液中2h后取出，用去離子水反復(fù)沖洗后在轉(zhuǎn)速為2500r/min下的離心處理既得涂覆海藻酸支架。
[0025]D、載藥微球與支架的結(jié)合:將A步制得的載藥殼聚糖微球均勻分散在裝有去離子水溶液離心管中，再將C步中涂覆海藻酸的支架浸入裝有載藥殼聚糖微球懸浮溶液的離心管中，放置在37°C，轉(zhuǎn)速100r/min的恒溫震蕩箱中震蕩2h，取出支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥殼聚糖微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支架。
[0026]實例2
[0027]A、載藥微球的制備:將0.25g的殼聚糖溶解在1ml 2%的冰乙酸溶液中，然后加入0.031g丹酚酸B混合均勻，再將1ml丹酚酸B/殼聚糖混合液緩慢滴加到包含有2ml司班80的10ml油相中煤油體系中攪拌2h，再加入Iml 25%戊二醛攪拌2h后離心收集所制備的載藥殼聚糖微球，分別依次用異丙醇，乙醇及去離子水進(jìn)行清洗后，在零下_10°C冷凍后采用冷凍干燥方法制的載藥微球。
[0028]C、涂覆海藻酸支架制備:將0.5g海藻酸溶解在10ml去離子水中制的海藻酸溶液，將B步中的多孔支架浸入上述的海藻酸溶液中1min后取出，在轉(zhuǎn)速為2000r/min下的離心處理。重復(fù)4次，浸入5%氯化鈣溶液中2h后取出，用去離子水反復(fù)沖洗后在轉(zhuǎn)速為2500r/min下的離心處理既得涂覆海藻酸支架。
[0029]D、載藥微球與支架的結(jié)合:將A步制得的載藥殼聚糖微球均勻分散在裝有去離子水溶液離心管中，再將C步中涂覆海藻酸的支架浸入裝有載藥殼聚糖微球懸浮溶液的離心管中，放置在37°C，轉(zhuǎn)速100r/min的恒溫震蕩箱中震蕩2h，取出支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥殼聚糖微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支架。
[0030]實施例
[0031]實例3
[0032]A、載藥微球的制備:將0.5g的殼聚糖溶解在1ml 2%的冰乙酸溶液中，然后加入0.063g骨形態(tài)發(fā)生蛋白混合均勻，再將1ml骨形態(tài)發(fā)生蛋白/殼聚糖混合液緩慢滴加到包含有2ml司班80的10ml液體石錯體系中攪拌2h，再加入25ml 5%三聚磷酸鈉攪拌3h后離心收集所制備的載藥殼聚糖微球，分別依次用石油醚，異丙醇及去離子水進(jìn)行清洗后，在零下-10°C冷凍后采用冷凍干燥方法制的載藥微球。
[0033]C、涂覆海藻酸支架制備:將1.3g海藻酸溶解在10ml去離子水中制的海藻酸溶液，將B步中的多孔支架浸入上述的海藻酸溶液中1min后取出，在轉(zhuǎn)速為2000r/min下的離心處理。重復(fù)4次，浸入2%氯化鈣溶液中3h后取出，用去離子水反復(fù)沖洗后在轉(zhuǎn)速為3000r/min下的離心處理既得涂覆海藻酸支架。
[0034]D、載藥微球與支架的結(jié)合:將A步制得的載藥殼聚糖微球均勻分散在裝有去離子水溶液離心管中，再將C步中涂覆海藻酸的支架浸入裝有載藥殼聚糖微球懸浮溶液的離心管中，放置在37°C，轉(zhuǎn)速120r/min的恒溫震蕩箱中震蕩lh，取出支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥殼聚糖微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支架
[0035]實例4
[0036]A、載藥微球的制備:將0.1g的殼聚糖溶解在1ml 2%的冰乙酸溶液中，然后加入0.025g骨形態(tài)發(fā)生蛋白混合均勻，再將1ml骨形態(tài)發(fā)生蛋白/殼聚糖混合液緩慢滴加到包含有2ml司班80的10ml液體石錯體系中攪拌2h，再加入4ml I %京尼平攪拌5h后離心收集所制備的載藥殼聚糖微球，分別依次用異丙醇、乙醇及去離子水進(jìn)行清洗后，在零下_10°C冷凍后采用冷凍干燥方法制的載藥微球。
[0037]C、涂覆海藻酸支架制備:將0.Sg海藻酸溶解在10ml去離子水中制的海藻酸溶液，將B步中的多孔支架浸入上述的海藻酸溶液中1min后取出，在轉(zhuǎn)速為2000r/min下的離心處理。重復(fù)4次，浸入5%氯化鈣溶液中2h后取出，用去離子水反復(fù)沖洗后在轉(zhuǎn)速為100r/min下的離心處理既得涂覆海藻酸支架。
