中沒有發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)JNK磷酸化。
在H1299細胞中PARP分裂的誘導(dǎo)表現(xiàn)很快，但是仍然慢于在AGS、MCF7或SJSA1細胞中的誘導(dǎo)速度(圖1A、1B、1C、1D和1E)。在MCF7細胞中，盡管不存在85-kDa PARP分裂產(chǎn)物，但是PARP蛋白質(zhì)水平仍然有顯著降低(圖1D)。另外還在AGS、SJSA1和H1299中對另一種體內(nèi)抑制劑化合物49進行了測試(圖2)。這種化合物誘導(dǎo)出現(xiàn)了更迅速的細胞圓形化現(xiàn)象，同時在蛋白質(zhì)水平上還表現(xiàn)出與使用化合物2相類似的變化。
重要的是，需要判斷快速的細胞圓形化現(xiàn)象是否與細胞死亡相關(guān)。將MCF7或H1299細胞使用化合物2處理，在不同時間間隔利用錐蟲藍排除法計算圓形細胞的數(shù)目和存活細胞的數(shù)目。在兩種細胞類型中快速細胞圓形化現(xiàn)象出現(xiàn)明顯不同于細胞死亡的動力學(xué)曲線(圖3)。該數(shù)據(jù)表明細胞圓形化現(xiàn)象與死亡細胞并不相關(guān)。
分析了一對化合物68(競爭性抑制作用IC50＝431μM)和69(IC50＝151μM；參見表1)對于MCF7和H1299細胞的活性。將細胞使用5倍IC50濃度的具有更高活性的化合物69處理。當(dāng)使用68處理時，僅僅檢測到蛋白質(zhì)水平有細小變化。相反地，69在形態(tài)學(xué)和蛋白質(zhì)水平方面均誘導(dǎo)產(chǎn)生了變化。在兩種細胞系中，利用在稍晚時間點上可檢測到的85-kDa分裂產(chǎn)物的產(chǎn)生來檢測PARP水平的快速降低(圖4A和4B)。MCF7細胞中的HDM2和HDMX水平在使用化合物69處理之后立即降低(圖4A)。在H1299細胞中使用化合物69處理之后使得HDM2水平迅速降低，在稍晚的時間點上又恢復(fù)過來(圖4B)。相對于對照品而言，E2F-1水平幾乎沒有變化(圖4B)。在兩種細胞類型中都沒有檢測到快速圓形化現(xiàn)象。使用化合物69處理之后檢測到68小時均在遷移的MCF7細胞(具有與死亡細胞之一相對應(yīng)的形態(tài)學(xué)特征)，而使用化合物68處理之后卻沒有檢測到這種現(xiàn)象。這明顯與由化合物2觀察到細胞圓形化現(xiàn)象不同。
為了確定雙芳基磺酰胺是否誘導(dǎo)細胞周期變化，將MCF7或H1299細胞使用順鉑或化合物2處理(圖5)。順鉑和化合物2都誘導(dǎo)了作為細胞凋亡標志物的亞G1細胞，但是沒有觀察到其在細胞周期的任何階段出現(xiàn)過(arrest)。
為了表征雙芳基磺酰胺的誘導(dǎo)細胞凋亡特性，對天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(caspase)1/3活性進行了測試。將AGS或H1299細胞使用低濃度的化合物2或順鉑(相應(yīng)于2倍IC50值)處理(圖6A)。檢測72小時內(nèi)10-20％的細胞所出現(xiàn)的形態(tài)學(xué)變化，相當(dāng)于在48小時時首先檢測天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性的誘導(dǎo)，然后增加至72小時。我們還使用更高的濃度(相當(dāng)于5倍IC50值)對AGS和H1299細胞進行處理(圖6B)。在該試驗中，我們使用具體的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3抑制劑Z-VAD.fmk來確定天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶的響應(yīng)性。檢測了天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶在H1299中4小時內(nèi)的活性大小，這與通過Western印跡法檢測到的PARP分裂產(chǎn)物有關(guān)(圖1C)。與使用順鉑處理相比，在AGS細胞中在24小時之內(nèi)僅微弱地誘導(dǎo)了天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性。該活性屬于天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3依賴型的，因為天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑在24小時時將天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶活性降低至電泳泳道水平(圖6B)。特別地，盡管存在天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶抑制劑，但是在AGS細胞中仍然檢測到快速細胞圓形化現(xiàn)象，這進一步證實了我們的結(jié)論，那就是細胞圓形化并不意味著細胞死亡。
我們的試驗結(jié)果始終表明，雙芳基磺酰胺這種HDM2抑制劑能夠誘導(dǎo)E2F-1水平迅速降低。為了確定這是否是反靶向活性(off-target effect)或者通過抑制HDM2/HDMX活性就可能出現(xiàn)的結(jié)果，使用兩種不同的siRNAs(一種抗HDM2、一種抗HDMX)轉(zhuǎn)染MCF7細胞。首先，將細胞使用HDM2或?qū)φ誷iRNAs每隔24小時連續(xù)進行轉(zhuǎn)染，然后24小時后收集起來。細胞溶解之后，通過SDS-PAGE分離出等量蛋白質(zhì)，然后通過Western印跡法分析。使用對照siRNAs處理后在HDM2水平上沒有顯示出效果(圖7A電泳泳道1-9)。使用HDM2 siRNA處理后顯著降低了所有時間點上的HDM2蛋白質(zhì)水平(圖7A，電泳泳道10-15)。這相應(yīng)說明了是E2F-1水平降低而不是E2F-4水平降低，同時還誘導(dǎo)了p53蛋白水平。使用肌動蛋白作為加樣對照(loadingcontrol)。HDMX顯示出能夠穩(wěn)定HDM2水平。接下來，我們對HDM2水平是否受MCF7細胞中的HDMX水平影響以及降低HDMX水平是否能夠降低E2F-1水平進行確定。將MCF7細胞使用單獨或者混合的HDM2 siRNA和HDMX siRNA進行轉(zhuǎn)染。在存在HDM2 siRNA的情況下，所有時間點上的HDM2水平都降低了(圖7B電泳泳道10-12)。使用HDMX siRNA處理細胞后降低了HDMX的細胞水平，同時還降低了HDM2水平(圖7B電泳泳道13-15)。在兩種情形中，E2F-1水平也有所降低。聯(lián)合使用HDM2和HDMXsiRNA進行處理具有疊加效應(yīng)，也就是顯著降低了E2F-1在48小時時的水平(圖7B電泳泳道17)。這些試驗表明，HDM2和HDMX都能調(diào)節(jié)E2F-1。HDMX可能是間接通過穩(wěn)定HDM2來調(diào)節(jié)E2F-1的。
對本發(fā)明進行各種修飾和變型對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，只要其沒有偏離本發(fā)明范圍和主旨。盡管結(jié)合具體優(yōu)選的實施方案對本發(fā)明進行了描述，但是應(yīng)該理解的是，本發(fā)明并不僅僅限于這些具體的實施方案。實際上，為了完成本發(fā)明而對所述方案進行于相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的各種變型也是被包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)的。
表1
n.d.表示未測出。
表2
表3
aH-Phe-Met-Aib-Pmp-(6-Cl-Trp)-Glu-Ac3c-Leu-NH2。
b該濃度的測試化合物其p53誘導(dǎo)活性最大。
c相對于基本的熒光素酶活性而言(16-h時間點)。
d按照實施例3中描述的熒光素偏振測定方法測量。
e最高測試濃度。
表4
a使用測試化合物處理3小時之后。
b使用0.3mM含羞草素同步化24小時，然后沖洗。
表5
表6
權(quán)利要求
1.通式I化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途， 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其每個任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是 或 或 或 其中X是S、O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；Y是CH或N；E是N或CR4；R2、R3、R4、以及R14-16各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRa、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 或 Ar2是
