專利名稱：一種制備薯蕷皂苷元的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于一種從中藥穿山龍或其它薯蕷科植物中提取制備藥物原料薯蕷皂苷元的新方法，屬于中藥領(lǐng)域。
本發(fā)明目的在于提供一種適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的薯蕷皂苷元的制備新方法。
本發(fā)明薯蕷皂苷元制備方法可以選自下列方法中的任何一種。
方法一用中藥穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加氧化鈣或氫氧化鈣乳浸濕，放置，再用乙醇回流提取，提取液過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，減壓干燥。干燥物用硫酸或鹽酸水解，放冷，抽濾或離心，水洗后加適量石灰粉用乙醇回流提取水解物，提取液加活性炭脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，乙醇中重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
本方法還可以是穿山龍250-1000重量份，加入10-40重量份氧化鈣乳浸濕，放置6-18小時，用2-8倍體積份(kg/L)60-900％的乙醇回流提取2-4次，每次時間為2-4小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，將不溶物減壓干燥。干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，放冷，抽濾或離心，不溶物用水洗后加3-12重量份石灰粉，用85-95％乙醇1-2倍體積份(kg/L)回流提取水解物，提取液加活性炭1-6重量份脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，用200-1000體積份(kg/L)85-95％乙醇重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)，收率為1.2％，含量為96.9％。
方法二用中藥穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加常水浸泡，棄去浸泡液，用乙醇回流提取，在提取液中加入活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥。干燥物用硫酸或鹽酸水解，水解物抽濾或離心，用水洗至中性，加石灰粉攪拌、干燥、用乙醇回流提取水解物，調(diào)PH值，用活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用乙醇重結(jié)晶得無色針狀結(jié)晶純品。
本方法還可以是穿山龍250-1000重量份，加8-12倍體積份(kg/L)常水室溫浸泡8-18小時，棄去浸液，用4-10倍體積份(kg/L)85-95％乙醇回流提取2-4小時，再用70-90％乙醇4-8倍體積份回流提取1-3小時，合并提取液，在提取液中加入6-12重量份活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥。干燥物用1mol/L硫酸水解2-4小時，水解物抽濾，用水洗至中性，加20-60重量份石灰粉攪拌、干燥，用85-95％乙醇1-2倍體積份(kg/L)回流提取水解物，調(diào)PH值至4-6，加入藥用活性炭1-3重量份，脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用85-95％乙醇200-1000體積份(kg/L)重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)收率為1.4％，含量為94.8％。
方法三以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加1％的糖化酶或淀粉酶，用適量水溶液浸泡24小時以上，再用常水沖洗浸泡物，用乙醇回流提取，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥。干燥物用硫酸或鹽酸水解，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入氧化鈣或氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取，抽濾，調(diào)PH值，用的活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
本方法還可以是穿山龍250-1000重量份，加入6-12重量份的糖化酶，用4-10倍體積份(kg/L)的去離子水浸泡12-36小時，再用常水沖洗浸泡物，用4-10倍體積份(kg/L)95％乙醇回流提取2-4小時，濾取提取液，再用75-90％乙醇4-10倍體積份(kg/L)回流提取1-3小時，合并提取液，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥。干燥物用2mol/L鹽酸水解2-4小時，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入10-30重量份的氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取1-3小時，抽濾，調(diào)PH值4-6，用3-8重量份活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用85-95％乙醇600-1000體積份(kg/L)重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)，收率為1.3％，含量為96.3％。
方法四以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，用含的氧化鈣或氫氧化鈣的乙醇溶液回流提取，過濾，調(diào)PH值，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物。用硫酸或鹽酸水解濾取物，過濾或離心，用水洗至中性，干燥，再用乙醇抽濾水解物，抽濾，加適量活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
本方法還可以是穿山龍250-1000重量份，加入40-80重量份氫氧化鈣，用4-10倍體積份(kg/L)80-95％乙醇溶液回流提取2-4小時，濾取提取液，再用80-95％乙醇4-10倍體積份(kg/L)回流提取1-3小時，合并提取液，過濾，調(diào)PH值，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物。用2mol/L鹽酸水解濾取物，過濾，用水洗至中性，干燥，再用85-95％乙醇600-1000體積份(kg/L)提取水解物，抽濾，濾液加8-12重量份活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用85-95％乙醇600-1000體積份(kg/L)重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)，收率為1.5％，含量為96.3％。
