專利名稱：監(jiān)測生物酶催化提取薯蕷皂苷元中催化反應終點的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種監(jiān)測生物酶催化提取薯蕷皂苷元中催化反應終點的方法，屬于由薯蕷植物中提取薯蕷皂苷元的技術(shù)。
背景技術(shù)：
薯蕷皂苷元又名薯蕷皂素，是甾體制藥工業(yè)的重要中間體，對它進行半合成改造后可以制備出上千種的藥物，因此薯蕷皂苷元被稱為是藥用“黃金”。
我國薯蕷植物資源豐富，種類比較多，南北各地都有分布，其中最常見并作為薯蕷皂苷元生產(chǎn)的原料有盾葉薯蕷(俗稱黃姜)、穿龍薯蕷(俗稱穿地龍)和黃山藥等。這些原料經(jīng)常規(guī)酸水解法后可以制得薯蕷皂苷元，但是由于原料根莖中存在著大量的淀粉使薯蕷皂苷被“包裹”與“屏蔽”起來，對薯蕷皂苷的水解產(chǎn)生干擾，從而造成采用常規(guī)酸水解法生產(chǎn)的薯蕷皂苷元的收率較低，只有1.6％(質(zhì)量百分比)。為了提高薯蕷皂苷元的收率，充分利用植物資源，近年來人們發(fā)現(xiàn)在酸水解之前通過自然發(fā)酵后可以大大提高薯蕷皂苷元的收率。鑒于此，我們采用生物催化技術(shù)，在薯蕷皂苷元提取之前，將植物中的薯蕷皂苷元與纖維和淀粉形成的苷鍵徹底斷裂，從而使薯蕷皂苷轉(zhuǎn)化成薯蕷皂苷元，使得在提取時能夠?qū)⒏嗟氖硎氃碥赵崛〕鰜?，以最終達到提高收率的目的，其收率達2.5％。
實驗證明，生物酶催化法提取薯蕷皂苷元時，催化反應沒有達到終點時，所得薯蕷皂苷元的產(chǎn)品符合優(yōu)級品標準，但產(chǎn)率較低；而當生物反應超過終點時，產(chǎn)率雖然較高，但是產(chǎn)品的質(zhì)量卻較差，雜質(zhì)較多。因此，在生物酶催化反應過程中，如何控制催化反應的終點對于保證提取的薯蕷皂苷元既具有較高的收率，又具有較好的品質(zhì)是是非常重要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種監(jiān)測生物酶催化法提取薯蕷皂苷元時催化反應終點的方法。該方法簡單易行，靈敏可靠。
本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案加以實現(xiàn)的，一種監(jiān)測生物酶催化提取薯蕷皂苷元中催化反應終點的方法，其特征包括以下具體步驟1.碘試劑的制備將2.4～3.8g碘化鉀溶于20～38mL蒸餾水中，然后再加入0.8～1.7g的碘片，待溶解完全后，定容至1000mL，儲存于棕色瓶中待用。
2.向發(fā)酵液滴加碘試劑觀測顏色的變化確定發(fā)酵終點向1～6mL的發(fā)酵液中加入2～5滴配好的碘試劑，觀察顏色的變化。如果溶液顯蘭色，反應沒有到終點；如果溶液顯淺黃色，且溶液pH值在4.5～5.3之間時則反應達到終點。
本發(fā)明的優(yōu)點在于所用試劑價廉，無污染，測試儀器簡單，操作方便，對催化反應終點的監(jiān)測靈敏可靠。
具體實施例方式
實施例1取生物催化反應時間為24h時的發(fā)酵液2mL置于比色皿，然后滴入3滴配好的碘試劑，溶液顏色呈淺黃色，同時用酸度計測定溶液的pH值為5.0，反應達到終點。此時提取的薯蕷皂苷元的收率為2.51％，熔點為204～208℃，符合優(yōu)級品標準，產(chǎn)品為白色結(jié)晶粉末。
實施例2取生物催化反應時間為18h時的發(fā)酵液3mL置于比色皿，然后滴入5滴配好的碘試劑，溶液顏色呈深蘭色，同時用酸度計測定溶液的pH值為5.8，反應未達到終點。此時提取的薯蕷皂苷元的收率為1.91％，熔點為201～204℃，符合優(yōu)級品標準，產(chǎn)品為白色結(jié)晶粉末。
實施例3取生物催化反應時間為30h時的發(fā)酵液3mL置于比色皿，然后滴入4滴配好的碘試劑，溶液顏色呈黃色，同時用酸度計測定溶液的pH值為4.3，反應超過終點。此時提取的薯蕷皂苷元的收率為3.17％，熔點為179～206℃，不符合產(chǎn)品質(zhì)量標準，產(chǎn)品為黃色粉末。
權(quán)利要求
1.一種監(jiān)測生物酶催化提取薯蕷皂苷元中催化反應終點的方法，其特征包括以下具體步驟1).碘試劑的制備將2.4～3.8g碘化鉀溶于20～38mL蒸餾水中，然后再加入0.8～1.7g的碘片，待溶解完全后，定容至1000mL，儲存于棕色瓶中待用；2).向發(fā)酵液滴加碘試劑觀測顏色的變化確定發(fā)酵終點向1～6mL的發(fā)酵液中加入2～5滴配好的碘試劑，觀察顏色的變化，如果溶液顯蘭色，反應沒有到終點；如果溶液顯淺黃色，且溶液pH值在4.5～5.3之間時則反應達到終點。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種監(jiān)測生物酶催化提取薯蕷皂苷元中催化反應終點的方法，屬于由薯蕷植物中提取薯蕷皂苷元的技術(shù)。該方法包括以下步驟，碘試劑的制備將2.4～3.8g碘化鉀溶于20～38mL蒸餾水中，然后再加入0.8～1.7g的碘片，待溶解完全后，定容至1000mL，儲存于棕色瓶中待用；向發(fā)酵液滴加碘試劑觀測顏色的變化確定發(fā)酵終點向1～6mL的發(fā)酵液中加入2～5滴配好的碘試劑，觀察顏色的變化。如果溶液顯藍色，反應沒有到終點；如果溶液顯淺黃色，且溶液pH值在4.5～5.3之間時則反應達到終點。本發(fā)明的優(yōu)點在于，所用試劑價廉，無污染，測試儀器簡單，操作方便，對催化反應終點的監(jiān)測靈敏可靠。
文檔編號G01N21/79GK1598547SQ20041002004
公開日2005年3月23日 申請日期2004年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月19日
發(fā)明者張裕卿 申請人:天津大學