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 Ar2是
4.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 Ar2是
5.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 Ar2是
6.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 Ar2是
7.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中Ar1是 Ar2是
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中-R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、每個可任選被一個或多個OH或CORu基團取代的嗎啉代基、哌嗪子基或哌啶子基、或者選自吡啶基、嘧啶基、噁唑基、噻唑基和吡唑基的雜芳基，其中的每個可任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代，或者R2和R3一起形成飽和6-元環(huán)或不飽和5-元環(huán)，其中每個任選含有一個或多個雜原子；以及-R5、R6、R7、R8、以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-5烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHPh、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHPh、SO2NHRm、SO2Ph、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHPh、CONHRq、ORv、COPh或CORr。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHPh、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、吡啶基、嘧啶基、2-甲硫基嘧啶-5-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、嗎啉-4-基、4-乙酰基-哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中R2、R3和R4各自獨立地是H、鹵素、NO2、SO2Ph、S(CO)Me、COOH、COOEt、OPh、OMe、NHCH2CH2OMe、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基、N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、噁唑-2-基、C1-5烷基、NH2、嗎啉-4-基、4-乙?；?哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-3或8-10中任意一項的用途，其中Ar1是 X是S或N；R2、R3和R4各自獨立地是C1-5烷基、S(CO)Me、COOH、NHCH2CH2OMe、COOEt、H、鹵素、NO2、SO2Ph、SO2NH-(4-氯苯基)、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、嗎啉-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基、N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、3-羥基-哌啶-1-基、吡啶-2-基；或者R2和R3形成任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的用途，其中-R2是鹵素、SO2Ph、NO2、Et、SOMe、嗎啉-4-基、NHCH2CH2OMe、3-羥基-哌啶-1-基、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基或2-甲硫基-嘧啶-5-基；-R3是鹵素、SO2NH-(4-氯苯基)、H、NO2、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基或N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基；以及-R4是H。
13.根據(jù)權(quán)利要求1、4、5、7-10中任意一項的用途，其中Ar1是 Y是CH或N；以及R2、R3和R4各自獨立地是H、OH、COOH、CF3、OPh、OMe、NO2、4-乙?；?哌嗪-1-基、NH2、鹵素、吡唑-1-基、噁唑-2-基或C1-5烷基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O-或-N-S-N-。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中當(dāng)Y是CH時-R2是H、NO2或Cl；-R3是NO2、NH2、Cl、CF3、COOH、4-乙?；?哌嗪-1-基；以及-R4是H、Cl、噁唑-2-基、OH、NO2、NH2、OMe或Me；或者當(dāng)Y是N時-R2是H；-R3是Br；-R4是Cl或OPh。
15.根據(jù)權(quán)利要求1、2或8-10中任意一項的用途，其中Ar1是 R2和R4是C1-5烷基，R3是COOH或COOEt。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中-R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是H、鹵素、OMe、NO2、C1-5烷基、CF3或者OH；以及-R10、R11、R12和R13都是H。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中-R5是H、C1-5烷基、或鹵素；-R6是H、鹵素、NO2、或CF3；-R7是H、鹵素、OMe、NO2、OH或CF3；-R8是H、鹵素或CF3；-R9是H。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中-W是CH2、CH2CH2或CH(CH3)CH2；以及-R1是H、CH2Ph、CH2CH(Me)2、3-(三氟甲基)芐基、或Me。
19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述通式I化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[1]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)-酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[4]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[8]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[9]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[10]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[11]；5-(2-甲硫基-嘧啶-5-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[12]；4-噁唑-2-基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[13]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[14]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[15]；5-溴噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[16]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[17]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；N-(4-氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[19]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[20]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-硝基苯磺酰胺[21]；N-(2，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