本發(fā)明的上述方法均可以用于產(chǎn)業(yè)化大量制備單體薯蕷皂苷元，是一種成本低、含量高、安全、環(huán)境污染少的工藝；本發(fā)明的薯蕷皂苷元制備新方法是先將藥材適當(dāng)處理后用乙醇將皂苷提取出來，適當(dāng)純化后用酸水解，水解產(chǎn)物加適量氧化鈣或氫氧化鈣，用乙醇抽提薯蕷皂苷元，重結(jié)晶后可得薯蕷皂苷元純品，含量在94％以上。新工藝不僅解決了舊工藝用120#汽油提取的問題(水解物可直接用乙醇抽提)，同時解決了120#汽油在制備薯蕷皂苷元過程中的易燃易爆的問題。新工藝也解決了酸水解時酸的用量過大問題，新工藝每公斤藥材用鹽酸量為50ml，舊工藝每公斤藥材用鹽酸量為500ml，減少了酸對環(huán)境的污染，同時也降低了生產(chǎn)成本。
本發(fā)明的薯蕷皂苷元是通過高效液相色譜和液一質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)進行分析的。
1、高效液相(HPLC)分析儀器美國Agillent1100型高效液相色譜儀(配四元泵、二級管陣列檢測器、自動進樣器、柱溫箱、軟件為Agillent1100型多種數(shù)自動處理系統(tǒng))，條件色譜柱為Zorbax C18反相硅膠柱(4.6cm×150cm)，進樣量為5ul，流動相為甲醇水＝80∶20，流速為1.0ml/min，檢測波長為215nm。分析結(jié)果薯蕷皂苷元保留時間為15.385min，與標(biāo)準(zhǔn)品一致，外標(biāo)法定量為94％以上。
2、液—質(zhì)聯(lián)用(LC/MSD)分析儀器美國Agillent液一質(zhì)聯(lián)用儀(配四元泵、補償單元泵、二級管陣列檢測器、自動進樣器、柱溫箱、軟件為Agillent1100型多種數(shù)據(jù)處理系統(tǒng))。條件色譜柱為ZOBAX EXTEND C18柱，流動相為乙腈水(PH為3.5)＝8020。流速為0.9ml/min，柱后補償促離子化試劑氨水溶液(0.1ml/min)，質(zhì)譜條件為負離子模式(NEG)電噴霧(API-ESI)掃描。經(jīng)液一質(zhì)聯(lián)用分析確定了本發(fā)明提取的化合物與標(biāo)準(zhǔn)品薯蕷皂苷元完全一致。
本發(fā)明的上述方法可以用于產(chǎn)業(yè)化大量制備單體薯蕷皂苷元，是一種成本低、含量高、安全、環(huán)境污染少的工藝。在本發(fā)明完成以前沒有關(guān)于該工藝的報道。
實施例1穿山龍1kg，加入40g氧化鈣乳浸濕，放置12小時，用6000ml 80％的乙醇回流提取兩次，每次時間為3小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，將不溶物減壓干燥。干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，放冷，抽濾或離心，不溶物用水洗后加10g石灰粉用95％乙醇1000ml回流提取水解物，提取液加活性炭5g脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，用800ml95％乙醇重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)約12g，收率為1.2％，含量為96.9％。實施例2穿山龍1kg，加10000ml常水室溫浸泡12小時，棄去浸液，用8000ml 95％乙醇回流提取3小時，再用80％乙醇6000ml回流提取2小時，合并提取液，在提取液中加入10活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥。干燥物用1mol/L硫酸水解3小時，水解物抽濾，用水洗至中性，加40g石灰粉攪拌、干燥、用95％乙醇1000ml回流提取水解物，調(diào)PH值至5，加入藥用活性炭2g脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用95％乙醇800ml重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)約14g，收率為1.4％，含量為94.8％。實施例3穿山龍1kg，加入10g的糖化酶，用8000ml的去離子水浸泡24小時，再用常水沖洗浸泡物，用8000ml95％乙醇回流提取3小時，濾取提取液，再用85％乙醇6000ml回流提取2小時，合并兩次提取液，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥。干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入20g的氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取2小時，抽濾，調(diào)PH值近中性，用5g活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用95％乙醇800ml重結(jié)晶，用95％乙醇800ml重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)約13g，收率為1.3％，含量為96.3％。實施例4穿山龍1kg，加入60g氫氧化鈣，用8000ml85％乙醇溶液回流提取3小時，濾取提取液，再用85％乙醇6000ml回流提取2小時，合并兩次提取液，過濾，調(diào)PH值至中性，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物。用2mol/L鹽酸水解濾取物，過濾，用水洗至中性，干燥，再用95％乙醇1000ml提取水解物，抽濾，濾液加10g活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用95％乙醇800ml重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶(Diosgenin)約15g，收率為1.5％，含量為96.3％。
權(quán)利要求
