專利名稱：新的1,2－二苯基－2－丙烯－1－酮衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作青光眼治療劑的新化合物。
背景技術(shù)：
通常青光眼為一種由眼內(nèi)壓升高而引起的視覺功能障礙的疾病。水狀液流出與眼內(nèi)壓的升高密切相關(guān)。當(dāng)水狀液流出受到干擾時(shí)，眼內(nèi)壓升高。水狀液主要由小梁網(wǎng)通過眼球外的鞏膜靜脈竇流出。水狀液流出可通過減少在這種小梁網(wǎng)中的水狀液流出的阻力而增加。形成小梁網(wǎng)的細(xì)胞(小梁網(wǎng)細(xì)胞)具有巰基基團(tuán)?，F(xiàn)已報(bào)道了一種降低眼內(nèi)壓的方法，其中給予一種可與巰基反應(yīng)的化合物以產(chǎn)生小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變，并增加水狀液的流出率。(日本審定專利公開號(hào)13013/1995)。該專利公開了苯氧乙酸衍生物，優(yōu)選利尿酸作為能和巰基反應(yīng)的化合物。
通過導(dǎo)致小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變而降低眼內(nèi)壓的方法作為一種治療青光眼的方法是十分引人關(guān)注的。但是，還沒有研究出具有該功能機(jī)理的藥物。在青光眼的治療劑的開發(fā)中創(chuàng)制新藥的研究是非常令人關(guān)注的課題本發(fā)明公開由于注意到利尿酸，即一種具有α，β-不飽和羰基的苯氧乙酸衍生物，具有導(dǎo)致小梁網(wǎng)細(xì)胞中的形態(tài)學(xué)改變和降低眼內(nèi)壓的作用，本發(fā)明人合成了各種新穎的化合物，并研究了它們對小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)的作用。結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了新的1，2-二苯基-2-丙烯-1-酮衍生物，即具有以1，2-二苯基-2-丙烯-1-酮結(jié)構(gòu)為基本結(jié)構(gòu)，而在其苯環(huán)的1位側(cè)鏈上引入氨基的化合物，它們具有出色的效果。因此，本發(fā)明得以完成。
本發(fā)明涉及由下面的通式[I]代表的化合物及其鹽(此后在沒有前提的情況下指“本發(fā)明化合物”)，及含有它們作為活性組分的藥物組合物
其中，R1為氫，低級(jí)烷基，羥基，低級(jí)烷氧基或鹵素，R2，R3和R4相同或不同，為氫成低級(jí)基，且…為單鍵或雙鍵。
上面定義的基團(tuán)在下面詳細(xì)描述。
低級(jí)烷基為具有一到八個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，丙基，丁基，己基，異丙基，異丁基，異戊基，異己基，叔丁基或3，3-二甲基丁基。
低級(jí)烷氧基為具有一到八個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基，己氧基，異丙氧基或叔丁氧基。
鹵素為氟。氯。溴或碘。
當(dāng)本發(fā)明的化合物中R3和/或R4為氫時(shí)，氨基可用保護(hù)基保護(hù)。氨基的保護(hù)基為通用的氨基保護(hù)基，例如?；セ?，取代的低級(jí)烷基或取代的磺?；?。詳細(xì)地說，保護(hù)基的實(shí)例為?；?，例如甲酰基，低級(jí)烷酰基，鹵代低級(jí)烷?；虮交减；?；酯基例如低級(jí)烷氧羰基，取代的低級(jí)烷氧羰基或苯氧羰基；取代的低級(jí)烷基例如烯丙基，苯基-低級(jí)烷基或苯甲?；?低級(jí)烷基；和取代的磺?；绲图?jí)烷基磺?；虮交酋；?。上述所提到的苯基碳酰基，苯氧羰基，苯基-低級(jí)烷基，苯甲酰基-低級(jí)烷基和苯基磺?；械拿恳粋€(gè)苯基環(huán)都可以被鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基或硝基取代。
優(yōu)選的氨基保護(hù)基的具體實(shí)列為酰基，例如甲?；阴；纫阴；?，三氟乙酰基或苯甲?；?；酯基例如甲氧羰基，異丁氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙氧羰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，芐氧羰基，二苯基甲氧羰基或苯氧羰基；取代的烷基例如烯丙基，芐基，三苯基甲基或(4-甲氧基苯基)二苯基甲基；和取代的磺?；?，例如苯磺酰基，2，4，6-三甲基苯磺?；蚣妆交酋；?。
