鹿角膠顆粒在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及鹿角膠顆粒在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng)用，可有效解決圍絕經(jīng)期綜合征的治療用藥問題，方法是，由鹿角膠18?22g、土炒山藥9?11g、大棗9?11g制成，其中，大棗每次加大棗重量6?8倍的水煎煮2次，每次煎煮30?40分鐘，合并兩次煎液，濃縮至相當(dāng)于含生藥2g/ml，得大棗水煎濃縮液；將鹿角膠烊化后，溶于大棗水煎濃縮液中，得混合液；再將土炒山藥粉碎成過100目篩的細(xì)粉，溶入混合液中，減壓烘干，粉碎成過100目篩的細(xì)粉，用質(zhì)量濃度90%的乙醇混勻制粒，烘干；本發(fā)明原料豐富，制備方法簡單，具有顯著提高子宮指數(shù)的作用，改變子宮內(nèi)膜、腺體、肌層的狀態(tài)，可有效用于制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物。
【專利說明】
鹿角膠顆粒在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種鹿角膠顆粒在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 圍絕經(jīng)期綜合征出現(xiàn)的根本的原因是由于生理性或病理性或手術(shù)而引起的卵巢 功能衰竭。卵巢功能一旦衰竭或被切除和破壞，卵巢分泌的雌激素就會減少。女性全身有 400多種雌激素受體，分布在幾乎女性全身所有的組織和器官，接受雌激素的控制和支配， 一旦雌激素減少，就會引發(fā)器官和組織的退行性變化，出現(xiàn)一系列的癥狀。
[0003] 圍絕經(jīng)期綜合征中最典型的癥狀是潮熱、潮紅。多發(fā)生于45~55歲，大多數(shù)婦女可 出現(xiàn)輕重不等的癥狀，有人在絕經(jīng)過渡期癥狀已開始出現(xiàn)，持續(xù)到絕經(jīng)后2~3年，少數(shù)人可 持續(xù)到絕經(jīng)后5~10年癥狀才有所減輕或消失。人工絕經(jīng)者往往在手術(shù)后2周即可出現(xiàn)圍絕 經(jīng)期綜合征，術(shù)后2個(gè)月達(dá)高峰，可持續(xù)2年之久。
[0004] 1.月經(jīng)改變
[0005] 月經(jīng)周期改變是圍絕經(jīng)期出現(xiàn)最早的臨床癥狀，分為3種類型：
[0006] (1)月經(jīng)周期延長，經(jīng)量減少，最后絕經(jīng)。
[0007] (2)月經(jīng)周期不規(guī)則，經(jīng)期延長，經(jīng)量增多，甚至大出血或出血淋漓不斷，然后逐漸 減少而停止。
[0008] (3)月經(jīng)突然停止，較少見。由于卵巢無排卵，雌激素水平波動(dòng)，易發(fā)生子宮內(nèi)膜 癌。對于異常出血者，應(yīng)行診斷性刮宮，排除惡變。
[0009] 2.血管舒縮癥狀
[001 0]臨床表現(xiàn)為潮熱、出汗，是血管舒縮功能不穩(wěn)定的表現(xiàn)，是圍絕經(jīng)期綜合征最突出 的特征性癥狀。潮熱起自前胸，涌向頭頸部，然后波及全身，少數(shù)婦女僅局限在頭、頸和乳 房。在潮紅的區(qū)域患者感到灼熱，皮膚發(fā)紅，緊接著爆發(fā)性出汗。持續(xù)數(shù)秒至數(shù)分鐘不等，發(fā) 作頻率每天數(shù)次至30~50次。夜間或應(yīng)激狀態(tài)易促發(fā)。此種血管功能不穩(wěn)定可歷時(shí)1年，有 時(shí)長達(dá)5年或更長。
[0011]現(xiàn)雖有治療圍絕經(jīng)期綜合征的多種藥物，但由于種種原因，其使用和療效并不盡 人意，因此，研制新的治療圍絕經(jīng)期綜合征的藥物勢在必行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種鹿角膠顆粒 在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng)用，可有效解決圍絕經(jīng)期綜合征的治療用藥問題。
[0013] 本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，該鹿角膠顆粒是由鹿角膠18_22g、土炒山藥9-llg、大 棗9-1 lg制成，其中，大棗每次加大棗重量6-8倍的水煎煮2次，每次煎煮30-40分鐘，合并兩 次煎液，濃縮至相當(dāng)于含生藥2g/ml，得大棗水煎濃縮液;將鹿角膠烊化后，溶于大棗水煎濃 縮液中，得混合液;再將土炒山藥粉碎成過1 〇〇目篩的細(xì)粉，溶入混合液中，減壓烘干，粉碎 成過100目篩的細(xì)粉，用質(zhì)量濃度90%的乙醇混勻制粒，烘干，即得鹿角膠顆粒；