[0038]D、載藥微球與支架的結(jié)合:將A步制得的載藥殼聚糖微球均勻分散在裝有去離子水溶液離心管中，再將C步中涂覆海藻酸的支架浸入裝有載藥殼聚糖微球懸浮溶液的離心管中，放置在37°C，轉(zhuǎn)速80r/min的恒溫震蕩箱中震蕩3h，取出支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥殼聚糖微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支。
【主權(quán)項】
1.一種骨組織工程多孔陶瓷支架的制備方法，首先通過以下步驟制得支架，A、通過在含氯化鋰的二甲基乙酰胺溶劑加入甲殼素，再加入無機(jī)粉末配制成無機(jī)粉末/甲殼素漿料；B、將糖球顆粒堆積于支架模具中進(jìn)行熱處理，隨后冷卻至常溫;得到附著于支架模具內(nèi)表面的糖球堆積的支架模具;C、將A步的無機(jī)粉末/甲殼素漿料注入B步的支架模具中，待漿料自然凝膠化后，即得支架初胚;D、將C步制得的支架初胚在1000?1200°C下燒結(jié)2?3h，即制得多孔支架;其特征在于: E、載藥微球的制備:將質(zhì)量體積比為I?5%的殼聚糖溶解在2%的冰乙酸溶劑中，得到殼聚糖溶液，然后，按殼聚糖的質(zhì)量以2?8:1的比例將促骨生長藥物加入殼聚糖溶液混合均勻，得到含促骨生長藥物的殼聚糖混合液，將1ml含促骨生長藥物的殼聚糖混合液緩慢滴加到含有2%司班80的油相中攪拌，再加入I?25ml濃度為I?25%交聯(lián)劑攪拌2?5小時，然后注入離心管，離心收集載藥殼聚糖混合物，分別依次用異丙醇，乙醇及去離子水或石油醚、異丙醇及去離子水對載藥殼聚糖混合物進(jìn)行清洗后，在零下10°C條件下冷凍干燥制得載藥微球； F、涂覆海藻酸陶瓷支架制備:將海藻酸以質(zhì)量體積比為0.5?1.3%的比例溶解在去離子水中制得海藻酸溶液，將D步中的多孔支架浸入上述的海藻酸溶液中10分鐘后取出，在轉(zhuǎn)速為2000r/min條件下的離心處理，重復(fù)四次，再將多孔支架浸入26%氯化鈣溶液中I?3小時后取出，用去離子水反復(fù)沖洗后在轉(zhuǎn)速為1000?3000r/min條件下的離心處理，即得到表面涂覆海藻酸的陶瓷支架； G、載藥微球與陶瓷支架的結(jié)合:將E步制得的載藥微球均勻分散在裝有去離子水的離心管中，再將涂覆海藻酸的陶瓷支架浸入裝有載藥微球的離心管中，放置在37°C，轉(zhuǎn)速60?120r/min的恒溫震蕩箱中震蕩I?3小時，取出陶瓷支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支架。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種骨組織工程多孔陶瓷支架的制備方法，其特征在于:所述促骨生長藥物是骨形態(tài)發(fā)生蛋白或丹酚酸B。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種骨組織工程多孔陶瓷支架的制備方法，其特征在于:所述油相是煤油、液體石蠟或植物油。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種骨組織工程多孔陶瓷支架的制備方法，其特征在于:所述交聯(lián)劑為戊二醛、三聚磷酸鈉或京尼平。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種骨組織工程多孔陶瓷支架的制備方法，屬于生物醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域。它能有效地解決骨組織工程多孔陶瓷支架表面涂覆載藥殼聚糖微球的均勻分布問題。首先制備多孔支架，然后制備載藥微球，再制備涂覆海藻酸陶瓷支架。得到表面涂覆海藻酸的陶瓷支架后，需要將載藥微球與陶瓷支架的結(jié)合：將制得的載藥微球均勻分散在裝有去離子水的離心管中，再將涂覆海藻酸的陶瓷支架浸入裝有載藥微球的離心管中，放置在37℃，轉(zhuǎn)速60～120r/min的恒溫震蕩箱中震蕩1～3小時，取出陶瓷支架用去離子水反復(fù)沖洗后，真空干燥即得載藥微球均勻分布在涂覆海藻酸的骨組織工程多孔陶瓷支架。主要用于人體骨組織修復(fù)。
【IPC分類】A61L27/56, A61L27/20, A61L27/34, A61L27/02, A61L27/54
【公開號】CN105457104
【申請?zhí)枴緾N201510964978
【發(fā)明人】翁杰, 李金雨, 王琴, 許韜韜, 屈樹新, 馮波
【申請人】西南交通大學(xué)
【公開日】2016年4月6日
【申請日】2015年12月21日