當(dāng)R1為羥基時(shí)，羥基可被類似于氨基保護(hù)的通用的保護(hù)基保護(hù)。
本發(fā)明中的鹽是指任何藥學(xué)可接受的鹽，例如與諸如鹽酸，硝酸或硫酸的無機(jī)酸所形成的鹽，與諸如乙酸，富馬酸，馬來酸，檸檬酸或酒石酸等的有機(jī)酸所形成的鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物存在幾何異構(gòu)體或旋光異構(gòu)體時(shí)，這些異構(gòu)體也包括在本發(fā)明中。
本發(fā)明的化合物也可以以溶劑化物例如水合物的形式存在本發(fā)明的化合物的優(yōu)選的實(shí)例為其中的基團(tuán)為通式[I]所代表的化合物或其鹽中的基團(tuán)的那些化合物
(1a)R1為選自氫。低級(jí)烷基鹵素的基團(tuán)；和/或(2a)R2為氫；和/或(3a)R3和R4都為低級(jí)烷基。
即·用上述的(1a)定義的通式[I]所代表的化合物或其鹽中的化合物，·用上述的(2a)定義的通式[I]所代表的化合物或其鹽中的化合物，·用上述的(3a)定義的通式[I]所代表的化合物或其鹽中的化合物，及·用兩個(gè)或多個(gè)上述的(1a)，(2a)和(3a)的組合定義的通式[I]所代表的化合物或其鹽中的化合物。
本發(fā)明化合物的更優(yōu)選的實(shí)例為下面的化合物及其鹽。
1)1-[4-[(E)-2-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基-2-苯基-2-丙烯-1-酮 2)1-[4-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基-2-苯基-2-丙烯-1-酮 本發(fā)明還涉及下面的通式[IV]所代表的化合物及其鹽，該化合物為上面所述通式[I]所代表的化合物的合成中間件
其中，R1，R2，R3和R4和…與上述的定義相同，而且＞X為＞CHOH或＞C＝O。當(dāng)R3和/或R4為氫時(shí)，氨基可被保護(hù)基保護(hù)。
本發(fā)明化合物[1]的典型的合成路線如下所示 上述的合成路線并不代表所有方法，僅僅是一個(gè)典型的例子。具體的合成方法將在后面的實(shí)施例中詳細(xì)描述。
上述的合成路線的合成方法如下所詳述。
在氧化試劑(例如，二甲亞砜(DMSO))的存在下處理氨基醇[II](通式[IV]所代表的化合物及其鹽中，其中＞X為＞CHOH的化合物)，得到通式[III]所代表的羰基化合物(通式[IV]所代表的化合物及其鹽中，其中＞X為＞C＝O的化合物)。而后，化合物[III]在仲胺的存在下通過曼尼期反應(yīng)與多聚甲醛縮合，而后通過消去反應(yīng)得到本發(fā)明化合物[I]。
當(dāng)上述的合成方法中反應(yīng)物的分子中有羥基或氨基時(shí)，該基團(tuán)可任選地被適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基保護(hù)，該保護(hù)基也可在反應(yīng)后用常規(guī)的方法除去。
本發(fā)明的化合物為文獻(xiàn)中所未知的新化合物，其特征在于本發(fā)明的化合物具有1，2-二苯基-2-丙烯-1-酮結(jié)構(gòu)，即，這些化合物具有被兩個(gè)苯環(huán)取代的α，β-不飽和羰基基團(tuán)為基本結(jié)構(gòu)，且氨基是在苯環(huán)的1-位側(cè)鏈上引入的。
如在“背景技術(shù)”部分所描述的，已經(jīng)有人報(bào)導(dǎo)了利尿酸具有通過使小梁網(wǎng)細(xì)胞中的形態(tài)學(xué)改變和提高水狀液流出的速率而降低眼內(nèi)壓的作用(見日本審定專利公報(bào)No.13013/1995)。利尿酸為具有α，β-不飽和羰基基團(tuán)的苯氧乙酸衍生物。通過集中研究利尿酸的該化學(xué)結(jié)構(gòu)，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在利尿酸的α-位引入一個(gè)苯環(huán)并在另一個(gè)苯環(huán)的側(cè)鏈上引入氨基基團(tuán)而得到顯示出更高活性的新化合物。
給藥方法可以是一種以活性化合物本身給藥的方法，或一種以在體內(nèi)分解和轉(zhuǎn)化為活性化合物的形式，即以前藥的形式給藥的方法。兩種方法都是廣泛使用的方法。當(dāng)本發(fā)明化合物在其分子中具有為適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基所保護(hù)的羥基或氨基時(shí)，本發(fā)明化合物可以以被保護(hù)基保護(hù)的羥基或氨基形式給藥。本發(fā)明化合物也可以在除去保護(hù)基而將被護(hù)基轉(zhuǎn)變?yōu)榱u基或氨基后給藥。