[0014] 該鹿角膠顆粒有效用于制備治療圍絕經(jīng)期綜合征，實(shí)現(xiàn)鹿角膠顆粒在制備治療圍 絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明原料豐富，制備方法簡單，具有顯著提高子宮指數(shù)的作用，改變子宮內(nèi)膜、 腺體、肌層的狀態(tài)，可有效用于制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物，開拓了鹿角膠顆粒的新用 途。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 以下結(jié)合具體情況和實(shí)施例對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說明。
[0017] 實(shí)施例！
[0018] 本發(fā)明在具體實(shí)施中，所述的鹿角膠顆粒是由鹿角膠20g、土炒山藥10g、大棗10g 制成，其中，大棗加水煎煮2次，第一次加入大棗重量8倍的水，煎煮40分鐘，過濾，得第一次 濾液，藥渣再加大棗重量6倍的水，煎煮30分鐘，過濾，得第二次濾液，合并兩次濾液，濃縮至 相當(dāng)于含生藥2g/ml，得大棗水煎濃縮液;將鹿角膠烊化后，溶于大棗水煎濃縮液中，得混合 液;再將土炒山藥粉碎成過100目篩的細(xì)粉，溶入混合液中，減壓烘干，粉碎成過100目篩的 細(xì)粉，用質(zhì)量濃度90%的乙醇混勻制粒，烘干，即得鹿角膠顆粒。
[0019] 實(shí)施例2
[0020] 本發(fā)明在具體實(shí)施中，所述的鹿角膠顆粒是由鹿角膠19g、土炒山藥10.5g、大棗 9.5g制成，制備方法同實(shí)施例1。
[0021] 實(shí)施例3
[0022]本發(fā)明在具體實(shí)施中，所述的鹿角膠顆粒是由鹿角膠21g、土炒山藥9.5g、大棗 10.5g制成，制備方法同實(shí)施例1。
[0023] 在上述藥物中，其中鹿角膠溫補(bǔ)肝腎，益精養(yǎng)血，用于血虛頭暈，腰膝酸冷，虛勞消 瘦。
[0024] 山藥為懷山藥，具有滋養(yǎng)強(qiáng)壯，助消化，斂虛汗，止瀉之功效，主治脾虛腹瀉、肺虛 咳嗽、糖尿病消渴、小便短頻、遺精、婦女帶下及消化不良的慢性腸炎。
[0025] 大棗性溫、味甘，具益氣補(bǔ)血、健脾和胃、袪風(fēng)功效。
[0026] 上述藥物的有效組合，互相支持，并經(jīng)科學(xué)制備具有提高子宮指數(shù)的作用，改變子 宮內(nèi)膜、腺體、肌層的狀態(tài)，可有效用于制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)取得了非 常滿意的有益技術(shù)效果，有關(guān)資料如下：
[0027] 1.材料與方法
[0028] 1.1實(shí)驗(yàn)材料
[0029] 1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
[0030] SPF級小鼠，昆明種，雌性，20_25g，由武漢生物制品研究所提供。合格證編號： 42000400000611;實(shí)驗(yàn)室合格證號 SYXK(豫)2010-001。
[0031] 1.2實(shí)驗(yàn)藥物
[0032]鹿角膠，大棗、土炒山藥，河南省藥材公司；更年安膠囊，山西天星制藥有限公司生 產(chǎn)，批號121104 '大豆異黃酮維E軟膠囊，威海紫光生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)，批號 13070302。
[0033] 1.3實(shí)驗(yàn)試劑
[0034] 羧甲基纖維素鈉，天津市恒星化學(xué)試劑制造有限公司，批號20120418;注射用青霉 素鈉，華北制藥有限公司生產(chǎn)，批號C1206807;甲醛溶液(分析純），煙臺市雙雙化工有限公 司生產(chǎn)，批號2 0 1 3 0 9 0 2 ; 0.9 %氯化鈉注射液，辰欣藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號 1301265303;水合氯醛，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，批號20120827;小鼠 E2ELISA檢測試劑 盒，R&D公司，批號20131001A;小鼠 T ELI SA檢測試劑盒，R&D公司，批號20131001A;小鼠 LH ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號20131001A;小鼠 FSH ELISA檢測試劑盒，R&D公司，批號 20131001A。
[0035] 1.4實(shí)驗(yàn)儀器