1.一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為用中藥穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加氧化鈣或氫氧化鈣乳浸濕，放置，再用乙醇回流提取，提取液過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，減壓干燥；干燥物用硫酸或鹽酸水解，放冷，抽濾或離心，水洗后加適量石灰粉用乙醇回流提取水解物，提取液加活性炭脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，乙醇中重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
2.如權(quán)利要求1所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍250-1000重量份，加入10一40重量份氧化鈣乳浸濕，放置6-18小時，用2-8倍體積份60-900％的乙醇回流提取2-4次，每次時間為2-4小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，將不溶物減壓干燥；干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，放冷，抽濾或離心，不溶物用水洗后加3-12重量份石灰粉，用85-95％乙醇1-2倍體積份回流提取水解物，提取液加活性炭1-6重量份脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，用200-1000體積份85-95％乙醇重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
3.如權(quán)利要求2所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍1000重量份，加入40重量份氧化鈣乳浸濕，放置12小時，用6000體積份80％的乙醇回流提取兩次，每次時間為3小時，合并提取液，過濾，回收乙醇，過濾得不溶物，將不溶物減壓干燥；干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，放冷，抽濾或離心，不溶物用水洗后加10重量份石灰粉用95％乙醇1000體積份回流提取水解物，提取液加活性炭5重量份脫色除雜質(zhì)，得薯蕷皂苷元，用800ml95％乙醇重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
4.一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為用中藥穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加常水浸泡，棄去浸泡液，用乙醇回流提取，在提取液中加入活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥；干燥物用硫酸或鹽酸水解，水解物抽濾或離心，用水洗至中性，加石灰粉攪拌、干燥、用乙醇回流提取水解物，調(diào)PH值，用活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用乙醇重結(jié)晶得無色針狀結(jié)晶純品。
5.如權(quán)利要求4所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為本方法還可以是穿山龍250-1000重量份，加8-12倍體積份常水室溫浸泡8-18小時，棄去浸液，用4-10倍體積份85-95％乙醇回流提取2-4小時，再用70-90％乙醇4-8倍體積份回流提取1-3小時，合并提取液，在提取液中加入6-12重量份活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥；干燥物用1mol/L硫酸水解2-4小時，水解物抽濾，用水洗至中性，加20-60重量份石灰粉攪拌、干燥，用85-95％乙醇1-2倍體積份回流提取水解物，調(diào)PH值至4-6，加入藥用活性炭1-3重量份，脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用85-95％乙醇200-1000體積份重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
6.如權(quán)利要求5所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍1kg，加10000ml常水室溫浸泡12小時，棄去浸液，用8000ml95％乙醇回流提取3小時，再用80％乙醇6000ml回流提取2小時，合并提取液，在提取液中加入10活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥；干燥物用1mol/L硫酸水解3小時，水解物抽濾，用水洗至中性，加40g石灰粉攪拌、干燥、用95％乙醇1000ml回流提取水解物，調(diào)PH值至5，加入藥用活性炭2g脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用95％乙醇800ml重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
7.一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加1％的糖化酶或淀粉酶，用適量水溶液浸泡24小時以上，再用常水沖洗浸泡物，用乙醇回流提取，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥；干燥物用硫酸或鹽酸水解，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入氧化鈣或氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取，抽濾，調(diào)PH值，用的活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
8.如權(quán)利要求7所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍250-1000重量份，加入6-12重量份的糖化酶，用4-10倍體積份的去離子水浸泡12-36小時，再用常水沖洗浸泡物，用4-10倍體積份95％乙醇回流提取2-4小時，濾取提取液，再用75-90％乙醇4-10倍體積份回流提取1-3小時，合并提取液，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥；干燥物用2mol/L鹽酸水解2-4小時，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入10-30重量份的氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取1-3小時，抽濾，調(diào)PH值4-6，用3-8重量份活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用85-95％乙醇600-1000體積份重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
