專利名稱：克拉霉素2′－單丙酸酯十二烷基硫酸鹽制備及其藥用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物克拉霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽及其作為抗生素藥物的應(yīng)用。
我們知道，依托紅霉素即紅霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽，分子式C40H71NO14.C12H26O4S，CA登記號(hào)[3521-62-8]，因無苦味而稱為無味紅霉素。而2′-丙酸基紅霉素(III)分子式C40H71NO14，CA登記號(hào)[134-36-1]，結(jié)構(gòu)式為 雖然化合物(III)比紅霉素降低了苦味，但不如成鹽的紅霉素效果好，不作為藥物來應(yīng)用，而成為紅霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽的中間體化合物。歷年的中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典等版本都只收錄了紅霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽，而從未將化合物(III)作為治療藥物來使用。
克拉霉素(Clarithromycin)是在紅霉素的6位-OH基改成-OCH3基團(tuán)后，藥效增強(qiáng)但其作用機(jī)理未變。據(jù)此，我們?cè)诳死顾氐?′位接上一個(gè)丙酸基再與十二烷基硫酸鹽成鹽結(jié)合，可得到化合物(I)，使化合物(I)既保留了克拉霉素的藥效好的特性又去除克拉霉素苦味的弊病。因此我們就對(duì)此進(jìn)行了研究。通過浙江科技情報(bào)查新檢索結(jié)果報(bào)告，國(guó)內(nèi)至今尚未有對(duì)該化合物(I)和化合物(II)的研究報(bào)道及專利申請(qǐng)，并通過專利檢索和美國(guó)化學(xué)文摘檢索(查至2000年131卷)，除有化合物(II)2′—丙酸基克拉霉素C41H73NO14[CA登記號(hào)107783-86-8]有日本專利昭61—200998涉及合成報(bào)道外，也未見對(duì)化合物(I)進(jìn)行研究的文獻(xiàn)報(bào)道?；衔?I)與在日本專利昭61—200998公開的化合物(II)比較，也同紅霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽與2′-丙酸基紅霉素的區(qū)別一樣，化合物(I)沒有苦味，可以成為一個(gè)新的抗生素藥物來開發(fā)利用。而化合物(II)雖減低了苦味，也與化合物(III)一樣的道理，不適于生產(chǎn)上的運(yùn)作及作為治療藥物應(yīng)用，而只能作為化合物(I)的中間體，沒有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，效果不如成鹽的化合物(I)好。
本發(fā)明提供了一種解決克拉霉素苦味的藥物，即無苦味，效果好，毒性低的化合物(I)。
化學(xué)式C41H73NO14.C12H25OSO3H英文名稱Clarithromycin Estolate或Erythromcin，6-0-Methyl，2′-propionate dodecyl sulfate(salt)結(jié)構(gòu)式
在日本專利公開的昭61—200998化合物(II)的制備方法是將克拉霉素加入有無水碳酸鈉的二氯甲烷或丙酮的溶劑中，加入丙酸酐或丙酰氯反應(yīng)后，用飽和碳酸鈉水溶液分離，再用二氯甲烷或丙酮抽提，有機(jī)層用飽和食鹽水洗凈后，再用無水硫酸鎂干燥，除去溶媒，得到化合物(II)2′—丙酸基克拉霉素。
本發(fā)明涉及該化合物(I)的制備方法一種由克拉霉素制備化合物(I)的方法。該方法特征在于將克拉霉素的2′羥基丙?；?，得2′—丙酸基克拉霉素(II)，再與十二烷基硫酸鈉成鹽，即得化合物(I)。
本發(fā)明的目的是在上述方法的基礎(chǔ)上，由克拉霉素與無水丙酸酐進(jìn)行酯化反應(yīng)后再直接與十二烷基硫酸鈉成鹽，通過以一鍋煮的方式進(jìn)行反應(yīng)，得到化合物(I)。由于反應(yīng)是一鍋煮的方式進(jìn)行，中間體無須分離純化，反應(yīng)后用水精制，工藝簡(jiǎn)單，不用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取和分離，減少了環(huán)境污染，提高收率。