[0036]電子稱，上海民橋醫(yī)療器械有限公司，型號JY601;電子分析天平，奧豪斯(上海)公 司，型號AR1140/C;高速臺式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠，型號TGL-168;電熱恒溫水浴鍋， 上海一恒科學(xué)儀器有限公司，型號HWS12;小鼠自主活動(dòng)測試儀，成都泰盟科技有限公司，型 號ZZ-6;小鼠避暗儀，成都泰盟科技有限公司，型號BA-200;高速冷凍離心機(jī)，科大創(chuàng)新股份 有限公司中佳分公司，型號KDC-160HR;可調(diào)式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司；酶標(biāo) 儀，美國BI0-RAD公司，型號:680;電動(dòng)顯微鏡，日本OLYMPUS公司，型號BX61。
[0037] 1.2實(shí)驗(yàn)方法
[0038] 1.2.1造模與給藥
[0039]造模方法:取體重23~25g雌性昆明小鼠 100只，隨機(jī)取12只作為空白組外，做假手 術(shù)處理，其余小鼠造更年期模型。小鼠稱重后腹腔注射10%水合氯醛(0.03ml/10g)麻醉后 腹位固定，然后從小鼠背部最末肋骨下，在腋中線和距脊柱外側(cè)約lcm交叉處剪毛，消毒后 切開皮膚和背肌約0.5~lcm，切口視野中可見一乳白色發(fā)亮的脂肪團(tuán)，卵巢即包埋其中。用 小鑷子輕輕夾住脂肪團(tuán)拉出切口外，分離脂肪團(tuán)，即可見到一團(tuán)細(xì)線狀不規(guī)則呈黃紅色的 卵巢。剪取時(shí)先將卵巢下輸卵管(包括脂肪）用細(xì)線結(jié)扎，再摘除卵巢，術(shù)后順勢將子宮角放 回腹腔中，縫合肌肉及皮膚，同法摘除雙側(cè)卵巢。術(shù)后精心飼養(yǎng)，肌肉注射青霉素 20萬u/kg (每只O.lmL)以防感染，連續(xù)3d，每天1次。手術(shù)5d后開始逐只進(jìn)行小鼠陰道涂片檢查，每天1 次，連續(xù)5d，以確定卵巢是否完全切除。涂片呈現(xiàn)動(dòng)情反應(yīng)的小鼠棄去不用，選擇72只去勢 完全的小鼠隨機(jī)均勻分為6組供實(shí)驗(yàn)用，分別為模型組，更年安膠囊組，大豆異黃酮軟膠囊 組，大、中、小劑量鹿角膠顆粒組。
[0040] 配藥方法:0.5 % CMC配制方法:稱取羧甲基纖維素鈉4g，用蒸餾水配成800ml。大、 中、小劑量鹿角膠顆粒組給藥劑量分別為1500mg/kg、750mg/kg、375mg/kg(給藥體積0.1ml/ l〇g)。配置方法:分別稱取鹿角膠顆粒15、7.5g、3.75g，先用少量的0.5 % CMC溶解，然后再定 容到100ml，混勾，即可。更年安膠囊(675mg/kg，用蒸餾水配成67.5mg/ml，0· lml/10g，相當(dāng) 于臨床用量的15倍）；配置方法:取更年安膠囊9粒，先用少量的0.5 % CMC溶解，然后再定容 至Ij40ml，混勻，即為更年安膠囊混懸液的劑量(675mg/kg)。大豆異黃酮維E軟膠囊（250mg/ kg，用蒸餾水配成25mg/ml，0. lml/10g，相當(dāng)于臨床用量的15倍）；配置方法:取大豆異黃酮 膠囊2粒，先用少量的0.5%CMC溶解，然后再定容到40ml，混勻，即為大豆異黃酮膠囊混懸液 的劑量(250mg/kg)。
[0041 ]儲存方法:冷藏，用時(shí)隔水溫?zé)帷?br>[0042]給藥方法:各組動(dòng)物于手術(shù)后第10天給予相應(yīng)藥物。更年安膠囊組灌服更年安膠 囊混懸液675mg · kg^1，大豆異黃酮軟膠囊組灌服大豆異黃酮軟膠囊混懸液250mg · kg^1， 大、中、小劑量鹿角膠顆粒組分別按組別灌服大、中、小劑量鹿角膠顆粒200mg · kg4、10mg · kg' 50mg · kg<，Ο · lml/10g。空白組和模型組分別灌服同體積Ο · 5 % CMC溶液，每日灌胃給 藥1次，連續(xù)給藥21d。
[0043] 1.2.2觀察項(xiàng)目及檢測方法
[0044] 各組小鼠于給藥18天時(shí)測定5min內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)，于給藥19-20天時(shí)測定小鼠首 次進(jìn)入暗室的潛伏期及5min內(nèi)進(jìn)入暗室遭電擊的次數(shù)。于末次給藥后2h(禁食不禁水12h)， 小鼠稱重后摘眼球取血，分離血清，測定血清中E 2、T、LH、FSH的含量;然后脫頸椎處死小鼠， 解剖小鼠，摘除胸腺、脾臟、子宮組織，稱量其濕重并計(jì)算臟器指數(shù)(臟器指數(shù)=臟器濕重 mg/小鼠體重g)，然后取垂體;將胸腺、脾臟、子宮、垂體固定于10%福爾馬林溶液中，石蠟包 埋，切片，HE染色，光鏡下觀察各組的組織形態(tài)學(xué)變化。