為了研究本發(fā)明化合物的用途，對本發(fā)明化合物對小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響進(jìn)行了研究。詳細(xì)情況在后面的“藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)”部分加以描述，加入本發(fā)明化合物后小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變通過圖象分析加以研究。結(jié)果，本發(fā)明化合物對小梁網(wǎng)細(xì)胞顯示出卓越的形態(tài)學(xué)改變作用。因此，可認(rèn)為本發(fā)明化合物具有卓越的眼內(nèi)壓降低作用。
本發(fā)明化合物主要以非腸道方式給藥，也可以口服給藥。劑型的例子為滴眼劑，注射劑，片劑，膠囊劑，顆粒劑等。本發(fā)明化合物可按常規(guī)方法制成制劑。例如，滴眼劑可通過可選地使用下列物質(zhì)加以制備等滲劑例如氯化鈉或濃甘油；緩沖液例如磷酸鈉或乙酸鈉；表面活性劑例如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯，硬脂酸-40-聚烴氧基酯，或聚氧乙烯氫化蓖麻油；穩(wěn)定劑例如檸檬酸鈉或乙二胺四乙酸二鈉鹽；防腐劑例如苯扎氯銨或?qū)αu基苯甲酸酯；等。pH值可在眼藥制劑允許的范圍，優(yōu)選在4到8的范圍?？诜├缙瑒?，膠囊劑和顆粒劑的制備，可選的可通過使用稀釋劑例如乳糖，淀粉，結(jié)晶纖維素或植物油；潤滑劑例如硬酯酸鎂或滑石粉；粘合劑例如羥丙基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；繃解劑例如羧甲基纖維素鈣；包衣劑例如羥丙基甲基纖維素，大粒凝膠(macrogol)或硅氧烷樹脂；或明膠成膜試劑加以制備。
本發(fā)明化合物的劑量可根據(jù)癥狀，年齡，劑型等加以適當(dāng)選擇。在滴眼液的情況下，可使用它們的濃度為0.001到3％(w/v)的溶液每天滴注一次到多次，對于口服制劑，通常每天的劑量為1到1000毫克，可以給予單劑量或多個(gè)均分劑量。
本發(fā)明化合物的制備，制劑和藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下所示。這些實(shí)施例并不限制本發(fā)明的范圍，而是使人們更清楚的理解本發(fā)明。
本發(fā)明的最好實(shí)施方式化合物制備參考實(shí)施例14-(苯基乙酰基)肉桂酸(參考化合物No.1-1) 1)向4-羧基肉桂酸乙酯(2.0g)的氯仿(4ml)溶液中，在氮?dú)夥障碌渭觼喠蝓Ｂ?3.3ml)，而后向其中加入一滴二甲基甲酰胺，將混合物回流30分鐘。反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，得到相應(yīng)?；鹊臍堄辔?。將殘余物在氮?dú)夥障氯苡谒臍溥秽?30ml)中，溶液用干冰冷卻。向其中滴加芐基氯化鎂在四氫呋喃(4.5ml)的2.0M溶液。滴加完成十二分鐘后，向用干冰冷卻的反應(yīng)混合物中加入10％的檸檬酸水溶液，而后升溫至室溫，而后全部用乙醚提取。有機(jī)層用水和飽和鹽水依次洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。得到的殘余物用硅膠柱色譜法提純，得到結(jié)晶的4-(苯基乙?；?肉桂酸乙酯(675mg)。
熔點(diǎn)110.5℃～111.3℃IR(KBr，cm-1)2986，1690，1410，1330，1206，970，7042)在氮?dú)夥障?，?-(苯基乙酰基)肉桂酸乙酯(675mg)在乙醇(6ml)-四氫呋喃(6ml)的溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(2.3ml)和水(4ml)，將混合物在室溫下攪拌6.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入1N鹽酸將其酸化，反應(yīng)液整體用乙酸乙酯提取。有權(quán)層用飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。將得到的沉淀過濾，得到標(biāo)題化合物(參考化合物No.1-1)的結(jié)晶。
(參考化合物No.1-1)熔點(diǎn)232℃～236℃(分解)IR(KBr，cm-1)3036，2589，1684，1630，1337，1230，993下面的化合物可按與參考實(shí)施例1類似的方法制備得到。