化合物(I)制備方法的詳細(xì)說明如下將克拉霉素置于水溶性非極性有機(jī)溶劑如丙酮、丁酮、環(huán)己酮、四氫呋喃等中，邊攪拌邊加入無水丙酸酐，將溫度保持在15℃至45℃之間，經(jīng)攪拌0.5至3個(gè)小時(shí)，使克拉霉素完全溶解，成澄明的2′—丙酸基克拉霉素的丙酮溶液。然后降溫至10至35℃，保持此溫度，在30至90分鐘內(nèi)邊攪拌邊滴加2至15％的十二烷基硫酸鈉水溶液。在配制十二烷基硫酸鈉水溶液時(shí)，如室溫低十二烷基硫酸鈉不易溶解，可在溫水浴中加熱而溶解變澄清，也可在此溶液內(nèi)加入1至3摩爾的醋酸、丙酸、硫酸等酸劑。滴加方式可分二種，連續(xù)滴加和間歇滴加。滴加速度不宜過快，過快會(huì)造成產(chǎn)品色澤變深，也不宜過慢，會(huì)引起酯化過度。溫度也不宜過高，否則會(huì)引起酯化過度，溶劑逸出。滴加15分鐘后會(huì)出現(xiàn)大量的透明結(jié)晶，隨著攪拌及繼續(xù)滴加會(huì)逐步消失。繼續(xù)攪拌1至3個(gè)小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束。抽濾得白色結(jié)晶。將濾液濃縮回收丙酮，在濃縮液中加入其0.2至3倍體積的蒸餾水，降低產(chǎn)品在濾液有機(jī)溶劑的溶解度，0至10℃冷藏箱內(nèi)冷藏1至24個(gè)小時(shí)后，在瓶壁上結(jié)出白色針狀結(jié)晶。抽濾，得白色結(jié)晶。這樣不僅減少了對(duì)環(huán)境的污染，又可提高產(chǎn)品收率。將白色結(jié)晶合并，用蒸餾水洗滌3至8次，以除去殘留在結(jié)晶體中的十二烷基硫酸鈉等雜質(zhì)，真空干燥得白色粉針狀晶體，即得化合物(I)。最高收率可達(dá)90％以上。通過高效液相測(cè)定，其純度在95％以上。
經(jīng)浙江醫(yī)科大學(xué)附屬一院對(duì)化合物(I)(代號(hào)CES)與克拉霉素進(jìn)行了初步體外抗菌活性比較試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)采用NCCLS公布的瓊脂稀釋法，對(duì)草綠色鏈球菌、溶血鏈球菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、表皮葡萄球菌、產(chǎn)單核李斯特菌和ATCC25923等細(xì)菌進(jìn)行活性測(cè)定，其結(jié)果如下(單位微克/毫升)
(注CES990903批及990901批均由990701批克拉霉素原料制成。)結(jié)果表明化合物(I)與克拉霉素的抗菌活性基本一致，藥效也沒有降低。
經(jīng)動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)觀察，化合物(I)對(duì)小鼠口服的急性毒性很小，其LD50＞7.5g/kg，而改作最大耐受量試驗(yàn)，結(jié)果其最大耐受量為＞8g/kg。在小鼠給藥后，有被毛松弛、嗜睡現(xiàn)象、精神不振、活動(dòng)量減小，但沒有出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。給藥3天后逐漸恢復(fù)常態(tài)。而克拉霉素小鼠口服LD50為2.7至3.5g/kg，無味紅霉素小鼠口服LD50＞6.45g/kg。表明化合物(I)的毒性是很小的，對(duì)人體安全性是很高的?；衔?I)具有很強(qiáng)的穩(wěn)定性，無苦味，毒性低且抗菌活性強(qiáng)，可作為一種新的抗感染藥，制成干糖漿、混懸劑片劑等，特別適合于小兒口服用藥，且其可以與食物同服，因此它具有很大的應(yīng)用開發(fā)價(jià)值。
本發(fā)明中使用的術(shù)語“一鍋煮”表示有關(guān)反應(yīng)各階段的反應(yīng)產(chǎn)物不經(jīng)分離和純化，在一個(gè)步驟中進(jìn)行。
為了對(duì)本發(fā)明的制備方法做進(jìn)一步的說明，給出以下實(shí)施例。
實(shí)施例1將7.4克克拉霉素(0.01摩爾)加入盛有29克丙酮(0.5摩爾)溶劑的燒瓶中，攪拌，加入2克無水丙酸酐(0.015摩爾)，攪速為120轉(zhuǎn)/分，在25℃左右的進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)1個(gè)小時(shí)后基本溶解，1.5小時(shí)后溶液澄清，反應(yīng)停止。移開水浴，在常溫下慢慢滴加1.8％十二烷基硫酸鈉水溶液180毫升，連續(xù)滴加，滴加速度為3至5毫升/分鐘，快速攪拌，滴完后再反應(yīng)2個(gè)小時(shí)，有大量的白色物產(chǎn)生。抽濾，得白色結(jié)晶體，濾液用減壓法抽提有機(jī)溶劑丙酮，并加入36毫升(0.2倍體積)蒸餾水，搖勻，置于冰箱內(nèi)冷藏31個(gè)小時(shí)后抽濾，得少量白色結(jié)晶。白色結(jié)晶合并，用蒸餾水洗滌，抽干，反復(fù)3次，置于真空干燥箱內(nèi)干燥(溫度小于80℃)，得白色晶體化合物(I)。
實(shí)施例2將7.4克克拉霉素(0.01摩爾)加入盛有72克丁酮(1.0摩爾)溶劑的燒瓶中，攪拌，加入1.30克無水丙酸酐(0.01摩爾)，攪速為120轉(zhuǎn)/分，在35℃左右的進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)2小時(shí)后溶液澄清，反應(yīng)停止。在常溫下慢慢滴加入含有1克冰醋酸(0.016摩爾)的10％十二烷基硫酸鈉水溶液65毫升，間隙滴加(每次2至4毫升，間隔2至5分鐘)，快速攪拌，滴完后再反應(yīng)2.5個(gè)小時(shí)，有大量的白色物產(chǎn)生。抽濾，得白色結(jié)晶體，濾液用減壓法抽提有機(jī)溶劑丁酮，再加入130毫升蒸餾水(2倍體積)，搖勻，置于冰箱內(nèi)冷藏12個(gè)小時(shí)后抽濾，得白色結(jié)晶。白色結(jié)晶合并，用蒸餾水洗滌，抽干，反復(fù)5次，置于真空干燥箱內(nèi)干燥(溫度小于80℃)，得白色晶體化合物(I)。
