專利名稱：梯度分子量口服膠原蛋白制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域，具體地說是一種梯度分子量口服膠原蛋白及其制備方法。
膠原蛋白丟失直接影響皮膚、骨骼的結(jié)構(gòu)與功能，合成新膠原分子可彌補體內(nèi)膠原含量下降。合成膠原需要一種特殊氨基酸--羥脯氨酸，這種氨基酸只存在于豬蹄、肉皮等特殊食品中的膠原蛋白中，而肉、奶、蛋、菜、豆、水果中均不能直接向機體提供羥脯氨酸?？诜媚z原蛋白粉劑是國際上用于促進體內(nèi)膠原蛋白合成的食品，國內(nèi)有多家單位在此領(lǐng)域有所進展，如公告號為CN1185338的專利申請中，公開了一種采用動物軟骨在低濃度醋酸中溶脹，然后用酶進行消化，并通過鹽析的方法分離純化制得的II型膠原蛋白的方法；公告號為CN1230402公開了一種骨形態(tài)發(fā)生蛋白與膠原顆粒復(fù)合劑型的制造方法。但這些方法得到的膠原蛋白，存在著一次性口服后，在胃腸中突達高峰，不利于血液運輸和組織沉積的缺陷。
本發(fā)明的目的在于針對上述技術(shù)的缺陷，提出一種梯度分子量口服膠原蛋白及其制備方法。
以下敘述本發(fā)明的主要內(nèi)容一種梯度分子量口服膠原蛋白制備方法，其特征在于將提取的膠原蛋白溶解在乙酸溶液中，進行γ射線照射，向照射過的膠原溶液中加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲得液體1與沉淀1；液體1中再加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲沉淀2，棄液體2；沉淀1再溶解于乙酸，并重復(fù)γ射線照射、加NaCl、過濾步驟，獲液體3及沉淀3；液體3中再加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲沉淀4，棄液體4；沉淀3再重復(fù)以上步驟，獲沉淀5和液體5；沉淀5和液體5再重復(fù)以上步驟，如此重復(fù)數(shù)次；混合沉淀2、4、6......，烤干，即制得梯度分子量膠原蛋白。


圖1為本發(fā)明工藝流程圖。
以下結(jié)合附圖詳細敘述本發(fā)明的實施過程步驟1將提取的膠原蛋白溶解在濃度為0.05-0.5mol/L乙酸溶液中，進行劑量為2500-250萬拉德γ射線照射；照射之后，向膠原溶液中加入NaCl，使膠原溶液中NaCl的最終濃度達到1％-10％，放置10-20小時，過濾，分離液體1與沉淀1；步驟2液體1中加入NaCl，使溶液中NaCl的最終濃度高于前一次的濃度，即達到3％-14％，放置10-20小時，過濾，獲沉淀2，棄去液體2；步驟3將沉淀1溶解在濃度為0.05-0.5mol/L乙酸溶液中，進行劑量為2500-250萬拉德γ射線照射；照射之后，向膠原溶液中加入NaCl，使膠原溶液中NaCl的最終濃度達到1％-10％，放置10-20小時，過濾，分離液體3與沉淀3。液體3重復(fù)步驟2可獲沉淀4。
沉淀3再重復(fù)步驟3，獲液體5和沉淀5。液體5重復(fù)步驟2可獲沉淀6。沉淀5再重復(fù)步驟3……，如此再重復(fù)數(shù)次，實驗證明重復(fù)次數(shù)以2-7次為佳?；旌铣恋?、4、6……，即獲梯度分子量膠原蛋白。
本發(fā)明的工作條件除γ射線照射外，以上工作步驟均在潔凈、0-4℃條件下進行。
本發(fā)明較已有技術(shù)相比具有如下典型優(yōu)點1、本方法所采用的γ射線照射及分步分離法，既可將大分子膠原裂解為較小分子，又可加強三螺旋間共價交聯(lián)，增強二極分化。
2、本產(chǎn)品所含的膠原蛋白的分子量呈梯度存在，不僅利于吸收，還延長了膠原在血液中的高濃度分布時間。
3、本發(fā)明方法簡單，成本低廉。
本發(fā)明最佳實施例取已提取純化的豬皮膠原，溶解于0.2mol/L的乙酸中，充分攪拌，棄除不溶物。將膠原溶液置γ射線源，使膠原溶液照射劑量達250000拉德。照射之后，向膠原溶液中加入固體NaCl，使溶液中NaCl終濃度達3％。放置15小時，可見有沉淀形成。雙層濾紙過濾后，獲液體1。小心刮下濾紙上的膠原(為沉淀1)。液體1中再加入NaCl，使溶液終濃度高于前一次的濃度，即為4％。放置12小時，可見沉淀形成。過濾，棄除液體，小心刮下濾紙上的膠原沉淀(為沉淀2)。將沉淀1再次溶解于乙酸中0.mol/L)，充分攪拌，使溶解。重復(fù)上述之γ射線照射、NaCl沉淀、過濾等步驟。共重復(fù)3次?；旌铣恋?、4、6、8?？靖?，即得梯度分子量膠原蛋白?？筛鶕?jù)身體需要口服補充皮膚、骨骼中的膠原蛋白。本實施例的實施過程除γ射線照射外，均在0-4℃潔凈條件下進行。
權(quán)利要求
1.一種梯度分子量口服膠原蛋白制備方法，其特征在于將提取的膠原蛋白溶解在乙酸溶液中，進行γ射線照射，向照射過的膠原溶液中加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲得液體1與沉淀1；液體1中再加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲沉淀2，棄液體2；沉淀1再溶解于乙酸，并重復(fù)γ射線照射、加NaCl、過濾步驟，獲液體3及沉淀3；液體3中再加入NaCl，放置10-20小時，過濾，獲沉淀4，棄液體4；沉淀3再重復(fù)以上步驟，獲沉淀5和液體5；沉淀5和液體5再重復(fù)以上步驟，如此重復(fù)數(shù)次；混合沉淀2、4、6……，烤干，即制得梯度分子量膠原蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于乙酸的濃度為0.05-0.5mol/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于γ射線的強度為2500-250萬拉德。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于液體處理時溶液中NaCl終濃度為3％-14％；沉淀處理時溶液中NaCl終濃度為1％-10％。
全文摘要
一種梯度分子量的口服膠原蛋白的制備方法,其特征是利用提取的膠原蛋白,經(jīng)乙酸溶解、γ射線照射、NaCl沉淀、過濾分離分別獲得液體1和沉淀1。沉淀1再重復(fù)上述溶解、照射、NaCl沉淀、過濾處理。液體1加NaCl產(chǎn)生沉淀,過濾獲沉淀2。重復(fù)數(shù)次。將上述重復(fù)操作所獲沉淀混合,可制得具有梯度差別的不同大小分子量的膠原蛋白。用于口服補充皮膚、骨骼中的膠原蛋白,不僅具有易于吸收的優(yōu)點,還可形成良好的階段性胃腸分布。
文檔編號C07K14/78GK1277061SQ0010809
公開日2000年12月20日 申請日期2000年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月14日
發(fā)明者劉秉慈 申請人:劉秉慈