·4-[(4-甲苯基)乙酰基]肉桂酸(參考化合物No.1-2)·4-[(4-氟苯基)乙?；鵠肉桂酸(參考化合物No.1-3)·4-[(4-氯苯基)乙酰基]肉桂酸(參考化合物No.1-4)參考實(shí)施例23-[4-(苯基乙?；?苯基]丙酸(參考化合物No.2-1) 1)在冰浴冷卻下向無水氯化鋁(4.27g)的1，2-二氯乙烷(30ml)溶液中加入苯基乙酰氯(3.4ml)，而后向其中滴加3-苯基丙酸乙酯(5.1g)的無水1，2-二氯乙烷(5ml)溶液。將混合物在冰冷卻下攪拌20分鐘，并在室溫下過夜。將反應(yīng)混合物一點(diǎn)一點(diǎn)地加入到含有冰(100g)的飽和碳酸氫鈉水溶液(150ml)中。將得到的沉淀過濾除去。向?yàn)V液中加入乙醚。有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水依次洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。得到的殘余物用硅膠柱色譜法提純，得到結(jié)晶的3-[4-(苯基乙?；?苯基]丙酸乙酯。
熔點(diǎn)50.5℃～52.5℃IR(KBr，cm-1)3059，2977，2921，1735，1682，1605，1479，1455，1437，1357，1316，1181，8222)向3-[4-(苯基乙?；?苯基]丙酸乙酯(700mg)在乙醇(6ml)-四氫呋喃(3ml)的溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(3.1ml)，將混合物在室溫下攪拌兩小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入10％檸檬酸水溶液將其酸化，反應(yīng)液整體用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用水和飽和鹽水依次洗滌，用無水硫酸鈉干燥，并在減壓下濃縮。得到的沉淀過濾，得到標(biāo)題化合物(參考化合物No.2-1)的結(jié)晶。
(參考化合物No.2-1)熔點(diǎn)132℃～137℃IR(KBr，cm-1)3497，3028，1680，1607，1498，1455，1348，1221，1182，992，826參考實(shí)施例3N，N-二甲基-4-(苯基乙酰基)肉桂酰胺(參考化合物No.3-1) 向4-(苯基乙?；?肉桂酸(參考化合物No.1-1，3.23g)在無水四氫呋喃(120ml)-氯仿(20ml)中的溶液中加入1-羥基苯并三唑(1.64g)，二甲基胺鹽酸鹽(1.19g)，N-甲基嗎啉(3.1ml)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(2.56g)，將混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，向濃縮液中加入10％檸檬酸水溶液，整個(gè)用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用水，飽和碳酸氫鈉水溶液，水，飽和鹽水依次洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。過濾得到的沉淀，得到標(biāo)題化合物(參考化合物No.3-1，3.00g)的結(jié)晶。
(參考化合物No.3-1)熔點(diǎn)138.5℃～141.5℃IR(KBr，cm-1)3030，1684，1653，1604，1498，1413，1328，1205，992，967下面化合物是按照與參考實(shí)施例3類似的方法得到的。
·N，N-二甲基-3-[4-(苯基乙?；?苯基]丙酰胺(參考化合物No.3-2)熔點(diǎn)125℃～131℃IR(KBr，cm-1)3028，2908，1684，1640，1604，1495，1452，1407，1141·N，N-二甲基-4-[(4-甲苯基)乙酰基]肉桂酰胺(參考化合物No.3-3)·N，N-二甲基-4-[(4-氟苯基)乙?；鵠肉桂酰胺(參考化合物No.3-4)·4-[(4-氯苯基)乙?；鵠-N，N-二甲基肉桂酰胺(參考化合物No.3-5)·4-(苯基乙?；?肉桂酰胺(參考化合物No.3-6)實(shí)施例1
1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙醇鹽酸鹽(化合物No.1-1) 在冰冷卻下，氮?dú)夥障?，將N，N-二甲基-4-(苯基乙?；?肉桂酰胺(參考化合物No.3-1，3.00g)在無水四氫呋喃(72ml)中的溶液，滴加到氫化鋁鋰(0.58g)在無水四氫呋喃(30ml)中的懸濁液中。全部加完后，混合物在室溫下攪拌20分鐘。