[0045] 2.2.2.1自主活動(dòng)次數(shù)測試
[0046] 將各組小鼠放入自主活動(dòng)儀中，先適應(yīng)環(huán)境lmin，然后測定5min內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)。
[0047] 2.2.2.2避暗法測試
[0048]將各組小鼠尾部對著進(jìn)入暗室的小口放入測定盒中，進(jìn)行訓(xùn)練，24h后重新測定小 鼠首次進(jìn)入暗室的潛伏期及5min內(nèi)進(jìn)入暗室遭電擊的次數(shù)。
[0049] 2.2.2.3試劑盒測定方法
[0050] 血清標(biāo)本的獲取:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激， 收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心的分離。
[0051 ] 小鼠雌二醇(E2 )ELISA檢測試劑盒測定方法:從室溫平衡20min后的鋁箱袋中取出 所需板條，剩余板條用自封發(fā)袋密封放回4°C。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加入不 同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50yL。樣本孔中先加入待測樣本10yL，再加樣本稀釋液40yL( 即樣本稀釋5 倍）；空白孔不加。除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測 抗體l〇〇yL，用封板膜封住反應(yīng)孔。37°C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體，吸水紙上拍 干，每孔加滿洗滌液，靜置lmin。甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次。每孔先加入 底物A、B各50yL，37°C避光孵育15min。取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50yL，15min內(nèi)，在450nm波 長測量各孔的吸光值(0D值）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的0D值，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品回歸曲線，按 曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。最終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。其中，標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5)濃度依次為:0、4、8、16、32、64pmol/L。
[0052] 小鼠（Mouse)睪酮（T)ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品（S0-55)濃度依次為：0、50、100、 200、400、800pg/mL;
[0053] 小鼠（Mouse)黃體生成素（LH)ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品（S0-55)濃度依次為：0、 0·5、1、2、4、8mIU/mL;
[0054] 小鼠（Mouse)促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品（S0-55)濃度依次為：0、5、 10、20、40、80mIU/mL。
[0055] 2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
[0056]數(shù)據(jù)分析用SPSS17.0醫(yī)用統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用平均數(shù) 土標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，各組間比較采用單因素方差分析，方差檢驗(yàn)齊者用LSD法，方差不齊 者用Games-Howel 1法檢驗(yàn)，等級資料采用Ridit檢驗(yàn)。
[0057] 2 ·結(jié)果
[0058] 1對小鼠圍絕經(jīng)期模型自主活動(dòng)的影響
[0059] 實(shí)驗(yàn)各組小鼠自主活動(dòng)測試結(jié)果，見表1。
[0060] 表1鹿角|父顆粒對圍絕經(jīng)期1?型小鼠自主活動(dòng)的影響(.X土s.)