[22]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[23]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[24]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[25]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[26]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-氯-3-硝基苯磺酰胺[29]；4-氯-N-(3，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[30]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[31]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氟苯基)-酰胺][32]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)-酰胺][33]；4-甲基-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[34]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[35]；3-氨基-4-甲基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[36]；N-(4-氯苯基)-4-甲基-3-硝基苯磺酰胺[37]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)-酰胺[40]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[41]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[42]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基芐基)酰胺[52]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-異丁基-酰胺[58]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；5-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[68]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；5-乙基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[71]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[76]；4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[77]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-3-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[78]；5-嗎啉-4-基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[79]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；4-氯-N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-3-硝基-苯磺酰胺[81]；N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺[82]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；6-氯-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[84]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[85]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[86]；6-苯氧基-吡啶-3-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[87]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-吡唑-1-基-苯磺酰胺[89]；4-(4-氯-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯[90]；4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[91]；4-(4-氯-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[92]；2-(4-氯-苯基氨磺?；?-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯[93]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[94]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3，5-二氯-4-羥基-苯磺酰胺[95]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[96]；N-(4-氯-苯基)-4-硝基-苯-磺酰胺[97]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[98]；4-氨基-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-苯磺酰胺[99]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[100]；3，5-二氯-N-(3，5-二氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[101]；4-氨基-3-氯-N-(4-氯-苯基)-苯磺酰胺[102]；3-氯-N-(4-氯-苯基)-4-甲氧基-苯磺酰胺[103]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；3-(4-乙?；?哌嗪-1-基)-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[106]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2-硝基-苯磺酰胺[107]；3-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-苯甲酸[108]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[109]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯甲基)-苯磺酰胺[110]；3，5-二氯-4-羥基-N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-苯磺酰胺[111]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；N-(3，5-二氯-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[113]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[114]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[115]；5-溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[116]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(2，4-二氯-苯基)-酰胺[118]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[121]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[123]；5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[124]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；3，5-二氯-N-(4-氟