向反應(yīng)混合物中加入無水硫酸鈉，并在攪拌下向其中滴加水。過濾除去得到的不溶性物質(zhì)，濾液在減壓下濃縮。得到的殘余物通過硅膠柱色譜提純，并溶解在4.0N氯化氫的乙酸乙酯溶液中。真空濃縮后，過濾得到的沉淀，得到標(biāo)題化合物(化合物No.1-1，0.80g)結(jié)晶。
(化合物No.1-1)熔點(diǎn)152℃～164℃IR(KBr，cm-1)3334，2954，2664，1650，1418，1161，1034，984，752，708下面的化合物可通過與實(shí)施例1類似的方法得到。
·1-[4-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-2-苯基-1-乙醇(化合物No.1-2)IR(膜，cm-1)3026，2941，2860，2778，1495，1454，1042·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-甲苯基)-1-乙醇(化合物No.1-3)·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-氟苯基)-1-乙醇(化合物No.1-4)·2-(4-氯苯基)-1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-1-乙醇(化合物No.1-5)·1-[4-[(E)-3-氨基-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙醇(化合物No.1-6)實(shí)施例2
1-[4-[(E)-3-(乙酰氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙醇(化合物No.2-1) 用乙酸酐在吡啶中處理1-[4-[(E)-3-氨基-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙醇(化合物No.1-6)得到標(biāo)題化合物(化合物No.2-1)。
實(shí)施例31-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙酮(化合物No.3-1) 在室溫?cái)嚢柘孪?-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙醇鹽酸鹽(化合物No.1-1，800mg)的二甲亞砜(15ml)溶液中加入三乙胺(2.1ml)，而后向其中進(jìn)一步滴加三氧化硫-吡啶復(fù)合物(1.6g)的二甲亞砜(10ml)溶液。將混合物在室溫下攪拌三小時(shí)，向反應(yīng)混合物中加入0.1N氫氧化鈉水溶液，整體用乙醚提取。有機(jī)層用飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。得到的殘余物用硅膠柱色譜提純得到標(biāo)題化合物(化合物No.3-1，270mg)結(jié)晶。
(化合物No.3-1)IR(KBr，cm-1)2767，1682，1599，1452，1408，1332，1219，1175，975，726，697下面的化合物可通過與實(shí)施例3類似的方法得到。
·1-[4-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-2-苯基-1-乙酮(化合物No.3-2)熔點(diǎn)37.8℃～40.0℃IR(KBr，cm-1)2809，2758，1682，1601，1565，1493，1453，1409·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-甲苯基)-1-乙酮(化合物No.3-3)·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-氟苯基)-1-乙酮(化合物No.3-4)·2-(4-氯苯基)-1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-1-乙酮(化合物No.3-5)·1-[4-[(E)-3-(乙酰氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙酮(化合物No.3-6)實(shí)施例41-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-1) 將1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-1-乙酮(化合物No.3-1，200mg)的二噁烷(10ml)溶液導(dǎo)入壓力管中。向該溶液中加入多聚甲醛(86mg)，二甲胺鹽酸鹽(233mg)，乙酸(一滴)和無水硫酸鎂(1g)，將混合物加熱到120℃攪拌過夜。在冰冷卻下向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液進(jìn)行堿化，整體用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。得到的殘余物用硅膠柱色譜提純得到標(biāo)題化合物(化合物No.4-1，145mg)。