9.如權(quán)利要求8所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍1kg，加入10g的糖化酶，用8000ml的去離子水浸泡24小時，再用常水沖洗浸泡物，用8000ml95％乙醇回流提取3小時，濾取提取液，再用85％乙醇6000ml回流提取2小時，合并兩次提取液，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥；干燥物用2mol/L鹽酸水解3小時，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入20g的氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取2小時，抽濾，調(diào)PH值近中性，用5g活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用95％乙醇800ml重結(jié)晶，用95％乙醇800ml重結(jié)晶得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
10.一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，用含的氧化鈣或氫氧化鈣的乙醇溶液回流提取，過濾，調(diào)PH值，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物；用硫酸或鹽酸水解濾取物，過濾或離心，用水洗至中性，干燥，再用乙醇抽濾水解物，抽濾，加適量活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品。
11.如權(quán)利要求10所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為穿山龍250-1000重量份，加入40-80重量份氫氧化鈣，用4-10倍體積份80-95％乙醇溶液回流提取2-4小時，濾取提取液，再用80-95％乙醇4-10倍體積份回流提取1-3小時，合并提取液，過濾，調(diào)PH值，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物；用2mol/L鹽酸水解濾取物，過濾，用水洗至中性，干燥，再用85-95％乙醇600-1000體積份提取水解物，抽濾，濾液加8-12重量份活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用85-95％乙醇600-1000體積份重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶。
12.如權(quán)利要求11所述的一種薯蕷皂苷元的制備方法，其特征在于該方法為1)穿山龍1kg，加入60g氫氧化鈣，用8000ml85％乙醇溶液回流提取3小時，濾取提取液，再用85％乙醇6000ml回流提取2小時，合并兩次提取液，過濾，調(diào)PH值至中性，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物；用2mol/L鹽酸水解濾取物，過濾，用水洗至中性，干燥，再用95％乙醇1000ml提取水解物，抽濾，濾液加10g活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用95％乙醇800ml重結(jié)晶，得薯蕷皂苷元無色針狀結(jié)晶；2)用中藥穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加常水浸泡，棄去浸泡液，用乙醇回流提取，在提取液中加入1％活性炭，抽濾，回收乙醇，抽濾得不溶物，干燥；干燥物用硫酸或鹽酸水解，水解物抽濾或離心，用水洗至中性，加適量石灰粉攪拌、干燥、用乙醇回流提取水解物，調(diào)PH值，用活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，干燥得薯蕷皂苷元，用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶；3)以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，加1％的糖化酶或淀粉酶，用適量水溶液浸泡24小時以上，再用常水沖洗浸泡物，用乙醇回流提取，回收乙醇提取液，過濾，不溶物干燥；干燥物用硫酸或鹽酸水解，抽濾水解物，用水洗至中性，干燥，加入2％的氧化鈣或氫氧化鈣，攪勻，用乙醇回流提取2-3次，抽濾，調(diào)PH值近中性，用1-2％的活性炭脫色，抽濾，回收乙醇，過濾不溶物，干燥得薯蕷皂苷元粗品，用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶；4)以穿山龍或其它薯蕷科植物為原料，用含0.5-1.5％的氧化鈣或氫氧化鈣的乙醇溶液回流提取，過濾，調(diào)PH值至中性，減壓回收乙醇，過濾，干燥濾取物；用硫酸或鹽酸水解濾取物，過濾或離心，用水洗至中性，干燥，再用乙醇抽提水解物，抽濾，加適量活性炭，攪拌過濾，回收乙醇，抽濾，再用乙醇重結(jié)晶，得無色針狀結(jié)晶純品；
13.根據(jù)權(quán)利1所述的方法，其特征在于藥材首先必須用乙醇提取，并加入適量的氧化鈣或氫氧化鈣；
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于水解物經(jīng)抽濾、干燥后用乙醇回流提取，且加入適量的氧化鈣或氫氧化鈣，提取液加活性炭脫色除雜質(zhì)；
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于酸水解所用的酸是硫酸或鹽酸，其濃度為1mol/L-5mol/L；
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從穿山龍或其它薯蕷科植物中產(chǎn)業(yè)化制備薯蕷皂苷元的新方法，這種新方法首先用乙醇抽提藥材中的總皂苷，然后再用酸降解，水解物加入氧化鈣或氫氧化鈣，用乙醇回流提取，經(jīng)重結(jié)晶后可得純度在94％以上的薯蕷皂苷元。解決了以往制備薯蕷皂苷元酸用量過大、污染環(huán)境嚴重的問題，最重要的是可用乙醇代替120#汽油提取水解物，解決了使用易燃易爆汽油的問題。該方法具有簡單、先進、安全、適用、并有利于環(huán)境保護的特點。
文檔編號C07J71/00GK1418888SQ0215399
公開日2003年5月21日 申請日期2002年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月9日
發(fā)明者赫玉芳, 趙全成, 曲文, 南敏倫 申請人:吉林天藥科技股份有限公司