-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[127]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-酰胺[129]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的用途，其中通式I化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯-磺酰胺[35]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基苯-磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；以及N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的用途，其中通式I化合物是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[9]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[23]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-氯-3-硝基苯-磺酰胺[29]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)酰胺][33]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯-磺酰胺[35]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基(4-三氟甲基-苯甲基)酰胺[52]5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；5-溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[116]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
22.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述增殖性疾病是癌癥。
23.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述化合物按照足以有效抑制HDM2與p53和/或HDM2與E2F轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用的用量施用。
24.通式Ia化合物 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其每個可任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是 或 或 或 其中X是O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；E是N或CR4；Y是N；R2、R3、R4、以及R14-16各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3；條件是，所述化合物不是5-[(4-氯苯基)氨基]磺酰基-2-呋喃羧酸。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 或 Ar2是
26.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 Ar2是
27.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 Ar2是
28.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 Ar2是
29.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 Ar2是
30.根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中Ar1是 Ar2是
31.通式Ib化合物 其中W是C1-5支鏈或直鏈亞烷基或C2-5亞鏈烯基；n是0或1；R1是H、C1-8支鏈或直鏈烷基、C2-8鏈烯基、或者芳基或芳烷基，其中的每個可以任選被一個或多個鹵素或CF3基團取代；Ar1是 或 其中X是S、O、NH或NR’，其中R’是C1-3烷基；E是N或CR4；Y是CH或N；R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-3烷基，p是0或1，B是H、鹵素、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHAra、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Arc、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHArd、CONHRg、COAre、CORh、S(CO)Rs、ORt、OArf、任選含有一個或多個雜原子的脂環(huán)基，其任選被一個或多個OH、CORu、鹵素或CF3基團取代、或者任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代的雜芳基；或者R2和R3連接形成任選含有一個或多個雜原子的飽和或不飽和環(huán)系，其任選被一個或多個鹵素、OH或CF3基團取代；Ara-f各自獨立地是芳基，其任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素或CF3基團取代；Ra-i、Rs、Rt和Ru各自獨立地是C1-5烷基，其任選被一個或多個烷氧基、鹵素或CF3基團取代；條件是，R2、R3和R4中至少一個不是H；Ar2是 或 其中Z是S、O、NH或NR”，其中R”是C1-3烷基；R5、R6、R7、R8以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-3烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHArg、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHArh、SO2NHRm、SO2Ari、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHArj、CONHRq、ORv、COArk或CORr；Rj-r、Rv各自獨立地是C1-5烷基；Arg-k各自獨立地是芳基；條件是，取代基R5、R6、R7、R8以及R9中至少一個不是H；R10、R11、R12和R13各自獨立地是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2或者CF3。
32.根據(jù)權(quán)利要求24-31中任意一項的化合物，其中-R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHArb、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、每個可任選被一個或多個OH或CORu基團取代的嗎啉代基、哌嗪子基或哌啶子基、或者選自吡啶基、嘧啶基、噁唑基、噻唑基和吡唑基的雜芳基，其中的每個可任選被一個或多個C1-5烷基、鹵素、SRi或CF3基團取代，或者R2和R3一起形成飽和6-元環(huán)或不飽和5-元環(huán)，其中每個任選含有一個或多個雜原子；以及-R5、R6、R7、R8、以及R9各自獨立地是(L)qM，其中L是C1-5烷基，q是0或1，M是H、C1-5烷基、鹵素、NO2、OH、NH2、NHPh、NHRj、NRkRl、SO3H、SO2NH2、SO2NHPh、SO2NHRm、SO2Ph、SO2Rn、CF3、CN、COOH、COORp、CONH2、CONHPh、CONHRq、ORv、COPh或CORr。
33.根據(jù)權(quán)利要求24-31中任意一項的化合物，其中R2、R3和R4各自獨立地是(A)pB，其中A是C1-5烷基，p是0或1，B是H、F、Cl、Br、I、C1-5烷基、NO2、OH、NH2、NHRa、NRbRc、SO3H、SO2NH2、NHPh、SO2NHPh、SO2NHRd、SO2Ph、SO2Re、CF3、CN、COOH、COORf、CONH2、COONHPh、CONHRg、S(CO)Rs、ORt、OArf、COPh、CORh、吡啶基、嘧啶基、2-甲硫基嘧啶-5-基、噁唑-2-基、噻唑-2-基、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、嗎啉-4-基、4-乙?；?哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