通過高效液相檢測(cè)，化合物(I)的保留時(shí)間為11.6分鐘，峰面積為96.2％，而起始原料克拉霉素的保留時(shí)間為7.5分鐘，峰面積為0(見附

圖1、圖2)。表明反應(yīng)完全徹底，化合物(I)純度在96％以上。效價(jià)為672.8克拉霉素單位。
化合物(I)紅外色譜(IR)γmaxKBr主要特征吸收峰有3475，2930，2833，1736，1695，1380，1250，1174，1066，1005cm-1(見附圖3)。紅外圖譜解釋3475cm-1γO-H 羥基 -OH2930cm-1γC-H 甲基 -CH32833cm-1γC-H 甲氧基 -OCH31738cm-1γC-O 內(nèi)酯酮基 C＝O1695cm-1γC＝O 環(huán)酮(飽和酮基)1380cm-1δC-H 甲基 -CH31250cm-1γC-O 丙酸基 -OCOCH2CH31174cm-1δO-H 叔醇基團(tuán)1066cm-1γC-O 十二烷基硫酸酯基團(tuán)
權(quán)利要求
1.一種大環(huán)內(nèi)酯類衍生物克拉霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽，該化合物分子式C41H73NO14.C12H26O4S該化合物(I)結(jié)構(gòu)式
2.制備權(quán)利要求1所述的化合物(I)的方法，其特征在于將克拉霉素的2′羥基丙?；?′—丙酸基克拉霉素(II)，再與十二烷基硫酸鈉成鹽即得化合物(I)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述化合物(I)的制備方法，其特征在于將克拉霉素在無水條件下，置于4至12摩爾水溶性非極性溶劑中，加入0.5至2摩爾的無水丙酸酐或丙酰氯，溫度保持在15至45℃之間，經(jīng)攪拌0.5至3個(gè)小時(shí)，使克拉霉素完全溶解，成澄明的2′—丙酸基克拉霉素的丙酮溶液；然后降溫至10至35℃，保持此溫度，在30至90分鐘內(nèi)邊攪拌邊滴加1至4摩爾2至15％的十二烷基硫酸鈉水溶液，攪拌1至3個(gè)小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束，抽濾得白色結(jié)晶，將濾液濃縮回收丙酮，在濃縮液中加入其0.2至3倍體積的蒸餾水，置0至10℃冷藏箱內(nèi)冷藏后抽濾，得白色結(jié)晶，將白色結(jié)晶合并，用蒸餾水洗滌多次，真空干燥得化合物(I)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物(I)的制備方法，其特征在于克拉霉素的2′羥基丙?；?，與十二烷基硫酸鈉成鹽的反應(yīng)是以一鍋煮的方式進(jìn)行的。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物(I)的制備方法，其特征在于第一步反應(yīng)的溶劑用水溶性非極性溶劑，包括丙酮、丁酮、環(huán)己酮、四氫呋喃等，其中優(yōu)選丙酮。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物(I)的制備方法，其特征在于所用的成鹽化合物是十二烷基硫酸鈉的水溶液，用量是1至4摩爾，濃度為1.5至15％；在此水溶液也可加入1至3摩爾的醋酸、丙酸、硫酸等酸劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物(I)的制備方法，滴加方式可分二種，連續(xù)滴加和間歇滴加。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述化合物(I)的制備方法，其特征在于對(duì)第一次抽濾后的濾液濃縮回收丙酮，在濃縮液中加入其0.2至3倍體積的蒸餾水，置0至10℃冷藏箱內(nèi)冷藏1至24個(gè)小時(shí)后抽濾，得白色結(jié)晶。
9.含有克拉霉素2′—單丙酸酯十二烷基硫酸鹽，可作為一種新的抗菌消炎藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的大環(huán)內(nèi)酯衍生物克拉霉素2′－單丙酸酯十二烷基硫酸鹽(I)和它的制備方法。將克拉霉素的2′羥基丙?；?得2′－丙酸基克拉霉素,再與十二烷基硫酸鈉成鹽即得。本化合物消除了克拉霉素的苦味,毒性降低,藥效作用不降低,可抗菌消炎。該化合物的分子式:C
文檔編號(hào)C07H17/08GK1329007SQ0011779
公開日2002年1月2日 申請(qǐng)日期2000年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月20日
發(fā)明者王新華 申請(qǐng)人:王新華, 盛金火