(化合物No.4-1)
IR(膜，cm-1)2941，2771，1664，1601，1412，1217，1175，980，700下面的化合物可通過類似于實(shí)施例4的方法得到·1-[4-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-2-苯基-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-2)IR(KBr，cm-1)3416，3027，2942，2814，2765，1665，1604，1465，1415，981，915·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-甲苯基)-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-3)·1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-(4-氟苯基)-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-4)·2-(4-氯苯基)-1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-5)·1-[4-[(E)-3-(乙酰氨基)-1-丙烯基]苯基]-2-苯基-2-丙烯-1-酮(化合物No.4-6)制劑使用本發(fā)明化合物制備滴眼劑和口服制劑的制劑實(shí)施例如下所示。
1)滴眼劑在10ml中本發(fā)明化合物1mg濃縮的甘油 250mg聚山梨酯80 200mg二水合磷酸二氫鈉20mg1N氫氧化鈉 適量1N鹽酸 適量無菌純化水 足量2)片劑在100mg中本發(fā)明化合物1mg乳糖66.4mg玉米淀粉20mg
羧甲基纖維素鈣6mg羥丙基纖維素 6mg硬脂酸鎂 0.6mg藥理實(shí)驗(yàn)為了研究本發(fā)明化合物在青光眼中的用途，研究了本發(fā)明化合物對小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)的影響。
1)對小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)的作用已經(jīng)有人報(bào)道了以下可能性，即具有提高水性液體流出作用的藥物可通過評價(jià)藥物對培養(yǎng)的小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)的作用而發(fā)現(xiàn)(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，33，2631-2640(1992))。因此，按照上述文獻(xiàn)所描述的相似方法研究本發(fā)明化合物對培養(yǎng)的牛小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)的作用。
實(shí)驗(yàn)方法通過圖像分析，對在培養(yǎng)的牛小梁網(wǎng)細(xì)胞中加入本發(fā)明化合物而造成的形態(tài)學(xué)改變加以定量評價(jià)。
細(xì)胞的制備在用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基D-MEM(Dulbecco’s修飾的伊格爾氏培養(yǎng)基，由Gibco Co.，Ltd.制造)中進(jìn)行牛小梁網(wǎng)細(xì)胞(傳代數(shù)2到5)的培養(yǎng)，該培養(yǎng)基含有胎牛血清(10％)，兩性霉素B(2.5μg/ml)和慶大霉素(50μg/ml)，在隨后的藥品處理的24小時(shí)之前用胰蛋白酶-EDTA溶液(0.05％胰蛋白酶，0.53mM EDTA·4Na)處理，并接種在24-孔板中(104個(gè)細(xì)胞/孔)。在隨后的藥品處理12小時(shí)之前，將細(xì)胞用磷酸緩沖的生理鹽水洗滌，而后將培養(yǎng)基換成含有兩性霉素B(2.5μg/ml)和慶大霉素(50μg/ml)的D-MEM(在下文中稱為“培養(yǎng)基A”)。在隨后的藥品處理的一小時(shí)之前，從上述制備的細(xì)胞中篩選出互相不接觸的細(xì)胞并用于實(shí)驗(yàn)。