34.根據(jù)權(quán)利要求24-31中任意一項的化合物，其中R2、R3和R4各自獨立地是H、鹵素、NO2、SO2Ph、S(CO)Me、COOH、COOEt、OPh、OMe、NHCH2CH2OMe、1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基、2-甲硫基嘧啶-5-基、N-(4-氟苯基)亞磺酰氨基、N-(4-三氟甲基-苯基)-亞磺酰氨基、噁唑-2-基、C1-5烷基、NH2、嗎啉-4-基、4-乙?；?哌嗪-1-基、3-羥基-哌啶-1-基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O--N-S-N-或任選被一個或多個鹵素取代的苯基。
35.根據(jù)權(quán)利要求24、25或32-34中任意一項的化合物，其中Ar1是 R2和R4是C1-5烷基，R3是COOH或COOEt。
36.根據(jù)權(quán)利要求24-34中任意一項的化合物，其中Ar1是 R2、R3和R4各自獨立地是H、OH、COOH、CF3、OPh、OMe、NO2、4-乙?；?哌嗪-1-基、NH2、鹵素、吡唑-1-基、噁唑-2-基或C1-5烷基，或者R2和R3一起形成-OCH2CH2O-或-N-S-N-。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的化合物，其中當(dāng)Y是CH時-R2是H、NO2或Cl；-R3是NO2、NH2、Cl、CF3、COOH、4-乙?；?哌嗪-1-基；以及-R4是H、Cl、噁唑-2-基、OH、NO2、NH2、OMe或Me；或者當(dāng)Y是N時-R2是H；-R3是Br；-R4是Cl或OPh。
38.根據(jù)權(quán)利要求24-37中任意一項的化合物，其中-R5、R6、R7、R8和R9各自獨立地是H、鹵素、OMe、NO2、C1-5烷基、CF3或者OH；以及-R10、R11、R12和R13都是H。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的化合物，其中-R5是H、C1-5烷基、或鹵素；-R6是H、鹵素、NO2、或CF3；-R7是H、鹵素、OMe、NO2、OH或CF3；-R8是H、鹵素或CF3；-R9是H。
40.根據(jù)權(quán)利要求24-39中任意一項的化合物，其中-W是CH2、CH2CH2或CH(CH3)CH2；以及-R1是H、CH2Ph、CH2CH(Me)2、3-(三氟甲基)芐基、或Me。
41.化合物，其選自5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[1]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)-酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[4]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[8]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[11]；5-(2-甲硫基-嘧啶-5-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[12]；4-噁唑-2-基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[13]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[14]；4-溴-5-氯噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[15]；5-溴噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[16]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[17]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；N-(4-氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[19]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[20]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-硝基苯磺酰胺[21]；N-(2，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[22]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[23]；5-苯磺?；绶?2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[24]；5-苯磺酰基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[25]；5-氯噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[26]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；4-氯-N-(3，4-二氯苯基)-3-硝基苯磺酰胺[30]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[31]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氟苯基)-酰胺][32]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)-酰胺][33]；4-甲基-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[34]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[35]；3-氨基-4-甲基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯磺酰胺[36]；N-(4-氯苯基)-4-甲基-3-硝基苯磺酰胺[37]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)-酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)-酰胺[40]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[41]；5-溴-6-氯吡啶-3-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[42]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；4-氯-N-(3，5-二氯苯基)-3-硝基-苯磺酰胺[47]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基芐基)酰胺[52]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-異丁基-酰胺[58]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯基酰胺[62]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；5-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[68]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；5-乙基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[71]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺?；?