[0061]
[0062] 注：與模型組比較，*P〈0 · 05，**P〈0 · 01
[0063] 由上表可看出，與空白組比，模型組小鼠的活動(dòng)次數(shù)、站立次數(shù)均顯著減少（P〈 0.01)，說明圍絕經(jīng)期模型小鼠對新鮮環(huán)境的好奇程度降低。與模型組比，大豆異黃酮軟膠 囊、更年安膠囊、大、中劑量鹿角膠顆粒組均可顯著提高小鼠的活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)(P〈 0.01 )，小劑量鹿角膠顆粒組可明顯提高小鼠的活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)(P〈〇. 05)。
[0064] 2對小鼠圍絕經(jīng)期模型避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期和被電擊次數(shù)的影響
[0065] 實(shí)驗(yàn)各組小鼠避暗實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果，見表2。
[0066] 表2鹿角膠顆粒對小鼠圍絕經(jīng)期模型避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期和電擊次數(shù)的影響(x±s)
[0067]
[0069]注:與模型組比較，*P〈0 · 05，**P〈0 · 01
[0070]由表2可看出，與空白組比，模型組小鼠的潛伏期、電擊次數(shù)均顯著減少(P〈0.01)， 反映了小鼠圍絕經(jīng)期模型記憶力下降。與模型組比，更年安膠囊、大豆異黃酮軟膠囊、大、中 劑量鹿角膠顆粒均可顯著提高小鼠的避暗實(shí)驗(yàn)的潛伏期，降低電擊次數(shù)(p〈0.01)，提高小 鼠記憶力;小劑量鹿角膠顆?？擅黠@降低電擊次數(shù)(P〈〇.05)。
[0071 ] 3對小鼠圍絕經(jīng)期模型臟器指數(shù)的影響
[0072 ]實(shí)驗(yàn)各組小鼠胸腺、脾臟、子宮指數(shù)，見表3。
[0073] 表3鹿角膠顆粒對小鼠圍絕經(jīng)期模型胸腺、脾臟、子宮指數(shù)的影響（x±s)
[0074]
[0075] 注：與模型組比較，*P〈0 · 05，林P〈0 · 01
[0076] 由表3可以看出，與空白組比，模型組小鼠的子宮指數(shù)顯著降低(P〈0.01)，說明摘 除卵巢導(dǎo)致圍絕經(jīng)期模型小鼠子宮萎縮，摘除卵巢從而雌激素分泌不足導(dǎo)致圍絕經(jīng)期小鼠 免疫器官萎縮。與模型組比，大豆異黃酮軟膠囊、更年安膠囊、大、中劑量鹿角膠顆粒均可顯 著提高胸腺、脾臟、子宮指數(shù)(P〈〇. 01)。
[0077] 4對小鼠圍絕經(jīng)期模型血清性激素水平的影響
[0078] 各組小鼠血清中E2、T、FSH、LH含量。見表4~5。
[0079] 表4鹿角膠顆粒對小鼠圍絕經(jīng)期模型血清中E2、T水平的影響(x±s )
[0080]
[0081]
[0082] 注：與模型組比較，*P〈0 · 05，**P〈0 · 01
[0083] 表5鎖膠囊對小鼠圍絕經(jīng)期模型血清中FSH、LH水平的影響
[0084]
[0085] 注:與模型組比較，*Ρ〈0 · 05，**Ρ〈0 · 01
[0086] 從表4~5可以看出，與空白組比，模型組小鼠血清中Ε2、Τ水平顯著下降(Ρ〈0.01)， LH、FSH水平均顯著升高(Ρ〈0.01)，說明摘除卵巢導(dǎo)致圍絕經(jīng)期模型小鼠血清中的性激素水 平紊亂，圍絕經(jīng)期小鼠模型復(fù)制成功。大、中劑量鹿角膠顆粒與更年安膠囊、大豆異黃酮軟 膠囊可顯著升高小鼠圍絕經(jīng)期模型血清中Ε2、Τ水平(Ρ〈0.01)和降低血清中升高的FSH、LH 水平。小劑量鹿角膠顆?？擅黠@降低血清中的FSH水平和T水平(P〈0.05)。