試驗(yàn)化合物溶液的制備將試驗(yàn)化合物溶于二甲亞砜(DMSO)中，向溶液中加入培養(yǎng)基A，而后通過過濾將溶液滅菌。而后再將培養(yǎng)基A加入而將其稀釋到指定濃度。該稀釋的溶液在隨后的藥品處理的一小時(shí)前，在37℃在5％二氧化碳?xì)夥障?，保持等溫狀態(tài)一小時(shí)，以制備試驗(yàn)化合物溶液。
測定方法
首先，在藥品處理前一小時(shí)，用孔掃描儀對細(xì)胞拍照。接著，將細(xì)胞培養(yǎng)基用試驗(yàn)化合物溶液替換，將細(xì)胞用藥品處理，并在37℃在5％二氧化碳?xì)夥障屡囵B(yǎng)3小時(shí)。而后，將與用藥品處理一小時(shí)之前拍過照的細(xì)胞相同的細(xì)胞用孔掃描儀拍照。
圖像分析用CCD照相機(jī)(由HAMAMATU Co.，Ltd.公司制造)將拍攝的細(xì)胞圖像從照片插入到圖像分析系統(tǒng)中。描繪插入的細(xì)胞圖像輪廓，并測定面積。由試驗(yàn)化合物造成的小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的程度通過下面的面積的改變率(％)表示。
面積的改變率(％)＝[(A-B)/A]×100A藥品處理前的細(xì)胞面積B藥品處理后的細(xì)胞面積結(jié)果表1顯示減少小梁網(wǎng)細(xì)胞的細(xì)胞面積的50％所需的濃度，即EC50值，作為測試結(jié)果的實(shí)例。表1也顯示了使用利尿酸作為對照藥品的結(jié)果。
表1

表1顯示本發(fā)明化合物對小梁網(wǎng)細(xì)胞具有出色的細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變作用。這些作用大大地高于已知的用于比較的對照藥物利尿酸的作用。
上述的結(jié)果表明本發(fā)明化合物具有出色的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變作用，可用作眼內(nèi)壓降低劑，即可作為青光眼的治療劑。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明提供了通過導(dǎo)致小梁網(wǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變而降低眼內(nèi)壓的化合物。這些化合物可用作青光眼的治療劑。
權(quán)利要求
1.一種由下面的通式[I]所代表的化合物或其鹽， 其中，R1為氫，低級(jí)烷基、羥基，低級(jí)烷氧基或鹵素，R2，R3和R4相同或不同，為氫或低級(jí)烷基，且…為單鍵或雙鍵。
2.如權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中R3和/或R4為氫，而且氨基被保護(hù)基保護(hù)。
3.如權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中1)R1為選自氫。低級(jí)烷基和鹵素的基團(tuán)；和/或2)R2為氫；和/或3)R3和R4都為低級(jí)烷基。
4.一種選自下面一組的化合物1-[4-[(E)-3-(二甲基氨基)-1-丙烯基]苯基-2-苯基-2-丙烯-1-酮和1-[4-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基-2-苯基-2-丙烯-1-酮或其鹽。
5.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1所要求的化合物或其鹽作為活性組分。
6.一種水狀液流出改進(jìn)劑，包含權(quán)利要求1所要求的化合物或其鹽作為活性組分。
7.一種眼內(nèi)壓降低劑，包含權(quán)利要求1所要求的化合物或其鹽作為活性組分。
8.一種下面的通式[IV]所代表的化合物或其鹽， 其中，R1為氫，低級(jí)烷基，羥基，低級(jí)烷氧基或鹵素，R2，R3和R4相同或不同，為氫或低級(jí)烷基，且…為單鍵或雙鍵，＞X為＞CHOH或＞C＝O，且其中R3和/或R4為氫時(shí)，氨基可以被保護(hù)基保護(hù)。
全文摘要
本發(fā)明提供通式(I)表示的化合物或其鹽,該化合物可通過導(dǎo)致小梁網(wǎng)細(xì)胞中的形態(tài)學(xué)改變而降低眼內(nèi)壓。在通式中,R
文檔編號(hào)C07C233/31GK1336910SQ00802868
公開日2002年2月20日 申請日期2000年1月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月18日
發(fā)明者白澤榮一, 市川正樹, 須原寬 申請人:參天制藥株式會(huì)社