-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[76]；4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[77]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-3-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[78]；5-嗎啉-4-基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[79]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；4-氯-N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-3-硝基-苯磺酰胺[81]；N-[2-(5-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-4-甲基-3-硝基-苯磺酰胺[82]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；6-氯-咪唑并[2，1-b]噻唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[84]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[85]；2，3-二氫-苯并[1，4]二氧雜環(huán)己烷-6-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[86]；6-苯氧基-吡啶-3-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[87]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-吡唑-1-基-苯磺酰胺[89]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯[90]；4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[91]；4-(4-氯-苯基氨磺?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸[92]；2-(4-氯-苯基氨磺酰基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯[93]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[94]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3，5-二氯-4-羥基-苯磺酰胺[95]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[96]；N-(4-氯-苯基)-4-硝基-苯-磺酰胺[97]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[98]；4-氨基-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-苯磺酰胺[99]；3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯磺酰胺[100]；3，5-二氯-N-(3，5-二氯-苯基)-4-羥基-苯磺酰胺[101]；4-氨基-3-氯-N-(4-氯-苯基)-苯磺酰胺[102]；3-氯-N-(4-氯-苯基)-4-甲氧基-苯磺酰胺[103]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯-磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；3-(4-乙?；?哌嗪-1-基)-N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-4-硝基-苯磺酰胺[106]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2-硝基-苯磺酰胺[107]；3-(3，5-雙-三氟甲基-苯基氨磺?；?-苯甲酸[108]；3，5-二氯-N-(4-氯-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[109]；3，5-二氯-4-羥基-N-(4-三氟甲基-苯甲基)-苯磺酰胺[110]；3，5-二氯-4-羥基-N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-苯磺酰胺[111]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；N-(3，5-二氯-苯基)-4-噁唑-2-基-苯磺酰胺[113]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[114]；4-溴-5-氯-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[115]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(2，4-二氯-苯基)-酰胺[118]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[121]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；苯并[1，2，5]噻二唑-5-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[123]；5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[124]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；3，5-二氯-N-(4-氟-苯甲基)-4-羥基-苯磺酰胺[127]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-酰胺[129]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，它是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)-苯-磺酰胺[35]；4-氯-N-(4-氯苯基)-3-硝基苯-磺酰胺[38]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺[64]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；以及N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]。
43.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，它是選自下面的化合物5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)酰胺[2]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)酰胺[3]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-羥基苯基)酰胺[5]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[6]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氟苯基)甲酰胺[7]；5-溴噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[18]；5-苯磺?；?噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)酰胺[23]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯基)酰胺[27]；4，5-二溴噻吩-2-磺酸(3，4-二氯苯基)酰胺[28]；5-氯噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-三氟甲基-苯基)酰胺][33]；4-氯-3-硝基-N-(4-三氟甲基-苯基)苯-磺酰胺[35]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氯苯基)酰胺[39]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-二氟苯基)酰胺[40]；5-(1-甲基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基)-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[43]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)酰胺[44]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-氟苯甲酰胺[45]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸4-三氟甲基苯甲酰胺[46]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]酰胺[48]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸[2-(1H-吲哚-3-基)-1-甲基乙基]酰胺[49]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基-(4-三氟甲基-苯基)酰胺[50]；5