[0087] 5.對圍絕經(jīng)期模型小鼠器官組織形態(tài)的影響
[0088] 實(shí)驗(yàn)各組小鼠子宮、胸腺、脾臟、垂體的病理組織學(xué)觀察結(jié)果如下，病理照片見附 錄1中圍絕經(jīng)期型小鼠病理照片。
[0089] 5.1對圍絕經(jīng)期模型小鼠子宮組織形態(tài)的影響
[0090]根據(jù)實(shí)驗(yàn)各組小鼠子宮內(nèi)膜、腺體、肌層出現(xiàn)的不同程度的改變，采用半定量標(biāo) 準(zhǔn)，將病理組織形態(tài)分為四個(gè)級別，對實(shí)驗(yàn)各組小鼠子宮進(jìn)行測定，觀察結(jié)果見表7。
[0091 ]表7鹿角膠顆粒對圍絕經(jīng)期模型小鼠子宮病理變化的影響單位:只
[0092]
[0093] 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腺體、肌層、漿膜均正常；"+"子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腺體少部 分萎縮，肌層漿膜均正常；"++"子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腺體部分萎縮，肌層稍有萎縮，漿膜正 常；"+++"子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、腺體明顯萎縮，漿膜正常。
[0094] 經(jīng)Ridit檢驗(yàn)，從上表可知，與空白組比，模型組小鼠子宮出現(xiàn)顯著的病理組織病 變(P〈0.01)。與模型組比，大豆異黃酮維E軟膠囊、更年安膠囊、中劑量鹿角膠顆粒均可顯著 的改善小鼠的子宮病理組織病變(P〈〇.01)，大劑量鹿角膠顆?？擅黠@的改善小鼠的子宮病 理組織病變(P〈〇.〇5)。
[0095] 5.2對小鼠圍絕經(jīng)期模型胸腺、脾臟組織形態(tài)的影響
[0096] 采用測微尺，對實(shí)驗(yàn)各組每只小鼠胸腺皮質(zhì)最厚處和最窄處測定其厚度求得均 數(shù);采用測微尺的基線落在脾小結(jié)上，以中央動(dòng)脈為中心分別測定兩側(cè)的脾小結(jié)厚度大小， 求均數(shù);結(jié)果見表8。
[0097] 表8鎖膠囊對圍絕經(jīng)期模型小鼠胸腺、脾臟病理變化的影響(x±s)
[0098]
[0099] 注：與模型組比較，*P〈0 · 05，林P〈0 · 01
[0100] 從表7可看出，與空白組比，模型組小鼠胸腺皮質(zhì)厚度、脾小結(jié)體積顯著減少（P〈 0.01)，說明小鼠造圍絕經(jīng)期模型后胸腺、脾臟體積萎縮。與模型組比，大劑量鹿角膠顆?？?顯著增厚胸腺皮質(zhì)厚度和脾小結(jié)體積(P〈〇.01)，中劑量鹿角膠顆?？擅黠@增厚胸腺皮質(zhì)厚 度(P〈0.05)。
[0101] 5.3對小鼠圍絕經(jīng)期模型垂體組織形態(tài)的影響
[0102] 高倍視野下落在面積為ΙΟΟΟΟμπι2測微矩形框內(nèi)嗜堿性細(xì)胞數(shù)量和垂體前葉細(xì)胞 數(shù)量。結(jié)果見表9。
[0103] 表9鹿角膠顆粒對圍絕經(jīng)期模型小鼠垂體病理變化的影響
[0104]
[0105] 注：與模型組比較，*Ρ〈0 · 05，林Ρ〈0 · 01