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸(4-氯苯基)甲酰胺[51]；以及5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酸甲基(4-三氟甲基-苯甲基)酰胺[52]5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氟-苯甲基)-酰胺[53]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氯-苯甲酰胺[54]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸3，5-二氟-苯甲酰胺[55]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸4-氯-苯甲酰胺[56]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[1-(4-氟-苯基)-乙基]-酰胺[57]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(1H-苯并咪唑-2-基)-酰胺[59]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸[2-(6-氯-1H-吲哚-3-基)-乙基]-酰胺[60]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺[61]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯基酰胺[62]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸對甲苯酰胺[63]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲酰胺[64]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-氯-苯基)-酰胺[65]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸苯甲基-(4-甲氧基-苯基)-酰胺[66]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-(3-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[67]；4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[69]；5-氯-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][70]；硫代乙酸S-[5-(4-氯-苯基氨磺酰基)-3-硝基-噻吩-2-基]酯[72]；5-甲基-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[73]；5-甲基-噻吩-2，4-二磺酸雙-[(4-氯-苯基)-酰胺][74]；5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(3-三氟甲基-苯甲基)-(4-三氟甲基-苯甲基)-酰胺[75]；5-(2-甲氧基-乙基氨基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[80]；N-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-3-硝基-苯磺酰胺[83]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(4-氯-3-硝基-苯基)-酰胺[88]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-氯-4-甲氧基-苯磺酰胺[104]；N-(3-氯-4-硝基-苯基)-3，5-雙-三氟甲基-苯磺酰胺[105]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(3，5-二氯-苯基)-酰胺[112]；5-苯磺酰基-噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[117]；5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[119]；苯并[b]噻吩-2-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[120]；苯并[1，2，5]噻-二唑-5-磺酸(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-酰胺[122]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[125]；4，5-二溴-噻吩-2-磺酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺[126]；N-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-2，6-二氯-苯磺酰胺[128]；5-(3-羥基-哌啶-1-基)-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-氯-苯基)-酰胺[130]；以及5-氯-4-硝基-噻吩-2-磺酸(4-硝基-苯基)-酰胺[131]。
44.一種藥物組合物，其含有與一種或多種可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合的權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物。
45.權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物在測定對HDM2結(jié)合力的方法中的用途。
46.根據(jù)權(quán)利要求45的用途，其中所述測定方法能夠識別出可抑制HDM2與p53和/或E2F之間的相互作用的候選化合物。
47.根據(jù)權(quán)利要求45或46中任意一項的用途，其中所述測定方法是競爭性結(jié)合測定方法。
48.根據(jù)權(quán)利要求47的用途，其中所述競爭性結(jié)合測定方法包括下述步驟在p53衍生肽存在下，使權(quán)利要求1-22中任意一項所定義的通式I化合物與HDM2接觸；并檢測在HDM2和所述p53衍生肽之間的相互作用中所出現(xiàn)的任意變化。
49.根據(jù)權(quán)利要求48的用途，其中所述p53衍生肽是熒光標記的或生物素化的p53衍生肽。
50.一種檢測配體對HDM2結(jié)合力的方法，所述方法包括下述步驟(i)在p53衍生肽存在下，使配體與HDM2接觸；并(ii)檢測在HDM2和所述p53衍生肽之間的相互作用中所出現(xiàn)的任意變化；其中所述配體是權(quán)利要求1-22中任意一項所定義的化合物。
51.一種并用藥物，它含有至少一種權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物和至少一種細胞毒素劑。
52.根據(jù)權(quán)利要求51的并用藥物，其中所述細胞毒素劑是化學(xué)治療劑。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的并用藥物，其中所述化學(xué)治療劑是順鉑或依托泊苷。
54.一種藥物組合物，其含有與可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合的至少一種權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物、以及一種或多種細胞毒素劑。
55.一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物，另外在給藥之前、同時或者之后還施用一種或多種其它的細胞毒素劑。
56.一種治療增殖性疾病的方法，所述方法包括向患者施用至少一種權(quán)利要求1-43中任意一項所定義的化合物，另外在給藥之前、同時或者之后還結(jié)合使用放射治療。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I的雙芳基磺酰胺化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途，其中W是C
文檔編號C07D285/06GK1665802SQ03815948
公開日2005年9月7日 申請日期2003年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月5日
發(fā)明者王淑東, 達倫·吉布森, 肯尼思·鄧肯, 凱文·貝利, 馬克·托馬斯, 戴維·麥卡勒姆, 丹尼拉·澤勒瓦, 尼古拉斯·J·特納, 彼得·M·費希爾 申請人:西克拉塞爾有限公司