[0106] 由表8可以看出，與空白組比，模型組嗜堿性細(xì)胞數(shù)量和垂體前葉細(xì)胞數(shù)量顯著降 低(Ρ〈0.01)，說明小鼠造圍絕經(jīng)期模型后，分泌促性腺激素的細(xì)胞源減少。與模型組比，大、 中劑量鹿角膠顆粒組可顯著增加垂體嗜堿性細(xì)胞數(shù)量和垂體前葉細(xì)胞數(shù)量(Ρ〈〇. 01)。 [0107] 3.結(jié)論
[0108]由上述實(shí)驗(yàn)充分表明，鹿角膠顆粒對小鼠圍絕經(jīng)期模型有好的改善作用，顯著提 高小鼠的活動(dòng)次數(shù)和站立次數(shù)，顯著提高小鼠的避暗實(shí)驗(yàn)的潛伏期，降低電擊次數(shù)，提高小 鼠記憶力，可顯著升高小鼠圍絕經(jīng)期模型血清中Ε2、Τ水平和降低血清中升高的FSH、LH水 平，可顯著改善小鼠的子宮病理組織病變，可顯著增厚胸腺皮質(zhì)厚度和脾小結(jié)體積，組可顯 著增加垂體嗜堿性細(xì)胞數(shù)量和垂體前葉細(xì)胞數(shù)量，有效用于制備治療圍絕經(jīng)期綜合征的藥 物，是治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物上的創(chuàng)新，具有實(shí)際的應(yīng)用價(jià)值。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種鹿角膠顆粒，其特征在于，由鹿角膠18-22g、土炒山藥9-1 lg、大率9-1 lg制成，其 中，大棗每次加大棗重量6-8倍的水煎煮2次，每次煎煮30-40分鐘，合并兩次煎液，濃縮至相 當(dāng)于含生藥2g/ml，得大棗水煎濃縮液;將鹿角膠烊化后，溶于大棗水煎濃縮液中，得混合 液;再將土炒山藥粉碎成過100目篩的細(xì)粉，溶入混合液中，減壓烘干，粉碎成過100目篩的 細(xì)粉，用質(zhì)量濃度90%的乙醇混勻制粒，烘干，即得鹿角膠顆粒。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹿角膠顆粒，其特征在于，由鹿角膠20g、土炒山藥10g、大棗 l〇g制成，其中，大棗加水煎煮2次，第一次加入大棗重量8倍的水，煎煮40分鐘，過濾，得第一 次濾液，藥渣再加大棗重量6倍的水，煎煮30分鐘，過濾，得第二次濾液，合并兩次濾液，濃縮 至相當(dāng)于含生藥2g/ml，得大棗水煎濃縮液;將鹿角膠烊化后，溶于大棗水煎濃縮液中，得混 合液;再將土炒山藥粉碎成過100目篩的細(xì)粉，溶入混合液中，減壓烘干，粉碎成過100目篩 的細(xì)粉，用質(zhì)量濃度90%的乙醇混勻制粒，烘干，即得鹿角膠顆粒。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹿角膠顆粒，其特征在于，由鹿角膠19g、土炒山藥10.5g、大棗 9.5g制成。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹿角膠顆粒，其特征在于，由鹿角膠21g、土炒山藥9.5g、大棗 10.5g制成。5. 權(quán)利要求1或2-4任一項(xiàng)所述的鹿角膠顆粒在制備治療圍絕經(jīng)期綜合征藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號】A61P15/00GK105832960SQ201610401817
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年6月8日
【發(fā)明人】苗明三, 辛衛(wèi)云, 佐艇
【申請人】河南中醫(yī)學(xué)院